Tách và xác định cấu trúc một số hợp chất từ nụ và hoa cây vối ( cleistocalyx operculatus (roxb) merr et perry) ở nghệ an

Bộ giáo dục đào tạo Tr-ờng đại học vinh === === BùI DOÃN TÂM TáCH Và XáC ĐịNH CấU TRúC MộT Số HợP CHấT Từ Nụ Và HOA C¢Y VèI (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) ë NGHƯ AN Chuyên ngành: hóa hữu MÃ số: 60.44.27 LUậN VĂN THạC Sĩ Hóa học Vinh 2012 Bộ giáo dục đào tạo Tr-ờng đại học vinh === === BùI DOÃN TÂM TáCH Và XáC ĐịNH CấU TRúC MộT Số HợP CHấT Từ Nụ Và HOA CÂY VốI (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) NGHệ AN Chuyên ngành: hóa hữu MÃ số: 60.44.27 LUậN VĂN THạC Sĩ Hãa häc Ng-êi h-íng dÉn khoa häc: PGS.TS HOµNG V¡N LùU Vinh 2012 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành gửi lời cảm ơn tới: PGS TS Hoàng Văn Lựu – Khoa hóa học – Trường Đại học Vinh Thầy giao đề tài, tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình học tập hồn thiện luận văn PGS TS Chu Đình Kính – Viện hóa học – Viện khoa học cơng nghệ Việt Nam tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi việc ghi phổ xác định cấu trúc hợp chất TS Trần Đình Thắng PGS TS Lê Văn Hạc tận tình bảo có ý kiến đóng góp quý báu cho luận văn ThS NCS Nguyễn Văn Thanh tận tình giúp đỡ, hướng dẫn cho tơi hồn thành phần thực nghiệm Cuối xin chân thành gửi lời cảm ơn tới thầy giáo khoa hóa học, khoa sau đại học – trường Đại học Vinh, gia đình, người thân, bạn bè tạo điều kiện để giúp đỡ vật chất lẫn tinh thần để tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn! Vinh, ngày 08 tháng12 năm 2011 Tác giả Bùi Dỗn Tâm DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT CC : Column Chromatography (Sắc ký cột) TLC : Thin Layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) H – NMR : Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C – NMR : Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon – 13) DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer s : singlet br s : singlet tù br d : doublet tù d : doublet m : multiplet DANH SÁCH BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hoá học tinh dầu gioi ……………… …… ……8 Bảng 1.2 Thành phần hoá học tinh dầu bột gỗ gioi ………… Bảng 1.3 Thành phần hố học hoa gioi…………………………….8 Bảng1.4: Thành phần húa học đinh hương………………………… 14 Bảng 1.5: Thành phần hóa học tinh dầu hoa sim Nghệ An 19 Bảng 1.6: Thành phần hóa học tinh dầu rễ sim Nghệ An …19 Bảng 1.7 Thành phần hóa học tinh dầu vối Quảng Châu, TrQ ……… 24 Bảng 1.8 Thành phần hóa học tinh dầu nụ vối Quảng Châu, TrQ …… …25 Bảng 1.9 Thành phần hóa học tinh dầu vối thành phố Vinh, Nghệ An … …27 Bảng 1.10 Thành phần hoá học tinh dầu nụ vối non nụ vối già …… 29 Bảng1.11 Thành phần hoá học tinh dầu hoa vối thành phố Vinh, Nghệ An …… 30 Bảng 2.1: Số liệu quỏ trỡnh chạy cột cao etyl axetat Nụ Hoa vối 41 Bảng 3.1: Số liệu cộng hưởng từ hạt nhân hợp chất TDH136 ………………… 59 Bảng 3.2 : Số hiệu cộng hưởng từ hạt nhân hợp chất TDH 160 78 DANH SÁCH HÌNH Hình 1.1: Cây tiểu sim ……………………………………………… 18 H×nh 1.2 ảnh vối 22 Hình 1.3 ảnh nụ hoa c©y vèi 23 Hình 3.1: Phổ 1H-NMR Hợp chất TDH 136 45 Hình 3.2: Phổ 1H-NMR Hợp chất TDH 136 46 Hình 3.3: Phổ C13 – NMR hợp chất TDH 136 48 Hình 3.4: Phổ C13 – NMR hợp chất TDH 136 .49 Hình 3.5: Phổ giản C13 – NMR hợp chất TDH 136 ….….…………… 50 Hình 3.6: Phổ giản C13 – NMR hợp chất TDH 136 ….……………… 51 Hình 3.7: Phổ HNBC hợp chất TDH 136 …………….………………….53 Hình 3.8: Phổ HNBC hợp chất TDH 136 …………….………………….54 Hình 3.9: Phổ HNBC hợp chất TDH 136 …………….………………….55 Hình 3.10: Phổ HNBC hợp chất TDH 136 ………….………………….56 Hình 3.11: Phổ HNBC hợp chất TDH 136 …………….……………… 57 Hình 3.12: Phổ HSQC hợp chất TDH 136 ………………………………58 Hình 3.13: Phổ HSQC hợp chất TDH 136 .59 Hình 3.14 : Phổ 1H-NMR Hợp chất TDH 160 .63 Hình 3.15 : Phổ 1H-NMR Hợp chất TDH 160 64 Hình 3.16 : Phổ C13 – NMR hợp chất TDH 160 .66 Hình 3.17 : Phổ C13 – NMR hợp chất TDH 160 67 Hình 3.18 : Phổ giản C13 – NMR hợp chất TDH 160 68 Hình 3.19 : Phổ giản C13 – NMR hợp chất TDH 160 69 Hình 3.20 : Phổ HSQC hợp chất TDH 160 72 Hình 3.21 : Phổ HSQC hợp chất TDH 160 73 Hình 3.22 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 74 Hình 3.23 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 75 Hình 3.24 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 76 Hình 3.25 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 77 DANH SÁCH SƠ ĐỒ Sơ đồ tách hợp chất từ Nụ Hoa vối ……………………………4 Mục lục LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT DANH SÁCH BẢNG DANH SÁCH HÌNH DANH SÁCH SƠ ĐỒ Mục lục LỜI MỞ ĐÂU li chọn đề tài 2 NhiƯm vơ nghiªn cøu 3 Đối t-ợng nghiên cứu Bố cục luận văn ChƯƠNG 1: TæNG quan 1.1 Đặc điểm thực vật học hóa học họ Sim 1.1.1 Đặc điểm thực vật học 1.1.2 Đặc điểm thành phần hoá học 1.2 Giíi thiƯu mét sè c©y thc hä Sim 1.2.1 C©y gioi (Eugenia jambos L.) 1.2.2 Cây đinh hương (Syzygium aromaticum (L.) Merr Et Perry) .12 1.2.3 C©y sim ( Rhodomyrtus tomentosa) 17 1.3 Đặc điểm thực vật học hóa học vèi 22 1.3.1 Tªn gäi 23 1.3.2 Ph©n bè 23 1.3.3 Mô tả thực vật 23 3.4 Thành phần hóa học vối .23 1.3.5 VỊ t¸c dơng d-ỵc lÝ: 36 CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM 39 2.1 Ph-ơng pháp lÊy mÉu 38 2.2 Ph-ơng pháp phân tích, tách phân lập chất 38 2.3 Ph-ơng pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 38 2.4 ThiÕt BÞ Vµ Hãa ChÊt 38 2.4.1 ThiÕt bÞ 39 2.4.2 Ho¸ chÊt 39 2.5 T¸ch xác ịnh cấu trúc hợp chất từ vỏ vèi 39 2.5.1 Tách hợp chất từ Nụ Hoa vối 39 2.5.2 Xác định cấu trúc hợp chất 42 CHNG 3: Kết thảo luận 43 3.1 X¸c định cấu trúc ca hợp chất TDH 136 (TDVV 39) 43 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất TDH 160 (TDVV 31) .61 KÕt luËn 77 Tµi liƯu tham kh¶o 78 LỜI MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Từ thời xa xưa, người biết sử dụng cỏ có tự nhiên làm nguồn dược liệu để chữa bệnh Tuy nhiên thời kì ng-ời chủ yếu sử dụng d-ới dạng thô Ngy nay, cựng vi s phỏt triển khoa học người ta bắt đầu bào chế loại thuốc mà hoạt chất hợp chất hóa học có phận cỏ như: thân, lá, hoa, quả, rễ… với mong muốn tìm hợp chất phục vụ cho đời sống người Cuèi thÕ kû XX đầu kỷ XXI hóa học hợp chất thiên nhiên bùng nổ cách mạnh mẽ Do đặc tính thân thiện an toàn, giới có nhiều phòng thí nghiệm tích cực tách chế, xác định thử hoạt tính chất tách đ-ợc từ cỏ với mong muốn tìm đ-ợc hợp chất đáp ứng đ-ợc nhu cầu ngày cao ng-ời lĩnh vực nh-: d-ợc học, thực phẩm, h-ơng liệu, mỹ phẩm Theo c quan Y Tế giới có tỉ (67% dân số) người dùng dược thảo toàn cầu Kỹ nghệ chế biến dược thảo thành loại thuốc mỹ phẩm phát triển với số doanh thu 12 tỷ đô la năm 1998 Riêng Hoa Kỳ, năm 1998, dân chúng tiêu tỷ đô la để mua lọai dược thảo Từ năm 1990 tới 1997, số người dùng dược thảo tăng 380%, số người khám Bác sĩ giảm, mà số người khám bệnh thầy thuốc khơng thống nhiều Số người dùng dươc thảo ngày nhiều Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, cận xích đạo, lượng mưa nhiều, độ ẩm cao nên có thảm thực vật phong phú Mặc dù nay, việc nghiên cứu hệ thực vật nước ta chưa tiến hành cách đầy đủ quy mô, theo tổng hợp từ nguồn tài liệu nhiều tác giả Việt Nam có 7.000 lồi thực vật học bậc cao Trong số có 2000 lồi thực vật nhân dân ta sử dụng làm nguồn lương thực, thực phẩm, lấy gỗ, tinh dầu, thuốc chữa bệnh… Các nhà nghiên cứu tổng hợp nhiều hợp chất có tác dụng chữa bệnh, song hợp chất có số hạn chế định, gây phản ứng phụ không mong muốn Hình 3.19: Phổ giản 13C-NMR hợp chất TDH 160 68 phổ 13C – NMR hợp chất TDH 160 có tín hiệu cộng hưởng hợp chất TDH 160 có nguyên tử C Các nguyên tử C2 , C4 , C5 dị vịng oxazole có độ chuyển dịch hóa học là: C2 :  = 145,39 ppm C4 :  = 141,88 ppm C5 :  = 145,88 ppm Nguyên tử C1’ gốc đường glucopyzanoside có độ chuyển dịch hóa học : C1’ :  = 104,82 ppm Nguyên tử C6’ gốc đường có độ chuyển dịch hóa học : C6’ :  = 62,37 ppm Các nguyên tử C2’ , C3’ , C4’ , C5’ gốc đường có độ chuyển dịch hóa học: C2 ‘:  = 74,48 ppm C3’:  = 78,32 ppm C4’ :  = 71,18 ppm C5’ :  = 77,67 ppm 69 70 Hình 3.20 : Phổ HSQC hợp chất TDH 160 71 Hình 3.21: Phổ HSQC hợp chất TDH 160 72 Hình 3.22: Phổ HMBC hợp chất TDH 160 73 Hình 3.23 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 74 Hình 3.24 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 75 Hình 3.25 : Phổ HMBC hợp chất TDH 160 76 Từ số liệu phổ 1H NMR 13C – NMR hợp chất TDH 160 so sánh với liệu phổ máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân xác định cấu tạo hợp chất B là: 4-Hiđroxyoxazole – – O -  - D – glucopyranoside Công thức cấu tạo: Bảng số hiệu cộng hưởng từ hạt nhân hợp chất TDH 160 thể bảng sau : TT Nhóm 13 C-NMR H-NMR HMBC 8,62 (1H; s) 4; CH 145,39 C 141,88 CH 145,88 8,47 (1H; s) 2; 1’ CH 104,82 4,69 (1H; d; j=7,5) 4; 2’; 3’ 2’ CH 74,48 3,45 (tín hiệu bị che lấp) 1’; 4’ 3’ CH 78,32 3,46 (tín hiệu bị che lấp) 1’; 4’; 5’ 4’ CH 71,18 3,39 (tín hiệu bị che lấp) 2’; 6’ 5’ CH 77,67 3,46 (tín hiệu bị che lấp) 4’; 6’ 6’ CH2 62,37 Ha: 3,94 (dd; j1=2,0; j2=12,0) 5’; 4’ Ha: 3,73 (dd; j1=5,5; j2=12,0) 5’; 4’ Bảng 3.2 : Số hiệu cộng hưởng từ hạt nhân hợp chất TDH 160 KÕt luËn 77 1.Từ cao etyl axetat Nụ Hoa vối, phương pháp tách cột silicagel, hệ dung môi rửa giải etyl axetat: methanol với tăng dần độ phân cực tách Hợp chất TDH 136 Hợp chất TDH 160 Bằng phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H – NMR, 13C – NMR so sánh với phổ chuẩn xác định cấu trúc Hợp chất TDH 136 là: Mangiferin Và hợp chất TDH 160 là: 4-hydroxyoxazole-4-O-  -D-glucopyranoside Cơng thức hóa học Hợp chất TDH 136 Công thức cấu tạo Hợp chất TDH 160 TÀI LIỆU THAM KHẢO Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam (2005), Viện Dược liệu 78 Nguyễn Xuân Dũng, Đào Hữu Vinh cộng (1985), phương pháp sắc ký, NXB Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Xuân Dũng, Hoàng Văn Lựu, Tạ Thị Khôi and Piet A Leclercq (1984), "GC and GC/MS Analysis of the leaf oil of cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry", Journal of Essential Oil Reseach, 6, 661-662 Nguyễn Xn Dũng, Trần Đình Thắng, Hồng Văn Lựu,"Nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu hoa sim ", Tạp chí dược liệu, số -, tập 4, Tr 108 - 109 Lê Thị Anh Đào, Nguyễn Xuân Dũng, Hồng Văn Lựu (1997), "Nghiên cứu thành phần hóa học vối Nghệ An", Tạp chí hóa hóa học, T 35, số 3, Tr 47 - 51 Nguyễn Văn Đậu, Nguyễn thị Thuận, Đỗ Thị Thanh, "Phân lập số hợp chất từ vối (2007)", Tuyển tập cơng trình hội nghị khoa học cơng nghệ hóa học hữu tồn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 311 - 315 Phan Minh Giang, Trần Thị Hà, Nguyễn Hồng Anh, Phan Tống Sơn (2007), "Nghiên cứu hóa thực vật sim (Rhodomyrtus tomentosa (Ait) Hassk Myrtaceae", Tuyển tập cơng trình hội nghị khoa học cơng nghệ hóa học hữu tồn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 340 - 345 Nguyễn Quang Huy, Phan Tuấn Nghĩa, Ngô Văn Quang, Phan Văn Kiên (2007), "Axit asiatic phân lập từ sắn thuyền (Syzygium resinosum) có tác dụng lên vi khuẩn Streptoccus mutans", Tạp chí Dược học số Văn Ngọc Hướng, Nguyễn Xuân Sinh (2003), "Isolasion and Identification of two triterpenoids from the leaves of Syzygium resinosum Gagnep" 8th Eurasia comference on chemical sciences, Ha Noi, october 21 - 24, p.p.355 10 Đỗ Tất Lợi (2005), thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học 11 Hồng văn Lựu (1996), Nghiên cứu thành phần hóa học số thuộc họ Sim (Myrtaceae) Nghệ An, Luận án Phó tiến sĩ khoa học Hóa học - ĐHQGHN, Trường ĐHSP Hà Nội 79 12 Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Xuân Dũng, Lê Thị Anh Đào (1994), "Đặc trưng hóa học tinh dầu hoa vối (Cleistocalyx operculatus Roxb Merr et Perry) Việt Nam", Thông báo khoa học, Đại học sư phạm Hà Nội I, (4), 32 - 34 13 Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Quang Tuệ (2004), "Thành phần hóa học gioi", Tạp chí phân tích hóa, lý sinh học, Tập 9, số 1, tr 20 - 23 14 Nguyễn Đức Minh (1975), Tính kháng khuẩn thuốc Việt Nam, NXB Y học 15 Nguyễn Duy Như (2008), "Trị tiêu chảy ổi", Tạp chí Khoa học phổ thông, số 87, tr 14 - 16 16 Nguyễn Văn Thanh, Hồng Văn Lựu, Chu Đình Kính, Phạm Thị Thanh Mỹ (2008), "Xác định cấu trúc số hợp chất từ rễ sắn thuyền (Syzygium resinosum Gagnep Merr et Perry)", Tạp chí Hố học T46, 5A 17 Nguyễn Văn Thanh, Hồng Văn Lựu, Chu Đình Kính (2009), "Nghiên cứu thành phần cấu trúc hoá học số hợp chất tách từ rễ vối (Cleistocalyx operculatus Roxb Merr et Perry)", Tạp chí Hố học T47, 4A 18 Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Văn Thanh , Chu Đình Kính: Tách xác định cấu trúc số hợp chất tritecpenoit, Flavonoit từ rễ vối(Tạp chí khoa học công nghệ 49(3A) (2011) 118-124 19 Trịnh Thị Thuỷ, Trần Văn Sung (1993 - 1994), "Kết nghiên cứu hóa học số thuốc Việt Nam" Tuyển tập báo cáo Khoa học - Viện Hóa học, 213 20 Trịnh Thị Minh, Nguyễn Thị Hoàng Anh, Vũ Đào Thắng, Trần Văn Sung: “Các kết thành phần hố học chóc máu (salaca chinensis) Tạp chí hố học, T47(4A) Tr.192-196 2009 21 C l ye, J W Liu, D z Wei, Y H Lu, F Quian Cancer chemother Pharmacol 2005, 55(5), 447 - 452 22 Corie Djadjo, Michel Delmee, Joelle Quetin - Leclercq, "Antimicrobial activity of bark extract of Syzygium jambor (L) Alston (Myrtaceae)", Journal of Ethnopharmacology 71, 108 - 109 80 23 Dachriyanus, Salni, Meloyn V Sargent, Brian W Skelton, Iwang Soediro, Mumu Sutisna, Allan H White and Elin Yulinal (2002), "Rhodomyrtone, an antibiotic from Rhodomyrtus tomentosa", Austr J Chem, 55, 229 - 232 24 Karla Slowing, Monica Sollhuber, Emilia Carretero and Angel Villor (1994), "Flavonoid glycosid from Eugenia jambor", Phytochemistry, Vol 37 No 1, pp 255 258 25 Ebrhard Breitmaier (2002), "Structure elucidation by NMR in Organic chemistry", John Wiley & son, ltd, p, 1-65 26 Myint Myint Khine (2006), "Isolation and Characterization of phytoconstituents from Myanmar Medicinal Plants", Dissertation, p, 29-33 27 L, John Goad, Toshihiro Akihisa (1997), "Analysis of Sterols", Blackie Academic & Professional 28 Zhang Fengxian, Liu Meifang and Lu Renrong (1990), "Chemical constituents from the bud of Cleistocalyx operculatus" Zhwu xuebao 32 (6), 469 29 Wai Hean Hui and Man Moon Li (1997), "Two new tritecpenoids from Rhodomyrtus tomentosa", Phytochemitry, Vol 15, pp 1741 - 1743 30 Byung Sun Min, Cao Van Thu, Nguyen Tien Dat, Nguyen Hai Dang, Han – Han Su and Tran Manh Hung Antioxidative Flavonoids From Cleistocalyx operculatus Buds Chem Pharm Bull 56(12) 1725 - 1728 (2008) 31 Chemical constituent of clove (Syzygium aromaticum Fam Myrtaceae) and their antioxidant activity, Rev Latinoamer Quim 35/3 (2007) 32 Phytochemical analysis of Bioactive constituents From edible Myrtaceae Fruif By Kurt Allerslev Reynertson A dissertation Submitted to the Graduate Faculty in Biolog in Partial Fulfillment For the degree of doctor of Philosophy, the city university of New York 33 Kuiate J.R Mouokeu S Wabo H.K TaneP.(2007) Antidermatophytic triterpenoids From Syzygium Jambos (L.) Alston ( Myrtaceae) phytother Res 2007 Feb: 21(2) : 14952 81 34 Trong Tuan Dao, Bui Thanh Tung, Phi Hung Nguyen, Phuong Thien Thuong, Sung Sik Yoo Eun Hee Kim, Sang Kyum Kim and Won Keun Oh C-Methylated flavonoids from Cleistocalyx Operculatus and Their Inhibitory Efeds on Novel In Fluenza A (H1N10) Neuraminidase J.Nat.Prod, 2010,73 (10),PP 1636-1642 35 Carbohydrate Research volume 341, issue 1, 16 january 2006 pages 160 - 163 36 Buying Sun Min, To Dao Cuong, Joo-Sang Lee, Mi Hee Woo and Tran Manh Hung (2010) Flavonoids From Cleitocalyx operculatus buds and Cytotocyx activity Bull Korean Chem Soc 31(8) 2392-2394 82 ... === === BùI DOÃN TÂM TáCH Và XáC ĐịNH CấU TRúC MộT Số HợP CHấT Từ Nụ Và HOA C¢Y VèI (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) ë NGHƯ AN Chuyên ngành: hóa hữu MÃ số: 60.44.27 LUậN V¡N TH¹C... hợp chất từ Nụ Hoa vối 39 2.5.2 X¸c định cấu trúc hợp chất 42 CHNG 3: Kết th¶o luËn 43 3.1 Xác định cấu trúc ca hợp chất TDH 136 (TDVV 39) 43 3.2 Xác định cấu trúc hợp. .. Hoá chất ã Axit sunfuric ã Axeton ã Butanol ã Clorofom ã Các dung môi đo phổ ã Etylaxetat • Metanol • n-Hexan • N-íc cÊt • Ièt • Silicagel 2.5 Tách Và Xác Định Cấu Trúc Hợp Chất Từ nụ hoa CÂY VốI