Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính gây độc tế bào phân đoạn n hexane và xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cao chiết ethanol của hoa đu đủ đực thu hái tại quảng nam đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUYỄN ĐÌNH TÙNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN N-HEXANE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC THU HÁI TẠI QUẢNG NAM-ĐÀ NẴNG LUẬN VĂN CỬ NHÂN HOÁ HỌC Đà Nẵng- Năm 2019 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUYỄN ĐÌNH TÙNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN N-HEXANE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC THU HÁI TẠI QUẢNG NAM-ĐÀ NẴNG Chuyên ngành : Hóa hữu LUẬN VĂN CỬ NHÂN HÓA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC ThS ĐỖ THỊ THÚY VÂN Đà Nẵng-Năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Nguyễn Đình Tùng LỜI CẢM ƠN Để có đƣơc kiến thức kĩ nhƣ em xin chân thành cảm ơn đến tất thầy khoa Hóa học trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng truyền đạt dạy dỗ em Đặc biết em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu xắc đến cô ThS Đỗ Thị Thúy Vân ngƣời hƣớng dẫn tận tâm tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thành phịng thí nghiệm giúp đỡ em q trình hồn thành khóa luận Những kiến thức tích lũy lúc thực nghiệm hành trang để em tiếp tục đƣờng sau Cuối em xin cảm ơn thầy cô hội đồng dành thời gian quý báu để nhận xét, đánh giá tham gia chấm khóa luận Đà Nẵng, ngày 19 tháng 04 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Đình Tùng MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY ĐU ĐỦ 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ TRONG NƢỚC 1.3 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ NGỒI NƢỚC 1.4 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ12 1.5 CÁC PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO 23 1.5.1 Phƣơng pháp MTT 23 1.5.2 Phƣơng pháp SRB 24 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 25 2.1.1 Nguyên liệu 25 2.1.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 25 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.2.1 Phƣơng pháp chiết mẫu thực vật 25 2.2.3 Phƣơng pháp xác định thành phần hóa học dịch chiết 26 2.3 ĐỊNH TÍNH MỘT SỐ LỚP CHẤT TRONG HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 26 2.3.1 Alkaloid 26 2.3.2 Flavonoid 27 2.3.3 Coumarin 27 2.3.4 Saponin 27 2.3.5 Đƣờng khử 28 2.3.6 Polyphenol 28 2.3.7 Steroid 28 2.3.8 Axit hữu 28 2.3.9 Chất béo 28 2.3.10 Carotene 28 2.3.11 Polysaccarid 28 2.3.12 Iridoid 29 2.4 SƠ ĐỒ ĐIỀU CHẾ CÁC CAO CHIẾT 29 2.5 THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA DỊCH CHIẾT N-HEXANE 30 2.5.1 Quy trình chiết xuất dịch chiết hoa Đu đủ đực để nghiên cứu tác dụng ức chế tế bào ung thƣ 30 2.5.2 Các dòng tế bào 31 2.5.3 Phƣơng pháp 31 2.5.4 Thử độc tế bào 31 2.6 ĐỊNH DANH SƠ BỘ MỘT SỐ HỢP CHẤT HÓA HỌC TRONG CAO CHIẾT N-HEXANE 32 2.7 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL 32 2.7.1 Chiết xuất cao chế phẩm 32 2.7.2 Mô tả 32 2.7.3 Cắn không tan nƣớc 33 2.7.4 Mất khối lƣợng làm khô Phụ lục 9.6-DĐVN IV) 33 2.7.5 Tro toàn phần Phụ lục 9.8-DĐVN IV) 33 2.7.6 Kim loại nặng 34 2.7.7 Độ pH Phụ lục 6.2-DĐVN IV) 34 2.7.8 Định tính lớp chất hóa học 34 2.7.9 Hoạt tính kháng vi sinh vật 34 2.7.10 Hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ cao chiết ethanol hoa đu đủ đực35 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH CÁC LỚP CHẤT TRONG HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 35 3.2 THỬ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƢ CỦA CAO CHIẾT NHEXANE TỪ HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 36 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA HỌC DỊCH CHIẾT NHEXANE BẰNG PHƢƠNG PHÁP GC-MS 37 3.4 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 KẾT LUẬN 55 KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BuOH: Butanol CHCl3: Chloroform D: Dichlomethane DMSO: Dimethyl sunfoxide EtOAc: Etylacetate EtOH: Ethanol GC-MS: Gas chromatography-Mass spectrometry MeOH: Methanol Me: Methyl SRB: Sulforhodamine B DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Số hiệu bảng 1.1 1.2 1.3 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 Tên bảng Trang Thành phần hóa học Đu đủ 12 Tác dụng chất chiết từ Đu đủ lên dòng tế bào ung thƣ khác điều kiện in vitro 18 Hoạt tính chống ung thƣ glucosinolate, phenolic, flavonoid, carotenoid alcaloid Đu đủ Định tính lớp chất hoa Đu đủ đực Hoạt tính độc tế bào phân đoạn dịch chiết n-hexane Thành phần hóa học dịch chiết n-hexane hoa Đu đủ đực Kết khảo sát cắn không tan nƣớc cao đặc hoa đu đủ Kết khảo sát khối lƣợng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hàm lƣợng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nƣớc Kết định tính nhóm chất cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ cao đặc hoa đu đủ đực 21 42 43 44 48 48 49 49 50 50 52 54 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Số hiệu hình Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh Đu đủ 1.1 2.1 2.2 3.1 Công thức cấu tạo hợp chất Đu đủ Hoa đu đủ đực bột hoa đu đủ đực Sơ đồ điều chế cao chiết Sắc ký đồ GC-MS dịch chiết n-hexane hoa Đu đủ đực Phổ MS Error! Reference source not found – Sitosterol Phổ MS 9,12-Octadecadienoic acid(Z,Z) Phổ MS n-Hexadecanoic acid 12 29 34 44 3.2 3.3 3.4 47 47 47 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Cùng với phát triển không ngừng mặt xã hội, ngƣời phải đối mặt với nguy xuất bệnh tật ngày nhiều Một giải pháp xu hƣớng quay với thiên nhiên, dùng sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên tổng hợp đƣờng nhân tạo, hợp chất thiên nhiên từ thực vật xung quanh Cây Đu đủ (Carica papaya Linn) loại ăn có nguồn gốc từ vùng nhiệt đới châu Mỹ Hiện nay, Đu đủ đƣợc trồng nƣớc vùng nhiệt đới, nơi có nhiệt độ bình qn năm khơng thấp 150C Sản lƣợng Đu đủ giới khoảng triệu quả/năm [14] Ở Việt Nam, Đu đủ đƣợc trồng hầu hết tỉnh miền Bắc miền Nam Tuy nhiên, chúng đƣợc trồng nhiều tỉnh đồng bằng, dọc theo sông, loại đất phù sa Diện tích trồng Đu đủ nƣớc ƣớc khoảng 10000-17000 hecta với sản lƣợng khoảng 200-350 nghìn [14] Cây Đu đủ có lợi loại dễ trồng, sớm, suất cao đồng thời toàn thân, lá, đƣợc sử dụng với nhiều mục đích chữa bệnh khác Quả Đu đủ nguồn cung cấp nhiều loại enzyme khác Papain, pepsin có xanh trợ giúp tuyệt vời cho q trình tiêu hóa, giúp tiêu hóa protein thức ăn mơi trƣờng acid, kiềm trung tính Lipase, enzyme hydrolase liên kết chặt chẽ với phần không tan nƣớc xanh, chất xúc tác sinh học cố định Quả Đu đủ lên men chất chống oxy hoá tốt, giúp cải thiện khả phịng chống oxy hố bệnh nhân cao tuổi khơng có tình trạng thiếu oxy Ngồi ra, acid folic tìm thấy Đu đủ chất chuyển đổi homocysteine thành acid amin nhƣ cysteine methionine Nếu khơng chuyển đổi, homocysteine trực tiếp làm hỏng thành mạch máu, đƣợc coi yếu tố dẫn đến nguy đau tim đột quỵ Quả Đu đủ chín thuốc nhuận tràng đảm bảo cho ruột hoạt động bình thƣờng [49] Trong dân gian Đu đủ đƣợc sử dụng để sát khuẩn, kháng nấm, kháng viêm, chữa sốt rét, trừ giun sán, Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu hoạt tính sinh học Đu đủ Lá Đu đủ đƣợc chứng minh có khả chống oxy hóa mạnh 10,04 69 3,30 1,5,9undecatrien 2,6,10trimethyl,(Z); C14H24 13,78 68 1,94 3,7,11,15Tetramethyl-2hexadecen-1-ol; C20H40O 16,07 73 12,71 n-Hexadecanoic acid; C16H32O2 18,62 57 1,27 Octadecane, 1chloro; C18H37Cl 19,45 55 15,21 9,12Octadecadienoic acid (Z,Z); C18H32O2 19,93 55 2,69 9-Octadecenoic acid (Z); C18H34O2 40,46 55 5,02 Campesterol; C28H48O 10 40,92 55 8,44 Stigmasterol; C29H48O 38 11 41,66 55 29,96 Error! Reference source not found – Sitosterol; C29H50O 12 42,55 55 12,58 16-Pregnen3,20-dione; C21H30O2 13 44,43 57 5,32 9,10-Dideutero octadecanal; C18H34D2O Từ bảng 3.3 cho thấy, cấu tử đƣợc định danh với hàm lƣợng lớn bao gồm: Error! Reference source not found.– Sitosterol (29,96%); 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z) (15,21%); n-Hexadecanoic acid (12,71%); 16-Pregnen-3,20-dione (12,58%); Stigmasterol (8,44%); 9,10-Dideutero octadecanal (5,32%); Campesterol (5,02;%) Hình ảnh phổ MS cấu tử chiếm tỉ lệ phần trăm diện tích peak lớn đƣợc trình bày hình từ 3.2 đến 3.4 Hình 3.2 Phổ MS Error! Reference source not found – Sitosterol 39 Hình 3.3 Phổ MS 9,12-Octadecadienoic acid(Z,Z) Hì nh 3.4 Phổ MS n-Hexadecanoic acid 3.4 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL Từ nghiên cứu dựa theo DĐVN IV, đề xuất tiêu chuẩn cao dƣợc liệu hoa đu đủ đực với định hƣớng làm nguyên liệu thuốc gây độc tế bào ung thƣ từ hoa đu đủ đực nhƣ sau: 3.4.1 Chiết xuất cao dƣợc liệu: Cao đặc hoa đu đủ đực đƣợc bào chế từ hoa đu đủ đực Carica papaya L.) theo phƣơng pháp thích hợp, để chế phẩm có hàm lƣợng hoạt chất ổn định 3.4.2 Mô tả: Cao hoa đu đủ đực cao đặc quánh, mềm, đồng Màu nâu đậm Mùi nồng, đặc trƣng dƣợc liệu Vị lợ, đắng 3.4.3 Cắn không tan nƣớc: Không 3% Kết khảo sát cắn không tan nƣớc cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.4 Bảng 3.4 Kết khảo sát cắn kh ng tan nƣớc cao đặc hoa đu đủ đực 40 STT mmẫu (g) mcắn (g) C (%) 1,000 0,021 2,100 1,000 0,021 2,100 1,000 0,022 2,200 CTB (%) 2,133 Nhận xét: Cắn không tan nƣớc trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 2,133%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không 3% 3.4.4 Mất khối ƣợng làm khô: Không 20% Kết khảo sát khối lƣợng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết khảo sát khối ƣợng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực STT mmẫu (g) mmẫu sau làm khô (g) W (%) 1,000 0,853 14,700 1,000 0,853 14,700 1,000 0,852 14,800 WTB (%) 14,733 Nhận xét: Mất khối lƣợng làm khơ trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 14,733%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không 20% 3.4.5 Tro tồn phần: Khơng q 35% Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.6 Bảng 3.6 Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực STT mcốc (g) mmẫu (g) m cốc mẫu sau tro hóa T (%) (g) 34,452 1,000 34,559 10,700 32,365 1,000 32,472 10,700 36,283 1,000 36,389 10,600 TTB (%) 10,667 41 Nhận xét: Tro tồn phần trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 10,667%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không 35% 3.4.6 Kim loại nặng Kết khảo sát hàm lƣợng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết khảo sát hàm ƣợng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực Hàm ƣợng cao Hàm ƣợng cho phép đặc hoa đu đủ đực Kim loại nặng (mg/kg) (mg/kg) 2+ 5,273.10-4 ≤ 0,05 2+ 6,591.10-4 ≤ 30 2+ 4,502.10-3 ≤ 40 Pb Cu Zn Nhận xét: Hàm lƣợng số kim loại nặng khảo sát cao đặc hoa đu đủ đực dƣới mức cho phép theo định số 46/2007/QĐ-BYT nên không ảnh hƣởng đến sức khỏe ngƣời 3.4.7 Độ pH: Dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực 1% kl/tt) nƣớc phải có pH từ 5,0 đến 6,0 Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nƣớc thể Bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nƣớc Lần đo Trung bình pH 5,610 5,620 5,620 5,610 5,610 5,614 Nhận xét: Độ pH trung bình dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nƣớc 5,614 3.4.8 Định tính: Chế phẩm phải thể phép thử định tính nhóm hợp chất có khả gây độc tế bào ung thƣ từ hoa đu đủ đực 42 Kết định tính nhóm hợp chất có khả gây độc tế bào ung thƣ từ cao đặc hoa đu đủ đực đƣợc thể Bảng 3.9 STT Nhóm chất Saponin Alcaloid Coumarin Thuốc thử đặc hiệu Hiện tƣợng Tạo Phản ứng tạo bọt cột bọt bền Kết Kết luận sơ + Có Mayer Kết tủa trắng +++ Dragendroff Kết tủa cam ++ Wagner Kết tủa nâu ++ Phản ứng đóng mở Tạo dung dịch đục vong lacton Phản ứng Cyanidin Dung dịch chuyển sang + Có Có + màu tím đỏ Flavonoid Dung dịch NaOH 10% Dung dịch chuyển sang + Có màu vàng đậm Dung dịch FeCl3 Dung dịch chuyển sang + màu xanh đen Đƣờng khử Polyphenol Fehling A Fehling Kết B tủa đỏ gạch Dung dịch FeCl3 5% Dung dịch chuyển sang màu xanh ++ Có +++ Có thẫm Dung Thuốc thử Salkowski chuyển dịch sang ++ màu xanh Steroid ứng Dung Phản Lieberman43 chuyển Có dịch sang + Bourchard Chất béo Acid hữu 10 Carotenoid màu xanh lục Hơ nóng cho bay Để lại vết mờ hết dung môi Phản ứng giấy lọc với Không Na2CO3 tinh thể tƣợng Phản ứng với H2SO4 Dung dịch có đậm đặc màu xanh + Có - Khơng có ++ Có Bảng 3.9 Kết định tính nhóm chất cao đặc hoa đu đủ đực Tên mẫu Gram + Gram - Nấm men Nhận xét: Sơ kết luận cao đặc hoa đu đủ đực có chứa hoạt chất: Alcaloid, Flavonoid, saponin, đƣờng khử, polyphenol, steroid, coumarin, carotene, chất béo Ghi chú: Dấu (+) : Phản ứng dƣơng tính (++) : Phản ứng dƣơng tính rõ (+++) : Phản ứng dƣơng tính rõ (-) : Khơng có 3.4.9 Hoạt tính kháng vi sinh vật Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc hoa đu đủ đực đƣợc thể Bảng 3.10 44 Enteroc Staphylo Bacill Escher occus coccus us ichia faecalis aureus cereus coli ATCC2 ATCC25 ATCC ATCC 99212 923 13245 25922 Pseudo monas aerugin osa ATCC2 7853 Salmon ella enterica ATCC1 3076 Candida albicans ATCC10 231 MIC Cao đặc hoa đu đủ 256 - - - - - 128 256 256 128 32 256 128 - 16 64 256 256 - 128 128 64 16 - - - - - - đực Steptomyc ina Tetramyci na Kanamyci na Nistatinb Cyclohexa 32 mideb Bảng 3.10 Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc a Chất đối chứng cho chủng vi khuẩn b Chất đối chứng cho nấm Nhận xét: Kết Bảng 3.10 cho thấy cao đặc hoa đu đủ đực biểu hoạt tính kháng vi khuẩn Enterococcus faecalis (ATCC299212) với giá trị MIC 256 µg/mL có khả ức chế phát triển nấm Candida albicans (ATCC10231) với giá trị MIC 128 µg/mL 3.4.10 Hoạt tính gâ độc tế bào ung thƣ Kết khảo sát hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ cao đặc hoa đu đủ đực đƣợc thể Bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết khảo sát hoạt tính gâ độc tế bào ung thƣ cao đặc hoa đu đủ đực 45 Mẫu N.độ TB sống sót (CS %) (µg/mL) A549 Hep3B % TB sống Sai số % TB sống Control MCF-7 Sai số % TB sống Sai số 100,00 2,40 100,00 1,89 100,00 3,76 Cao đặc hoa 30 58,67 3,12 88,31 2,53 74,04 1,25 đu đủ đực 100 66,47 2,05 63,27 1,71 57,25 3,12 Camptotheci 0,5 µM 76,00 2,27 48,73 1,35 62,82 2,10 n* 10 µM 41,77 1,25 28,27 2,64 42,66 2,08 Camptothecin *: Chất đối chứng dƣơng hoạt động ổn định thí nghiệm Nhận xét: Kết Bảng 3.11 cho thấy cao đặc hoa đu đủ đực thể hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ dòng tế bào ung thƣ phổi A549, ung thƣ gan Hep3B, ung thƣ vú MCF-7 nồng độ 30 µg/mL 100 µg/mL với mức độ khác KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN -Đã định tính sơ lớp chất thƣờng gặp thực vật phản ứng hóa học cho kết quả: mẫu hoa Đu đủ đực dùng nghiên cứu có lớp chất là: alkaloid, flavonoid, saponin steroid, đƣờng khử, polyphenol, sterol, coumarin, polysaccarid, carotene, chất béo - Từ nguyên liệu ban đầu, phƣơng pháp khác thu đƣợc dịch chiết n-hexane Đã thử hoạt độc tế bào dịch chiết n-hexane dòng tế bào ung thƣ phổi A549), ung thƣ gan Hep 3B), ung thƣ vú MCF-7), kết cho thấy phân đoạn dịch chiết n-hexane thể hoạt tính mức trung bình, tác dụng ức chế mạnh lên dòng tế bào A549 với phần trăm tế bào sống sót 29,29±1,73 - Đã định danh sơ thành phần hóa học cao n-hexane phƣơng pháp phổ GC/MS có 13/13 cấu tử đƣợc định danh với hàm lƣợng lớn bao gồm: Error! Reference source not found.– Sitosterol (29,96%); 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z) (15,21%); n-Hexadecanoic acid (12,71%); 16-Pregnen-3,20-dione (12,58%); Stigmasterol (8,44 %);9,10-Dideutero octadecanal (5,32%); Campesterol (5,02%) 46 - Đã xây dựng tiêu chuẩn sở cao chiết ethanol hoa đu đủ đực KIẾN NGHỊ - Phân lập xác định cấu trúc chất phân lập đƣợc từ phân đoạn hoa Đu đủ đực - Thăm dị hoạt tính gây độc tế bào chất phân lập từ hoa đu đủ đực TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [2] Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Hà Nội [3] Nguyễn Văn Đàm, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, Nxb Y học, Hà Nội [4] Trần Thanh Hải (2016) Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học hoa Đu đủ đực, Luận văn Thạc sĩ Dƣợc học, Học viện Quân Y, Bộ Quốc phòng [5] Trần Thanh Hà, Trịnh Thị Điệp 2012), “Hai cycloratane triterpene lần phân lập từ đu đủ (Carica papaya L.)”, Tạp chí hóa học, Tập 50 (4A), tr 166-169 [6] Hồ Thị Hà 2014), Nghiên cứu hoạt tính sinh học số hợp chất chiết tách từ đu đủ Carica papaya Linn), Luận án Tiến sĩ Sinh học, Trƣờng Đại học Bách khoa Hà Nội [7] Giang Thị Kim Liên Đỗ Thị Lệ Uyên (2015), “Khảo sát thành phần hoá học số dịch chiết từ hoa đu đủ đực thu hái Đà Nẵng”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ ĐHĐN, Số 03 (88), tr 119 [8] Đỗ Tất Lợi (1986), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 47 [9] Phạm Kim Mãn cộng (2001), “Nghiên cứu thuốc Panacrin ức chế u dùng điều trị ung thƣ”, Tạp chí dược liệu, (2+3), tr 58-62 [10] Hà Thị Bích Ngọc, Trần Thị Huyền Nga, Nguyễn Văn Mùi 2007), “Điều tra hợp chất carotenoid số thực vật Việt Nam”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 23, tr 130-134 [11] Lê Thị Thanh Phƣơng 2017) Nghiên cứu phân lập số hợp chất từ phân đoạn dịch chiết Chloroform hoa Đu đủ đực thu hái Quảng Nam-Đà Nẵng, Luận văn Thạc sĩ Hóa Hữu cơ, Trƣờng Đại học Sƣ phạm, Đại học Đà Nẵng [12] Nguyễn Văn Rƣ, Vũ Quang Thái 2013), “Tách chiết chymopapain từ nhựa đu đủ xanh (Carica papaya L.) chế thử thành dạng bột để pha tiêm” Tạp chí Hóa học, 50.6, tr 767-771 [13] Đỗ Thị Thảo (2006), Nghiên cứu xác định khả phòng chống ung thư chất hóa học số thuốc Việt Nam, Luận án Tiến sĩ Sinh học [14] Trần Thế Tục, Đoàn Thế Lƣ 2004), Cây đu đủ kỹ thuật trồng, Nxb Lao động Xã hội, Hà Nội [15] Nguyễn Tƣờng Vân, Đặng Hồng Vân, Phạm Gia Khôi, Trần Mạnh Bình, Phan Quốc Kinh (1983), “Chiết xuất xác định carpaine alkaloid Đu đủ”, Tạp chí dược học, số Tiếng Anh [16] Okunola A., Alabi, Muyideen T Haruna, Chinedu P Anokwuru, Tomisin Jegede, Harrison Abia, Victor U Okegbe and Babatunde E Esan (2012), “Comparative studies on antimicrobial properties of extracts of fresh and dried leaves of Carica papaya (L) on clinical bacterial and fungal isolates, Pelagia Research Library”, Advances in Applied Science Research, 3(5), pp 3107-3114 [17] Maisarah A.M., Nurul Amira B., Asmah R and Fauziah O 2013), “Antioxidant analysis of different parts of Carica papaya L.”, International Food Research Journal, 20(3), pp 1043-1048 [18] Ikeyi Adachukwu, Ogbonna O and Eze Faith V 2013), “Phytochemical analysis of paw paw (Carica papaya) leaves”, International Journal of Life Sciences Biotechnology and Pharma Research, Vol 2(3), pp 346-351 48 [19] Eno AE, Owo OI, Itam EH, Konya RS (2000), “Blood pressure depression by the fruit juice of Carica papaya L in renal and DOCA-induced hypertension in the rat”, Phytother Res, Jun; 14(4):235-9 [20] Adlin Afzan, Noor Rain Abdullah, Siti Zaleha Halim, Badrul Amini Rashid 2012), “Repeated dose 28 days oral toxicity study of Carica papaya L leaf extract in Sprague dawley rats”, Molecules 2012, 17, pp 4326-4342 [21] Adeolu Alex, Adedapo and Vivian Eguonor, Orherhe 2013), “Antinociceptive and anti-inflammatory studies of the aqueous leaf extract of Carica papaya in laboratory animals” Asian J.EXP.BIOL.SCI, Vol 4(1), pp 89-96 [22] Moses Alo, Ukpai Agwu Eze, Chukwudi Anyim (2012), “Invitro antimicrobial activities of extracts of magnifera indica, carica papaya and psidium guajava leaves on salmonella typhi isolates”, World J Public Health Sciences, 1(1):1 [23] Antonella Canini, Daniela Alesiani, Giuseppe D’Arcangelo, Pietro Tagliatesta (2007), “Gas chromatography-mass spectrometry analysis of phenolic compounds from Carica papaya L leaf”, Journal of food composition and analysis, Vol 20, pp 584-590 [24] Stephen Chinwendu, Ukpabi Emmanuel O., Chukwu Henry C., Ezikpe Chizaram (2015), Chemical Composition Of Carica Papaya Flower (Paw-Paw), International Journal of Scientific Research and Engineering Studies (IJSRES), Volume 2, Issue [25] Sunday Ahamefula Ezekwe and Paul Chidoka Chikezie 2017), “GC-MS Analysis of Aqueous extract of Unripe fruit of Carica papaya”, Journal of Nutrion & Food Sciences, 7:3, pp 2-5 [26] Satrija F, Nansen P, Bjorn H, Murtini S, He S., 1994), “Effect of papaya latex against Ascaris suum in naturally infected pigs”, J Helminthol Dec, 68(4):343-6 [27] Sheikh Fauziya and R Krishnamurthy 2013), “Papaya Carica papaya): Source material for anticancer”, CIB Tech Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 2(1), pp 25-34 [28] Aravind G., Debjit Bhowmik, Duraivel S., Harish G (2013), “Traditional and medicinal uses of carica papaya”, Journal of medicinal plants studies, Vol 1, Issue 1, pp 7-15 [29] Ayoola G.A., Coker H.A.B., Adesegun S.A., Adepoju-Bello A.A., Obaweya K., Ezennia E.C., Atangbayila T.O 2008), “Phytochemical screening and antioxidant 49 activities of some selected medicinal plants used for malaria therapy in southwestern Nigeria”, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 7(3), pp 1019-1024 [30] Srikanth G.S., Manohar Babu S., Kavitha CH.N., Bhanoji Rao M.E., Vijaykumar N., Pradeep CH 2010), “Studies on in - vitro antioxidant activities of Carica papaya aqueous leaf extract”, Research journal of pharmaceutical, Biological and Chemical sciences, Vol 1, pp 59-65 [31] Krishna K.L., Paridhavi M and Jagruti A Patel 2008), “Review on nutritional, medicinal and pharmacological properties of papaya (Carica papaya Linn.)”, Natural product radiance, Vol 7(4), pp 364-373 [32] K Kayalvizhi, Dr L Cathrine K Sahira Banu 2015), “Phytochemical and antibacterial studies on the leaf extracts of female Carica papaya.linn”, International Journal of PharmTech Research, Vol 8(7), pp 166-170 [33] Marline Nainggolan and Kasmirul 2015), “Cytotoxicity activity of male Carica papaya L flowers on MCF-7 breast cancer cells” Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 7(5), pp 772-775 [34] Thao T T Nguyen, Paul N Shaw, Marie-Odile Parat and Amitha K Hewavitharana 2013), “Anticancer activity of Carica papaya: A review”, Mol.Nutr.Food Res, 57, pp 153-164 [35] T Oduola, T.O Idowu, I.S Bello, F.A Adeniyi, E.O Ogunyemi (2012), “Heamatological respone to intake of unpripe Carica papaya fruit extract and the isolation and characterization of Caricapinoside: A new antisickling agent from the extract”, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, Vol 5(3), pp 77-81 [36] Noriko Otsuki, Nam H Dang, Emi Kumagai, Akira Kondo, Satoshi Iwata, Chikao Morimoto 2010), “Aqueous extract of Carica papaya leaves exhibits anti tumor activity and immunomodulatory effects”, Journal of Ethnopharmacology, 127, pp 760 - 767 [37] Aysun ozkan, Hamide gubbuk, Esma gunes, Ayse erdogan 2011), “Antioxidant capacity of juice from different papaya (Carica papaya L.) cultivars grown under greenhouse conditions in Turkey”, Turk J Biol, 35(2011), pp 619-625 [38] Giordani R., Cardenas M.L., Moulin-Traffort J., Regli P., 1996), “Fungicidal activity of latex sap from Carica papaya and antifungal effect of D(+)-glucosamine on Candida albicans growth” Mycoses, 39, pp 103-110 50 [39] John R., Van 1998), “Mechanism of Action of Non Stervidal Anti inflammatory Drug”, The American Jour of Med March 30, Vol 104 (3A), pp 2s-3s [40] Kermanshai R, McCarry BE, Rosenfeld J, Summers PS, Weretilnyk EA, Sorger GJ 2001), “Benzyl isothiocyanate is the chief or sole anthelmintic in papaya seed extracts”, Phytochemistry, Jun; 57(3):427-35 [41] Asmah Rahmat, Rozita Rosli, Wan Nor I`zzah Wan Mohd Zain, Susi Endrini and Huzaimah Abdullah Sani (2002), “Antiproliferative Activity of Pure Lycopene Compared to Both Extracted Lycopene and Juices from Watermelon (Citrullus vulgaris) and Papaya (Caricapapaya) on Human Breast and Liver Cancer Cell Lines”, Journal of Medical Sciences, Vol 2, Issue 2, pp 55-58 [42] Rumiyati, Sismindari dan Ariyani (2006), “Effect of protein fraction of Carica papaya L leaves on the expressions of p53 and Bcl-2 in breast cancer cells line”, Majalah Farmasi Indonesia, 17(4), pp 170-176 [43] David S., Seigler, Guido F., Pauli, Adolf Nahrstedt, Rosemary Leen (2002), “Cyanogenic allosides and glucosides from passiflora edulis and carica papaya”, Phytochemistry, Vol 60, pp 873-882 [44] Rahman S., Imran M., Muhammad N., Hassan N., Chisthi A.K., Khan A.F., Sadozai K.S and Khan S.M 2011), “Antibacetial screening of leaves and stem of Carica papaya L.”, Journal of Medicinal Plants Research, Vol 5(20), pp 5167-5171 [45] Govindachari T.R., Naga rajan K and Viswanathan N (1965), “Carpaine and pseudocarpaine”, Tetrahedron letters, No 24, pp 1907-1916 [46] Chung-Shih Tang (1979), “New macrocyclic Δ1–piperideine alkaloids from papaya leaves: dehydrocarpaine I and II”, Phytochemistry, Vol 18, pp 651-652 [47] Ashok Kumar U., Manjunath C., Thaminzhmani T., Ravi Kiran Y., Brahmaiah Y 2012), “A review on immunomodulatory activity plants”, Indian Journal of Novel Drug delivery, 4(2), pp 93-103 [48] Bamidele V, Owoyele, Olubori M, Adebukola, Adeoye A, Funmilayo and Ayodele O, Soladoye (2008), “Anti-inflammatory activities of ethanolic extract of Carica papaya leave”, Inflammopharmacology, 16, pp 168-173 [49] Abrham W.B., (1978), Techniques of Animal and Clinical toxicology, Med Pub, Chicago 51 [50] Vijay Yogiraj 2014), “Carica papaya Linn: An Overview ”, International Journal of Herbal Medicine, Vol 2(5), pp 1-8 52 ...ĐẠI HỌC ĐÀ N? ??NG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUY? ?N ĐÌNH TÙNG NGHI? ?N CỨU THÀNH PH? ?N HĨA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PH? ?N ĐO? ?N N -HEXANE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHU? ?N CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC... N? ??ng” 2 Mục tiêu nghi? ?n cứu Xác định thành ph? ?n hóa học, hoạt tính gây độc tế bào ph? ?n đo? ?n n- hexane xây dựng tiêu chu? ?n sở cao chiết ethanol hoa đu đủ đực, góp ph? ?n cung cấp thơng tin có ý nghĩa... bệnh ung thƣ Do đó, tơi lựa ch? ?n đề tài: ? ?Nghi? ?n cứu thành ph? ?n hóa học, hoạt tính gây độc tế bào ph? ?n đo? ?n n- hexane xây dựng tiêu chu? ?n sở cao chiết ethanol hoa Đu đủ đực thu hái Quảng Nam – Đà