Tách và xác định cấu trúc một số hợp chất từ rễ cây sài hồ nam (pluchea pteropoda hemsl) ở thành phố vinh nghệ an

LờI CảM ƠN Để hoàn thành đợc luận văn này tôi xin đợc gửi lời cảm ơn sâu sắc tới: PGS.TS.NGƯT. Lê Văn Hạc ngời đã trực tiếp giao đề tài và tận tình hớng dẫn, giúp đỡ cho tôi trong suốt quá trình làm luận văn. PGS.TS. Hoàng Văn Lựu, GVC. Lê Quý Bảo đã có những đóng góp ý kiến quý báu cho bản luận văn này. ThS . Nguyễn Thị Chung, ThS . Nguyễn Thị Hiền đã tận tình hớng dẫn, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình làm thực nghiệm. Nhân dịp này tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, ngời thân, các thầy giáo cô giáo khoa Hoá Học, trờng Đại Học Vinh và bạn bè đã quan tâm, động viên, giúp đỡ cho tôi hoàn thành tốt bản luận văn này. Vinh, tháng 5 năm 2006. Sinh Viên Lê Thị Dung 1 Bộ giáo dục và đào tạo Trờng đại học vinh Khoa hoá học -------------------- KHoá luận tốt nghiệp đại học TáCH Và XáC ĐịNH CấU TRúC một số hợp chất từ rễ cây sài hồ nam (pluchea pteropoda hemsl) ở thành phố vinh - nghệ an Ngời hớng dẫn : PGS.TS.lê văn hạc Ngời thực hiện : Lê Thị Dung Sinh viên Lớp : 42E - khoa Hoáhọc vinh05/2006 Mở đầu I. Lý do chọn đề tài. Các hợp chất thiên nhiên nói chung, các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học nói riêng đang ngày càng đóng vai trò quan trọng trong đời sống con ngời, thu hút sự quan tâm, chú ý của nhiều nhà khoa học trong và ngoài nớc vì nó cung cấp nguồn nguyên liệu phong phú cho công nghiệp, nông nghiệp, y học, mỹ phẩm Hệ thực vật Việt Nam rất phong phú và đa dạng. Hiện nay đã biết đợc có 10.386 loài thực vật bậc cao, dự đoán có thể tới 12.000 loài, trong đó cây làm thuốc có khoảng 600 loài. Từ xa xa cha ông ta đã sử dụng nguồn dợc liệu có sẵn trong tự nhiên tạo ra nhiều loại thuốc chữa bệnh trong dân gian [6]. Họ Cúc (Compositae) là họ thực vật lớn nhất, có tới 13.000 loài thuộc 900 chi, trong đó có hơn 100 loài dùng làm thuốc chữa bệnh. Ngoài ra, cây họ Cúc còn đợc dùng trong nông nghịêp, dợc phẩm, hơng liệu, mỹ phẩm Cây sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl) thuộc họ Cúc (Compositae). ở Việt Nam cây mọc ở vùng nớc lợ, nớc mặn nh ven biển miền Bắc, duyên hải miền Trung. Tại Nghệ An cây mọc phổ biến ở mép bờ đê chắn sóng, làm hàng rào[12] Trong Đông y, ngời ta dùng rễ cây sài hồ nam để chữa một số bệnh nh cảm sốt, nhức đầu, đau tức ngực, áp huyết cao, kinh nguyệt không đều, hoa mắt Ngoài ra nhân dân một số địa phơng còn dùng để ăn gỏi cá. Xuất phát từ tình hình thực tế nên chúng tôi chọn đề tài Tách và xác định cấu trúc một số hợp chất từ rễ cây sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl) ở Nghệ An nhằm góp phần bổ sung sự hiểu biết về thành phần hoá học của cây sài hồ nam. II. Nhiệm vụ nghiên cứu. 2 Trong luận văn này, chúng tôi có các nhiệm vụ: - Thu thập rễ cây sài hồ nam. - Ngâm rễ cây sài hồ nam trong dung môi chọn lọc rồi chng cất thu hồi dung môi, sau đó chiết phần cao đặc trong các dung môi thích hợp để thu đợc hỗn hợp các chất trong các dịch chiết tơng ứng. Phân lập các hợp chất từ dịch chiết rễ cây sài hồ nam và xác định cấu trúc của một số hợp chất thu đợc. III. Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu là dịch chiết từ rễ cây sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl) thuộc họ Cúc (Compositae) ở Nghệ An. 3 Chơng I Tổng quan I. Chi Pluchea Cass I.1. Đặc điểm thực vật Chi Pluchea Cass, trên thế giới có khoảng 80 loài mọc phổ biến ở vùng nhiệt và cận nhiệt đới thuộc châu á, Bắc và Nam Mỹ, châu Phi, châu úc. ở Việt Nam có 4 loài, gặp khá phổ biến là : Pluchea inđica Less (cây cúc tần), Pluchea pteropoda Hemsl (cây sài hồ nam), Pluchea eupatoroides Kurz (cây lức), Pluchea polygonata Gagnep (cây cúc bông). Cây thuộc chi này thờng dạng bụi thấp, hiếm dạng cỏ. Cụm hoa đầu nhỏ đơn độc hoặc xếp thành ngù, đỉnh tràng 2-3 răng màu vàng nhạt hoặc tím hồng, hữu thụ, giữa lá hoa lỡng tính dạng phễu và lép, đỉnh tràng 5 thuỳ. Đế hoa phẳng, trần. Quả bế 4-5 cạnh, mào lông ở đỉnh quả, một hàng sợi mảnh. Quả của hoa lép cũng có mào. Trên thế giới nhiều loài cây của chi này đợc dùng làm thuốc chữa bệnh trong dân gian, ngời da đỏ Mêhicô dùng nớc sắc của lá cây P.symphytifolia (Miller) Gillis để chữa đau bụng, ỉa chảy, ký sinh trùng đờng ruột. ở Brazin, cây P.quitoc dùng làm thuốc long đờm, trung tiện, tiêu hoá và tê thấp. ở ấn Độ, cây P.lanceolata làm thuốc giảm đau, hạ sốt, đầy bụng, chống viêm. ở Pakistan, ấn Độ, Thái Lan, Việt Nam dùng cây P.indica làm thuốc lợi tiểu, giảm đau, chữa loét hành tá tràng, chống viêm, bổ gan, kháng khuẩn, kháng nấm, trị giun, chữa rắn cắn [1] Hiện nay có khoảng 20 loại cây thuộc chi Pluchea Cass đã đợc nghiên cứu về thành phần hoá học, gồm: Pluchea arguta Boiss, Pluchea chingoyo, 4 Pluchea carolonesis (Jacp) G. Donl, Pluchea dioscoridis (L ) DC, Pluchea eupatoroides Kurz, Pluchea fastigirata Guiseb, Pluchea foetida DC (P.camphorata DC), Pluchea indica (L ) Less, Pluchea lanceolata (DC) CB clark, Pluchea odorata Cass, Pluchea polygonata (DC) Gagnep, Pluchea pteropoda Hemsl, Pluchea purpurescens, Pluchea quitoc (DC), Pluchea rosea, Pluchea sagittalis, Pluchea salicifolia, Pluchea sericia (Nutt) Caville, Pluchea suaveolens, Pluchea symphytifolia (Miller) Gillis. I.2. Thành phần hoá học chi Pluchea Cass. Rất nhiều công trình đã nghiên cứu về thành phần hoá học chi Pluchea Cass. Ngời ta đã phát hiện ra nhiều loại tinh dầu và nhiều lớp hợp chất khác nhau từ chi này. Các hợp chất đặc trng của chi này thờng gặp là: ankinyl thiophen, flavonoit, tritecpen, secsquitecpen, sterol, 5 a/ Hợp chất ankinyl thiophen Hiện nay đã phát hiện đợc 14 hợp chất loại này trong 6 loài cây: Pluchea odorata, Pluchea symphytifolia, Pluchea dioscoridis, Pluchea foetida, Pluchea suaveolens, Pluchea indica [14]. S C C C C C C R 2 R 1 b/ Hợp chất sterol Loại hợp chất này thờng gặp phổ biến trong cơ thể động vật, đặc biệt là động vật có xơng sống. Thời gian gần đây cũng tìm thấy ở một số loài cây thuộc chi Pluchea Cass [14]. +) -sitosterol trong Pluchea chingoyo, Pluchea arguta, Pluchea dioscoridis, Pluchea sericia, Pluchea pteropoda Hemsl. +) Stigmasterol trong Pluchea quitoc, Pluchea arguta, Pluchea chingoyo, Pluchea lanceolata, Pluchea dioscoridis, Pluchea pteropoda Hemsl. +) -sitosterol-3-O-D-glucozit trong Pluchea dioscoridis, Pluchea indica, Pluchea pteropoda Hemsl. c/ Hợp chất tritecpenoit Loại hợp chất này thờng có trong Pluchea symphytifolia, Pluchea pteropoda Hemsl, Pluchea lanceolata, thờng phát hiện ở dạng aglycol tự do hoặc este axetat, cha thấy ở dạng O-glucozit. Các hợp chất này thờng là dẫn xuất hiđrocacbon và hợp chất tritecpenoit pentaxyclic thờng quyết định tính chống viêm ở một số loài. Từ Pluchea lanceolata: ngời ta đã phân lập đợc 8 hợp chất tritecpen khác nhau [14]. Từ Pluchea symphytofilia: đã phân lập đợc 6 hợp chất thuộc loại axit caffeyl quinic [19]. 6 d/ Hîp chÊt flavonoit Thêng gÆp lo¹i flavon, flavonol, flavanon, flavanol vµ O-glucozit cña chóng [14]. O O O O OH flavon flavonol O O flavanon O O OH flavanol e/ Hîp chÊt Secsquitecpen C¸c lo¹i hîp chÊt secsquitecpen chñ yÕu thuéc lo¹i khung eudesman, ngoµi ra cßn mét sè kiÓu khung nh guaian, eremophilan, [3,3,3]-propellan edudesman guaian eremophilan [3,3,3]-propellan Ngêi ta còng ph¸t hiÖn 9 loµi cña chi nµy cã tinh dÇu - Pluchea quitoc chøa 0,47% tinh dÇu víi thµnh phÇn chÝnh lµ c¸c monotecpen: p - ximen, d - campho, d - camphen… [14]. 7 - Pluchea foetida [Gildemester E. Hofman. Fr (1961)] chứa 0,025% tinh dầu với thành phần chủ yếu: Xineol, eudesman, ankinyl thiophen [14]. - Pluchea inđica: chứa khoảng 0,04-0,08% với thành phần chính là - selinen, 7-H-silphinerfol-5-en, -copaen [14]. - Pluchea purpurescens, Pluchea salicifolia: thành phần tinh dầu chứa caryophylen, caryophylen oxit, -humulen, felina-4(15); 7(11) đien [14] - Pluchea fastiginata: thành phần chính là monotecpen nh -pinen (15- 19%), sabiben (7-10%). Secsquitecpen nh -caryophylen (15-19%), -cadinen (3-7%), -murolen (2-2,3%) [17]. - Pluchea dioscoridis: xác định đợc 36 hợp chất khác nhau, trong đó có các secsquitecpen và dẫn xuất chứa oxy của nó chiếm 65,86% [18]. Lê Văn Hạc, Nguyễn Thị Chung khi nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu cây cúc tần đã khẳng định thành phần chính của rễ cúc tần gồm 7-H- silphinerfol-5-en (27,9-34%), -copaen (13,8-15,5%) còn cành lá non chứa - selinen(35,6-44,7%), 7-H-silphinerfol-5-en (28,9-29,5%) [2]. I.3. Cây sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl). I.3.1. Thực vật học. ở Việt Nam, cây sài hồ nam còn có tên gọi khác là nam sài hồ, hải sài hồ, cây lức, cây lức lan. Tên khoa học: Pluchea pteropoda Hemsl. Thuộc họ Cúc: Compositae (hay Asteraceae). Cây sài hồ nam là cây thảo, sống lâu năm, thân mẫm và chắc, hình trụ, cao 30 40cm, có thể lên tới 70cm, càng lên cao càng nhiều nhánh. Lá mọc cách, hình thìa, phía cuống hẹp lại, có răng ca hai bên, lá dày, mặt trên xanh hơn mặt dới, dài khoảng 3 4cm, rộng 1,5 2,5cm, có 3 4 đôi đờng phụ. Cụm hoa hình đầu màu đỏ nhạt, hơi tím, gần nh không có cuống, hợp thành 2 8 4 ngù, lá bắc nhẵn, phía trong hẹp hơn. Quả bế có 10 cạnh, có lông mao, không rụng [6]. Trên thế giới cây mọc ở Trung Quốc, thờng ở các vùng Tứ Xuyên, Hà Bắc, Sơn Tây, Nội Mông. Tại Việt Nam cây mọc hoang dại ở vùng nớc lợ, nớc mặn và duyên hải miền Trung. Cây có thể đợc trồng làm hàng rào. ảnh của cây sài hồ nam I.3.2. Thành phần hoá học. Đoàn Thanh Tờng, lần đầu tiên đã phân lập đợc 8 hợp chất từ dịch chiết n-hexan của cây sài hồ nam ở Hải Hậu Nam Định và đã nhận diện đợc 7 hợp chất: -sitosterol (46), stimasterol (51), taraxast-20(30)-en-3-yl-axetat (52); 26, 27, 28-neohop-13(18)-en-3-yl-axetat (53), -sitosterolglucopyranozit (54), hop-17(21)-en-3-yl axetat (55) và hop-17(21)-en-20-ol-3-yl axetat (56). 9 Theo tác giả, hoạt tính chống viêm nhiễm quan sát thấy ở Pluchea pteropoda Hemsl (trị các vết loét có giòi ở trâu bò) có liên quan trực tiếp đến các hợp chất tritecpen pentacxyclic trong dịch chiết n-hexan, dó là hợp chất (52), (53), (55), (56) [14] . Các hợp chất tritecpen pentaxyclic cũng thờng thấy trong một số loài cây nh cây nhân sâm, cây cam thảo, cây rau má. (51) (52) AcO HO (53) AcO (55) AcO (56) AcO OH 10 . phát từ tình hình thực tế nên chúng tôi chọn đề tài Tách và xác định cấu trúc một số hợp chất từ rễ cây sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl) ở Nghệ An nhằm. chiết, tách chất từ rễ cây sài hồ nam. III.2.2. Phân tích cấu trúc của các hợp chất từ phổ khối và phổ cộng hởng từ hạt nhân. Xác định cấu trúc hợp chất