Nghiên cứu tuyển chọn một số chủng vi khuẩn bacillus sinh enzyme protease nhằm ứng dụng trong xử lý nước thải thủy sản trên địa bàn thành phố đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH –MÔI TRƢ ỜNG NGUYỄN THỊTHU HIỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SINH ENZYME PROTEASE NHẰM ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƢ ỚC THẢI THỦY SẢN TRÊN ĐỊ A BÀN THÀNH PHỐĐÀNẴNG Đà ẵng N–Năm 2014 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH –MÔI TRƢ ỜNG NGUYỄN THỊTHU HIỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SINH ENZYME PROTEASE NHẰM ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƢ ỚC THẢI THỦY SẢN TRÊN ĐỊ A BÀN THÀNH PHỐĐÀ ẴN NG Ngành: Cửnhân Sinh –Môi ờng trƣ Ngƣ ời hƣ ng dẫn: ThS Nguyễ n ThịLan Đà ẵng N–Năm 2014 Phƣơng LỜI CAM ĐOAN 7{L[LQFDPÿRDQÿk\OjF{QJWUuQKQ ͱu cͯa riêng Các s͙li͏ u, k͇ t qu̫nêu nghiên cͱu hoàn tồn trung th͹FYjFK˱D tͳQJÿ˱ ͫc cơng b͙trong b̭t kì cơng trình khác Tác giả Nguyễn Thị Thu Hiền LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Khóa luận tốt nghiệp này, em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Trƣờng Đại Học Sƣ Phạm Đà Nẵng, Ban Chủ Nhiệm Khoa Sinh - Môi Trƣờng tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành các nghiên cứu phục vụ cho khóa luận Đặc biệt, em xin gửi lời cám ơn đến Cô Nguyễn Thị Lan Phƣơng thầy cô Khoa Sinh - Môi Trƣờng, Đại học Sƣ phạm Đà Nẵng đã tận tình hƣớng dẫn, quan tâm, dạy, định hƣớng có góp ý cho em suốt q trình thực Khóa luận tốt nghiệp Ĉj1 ̽ ng, ngày 20 tháng QăP Nguyễn Thị Thu Hiền MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC DANH MỤC BIỂU BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH CHỮ VIẾT TẮT ẢNH MỞĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƢƠNG Ổ1 NG QUAN T TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ NƢỚC THẢI THỦY SẢN 1.2 TỔNG QUAN VỀ VSV SINH TỔNG HỢP PROTEASE 1.2.1 Vi khuẩn 1.2.2 Nấm 1.2.3 Xạ khuẩn 1.3 VK BACILLUS .6 1.4 TỔNG QUAN VỀ CÁC PHƢƠNG PHÁP XỬ LÝ NƢỚC THẢI .9 1.4.1 Phƣơng pháp xử lý học 1.4.2 Phƣơng pháp xử lý hóa lý .10 1.4.3 Phƣơng pháp hóa học 10 1.4.3 Phƣơng pháp xử lý sinh học 10 1.5 THỰC TRẠNG XỬ LÝ NƢỚC THẢI THỦY SẢN Ở VIỆT NAM VÀ TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG .11 1.5.1 Thực trạng xử lý nƣớc thải thủy sản Việt Nam 11 1.5.2 Thực trạng xử lý nƣớc thải thủy sản Đà Nẵng .12 CHƢƠNG Ố I TƢ ỢĐ NG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP ỨU .13 NGH 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 13 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 13 2.3 ĐỊA ĐIỂM, PHẠM VI VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 13 2.3.1 Địa điểm nghiên cứu .13 2.3.2 Phạm vi nghiên cứu .14 2.3.3 Thời gian nghiên cứu 14 2.4 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.4.1 Phƣơng pháp thu mẫu thực địa .15 2.4.2 Phƣơng pháp phân lập giữ giống VSV 16 2.4.3 Phƣơng pháp xác định khả sinh hoạt tính protease VSV 16 2.4.4 Phƣơng pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái VSV 17 2.4.5 Phƣơng pháp khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển VSV 17 2.4.6 Phƣơng pháp định lƣợng VSV 18 2.4.7 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm xử lý nƣớc thải hệ thống bể xử lý sinh học hiếu khí .19 2.4.8 Phƣơng pháp xác định pH nƣớc thải .20 2.5.9 Phƣơng pháp xác định COD nƣớc thải 20 2.4.10 Phƣơng pháp xác định BOD5 nƣớc thải 21 2.4.11 Phƣơng pháp xác định N tổng số nƣớc thải .21 CHƢƠNG Ế T QUẢ KVÀ BÀN LUẬN 23 3.1 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VK TỪ NƢỚC THẢI THỦY SẢN 23 3.2 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CHỦNG VK CĨ HOẠT TÍNH PROTEASE .24 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG VK H1 25 3.3.1 Ảnh hƣởng thời gian đến khả sinh hoạt tính protease chủng VK H1 .25 3.3.2 Ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng chủng VK H1 .26 3.3.3 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến sinh trƣởng chủng VK H1 27 3.3.4 Kết nhuộm Gram chủng VK H1 27 3.4 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MẬT ĐỘ VI KHUẨN CHO VÀO BỂ XỬ LÝ SINH HỌC HIẾU KHÍ 28 3.5 KẾT QUẢ XỬ LÝ NƢỚC THẢI THỦY SẢN BẰNG BỂ XỬ LÝ SINH HỌC HIẾU KHÍ 29 3.5.1 pH 29 3.5.2 COD 30 3.5.3 BOD5 .32 3.5.4 Nitơ tổng 33 CHƢƠNG Ế T LUẬ K N VÀ KIẾN NGHỊ 37 4.1 KẾT LUẬN 37 4.2 KIẾN NGHỊ .37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 PHỤLỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT BOD (Biochemical Oxygen Demand) : Nhu cầu oxy sinh hoá COD (Chemical Oxygen Demand) : Nhu cầu oxy hố học KCNDVTS : Khu cơng nghiệp dịch vụ thủy sản QCVN : Quy Chuẩn Việt Nam TNHH : trách nhiệm hữu hạn VK : Vi khuẩn VSV : Vi sinh vật TẮT DANH MỤC Số hiệu Bảng Tên BẢNG BIỂU bảng Trang 1.1 Đặc điểm số nƣớc thải chế biến thủy sản tiêu chuẩn cho phép 1.2 Ứng dụng q trình xử lý hóa học 10 3.1 Hình thái khuẩn lạc chủng VK phân lập đƣợc từ nƣớc thải thủy sản 23 3.2 Vịng phân giải chủng VK Bacillus có hoạt tính protease 24 3.3 Đƣờng kính vịng phân giải protein chủng VK H1 25 3.4 Sự thay đổi pH nƣớc thải qua ngày xử lý 29 3.5 Sự thay đổi COD nƣớc thải qua ngày xử lý 31 3.6 Sự thay đổi BOD5 nƣớc thải qua ngày xử lý 32 3.7 Sự thay đổi Ntổng nƣớc thải qua ngày xử lý 33 3.8 Giá trị tiêu nƣớc thải sau ngày xử lý 35 DANH MỤC HÌNH ẢNH Số hiệu hình vẽ Tên hình vẽ Trang 1.1 Khuẩn lạc nấm mốc 1.2 S grieus dƣới kính hiển vi điện tử 1.3 Khuẩn lạc S fradiae 1.4 VK Bacillus bắt màu Gram dƣới kính hiển vi 1.5 Bể điều hòa 1.6 Bể lắng Lamen 1.7 Bể Aeroten Công ty TNHH Bắc Đẩu 12 2.1 Sơ đồ tóm tắt quy trình nghiên cứu 15 2.2 Sơ đồ công nghệ bể xử lý Pilot Aeroten – KT11 19 2.3 Quy trình phân tích COD 20 3.1 Các chủng VK Bacillus phân lập đƣợc từ nƣớc thải thủy sản 23 3.2 Vòng phân giải protease chủng VK Bacillus có hoạt tính 24 3.3 Đƣờng kính vịng phân giải protein chủng VK H1 tƣơng ứng với thời gian nuôi cấy 25 3.4 Ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng chủng VK H1 26 3.5 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến sinh trƣởng chủng VK H1 27 3.6 Chủng VK H1 bắt màu tím nhuộm Gram 28 3.7 Sự thay đổi pH nƣớc thải qua ngày xử lý 30 3.8 Sự thay đổi COD nƣớc thải qua ngày xử lý 31 3.9 Sự thay đổi BOD5 nƣớc thải qua ngày xử lý 32 3.10 Sự thay đổi Ntổng nƣớc thải qua ngày xử lý 34 3.11 Nƣớc thải trƣớc xử lý 36 3.12 Nƣớc thải sau xử lý 36 33 Dựa vào biểu đồ trên, nhận thấy: - BOD5 giảm mạnh vào ngày đầu tiên, giảm 54,5% bổ sung chủng VK H1 giảm 11,8% không bổ sung VSV vào trình xử lý - Sau ngày xử lý với việc bổ sung chủng VK H1, BOD5 giảm 46 mg/l, đạt mức quy định cột B QCVN 11:2008/BTNMT – Quy chuẩn kĩ thuật Quốc gia nƣớc thải công nghiệp chế biến thủy sản [2] Khi không bổ sung VSV, sau ngày COD cao khoảng 14 lần so với tiêu chuẩn cho phép - Sau ngày xử lý, bổ sung chủng VK H1 số BOD5 nƣớc thải đầu giảm nhiều (giảm 98%) so với không bổ sung VSV (giảm 41,7%) Điều chứng tỏ, bổ sung chủng VSV đƣợc tuyển chọn vào q trình xử lý, nồng độ hợp chất vơ hữu nƣớc thải giảm mạnh nhiều lần so với xử lý bể xử lý sinh học hiếu khí thơng thƣờng 3.5.4 ổ ng Nitơ t Hàm lƣợng Ntổng giảm xuống rõ rệt sau ngày xử lý, đạt hiệu cao bổ sung chủng VK H1, kết đƣợc tổng hợp bảng 3.7: B̫ng 3.7 S͹WKD\ÿ ͝i Nt͝ng cͯ DQ˱ ͣc th̫ i qua ngày x͵lý Thí nghiệ m Ngày thứ1 Ngày thứ2 Ngày thứ3 Ngày thứ4 Ngày thứ5 Ngày thứ6 Ngày thứ7 Bổsung VK H1 173 141 95 71 62 56 49 Không bổ sung VSV 156 148 125 116 109 102 98 34 Từ số liệu bảng 3.7, thay đổi Ntổng qua trình xử lý đƣợc thể biểu đồ hình 3.10: z: tiêu chuẩn Ntổng cho phép cột B – QCVN 11:2008 Hình 3.10 S͹WKD\ÿ ͝ i Nt͝ng WURQJQ˱ ͣc th̫i qua ngày x͵lý Dựa vào đồ biểu đồ, nhận thấy: - Ntổng giảm mạnh vào ngày thứ hai, giảm 32% bổ sung chủng VK H1 giảm 11,8% khơng bổ sung VK vào q trình xử lý - Sau ngày xử lý với việc bổ sung chủng VK H1, Ntổng giảm 55,8 mg/l, đạt mức quy định cột B QCVN 11:2008/BTNMT – Quy chuẩn kĩ thuật Quốc gia nƣớc thải công nghiệp chế biến thủy sản [2] - Sau ngày xử lý, bổ sung chủng VK H1 hàm lƣợng Ntổng giảm nhiều (giảm 71,7%) so với không bổ sung VSV (giảm 37,2%) Mặt khác, hàm lƣợng Ntổng tỉ lệ thuận với hàm lƣợng protein thô (Hàm lƣợng protein thô = Hàm lƣợng Ntổng x 6,25), nên hàm lƣợng Ntổng nƣớc thải giảm, điều chứng tỏ hàm lƣợng protein giảm mạnh sau trình xử lý 35 Nhƣ vậy, kết sau ngày xử lý có bổ sung chủng VK H1 khơng bổ sung VSV vào q trình xử lý bể sinh học hiếu khí đƣợc thể bảng 3.8 nhƣ sau: B̫ng 3.8 Giá tr͓các ch͑tiêu cͯ DQ˱ ͣc th̫i sau ngày x͵lý Chỉ Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày QCVN tiêu thứ1 thứ2 thứ3 thứ4 thứ5 thứ6 thứ7 11:2008 6,05 6,68 6,95 7,03 7,22 7,19 7,33 6,12 6,33 6,36 6,38 6,31 6,39 6,38 COD 974 385 156 87 74 61 58 (mg/l) 913 830 778 725 680 665 642 BOD5 1430 650 178 46 37 31 26 (mg/l) 1230 1085 987 907 833 772 717 Ntổng 173 141 95 71 62 56 49 (mg/l) 156 148 125 116 109 102 98 pH –9 80 50 60 Chú thích: Khảo sát thay đổi tiêu pH, COD, BOD5, Ntổng nƣớc thải ngày, nhiên, dựa vào bảng 3.8 nhận thấy bổ sung chủng VK H1 vào trình xử lý sau khoảng ngày tiêu đạt dƣới mức tiêu chuẩn cột B QCVN 11:2008/BTNMT – Quy chuẩn kĩ thuật Quốc gia nƣớc thải công nghiệp chế biến thủy sản [2] Trong đó, xử lý bể xử lý sinh học hiếu khí thơng thƣờng mà khơng bổ sung VSV vào trình xử lý ngoại trừ tiêu pH, tiêu cao nhiều lần so với tiêu chuẩn cho phép 36 Đồng thời, trực quan nhận thấy nƣớc thải sau ngày xử lý có màu sắc nhạt so với ngày đầu, cảm quan, nƣớc thải gây mùi khó chịu sau q trình xử lý Qua cho thấy hiệu xử lý chủng VK H1 tốt Hình 3.11 1˱ ͣc th̫ LWU˱ ͣc x͵lý Hình 3.121˱ ͣc th̫i sau ngày x͵lý 37 CHƢƠNG Ế T LUẬ K N VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN - Từ mẫu nƣớc thải thủy sản công ty TNHH Bắc Đẩu trạm xử lý nƣớc thải tập trung KCNDVTS Thọ Quang – Đà Nẵng, phân lập đƣợc chủng VK Bacillus, xác định đƣợc chủng có hoạt tính protease - Xác định đƣợc chủng VK H1 chủng sinh tổng hợp enzyme mạnh nhất, tiến hành nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng cho thấy chúng thuộc loại VK Gram (+), hình que ngắn, sinh trƣởng thích hợp khoảng pH trung tính (6,5 – 7,5), nhiệt độ 320C – 360C sinh hoạt tính protease mạnh sau 48h nuôi cấy - Ứng dụng chủng VK H1 vào xử lý nƣớc thải thủy sản bể xử lý sinh học hiếu khí với tỉ lệ 4.109 (CFU/ lit) cho thấy đạt hiệu xử lý cao nhiều so với không bổ sung VSV Các tiêu BOD5, COD, Ntổng giảm giảm mạnh ngày thứ ngày thứ hai Sau khoảng – ngày xử lý, nƣớc thải đầu đạt mức pH trung tính tiêu nƣớc thải đạt tiêu chuẩn QCVN 11:2008/ BTNMT 4.2 KIẾN NGHỊ Do thời gian giới hạn khóa luận tốt nghiệp, với điều kiện thực nghiệm hạn chế nên việc nghiên cứu xử lý nƣớc thải chế biến thuỷ hải sản chƣa đƣợc tiến hành thật đầy đủ, phân lập đƣợc số chủng VK Bacillus số nhà máy chế biến thủy sản địa bàn thành phố Đà Nẵng nghiên cứu đặc điểm sinh học Từ đó, đề tài kiến nghị số phƣơng hƣớng nghiên cứu cần thực nhƣ sau: - Nghiên cứu đặc tính sinh học hoạt tính khác chủng VK phân lập đƣợc - Tiến hành nghiên cứu xử lý tải trọng khác nƣớc thải mật độ VK bổ vào hệ thống Đồng thời tiến hành phối hợp chủng VK H1 với chủng VSV khác trình xử lý để so sánh hiệu - Tiến hành phân tích bổ sung số tiêu khác nhƣ TSS, NO3-, Ptổng, PO43… tiêu pH, COD, BOD5, Ntổng 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiế ng Việ t [1] Nguyễn Việt Anh (2011), Thi͇ t k͇h͏th͙ng x͵OêQ˱ ͣc th̫i thͯy s̫ n (cá, ch̫ cá) công ty c͝ph̯ n thͯ y s̫ n Kiên Giang xí nghi͏ p ch͇bi͇ n thͯ y s̫ n xṷt kẖ u T̷ c C̵u, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Kỹ thuật cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh, TP.HCM [2] Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia chất lƣợng nƣớc (2008), Quy chu̱ n kͿthu̵ t Qu͙ c gia v͉Q˱ ͣc th̫i công nghi͏ p ch͇bi͇ n thͯy s̫ n, Hà Nội [3] Lê Đông Cung cộng (2010), ;iF ͓ nh kh̫ ÿ QăQJ ͋ Q FKX\ KyD ̩ m cͯ aÿ nhóm vi khu̱n hͷu ích h͏th͙QJ˱˯QJW{PV~3HQ Q˱ ͣc tu̯ n hồn, Tạp chí Khoa học 2010, trang 33 – 37 [4] Nguyễn Thị Phƣơng Duyên (2013), Nghiên cͱu hi͏ u qu̫x͵OêQ˱ ͣc th̫i thuͽ s̫n công ty TNHH Angst ±7U˱ ͥng Vinh b̹ng mơ hình l͕ c sinh h͕ c hi͇ u khí, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Kỹ thuật Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh [5] Trần Anh Đào (2008), Enzim protese, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Vinh [6] Egorov N.X, Nguyễn Lân Dũng dịch (1983), Th͹c hành vi sinh v̵t, NXB Mir Matcova, NXB KT-KH, Hà Nội [7] Cao Thị Hạnh (2007), Nghiên cͱu nuôi vi khu̱n Bacillus thu sinh kh͙Lÿ ͋s̫ n xṷt ch͇pẖP (0,1$ GQJ WURQJ ̫o v͏P{L FKăQ ͥng, WU˱ QX{L Khóa luận tốt nghiệp, Trƣờng Đại học Nơng nghiệp I – Hà Nội [8] Hoàng Huệ (2005), X͵OêQ˱ ͣc th̫i, NXB Xây dựng, Hà Nội [9] Nguyễn Hoài Hƣơng (2013), Kh̫o sát kh̫QăQJ ͱng dͭ ng vi khu̱n ph̫n nitrat phân l̵ p tͳQ˱ ͣc th̫i ch͇bi͇ n thͯy s̫n x͵OêQ˱ ͣc th̫i giàu nitrat, Khóa luận thạc sĩ sinh học, Đại học Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh [10] Nguyễn Văn Lợi (2013), Nghiên cͱu ͱng dͭng công ngh͏Hybrid (L͕ c sinh h͕ c ±Aroten) x͵OêQ˱ ͣc th̫ i thͯy s̫n t̩LĈj1 ̽ ng, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học bách khoa Đà Nẵng 39 [11] Đặng Văn Lƣợng (2012), Nghiên cͱu x͵Oê ͣcQ˱ th̫i chͱD KjP ͫng ch̭ O˱ t hͷXF˯FDRE ̹ ng thi͇ t b͓UASB, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Kỹ thuật Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh [12] Vũ Thúy Nga (2012), Phân l̵ p, tuy͋ n ch͕n chͯ ng vi khu̱Q%DFLOOXVÿ ͙ i khàng ṋ m Fusarium oxyspoum gây b͏ QKKpRUNJWUrQP ͡ t s͙cây tr͛ng c̩n, Khóa lu̵ n th̩ FVƭ Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam [13] Trần Thị Hồng Nghi (2012), Nghiên cͱu ͱng dͭ ng enzyme protease tͳvi khu̱Q%DFLOOXVVXEWLOLV ÿ ͋thͯy phân phͭpẖm cá tra, Khóa luận thạc sĩ sinh học, Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh [14] Nguyễn Thị Minh Ngọc (2012), “Nghiên cứu phân dị trầm tích bãi triều chuyển đổi môi trƣờng rừng ngập mặn thành đầm ni tơm phƣơng pháp phân tích thành phần chính”, T̩p chí Sinh h͕c 2012, trang 13 – 18 [15] Trƣơng Thị Hồng Nhung (2011), Phân l̵ SYj[iFÿ ͓ nh ho̩t tính enzyme ngo̩ i bào cͯa vi khu̱Q˱DQKL ͏ t ͱng dͭng x͵OêP{LWU˱ ͥng, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nông nghiệp Hà Nội [16] Bùi Thị Phi (2009), Phân l̵p, kh̫RViWÿ ̿FÿL ͋ m sinh h͕ c tìm hi͋ u kh̫ QăQJVLQKHQ]\PHF ͯa vi khu̱Q%DFLOOXVVXEWLWLVÿ ͋s̫ n xṷt th͵nghi͏ m ch͇pẖ m sinh h͕ c, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nông lâm thành phố Hồ Chí Minh [17] Nguyễn Thiện Phú cộng (2013), “Phân lập tuyển chọn số chủng Bacillus Thuringensis từ rừng ngập mặn Cần Giờ có hoạt tính diệt sâu”, T̩p chí khoa h͕ FĈ+63WKjQKSK ͙H͛Chí Minh, trang 21 – 27 [18] Lê Thị Bích Phƣợng cộng (2012), “Phân lập tuyển chọn số chủng Bacillus sinh tổng hợp Nattokinase”, T̩p chí Sinh h͕c 2011, trang 45 – 49 [19] Lê Minh Tâm (2007), 3K˱˯QJSKiSSKkQWtFKP ͡t s͙ch͑WLrXYLVLQK ̫ n cͯ a th͹c pẖ m, NXB Hà Nội, Hà Nội 40 [20] Phạm Hoàng Thái (2007), Phân l̵p vi khu̱n Bacillus subtitis tͳÿ ̭t, kh̫ o sát kh̫QăQJ ͱc ch͇s̫ n sinh ailatoxin cͯa chͯ ng vi khu̱n phân l̵p ÿ˱ ͫc, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nơng lâm thành phố Hồ Chí Minh [21] Trịnh Thị Thanh, Trần Yêm, Đồng Kim Loan (2004), Giáo trình Cơng ngh͏ P{LWU˱ ͥng, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội [22] Trần Thị Anh Thảo (2007), Phân l̵p, tuy͋ n ch͕ n gi͙ ng vi sinh v̵ t sinh SURWHDVHJk\K˱˯QJP ̷ Pÿ ̿FWU˱QJW ͳFK˱ ͫp m̷m ͱng dͭng vào s̫n xṷWQ˱ ͣc m̷m chay tͳṋ m, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh [23] Trần Thanh Thủy (1998), +˱ ͣng d̳ n th͹c hành vi sinh v̵t h͕c, NXB Giáo dục, Hà Nội [24] Nguyễn Thị Trần Thụy (2009), Nghiên cͱu tuy͋ n ch͕ n chͯ ng vi khu̱ n Bacillus phân l̵ p tͳÿ̭WY˱ ͥn sinh protease ki͉ m, Luận văn thạc sĩ sinh học, Trƣờng đại học Sƣ phạm thành phố Hồ Chí Minh [25] Tổng cục Môi trƣờng (2001), +˱ ͣng d̳QÿiQKJLiV ͹phù hͫp cͯa công ngh͏ x͵OêQ˱ ͣc th̫ i giͣi thi͏ u m͡ t s͙công ngh͏x͵OêQ˱ ͣc th̫Lÿ ͙i vͣi ngành Ch͇bi͇ n thͯ y s̫n, D͏ t may, Gi̭y b͡t gi̭ y, Tài liệu kĩ thuật, Hà Nội [26] Nguyễn Quỳnh Trang (2011), Phân l̵ p, tuy͋ n ch͕n chͯng Bacillus subtilis có kh̫QăQJVLQKW ͝ng hͫp ch̭t ͱc ch͇Į ±glucosidase t͙L˱XKy DÿL ͉ u ki͏ n nuôi c̭\ ͋ÿ thu ch̭t ͱc ch͇Į ±glucosidase cao, Khóa luận tốt nghiệp, Viện Đại học mở Hà Nội Tiế ng Anh [27] D J Mukesh Kumar et al (2012), Production and Purification of Alkaline Protease from Bacillus sp MPTK 712 Isolated from Dairy Sludge, Global Veterinaria, Vol (5), 433-439 41 [28] D J Mukesh Kumar et al (2012), Production and Purification of Alkaline Protease from Bacillus sp MPTK 712 Isolated from Dairy Sludge, Global Veterinaria Vol (5), 433-439 [29] F G Priest (1997), Bacillus amyloliquefaciens sp nov norn rev., International Journal of systematic bacteriolory Vol 37 (1), 69-71 [30] F S Josephine, et al (2012), Isolation, production and characterization of protease from Bacillus sp isolated from soil sample, J Microbiol Biotech Res., Vol (1), 163-168 [31] J P Chenel et al (2009), Production of thermostable protease enzyme in wastewater sludge using thermophilic bacterial strains isolated from sludge, Institut National de la Recherche Scientifique, Vol (1), – 15 [32] R Rani et al (2012), Isolation and screening of alkaline protease producing bacteria and induction of overproducing Bacillus licheniformis mutants through UV irradiation, IOSR Journal of Pharmacy, Vol (1), 001-014 [33] S Geethanjali and A Subash (2011), Opitimization of Protease Production by Bacillus subtilis Isolated from Mid Gut of Fresh Water Fish Labeo rohia, World Journal of Fish and Marine Sciences, Vol (1), 88 – 95 [34] T Kuberan, S Sangaralingam and V Thirumalai Arasu (2010), Isolation and optimization of Protease producing Bacteria fromHalophilic soil, J Biosci Res, Vol (3), 163-174 [35] U Boominadhan (2009), Optimization of Protease Enzyme Production Using Bacillus Sp Isolated from Different Waste, International, Vol (2), 83-87 Botany Research PHỤLỤC PHỤLỤC 01 MỘT SỐ MÔI TRƢ ỜNG NI CẤY VK BACILLUS Mơi ờng LB trƣ Broth bổsung agar - Cao nấm men : 5g - Trypton : 10g - NaCl : 10g - Agar : 10g - Nƣớc cất : bổ sung đủ 1000ml Môi ờng nƣ trƣ ớc mắ m - pepton - Nƣớc mắm 350 đạm : 30ml - Trypton : 10g - NaCl : 10g Môi ờng nƣ trƣ ớc thị t - pepton - Nƣớc chiết thịt : 1000ml - Pepton : 10g - NaCl : 5g - Agar : 20g PHỤLỤC 02 BẢNG GIÁ TRỊCÁC THƠNG SỐ Ơ NHIỄM TÍNH TOÁN GIÁ TRỊTỐI ĐA LÀM CHO CƠ Ở PHÉP S THEO QCVN 11: 2008/BTNMT B̫ ng - Giá tr͓các thơng s͙ơ nhi͍ POjPF˯V ͧtính tốn giá tr͓t͙LÿDFKRSK TT Thơng số Giá trịC Đơnị v A B  9 5,5 9 pH BOD5 20 0C mg/l 30 50 COD mg/l 50 80 Tổng chất rắn lơ lửng (TSS) mg/l 50 100 Amoni (tính theo N) mg/l 10 20 Tổng nitơ mg/l 30 60 Tổng dầu, mỡ động thực vật mg/l 10 20 Clo dƣ mg/l Tổng Coliforms 3.000 5.000 Trong MPN/ 100 ml đó: - Cột A quy định giá trị C thông số ô nhiễm làm sở tính tốn giá trị tối đa cho phéptrong nƣớc thải công nghiệp chế biến thủy sản thải vào nguồn nƣớc đƣợc dùng cho mục đích cấp nƣớc sinh hoạt (có chất lƣợng nƣớc tƣơng đƣơng cột A1 A2 Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia chất lƣợng nƣớc mặt) - Cột B quy định giá trị C thông số làm sở tính tốn giá trị tối đa cho phéptrong nƣớc thải công nghiệp chế biến thủy sản thải vào nguồn nƣớc khơng dùng cho mục đích cấp nƣớc sinh hoạt (có chất lƣợng nƣớc tƣơng đƣơng cột B1 B2 Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia chất lƣợng nƣớc mặt vùng nƣớc biển ven bờ) Ngồi 09 thơng số quy định bảng 1, tuỳ theo u cầu mục đích kiểm sốt nhiễm, giá trị C thông số ô nhiễm khác áp dụng theo quy định cột A cột B bảng Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 5945:2005 - Chất lƣợng nƣớc – Nƣớc thải công nghiệp – Tiêu chuẩn thải PHỤLỤC HÌNH 03 MỘT SỐ HÌNH ẢNH THU MẪU VÀ NI CẤY VSV Hình 1.Ĉ͓ DÿL ͋ m thu m̳XQ˱ ͣc th̫i t̩i Công ty TNHH B̷FĈ ̱u ±Ĉj1 ̽ ng Hình M͡ t s͙chͯng VK phân l̵Sÿ˱ ͫFWUrQP{LWU˱ ͥng th̩ch Hình 3.Ni c̭y l̷ c chͯ ng VK H1 Hình 4.Dung d͓ ch ni c̭y chͯng VK H1 PHỤLỤC HÌNH 04 MỘT SỐ THIẾT BỊPHÂN TÍCH Hình B͋x͵lý Pilot ±Aeroten KT11 Hình 7.0i\ÿR BODSensor system Hình 0i\ÿRP ̵Wÿ ͡quang UV-vis k͇ t n͙ i vͣi h͏th͙ ng máy tính Hình Máy ͯnhi͏ t ±ĈR%2' ... TRẠNG XỬ LÝ NƢỚC THẢI THỦY SẢN Ở VI? ??T NAM VÀ TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG .11 1.5.1 Thực trạng xử lý nƣớc thải thủy sản Vi? ??t Nam 11 1.5.2 Thực trạng xử lý nƣớc thải thủy sản Đà Nẵng. .. HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH –MÔI TRƢ ỜNG NGUYỄN THỊTHU HIỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SINH ENZYME PROTEASE NHẰM ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƢ ỚC THẢI THỦY SẢN... đƣợc khả ứng dụng chủng vi sinh vật (VSV) nghiên cứu vào xử lý nƣớc thải thủy sản, tạo tiền đề cho vi? ??c nghiên cứu ứng dụng chế phẩm sinh học vào vi? ??c xử lý môi trƣờng – hƣớng nghiên cứu để giải