Khảo sát thành phần hóa học trong cao ethyl acetate của cây euphorbia antiquorum

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Thanh Nhã KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY EUPHORBIA ANTIQUORUM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Thành phố Hồ Chí Minh - 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Thanh Nhã KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY EUPHORBIA ANTIQUORUM Chuyên ngành : Hóa hữu Mã số : 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS DƯƠNG THÚC HUY Thành phố Hồ Chí Minh - 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi tên Trần Thanh Nhã, học viên cao học chun ngành Hóa hữu Tơi xin cam đoan luận văn Thạc sĩ: “Khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate Euphorbia antiquorum” thực hướng dẫn TS Dương Thúc Huy, với số liệu kết nghiên cứu luận văn tự tơi tìm hiểu cách trung thực, khách quan Theo hiểu biết tài liệu tham khảo, kết nghiên cứu luận văn chưa công bố nghiên cứu khác TP Hồ Chí Minh, tháng 12 năm 2020 Tác giả luận văn Trần Thanh Nhã LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Dương Thúc Huy, giảng viên hướng dẫn đề tài luận văn tôi, giảng viên nhiệt tâm, tận tình giúp đỡ tơi từ bước chập chững đến với mơn Hóa hữu Sự tâm huyết Thầy động lực lớn giúp tơi hồn thành luận văn thạc sĩ ngày hôm Tôi xin chân thành cảm ơn đến PGS.TS Warinthorn Chavasiri, giảng viên trường đại học Chulalongkorn Vương quốc Thái Lan học bổng ASEAN tạo hội thực tập Thái Lan Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Thầy, Cơ Ban Chủ nhiệm khoa Hóa học; Thầy, Cơ Bộ mơn Hóa hữu cơ, Phòng Sau Đại học, Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh Các Thầy, Cơ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi để hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn học viên lớp Hóa hữu K29, bạn làm việc phịng thí nghiệm Hóa Hữu giúp đỡ động viên để tơi hồn thành luận văn cách suôn sẻ Cuối cùng, xin gửi lời tri ân đến gia đình, bạn bè quan tâm giúp đỡ động viên thời gian nghiên cứu đề tài vừa qua TP Hồ Chí Minh, tháng 12 năm 2020 Trần Thanh Nhã MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt kí hiệu Danh mục bảng Danh mục hình ảnh Danh mục sơ đồ Danh mục công bố MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Euphorbia 1.2 Mô tả Euphorbia antiquorum L 1.2.1 Giới thiệu chung Euphorbia antiquorum 1.2.2 Mô tả thực vật Euphorbia antiquorum 1.3 Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học chi Euphorbia Euphorbia antiquorum 1.3.1 Thành phần hóa học 1.3.2 Dược tính 12 Chương THỰC NGHIỆM 15 2.1 Hóa chất, dụng cụ, phương pháp tiến hành 15 2.1.1 Hóa chất 15 2.1.2 Dụng cụ 15 2.1.3 Phương pháp tiến hành 15 2.2 Thử nghiệm hoạt tính sinh học 15 2.2.1 Thử nghiệm độc tính tế bào 17 2.2.2 Thử nghiệm ức chế enzyme alpha-glucosidase 17 2.3.Quy trình phân lập hợp chất từ cao ethyl acetate 15 2.3.1 Nguyên liệu 17 2.3.2 Điều chế cao ethyl acetate 17 2.3.3 Quy trình phân lập 18 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Khảo sát cấu trúc 22 3.1.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA1 22 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA2 26 3.1.3 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA3 29 3.1.4 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA4 32 3.1.5 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA5 37 3.1.6 Khảo sát cấu trúc hợp chất EA6 40 3.2 Hoạt tính sinh học 43 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU Ac Acetone AcOH Acid acetic C Chloroform COSY Correlation spectroscopy EA Ethyl acetate H n-Hexane HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation HR-ESI-MS High Resolution ElectroSpray Ionization-Mass Spectrometry NMR Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy NOESY Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy IC50 Half Maximal Inhibitory Concentration JMOD J-modulated spin-echo RP Reverse phase Proton Nuclear Magnetic Resonance H-NMR 13 C-NMR Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance s Singlet d Doublet t Triplet m Multiplet DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số hợp chất phân lập từ chi Euphorbia Euphorbia antiquorum L .7-8 Bảng 3.1 So sánh liệu phổ 1H 13 C-NMR hợp chất EA1 với ent- 1,3,16,17-tetrahydroxyatisane 25 Bảng 3.2 So sánh liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất EA2 với 3β-O-acetylent-atisane-16α, 17-diol 28 Bảng 3.3 So sánh liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất EA3 EA1 31 Bảng 3.4 So sánh liệu phổ 1H 13 C-NMR hợp chất EA4 với ent- 1β,3α,16β,17-tetrahydroxyatisane 34 Bảng 3.5 So sánh liệu phổ 1H-NMR hợp chất EA1-4 CD3OD 35 Bảng 3.6 So sánh liệu phổ 13C-NMR hợp chất EA1-4 CD3OD 36 Bảng 3.7 So sánh liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất EA5 với 20-deoxy-16hydroxyingenol 39 Bảng 3.8 So sánh liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất EA6 với ingol 12-acetate euphorantin I 42 Bảng 3.9 Giá trị IC50 chất phân lập 43 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Các thuộc chi Euphorbia phổ biến sống Hình 1.2 Cây hoa Euphorbia antiquorum Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất từ chi Euphorbia E antiquorum 9-12 Hình 3.1 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập 24 Hình 3.2 Cấu trúc hóa học chất EA1 24 Hình 3.3 Tương quan HMBC, COSY, NOESY EA1 27 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học EA1 ent-1β,3α,16β,17-tetrahydroxyatisane 27 Hình 3.5 Cấu trúc hóa học EA2 3β-O-acetyl-ent-atisane-16α,17-diol 27 Hình 3.6 Tương quan HMBC, COSY, NOESY EA2 27 Hình 3.7 Cấu trúc hóa học chất EA3 30 Hình 3.8 Tương quan HMBC, COSY, NOESY EA3 30 Hình 3.9 Cấu trúc hóa học EA4 ent-1β,3α,16β,17-tetrahydroxyatisane 38 Hình 3.10 Tương quan HMBC, COSY, NOESY EA4 33 Hình 3.11 Cấu trúc hóa học của hợp chất EA1-4 36 Hình 3.12 Cấu trúc hóa học hợp chất EA5 38 Hình 3.13 Tương quan HMBC, COSY, NOESY EA5 38 Hình 3.14 Cấu trúc hóa học EA6 euphorantin I 41 Hình 3.15 Tương quan HMBC hợp chất EA6 41 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quá trình phân lập chất cao ethyl acetate 20 Sơ đồ 2.2 Quá trình phân lập chất cao ethyl acetate (tiếp theo) 21 PL21 HRESIMS m/z: [M+Na]+ 361.2336 (calcd for C20H34O4Na, 361.2355) Phụ lục 22 Phổ HRESIMS EA4 PL22 Phụ lục 23 Phổ 1H NMR EA4 CD3OD PL23 Phụ lục 24 Phổ 13C NMR EA4 CD3OD PL24 Phụ lục 25 Phổ HSQC EA4 CD3OD PL25 Phụ lục 26 Phổ HMBC EA4 CD3OD PL26 Phụ lục 27 Phổ COSY EA4 CD3OD Phụ lục 28 Phổ NOESY EA4 CD3OD PL27 HRESIMS m/z: [M+Na] + 371.1795 (calcd for C20H28O5Na, 371.1834) Phụ lục 29 Phổ HRESIMS EA5 Phụ lục 30 Phổ 1H NMR EA5 CD3OD PL28 Phụ lục 31 Phổ 13C NMR EA5 CD3OD PL29 Phụ lục 32 Phổ HSQC EA5 CD3OD PL30 Phụ lục 33 Phổ HMBC EA5 CD3OD Phụ lục 33 Phổ COSY EA5 CD3OD PL31 Phụ lục 35 Phổ NOESY EA5 CD3OD Phụ lục 36 Phổ HRESIMS hợp chất EA6 CD3OD PL32 Phụ lục 37 Phổ 1H-NMR hợp chất EA6 CD3OD PL33 Phụ lục 38 Phổ 13C-NMR giãn rộng hợp chất EA6 CD3OD PL34 Phụ lục 39 Phổ HSQC hợp chất EA6 CD3OD PL35 Phụ lục 40 Phổ HMBC hợp chất EA6 CD3OD ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Thanh Nhã KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY EUPHORBIA ANTIQUORUM Chuyên ngành : Hóa hữu Mã số : 8440114... tồn Cây hoa từ tháng đến tháng [1] 1.3 Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học chi Euphorbia Euphorbia antiquorum 1.3.1 Thành phần hóa học Thực vật thuộc họ Euphorbiaceae tiếng đa dạng hóa học thành. .. nghiên cứu sâu Một số báo Euphorbia antiquorum nghiên cứu từ lâu chưa thật đầy đủ Vì vậy, tơi định chọn đề tài ? ?Khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate Euphorbia antiquorum? ?? làm đề tài nghiên