Tổng hợp dẫn xuất chitosan pluronic và khảo sát ảnh hưởng của dung dịch đệm lên hiệu quả dẫn truyền paclitaxel và quercetin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Huỳnh Hoàng Hạnh TỔNG HỢP DẪN XUẤT CHITOSAN-PLURONIC VÀ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG DỊCH ĐỆM LÊN HIỆU QUẢ DẪN TRUYỀN PACLITAXEL VÀ QUERCETIN LUẬN VĂN THẠC SĨ: HĨA PHÂN TÍCH Hồ Chí Minh – 03/2021 VÀ ĐÀO TẠO BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Huỳnh Hoàng Hạnh TỔNG HỢP DẪN XUẤT CHITOSAN-PLURONIC VÀ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG DỊCH ĐỆM LÊN HIỆU QUẢ DẪN TRUYỀN PACLITAXEL VÀ QUERCETIN Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 44 01 18 LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA PHÂN TÍCH NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : Người hướng dẫn : TS Lê Hoàng Sinh Người hướng dẫn : PGS TS Trần Ngọc Quyển Hồ Chí Minh – 03/2021 LỜI CAM ĐOAN Cơng trình thực phịng Hóa Dược – Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng – Viện Hàn Lâm Khoa Học Công Nghệ Việt Nam thành phố Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng hướng dẫn khoa học TS Lê Hoàng Sinh PGS.TS Trần Ngọc Quyển Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa công bố hình thức trước TP Hồ Chí Minh, tháng 02 năm 2021 Huỳnh Hồng Hạnh i LỜI CÁM ƠN Trong thời gian học tập nghiên cứu với nỗ lực thân với giúp đỡ tất người để hoàn thành luận văn Tơi xin chân thành bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến: Các Thầy Cô Bộ Mơn Hóa – Khoa Hóa học – Học Viện Khoa học Công nghệ - Viên Hàn Lâm Khoa Học Công nghệ Việt Nam truyền đạt cho nhiều kiến thức bổ ích q trình học tập TS Lê Hoàng Sinh – Đại học Duy Tân PGS.TS Trần Ngọc Quyển – Viện Khoa Học Vật Liệu Ứng Dụng – Viện Khoa Học Công nghệ Việt Nam, người định hướng nghiên cứu tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình thực đề tài Bạn Đặng Thị Lệ Hằng (Nghiên cứu viên), bạn Nguyễn Đình Trung (Nghiên cứu viên) nhóm nghiên cứu phịng Vật Liệu Hóa Dược – Viện Khoa Học Vật Liệu Ứng Dụng – Viện Hàn Lâm Khoa Học Cơng nghệ Việt Nam nhiệt tình hướng dẫn, tham gia nghiên cứu tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành đề tài Sau xin cám ơn đến gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên giúp đỡ an tâm học tập hoàn thành tốt đề tài nghiên cứu ii Danh mục ký hiệu chữ viết tắt ACN Acet CP Chit DI Nướ DLS Dyn Et Etha F127 Pluro HPLC NMR High Chro Nucl Spec NPC Nitro PBS Phos PEO Poly PPO Poly PTX Pacl QU Quer TEM THF Tran Micr Tetra iii Danh mục bảng Bảng 2.1 Chương trình dung mơi chạy máy sắc ký HPLC 25 Bảng 2.2 Mẫu dung dịch chuẩn để khảo sát tính tuyến tính PTX 27 Bảng 2.3 Kết khảo sát độ tuyến tính QU 33 Bảng 3.1 Tính tương thích hệ thống HPLC mẫu PTX …………41 Bảng 3.3 Kết khảo sát độ tuyến tính 43 Bảng 3.2 Kết giới hạn phát giới hạn định lượng 44 Bảng 3.4 Kết khảo sát độ 45 Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại 46 iv Danh mục hình vẽ Hình 1.1 Tương tác ion Hình 1.2 Tương tác kỵ nước Hình 1.3 Quá trình nhả chậm thuốc theo thời gian nanogel mang thuốc Hình 1.4 Số người tử vong ung thư năm 2018 10 Hình 1.5 Pluronic từ copolyme khối PEO-PPO-PEO 11 Hình 1.6 Cấu trúc chitosan (hay Poliglusam; Deacetylchitin; Poly-(D) glucosamine) 12 Hình 1.7 Cấu tạo phân tử Paclitaxel .16 Hình 1.8 Cấu tạo phân tử Quercetin 17 Hình 2.1 Phương trình phản ứng tổng hợp NPC-F127-NPC……………….21 Hình 2.2 Phương trình phản ứng tổng hợp NPC-F127-OH……………… 22 Hình 2.3 Phương trình phản ứng tổng hợp copolymer chitosan-pluronic F127 (CP-F127)…………………………………………………………… 23 Hình 2.4 Đồ thị biểu diễn tỉ lệ nồng độ QU độ hấp thụ……………33 Hình 3.1 Cơng thức cấu tạo NPC-F127-NPC……………………………….35 Hình 3.2 Phổ IR NPC-F127-NPC……………………………………… 35 Hình 3.3 Phổ H-NMR NPC-F127-NPC……………………………… 36 Hình 3.4 Cơng thức cấu tạo NPC-F127-Ami……………………………… 37 Hình 3.5 Phổ 1H-NMR NPC-F127-ami……………………………… 38 Hình 3.6 Cơng thức cấu tạo Chitosan- Pluronic F127………………………39 Hình 3.7 Phổ IR Chitosan-Pluronic F127……………………………… 39 Hình 3.8 Phổ H-NMR Chitosan-Pluronic F127……………………… 40 Hình 3.9 Sắc ký đồ ghép thể độ đặc hiệu mẫu: mẫu trắng, mẫu chuẩn mẫu thử…………………………………………………………….42 v Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích peak tương ứng chất chuẩn PTX……………………………………… 43 Hình 3.11 Sắc ký đồ ghép mẫu lập đường chuẩn………………… 44 Hình 3.12 Hình chụp TEM đo DLS hệ copolymer sau nang hóa thuốc PTX QU…………………………………………………………… 47 Hình 3.13 Kết zeta hệ copolymer trước (A) sau (B) mang thuốc PTX QU…………………………………………………………… 47 Hình 3.14 Biểu đồ tốc độ giải phóng thuốc PTX từ hệ copolymer CP (1:15) PBS (pH=7,4)………………………………………………………… 50 Hình 3.15 Biểu đồ tốc độ giải phóng thuốc QU từ hệ copolymer CP (1:15) PBS (pH=7,4)………………………………………………………… 51 vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CÁM ƠN ii Danh mục ký hiệu chữ viết tắt iii Danh mục bảng iv Danh mục hình vẽ .v MỤC LỤC vii TÓM TẮT .1 ABSTRACT MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ NANOGEL VÀ UNG THƯ 1.1.1 Tổng quan nanogel 1.1.2 Tổng quan ung thư 1.2 TỔNG QUAN VỀ PLURONIC VÀ CHITOSAN .10 1.2.1 Pluronic .10 1.2.2 Chitosan 12 1.3 XÁC NHẬN GIÁ TRỊ SỬ DỤNG CỦA PHƯƠNG PHÁP 13 1.3.1 Tính tương thích hệ thống 14 1.3.2 Khoảng tuyến tính .14 1.3.3 Độ .14 1.3.4 Độ chụm 14 1.3.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng 15 1.4 TỔNG QUAN VỀ HOẠT CHẤT PACLITAXEL VÀ QUERCETIN 16 1.4.1 Hoạt chất paclitaxel .16 vii Phụ luc 3: Kết dựng đường chuẩn Paclitaxel dung môi ACN:H2O (9:1) Phụ lục 4: Kết khảo sát độ Phụ lục 5: Kết khảo sát độ lặp lại Phụ lục 6: Đường chuẩn QU EtOH : H2O (1:1) Phụ lục 7: Tỷ lệ phần trăm phóng thích PTX theo thời gian Thời gian PTX (h) Phụ lục 8: Tỷ lệ phần trăm phóng thích QU theo thời gian Thời gian (h) 12 QU ... HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Huỳnh Hoàng Hạnh TỔNG HỢP DẪN XUẤT CHITOSAN- PLURONIC VÀ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG DỊCH ĐỆM LÊN HIỆU QUẢ DẪN TRUYỀN PACLITAXEL. .. sĩ ? ?Tổng hợp dẫn xuất chitosan- pluronic khảo sát ảnh hưởng dung dịch đệm lên hiệu dẫn truyền paclitaxel quercetin? ?? CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ NANOGEL VÀ UNG THƯ 1.1.1 Tổng quan nanogel... 10 mL dung mơi Ethanol Nhỏ từ từ mL dung môi Ethanol vào dung dịch CP khuấy từ mẫu phân tán hoàn toàn, tạo thành dung dịch suốt Nhỏ từ từ dung dịch QU vào dung dịch CP Đánh siêu âm hỗn hợp QU