Luận án tiến sĩ Y học: Nghiên cứu tổ hợp chất chỉ điểm sinh học vWF, VCAM1, MCP-1, D-Dimer trong chẩn đoán và tiên lượng nhồi máu não cấp

Luận án với mục tiêu định lượng nồng độ và xác định giá trị chẩn đoán của tổ hợp 4 chất chỉ điểm sinh học vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer ở bệnh nhân nhồi máu não cấp. Khảo sát giá trị tiên lượng và mối tương quan giữa nồng độ vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer huyết tương với thang điểm NIHSS và thang điểm Glasgow.

Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Y Dược Huế Người hướng dẫn khoa học: GS.TS HOÀNG KHÁNH GS.TS HUỲNH VĂN MINH Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ Hội đồng chấm luận án cấp Đại học Huế họp 03 Lê Lợi - Thành phố Huế vào lúc ngày tháng năm Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Trường Đại học Y Dược Huế - Thư viện Quốc gia Cơng trình hoàn thành tại: Trường Đại học Y Dược Huế Người hướng dẫn khoa học: GS.TS HOÀNG KHÁNH GS.TS HUỲNH VĂN MINH Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ Hội đồng chấm luận án cấp Đại học Huế họp 03 Lê Lợi - Thành phố Huế vào lúc ngày tháng năm Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Trường Đại học Y Dược Huế - Thư viện Quốc gia MỞ ĐẦU TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Ngày đột quỵ não vấn đề cấp thiết y học bệnh nặng, tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong cịn cao, chi phí điều trị lớn, người cịn sống sót mang di chứng nặng nề, gánh nặng cho gia đình xã hội Ở nước phát trỉển đột quỵ não nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ sau bệnh ung thư bệnh tim mạch Hiện giới Việt Nam, tỷ lệ mắc đột quỵ não ngày tăng Đề chẩn đoán sớm nhồi máu não giai đoạn cấp chủ yếu dựa vào hình ảnh học nhiên cịn nhiều điểm khuyết đầu khơng thể phát Do việc song hành tìm phương pháp cận lâm sàng để hổ trợ chẩn đoán cần thiết Các chất điểm sinh học (biomarker) hướng nghiên cứu hứa hẹn Các chất điểm sinh học phân tử bám dính tế bào mạch máu - Vascular Cell Adhesion Molecule 1, seletin hịa tan thuộc nhóm phân tử globulin miễn dịch bám vào tế bào thành mạch, nghiên cứu cho thấy nồng độ chất tăng cao đầu sau thiếu máu não Hoặc von Willebrand, chất liên quan đông cầm máu, liên quan đến thành lập huyết khối, có chất protein Là yếu tố hoạt động chất tải yếu tố VIII, xem chất điểm sinh học đột quỵ não Nồng độ vWF tăng sau thiếu máu não Hoặc protein có lực hóa học với bạch cầu đơn nhân Monocyte chemotactic protein 1, có xu hướng hút bạch cầu đơn nhân, có mặt huyết dịch não tủy, hoạt lực tăng nhanh sau 24 xuất triệu chứng thiếu máu não Hoặc D-Dimer, chất điểm sinh học tiêu hủy fibrin, thể hoạt tính sinh học plasmin, tăng đầu thiếu máu não Mặc dù chưa có chất điểm sinh học đơn lẻ thừa nhận đặc trưng cho chẩn đoán nhồi máu não cấp mà yếu tố góp thêm cho chẩn đốn Một hướng nghiên cứu có nhiều kết hứa hẹn phối hợp nhiều chất điểm sinh học thành tổ hợp Kết số nghiên cứu nước cho thấy giá trị chẩn đốn dương tính nhồi máu não với độ nhạy độ đặc hiệu cao Ở Việt Nam có vài nghiên cứu chất điểm sinh học đột quỵ não, nghiên cứu kết hợp nhiều chất điểm thành tổ hợp cịn hạn chế, mục đích hướng chẩn đoán tiên lượng, đặc biệt giai đoạn nhồi máu não cấp Xuất phát từ lý tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu tổ hợp chất điểm sinh học vWF, VCAM1, MCP-1, D-Dimer chẩn đoán tiên lượng nhồi máu não cấp” MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI 2.1 Định lượng nồng độ xác định giá trị chẩn đoán tổ hợp chất điểm sinh học vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer bệnh nhân nhồi máu não cấp 2.2 Khảo sát giá trị tiên lượng mối tương quan nồng độ vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer huyết tương với thang điểm NIHSS thang điểm Glasgow Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN 3.1 Ý nghĩa khoa học - vWF, VCAM-1, MCP-1 D-Dimer chất điểm sinh học có liên quan đến tổn thương mạch máu, đến hình thành huyết khối, đến tổn thương tế bào não liên quan đến trình viêm nhồi máu não cấp Việc định lượng nồng độ tổ hợp chất chất điểm sinh học giúp chẩn đoán, tiên lượng mức độ nặng lúc vào viện, tiên lượng diễn tiến nặng lâm sàng thời gian theo dõi, hổ trợ cho chăm sóc, điều trị kịp thời kết - vWF, VCAM-1, MCP-1 D-Dimer chất điểm sinh học diện sớm pha cấp nhồi máu não hình ảnh chụp cắt lớp vi tính chưa thấy tổn thương Do việc định lượng nồng độ tổ hợp vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer giai đoạn cấp giúp nâng giá trị chẩn đốn xác đầu 3.2 Ý nghĩa thực tiễn - Kết đề tài đóng góp thêm tổ hợp chất điểm sinh học mới, góp phần chẩn đốn nhồi máu não cấp có độ nhạy độ đặc hiệu cao - Sự gia tăng nồng độ huyết tương chất điểm sinh học VWF, VCAM-1, MCP-1 D-Dimer giai đoạn cấp nhồi máu não yếu tố dự báo tiên lượng mức độ nặng lúc vào viện diễn tiến nặng lâm sàng trình theo dõi điều trị - Thơng qua việc tìm hiểu số mối tương quan chất điểm sinh học tổ hợp nói với thang điểm NIHSS Glasgow giúp công tác điều trị theo dõi tốt cho bệnh nhân ĐÓNG GÓP CỦA LUẬN ÁN - Là nghiên cứu nước kết hợp nhiều chất điểm sinh học thành tổ hợp để góp phần chẩn đốn tiên lượng bệnh nhân nhồi máu não cấp - Kết nghiên cứu định lượng nồng độ xác định ngưỡng tăng có giá trị chẩn đốn tổ hợp vWF, VCAM-1, MCP-1 D-Dimer, xây dựng mơ hình chẩn đốn mơ hình dự báo tiên lượng nhồi máu não cấp Cấu trúc luận án: Gồm 139 trang: đặt vấn đề trang, tổng quan tài liệu 32 trang, đối tượng phương pháp nghiên cứu 22 trang, kết nghiên cứu 38 trang, bàn luận 40 trang, kết luận trang, kiến nghị trang Luận án có 43 bảng, 12 biểu đồ, hình, sơ đồ, 162 tài liệu tham khảo: 36 tài liệu tiếng Việt, 126 tài liệu tiếng Anh Chương TỔNG QUAN 1.1 NHỒI MÁU NÃO 1.1.1 Định nghĩa phân loại nhồi máu não Định nghĩa đột quỵ Hội đột quỵ Hoa kỳ 2013: Nhồi máu hệ thần kinh trung ương (Central nervous system infarction) tình trạng chết tế bào não, tủy sống võng mạc thiếu máu, dựa giải phẫu bệnh, chẩn đốn hình ảnh thần kinh và/hoặc chứng lâm sàng tổn thương vĩnh viễn Nhồi máu hệ thần kinh trung ương bao gồm: - Đột quỵ thiếu máu (ischemic stroke) để trường hợp nhồi máu hệ thần kinh trung ương có triệu chứng - Nhồi máu não thầm lặng (silent infartion) để trường hợp không phát triệu chứng lâm sàng Cơn thiếu máu não cục thoáng qua giai đoạn ngắn rối loạn chức thần kinh thiếu máu não võng mạc, với triệu chứng lâm sàng thường kéo dài giờ, khơng có chứng nhồi máu não cấp tính Đột quỵ bao gồm chảy máu não (intracerebral hemorrhage) chảy máu nhện (subarachnoid hemorrhage) - Phân loại theo giai đoạn + NMN cấp : Tuần đầu sau khởi bệnh + NMN bán cấp : Tuần thứ đến tuần thứ + NMN mạn : Sau tuần thứ 1.1.2 Cơ chế bệnh sinh nhồi máu não Hai chế tham gia vào trình gây tai biến thiếu máu não chế nghẽn mạch (thường huyết khối, cục tắc) chế huyết động học 1.2 TỔ HỢP CHẤT CHỈ ĐIỂM SINH HỌC TRONG CHẨN ĐOÁN VÀ DỰ BÁO TIÊN LƯỢNG NHỒI MÁU NÃO Mặc dù có nhiều chất diểm sinh học (CCĐSH) giúp chẩn đốn nhồi máu não (NMN) khơng có CCĐSH đơn lẻ đặc trưng Do đó, nhiều nghiên cứu tiến hành phối hợp nhiều CCĐSH với tạo thành tổ hợp, để tăng độ nhạy độ đặc hiệu 1.2.1 Tổ hợp có D-Dimer D-Dimer, CCĐSH tiêu hủy fibrin, thể hoạt tính sinh học plasmin, tăng đầu sau thiếu máu não kéo dài tới vài tháng, phản ánh rối loạn đông máu cấp mạn tính Một số nghiên cứu đánh giá nhiều CCĐSH q trình đơng máu rút kết luận nồng độ D–Dimer nhạy đột quỵ, giúp phân biệt nguồn gốc đột quỵ yếu tố tiên lượng mạnh mức độ nặng tái lập giai đoạn bán cấp D-Dimer có khả dự đốn cao tình trạng diễn tiến nặng lâm sàng, (DTNLS) tình trạng tử vong nguy tái phát đột quỵ NMN Nồng độ D-Dimer tăng phản ánh phản ứng pha cấp hoạt hóa đơng máu thứ phát từ phá hủy mô biến chứng đột quỵ 1.2.2 Tổ hợp có vWF VCAM-1 - Yếu tố đông máu von Willebrand (vWF) Yếu tố đông máu vWF, có chất protein, yếu tố hoạt động chất tải yếu tố VIII, coi CCĐSH tiên lượng TBMNM thoáng qua, TBMMN hình thành Cũng lý liên quan đến trình hình thành huyết khối mà gần vWF nghiên cứu CCĐSH đặc biệt NMN vWF tăng sớm vòng 12 sau khởi phát bệnh - Phân tử bám dính tế bào mạch máu (Vascular cell adhesion moleculeVCAM-1) Phân tử VCAM-1 seletin hịa tan thuộc nhóm phân tử globulin miễn dịch bám vào tế bào thành mạch Trong trình viêm, nồng độ VCAM -1 tăng lên, bám dính vào tế bào nội mạc Nhiều nghiên cứu cho thấy nồng độ chất tăng cao máu sau triệu chứng thiếu máu não xuất 1.2.3 Tổ hợp có MCP-1 Monocyte chemotactic protein (MCP-1) protein có lực hóa học với bạch cầu đơn nhân, có xu hướng hút bạch cầu đơn nhân, có mặt dịch não tủy hoạt lực tăng đáng kể 24 sau triệu chứng thiếu máu não, nồng độ chất không thay đổi máu MCP-1 chemokine tiết từ tế bào thần kinh tế bào hình sau đột quỵ, biết làm trầm trọng thêm tình trạng thiếu máu cục Kết cho thấy MCP-1 đóng vai trò phản ứng viêm giai đoạn sớm đột quỵ thiếu máu não có giá trị tiên lượng Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Nhóm bệnh: Là bệnh nhân (BN) NMN giai đoạn cấp từ 18 trở lên Bị NMN lần Khơng có bệnh lý kèm theo ảnh hưởng đến tăng nồng độ vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer huyết tương Điều trị nội trú khoa Hồi sức cấp cứu khoa Nội Tổng hợp Bệnh viện ĐKKV Bồng Sơn Bình Định Tự nguyện tham gia nhóm nghiên cứu Nhóm chứng: Là người khỏe mạnh, có độ tuổi tương đương với nhóm bệnh Chưa lần bị tai TBMMN đến thời điểm nghiên cứu Khơng có bệnh lý kèm theo ảnh hưởng đến tăng nồng độ vWF, VCAM-1, MCP1, D-Dimer huyết tương Tự nguyện tham gia nhóm nghiên cứu Thời gian nghiên cứu: Từ 01 / 2015 đến 01 / 2016 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Theo phương pháp mô tả cắt ngang, có so sánh đối chiếu với nhóm chứng Bệnh nhân đánh giá thời điểm: Lúc vào viện 48 sau vào viện 2.2.1 Cách thức chọn mẫu: Theo cơng thức tính cỡ mẫu ước lượng tỷ lệ pvWF = 0,94 (theo nghiên cứu Mark A Reynolds cs, tỷ lệ tăng vWF bệnh nhân NMN cấp 94%) PVCAM 1 = 0,91 (theo nghiên cứu Lynch J.R cs, tỷ lệ tăng VCAM-1 bệnh nhân NMN cấp 91%) PMCP1 = 0,94 (theo nghiên cứu Reynolds A Mark cs, tỷ lệ tăng MCP-1 bệnh nhân NMN cấp 94%) PD  Dimer = 0,91 (theo nghiên cứu Igor Sibon, Rouanet, Whiteley W tỷ lệ tăng D-Dimer bệnh nhân NMN cấp 91%) Như vậy, cỡ mẫu nghiên cứu từ 34 đến 49 BN Thực tế nghiên cứu 50 BN NMN 40 người chứng 2.2.2 Các bước tiến hành Bước 1: Chọn bệnh nhân đột quỵ, chụp não cắt lớp vi tính (NCLVT) máy Aquilion Toshiba – Nhât, có tổn thương dạng NMN Bước 2: Tiến hành nghiên cứu vào thời điểm: 2.2.2.1 Lúc vào viện *Khám lâm sàng (LS): Bệnh nhân khám, đánh giá thang điểm Glasgow, NIHSS Khai thác tình trạng hút thuốc lá, uống rượu *Lấy máu xét nghiệm: - Đối với vWF, VCAM-1, MCP-1, D-Dimer: BN lấy ml máu lúc vào viện, tiến hành ly tâm với tốc độ 3.000 vòng / phút 05 phút, sau bảo quản - 20°C Mỗi 10 đến 15 mẫu chuyển nhanh Bệnh viện TW Huế xe đơng lạnh có thiết bị bảo quản Xét nghiệm thực kỷ thuật ELISA máy EVOLIS Khoa Sinh hóa Huyết hoc - Đối với glucose, bạch cầu, tiểu cầu, bilan lipid, creatinin: BN lấy máu lúc đói ngày Các xét nghiệm thực Bệnh viện ĐKKV Bồng Sơn, Bình Định máy SAT 600 2.2.2.2 Sau 48 giờ: Đánh giá lại tình trạng lâm sàng bệnh nhân thông qua thang điểm Glasgow NIHSS 2.3 ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU - Đề cương nghiên cứu thông qua Hội đồng Y đức phê duyệt - Bệnh nhân và/hoặc gia đình giải thích đầy đủ đồng ý tham gia nghiên cứu Thông tin cá nhân thông tin tình trạng sức khỏe BN bảo mật hồn toàn Chương KẾT QUẢ 3.1 ĐẶC ĐIỂM CHUNG MẪU NGHIÊN CỨU Bảng 3.1 Phân bố tuổi nhóm bệnh nhóm chứng Nhóm nghiên cứu Nhóm bệnh Nhóm chứng p Tuổi (n=50 ) (n=40 ) Tuổi Nam 66,30 ± 16,00 65,20 ± 17,30 >0,05 TB Nữ 74,40 ± 8,90 74,40 ± 9,50 >0,05 (X±SD ) Chung 69,70 ± 14,00 69,40 ± 14,90 >0,05 Tuổi lớn 93 91 Tuổi nhỏ 33 41 Khơng có khác biệt có ý nghĩa tuổi giới nhóm 3.2 NỒNG ĐỘ vWF, VCAM-1, MCP-1 VÀ D-Dimer HUYẾT TƯƠNG Bảng 3.2 Nồng độ trung bình (TB) vWF, VCAM-1, MCP-1 DDimer huyết tương nhóm bệnh chứng Nhóm nghiên Nhóm bệnh Nhóm chứng cứu p (n=50) (n=40) CCĐSH vWF (Mu/ml) 176,03 ± 18,11 148,98 ± 19,04