Từ các dịch chiết lá của loài Râu hùm hoa tía Tacca chantrieri André ở Việt Nam đã phân lập được các chất gồm RHH1 và RHH2 từ cặn chiết n-hexane, RHE1 và RHE2 từ cặn chiết ethyl acetate, RHW1 từ nước. Bằng các phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân, phổ khối lượng và so sánh với các số liệu đã được công bố đã xác định cấu trúc của 3 chất phân lập được gồm RHW1 từ cặn chiết nước là (6S, 9R)-roseoside; RHH2 từ cặn chiết n-hexane là β-sitosterol và RHH1 từ cặn chiết n-hexane là Triolein.
BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM - HỘI NGHỊ KHOA HỌC QUỐC GIA LẦN THỨ DOI: 10.15625/vap.2020.000100 NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT MỘT SỐ HỢP CHẤT TRONG LÁ CỦA LOÀI RÂU HÙM HOA TÍA (Tacca chantrieri André) Ở VIỆT NAM Nguyễn Quang Huy*, Lê Tiến Nga, Vũ Thị Diệp Tóm tắt: Từ dịch chiết loài Râu hùm hoa tía Tacca chantrieri André Việt Nam phân lập chất gồm RHH1 RHH2 từ cặn chiết n-hexane, RHE1 RHE2 từ cặn chiết ethyl acetate, RHW1 từ nước Bằng phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân, phổ khối lượng so sánh với số liệu công bố xác định cấu trúc chất phân lập gồm RHW1 từ cặn chiết nước (6S, 9R)-roseoside; RHH2 từ cặn chiết n-hexane β-sitosterol RHH1 từ cặn chiết n-hexane Triolein Chất RHH2 khơng có hoạt tính chống oxi hố kháng nấm có hoạt tính kháng với vi khuẩn Gram (+) Staphylococcus aureus, Lactobacillus fermentum, Bacillus subtillis với giá trị IC50 1,1; 25,8; 79,7 µg/mL vi khuẩn Gram (-) Escherichia coli, Salmonella enterica với IC50 tương ứng 4,4 3,1 µg/mL Từ khóa: Tacca chantrieri, cặn chiết lá, kháng khuẩn, Râu hùm hoa tía ĐẶT VẤN ĐỀ Các thuốc nguồn nguyên liệu trực tiếp gián tiếp cho ngành công nghiệp dược, hóa dược Các nghiên cứu gần cho thấy nhiều loại dược phẩm dùng chữa bệnh thử cận lâm sàng có nguồn gốc từ tự nhiên Chi Râu hùm (danh pháp khoa học Tacca, thuộc họ Dioscoreaceae), gồm 12-31 loài với tên gọi nưa, củ nưa, ngải rợm, hạ túc, râu hùm,… phát triển phổ biến khu vực Đông Nam Á (Vũ Thị Quỳnh Chi nnk, 2015) Theo Danh mục thực vật, ghi nhận 17 loài phân bố phổ biến nước Châu Á, Việt Nam có lồi sử dụng phổ biến làm thuốc chữa thấp khớp, viêm loét dày, viêm gan làm thực phẩm rau ăn (Quang nnk, 2012) Nghiên cứu Quang nnk 2012, cho thấy lồi chi Tacca có chứa chất taccalonolide, withanolide, cholestane, spirostanol, furostanol Từ lồi Râu hùm hoa tía (Tacca chantrieri) nhiều chất hóa học phân tách, đánh giá hoạt tính sinh học chủ yếu tập trung thân, rễ mà chưa đề cập đến phần (Vũ Thị Quỳnh Chi nnk, 2015, Jiang et al., 2014, Liu et al., 2015) Bài báo công bố số chất tách chiết từ loài Râu hùm hoa tía góp phần cho hiểu biết đầy đủ thành phần hóa học VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu: Râu hùm hoa tía thu từ tỉnh phía Bắc Việt Nam phân loại Nguyễn Kim Thanh, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN Mẫu tiêu lưu trữ Trường ĐH Khoa học Tự nhiên Mẫu sấy khô, nghiền thành bột bảo quản nơi khô Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội *Email: nguyenquanghuy@vnu.edu.vn 804 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Các chủng vi sinh vật kiểm định gồm: Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enterica ATCC 13076 Staphylococcus aureus ATCC 13709, Bacillus subtillis ATCC 6633, Lactobacillus fermentum ATCC 9338 nấm Candida albicans ATCC 10198 cung cấp Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Phương pháp xác định cấu trúc hóa học Các chất phân lập xác định cấu trúc hóa học kỹ thuật: Phổ khối lượng (MS) đo phương pháp ESI máy Agilent 1120; Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) đo máy Bruker AM 500 FT-NMR Spectrometer với TMS chất chuẩn nội; Phổ lưỡng sắc tròn (CD) đo máy Chirascan TMCD spectrometer; Độ quay cực ([α]D) đo máy JASCO DIP-1000 KUY polarimeter Các phân tích thực Viện Hóa học Viện Hóa sinh biển thuộc Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Các phương pháp phân lập hợp chất Các chất phân lập từ dịch chiết sắc ký cột với chất mang silica gel (hệ dung môi rửa giải với độ phân cực tăng dần) Sephadex LH-20 (hệ dung môi rửa giải CH2Cl2/MeOH: 1/9 MeOH); Sắc ký lớp mỏng thực mỏng silica gel Merck 60 F254, dày 0,25 mm, màu thuốc thử Vanilin/H2SO4 Ceri sulfatl Hoạt tính quét gốc tự DPPH đánh giá theo phương pháp Taskin nnk, 2017 Các mẫu xác định nồng độ có khả quét 50% gốc tự DPPH (giá trị IC50) dựa đường chuẩn tương quan nồng độ % quét gốc tự tương ứng Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định hợp chất phân lập tiến hành theo phương pháp Vander Vlietlinck, 1991 đĩa 96 giếng Ampicilin 50 mM dùng làm kháng sinh kiểm định cho chủng vi khuẩn với giá trị IC50 từ 0,052µg/mL Amphotericin B 0,04 mM dùng làm kháng sinh kiểm định cho nấm với giá trị IC50 từ 0,5-1 µg/mL Các kháng sinh pha DMSO Mẫu kháng sinh có bổ sung vi sinh vật kiểm định sử dụng làm mẫu đối chứng dương cịn mẫu có vi sinh vật kiểm định đối chứng âm Môi trường nuôi cấy vi sinh vật: MHB (Mueller-Hinton Broth), MHA (MuellerHinton Agar); TSB (Tryptic Soy Broth); TSA (Tryptic Soy Agar) cho vi khuẩn; SDB (Sabouraud với 2% dextrose) SA (Sabouraud với 4% dextrose) cho nấm men Các kết xử lý thống kê sinh học phần mềm Excel KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Kết phân lập chất từ cặn chiết dung môi Dựa vào tham khảo tài liệu (Vũ Thị Quỳnh Chi nnk, 2015, Jiang et al., 2014, Quang nnk, 2012) phương pháp tách chiết lựa chọn dung môi methanol (MeOH) khởi đầu cho việc điều chế cặn chiết từ Râu hùm hoa tía PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 805 Mẫu T chantrieri phơi khô, nghiền nhỏ thu 280 g bột khơ sau ngâm chiết với 500 mL methanol nhiệt độ phòng 24 giờ, lọc lấy phần dịch chiết (chiết lần thứ nhất) Phần bã nguyên liệu tiếp tục ngâm chiết với MeOH thêm lần theo quy trình tương tự lần chiết thứ Dịch chiết MeOH thu từ lần chiết gom chung cất loại dung môi xuống cịn 1/10 thể tích ban đầu Pha lỗng dịch chiết methanol cô đặc 50 mL nước cất chiết phân bố dung môi n-hexane ethyl acetate (EtOAc) để thu dịch chiết n-hexane, ethyl acetate nước Các dịch chiết n-hexane ethyl acetate cất loại kiệt dung môi áp suất giảm thu cặn chiết tương ứng cặn n-hexane ! ! (RH, 1,78 g) cặn ethyl acetate (RE, 3,8 g) Quá trình chiết xuất thu nhận cặn chiết dung mơi trình bày Hình Bột T chantrieri (280 g) Ngâm chiết với MeOH (3 lần, 24h/lần) Dịch Metanol - Cất loại MeOH xuống 1/10V - Pha loãng nước cất (50 mL) ! Dịch MeOH - H2O Chiết phân bố với hexane ! Dịch H2O Dịch chiết hexane Chiết phân bố với EtOAc Cất loại dung môi Cặn hexane (RH, 1,78 g) Dịch chiết EtOAc Dịch H2O ! (RW, 100 mL) Cất loại dung mơi Cặn EtOAc (RE, 3,80 g) Hình Sơ đồ điều chế cặn chiết với dung môi khác từ mẫu T chantrieri Hình 3.1 Sơ đồ điều chế cặn chiết từ mẫu lá, thân Tacca chantrieri Cặn n-hexane (RH) phân tách sắc kí cột silica gel, rửa giải 3.3.1 Phân lập chất từ cặn chiết n- hexan gradient hệ dung Cặn môihexan n-hexane: EtOAc (0→100% EtOAc) thu phân (RH1-RH4) (RH, 1,78 g) phân tách sắc kí cột chất hấp phụ Lựa chọn phân đoạn RH1 RH2 phân đoạn RH3 RH4 lẫn nhiều chất tạp silica gel, rửa giải phương pháp gradient hệ dung mơi hexane:EtOAc Phân đoạn RH1 có chất rắn màu trắng lẫn chất dầu màu vàng, rửa phân đoạn gradient (0®100% EtOAc) thu phân đoạn, kí hiệu RH1-RH4 Do thời gian acetone thu chất dạng chất rắn màu trắng kí hiệu RHH1 (Hình 2) điều kiện nên chúng tơi tập trung cho việc phân lập tiếp phân đoạn RH1 Phân đoạn RH2 RH2 có chất rắn màu trắng lẫn chất màu đen Rửa phân đoạn RH2 MeOH kết tinh lại hỗn hợp CH2Cl2: MeOH (9:1) thu chất RHH2 dạng phiến màu trắng (Hình Phân 2) đoạn RH1 có chất rắn màu trắng lẫn chất dầu màu vàng, rửa phân đoạn acetone thu chất dạng chất rắn màu trắng, kí hiệu RHH1 (5,2 mg) 806 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Hình Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexane từ T chantrieri Từ cặn chiết ethyl acetate (RE) sắc kí cột chất hấp phụ Sephadex LH-20, rửa giải với hệ dung môi CH2Cl2:MeOH (1:4) thu phân đoạn RE1-RE8 (Hình 3) Phân đoạn RE2 RE8 có khối lượng thu nhiều lựa chọn cho nghiên cứu Phân đoạn RE2 (628 mg) rửa MeOH thu chất rắn màu trắng, kết tinh lại chất rắn hỗn hợp CH2Cl2:MeOH (9:1) thu chất rắn màu dạng phiến màu trắng, kí hiệu RHE1 (20 mg) Phân đoạn RE8 (447 mg) kết tinh MeOH thu chất rắn dạng bột màu trắng, kí hiệu RHE2 (64 mg) Quá trình phân lập chất từ cặn ethyl acetate trình bày Hình Hình Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết ethyl acetate từ T chantrieri Cặn chiết từ nước phân tách cột Diaion HP-20, rửa cột H2O, MeOH:H2O (25:75, 50:50) MeOH (100%) Phân đoạn MeOH 100% cất loại dung mơi thu cặn kí hiệu RWA (1,0 g) tiếp tục phân tách cột Sephadex LH- PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 807 20, rửa giải MeOH thu phân đoạn RWA1 (830 mg) RWA2 (97 mg) cho phân tích Phân đoạn RWA2 phân tách cột silica gel, rửa giải hệ dung môi EtOAc:MeOH (1:0, 9:1) thu phân đoạn RWA2.1-RWA2.6 Phân đoạn RWA2.3 qua cột silica gel pha đảo C-18 với hệ dung môi H2O:MeOH (1:1→0:1) thu chất RHW1 (3,7 mg) Các bước trình phân lập chất pha nước Hình Hình Sơ đồ tách chất dịch chiết nước từ T chantrieri 808 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Xác định tên cấu trúc hoá học chất Các chất phân lập từ cặn chiết loài T chantrieri gồm chất RHH1 RHH2 từ cặn chiết n-hexane, RHE1 RHE2 từ cặn chiết ethyl acetate, RHW1 từ cặn nước xác định tên cấu trúc hoá học Chất RHH2 chất RHE1 có nhiệt độ nóng chảy tương đương 135-136 oC Kết sắc ký mỏng cho thấy chất trùng Kết xác định đặc điểm vật lý cho thấy RHW1 chất bột màu trắng, RHH1 có chất dầu, màu trắng đục RHH2 tương tự RHE1 có tinh thể dạng phiến, màu trắng RHE2: Chất bột vô định hình, màu trắng Cấu trúc chất xác định phương pháp phổ NMR, MS kết hợp với tham khảo tài liệu xác định tên cấu trúc chất phân lập - Chất (RHH1): Triolein Hình Cơng thức cấu tạo chất RHH1 Hợp chất RHH1 có phổ 1H-NMR RHH1có tín hiệu cộng hưởng nhóm oxymethylen δH 4,13 (2H, dd, J = 6,0, 11,5 Hz, H-1a H-3a) 4,28 (2H, dd, J = 4,0, 7,0 Hz, H-1b H-3b), nhóm oxymethyl δH 5,24 (1H, m, H-2) Các tín hiệu cộng hưởng cho biết cấu trúc RHH1 có chứa phân tử glycerol bị este hóa nhóm hydroxy Ngồi tín hiệu trên, phổ 1H-NMR cịn có tín hiệu cộng hưởng nhóm methyl δH 0,87 (9H, t, J = 7,0 Hz, H-18', H-18 H-18), nhóm methyl dạng olefin cộng hưởng vùng δH 5,26-5,39 (6H, m), tín hiệu cộng hưởng nhóm methylene vùng trường cao δH 1,20-2,83 Phổ 13C-NMR DEPT RHH1 cho tín hiệu nhóm carbonyl (δC 173,17 172,80), nhóm methin dạng olefin (δC 129,95 129,66), nhóm oxymethyl (δC 68,85), hai nhóm oxymethylen (δC 62,06), nhóm methyl (δC 14,03) số nhóm methylen tập trung vùng trường cao (δC 22,63-34,16) Kết hợp liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR cho phép dự kiến hợp chất RHH1 trieste glycerol với axit cấu hình liên kết đơi axit béo dạng cis So sánh số liệu phổ 13C-NMR phần axit RHH1 với axit oleic Sự tương đồng số liệu cho phép xác định RHH1 trieste axit oleic glycerol có tên gọi triolein (Hình 5) Cấu trúc RHH1 triolein khẳng định lại qua việc tham khảo tài liệu triolein so sánh mỏng với chất triolein chuẩn (Rf = 1,6) PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 809 - Chất RHH2: β-sitosterol Hình Cơng thức cấu tạo chất RHH2 Hợp chất RHH2 nóng chảy 135-136 oC Phổ 1H-NMR xuất tín hiệu cộng hưởng proton dạng olephin [δH 5,34 (1H, brd, J= 5,0 Hz, H-6) nhóm methyl có nhóm cộng hưởng dạng singlet [δH 0,68 (3H, s, H-18) 1,00 (3H, s, H-19)] nhóm cộng hưởng dạng doublet [δH 0,81 (3H, d, J= 7,0 Hz, H-27); 0,83 (3H, d, J= 7,0 Hz, H-26) 0,92 (3H, d, J= 6,5 Hz, H-21)] Tín hiệu cộng hưởng nhóm hydroxymethyl xuất dạng multiplet [δH 3,52 (1H, m, H-3)] Ngồi cịn có tín hiệu cộng hưởng proton nhóm methyl methylen khác vùng trường cao [δH 1,04-2,31] Phổ 13C-NMR RHH2 có tín hiệu cộng hưởng 29 nguyên tử cacbon bao gồm liên kết đôi [δC 121,73 (C-6); 140,77 (C-5)], nhóm methyl [δC 11,87 (C-18); 11,99 (C-29), 18,79 (C-21); 19,05 (C26); 19,40 (C-19); 19,82 (C-27)], nhóm methyn, 11 nhóm methylen cacbon bậc bốn Sự có mặt liên kết đơi, nhóm methyl bậc cacbon bậc bốn phân tử RHH2 cho biết chất có chứa khung steroit nhận định β-sitosterol Số liệu phổ 13C-NMR RHH2 so sánh với giá trị tương ứng công bố chất β-sitosterol (Mc Carthy cộng sự, 2005) Sự phù hợp số liệu phổ NMR cho phép khẳng định cấu trúc RHH2 β-sitosterol (Hình 6) Chất β-sitosterol sterol phổ biến loài thực vật bậc cao - Chất RHW1: (6S, 9R)-roseoside Hình Cơng thức hố học chất RHW1 Chất RHW1 có độ quay cực [α]30D+163,9(c 0,09; MeOH) Phổ khối ESI-MS cho pic ion phân tử deproton hóa m/z 385 [M-H]- Phổ 1H-NMR RHW1 xuất tín 810 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM hiệu nhóm methyl bậc δH 1,05 (3H, s, CH3-11); 1,06 (3H, s, CH3-12); 1,94 (3H, d, J=1,5 Hz, CH3-13), nhóm methyl dạng doublet H 1,31 (3H, d, J=6,5 Hz, CH3-10), proton olefin δH 5,87 (1H, s), 5,89 (1H, m) 5,90 (1H, m), proton anome δH 4,36 (1H, d, J= 8,0 Hz, H-1’) tín hiệu proton nằm khoảng δH 2,16-3,88 Tín hiệu nhóm methyl dịch chuyển phía trường thấp 1,94 cho phép dự đoán methyl liên kết trực tiếp với liên kết đôi, có mặt cấu trúc khung megastigmane chứa đơn vị đường Phổ 13C-NMR DEPT RHW1 xuất tín hiệu 19 cacbon bao gồm cacbonyl δC 201,2, nhóm methyl δC 21,2, 24,7, 23,4 19,6, nhóm methyn sp2 δC 127,2, 131,6 135,3, nhóm methyl sp3 δC 77,3, nhóm methylen δC 50,7, cacbon bậc cacbon thuộc phân tử đường (5 nhóm oxymethin nhóm oxymethylen) Cấu hình β phần đường xác định từ số tương tác lớn (J = 8,0 Hz) proton anomeric H-1’tại δH 4,35 Cấu hình tuyệt đối chất xác định phân tích phổ CD so sánh độ chuyển dịch hóa học với đồng phân lập thể biết Hóa lập thể C-6 C-9 xác định dựa phổ CD chuyển dịch tín hiệu phổ 13C-NMR RHW1 với hợp chất có cấu trúc hóa học tương tự (6S,9R), (6R,9R), (6S,9S), 6R,9S)-roseoside Hiệu ứng Cotton 240 nm (: +29,28) có giá trị dương cho phép xác định cấu hình 6S dựa nghiên cứu Yamano Ito, 2005 Từ liệu phổ NMR, ESI-MS, CD, so sánh độ quy cực RHW1 xác định (6S, 9R)-roseoside Theo Frankish cộng sự, 2010 chất đánh giá có hoạt tính chống ung thư dòng tế bào ung thư da chuột thực nghiệm Đánh giá hoạt tính sinh học RHH2 phân lập từ cặn chiết Râu hùm hoa tía Do hàm lượng thu từ chất phân lập không cao, lựa chọn chất RHH2 β-sitosterol (cặn n-hexane có hàm lượng tương đối nhiều) cho đánh giá hoạt tính sinh học Theo Saiedina et al, 2014 β-sitosterol sterol phổ biến lồi thực vật có tác dụng chống ung thư, kháng viêm Bảng Bảng kết nghiên cứu khả kháng vi sinh vật kiểm định hoạt tính chống oxi hố RHH2 Bảng Khả kháng vi sinh vật kiểm định β-sitosterol (RHH2) Giá trị IC50 chủng (µg/mL) Vi khuẩn Gram (+) Vi khuẩn Gram (-) Nấm S B L S P Candida E coli aureus subtilis fermentum enterica aeruginosa albican 1,1 79,7 25,8 3,1 4,4 > 256 > 256 Kết Bảng cho thấy khả kháng khuẩn RHH2 mạnh với hai chủng vi khuẩn Gram âm E.coli S enterica với giá trị IC50 tương ứng 4,4 3,1 µg/mL Chất RHH2 có hoạt tính kháng mạnh vi khuẩn Gram dương S aureus (IC50 = 1,1 µg/mL), yếu với L fermentum B subtilis (IC50 tương ứng 25,8 79,7 µg/mL) Hợp chất RHH2 khơng có hoạt tính kháng nấm Candida albican vi khuẩn P aeruginosa PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 811 Bảng Kết thử hoạt tính chớng oxy hố β-sitosterol (RHH2) Chất thử Giá trị IC50 (µg/mL) hệ DPPH Chất RHH2 > 128 Đối chứng dương Quercetin 8,11 Kết Bảng chất β-sitosterol (RHH2) phân lập từ Râu hùm khơng có hoạt tính oxi hóa hệ thử thấp so với chất đối chứng Quercetin KẾT LUẬN Đã phân lập xác định chất từ cặn chiết loài T chantrieri gồm RHH1 RHH2 từ cặn chiết n-hexane, RHE1 RHE2 từ cặn chiết ethyl acetate; RHW1 từ cặn nước Đã xác định cơng thức hố học chất RHW1 (6S, 9R)roseoside; chất RHH2 β-sitosterol chất RHH1 Triolein Chất RHH2 khơng có hoạt tính chống oxi hố kháng nấm có hoạt tính kháng với số vi khuẩn kiểm định gồm Gram dương S aureus, B subtillis, L fermentum với giá trị IC50 tương ứng 1,1, 79,7 25,8 µg/mL Gram âm E.coli S enterica với giá trị IC50 tương ứng 4,4 3,1 µg/mL Lời cảm ơn: Cơng trình thực với hỗ trợ kinh phí nhiệm vụ nghiên cứu xây dựng Bộ Địa chí Quốc gia Việt Nam: Tập Động vật, thực vật TÀI LIỆU THAM KHẢO Vũ Thị Quỳnh Chi, Nguyễn Xuân Nhiệm, Dương Thị Dung, Đỗ Thanh Tuân, Hoàng Lê Tuấn Anh, Đỗ Thị Hà, Châu Văn Minh, Phan Văn Kiệm, 2015 Nghiên cứu thành phần hoá học thân rễ Râu hùm Tacca chantrieri, Tạp chí Dược liệu, 20(6): 337-342 Frankish N., Sousa Menezes F., Mills C., Sheridan H., 2010 Enhancement of isulin release from beta-cell line INS-1 by an ethanolic extract of Bauhinia variegata and its major constituents reseoside Planta Medicine, 76: 995-1007 Jiang J., Yang H., Wang Y., Chen Y., 2014 Phytochemical and pharmacological studies of the genus Tacca: A Review Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 13: 635648 Liu ZH., Yan H., Hai LY., 2015 Chemical constituents and their bioactivities of plants of Taccaceae Chemistry & Biodiversity, 12: 221-238 Mc Carthy FO., Chopra J., Ford A., Hogan SA., Kerry JP., O'Brien NM., Ryan E., Maguire AR., 2005 Synthesis, isolation and characterisation of β-sitosterol and βsitosterol oxide derivative Organic and Biomolecular Chemistry, 3: 3059-3095 Quang TH., Ngan TH., Minh CV., Kiem PV., Yen BH., Tai BH., Nhiem NX., Thao NP., Hle TA., Luyen BT., Yang SY., Yang SY., Choi CW., Kim YH., 2012 Diary heptanoid glycosides from Tacca plantaginea and their effects on NK-kappa B activation and PPAR transcriptional activity Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 22: 6681-6687 812 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Saiedina SA., Manayi AR., Gohari MA., 2014 The story of β-sitosterol, European Journal of Medicinal Plants, 4(5): 590-609 Taskin T., Sadikoglu N., Tan SB., 2017 In vitro screening for antioxidant and antimicrobial properties of five commercial origanum species from Turkey Indian Journal of Traditional Knowledge, 16: 568-575 Vander B., Vlietinck AJ., 1991 Methods in plant biochemistry, 6: 47-48 Yamano Y., Ito M., 2005 Synthesis of optically active vomifoliol and roseoside stereoisomers, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 53: 541-546 ISOLATED CHEMICAL CONSTITUENTS OF Tacca chantrieri André LEAVES IN VIETNAM Nguyen Quang Huy*, Le Tien Nga, Vu Thi Diep Abstract: Various compounds were isolated from the different extracts of T chantrieri André leaves in Vietnam including RHH1 and RHH2 from n-hexane extract, RHE1 and RHE2 from ethyl acetate extract and RHW1 from water extract Three compounds have been identified, RHW1 as (6S, 9R)-roseoside; RHH2 as β-sitosterol, RHH1 as triolein by nuclear magnetic resonance, mass spectrometry analysis and comparison with the previously published data Compound RHH2 had no antioxidant and antifungal activity However, it exhibited activity against Gram positive bacterial strains including Staphylococcus aureus, Lactobacillus fermentum, Bacillus subtilliswith the IC50 values of 1.1, 25.8, 79.7 µg/mL, respectively and Gram negative bacteria Escherichia coli and Salmonella enterica with the IC50 values of 4.4 and 3.1 µg/mL, respectively Keywords: Tacca chantrieri, antibacterial, isolate University of Science, Vietnam National University, Hanoi *Email: nguyenquanghuy@vnu.edu.vn ... (1:1→0:1) thu chất RHW1 (3,7 mg) Các bước trình phân lập chất pha nước Hình Hình Sơ đồ tách chất dịch chiết nước từ T chantrieri 808 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Xác... mg) 806 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Hình Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexane từ T chantrieri Từ cặn chiết ethyl acetate (RE) sắc kí cột chất hấp phụ Sephadex... dung môi methanol (MeOH) khởi đầu cho việc điều chế cặn chiết từ Râu hùm hoa tía PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 805 Mẫu T chantrieri phơi khô, nghiền