Tiểu luận bệnh truyền nhiễm thú y 1 viêm gan vịt

tai lieu, document1 of 66 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP - PHÂN HIỆU ĐỒNG NAI TIỂU LUẬN BỆNH TRUYỀN NHIỄM THÚ Y Tên đề tài: VIÊM GAN VỊT Ngành: Thú y Lớp: K65B_TY Khoa: Nông học Họ Tên: Hồ Đình Huỳnh Văn Tiến Dũng Đồng Nai – Năm 2021 luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document2 of 66 Mục Lục PHẦN MỞ ĐẦU PHẦN NỘI DUNG 2.1 Lịch sử, địa lý 2.2 Đặc điểm 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Cấu tạo, hình thái 2.2.1 Hình thái cấu tạo virus viêm gan vịt type I 2.2.2.2.Thành phần hệ gen virus viêm gan vịt type I 2.2.3.Đặc diểm nuôi cấy 2.2.3.1.Nuôi cấy phôi trứng 2.2.3.2.Nuôi cấy môi trường tế bào 2.2.3.3.Nuôi cấy động vật cảm thụ 2.2.4 Đặc điểm sức đề kháng 2.3 Truyền nhiễm học 2.3.1 Dịch tễ 2.3.2 Cơ chế sinh bệnh 2.4 Triệu Chứng 2.5 Bệnh tích 10 2.5.1 Bệnh tích đại thể 10 2.5.2 bệnh tích vi thể 11 2.6 Chẩn đoán 12 2.6.1 Chẩn đoán lâm sang 12 2.6.2 Chẩn đoán phân biệt 13 2.7 Phòng trị bệnh 13 2.7.1 Điều trị 13 2.7.2 Phòng bệnh 14 2.8 Thực trạng tình hình ca bệnh 14 2.8.1 Trong nước 14 2.8.2 Ngoài nước 15 luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document3 of 66 PHẦN KẾT LUẬN 17 TÀI LIỆU THAM KHẢO 18 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt cDNA CFU Nguyên chữ CO2 Complementary deoxyribonucleic acid Colony-Forming Unit Carbon dioxit CPE DAstV Cytopathic effect Duck Astrovirus DEF ddNTP DHAV DHV DMEM Duck Embryo Fibroblast Dideoxynucleotide triphosphates Duck hepatitis A virus Duck hepatitis virus Dulbecco’s Modified Eagle’s medium DPV Duck Picornavirus EDTA ELD50 ELISA FBS FCS Ethylene diamine tetra acetic acid Embryo lethal dose 50% Enzyme Linked-immunosorbent assay Foetal bovine serum Fetal calf serum ĐBSCL Đồng sông Cửu Long ĐC IgA IgG IgM IgY LD50 Đối chứng Immunoglobulin A Immunoglobulin G Immunoglobulin M Yolk Immunoglobulin Lethal dose 50% MEM NaCl NCBI ORF Minimum essential medium Natri clorua National Center Biotechnology Information Open Reading Frame OIE PBS PCR TCID50 Office international des epizootics Phosphate buffered saline Polymerase chain reaction Tissue culture infectious dose 50% luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document4 of 66 UTR VPg Untranslated Region Viral Protein genome linked i luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document5 of 66 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Mơ hình câu strucs khơng gian picornavirus……………………4 Hình 2.2 Một số triệu chứng lâm sang vịt mắc bệnh…………………10 Hình 2.3 Bệnh tích gan vịt………………………………………………….11 Hình 2.4 Bệnh tích vi thể kính hiển vi ……………………………………12 ii luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document6 of 66 PHẦN MỞ ĐẦU Chăn nuôi vịt nghề chăn nuôi truyền thống, lâu đời người dân Hàng năm, nghề nuôi vịt cung cấp lượng thực phẩm đáng kể cho nhu cầu tiêu dùng nước xuất Những năm gần đây, số lượng đàn vịt gia tăng nhanh chóng trở thành nguồn thu nhập nhiều nơng hộ Tuy nhiên, năm qua tình hình dịch bệnh xảy vịt diễn biến ngày phức tạp gây chết nhiều vịt người chăn nuôi Những nguyên gây bệnh vịt vi khuẩn, virus bệnh tụ huyết trùng gia cầm, bệnh dịch tả vịt, bệnh cúm gia cầm v.v tương tự bệnh truyền nhiễm bệnh viêm gan vịt virus bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, gây thiệt hại lớn cho chăn nuôi vịt đặc biệt vịt Ở Việt Nam, bệnh viêm gan vịt virus ghi nhận vào năm 1978 chưa phân lập mầm bệnh Giai đoạn 1979 – 1983, bệnh xảy nhiều địa phương làm chết nhiều vịt (Trần Minh Châu Lê Thu Hồng, 1985) Theo thống kê Tổ chức dịch tễ giới (OIE) bệnh viêm gan vịt virus gây thiệt hại nặng nề cho chăn nuôi vịt Việt Nam Hiện nay, bệnh viêm gan vịt virus thường xuyên xuất xảy nhiều ổ dịch vịt với triệu chứng thần kinh co giật chết nhanh không kịp thể triệu chứng Bệnh viêm gan vịt virus có tính chất nguy hiểm tỷ lệ chết cao diễn biến phức tạp Cho nên, chúng em chọn đề tài: “viêm gan vịt” làm tiểu luận luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document7 of 66 PHẦN NỘI DUNG 2.1 Lịch sử, địa lý Bệnh viêm gan vịt virus phát lần vào mùa Xuân năm1945 Mỹ, vào thời điểm chưa phân lập mầm bệnh Năm 1950, Levine Fabricant theo dõi bệnh tương tự đàn vịt Bắc Kinh trắng Long Island (Mỹ), phát nhiều vịt bệnh 70 trại chăn nuôi vịt với qui mô lớn Trong thời gian đầu, trại có vịt nhiễm bệnh nặng tỷ lệ chết lên tới 95%, vào thời gian cuối số trại có tỷ lệ vịt chết giảm dần 15%, phương pháp nuôi cấy phôi gà phân lập virus viêmgan vịt type I Năm 1965, bệnh viêm gan vịt virus lại xảy Norfolk (Anh) đàn vịt tiêm phòng vaccine virus viêm gan vịt type I nhược độc Từ ổ dịch này, nhà khoa học phân lập loại virus khác hẳn với virus viêm gan vịt type I gọi virus viêm gan vịt type II (Asplin, 1965) Tại Long Island (Mỹ), bệnh viêm gan vịt virus xảy đàn vịt tiêm phòng vaccine virus viêm gan vịt type I nhược độc Bệnh xảy nhẹ so với bệnh virus viêm gan vịt type I tỷ lệ chết vịt vượt 30% Phân lập virus từ bệnh phẩm đàn vịt phát loại virus có đặc điểm khác với virus viêm gan vịt type I type II, nên đặt tên virus virus viêm gan vịt type III Ở Việt Nam, ghi nhận có bệnh viêm gan vịt virus vào năm 1978, vào thời điểm chưa phân lập mầm bệnh Giai đoạn năm 1979- 1983, bệnh xảy nhiều địa phương làm chết nhiều vịt Sau đó, có nhiều nghiên cứu bệnh nhà khoa học xác định nguyên gây ổ dịch tự nhiên virus viêm gan vịt type I (Trần Minh Châu Lê Thu Hồng, 1985) Đến năm 2009, virus viêm gan vịt phân lập từ ổ dịch tỉnh Đồng Nai lần xác định thuộc type I genotype (Đoàn Thị Thanh Hương ctv, 2009) 2.2 Đặc điểm 2.2.1 Phân loại Bệnh viêm gan vịt gây ba loại virus khác gọi virus viêm gan vịt type I, type II type III Virus viêm gan vịt type I (DHV-1) phân loại luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document8 of 66 Avihepatovirus, chi họ Picornaviridae xác định gồm có kiểu gen khác virus viêm gan vịt A (DHAV) genotype 1, genotype 2, genotype Tác nhân gây bệnh lây lan mạnh virus viêm gan vịt type I genotype (DHAV-1), trước gọi virus viêm gan vịt type I, hai genotype bổ sung chi Avihepatovirus virus viêm gan vịt type I genotype (DHAV-2) virus viêm gan vịt type I genotype (DHAV-3) Virus viêm gan vịt type II (DHV-2) phân loại loài Avastrovirus thuộc họ Astroviridae (Gough et al, 1985) đổi tên thành Astrovirus vịt type (DAstV-1) Virus viêm gan vịt type (DHV-3)cũng phân loại loài Avastrovirus (Kim et al, 2008; Todd et al, 2009) đổi tên thành Astrovirus vịt type (DAstV-2) Phân tích trình tự gen cho thấy, Astrovirus vịt type (DAstV-1) Astrovirus vịt type (DAstV-2) có kiểu gen khác đại diện cho loài Những virus viêm gan vịt khác với virus viêm gan B vịt (DHBV), virus viêm gan B vịt (DHBV) Avihepadnavirus, chúng không gây bệnh lâm sàng đáng kể vịt (Yang et al 2008) 2.2.2 Cấu tạo, hình thái 2.2.2.1 Hình thái cấu tạo virus viêm gan vịt type I Virus viêm gan vịt type I thuộc Picornavirus virus có kích thước nhỏ, xun qua màng lọc Beckefeld Seitz, thuộc họPicornaviridae Qua kính hiển vi điện tử, virus hạt tròn, không vỏ bọc, hệ gen chứa sợi RNA đơn dương, dài khoảng 7.100-9.000 nucleotide Capsid có cấu tạo dạng khối da diện 20 mặt tam giác đều, đường kính khoảng 27-30nm (Richter, 1964) luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document9 of 66 Hình 2.1.Mơ hình cấu trúc không gian picornavirus 2.2.2.2.Thành phần hệ gen virus viêm gan vịt type I Hệ gen chứa khoảng 29% adenine, 23% guanine, 21% cytosine 28% uracil Trong đó, hàm lượng G+C chiếm khoảng 44% hệ gen Virus viêm gan vịt type I chứa khung đọc mở nằm vị trí từ nucleotide thứ 625 đến 7.375 (Open Reading Frame – ORF), mã hóa cho chuỗi polypeptid khoảng 2.249 axít amin gọi protein chung Tất chủng virus viêm gan vịt type I có kích thước đoạn ORF đầu cuối 3’ UTR Chuỗi protein chung sau tổng hợp phải qua nhiều lần myristyl hóa, glycosyl hóa phân cắt để tạo nên protein sản phẩm độc lập Trong hệ gen virus viêm gan vịt type I, vùng gen mã hóa VP1 dài khoảng 714 nucleotide virus viêm gan vịt type I genotype 1, genotype 2; theo Đồn Thị Hương ctv (2011) vùng gen VP1 virus viêm gan vịt type I genotype có độ dài khoảng 720 nucleotide Trình tự hệ gen virus viêm gan vịt type I xác định với cấu tạo đặc trưng Picornavirus gồm có vùng sau: Vùng không dịch mã đầu 5’ (5’-URT: Untranslational Region): vùng gen có độ dài khoảng 625 nucleotide, khơng mã hóa có vai trị quan trọng trình mã, tăng cường độc lực tạo khung vỏ capsid DHV-1 thiếu cấu trúc mũ đầu 5’ mà thay vào protein nhỏ gọilà VPg Ở đầu 5’ có mã khởi đầu để bắt đầu trình dịch mã, mã nàyđược đặt vị trí nucleotide 627 hệ gen Mặt khác, đầu 5’ hệ gen RNA DHV-1 có chứa vùng gen làm vị trí luan van, khoa luan of 66 tai lieu, document10 of 66 cho ribosome vào gọi IRES IRES phân thành bậc dựa cấu trúc sơ cấp cấu trúc thứ cấp Có yếu tố hoạt động trì dạng cis nằm cạnh yếu tố IRES motif Yn- Xm-AUG Trong đó, Yn vùng giàu pyrimidine, Xm đoạn dài 15- 25 nucleotide, theo sau mã AUG Trình tự motif Yn-Xm-AUG DHV-1 AUG-CA-AUG Tại vùng 5’ UTR hệ gen có cấu trúc bậc hai tạo cấu trúc vịm khép kín (stem-loop) Đầu 5’ UTR DHV-1 sở hữu IRES loại II trì thứ hai cấu trúc tetranucleotid GNRA (RNRA2) (Tseng and Tsai, 2007a) Vùng không dịch mã đầu 3’ (3’-UTR: Untranslational Region): vùng có độ dài khoảng 315 nucleotide, lớn vùng 3’ UTR khác Picornavirus có nguồn gốc động vật Mặt khác đầu cuối 3’ UTR DHV-1 tạo năm cấu trúc RNA bậc hai, đầu cuối 3’UTR DPV (Duck Picornavirus) tạo thành bốn cấu trúc RNA bậc hai Vùng 3’ UTR có vai trị quan trọng q trình nhân lên Picornavirus Ở chuỗi polypeptid chung, phần protein ký hiệu L (Leader protein) protein dẫn, tiếp loại protein cấu trúc bao gồm VP4 (1A), VP2(1B), VP3(1C) VP1(1D) Đoạn cuối gồm protein không cấu trúc protein 2A, 2B, 2C, 3A, 3B, 3C 3D Số lượng protein tạo thành phụ thuộc nhiều vào yếu tố có mặt hay vắng mặt protein L; số lượng protein 2A, phân cắt hay không phân cắt VP0 thành VP4 VP2 Phần lớn virus họ Picornaviridae VP0 loại protein myristyl hóa (hay gọi myristate), tức gắn thêm axít béo bão hịa gồm 14cacbon vị trí Glycin theo qui luật (GxxxS/T) thơng qua mối liên kết amid, từ VP0 tự phân tách thành protein VP4 VP2 Hầu hết virus tronghọ Picornaviridae có protein 2A Protein 2A:có phân đoạn protein 2A1, 2A2 2A3 Đây điểm đặc trưng DHV-1 (Kim et al, 2006) Protein cấu trúc: có vùng protein cấu trúc gồm VP0, VP1 VP3.Trong đó, vùng VP1 có tính ổn định cao, nằm bề mặt ngồi tất luan van, khoa luan 10 of 66 tai lieu, document11 of 66 Picornavirus, chứa đựng hầu hết motif mà có chức tương tác với thụ thể tế bào kháng thể trung hịa đơn dịng (Oberste et al,1999) Trình tự protein VP1 khác chi virus (Tseng and Tsai, 2007a) Protein không cấu trúc: số protein không cấu trúc 2C, 2D và3D, chứa đựng motif đặc trưng khác hẳn với motif protein biết Picornavirus khác, gồm có motif GxxGxGK (S/T)- kéo dài từ axít amin thứ 145 đến 152 motif DDLxQ – từ axít amin thứ 192 đến 196 protein 2C, motif có chức enzyme helicase Motif GxxGxGK (S/T) xuất protein 2A2 (GksGsGKS; axít amin thứ 6-13) Trong motif DDLxQ protein 2C, Leucin thay Phenylanin 2.2.3.Đặc diểm nuôi cấy 2.2.3.1.Nuôi cấy phôi trứng Levine and Fabricant (1950) người nghiên cứu nhân virus gây bệnh viêm gan vịt lên cách tiêm huyễn dịch bệnh phẩm có chứa virus vào xoang niệu mơ phơi gà ngày tuổi Sau đó, cấy truyền dịch virus liên tục nhiều lần phôi gà 10 ngày tuổi có nhận xét, từ lần cấy truyền thứ 20 đến 26 dịch virus khơng cịn gây bệnh cho vịt nở Tiêm truyền huyễn dịch bệnh phẩm có chứa virus, vào màng nhungniệu hay vào túi nỗn hồng virus nhân lên tốt tiêm vào xoang niệu mô phôi vịt Huyễn dịch bệnh phẩm gan vịt nhiễm virus tiêm vào xoang niệu mô phôi vịt lúc 10-14ngày tuổi, sau tiêm 24-72 phơi chết Nếu tiếp tục nuôi cấy virus phôi gà liên tục vịng 68 đời hiệu giá virus trìở mức 10-4 đến 10-6 ELD50/0,2ml Trong tự nhiên, sốchủng virus có độc lực cao số chủng có độc lực thấp, lần cấy truyền gây chết phơi (Ding and Zhang, 2007) Chẳng hạn phơi gà, gây chết phôi sau cấy truyền dịch virus từ 5-6 ngày Khi gây nhiễm chủng có độc lực thấp, khơng quan sát thấy chậm phát triển phơi bệnh tích phơi biểu điển hình bệnh viêm gan vịt virus (Wang et al, 2008) luan van, khoa luan 11 of 66 tai lieu, document12 of 66 2.2.3.2.Nuôi cấy mơi trường tế bào Virus viêm gan vịt nhân lên nhiều loại môi trường tế bào khác tế bào xơ phôi vịt, xơ phôi gà, thận phôi vịt, thận phôi gà, gan phôi vịt, thận phôi ngỗng Trên môi trường tế bào nuôi cấy, sau gây nhiễm quan sát thấy bệnh lý tế bào (CPE- Cytopathic effect) cao sau 48-96 Bệnh lý tế bào biểu cụm tế bào co tròn, nguyên sinh chất đặc lại tạo không bào, tế bào vỡ chết Khi cấy truyền virus từ lần thứ 25 trở tế bào thận phôi vịt, cấy truyền môi trường tế bào thận phôi gà virus khơng cịn khả gây hủy hoại tế bào môi trường tế bào thận phôi gà Bằng kỹ thuật kháng thể huỳnh quang để theo dõi phát triển virus viêm gan vịt môi trường tế bào thận phôi vịt tế bào thận heo cho thấy, virus nhân lên gây bệnh tích tế bào hàm lượng virus xác định cao lúc 48 sau gây nhiễm DHV-1 thích ứng phơi gà ni cấy mơi trường tế bào xơ phơi vịt chủng virus có biểu bệnh lý tế bào cao tiếp tục sử dụng để sản xuất vaccine thực phản ứng trung hòa virus (Golubnichi et al, 1976) 2.2.3.3.Nuôi cấy động vật cảm thụ Virus viêm gan vịt có khả nhân lên tiêm cho vịt mẫn cảm tuần tuổi Huyễn dịch bệnh phẩm chứa virus viêm gan vịt type I tiêm da, tiêm bắp, cho uống, nhỏ mũi cho vịt, vòng 18 – 48 sau gây nhiễm, thường 24 vịt thí nghiệm có biểu triệu chứng bệnh tích đặc trưng bệnh (Kim et al, 2008) Virus viêm gan vịt type III biểu tỷ lệ bệnh thấp cho vịt In vivo, gây nhiễm cho vịt qua đường tiêm tĩnh mạch tỷ lệ bệnh cao qua đường tiêm dướida tiêm bắp 2.2.4 Đặc điểm sức đề kháng Virus viêm gan vịt mẫn cảm với formalin, đề kháng cao với ether chloroform Trong điều kiện mơi trường khắc nghiệt, virus có khả sống sót thời gian dài Virus có khả tồn lâu ngồi mơi trường tự nhiên; chất độn chuồng, thức ăn, nước uống, tồn từ 15-40 ngày Virus tương đối ổn định nhiệt độ thấp, bị bất hoạt nhanh chóng nhiệt độ cao Ở 40C virus tồn hai năm Ở 500C virus cịn có khả gây bệnh, luan van, khoa luan 12 of 66 tai lieu, document13 of 66 phần lớn bị chết 560C sau 30 phút Ở 370C, virus tồn 21 ngày, cho tiếp xúc với formalin 0,01% tồn Ở nhiệt độ 15-200C virus bị vơ hoạthồn tồn NaOH 1% vòng chloramin 3% vòng Virus độc lực điều kiện nhiệt độ phòng từ 48đến 96 Ở nhiệt độ -200C virus tồn được9 năm Trong tự nhiên điều kiện vệ sinh virus tồn 10 tuần Trong phân ẩm virus sống 37 ngày 2.3 Truyền nhiễm học 2.3.1 Dịch tễ Trong tự nhiên virus viêm gan vịt type I gây bệnh chủ yếu vịt từ 1-28 ngày tuổi, gặp vịt nở vịt 5-6 tuần tuổi Vịt trưởng thành bị nhiễm bệnh thường không biểu triệu chứng lâm sàng không ảnh hưởng đến sản lượng trứng truyền bệnh cho khác; ngan, ngỗng bị nhiễm bệnh Đối với virus viêm gan vịt type II, dường có lồi vịt mẫn cảm Trong phịng thí nghiệm, virus viêm gan vịt type III thể tính gây bệnh yếu cho vịt con, sau công cường độc từ 2-4 ngày, tỷ lệ chết 20% Virus viêm gan vịt type I virus viêm gan vịt type III tồn nhiều tuần phân vịt bệnh Các đàn vịt bị nhiễm bệnh tiếp xúc với vịt loài chim mang trùng, người dụng cụ chăn nuôi mang mầm bệnh Trong tự nhiên, vịt bệnh phục hồi thải virus phân chúng tuần sau khỏi bệnh Sự truyền lây ngang xảy có tiếp xúc vịt khỏe với vịt bị nhiễm bệnh vật mang trùng Sự truyền lây dọc không xảy ra, vịt nở bị nhiễm bệnh virus bám dính bề mặt vỏ trứng Nếu vỏ trứng sát trùng tiêu chuẩn truyền nhiễm dọc khơng xảy 2.3.2 Cơ chế sinh bệnh Virus xâm nhập vào thể qua niêm mạc đường hô hấp, tiêu hóa vết thương vào máu Theo máu, virus đến quan phủ tạng đặc biệt gan, quan thích hợp virus diễn biến bệnh biểu qua giai đoạn: giai đoạn đầu, virus gây rối loạn trao đổi chất gan, làm rối loạn trình trao đổi mỡ gan, đặc biệt chế trao đổi cholesterol bị đình trệ, từ hàm lượng glucose gan giảm thấp lượng lipid lại tăng cao, giai đoạn sau, virus luan van, khoa luan 13 of 66 tai lieu, document14 of 66 trực tiếp phá hoại tế bào gan, tế bào nội mô huyết quản, gây xuất huyết đặc trưng bề mặt gan Virus sinh sản tế bào gan, tế bào thuộc hệ võng mạc nội mô tế bào Kupffer, tổ chức tế bào gan bị phá hoại, thể không giải độc làm vật chết ngộ độc Vì vậy, vịt chết bị nhiễm virus viêm gan vịt có bệnh tích tập trung gan, thận, lách (Woolcock and Fabricant, 1997) 2.4 Triệu Chứng Khi xâm nhập vào thể, virus có thời gian nung bệnh từ 1-5 ngày, kéo dài từ 8-15 ngày Thời gian nung bệnh tùy thuộc vào độc lực virus sức đề kháng vịt Trên thực tế, tất vịt bệnh chết sau 3-4 ngày từ bị nhiễm virus Đầu tiên, vịt nhiễm bệnh không theo kịp với đàn Trong thời gian ngắn, chúng di chuyển ngừng hẳn, vịt thường nằm, mắt nhắm Vịt ngã phía, hai chân co giật, chết với tư đầu ngã phía sau bên sườn Vịt chết khoảng sau xuất triệu chứng bệnh Vào đỉnh điểm ổ dịch, vịt chết nhanh đến không ngờ, dấu hiệu đặc trưng bệnh Một số trường hợp thấy vịt tiêu chảy, phân lỗng, triệu chứng khơng phải xuất tất vịt bệnh Khi xuất triệu chứng vịt bệnh khỏi, phần lớn chết Đối với DHV-1, tỷ lệ bệnh 100% tỷ lệ chết khác vịt Ở số đàn vịt nhỏ tuần tuổi, tỷ lệ chết lên đến 95% Vịt 1-3 tuần tuổi, tỷ lệ chết 50% thấp Vịt từ 4-5 tuần tuổi, tỷ lệ bệnh chết thấp không đáng kể Đối với virus viêm gan vịt type II, vịt thường chết từ 1-4 ngày sau nhiễm bệnh thường 1-2 sau xuất triệu chứng Các triệu chứng điển vịt khát nước nhiều, phân lỏng có nhiều cặn urat, co giật tồn thân co cứng cấp tính, chân duỗi thẳng đầu ngửa sau, tỷ lệ chết tahy đổi từ 10-50% phụ thuộc vào độ tuổi vịt Đối với virus viêm gan vịt type III, tỷ lệ chết thường không vượt 30% Vịt chết virus viêm gan vịt type III có triệu chứng bệnh tích điển hình giống với vịt chết virus viêm gan vịt type I luan van, khoa luan 14 of 66 tai lieu, document15 of 66 Hình 2.2.: Một số triệu chứng lâm sang vịt mắc bệnh (1 vịt ủ rủ, bỏ ăn lại Vịt co giật Vịt chết nằm nghiêng sườn, vịt khô chân chảy dịch mũi) 2.5 Bệnh tích 2.5.1 Bệnh tích đại thể Vịt chết có biểu bệnh tích tập trung chủ yếu gan gan sưng, nhũn, dễ bị nát ấn nhẹ, bề mặt gan có nhiều điểm xuất huyết, xuất huyết lan rộng khơng có ranh giới có kích thước, hình dạng to nhỏ khác Ngồi bệnh tích gan, cịn có xuất bệnh tích lách, thận, màng bao tim, túi khí Lách đơi sưng to lốm đốm đỏ, thận sưng sung huyết 10 luan van, khoa luan 15 of 66 tai lieu, document16 of 66 Hình 2.3 Bệnh tích gan vịt Bệnh tích đặc trưng bệnh viêm gan vịt virus type II gan màu hồng nhạt với nhiều điểm xuất huyết li ti bề mặt gan Trong nhiều trường hợp lách sưng to với điểm tròn nhạt màu diện bên lách Thận thường phù thũng với mạch máu bị sung huyết bật bề mặt Lịng ống tiêu hóa thực quản, dày ruột khơng có thức ăn Một vài trường hợp ghi nhận có xuất huyết nhỏ thành ruột non mỡ tim Ở bệnh viêm gan vịt virus type III, diễn biến bệnh vịt sau chết giống viêm gan vịt virus type I Bề mặt gan nhợt nhạt, nhiều đốm xuất huyết đỏ, lách nhạt màu không sưng Trên phôi chết có bệnh tích màng nhung niệu bị nhạt màu, vùng ảnh hưởng bề mặt màng có lớp khô nhầy, mặt bên màng nhung niệu bị phù thũng, dày lên đến 10 lần so với bình thường Các bệnh tích phơi bao gồm phôi chậm phát triển, phôi phù, xuất huyết da, phôi mềm bở, phơi tích dịch chứa gelatin, gan, thận lách phôi sưng (Hanson and Tripathy, 1976) 2.5.2 bệnh tích vi thể Biến đổi vi thể thường xuất gan đại não Gan có đámtế bào bị hoại tử, ống mật viêm não bị viêm mơ thần kinh đệm, có xuất bạch cầu có hạt, sau tế bào lympho tương bào Ở vịt khơng chết có tái sinh tế bào nhu mô gan Khi tiến hành làm tiêu vi thể thấy tế bào gan bị biến đổi, tế bào gan xếp lộn xộn, vi huyết quản xuyên tâm giãn rộng chứa hồng cầu tế bào viêm, có hiệntượng xuất huyết lan tràn 11 luan van, khoa luan 16 of 66 tai lieu, document17 of 66 nhu mô gan Tế bào lympho tăng sinh mạnh, tập trung thành đám lớn rãi rác xen kẽ với tế bào gan Một số tế bào gan bị phần nguyên sinh chất, lại nhân, số tế bào bị thối hóa mỡ thối hóa khơng bào , tế bào gan bị hoại tử, thành ống mật tăng sinh dẫn đến hẹp ống mật ống mật ống mật mật, xuất nhiều bạch cầu hạt quanh mạch máu Hình 2.4 Bênh tích vi thể kính hiển vi (A, B) Gan vịt bị thối hóa khơng bào lan tỏa HE x200 (C) Tế bào gan bị hoại tử HE x200 (D) Niêm mạc biểu mô ống mật tăng sinh dẫn đến hẹp hẹp 2.6 Chẩn đoán 2.6.1 Chẩn đoán lâm sang Có thể dựa vào đặc điểm dịch tễ, triệu chứng lâm sàng bệnh tích để chẩn đốn sơ bệnh viêm gan vịt virus có biện pháp xử lý kịp thời sở chăn ni Mặt khác, bệnh chẩn đốn thơng qua triệu chứng bệnh tích điển hình tiêm mẫu bệnh phẩm cho phơi vịt vịt Ngồi ra, phương pháp nuôi cấy virus môi trường tế bào gan phơi vịt sử dụng Chẩn đốn lâm sàng cần ý bệnh xuất đột ngột, diễn biến cấp tính, xảy vịt tuần tuổi, có bệnh tích đặc trưng gan Tuy nhiên, nhiều trường hợp bệnh tích viêm gan vịt khơng biểu rõ Ít khơng lại Bỏ ăn, ủ rủ Khô chân 10-1 14 12 12 10-2 12 10 12 luan van, khoa luan 17 of 66 10-3 12 10-4 10 10-5 10 (con) 58/75 38/75 33/75 % 77,3 50,7 44,0 tai lieu, document18 of 66 Tiêu chảy phân trắng Co giật Nằm nghiêng sườn, đầu ngửa lên lưng Chảy dịch mũi 11 5 7 25/75 14/75 36/75 33,3 18,7 48,0 1 16/75 21,3 Triệu chứng lâm sàng vịt thí nghiệm sau gây nhiễm vịt lại khơng lại chiếm tỷ lệ cao 77,3%; vịt bỏ ăn, ủ rũ chiếm tỷ lệ 50%; trước chết vịt nằm nghiêng sườn đầu ngửa lên lưng chiếm tỷ lệ 48,0%; dấu hiệu khác khô chân, suy yếu 44,0%; tiêu chảy phân trắng 33,3%; chảy dịch mũi 21,3% biểu thần kinh co giật 18,7%, vịt chết nhanh sau biểu triệu chứng (Phạm Công Uẩn,2018) 2.6.2 Chẩn đoán phân biệt Những kỹ thuật chẩn đoán PCR, ELISA sử dụng rộng rãi, đặc biệt kỹ thuật PCR phân tích trình tự gen ứng dụng nhiều giám định virus, RNA DHAV phát dễ dàng kỹ thuật RT- PCR Ngồi ra, kỹ thuật RT-PCR cịn ứng dụng để chẩn đoán phân biệt DAstV-1 DAstV-2 2.7 Phòng trị bệnh 2.7.1 Điều trị Do bệnh tiến triển nhanh nên việc điều trị mang lại kết mong muốn: – Không cho vịt xuống nước - Tiêm kháng thể viêm gan vịt với liều - 1,5 ml/con - Phun thuốc sát trùng chuồng trại bằng: Vinadin, Vinadin 600, Chlorine dioxide, Vina Aqua…  Sử dụng kháng sinh sau: - Trị khẹc vịt: 20g/100kgP, dùng - ngày khỏi - Colivinavet: 10gr thuốc dùng cho 30 - 40kgP/ngày - Antidiarrhoea: gói 10gr cho 50kg thể trọng gia cầm - Gentatylodex oral: 1g/5 kgP/ngày tương đương 1g/lít nước 1g/0,5 kg thức ăn - Ampicoli fort: Gói 50/200 kgP/ngày - Vina colidox: 0,5-1gr/1 lít nước/ ngày pha nước uống, tương đương với 1-2gr/ 10kgP/ngày trộn vào thức ăn  Bổ trợ, tăng sức đề kháng, tăng cường trao đổi chất thuốc sau: 13 luan van, khoa luan 18 of 66 tai lieu, document19 of 66 - B.complex for oral: Một gói 100g thuốc pha với 300 lít nước trộn với 100 kg thức ăn hỗn hợp - Vinamix 200: g/1 lít nước/ngày dùng liên tục 10 ngày q trình ni - Stress-bran: 1g thuốc pha lít nước, thuốc dùng liên tục 4-5 ngày 2.7.2 Phòng bệnh Biện pháp tốt tiêm phòng vaccine nhược độc cho vịt trường hợp bệnh xuất vùng dạng dịch địa phương Vaccine đòi hỏi phải phù hợp với chủng virus địa phương Nếu phát sớm, can thiệp cách tiêm huyết miễn dịch hay kháng thể viêm gan vịt chế từ lòng đỏ trứng gà Nếu vịt nở chưa có miễn dịch cần phải tiêm phòng kháng thể vòng 24 đầu, sau 4-7 ngày tiêm nhắc lại, lần tiêm 0,5ml kháng thể chế từ lòng đỏ trứng gà hay kháng huyết Huyết từ vịt khỏi bệnh viêm gan vịt virus sử dụng để điều trị bệnh ổ dịch bệnh thực địa Khơng nhập vịt từ vùng có bệnh lưu hành thường xuyên Đảm bảo thức ăn, nước uống sẽ, vịt sống điều kiện tối ưu Định kỳ sát trùng chuồng trại, máng ăn, máng uống dụng cụ chăn nuôi: - Vinadin: 100ml thuốc pha với 10 lít nước - Chlorine dioxide: 1g pha với lít nước Bồi bổ thể, tăng cường sức đề kháng sản phẩm như: B.complex, Vinamix 200, Stress-bran, Premix-vitamin-khống 2.8 Thực trạng tình hình ca bệnh 2.8.1 Trong nước Bệnh diện Việt Nam nhập nhiều giống vịt, ngan cao sản từ số nước lân cận vào, vịt chưa thích nghi với điều kiện mơi trường sống (Nguyễn Hữu Vũ ctv, 2001) Theo Nguyễn Văm Cảm ctv (2001) nghiên cứu tính chất bệnh viêm gan vịt virus 12 ổ dịch số tỉnh phíaBắc (Hà Nội, Hà Tây, Hà Nam Tuyên Quang) cho thấy, tỷ lệ nhiễm bệnh đàn cao 100% tỷ lệ chết từ 48,57% đến 90%, tuổi mắc bệnh từ 01 đến 21 ngày tuổi Triệu chứng lâm 14 luan van, khoa luan 19 of 66 tai lieu, document20 of 66 sàng, bệnh tích đại thể vi thể biểu điển hình bệnh viêm gan vịt virus, kể đàn vịt nhiễm bệnh tự nhiên gây bệnh thực nghiệm: vịt nhiễm bệnh không theo kịp đàn, sau thời gian ngắn chúng lại không nhắm mắt Vịt nhiễm bệnh có biệu triệu chứng thần kinh thăng bằng, ngã bên, chân bơi chèo, co giật, liệt chân chết Khi chết có tư đặc trưng hai chân duỗi thẳng, cổ rút lại, đầu ngửa phía sau Trong ổ dịch, vịt chết nhanh, 1-2 sau có triệu chứng lâm sàng Bệnh tích đại thể điển gan sưng to, xuất huyết lốm đốm gan, gan hoại tử tỷ lệ chết từ 79,66 đến 100% Bệnh tích vi thể điển hình gan gồm hoại tử tế bào gan, tăng sinh tế bào biểu mô ống mật Các tác giả kết luận, vịt gây bệnh thực nghiệm có triệu chứng bệnh tích giống vịt nhiễm bệnh ngồi tự nhiên Qua nghiên cứu từ năm 2009 đến năm 2015 xác định nguyên gây bệnh viêm gan vịt từ ổ dịch tự nhiên khu vực Đông Nam Bộ tỉnh Long An Nguyễn Văn Dung ctv (2015) phân lập virus viêm gan vịt type I genotype Đây sở quan trọng việc nghiên cứu kháng thể vaccine để phòng trị bệnh hiệu cho đàn vịt ni vùng 2.8.2 Ngồi nước Trước đây, cơng trình nghiên cứu chủ yếu tập trung vào đặc điểm dịch tễ, triệu chứng lâm sàng, bệnh tích, đặc tính sinh học điều chế vaccine, với mục đích phịng chống bệnh Nghiên cứu tính sinh bệnh DHAV vịt SPF lúc ngày tuổi, vịt gây nhiễm dịch virus có độc lực cao qua đường tiêm da Khảo sát triệu chứng lâm sàng, bệnh tích, phân bố virus thể, thay đổi hình thái vi thể mô khác thời điểm khác sau gây nhiễm Kết cho thấy, bệnh tích đại thể đặc trưng xuất huyết phù thủng gan Về bệnh tích vi thể, lượng kháng nguyên virus nhuộm tỷ lệ thuận với mức độ xuất rõ bệnh tích mơ bệnh Các tế bào bị nhiễm virus diện tế bào bạch cầu, đại thực bào, tế bào đơn nhân quan miễn dịch túi Fabricius, tuyến ức lách, gan, thận não Quá trình hoại tử 15 luan van, khoa luan 20 of 66 tai lieu, document21 of 66 quan khảo sát 72 sau gây nhiễm, ngoại trừ não; phát có hoại tử tế bào, đặc trưng trương phồng tế bào, màng tế bào chất bị vỡ Nhóm nghiên cứu kết luận trình gây chết hoại tử tế bào mô, quan biểu mức độ vi thể tính sinh bệnh virus gây bệnh viêm gan vịt A gây (Zhang et al, 2012) 16 luan van, khoa luan 21 of 66 tai lieu, document22 of 66 PHẦN KẾT LUẬN Bệnh viêm gan vịt virus có tính chất nguy hiểm tỷ lệ chết cao diễn biến phức tạp Cho nên, bệnh mối đe dọa lớn đến sức khỏe đàn vịt ảnh hưởng đến hiệu kinh tế người chăn nuôi vịt vùng Cho nên vấn đề viêm gan vịt đáng lưu tâm chăn ni thủy cầm nói chung chăn ni vịt nói riêng Từ cấp thiết thực tế nên chúng em tìm hiểu bệnh viêm gan vịt để có hiểu rõ sâu sắc bệnh này, có thêm kiến thức để trường làm, chăn ni có cách phịng trị bệnh hợp lí 17 luan van, khoa luan 22 of 66 tai lieu, document23 of 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Thị Thu Hà Nguyễn Khánh Ly, 2001 Nghiên cứu biến đổi bệnh lý bệnh viêm gan virus vịt Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (4):48-51 Trần Minh Châu Lê Thu Hồng, 1985 Thăm dò tạo chủng vaccine nhược độc viêm gan vịt chủng phân lập địa phương Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, 4:3-8 Nguyễn Văn Dung, Trần Xuân Hạnh, Đặng Minh Hải, Bùi Anh Thy, Nguyễn Ngọc Hải, 2015 Phân lập giám định virus viêm gan vịt type I số tỉnh phía Nam Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y (3):5-10 Đồn Thị Thanh Hương, Nguyễn Bá Hiên, Lê Thanh Hòa, 2009 Nghiên cứu đặc tính phân tử virus nhược độc vaccine viêm gan vịt Việt Nam qua khảo sát chuỗi gen kháng ngun VP1 Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 7(1): 19-26 Phạm công Uẩn Hồ Thị Việt Thu,2018 Khảo sát độc lực virus viêm gan việt phân lập từ tỉnh Hậu Giang.Tạp chí khoa học Đại học Cần Thơ, 54-1B(2018) Nguyễn Hữu Vũ, Nguyễn Đức Lưu, Trần Thu Hiền Nguyễn Khánh Ly, 2001 Kết sử dụng kháng thể viêm gan virus vịt phòng bệnh cho vịt Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, 8(4): 52-58 Tiếng nước Golubnichi V P., G P Tishchenko and V I Korolkov, 1976 Preparation of tissue culture antigens of duck hepatitis virus Vet Nauk Proiz Tr (Minsk) 14:88-90 Abstr Land-wirtsch Zentralbl Abstract IV 1977:2251 Hanson L E and D N Tripathy, 1976 In vitro isolation, propagation, and characterization of duck hepatitis virus type III Avian Diseases, 18 luan van, khoa luan 23 of 66 tai lieu, document24 of 66 23:715- 729 Kim M C., Y K Kwon., S J Joh., A M Lindberg., J H Kwon., J H Kim and S J Kim, 2006 Molecular analysis of duck hepatitis virus type reveals a novel lineage close to the genus Parechovirus in the family Picornaviridae Virology, 87: 3307-3316 10 Richter W R., E J Razok and S M Moize, 1964 Electron microscopy of virus like particle associated with duck viral hepatitis Virology, 24:114- 116 11 Tseng C H and H J Tsai, 2007a Molecular characterization of a new serotype of duck hepatitis virus Virus Res, 126:19-31 12 Wang L., M Pan., Y Fu and D Zhang, 2008 Classification of duck hepatitis virus into three genotypes based on molecular evolutionary analysis 13 Woolcock P R and J Fabricant, 1997 Duck hepatitis In: Calnek B W., H J Barnes., C W Beart., L R McDougald and Y M Saif, Diseases of Poultry 12th Edition Iowa State University Press, Ames, Iowa, USA: 661-673 14 Yang, J Q., J H Chen and J J Liu, 2008 A new genus and a new species of Braconinae (Hymenoptera, Braconidae) from China Acta Zootaxonomica Sinica, 33 (1), 61–64 15 Zhang H., J Pi., C Tang., H Yue and F Yang, 2012 An experimental study of the pathogenicity of duck hepatitis A virus genotype C isolate specific pathogen free ducklings Avian Pathology, 41(6):613-620 19 luan van, khoa luan 24 of 66  ... Những nguyên g? ?y bệnh vịt vi khuẩn, virus bệnh tụ huyết trùng gia cầm, bệnh dịch tả vịt, bệnh cúm gia cầm v.v tương tự bệnh truyền nhiễm bệnh viêm gan vịt virus bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, g? ?y thiệt... virus viêm gan vịt type I gọi virus viêm gan vịt type II (Asplin, 19 65) Tại Long Island (Mỹ), bệnh viêm gan vịt virus x? ?y đàn vịt tiêm phòng vaccine virus viêm gan vịt type I nhược độc Bệnh x? ?y nhẹ... genotype Tác nhân g? ?y bệnh l? ?y lan mạnh virus viêm gan vịt type I genotype (DHAV -1) , trước gọi virus viêm gan vịt type I, hai genotype bổ sung chi Avihepatovirus virus viêm gan vịt type I genotype