Nghiên cứu tạo dung dịch keo bạc nano để phòng trừ bệnh rụng lá corynespora trên cây cao su do nấm corynespora cassiicola

LỜI CAM ĐOAN Tác giả xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân tác giả Các kết nghiên cứu kết luận luận án trung thực không chép từ nguồn dƣới hình thức Tác giả luận án Lê Thị An Nhiên i TÓM TẮT LUẬN ÁN Đề tài “Nghiên cứu tạo dung dịch keo bạc nano để phòng trừ bệnh rụng Corynespora cao su nấm Corynespora cassiicola” đƣợc thực từ tháng 09/2011 đến tháng 01/2018 Bộ môn Công nghệ sinh học – Đại học Bách khoa Thành phố Hồ Chí Minh, Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai Trung tâm Công nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh Mục tiêu đề tài tìm hiểu bệnh rụng Corynespora cao su nấm Corynespora cassiicola gây tìm phƣơng pháp tạo chế phẩm phịng trừ bệnh rụng Corynespora có hiệu phịng thí nghiệm cao su vƣờn ƣơm Nội dung đề tài bao gồm: Phân lập khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng lên sinh trƣởng nấm C cassiicola, từ tìm biện pháp phịng chống chúng; Khảo sát khả ức chế nấm C cassiicola vi khuẩn Bacillus subtilis Bacillus thuringiensis; Khảo sát khả tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis; Chế tạo dung dịch keo bạc nano - chitosan phƣơng pháp chiếu xạ; Khảo sát hiệu lực ức chế nấm C cassiicola dung dịch keo bạc nano điều kiện in vitro; Khảo sát khả phòng trị bệnh rụng Corynespora cao su vƣờn ƣơm dung dịch keo bạc nano - chitosan với kích thƣớc hạt bạc nano 10 nm Kết đạt đƣợc nhƣ sau: Đã phân lập đƣợc chủng nấm C cassiicola xác định đƣợc số đ c tính sinh trƣởng nấm C cassiicola nhƣ phát triển sinh bào tử tốt môi trƣờng thạch cao su pH 6,5, nhiệt độ 29°C Đã tạo đƣợc chế phẩm có khả ức chế diệt nấm C cassiicola gồm Huyền phù B subtilis với mật độ vi khuẩn 2,2  109 tế bào/ml; Huyền phù B thuringiensis với mật độ vi khuẩn 1,6  109 tế bào/ml; Dung dịch keo bạc nano đƣợc tổng hợp từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis có kích thƣớc hạt trung bình từ nm đến 12 nm, thời gian ổn định 20 ngày; Dung dịch keo bạc nano - chitosan đƣợc chế tạo phƣơng pháp chiếu xạ có kích thƣớc hạt từ nm đến 15 nm, thời gian ổn định 12 tháng Trong điều kiện in vitro, hiệu lực ức chế nấm C cassiicola huyền phù B subtilis B thuringiensis lần lƣợt 45,67 33,04 ii ; Dung dịch keo bạc nano đƣợc tổng hợp từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis nồng độ 90 ppm đạt 66,30 %, dung dịch keo bạc nano - chitosan nồng độ 50 ppm đạt từ 52,08 đến 100,00 kích thƣớc hạt bạc nano trung bình giảm từ 15 nm xuống nm Tại nồng độ 90 ppm, dung dịch keo bạc nano - chitosan với kích thƣớc hạt 10 nm có hiệu lực ức chế nấm đạt 100,00 %, cao dung dịch keo bạc nano đƣợc tổng hợp từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis với kích thƣớc hạt bạc nano trung bình nm (đạt 66,30 %) Trong điều kiện vƣờn ƣơm, dung dịch keo bạc nano - chitosan với kích thƣớc hạt trung bình 10 nm có hiệu lực phịng bệnh tốt nồng độ 2,5 ppm với t lệ bị nhi m bệnh 34,27 sau 28 ngày chủng bệnh có hiệu lực trị bệnh tốt nồng độ 12,5 ppm với t lệ cao su bị nhi m bệnh giảm từ 50,00 6,67 %; cao su bị nhi m bệnh giảm từ 50,00 xuống 6,75 giảm từ 22,13 % xuống 15,03 % sau 28 ngày xử lý dung dịch iii xuống ch số bệnh ABSTRACT The thesis title: “Study on synthesis of silver nanoparticles solution for controlling Corynespora leaf fall disease on rubber trees causing by Corynespora cassiicola” was carried out at the Department of Biotechnology, Dong Nai Biotechnology Application Center and Biotechnology Center of Ho Chi Minh City from September 2011 to January 2018 The objective of the thesis is studying Corynespora leaf fall disease on rubber trees causing by Corynespora cassiicola and finding a method to create a product to defence and eliminate Corynespora leaf fall disease effectively in the laboratory and on rubber trees in nurseries The contents of this research including: Isolation and investigation of a number of factors affecting the growth of C cassiicola, thereby finding ways to prevent them; Investigating the ability of Bacillus subtilis and Bacillus thuringiensis to inhibit C cassiicola; Investigation of the ability to biosynthesize silver nanoparticles from B subtilis intracellular fluid; Synthesis silver nanoparticles/chitosan by gamma ray irradiation method; Investigating the effective inhibition of C cassiicola of silver nanoparticles solution in in vitro conditions; Survey of the ability to prevent and treat Corynespora leaf fall disease on rubber trees in nurseries with silver nanoparticles/chitosan with 10 nm silver nanoparticles size The results showed that: C cassiicola was isolated and some growth characteristics of C cassiicola were identified as development and the best spore growth on rubber leaf agar media at pH 6.5, temperature of 29 ° C Four types of biological product against C cassiicola were created, including B subtilis suspension with a bacterial density of 2.2  109 cells/ml; B thuringiensis suspension with a bacterial density of 1.6  109 cells/ml; The silver nanoparticles solution systhesized from B subtilis intracellular fluid had an average particle size from to 12 nm, with the stabilization being about 20 days; The silver nanoparticles/chitosan solution had an average particle size from to 15 nm, with the stabilization being about 12 months iv In in vitro conditions, C cassiicola resistance of B subtilis and B thuringiensis were 45.67 % and 33.04 %, respectively The antifungal effect of silver nanoparticles solution systhesized from B subtilis intracellular fluid was 66.30 % at 90 ppm The antifungal effect of silver nano particles/chitosan solution reached from 52.08 % to 100.00 % when silver nanoparticle size decreased from 15 to nm, at a concentration of 50 ppm At the 90 ppm of concentration, the antifungal effect of silver nanoparticles/chitosan solution with an average particle size 10 nm (reached 100.00 %) was slightly higher than the silver nanoparticles solution systhesized from B subtilis intracellular fluid with an average particle size nm (reached 66.30 %) In in vivo conditions, the treatment of AgNPs /chitosan solution with an average particle size 10 nm was the best preventative effect at a concentration of 2.5 ppm with the infected leaves of 34.27 % after 28 days of C cassiicola infection (defence effect) For the elimination effect, the treatment of AgNPs /chitosan solution at a concentration of 12.5 ppm was able to reduce from 50.00 % to 6.67 % of infected leaves; from 50,00 % to 6.75 % of infected trees and from 22.13 % to 15.03 % of infection index after 28 days of treatment v LỜI CẢM ƠN Đầu tiên muốn bày tỏ lòng biết ơn đến Cha, Mẹ, ngƣời nuôi nấng, dạy dỗ con, tạo điều kiện niềm tin để có đủ nghị lực vƣợt qua khó khăn sống trƣởng thành nhƣ ngày hôm Con xin mãi trân trọng khắc ghi cơng ơn Cha, Mẹ Với lịng biết ơn sâu sắc, em xin cảm ơn Thầy PGS TS Nguy n Đức Lƣợng; Cô PGS TS Lê Thị Thủy Tiên; Thầy PGS TS Lê Quang Luân Anh Trần Tây Sơn tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt cho em kiến thức vô quý báu; giúp em vƣợt qua khó khăn suốt q trình làm Luận án Em xin gửi lời cảm ơn đến Ban Giám hiệu Trƣờng, thầy, Phịng Đào tạo Sau đại học, Ban Chủ nhiệm Khoa Kỹ thuật Hóa học, Bộ môn Công nghệ sinh học tạo điều kiện tốt trình học tập, nghiên cứu bảo vệ Luận án Em xin chân thành cảm ơn Cô PGS TS Nguy n Thúy Hƣơng, TS Huỳnh Ngọc Oanh truyền đạt cho em kiến thức quý báu giúp đỡ em khóa học Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Lãnh đạo Trung tâm Cơng nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh, Lãnh đạo Phịng tồn thể anh, chị, em Phịng Cơng nghệ sinh học Vật liệu Nano - Trung tâm Công nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện hỗ trợ em suốt trình thực Luận án Em xin cảm ơn Ban Lãnh đạo Sở Khoa học Công nghệ t nh Đồng Nai, Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai tạo điều kiện cho em suốt khóa học Em xin trân trọng gửi lời cảm ơn Thầy, Cô Hội đồng đánh giá Luận án cấp, đóng góp nhiều ý kiến quý báu để Luận án đƣợc hoàn ch nh Xin chân thành biết ơn! Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 Nghiên cứu sinh Lê Thị An Nhiên vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i TÓM TẮT LUẬN ÁN ii ABSTRACT iv LỜI CẢM ƠN vi MỤC LỤC vii DANH MỤC CÁC HÌNH xii DANH MỤC BẢNG .xv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT xvi MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1.1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tổng quan cao su 1.1.1 Đ c điểm sinh học cao su 1.1.2 Tình hình phát triển cao su 1.1.3 Một số bệnh hại cao su 1.2 Tổng quan bệnh rụng Corynespora nấm Corynespora cassiicola gây cao su 1.2.1 Sơ lƣợc bệnh rụng Corynespora 1.2.2 Đ c điểm nhận diện bệnh rụng Corynespora 1.2.3 Một số nghiên cứu bệnh rụng Corynespora cao su .12 1.3 Tổng quan nấm Corynespora cassiicola 14 1.3.1 Đ c điểm phân loại nấm C cassiicola .14 1.3.2 Lịch sử phát nấm C cassiicola 14 1.3.3 Hình thái học đ c điểm sinh học nấm C cassiicola 15 1.4 Tổng quan công nghệ nano 16 1.4.1 Khái niệm khoa học, công nghệ vật liệu nano .16 1.4.2 Cơ sở khoa học công nghệ nano 17 1.4.2.1 Hiệu ứng bề mặt 17 1.4.2.2 Kích thước tới hạn 17 1.4.2.3 Chuyển tiếp từ tính chất cổ điển đến tính chất lượng tử 17 1.4.3 Các phƣơng pháp chế tạo vật liệu nano 17 vii 1.4.3.1 Phương pháp từ xuống 17 1.4.3.2 Phương pháp từ lên 18 1.4.4 Hạt nano kim loại phƣơng pháp chế tạo hạt nano kim loại 18 1.4.4.1 Hạt nano kim loại 18 1.4.4.2 Các phương pháp chế tạo hạt nano kim loại 18 1.4.5 Tổng quan bạc nano .19 1.4.5.1 Bạc nano 19 1.4.5.2 Tính chất kháng khuẩn bạc nano 21 1.5 Tổng hợp nano bạc phƣơng pháp sinh học .23 1.5.1 Tổng quan tổng hợp nano bạc phƣơng pháp sinh học 23 1.5.2 Tổng quan vi khuẩn Bacillus subtilis 25 1.5.2.1 Đặc điểm phân loại học vi khuẩn B subtilis 25 1.5.2.2 Khả kháng vi sinh vật củ vi khuẩn 1.5.3 subtilis 26 Tổng quan vi khuẩn Bacillus thuringiensis 27 1.5.3.1 Đặc điểm phân loại học vi khuẩn B thuringiensis 27 1.5.3.2 Khả kháng vi sinh vật vi khuẩn B thuringiensis 28 1.5.4 Một số nghiên cứu nƣớc tổng hợp bạc nano nhờ vi khuẩn 28 1.6 Chế tạo dung dịch keo bạc nano phƣơng pháp chiếu xạ 30 1.6.1 Giới thiệu công nghệ xạ 30 1.6.2 Chế tạo bạc nano phƣơng pháp chiếu xạ 30 1.6.3 Vai trò chất ổn định dung dịch keo bạc nano 32 1.6.4 Một số nghiên cứu tính ức chế nấm dung dịch keo bạc nano đƣợc chế tạo phƣơng pháp chiếu xạ 34 CHƢƠNG 2.1 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 37 Vật liệu, hóa chất thí nghiệm 37 2.1.1 Vật liệu thí nghiệm 37 2.1.2 Hóa chất thí nghiệm 37 2.2 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 38 2.2.1 Phân lập khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng nấm C cassiicola gây bệnh rụng Corynespora cao su 38 viii 2.2.1.1 Thu mẫu cao su bị bệnh r ng Corynespora, phân lập nấm C cassiicola 38 2.2.1.2 Khảo sát ảnh hưởng củ môi trường nuôi cấ khác nh u l n khả sinh trưởng nấm C cassiicola hình thành bào tử củ nấm C cassiicola 39 2.2.1.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ l n khả sinh trưởng nấm C cassiicola 39 2.2.1.4 Khảo sát ảnh hưởng củ p l n khả sinh trưởng nấm C cassiicola 39 2.2.2 Khảo sát khả ức chế nấm C cassiicola vi khuẩn B subtilis B thuringiensis 40 2.2.3 Khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến trình tổng hợp bạc nano nhờ vi khuẩn Bacillus subtilis 42 2.2.3.1 Khảo sát khả tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào xác tế bào vi khuẩn B subtilis 42 2.2.3.2 Khảo sát ảnh hưởng củ p đến trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis 43 2.2.3.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội o vi khuẩn su tilis 43 2.2.3.4 Khảo sát độ ổn định dung dịch keo bạc nano tổng hợp từ dịch nội o vi khuẩn su tilis theo thời gi n 44 2.2.4 Chế tạo dung dịch keo bạc nano-chitosan phƣơng pháp chiếu xạ 44 2.2.4.1 Xác định liều xạ bão hòa dung dịch nồng độ bạc nitrate khác 44 2.2.4.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ chitos n l n kích thước hạt bạc nano 45 2.2.4.3 Khảo sát ảnh hưởng khối lượng phân tử chitos n l n kích thước hạt bạc nano 46 2.2.4.4 Khảo sát ảnh hưởng củ độ deacetyl củ chitos n l n kích thước hạt bạc nano 46 2.2.4.5 Khảo sát độ ổn định dung dịch keo bạc nano - chitosan theo thời gian 47 2.2.5 Khảo sát hiệu lực ức chế nấm C cassiicola dung dịch keo bạc nano điều kiện in vitro 47 2.2.6 Khảo sát khả phòng trị bệnh rụng Corynespora cao su vƣờn ƣơm dung dịch keo bạc nano - chitosan .49 ix 2.2.6.1 Khảo sát khả ph ng bệnh r ng Corynespora cao su vườn ươm dung dịch keo bạc nano - chitosan 49 2.2.6.2 Khảo sát khả trị bệnh r ng Corynespora cao su vườn ươm dung dịch keo bạc nano - chitosan 51 2.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu .52 2.4 Nơi thực thí nghiệm 53 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 54 3.1 Phân lập khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng nấm C cassiicola gây bệnh rụng Corynespora cao su 54 3.1.1 Thu mẫu cao su bị bệnh rụng Corynespora, phân lập nấm C cassiicola 54 3.1.2 Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy khác lên sinh trƣởng hình thành bào tử nấm C cassiicola 57 3.1.3 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên sinh trƣởng nấm C cassiicola 60 3.1.4 Ảnh hƣởng pH môi trƣờng nuôi cấy lên sinh trƣởng nấm C cassiicola 63 3.2 Khảo sát khả ức chế nấm C cassiicola vi khuẩn B subtilis B thuringiensis 65 3.3 Một số yếu tố ảnh hƣởng tới trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis 67 3.3.1 Quá trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào xác tế bào vi khuẩn B subtilis .67 3.3.2 Ảnh hƣởng pH đến trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis 69 3.3.3 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến trình tổng hợp bạc nano từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis 72 3.3.4 Thời gian ổn định dung dịch keo bạc nano đƣợc tổng hợp từ dịch nội bào vi khuẩn B subtilis 76 3.4 Chế tạo dung dịch keo bạc nano - chitosan phƣơng pháp chiếu xạ 77 3.4.1 Liều xạ bão hòa dung dịch bạc có nồng độ bạc nitrate khác .77 3.4.2 Ảnh hƣởng nồng độ chitosan lên kích thƣớc hạt bạc nano 81 3.4.3 nano Ảnh hƣởng khối lƣợng phân tử (Mw) chitosan lên kích thƣớc hạt bạc 82 x 100.0000 Total 21 34.2700 2.78609 1.60855 00000 00000 55.6657 34.05752 7.43196 27.3490 41.1910 31.10 36.33 100.0000 100.0000 100.00 100.00 40.1629 71.1685 00 100.00 Trắc nghiệm phân h ng CCC Duncan Subset for alpha = 0.05 NT N Sig 3 3 3 3 131.4167 132.0833 1.324323 132.6167 133.7167 134.1833 137.0500 137.1167 063 CB Duncan nt Sig N 3 3 3 3 0000 Subset for alpha = 0.05 53.3333 63.3333 1.000 1.000 1.000 100.0000 100.0000 100.0000 100.0000 100.0000 1.000 LB Duncan nt Sig N 3 3 3 3 0000 Subset for alpha = 0.05 34.2700 42.8900 51.1433 61.3567 1.000 1.000 1.000 154 1.000 1.000 100.0000 100.0000 100.0000 1.000 Phụ lục 6: Thí nghiệm tr bệnh  Ngày Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N LB CB CCC Mean Std Deviation Std Error Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 50.3233 2.28040 1.31659 44.6585 55.9882 48.76 52.94 3 51.5400 3.19944 1.84720 43.5922 59.4878 48.12 54.46 49.8100 2.99505 1.72919 42.3699 57.2501 47.20 53.08 50.2167 2.65108 1.53060 43.6310 56.8023 47.35 52.58 51.7433 2.61920 1.51220 45.2369 58.2498 49.68 54.69 50.1933 1.49474 86299 46.4802 53.9065 48.61 51.58 51.2333 2.79859 1.61577 44.2812 58.1854 48.12 53.54 Total 24 44.3825 17.27129 3.52549 37.0895 51.6755 00 54.69 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 50.0000 00000 00000 50.0000 50.0000 50.00 50.00 3 50.0000 00000 00000 50.0000 50.0000 50.00 50.00 50.0000 00000 00000 50.0000 50.0000 50.00 50.00 53.3333 5.77350 3.33333 38.9912 67.6755 50.00 60.00 53.3333 5.77350 3.33333 38.9912 67.6755 50.00 60.00 50.0000 00000 00000 50.0000 50.0000 50.00 50.00 50.0000 00000 00000 50.0000 50.0000 50.00 50.00 Total 24 44.5833 17.44037 3.56000 37.2189 51.9478 00 60.00 1.2435E2 3.52030 2.03245 115.6051 133.0949 120.55 127.50 1.2598E2 2.90703 1.67838 118.7619 133.2048 123.20 129.00 3 1.2722E2 4.27707 2.46937 116.5918 137.8415 122.55 130.95 1.2812E2 3.95611 2.28406 118.2891 137.9442 124.60 132.40 1.3078E2 1.82779 1.05528 126.2428 135.3238 128.90 132.55 1.2507E2 3.28418 1.89612 116.9083 133.2250 122.95 128.85 1.2877E2 3.25051 1.87668 120.6919 136.8414 125.55 132.05 1.2713E2 3.55506 2.05251 118.2954 135.9579 123.56 130.67 Total 24 1.2718E2 3.45849 70596 125.7159 128.6366 120.55 132.55 155 ANOVA LB CB CCC Sum of Squares df Mean Square Between Groups 6764.119 966.303 Within Groups 96.724 16 Total 6860.843 23 Between Groups 6862.500 980.357 Within Groups 133.333 16 8.333 Total 6995.833 23 Between Groups 90.870 12.981 Within Groups 184.237 16 11.515 Total 275.107 23 F Sig 159.846 000 117.643 000 1.127 394 6.045 Bảng trắc nghiệm phân h ng LB Duncan Subset for alpha = 0.05 Nt N 49.8100 50.1933 50.2167 50.3233 51.2333 3 51.5400 51.7433 Sig .0000 1.000 156 404 CB Duncan Subset for alpha = 0.05 Nt N 0000 50.0000 3 50.0000 50.0000 50.0000 50.0000 53.3333 53.3333 Sig 1.000 227 CCC Duncan nt Subset for alpha = 0.05 N 1 124.3500 125.0667 125.9833 127.1267 3 127.2167 128.1167 128.7667 130.7833 Sig .058 157  Ngày Descriptives N LB CB CCC Mean 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Std Error Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 73.0233 1.31614 75988 69.7539 76.2928 71.64 74.26 3 47.7533 3.68112 2.12529 38.6089 56.8977 45.25 51.98 43.5167 4.26373 2.46167 32.9250 54.1084 40.25 48.34 40.2400 3.09785 1.78855 32.5445 47.9355 38.26 43.81 36.1100 1.52069 87797 32.3324 39.8876 34.36 37.11 33.5900 3.27248 1.88936 25.4607 41.7193 30.53 37.04 47.8933 4.23769 2.44663 37.3663 58.4203 45.23 52.78 Total 24 40.2658 19.55060 3.99075 32.0103 48.5213 00 74.26 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 46.6667 5.77350 3.33333 32.3245 61.0088 40.00 50.00 43.3333 5.77350 3.33333 28.9912 57.6755 40.00 50.00 40.0000 00000 00000 40.0000 40.0000 40.00 40.00 36.6667 5.77350 3.33333 22.3245 51.0088 30.00 40.00 33.3333 5.77350 3.33333 18.9912 47.6755 30.00 40.00 46.6667 5.77350 3.33333 32.3245 61.0088 40.00 50.00 Total 24 43.3333 26.48489 5.40621 32.1497 54.5169 00 100.00 1.2868E2 2.98761 1.72490 121.2617 136.1050 125.55 131.50 1.3023E2 3.27580 1.89128 122.0958 138.3709 127.00 133.55 3 1.3110E2 4.74104 2.73724 119.3226 142.8774 126.15 135.60 1.3243E2 3.80274 2.19551 122.9868 141.8799 129.15 136.60 1.3462E2 2.62742 1.51694 128.0898 141.1435 131.65 136.65 1.2882E2 3.64737 2.10581 119.7561 137.8772 126.05 132.95 1.3312E2 2.82902 1.63333 126.0890 140.1443 130.55 136.15 1.3112E2 4.32310 2.49594 120.3808 141.8592 127.24 135.78 Total 24 1.3127E2 3.58976 73276 129.7492 132.7808 125.55 136.65 158 ANOVA LB CB CCC Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 8643.117 1234.731 133.415 000 Within Groups 148.077 16 9.255 Total 8791.194 23 Between Groups 15800.000 2257.143 108.343 000 Within Groups 333.333 16 20.833 Total 16133.333 23 Between Groups 89.398 12.771 987 474 Within Groups 206.988 16 12.937 Total 296.386 23 Bảng trắc nghiệm phân h ng LB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 33.5900 36.1100 3 47.7533 47.8933 Sig .0000 36.1100 40.2400 40.2400 43.5167 43.5167 73.0233 1.000 325 116 206 113 CB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 1 0000 33.3333 159 1.000 36.6667 36.6667 40.0000 40.0000 40.0000 43.3333 43.3333 3 46.6667 46.6667 1.0000E2 Sig 1.000 108 108 118 1.000 CCC Duncan nt N Subset for alpha = 0.05 1 128.6833 128.8167 130.2333 3 131.1000 131.1200 132.4333 133.1167 134.6167 Sig .094  Ngày 14 Descriptives N Mean 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Std Error Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 44.4400 4.54079 2.62163 33.1600 55.7200 40.72 49.50 40.5400 3.88309 2.24190 30.8939 50.1861 38.14 45.02 35.3133 2.20686 1.27413 29.8312 40.7955 32.85 37.11 33.1300 2.16585 1.25045 27.7497 38.5103 30.93 35.26 LB 160 CB CCC 28.0567 3.46058 1.99797 19.4601 36.6532 24.56 31.48 44.2933 3.85364 2.22490 34.7204 53.8663 40.54 48.24 Total 24 40.7217 26.76987 5.46438 29.4177 52.0256 00 100.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 43.3333 5.77350 3.33333 28.9912 57.6755 40.00 50.00 40.0000 00000 00000 40.0000 40.0000 40.00 40.00 36.6667 5.77350 3.33333 22.3245 51.0088 30.00 40.00 33.3333 5.77350 3.33333 18.9912 47.6755 30.00 40.00 26.6667 5.77350 3.33333 12.3245 41.0088 20.00 30.00 46.6667 5.77350 3.33333 32.3245 61.0088 40.00 50.00 Total 24 40.8333 27.01315 5.51404 29.4267 52.2400 00 100.00 1.3322E2 2.93527 1.69468 125.9250 140.5083 130.15 136.00 1.3508E2 3.28684 1.89766 126.9184 143.2483 131.55 138.05 3 1.3573E2 4.79122 2.76621 123.8313 147.6354 130.55 140.00 1.3588E2 3.61709 2.08833 126.8980 144.8687 133.55 140.05 1.3825E2 2.30651 1.33167 132.5203 143.9797 135.65 140.05 1.3278E2 3.27159 1.88886 124.6562 140.9104 130.65 136.55 1.3728E2 1.76163 1.01708 132.9072 141.6595 135.65 139.15 1.3574E2 4.39844 2.53944 124.8103 146.6630 131.55 140.32 Total 24 1.3550E2 3.35679 68520 134.0788 136.9137 130.15 140.32 ANOVA LB CB CCC Sum of Squares df Mean Square Between Groups 16338.229 2334.033 Within Groups 144.169 16 9.011 Total 16482.398 23 Between Groups 16450.000 2350.000 Within Groups 333.333 16 20.833 Total 16783.333 23 Between Groups 71.303 10.186 Within Groups 187.862 16 11.741 Total 259.165 23 161 F Sig 259.033 000 112.800 000 868 552 Bảng trắc nghiệm phân h ng LB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 28.0567 33.1300 40.5400 44.2933 3 44.4400 0000 33.1300 35.3133 1.0000E2 Sig 1.000 055 386 150 1.000 CB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 26.6667 33.3333 36.6667 36.6667 40.0000 40.0000 40.0000 3 43.3333 43.3333 3 0000 33.3333 46.6667 1.0000E2 Sig 1.000 093 108 CCC Duncan nt N Subset for alpha = 0.05 132.7833 133.2167 135.0833 162 108 108 1.000 3 135.7333 135.7367 135.8833 137.2833 138.2500 Sig .104  Ngày 21 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean LB CB CCC N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 1.0000E2 00000 00000 3 36.3333 3.53521 34.2700 Minimum Maximum 00 00 100.0000 100.0000 100.00 100.00 2.04106 27.5514 45.1153 32.58 39.60 3.97984 2.29776 24.3835 44.1565 31.78 38.86 30.8733 3.69711 2.13453 21.6892 40.0575 28.02 35.05 26.7333 3.10478 1.79254 19.0206 34.4460 23.37 29.49 16.5633 1.07398 62006 13.8954 19.2312 15.44 17.58 36.4700 4.07239 2.35120 26.3536 46.5864 32.87 40.89 Total 24 35.1554 27.80165 5.67499 23.4158 46.8950 00 100.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 36.6667 5.77350 3.33333 22.3245 51.0088 30.00 40.00 33.3333 5.77350 3.33333 18.9912 47.6755 30.00 40.00 30.0000 00000 00000 30.0000 30.0000 30.00 30.00 26.6667 5.77350 3.33333 12.3245 41.0088 20.00 30.00 16.6667 5.77350 3.33333 2.3245 31.0088 10.00 20.00 36.6667 5.77350 3.33333 22.3245 51.0088 30.00 40.00 Total 24 35.0000 27.97514 5.71040 23.1871 46.8129 00 100.00 1.3628E2 3.30202 1.90642 128.0807 144.4860 133.05 139.65 1.3573E2 3.58550 2.07009 126.8264 144.6402 132.00 139.15 3 1.3845E2 5.48361 3.16596 124.8280 152.0720 132.65 143.55 1.3902E2 3.57957 2.06667 130.1245 147.9088 136.95 143.15 163 1.4140E2 2.97867 1.71974 134.0006 148.7994 138.00 143.55 1.3575E2 2.91033 1.68028 128.5203 142.9797 133.55 139.05 1.4028E2 2.25906 1.30427 134.6715 145.8951 138.15 142.65 1.3868E2 4.80692 2.77527 126.7356 150.6177 133.95 143.56 Total 24 1.3820E2 3.71999 75934 136.6284 139.7700 132.00 143.56 ANOVA LB CB CCC Sum of Squares df Mean Square 17638.669 2519.810 Within Groups 138.766 16 8.673 Total 17777.434 23 17666.667 2523.810 Within Groups 333.333 16 20.833 Total 18000.000 23 93.892 13.413 Within Groups 224.390 16 14.024 Total 318.282 23 Between Groups Between Groups Between Groups F Sig 290.53 00 121.14 00 956 49 Bảng trắc nghiệm phân h ng LB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 1 0000 26.7333 30.8733 3 36.3333 36.4700 Sig 16.5633 30.8733 34.2700 34.2700 1.0000E2 1.000 1.000 104 164 177 399 1.000 CB Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 3 0000 26.6667 30.0000 30.0000 33.3333 33.3333 3 36.6667 36.6667 16.6667 1.0000E2 Sig 1.000 1.000 108 CCC Duncan Subset for alpha = 0.05 nt N 135.7333 135.7500 136.2833 3 138.4500 138.6767 139.0167 140.2833 141.4000 Sig 122 165 118 1.000  Ngày 28 Descriptives N LB CB CCC Mean 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Std Error Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 31.4800 3.88223 2.24141 21.8360 41.1240 27.15 34.65 28.1833 2.69760 1.55746 21.4821 34.8845 25.42 30.81 24.5233 3.42629 1.97817 16.0120 33.0347 21.74 28.35 13.2267 3.55742 2.05388 4.3895 22.0638 10.31 17.19 6.7433 1.53761 88774 2.9237 10.5630 5.26 8.33 31.6000 4.06078 2.34449 21.5125 41.6875 27.67 35.78 Total 24 29.4696 29.56586 6.03511 16.9850 41.9542 00 100.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 1.0000E2 00000 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3 30.0000 00000 00000 30.0000 30.0000 30.00 30.00 26.6667 5.77350 3.33333 12.3245 41.0088 20.00 30.00 23.3333 5.77350 3.33333 8.9912 37.6755 20.00 30.00 13.3333 5.77350 3.33333 -1.0088 27.6755 10.00 20.00 6.6667 5.77350 3.33333 -7.6755 21.0088 00 10.00 33.3333 5.77350 3.33333 18.9912 47.6755 30.00 40.00 Total 24 29.1667 29.76965 6.07670 16.5960 41.7373 00 100.00 1.3778E2 2.89885 1.67365 130.5822 144.9845 134.55 140.15 1.3573E2 3.58550 2.07009 126.8264 144.6402 132.00 139.15 3 1.4008E2 5.77090 3.33183 125.7476 154.4191 134.05 145.55 1.4100E2 3.42089 1.97505 132.5020 149.4980 139.00 144.95 1.4292E2 2.91605 1.68358 135.6728 150.1605 139.55 144.65 1.3792E2 3.50190 2.02183 129.2175 146.6159 135.65 141.95 1.4192E2 1.30512 75351 138.6746 145.1588 140.55 143.15 1.4035E2 5.02999 2.90407 127.8581 152.8485 135.67 145.67 Total 24 1.3971E2 3.89205 79446 138.0694 141.3564 132.00 145.67 166 ANOVA LB CB CCC Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 19974.033 2853.433 347.993 000 Within Groups 131.195 16 8.200 Total 20105.228 23 Between Groups 20050.000 2864.286 137.486 000 Within Groups 333.333 16 20.833 Total 20383.333 23 Between Groups 120.334 17.191 1.206 354 Within Groups 228.072 16 14.254 Total 348.406 23 Bảng trắc nghiệm phân h ng LB Duncan Subset for alpha = 0.05 Nt N 1 0000 24.5233 28.1833 3 31.4800 31.6000 Sig 6.7433 13.2267 28.1833 1.0000E2 1.000 1.000 1.000 167 137 184 1.000 CB Duncan Subset for alpha = 0.05 Nt N 0000 6.6667 23.3333 26.6667 26.6667 3 30.0000 30.0000 3 6.6667 13.3333 33.3333 1.0000E2 Sig .093 093 CCC Duncan Subset for alpha = 0.05 Nt N 135.7333 137.7833 137.9167 3 140.0833 140.3533 141.0000 141.9167 142.9167 Sig 057 168 108 108 1.000 ... nêu trên, đề tài: ? ?Nghiên cứu tạo dung dịch keo bạc nano để phòng trừ bệnh rụng Corynespora cao su nấm Corynespora cassiicola? ?? đƣợc thực Mục tiêu đề t i Tìm hiểu bệnh rụng Corynespora cao su nấm. .. 3.6.1 Hiệu lực phòng bệnh rụng Corynespora cao su vƣờn ƣơm dung dịch keo bạc nano - chitosan .100 3.6.2 Hiệu lực trị bệnh rụng Corynespora cao su vƣờn ƣơm dung dịch keo bạc nano - chitosan... botryosa, bệnh nấm hồng nấm Corticium salmonicolor 1.2 Tổng quan bệnh rụng Corynespora nấm Corynespora cassiicola gây cao su 1.2.1 Sơ lược bệnh rụng Corynespora Bệnh rụng Corynespora nấm Corynespora cassiicola