Đăng nhập
Hoặc tiếp tục với email
Nhớ mật khẩu
Đang tải... (xem toàn văn)
Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Cấu trúc
MỤC L
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
DANH MỤC BẢNG
TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
THESIS ABSTRACT
PHẦN 1. MỞ ĐẦU
1.1. GIỚI THIỆU
1.2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
1.2.1. Mục tiêu
1.2.2. Yêu cầu
1.3. Ý NGHĨA Khoa HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA LUẬN VĂN
1.3.1. Ý nghĩa khoa học
1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn
PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ ỚT
2.1.1. Nguồn gốc
2.1.2. Phân loại
2.1.3. Đặc điểm thực vật học
2.1.4. Tình hình sản xuất ớt trên thế giới
2.1.5. Tình hình sản xuất ớt tại Việt Nam
2.1.6. Lợi ích đối với sức khỏe
2.2. NHỮNG NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC VÀ THẾ GIỚI
2.2.1. Một số nghiên cứu về virus hại ớt
2.2.2. Một số begomovirus hại cà chua
2.2.3. Một số begomovirus hại ớt
2.3. ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA Begomovirus
2.3.1. Lịch sử phát hiện, phân bố và đa dạng của begomovirus
2.3.2. Đặc điểm hình thái
2.3.3. Cấu trúc genome của begomovirus
2.3.4. Cấu trúc của phân tử DNA-A
2.3.5. Cấu trúc của phân tử DNA-B
2.3.6. Đặc điểm của vùng IR
2.3.7. Phân loại các begomovirus
2.3.8. Tái sinh của begomovirus
2.3.9. Tương tác và tái tổ hợp của begomovirus
2.3.10. Triệu chứng bệnh do begomovirus
2.3.11. Môi giới truyền bệnh và sự lan truyền
2.3.12. Thiệt hại kinh tế do begomovirus gây ra
2.3.13. Phòng chống
2.4. KỸ THUẬT CHẨN ĐOÁN BẰNG PCR
2.5. KĨ THUẬT AGROINOCULATION
PHẦN 3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1. ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
3.2. THỜI GIAN NGHIÊN CỨU
3.3. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
3.3.1. Đối tượng nghiên cứu
3.3.2. Vật liệu nghiên cứu
3.3.2.1. Dòng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens mang cấu trúc xâm nhiễm của begomovirus đã xác định được
3.3.2.2. Cây thí nghiệm
3.3.2.3. Mồi PCR phát hiện begomovirus đã xác định được
3.3.2.4. Chất kháng sinh
3.3.2.5. Hóa chất, dung dịch đệm
3.3.2.6.Vi khuẩn sử dụng
3.3.2.7. Kit thương mại
3.3.2.8. Môi trường
3.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.5. PHƯƠNG PHÁP
3.5.1. Điều tra đồng ruộng
3.5.2. Thu mẫu
3.5.3. Chiết DNA tổng số
3.5.4. Phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction)
3.5.5. Điện di sản phẩm PCR
3.5.6. Chuẩn bị vi khuẩn A. tumefaciens khả biến (competent cells)
3.5.7. Chuẩn bị E.coli chủng X1 Blue khả biến
3.5.8. Biến nạp cấu trúc xâm nhiễm vào tế bào vi khuẩn E.coli khả biến bằng phương pháp xung điện
3.5.9. Lây nhiễm nhân tạo sử dụng kỹ thuật agroinoculation
3.5.10. Lây nhiễm nhân tạo dùng bọ phấn
3.5.10.1. Chuẩn bị cây nguồn bệnh
3.5.10.2. Chuẩn bị cây thí nghiệm
3.5.10.3 Lây nhiễm bằng bọ phấn
3.5.11. Kiểm tra các mẫu bằng phản ứng ELISA
3.5.11.1. Kỹ thuật DAS – ELISA (ELISA trực tiếp)
3.5.11.2. Kỹ thuật TAS-ELISA (Triple antibody sandwich -ELISA)
3.5.12. Giải trình tự
PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. ĐIỀU TRA BỆNH HẠI ỚT TẠI HÀ NỘI VÀ PHỤ CẬN
4.1.1. Triệu chứng bệnh virus trên ớt
4.1.2. Điều tra bệnh virus trên ớt ở một số địa điểm tại Hà Nội năm 2017
4.2. PHÁT HIỆN CÁC VIRUS TRÊN ỚT BẰNG PHƯƠNG PHÁP ELISA
4.2.1. Phát hiện Potyvirus trên ớt bằng DAS-ELISA
4.2.2. Phát hiện Tobamovirus trên ớt bằng DAS-ELISA
4.2.3. Phát hiện CMV (Cucumber mosaic virus) trên ớt bằng DAS-ELISA
4.2.4. Phát hiện Begomovirus trên ớt bằng TAS-ELISA
4.3. PHÁT HIỆN CÁC Begomovirus VÀ PEPYLCVNV BẲNG PCR
4.3.1. Phát hiện begomovirus bằng PCR dùng mồi chung
4.3.2. Phát hiện TYLCKaV bằng PCR dùng mồi đặc hiệu
4.3.3. Phát hiện PepYLCVNV bằng PCR dùng mồi đặc hiệu
4.4. ĐÁNH GIÁ TÍNH GÂY BỆNH CỦA PEPYLCVNV ĐƯỢC BẰNG LÂY NHIỀM NHÂN TẠO
4.4.1. Đánh giá tính gây bệnh của PepYLCVNV được bằng lây nhiềm nhân tạo dùng kĩ thuật Agroinoculation
4.4.1.1. Phục hồi các dòng vi khuẩn A. tumefaciens mang 2 cấu trúc xâm nhiễm của PepYLCVNV
4.4.1.2. Kết quả đánh giá tính gây bệnh của PepYLCVNV bằng phương pháp Agroinoculation
a. Tính gây bệnh của chỉ DNA-A của PepYLCVNV mẫu VNP1500 (lây nhiễm bằng agroinoculation)
b. Tính gây bệnh của cả DNA-A & DNA-B của PepYLCVNV mẫu VNP1500 (lây nhiễm bằng agroinoculation)
4.4.2. Đánh giá tính gây bệnh của PepYLCVNV bằng lây nhiễm nhân tạo dùng bọ phấn
4.5 ĐẶC TRƯNG PHÂN TỬ CỦA PEPYLCVNV mẪU VNP1500
4.5.1. Hoàn thiện giải trình tự mẫu PepYLCVNV (VNP1500)
4.5.1.1. Biến nạp cấu trúc xâm nhiễm vào tế bào vi khuẩn E.coli khả biến bằng phương pháp xung điện
4.5.1.2. Giải trình tự bổ sung mẫu PepYLCVNV VNP1500
4.5.1.3. Tổ chức bộ gen của mẫu PepYLCVNV (mẫu VNP1500)
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1. KẾT LUẬN
5.2. KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt:
Tiếng Anh:
Nội dung
Ngày đăng: 10/07/2021, 10:23
TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG
TÀI LIỆU LIÊN QUAN