GIỚI THIỆU PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ

GIỚI THIỆU MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CHƢƠNG 20 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.1 Sắc ký hấp phụ lỏng (trên cột) 20.2 Sắc ký phân bố (trên cột) 20.3 Sắc ký trao đổi ion 20.4 Sắc ký rây phân tử 20.5 Sắc ký mỏng 20.6 Sắc ký giấy 20.7 Sắc ký khí 20.8 Sắc ký lỏng hiệu cao 20.9 Ứng dụng CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CHƢƠNG 20 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.1 SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG (TRÊN CỘT) – Nguyên tắc – Hệ sắc ký lỏng – Kỹ thuật thực nghiệm & ứng dụng CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt NGUYÊN TẮC Sắc ký hấp phụ lỏng: Là trình tách lực khác cấu tử lỏng chất hấp phụ rắn, bao gồm: Lực Van der Waals Lực cảm ứng Lực liên kết hóa học Lực liên kết hydro Đa số đƣờng đẳng nhiệt tuân theo PT Langmuir (DD loãng: PT Henry) CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG Yêu cầu chất hấp phụ PHA TĨNH (Chất Hấp Phụ) Không tƣơng tác hố học với cấu tử, khơng có hoạt tính xúc tác để tránh P/Ứ phụ Chọn lọc cao Ổn định để kết có độ lặp lại cao Diện tích bề mặt riêng kích thƣớc hạt thích hợp CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG Các chất hấp phụ phổ biến PHA TĨNH (Chất Hấp Phụ) CuuDuongThanCong.com Nhơm oxide Phân cực có tính lƣỡng tính Hoạt tính phụ thuộc lớn vào hình dạng độ ẩm Dùng sắc ký dạng γ Hấp phụ tốt sản phẩm dầu mỏ, Silicagel acid béo ester chúng, SiO2.xH2O amin thơm hợp chất hữu khác… https://fb.com/tailieudientucntt HỆ SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG Các chất hấp phụ phổ biến PHA TĨNH (Chất Hấp Phụ) Than Hoạt Tính Bề mặt riêng 1300–1700 m2/ g, đƣợc điều chế từ gỗ, lignin, xƣơng, than đá, than nâu… Hấp phụ tốt nhƣng ổn định màu đen Thƣờng dùng tách chất cao phân tử chất thơm khỏi chất có phân tử lƣợng thấp Cịn dùng MgO, MgCO3, CaCO3, bột talc … chất hấp phụ biến tính, ví dụ nhƣ Silicagel tẩm bạc nitrate dùng tách olefin khỏi parafin CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG Yêu cầu pha động - độ tinh khiết cao - hòa tan tƣơng đối tốt tất cấu tử PT - bị hấp phụ tối thiểu pha tĩnh - khơng phản ứng hố học với chất tan chất hấp phụ PHA ĐỘNG Để tăng khả tách, rửa giải nhiều dung môi theo thứ tự khả giải hấp tăng dần Dung mơi có số điện mơi lớn có khả giải hấp cao chất hấp phụ phân cực Thƣờng dùng kỹ thuật chân không hay áp suất cao để bơm pha động qua cột (SK lỏng cao áp) CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ SẮC KÝ HẤP PHỤ LỎNG Dãy elutrop Trappe STT PHA ĐỘNG Dung môi ε ST T Dung môi ε 01 Nƣớc 81,0 11 Dioxane 02 Acid acetic 31,2 12 Chloroform 5,2 03 Ethylene Glycol - 13 Benzene 2,3 04 Rƣợu metylic 31,2 14 Toluen 2,3 05 Rƣợu etylic 25,8 15 TrichlorEthylene 3,4 06 Rƣợu npropylic 22,8 16 CCl4 2,2 07 Acetone 21,5 17 CS2 - 08 DichlorEthane 10,4 18 Cyclohexane 09 Ethyl Acetate 6,1 19 n - Pentane 10 Ether Etylic 4,4 20 Ether dầu hỏa CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt - 2,0 1,9 KT THỰC NGHIỆM & ỨNG DỤNG CỘT SẮC KÝ HẤP PHỤ VÀ KT TÁCH CuuDuongThanCong.com Cột SK thủy tinh, thép, nhôm, đồng, chất dẻo, kim loại …, có dạng hình trụ hình nón Chiều dài cột L từ vài cm tới 1020m; đƣờngkính cột d từ vài mm tới 10–20cm Theo kinh nghiệm: L 40 100 d Quá trình tách đƣợc thực theo PP xuống lên Tăng vận tốc dung môi kỹ thuật chân không kỹ thuật cao áp https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH PP sắc ký lên CÁCH TRIỂN KHAI SẮC ĐỒ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH PP sắc ký xuống 0 CÁCH TRIỂN KHAI SẮC ĐỒ CuuDuongThanCong.com - Dung môi Phƣơng pháp sắc ký xuống Dung môi thấm vào nhờ băng giấy nối với nhúng vào lọ dung môi (đƣợc treo móc), chuyển động từ xuống dƣới tác dụng lực mao quản lực trọng trƣờng https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH PP sắc ký nằm ngang CÁCH TRIỂN KHAI SẮC ĐỒ CuuDuongThanCong.com Để dung môi bay tự do, dƣới tác dụng lực mao quản, dung mơi chuyển động hƣớng từ tâm ngồi cấu tử phân bố mỏng dƣới dạng vòng đồng tâm https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH PP sắc ký đa bậc CÁCH TRIỂN KHAI SẮC ĐỒÀ CuuDuongThanCong.com Kỹ thuật tách đƣợc tiến hành với nhiều dung môi (đƣợc sử dụng theo thứ tự độ phân cực tăng dần) Giá trị Rf tính riêng dung môi https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH PP sắc ký hai chiều (vng góc) Dung mơi thứ hai B Dung mơi thứ CÁCH TRIỂN KHAI SẮC ĐỒÀ CuuDuongThanCong.com C D B,C, D A A,B,C, D PPP sắc ký hai chiều Khi DD phân tích chứa 10 cấu tử trở lên, thƣờng dùng PP sắc ký hai chiều để tách chúng: sau cho chạy chiều với dung môi thứ nhất, xoay 900 chạy tiếp với hệ dung môi thứ hai https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH HIỆN SẮC ĐỒ Đối với chất đƣợc sắc ký không màu có màu nhạt sau triển khai phải làm sắc đồ PP thích hợp (hố học, quang học, phóng xạ…) Cách phổ biến phun thuốc màu lên toàn dƣới dạng hạt sƣơng nhỏ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ĐỊNH TÍNH CuuDuongThanCong.com So sánh chuẩn với mẫu sắc ký để đảm bảo điều kiện tách giống hệt Nên tiến hành thí nghiệm với Rf nằm khoảng từ 0,1 đến 0,8 https://fb.com/tailieudientucntt ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG Định lƣợng trực tiếp sắc đồ Đánh giá diện tích S sắc đồ cƣờng độ vết màu xuất mắt thƣờng dùng máy đo… ĐỊNH LƢỢNG - Pha tĩnh trạng thái rắn đƣợc trãi thành lớp mỏng thủy tinh, kim loại hay chất dẻo - Phƣơng pháp đo S : khoảng lƣợng chất sử dụng m = - 100μg, m diện tích S có quan hệ tuyến tính sau đây: S = a lg m + b (7) a, b – số thực nghiệm CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG Định lƣợng trực tiếp sắc đồ ĐỊNH LƢỢNG Xây dựng đồ thị S = f(lg m) DD chuẩn có nồng độ khác Xác định nồng độ mẫu dựa vào đƣờng chuẩn PP bình phƣơng cực tiểu Ngồi ra, cịn dùng: + PP densitomet + PP huỳnh quang + PP đo độ phóng xạ… để định lƣợng trực tiếp sắc đồ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG PP tách chất khỏi sắc đồ ĐỊNH LƢỢNG CuuDuongThanCong.com Chuyển tất phần chất cần phân tích mỏng vào bình dùng PP thích hợp (đo màu, đo huỳnh quang, cực phổ, sắc ký khí…) để xác định hàm lƣợng chất https://fb.com/tailieudientucntt CHƢƠNG 20 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.6 SẮC KÝ GIẤY – Nguyên tắc – Hệ sắc ký giấy – Cách tiến hành – Định tính & định lượng CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt NGUYÊN TẮC Sắc ký giấy thuộc dạng sắc ký phân bố lỏng lỏng mà chất mang pha lỏng giấy sắc ký Trong trình sắc ký cấu tử đƣợc tách dọc theo lớp mỏng tờ giấy Có thể áp dụng lý thuyết tách sắc ký phân bố cột cho sắc ký giấy CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ DUNG MÔI SẮC KÝ GIẤY Giấy sắc ký phải tinh khiết hoá học, trơ với cấu tử DD dung môi sắc ký, đồng tỷ trọng để dung môi di chuyển với vận tốc định, có hƣớng sợi trùng với hƣớng chuyển động dung môi Giấy sắc ký thuộc loại hydrophyl ƣa nƣớc (hấp phụ ẩm không khí đến 20 -25% khối lƣợng giấy) nên ưS lỏng nƣớc, không cần làm ẩm giấy trƣớc φS Nếu φS lỏng chất hữu cơ, phải tẩm giấy chất kỵ nƣớc nhƣ parafin, dầu thực vật CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt HỆ DUNG MƠI SẮC KÝ GIẤY Dung mơi động dung môi tĩnh phải không trộn lẫn Để tách tốt, cấu tử mẫu khảo sát phải có tính tan khác rõ rệt hệ dung mơi chọn Tính tan cấu tử φm phải bé tính tan chúng φS nói chung nên mức vừa phải Để tách chất tan nƣớc, thƣờng chọn φm dung mơi hữu cịn φS nƣớc Ngƣợc lại, tách chất tan dung môi hữu cơ, φm nƣớc φS dung môi hữu CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CÁCH TIẾN HÀNH SẮC KÝ GIẤY Tƣơng tự phƣơng pháp sắc ký mỏng Cách định tính định lƣợng hồn tồn tƣơng tự Ngồi ra, kết hợp PP sắc ký giấy với PP điện di (điện di trƣớc sắc ký sau) cho kết tách cao CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt ... PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.1 Sắc ký hấp phụ lỏng (trên cột) 20.2 Sắc ký phân bố (trên cột) 20.3 Sắc ký trao đổi ion 20.4 Sắc ký rây phân tử 20.5 Sắc ký mỏng 20.6 Sắc ký giấy 20.7 Sắc ký khí... PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.4 SẮC KÝ RÂY PHÂN TỬ – Nguyên tắc – Hệ sắc ký rây phân tử – Kỹ thuật thực nghiệm & ứng dụng CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt NGUYÊN TẮC Sắc ký. .. TĨNH chân khơng) CỘT SẮC KÝ CuuDuongThanCong.com Tƣơng tự cột dùng sắc ký hấp phụ cột https://fb.com/tailieudientucntt CHƢƠNG 20 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ 20.3 SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION – Nguyên