Chiết tách, phân lập andrographolide từ cây xuyên tâm liên ( andrographis paniculata) ứng dụng định lượng trong một số sản phẩm chứa andrographolide bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ( hplc)

BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÂM HỒNG VY CHIẾT TÁCH, PHÂN LẬP ANDROGRAPHOLIDE TỪ CÂY XUYÊN TÂM LIÊN (Andrographis paniculata) – ỨNG DỤNG ĐỊNH LƢỢNG TRONG MỘT SỐ SẢN PHẨM CHỨA ANDROGRAPHOLIDE BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã chuyên ngành: 60540101 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2019 BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÂM HỒNG VY CHIẾT TÁCH, PHÂN LẬP ANDROGRAPHOLIDE TỪ CÂY XUYÊN TÂM LIÊN (Andrographis paniculata) – ỨNG DỤNG ĐỊNH LƢỢNG TRONG MỘT SỐ SẢN PHẨM CHỨA ANDROGRAPHOLIDE BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã chuyên ngành: 60540101 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2019 Cơng trình đƣợc hồn thành Trƣờng Đại học Cơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Nguyễn Ngọc Tuấn Ngƣời phản iện 1: Ngô Đại Nghiệp Ngƣời phản iện 2: Nguyễn Thị Ngần Luận văn thạc sĩ đƣợc ảo vệ Hội đồng chấm ảo vệ Luận văn thạc sĩ Trƣờng Đại học Cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh ngày 24 tháng 11 năm 2019 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: Lê Văn Việt Mẫn - Chủ tịch Hội đồng PGS TS Ngô Đại Nghiệp - Phản iện TS Nguyễn Thị Ngần - Phản iện Nguyễn Thị Minh Nguyệt - Ủy viên Nguyễn Đắc Trƣờng - Thƣ ký CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG VIỆN TRƢỞNG VIỆN CNSH&TP i BỘ CÔNG THƢƠNG CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP Độc lập - Tự - Hạnh phúc THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: LÂM HOÀNG VY MSHV: 16003351 Ngày, tháng, năm sinh: 15/06/1988 Nơi sinh: Tp HCM Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã chuyên ngành: 60540101 I TÊN ĐỀ TÀI: Chiết tách, phân lập andrographolide từ xuyên tâm liên (Andrographis paniculata) Ứng dụng định lƣợng số sản phẩm chứa andrographolide ằng phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Xây dựng đƣợc quy trình chiết tách phân tích Andrographolide từ Xun tâm liên, đóng ghóp vào cơng tác kiểm nghiệm xác định hàm lƣợng Andrographolide có sản phẩm chứa Andrographolide thị trƣờng II NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: Theo QĐ giao đề tài số 825/QĐ-ĐHCN ngày 23/4/2019 III NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 23/10/2019 IV NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Ngọc Tuấn Tp Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2019 NGƢỜI HƢỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO VIỆN TRƢỞNG VIỆN CNSH&TP ii LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc hoàn thành dƣới hƣớng dẫn tận tình đầy tâm huyết Thầy TS Nguyễn Ngọc Tuấn Tơi xin ày tỏ lịng iết ơn chân thành đến Thầy TS Nguyễn Ngọc Tuấn Trƣờng Đại học Cơng nghiệp TP Hồ Chí Minh, ngƣời giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi suốt thời gian thực nghiên cứu hồn thành ài luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học Công nghiệp TP Hồ Chí Minh, Lãnh đạo Viện Cơng nghệ Sinh học Thực phẩm quý thầy cô giáo công tác giảng dạy trƣờng – ngƣời truyền đạt kiến thức quý áu, giúp đỡ trình học tập nghiên cứu Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình, ạn è đồng nghiệp giúp đỡ, động viên, khích lệ tơi suốt q trình làm luận văn Tuy có nhiều cố gắng, nhƣng đề tài nghiên cứu khoa học khơng tránh khỏi thiếu sót Tơi kính mong Q thầy cơ, chun gia ngƣời quan tâm đến đề tài tiếp tục có ý kiến đóng góp, giúp đỡ để đề tài đƣợc hoàn thiện Xin chân thành cảm ơn! i TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ Bằng cách sử dụng phƣơng pháp sắc ký, phân lập đƣợc hợp chất andrographolide từ Andrographis paniculata Việc chiết xuất andrographolide từ A paniculata đƣợc thực ằng cách sử dụng ethanol làm dung môi Phƣơng pháp sắc ký sử dụng tăng dần độ phân cực dung môi Tiếp theo, sử dụng phƣơng pháp kết tinh lại để thu đƣợc andrographolide Cấu trúc đƣợc xác định sở liệu phổ (phổ khối lƣợng 1H-NMR, 13 C-NMR DEPT, HMBC, HSQC ESI-MS) Hợp chất đƣợc tinh chế (độ tinh khiết> 95,0%) đƣợc sử dụng làm tiêu chuẩn để phân tích Độ tinh khiết hợp chất đƣợc xác định ởi HPLC Trong nghiên cứu này, phƣơng pháp HPLC đƣợc phát triển để xác định định lƣợng andrographolide thực phẩm chức Phƣơng pháp định lƣợng đƣợc xác thực ằng cách xác định độ thu hồi trung ình từ mẫu đƣợc tăng cƣờng andrographolide 95% Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao với cột sắc ký: C18 (250 x 4,6 mm, hiệu), pha động: MeOH (A) - H2O (B) (v / v, 65/35), lƣu lƣợng: 0,7 ml / phút, thể tích tiêm : 20 µL, nhiệt độ: 35oC, ƣớc sóng phát 223 nm Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng andrographolide có độ xác cao với độ lệch chuẩn tƣơng đối (RSD) nhỏ 1% Phƣơng pháp phân tích andrographolide có hệ số xác định hệ số tƣơng quan cao, độ tuyến tính chặt, khoảng tuyến tính rộng, giới hạn định tính định lƣợng é Kết cho thấy mẫu thuốc Đơng y có hàm lƣợng andrographolide (