Nghiên cứu đa hình gen mthfr ở 2 vị trí 677 và 1298 trên phụ nữ mất thai tái diễn

T1 BỘ GIẢO DỤC VÀ DAO TẠO BỘ Y TẺ TRƯỜNG ĐẠI HỌC V HÀ NỘI DOÃN NGUYÊN TRÀ MY NGHIÊN CỨU ĐA HÌNH GEN MTHFR Ờ2 VỊ TRÍ 677 VÀ 1298 TRÊN PHỤ NỮ MÁT THAI TÁI DI ẺN Ngành đào lạo: Bác sfđa khoa Mâ ngành; D720101 KHỎA LUÂN TÓT NGHI ẸP BẢC SỲ Y KI1OA KHÓA 2015-2021 Nguời hirơng dân khoa hục: TS.BS ĐỒN THI KIM PIIƯỘNO HÀ NỘI-2021 U «s> ■> LỜI CAM ơx Trai qua nám hục lập rèn luyện núi inning Đại Hục Y Hà Nội em xin chân thánh cam ơn Đãng ủy Ban giâm hiẽu nhả trường thầy giáo, có giáo Trường IXti học Y Ha Nội đà tận tinh, taxn huyết truyền day cho em kiến thức chuyên môn quý báu long nhi# huyết va tinh yêu nghe Em rât may mÁn vâ tự hàù thực biện Kliõaluân tẨt nghiộp tội Bộ mon Y sinh hục - Di truyền Thời gian tham gia nghiên cưu Bộ mòn đà mò cho em gỏc nliin thú vị vả bố ích vè chuyên ngành Di truyền với nhcu kỳ thuật sinh học phan tư hicn đai Em xin gưi lòi cam ơn chân thành nhát tới TS.BS Đồn Thị Kim Phượng - Phơ Trương Bộ mõn Y sinh học - Di truyền, lả người dà trực tiếp hướng đản tận tinh chi dạy giưp dở động viên em sat qua trinh lâm nghiên cứu đé em hồn thiện khóa luận tốt nghiộp Em xin chán thánh cam ơn cúc thảy, cỏ giáo, anh ch| kỳ thuật viên va anh chi bác SV nội trú Bộ môn dà nhiệt lính giúp đờ tạo diều kiỳn thuận lụi cho em qua ttinh thực va hoàn nghiên cứu Con xin bày to lòng biết ượt qua khó khản, lả chỏ dựa vừng chằc nhât cho suốt chàng dường vừa qua Xin cam ơn bạn bè dà giúp đờ hồ trự tỏi rai nhiều sáu nẳm hực củng trinh hồn thành khóa luẠn Hà Nội 26 thang nỉm 2021 Đồn Ngun Trá My LỊI CAM ĐOAN TƠI lả Đồn Nguyen Trá My sinh viên Y6 chun ngành Bác sf đu khoa, xin cam đoan nhùng điều sau: Dày khóa luận tơi ti «“ *4: MỤC LỤC DẠT ÁN DÊ _ Chtnmg I: TÒNG QUAN TAI LIỆU _ 1.1 Tống quan v mat thai tai din ã ããããããããããããããããããããããããộ ãããããôã ãããããããããI ã • l-l.l, Dinh nghía 1.12 Dịch tề hộc •• *• MitMiMiiiuiiaiiii titiiiHMi mill liHHi ÌHIIIIHIIIMI itaMitiMi •• •• • • 1.13 Nguyên nhân vả cấc yểu tổ nguy 1*1 • *113tcu t I * * ããã.ãããããã.ãã ããããô ãã 1.2 Gen MTHFR (Meths lenetetrahydxofolate Reductase) 12 1.2.1 Tống quan gen MTHFR 1.22, Vị tri vả cấu true cua gen MTHFR .- 13 123 Cấu tnic vã chức nâng protein MTIIFR _ 13 1.2.4 Da hình gen MTIIFR „ « 14 1.2.5 Tinh hình nghiên củu mồi liên quan giừa da hình gcn M THI R màĩ lỉtai lai diên •• 1.3 Một sị kỹ thuật phat hiên đa hình gcn M nIFR •• L.3.1 I^y thuạt • • lổ • • •• 17 •• 1.32 Kỳ thuật real time PCR 18 1.33 Kỳ thuật phân lích đoạn DbỈA 19 1.3.4 Kỹ thuật giai trinh tự gen Sanger Chuvag 2: DÓI TƯỢNG VÀ PHI ONG PHÁP NGHIẾN cil • • •• 20 22 2.1 Đồi lượng nghiên cửu •■••••••••••••••••••••••••••••••••••••••a ••*(••••• ••••••••••< • • 22 •••• ** 2.1.1 T1CU chuan lựa chọn.•••* 22 2.12 Tiêu chuàn loựi trừ _ 22 2.2 Thòi gian địa điểm nghiên cưu TWM*M«K> *4: 2.3 Phương pháp nghiên cửu 2.3.1 Thiết kể nghiên cửu 2.32 Cừ mầu nghiên cứu - 2.4 Bien số s-ả chi số nghiên cửu 2.5 Quy trinh nghiên cữu 2.6 Kỳ thuật real tune PCR dê xảc định đa hỉnh 2.6.1 Lằy mẫu tách chiẻt DNA 2.62 Phan ứng real time PCR _ 2.63 Phàn lích kết „ 2.7 Xử lý sổ liệu •••••• •••••••••••••••••••••••••••• •••••••••••••••••• 2.8 Dạo đức nghiên cửu 29 Chtnmg3: KẾT QVÃ NGHIÊN cút _ 30 3.1 Dặc diêm cua dối tượng nghiên cứu 3.2 Xảc định đa hỉnh kicu genMTHFR C677T vã AI298C 30 3.2.1 Ktft qua lỏch chièt DNA 30 3.22 Hình anh tin luêu chạy may real time PCR - 31 3.23 Phản bố kiêu gen vá tằn sô alen cúa đa hình MTHFR C677T vã A129SC cùa đổi tượng nglũên cứu .» 33 3.3 Mồi liên quan giừa ki cu gen MTHFR C677T A1298C vởi mat thai tải diền cùa đổi tượng nghiên cửu - 36 Chưtmg 4: BÀN iMiMUIMIUiMM.MIN* 39 4.1 Dặc diêm đỗi lượng nghiên cưu 39 4.2 Ty lộ locu gen MTHFR C677T vã A1298C bâng kỹ thuật real time PCR 39 c da hình 6771* 39 4.22 đa hình A1298C 41 4.23 phổi hợp da hình gen MTHFR C677T vỏ AI298C 42 4.3 MÃ lỉẽn quan giừa kiỏu gen MTHFR C677T A1298C với thai tái dicn 43 4.4 Đi êm mạnh vả diêm yéư nghiên cứu 45 FT V k"Tk X 4Ó _ 48 TÀI LIỆU THAAI KH AO PHỤLực TWM*M«K> *4: DANH MỤC CÁC CHÙ* VI ÉT TÁT Tiếng Anh ASRM American Tlcng Việt for Hiệp hội Y học sinh san Hoa Society' Reproductive Medicine Kỳ DNA Deoxyribonucleic Acid đNTP Deo.xynucleoside uipbosphate ddNTP Dideoxynucleoside triphosphate HLA Human leukocyte antigen MTHFR Methyl enetetr ahydrofolate Khảng nguyên bạch càu người Reductase NIPS Non Invasive Prenatal Sàng lọc irc sinh khơng xâm Screening lan PCR Polymerase Chain Reaction Phan ứng chuối polymerase STR Short tandem repent Trinh tự lập lại ngàn TNF Tumor necrosis factor u tơ hoụi tứ u TWM*M«K> *4: DANH MỤC BÀNG Báng 2.1 Biến sổ chi số nghiên cửu 24 Bang 22 Thanh phần ưong mựt nủu phun ứng PCR 27 Bang 23 Chu trinh luân nhiệt cưa phán ứng real time PCR 27 Bang 2.4 Phân tích kềt qua teal - time PCR 28 Đang 3.1 Đặc diêm chung cua đói tượng nghiên ciru _ 30 Bang Nồng dộ DNA vá dờ tinh trung binh - 31 Bang 3.3 Phản bỗ kiêu gen vã tần số alen đa hình C677T nhỏm mat thai tái diễn nhóm chứng 33 Bang 3.4 Phân bỗ kiêu gen tần số alen cua đa hình AI298C nhỏm mẩT thai tai diẻn va nhom chngô**ô tr'tllf ! tlltvn ã*ãã ôã***ã V1WV ãã*ằằãããããããããằằãằ*ãã