Đang tải... (xem toàn văn)
Trong nghiên cứu này, thành phần hóa học tinh dầu từ lá loài Trâm vối lá đen (Cleistocalyx nigrans) và loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) đã được thực hiện. Hàm lượng tinh dầu đạt lần lượt là 0,10% và 0,21% tương ứng theo nguyên liệu tươi. Tinh dầu được phân tích bằng sắc ký khí (GC) và sắc ký khí khối phổ (GC/MS). Mời các bạn tham khảo!
KHOA HỌC CƠNG NGHỆ THÀNH PHẦN HĨA HỌC TINH DẦU TRONG LÁ LOÀI TRÂM VỐI LÁ ĐEN (Cleistocalyx nigrans (Gagnep.) Mer & Perry) VÀ LOÀI TRÂM GÂN MẠNG (Cleistocalyx retinervius Merr & Perry) THU HÁI Ở VƯỜN QUỐC GIA VŨ QUANG, TỈNH HÀ TĨNH Trần Hậu Khanh1, 2, Phạm Hồng Ban3, Trần Minh Hợi4 TÓM TẮT Trong nghiên cứu này, thành phần hóa học tinh dầu từ lồi Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) thực Hàm lượng tinh dầu đạt 0,10 0,21 tương ứng theo nguyên liệu tươi Tinh dầu phân tích sắc ký khí (GC) sắc ký khí khối phổ (GC/MS) Tổng cộng 42 hợp chất xác định, chiếm 89,72 tổng lượng tinh dầu loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) Thành phần tinh dầu n-Octanal (18,05 ), Decanal (17,29 ), 4ZDecanal (15,14 ) Đối với loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius), kết nghiên cứu xác định 43 hợp chất, chiếm 82,39 tổng lượng tinh dầu, Caryophyllene oxide (15,48 ), Myrcene (15,29 ), (E)-Caryophyllene (=β-Caryophyllene) (8,90 ), (E)-β-Ocimene (8,39 ) thành phần tinh dầu Đây dẫn liệu thành phần hóa học tinh dầu lồi thu hái Vườn Quốc gia Vũ Quang, tỉnh Hà Tĩnh, Việt Nam Từ khóa: Hà Tĩnh, họ Sim, Trâm gân mạng, Trâm vối đen, Vũ Quang ĐẶT VẤN ĐỀ Họ Sim (Myrtaceae Juss, 1789), theo Chen J & Craven, L A (2007) Thực vật chí Trung Quốc, tập 13 (2007) chia thành 13 chi, 122 loài [6] Theo Panell, J & Chantaranothai, P (2002) Thực vật chí Thái Lan năm 2002, họ Sim chia thành 14 chi, 204 loài, chủ yếu gỗ hay bụi, phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới cận nhiệt đới [18] Theo Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt Nam, tập II, năm 2003 thống kê họ Sim gồm có 14 chi 101 loài [11] Theo Nguyễn Tiến Bân (2003), họ Sim gồm có 15 chi với 107 lồi [4] Nhiều lồi họ Sim cho tinh dầu sử dụng làm thuốc [7], [14], [16] Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans (Gagnep.) Merr & Perry) loài đặc hữu Việt Nam, phân bố Biên Hòa, tỉnh Đồng Nai [4] Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius Merr & Perry) loài đặc hữu Việt Nam, phân bố Đà Nẵng [4] Cho đến chưa thấy có cơng bố thành phần hàm lượng tinh dầu lồi Bài báo trình bày kết nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) Trâm gân mạng (Cleistocalyx 1, Viện Sư phạm Tự nhiên, Trường Đại học Vinh Sở Khoa học Công nghệ Hà Tĩnh Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Email: tranhaukhanh@gmail.com retinervius) thu hái Vườn Quốc gia Vũ Quang, tỉnh Hà Tĩnh VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Lá loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) thu hái Vườn Quốc gia Vũ Quang, tỉnh Hà Tĩnh vào tháng năm 2019 (ký hiệu mẫu THK796L THK 816L) Tiêu hai loài định loại, so với mẫu chuẩn lưu giữ Bộ môn Thực vật, Viện Sự phạm Tự nhiên, Trường Đại học Vinh 2.2 Phương pháp + Tách tinh dầu Lá tươi (khoảng kg) cắt nhỏ chưng cất phương pháp lôi nước thời gian áp suất thường theo Dược điển Việt Nam IV [5] + Phân tích tinh dầu Hồ tan 1,5 mg tinh dầu làm khô Na2SO4 khan 1ml n-hexan tinh khiết loại dùng cho sắc kí phân tích phổ Sắc kí khí (GC): Được thực máy Agilent Technologies HP 6890N Plus gắn vào detectơ FID Hãng Agilent Technologies, Mỹ Cột sắc kí HP-5MS với chiều dài 30 m, đường kính (ID) = 0,25 mm, lớp phim mỏng 0,25 m sử dụng Khí mang H2 Nhiệt độ buồng bơm mẫu (kỹ thuật chương trình nhiệt độ-PTV) 250oC Nhiệt độ detectơ 260oC Chương trình nhiệt bung iu nhit: 60oC Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 63 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ (2 phút), tăng 4oC/phút 220oC, dừng nhiệt độ 10 phút [1], [5] Sắc kí khí-khối phổ (GC/MS): Việc phân tích định tính thực hệ thống thiết bị sắc kí khí phổ kí liên hợp GC/MS Hãng Agilent Technologies HP 6890N Agilent Technologies HP 6890N ghép nối với Mass Selective Detector Agilent HP 5973 MSD Cột HP-5MS có kích thước 0,25 m x 30 m x 0,25 mm HP1 có kích thước 0,25 m x 30 m x 0,32 mm Chương trình nhiệt độ với điều kiện 60oC/2 phút; tăng nhiệt độ 4oC/1 phút 220oC, sau lại tăng nhiệt độ 20oC/phút 260oC; với He làm khí mang Việc xác nhận cấu tử thực cách so sánh kiện phổ MS chúng với phổ chuẩn cơng bố có thư viện Willey/Chemstation HP [1], [10], [19] KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thành phần hóa học tinh dầu Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius), thu Vườn Quốc gia Vũ Quang, tỉnh Hà Tĩnh xác định Hàm lượng tinh dầu đạt 0,10 0,21 khối lượng tươi, tinh dầu có màu vàng nhạt, phân tích Sắc kí khí (GC) Sắc kí khí - Khối phổ liên hợp (GC/MS) (Bảng 1) Từ tinh dầu loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) xác định 42 hợp chất chiếm 89,72 tổng lượng tinh dầu Thành phần tinh dầu n-Octanal (18,05 ), Decanal (17,29 ), 4Z-Decanal (15,14 ), Spathulenol (4,97 ), n-Nonanol (4,74 ), Decanoic acid (3,24 ) Caryophyllene oxide (3,00 ) Từ tinh dầu loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) xác định 43 hợp chất chiếm 82,39 tổng lượng tinh dầu Thành phần tinh dầu Caryophyllene oxide (15,48 ), Myrcene (15,29 ), (E)-Caryophyllene (=βCaryophyllene) (8,90 ), (E)-β-Ocimene (8,39 ), Spathulenol (3,14 ), α-Humulene (2,64 ), α-Pinene (2,36 ), Humulene Epoxide II (2,22 ) Linalool (2,17 ), hợp chất lại chiếm tỷ lệ không đáng kể Bảng cho cho thấy, có 42 hợp chất phát lồi C nigrans 43 hợp chất phát loài C retinervius n-Octanal, Decanal 4Z-Decanal hợp chất đặc trưng cho loài C nigrans, Caryophyllene oxide Myrcene đặc trưng cho lồi C retinervius Có 12 hợp chất có lồi đặc trưng Caryophyllene oxide chiếm lượng lớn loài C retinervius chiếm lượng đáng kể loài C nigrans Đây dẫn liệu tinh dầu hai lồi Bảng Thành phần hóa học tinh dầu loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) Tỷ lệ ( ) TT Hợp chất RI 10 11 12 13 14 15 16 17 64 Hexanal n-Nonane n-Heptanal α-Pinene n-Heptanol β-Pinene Myrcene n-Octanal (Z)-β-Ocimene (E)-β-Ocimene n-Octanol trans-Linalool oxide (furanoid) cis-Linalool oxide (furanoid) unknown (67,150, RI 1098) Linalool Perillene Nonanal 900 901 939 966 984 991 1005 1037 1048 1068 1077 1093 1098 1101 1104 1105 C nigrans C retinervius 0,49 0,26 0,66 0,87 18,05 0,13 0,43 0,62 0,72 0,27 1,07 2,36 0,23 15,29 1,74 8,39 1,33 2,17 0,24 - N«ng nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 o-Guiacol Unknown (82, 109, RI 1112) Z-Myroxide Camphor n-Nonanol cis-Linalool oxide (pyranoid) tran-Linalool oxide (pyranoid) α-Terpineol 4Z-Decenal Decanal Neral Linalyl acetate (=Linalool acetate) Geranial unknown (97, 166, RI 1275) 2-Undecanone Unknown (43, 98, RI 1299) Unknown (111, 154, RI 1300) Decanoic acid Geranyl acetate (E)-Caryophyllene (=β-Caryophyllene) Aromadendrene α-Humulene 9-epi-(E)-Caryophyllene γ-Muurolene 2-Tridecanone β-Selinene (E,E)-α-Farnesene α-Selinene γ-Cadinene δ-Cadinene cis-Calamenene E-Nerolidol β-Oplopenone Spathulenol Spathulenol Unknown (79, 220, RI 1601) Caryophyllene oxide Cubeban-11-ol Cubeban-11-ol β-Biotol Humulene Epoxide II 1-epi-Cubenol Ageratochromene epi-α-Cadinol (=Tau-Cadinol) α-Cadinol neo-Intermedeol n-Tetradecanol 1107 1112 1143 1154 1171 1175 1178 1197 1198 1210 1245 1257 1273 1275 1294 1299 1300 1375 1384 1437 1456 1471 1479 1490 1497 1504 1512 1513 1530 1536 1538 1569 1587 1597 1598 1601 1605 1613 1614 1618 1631 1646 1652 1657 1672 1676 1681 4,74 0,23 0,27 15,14 17,29 0,49 4,81 3,24 1,25 0,61 0,31 0,42 0,24 0,27 4,97 3,00 0,26 0,25 0.,3 0,36 0,24 0.44 0,25 0,42 0,55 N«ng nghiƯp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 0,37 1,01 0,38 0,18 0,30 0,30 0,30 0,41 1,88 1,48 1,11 0,26 8,90 1,14 2,64 0,19 0,26 0,30 0,27 0,41 0,21 0,21 0,16 3,14 2,60 15,48 0,58 2,22 0,34 1,25 0,38 - 65 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ 65 66 67 68 69 70 71 72 73 trans-Calamenen-10-ol 14-Hydroxy-9-epi-(E)-Caryophyllene (E,E)-Farnesol unknown (43, 221, RI 1748) Zerumbone 6,10,14-Trimethylpentadecan-2-one m-Camphorene unknown (43, 282, RI 1999) Phytol Tổng cộng 1685 1688 1727 1748 1758 1848 1962 1999 2117 0,29 1,14 0,13 0,66 1,28 1,66 89,72 0,51 0,18 0,55 0,75 82,39 Ghi chú: RI: Chỉ số trì tương đối hợp chất Khi so sánh loài nghiên cứu với loài Cleistocalyx operculatus (Roxb.) Mer & Perry Việt Nam [15] cho thấy, lồi C operculatus có thành phần tinh dầu chủ yếu (Z)-β-Ocimene (32,1 ), Myrcene (24,6 ), β-Caryophyllen (14,5 ) (E)-βOcimene (9,4 ) [15] Đây thành phần tinh dầu loài C retinervius nghiên cứu Trong đó, lồi C nigrans chi với hai lồi có thành phần tinh dầu chủ yếu n-Octanal (18,05 ), Decanal (17,29 ) 4Z-Decanal (15,14 ) - thành phần khơng có hai loài Ngoài ra, kết hợp hợp chất quan sát từ C nigrans (nOctanal/Decanal/4Z-Decanal/Spathulenol nNonanol), Caryophyllene oxide/Myrcene/(E)-Caryophyllene (E)-βOcimene C retinervius không báo cáo trước từ Việt Nam nơi khác giới Các hợp chất quan sát góp phần vào hoạt động sinh học tinh dầu Cleistocalyx Tinh dầu lồi C operculatus báo cáo có tác dụng kháng khuẩn, chống oxy hóa trị vết bỏng [17], [3], [8], [9] Caryophyllene oxide báo cáo có khả chống tăng sinh tế bào ung thư [2], [12], thành phần tinh dầu C retinervius (15,48 ), thành phần nêu Dựa kết cho ta thấy, tinh dầu lồi C retinervius có tiềm điều trị ung thư cần nghiên cứu thêm Đây lĩnh vực nghiên cứu khác tác dụng tinh dầu C retinervius Octanal Decanal báo cáo có tác dụng ức chế tiêu diệt vi khuẩn [13], thành phần tinh dầu C nigrans –là lồi đặc hữu Việt Nam, nhiên đến chưa có nghiên cứu khảo sát tác dụng sinh học loài Các nghiên cứu tiến 66 hành thử nghiệm để xác minh hoạt tính trị liệu tiềm tinh dầu C nigrans dựa gợi ý thành phần tinh dầu biết qua nghiên cứu Tinh dầu từ loài C nigrans loài C retinervius Vườn Quốc gia Vũ Quang cho thấy tinh dầu hai lồi trở thành chất có hoạt tính sinh học có ý nghĩa trị liệu thương mại KẾT LUẬN Hàm lượng tinh dầu từ loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) đạt 0,10 khối lượng tươi Tổng cộng 42 hợp chất xác định, chiếm 89,72 tổng lượng tinh dầu Trong tinh dầu đặc trưng hợp chất n-Octanal (18,05 ), Decanal (17,29 ) 4Z-Decanal (15,14 ) Trong loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) xác định 43 hợp chất chiếm 82,39 tổng lượng tinh dầu Caryophyllene oxide (15,48 ), Myrcene (15,29 ), E-Caryophyllene (=βCaryophyllene) (8,90 ), (E)-β-Ocimene (8,39 ) thành phần tinh dầu TÀI LIỆU THAM KHẢO Adams, R P., 2007, Identification of essential oil components by gas chromatography/massspectrometry, 4thEdition, Allured Publishing, Carol Stream, Illinois, USA Ambrož, M et al., 2019, Sesquiterpenes αhumulene and β-caryophyllene oxide enhance the efficacy of 5-fluorouracil and oxaliplatin in colon cancer cells, Acta Pharm, 69(1), 121-128 Bajpai, V K., Dung, N T., Suh, H J., Kang, S C., 2010, Antibacterial activity of essential oil and extracts of Cleistocalyx operculatus buds against the bacteria of Xanthomonas spp., Journal of the American Oil Chemists’ Society, 87, 1341-1349 Nguyễn Tiến Bân, 2003, Danh lục loài thực vật Việt Nam Tập 2, Nxb Nụng nghip, H Ni Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 KHOA HC CÔNG NGHỆ Bộ Y tế, 2010 Dược điển Việt Nam IV Nxb Y học, 13 Liu, K., Chen, Q., Liu, Y., Zhou, X., Wang, X., Hà Nội 2012 Isolation and biological activities of decanal, Chen, J & Craven, L.A, Myrtaceae In: Wu, Z Y., linalool, valencene, and octanal from sweet orange oil, J Raven, P.H & Hong, D Y (Eds.), 2007 Flora of China Food Sci, 77(11), C1156-61 Vol 13, Science Press, Beijing and Missouri Botanical 14 Đỗ Tất Lợi, 2004 Những thuốc vị thuốc Garden Press, St Louis, Missouri Việt Nam Nxb Y học, Hà Nội Võ Văn Chi, 2018 Từ điển thuốc Việt Nam 15 Hoàng Văn Lựu, 1996 Nghiên cứu thành phần Tập 2, Nxb Y học, Hà Nội hóa học số thuộc họ Sim (Myrtaceae) họ Dung, N T., Kim, J M., Kang, S C., (2008) cỏ roi ngựa (Verbenaceae) Việt Nam Luận án tiến sĩ Chemical composition, antimicrobial and antioxidant khoa học hóa học Đại học Quốc gia Hà Nội activities of the essential oil and the ethanol extract of 16 Lã Đình Mỡi, Lưu Đàm Cư, Trần Minh Hợi, Cleistocalyx operculatus (Roxb.) Merr and Perry buds, Trần Huy Thái, Ninh Khắc Bản, 2000 Tài nguyên thực Food Chem Toxicol., 46, 3632–3639 vật có tinh dầu Việt Nam Tập 1, Nxb Nơng nghiệp, Hà Gia-Buu Tran, Nghia-Thu Tram Le and Sao-Mai Nội Dam, 2018 Potential Use of Essential Oil Isolated from 17 Noura, S D., Suraj, K P., William, N S., 2015 Cleistocalyx operculatus Leaves as a Topical Leaf essential oil composition, antimicrobial and Dermatological Agent for Treatment of Burn Wound, cytotoxic activities of Cleistocalyx operculatus from Dermatology Research and Practice Hetauda, Nepal, American Journal of Essential Oils and 10 Heller SR and Milne GWA, 1983 EPA/NIH Natural Products, 3(1), 34-37 Mass Spectral Data Base, U.S Government Printing 18 Parnell, J & Chantaranothai, Myrtaceae In: Office, Washington DC Larsen, K & Santisuk, T (Eds.), 2002 Flora of 11 Phạm Hoàng Hộ, 2003 Cây cỏ Việt Nam Quyển Thailand Vol 7, The Forest Herbarium, Royal Forest 2, Nxb Trẻ, TP HCM Department, Bangkok 12 Klaudyna, F., Anna, F., Leon, S & Antoni, S., 19 Stenhagen, E., Abrahamsson, S and McLafferty, 2016 β-caryophyllene and β-caryophyllene oxide-natural F W., 1974 Registry of Mass Spectral Data, Wiley, New compounds of anticancer and analgesic properties, York Cancer Medicine, 5(10), 3007–3017 CHEMICAL COMPOSITION OF ESSENTIAL OILS OF Cleistocalyx nigrans (Gagnep.) Mer & Perry AND Cleistocalyx retinervius Merr & Perry IN VU QUANG NATIONAL PARK, HA TINH PROVINCE Tran Hau Khanh 1, 2, Pham Hong Ban3, Tran Minh Hoi4 1, School of Natural Science Education, Vinh University Ha Tinh Department of Science and Technology Institute of Ecology and Biological Resources, Vietnam Academy of Science and Technology Summary Chemical composition of essential oils obtained from the leaf of Cleistocalyx nigrans and Cleistocalyx retinervius were reported, corresponding oil content 0.10 and 0.21 The analysis was performed by means of gas chromatography-flame ionization detector (GC-FID) and gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS) Fourty-two components were identified in leaf oil of Cleistocalyx nigrans, which represented about 89.72 of the total composition of the oil The major constituents of the essential oil were n-Octanal (18.05 ), Decanal (17.29 ), (4Z)-Decanal (15.14 ) Fourty-three components were identified in leaf oil of Cleistocalyx retinervius, which presented about 82.39 of the total composition of the oil The major constituents of the essential oil were Caryophyllene oxide (15.48 ), Myrcene (15.29 ), (E)Caryophyllene (=β-Caryophyllene) (8.90 ), (E)-β-Ocimene (8.39 ) For the first time, the chemical compositions of the essential oils of Cleistocalyx nigrans and Cleistocalyx retinervius from Vietnam were being reported Keywords: Cleistocalyx nigrans, Cleistocalyx retinervius, Ha Tinh, Myrtaceae, Vu Quang Người phản biện: TS Nguyễn Văn Khiêm Ngày nhận bài: 21/02/2020 Ngày thông qua phản biện: 23/3/2020 Ngày duyệt ng: 30/3/2020 Nông nghiệp phát triển nông thôn - KỲ - TH¸NG 11/2020 67 ... lượng lớn loài C retinervius chiếm lượng đáng kể loài C nigrans Đây dẫn liệu tinh dầu hai lồi Bảng Thành phần hóa học tinh dầu loài Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) loài Trâm gân mạng (Cleistocalyx. .. NGHIÊN CỨU Thành phần hóa học tinh dầu Trâm vối đen (Cleistocalyx nigrans) Trâm gân mạng (Cleistocalyx retinervius) , thu Vườn Quốc gia Vũ Quang, tỉnh Hà Tĩnh xác định Hàm lượng tinh dầu đạt 0,10 ... sinh học loài Các nghiên cứu tiến 66 hành thử nghiệm để xác minh hoạt tính trị liệu tiềm tinh dầu C nigrans dựa gợi ý thành phần tinh dầu biết qua nghiên cứu Tinh dầu từ loài C nigrans loài C retinervius