Nghiên cứu độc lực trên lợn con của chủng virus PRRS HUA 02 được phân lập tại miền Bắc Việt Nam

15 16 0
Nghiên cứu độc lực trên lợn con của chủng virus PRRS HUA 02 được phân lập tại miền Bắc Việt Nam

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Bài viết Nghiên cứu độc lực trên lợn con của chủng virus PRRS HUA 02 được phân lập tại miền Bắc Việt Nam trình bày: Kết quả nghiên cứu triệu chứng lâm sàng đã chỉ ra rằng lợn sau gây nhiễm có triệu chứng ủ rũ, mệt mỏi, bỏ ăn, sốt cao, khó thở, tím tai và da phát ban, táo bón. Kết quả phản ứng RT-PCR cho thấy sự hiện diện của chủng virus PRRS HUA 02 trong máu sau 3 ngày gây nhiễm, và trong dịch ngoáy mũi của cơ thể sau 5 ngày gây nhiễm,... Mời các bạn cùng tham khảo.

Vietnam J Agri Sci 2016, Vol 14, No 12: 1919-1933 Tạp chí KH Nơng nghiệp Việt Nam 2016, tập 14, số 12: 1919-1933 www.vnua.edu.vn NGHIÊN CỨU ĐỘC LỰC TRÊN LỢN CON CỦA CHỦNG VIRUS PRRS HUA 02 ĐƯỢC PHÂN LẬP TẠI MIỀN BẮC VIỆT NAM Lê Thị Toan1, Nguyễn Thị Lan1*, Phạm Công Hoạt2, Nguyễn Thị Ngọc1, Nguyễn Thị Hoa1 Khoa thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam, 2Bộ Khoa học Công nghệ Email*: agrivet.bp@gmail.com, nguyenlan@vnua.edu.vn Ngày gửi bài: 15.12.2016 Ngày chấp nhận: 24.01.2017 TÓM TẮT Trong nghiên cứu tiến hành nghiên cứu độc lực chủng virus PRRS HUA 02 gây hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn tháng tuổi Lợn thí nghiệm âm tính với kháng thể kháng virus PRRS gây nhiễm với liều ml/con qua đường mũi với hiệu giá TCID50 1,74x10 /25 µl Sau gây nhiễm, lợn thí nghiệm theo dõi triệu chứng lâm sàng, nhân lên virus máu, tổn thương đại thể vi thể số quan 21 ngày kể từ ngày gây nhiễm Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng lợn sau gây nhiễm có triệu chứng ủ rũ, mệt mỏi, bỏ ăn, sốt cao, khó thở, tím tai da phát ban, táo bón Kết phản ứng RT-PCR cho thấy diện chủng virus PRRS HUA 02 máu sau ngày gây nhiễm, dịch ngoáy mũi thể sau ngày gây nhiễm Ngoài ra, kết Realtime PCR cho thấy lượng virus PRRS đạt mức cao huyết lợn thí nghiệm ngày sau gây nhiễm Tổn thương đại thể chủ yếu lợn gây nhiễm với chủng virus PRRS HUA 02 phổi sưng, sung huyết, xuất huyết, viêm phổi kẽ; thận xuất huyết điểm, hạch phổi sưng to, tụ máu xoang bao tim tích nước Tổn thương vi thể chủ yếu lợn thí nghiệm phế quản phế viêm phổi, xuất huyết cầu thận Kết thí nghiệm cho thấy chủng virus PRRS HUA 02 có khả gây bệnh cho lợn thí nghiệm với biểu triệu trứng lâm sàng, biến đổi bệnh tích đại thể vi thể giống với lợn mắc chủng virus PRRS độc lực cao gây bệnh tự nhiên ghi nhận miền Bắc Việt Nam Từ khóa: Chủng virus PRRS HUA 02, độc lực Study on Virulence of PRRS Virus Strain Hua 02 Isolated in North Vietnam in Piglets ABSTRACT In this study, we investigated the virulence and pathogenicity of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) strain HUA 02 in 8-weeks old PRRSV antibody-negative pigs Experimental pigs were intranasally inoculated with a dose of TCID50 1,74x10 /25 µl (2 ml/pig) After inoculation, the pigs were recorded for clinical signs, virus replication in the blood, and macroscopic and microscopic lesions of some tissues for 21 days post inoculation The results demonstrated that pigs infected with PRRS HUA 02 virus strain had clinical signs and symptoms of moodiness, fatigue, anorexia, high fever, rapid breathing, dyspnea, skin rash and constipation Reverse transcription PCR (RT-PCR) results revealed the presence of PRRS HUA 02 virus strain in the blood and nasal swabs of infected pigs at and days post inoculation, respectively Similarly, the viral load in serum quantified by Realtime PCR showed that the PRRSV loads were recorded in the serum at days post infection, and reached highest level in all infected pigs at days post infection Macroscopic lesions consistently observed included lung inflammation, congestion, hemorrhage and interstitial pneumonia and kidneys with spotting hemorrhage In lung the lymph nodes were characterized by swelling and hematoma, and in pericardium with hydropericarditis of pigs infected with PRRS HUA 02 virus strain The microscopic lesions were observed mainly in lungs with bronchoalveolar inflammation, haemorrhagic lymph nodes, and hemorrhagic glomeruli The results of our study showed that the PRRSV HUA 02 is capable of causing severe disease in pigs with clinical signs, symptoms, macroscopic and microscopic lesions similar to those of highly-pathogenic PRRS virus strain observed previously in North Vietnam Keywords: PRRS HUA 02 virus strain, virulence 1919 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam ĐẶT VẤN ĐỀ Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) bệnh truyền nhiễm nguy hiểm lợn với nòi giống, lứa tuổi (Hill, 1990) PRRS loại ARN virus với đích cơng đại thực bào, dẫn đến tượng suy giảm miễn dịch lợn, tạo điều kiện cho virus, vi khuẩn gây bệnh khác công PRRS gây thiệt hại nặng nề ngành chăn nuôi lợn Đối với lợn nái, bệnh gây hậu nghiêm trọng như: lợn sơ sinh yếu ớt, giảm số sơ sinh/ổ, tình trạng bệnh kéo dài âm ỉ, rối loạn sinh sản, động dục kéo dài, chậm động dục trở lại Đối với đực giống, số lượng tinh dịch giảm, chất lượng tinh dịch kém, ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ thai chất lượng đàn Lợn sau cai sữa, lợn choai có biểu lợn sốt cao, bỏ ăn, lơng xơ xác, có biểu đường hơ hấp giảm tăng trọng (Nguyễn Thị Lan Dương Thị Minh Huyền, 2012) Bệnh xuất Mỹ năm 1987 lây lan nhanh Năm 1988, bệnh lan sang Canada sau lan sang nước Châu Âu Năm 1991, virus tìm thấy Hà Lan (Terpstra et al., 1991) Năm 1998, bệnh phát Hàn Quốc, Nhật Bản thuộc khu vực Châu Á Từ năm 2005 trở lại đây, bệnh lây lan khắp nước toàn giới Trong nghiên cứu gần Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam xác định số triệu chứng lâm sàng, đặc điểm bệnh lý lợn mắc PRRS tự nhiên (Nguyễn Thị Lan cs., 2010; Tiêu Quang An Nguyễn Hữu Nam, 2012) phân lập số chủng virus PRRS gây bệnh từ đàn lợn ni số tỉnh phía Bắc Việt Nam môi trường tế bào Marc 145 (Nguyễn Thị Lan Lương Quốc Hưng, 2012; Nguyễn Bá Hiên cs., 2015) Tuy nhiên chưa đánh giá hết độc lực hay khả gây bệnh lợn chủng virus phân lập Trong chủng phân lập được, có chủng virus PRRS HUA 02 phân lập từ lợn có triệu chứng bệnh tích điển hình lợn mắc PRRS, gây tỷ lệ ốm, tỷ lệ chết cao Để phục vụ mục đích lựa chọn chủng chế tạo vacxin, đánh giá hiệu vacxin sản xuất chế phẩm sinh học 1920 phịng trị bệnh cho vật ni việc nghiên cứu độc lực hay khả gây bệnh chủng virus phân lập vô quan trọng cấp thiết Xuất phát từ thực tế tiến hành nghiên cứu: “Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS Hua 02 phân lập miền Bắc Việt Nam” NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Nguyên liệu - Động vật: Nghiên cứu tiến hành lơ lợn: lơ thí nghiệm (5 lợn: TN1, TN2, TN3, TN4, TN5) lô đối chứng (3 lợn: ĐC1, ĐC2 ĐC3), tất lợn sau cai sữa thuộc giống Yorkshire, có khối lượng lượng từ 10 - 12 kg/con, chưa tiêm phòng vacxin PRRS Trước tiến hành gây nhiễm, toàn lợn thí nghiệm lấy máu kiểm tra kháng thể kháng PRRSV phương pháp ELISA kiểm tra virus PRRS phương pháp RT-PCR Lợn chọn làm thí nghiệm phải có kết âm tính với kháng thể kháng virus PRRS âm tính với virus PRRS - Chủng giống virus PRRS HUA 02 phân lập từ hạch phổi lợn nái có triệu chứng lâm sàng bệnh tích điển hình lợn mắc PRRS tỉnh Hưng Yên năm 2013 Hiệu giá chủng virus PRRS HUA 02 đạt 1,74x106 TCID50/25 µl Chủng virus lưu giữ bảo quản Phịng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú y, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp RT-PCR Bao gồm bước tách chiết RNA virus bước thực kỹ thuật RT-PCR RNA virus tách chiết kit QIAamp hãng Qiagen (Đức) “Quy trình tách chiết virus theo hướng dẫn nhà sản xuất” Phản ứng RT-PCR thực theo quy trình kít: Cặp mồi sử dụng là: Cặp mồi ORF5 (mồi xuôi: ATG TTG GGG AAG TGC TTG ACC, mồi ngược: CTA GAG ACG ACC CCA TTG TTC Lê Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Thị Ngọc, Nguyễn Thị Hoa CGC) (Feng, 2008), cặp mồi cho phép xác định đoạn gen có kích thước 720 bp có chứa đoạn gen ORF5 virus PRRS có kích thước 603 bp Tiến hành khuếch đại sản phẩm máy PCR với chu kỳ nhiệt: 500C: 30 phút, 950C: 15 phút; 35 chu kỳ (950C: 30 giây, 500C: 30 giây, 720C: phút); 720C: phút, 40C: kết thúc Điện di kiểm tra kết RT-PCR hiệu điện 100 V 30 phút Quan sát chụp ảnh kết điện di sản phẩm RT-PCR máy chụp ảnh gel 2.2.2 Phương pháp Realtime PCR Từ mẫu tách chiết RNA, sử dụng RT-PCR kit (Invitrogen superscript IIIqRT-PCR kit (No.11732-020)), đoạn mồi Probe (xem bảng dưới) Chuẩn bị trộn thành phần cho phản ứng với dung lượng 15 µl gồm có: Nước, 2X reaction, Probe, mồi xuôi, mồi ngược, enzyme RNA mẫu Khuếch đại sản phẩm máy Realtime PCR với chu kỳ nhiệt: 500C: 15 phút; 950C: phút; 40 chu kỳ: 950C: 15 giây; 600C: 15 giây Đọc kết quả: (+) Mẫu dương tính với giá trị Ct < 35; (-) Mẫu âm tính với giá trị Ct ≥ 35 Virus Virus PRRS Primer/Probe giá trị Ct = N/A (Ct – cycle threshold): Chu kỳ ngưỡng định nghĩa số chu kỳ PCR mà tín hiệu huỳnh quang đặc hiệu lớn ngưỡng Nói khác đi, số chu kỳ phản ứng realtime PCR tín hiệu đặc hiệu vượt khỏi tín hiệu nền) 2.2.3 Gây bệnh thực nghiệm Bố trí thí nghiệm: Lợn thí nghiệm chia thành lơ: Lơ thí nghiệm (kí hiệu từ TN1 đến TN5) lơ đối chứng (kí hiệu ĐC1, ĐC2 ĐC3) Thí nghiệm: Khu thí nghiệm đảm bảo có độ an toàn sinh học cấp II: Vệ sinh sẽ, thường xuyên phun thuốc sát trùng vô trùng dụng cụ sử dụng quy định, có màng lọc khơng khí khơng ngăn chặn mầm bệnh từ bên ngồi vào từ phịng gây nhiễm sang phịng đối chứng Nhiệt độ phịng trì từ 30 - 320C, độ ẩm không 90%, lợn cho ăn bữa/ngày (sáng, trưa, tối) theo phần lợn sau cai sữa thức ăn công nghiệp Gây nhiễm cho lợn: Nhóm lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 vào thể lợn qua qua đường mũi lọ nhỏ mũi với liều ml/con, hiệu giá 1,74x106/25 µl Trình tự (5’-3’) Probe (FAO) CGCGTAGAACTGTGACAACAACGCTGA Mồi xuôi (FAO) CCCAAGCTGATGACACCTTTG Mồi ngược (FAO) AATCCAGAGGCTCATCCTGGT Nhuộm huỳnh quang Hex Hình Gây nhiễm virus cách nhỏ qua niêm mạc mũi 1921 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam Theo dõi lợn sau gây nhiễm: thể trạng, tình hình sức khỏe, tình trạng ăn uống quan sát ghi chép hàng ngày Theo dõi thân nhiệt lợn thí nghiệm cách đo nhiệt kế hậu môn lợn lần/ngày vào sáng 17 chiều Tiến hành lấy máu vịnh tĩnh mạch cổ lợn dịch ngoáy xoang mũi vào thời điểm 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19 21 ngày sau gây nhiễm để kiểm tra có mặt virus thể lợn thí nghiệm Máu dịch ngoáy xoang mũi bảo quản lạnh thùng đá vận chuyển phịng thí nghiệm ngày 2.2.4 Xác định bệnh tích đại thể vi thể Làm tiêu vi thể: Bệnh phẩm cố định formol 10%, đúc parafin hệ thống chuyển đúc mô tự động STP 120 Các tiêu cắt độ dày - µm, sau nhuộm phương pháp HE (Haematoxylin Eosin) 2.2.5 Xử lý số liệu Số liệu thân nhiệt lợn thí nghiệm trước sau gây nhiễm, hàm lượng kháng thể lợn thí nghiệm phân tích Microsoft Office Excel 2007 Các tài liệu tham khảo báo trích dẫn phần mềm EndNote X7 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Quy trình mổ khám: Lợn mổ khám theo tiêu chuẩn TCVN 8402:2010 (Bộ Khoa học Công nghệ, 2010) Các lợn thí nghiệm mổ khám chết trình theo dõi sau thời gian theo dõi (21 ngày), ghi chép, chụp ảnh để thu thập thơng tin bệnh tích đại thể Các mẫu quan từ lợn mổ khám dày, ruột non, ruột già, hạch lympho, gan, phổi, thận cố định formol 10% để làm tiêu xác định biến đổi vi thể 3.1 Kết kiểm tra xuất thải virus Sự xuất virus máu, dịch ngoáy xoang mũi sau gây nhiễm xác định phương pháp RT-PCR, kết trình bày bảng hình Qua bảng hình chúng tơi thấy lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 sau ngày gây nhiễm thứ có xuất virus PRRS máu, đến ngày thứ Bảng Kết xét nghiệm có mặt virus PRRS phương pháp RT-PCR Lơ TN gây nhiễm chủng PRRS HUA 02 Ngày gây nhiễm Máu (Số mẫu (+)/số mẫu kiểm tra) Dịch ngoáy mũi (Số mẫu (+)/số mẫu kiểm tra) Máu (Số mẫu (+)/số mẫu kiểm tra) Dịch ngoáy mũi (Số mẫu (+)/số mẫu kiểm tra) 0/5 0/5 0/3 0/3 4/5 0/5 0/3 0/3 5/5 4/5 0/3 0/3 5/5 5/5 0/3 0/3 5/5 5/5 0/3 0/3 11 5/5 5/5 0/3 0/3 13 5/5 5/5 0/3 0/3 15 4/4 4/4 0/3 0/3 17 4/4 4/4 0/3 0/3 19 4/4 4/4 0/3 0/3 21 4/4 4/4 0/3 0/3 Ghi chú: Lô TN: Lơ lợn thí nghiệm; (+) Dương tính 1922 Lơ đối chứng Lê Th Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Công Hoạt, Nguyễn n Thị Th Ngọc, Nguyễn Thị Hoa 720 bp Hình Kết phản ứng RT RT-PCR PCR với mồi khuếch đại đoạn gen ORF5 sau ngày gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 Ghi chú: Thang chuẩn M 100 bp; giếng từ - mẫu máu lợn gây nhiễm chủng PRRS HUA 02 sau ngày , giếng đối chứng âm (nước tinh khiết không chứa RNA DNA); giếng đối chứng dương (RNA vacxin PRRS PRRS) Với kích thước vạch DNA 720 bp sau gây nhiễm thấy virus xuất dị dịch ngốy mũi Trong đó, lợn đối chứng cho kết âm tính hồn tồn khỏe mạnh Chứng tỏ gây nhiễm thành công cho lợn Ơ Ở ngày thứ 14 sau gây nhiễm, lợn TN3 lô gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 chết với triệu chứng lâm sàng bệnh tích điển hình lợn bị mắcc PRRS Lợn cịn lại có biểu lâm sàng đặc trưng lợn mắc virus PRRS lấy máu dịch ngoáy mũi để xét nghiệm có mặt a virus kết dương tính với virus PRRS đến hết thời gian theo dõi (21 ngày sau gây nhiễm) Lợn thí nghiệm gây nhiễm virus PRRS chết tiến hành mổ khám lấy mẫu để chẩn đoán phương pháp RT-PCR PCR Kết r Bảng ng K Kết xác định hàm lượng a virus PRRS máu b phương pháp Realtime-PCR Lô gây nhi nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 Lô đối ứng Ngày Cttb Kết Cttb Kết 41,23 ± 0,31 - N/A - 27,27 ± 0,22 + N/A - 18,24 ± 0,34 + N/A - 16,87 ± 0,27 + N/A - 16,11 ± 0,25 + N/A - 11 18,85 ± 0,16 + N/A - 13 20,52 ± 0,31 + N/A - 15 20,57 ± 0,34 + N/A - 17 25,65 ± 0,37 + N/A - 19 26,57 ± 0,12 + N/A - 21 28,38 ± 0,21 + N/A - Ghi chú: Cttb: Giá trị Ct tr trung bình lợn thí nghiệm; (+) Mẫu dương tính; (-) Mẫu âm tính 1923 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam lợn chết thí nghiệm dương tính với virus PRRS Dựa vào triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể kết chẩn đoán RT-PCR lợn TN3 chết virus PRRS gây 3.2 Kết triệu chứng lâm sàng chủ yếu lợn gây nhiễm Bên cạnh việc chẩn đoán phương pháp RT-PCR để xác định có mặt virus PRRS, chúng tơi cịn sử dụng phương pháp Realtime PCR để xác định hàm lượng virus PRRS máu lợn thí nghiệm Kết biểu diễn bảng Sau gây bệnh, tiến hành đo thân nhiệt ngày lợn vào thời điểm cố định sáng 17 chiều Sau ghi chép lại, xử lý số liệu qua Excel thể hình Lợn sốt thân nhiệt lớn 39,50C Qua hình thấy lợn thí nghiệm có biểu sốt cao Qua bảng thấy kết Realtime PCR phù hợp với kết RT-PCR Ngày thứ sau gây nhiễm, virus xuất máu lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 với giá trị Ct = 27,27 ± 0,22 Sau virus tiếp tục nhân lên máu làm cho hàm lượng virus máu lợn thí nghiệm tăng lên đạt giá trị cao ngày số với giá trị Cttb = 16,11 ± 0,25 Ở ngày tiếp theo, hàm lượng virus máu lợn thí nghiệm giữ mức cao, có xu hướng giảm dần đến ngày theo dõi số 21 (mổ khám lợn thí nghiệm cịn lại) thể giá trị Cttb tăng dần Giá trị Ct tăng cao đồng nghĩa với hàm lượng virus giảm ngược lại Ở lô đối chứng, tất ngày theo dõi lấy máu không thấy xuất virus máu, thể giá trị Ct không xác định (Ct = N/A) 3.2.1 Thân nhiệt lợn gây bệnh thực nghiệm với chủng PRRS HUA 02 Lợn thí nghiệm gây nhiễm sau ngày, nhiệt độ dao động phạm vi sinh lý bình thường, sau - ngày gây bệnh, lợn bắt đầu có biểu sốt lợn giữ thân nhiệt mức cao từ ngày số đến ngày số 14 sau gây nhiễm Lợn có tượng sốt virus công vào thể, phá huỷ tế bào sản sinh chất độc, kích thích vào trung khu điều hồ nhiệt, làm rối loạn trung khu điều hoà nhiệt, gây tượng sốt cao, kèm theo tượng mệt mỏi, giảm ăn bỏ ăn Lợn đối chứng có nhiệt độ dao động phạm vi sinh lý bình thường Theo nghiên cứu Ishibata et al (2000), lợn bắt đầu sốt vào ngày - sau gây nhiễm virus PRRS, thân nhiệt lợn đạt mức cao sau gây nhiễm ngày thứ 9, tình trạng sốt kéo dài khoảng 15 - 16 ngày trở ngưỡng sinh lý bình thường Tương tự nghiên cứu Li et al., Nhiệt độ (0C) 42,000 41,000 40,000 Lô TNtb 39,000 Lô ĐCtb 38,000 37,000 36,000 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Ngày Hình Thân nhiệt trung bình lợn sau gây bệnh thực nghiệm với chủng virus PRRS HUA 02 (0C) 1924 Lê Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Thị Ngọc, Nguyễn Thị Hoa (2014), lợn thí nghiệm sau gây nhiễm chủng cường độc WUH2 phân lập Trung Quốc, cho thấy tượng sốt từ ngày thứ sau gây nhiễm thân nhiệt đạt mức cao ngày thứ 10 với thân nhiệt trung bình lợn thí nghiệm khoảng 41,70C Như vậy, kết diễn biến thân nhiệt lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 tương tự với số chủng cường độc nghiên cứu Ishibata et al (2000) Li et al (2014), Nguyễn Thị Lan cs (2014) 3.2.2 Triệu chứng lâm sàng chủ yếu lợn gây nhiễm với chủng virus PRRS HUA 02 Lợn thí nghiệm lợn đối chứng theo dõi triệu chứng lâm sàng sau 21 ngày, kết theo dõi ghi chép lại theo ngày tổng hợp bảng Qua bảng thấy 100% lợn lơ thí nghiệm có biểu triệu chứng PRRS sau gây nhiễm có 1/5 lợn thí nghiệm bị chết vào ngày số 14, chiếm tỉ lệ 20% tổng số động vật lơ thí nghiệm Triệu chứng lâm sàng chủ yếu lợn gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 là: sốt cao, giảm ăn, bỏ ăn, ho khó thở, thở thể chó ngồi (Hình 7), tím tai, mắt có dử, chảy nước mắt, nước mũi (Hình 6), táo bón, tiêu chảy có nốt ban thể lợn thí nghiệm (Hình 5) Mức độ nặng nhẹ triệu chứng gần giống lợn thí nghiệm Trong lợn đối chứng ăn uống khỏe mạnh bình thường Trong nghiên cứu thực nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HuN4 cho lợn, tác giả Liu et al (2010) mơ tả tiến trình phát bệnh sau, lợn có biểu giảm tính thèm ăn, giảm tăng trọng, tăng thân nhiệt tiếp đến triệu chứng hệ hơ hấp như: khó thở, ho, chảy nhiều dịch mũi đặc giống đờm Từ 10 - 21 ngày gây nhiễm nhiều lợn thí nghiệm có biểu liệt chân sau, run cơ, tiêu chảy nặng, đỏ vùng da mỏng, cạnh tai chuyển dần sang màu xanh Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng lợn thí nghiệm sau gây nhiễm PRRS HUA 02 tương đối giống với kết nghiên cứu Liu et al (2010) triệu chứng lợn đường hơ hấp, nhiên có điểm khác biệt lợn nghiên cứu khơng có biểu liệt chân run nghiên cứu Liu et al (2010) Ngoài ra, kết triệu chứng lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 tương tự với công bố Halbur et al., 1995; Kim et al., 2015; Leng et al., 2012 Park et al., 2014 Bảng Triệu chứng lợn gây nhiễm với chủng virus PRRS HUA 02 Lơ thí nghiệm Lơ TN Lơ đối chứng Lợn thí nghiệm Triệu chứng lâm sàng Ghi TN1 Giảm, bỏ ăn, sốt cao, khó thở, ho, mắt nhiều dử, phát ban, tím tai, táo bón sau tiêu chảy Mổ khám sau 21 ngày theo dõi TN2 Giảm ăn, bỏ ăn, sốt cao, khó thở, tím tai, ho, phát ban, sưng mí mắt, chảy nước mũi Mổ khám sau 21 ngày theo dõi TN3 Giảm ăn, bỏ ăn, lông xù, da khô, mắt, mũi nhiều dử chảy nhiều nước mũi, khó thở nặng, ho, tím tái vùng tai da mỏng, táo bón tiêu chảy Chết sau 14 TN4 Giảm ăn, sốt cao, chảy nước mũi, khó thở Mổ khám sau 21 ngày theo dõi TN5 Giảm ăn, sốt cao, chảy nước mũi, khó thở, lông khô Mổ khám sau 21 ngày theo dõi lợn đối chứng Lợn khỏe mạnh, ăn uống bình thường Không chết ngày sau gây nhiễm Ghi chú: TN1 - TN5: lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 1925 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam Hình Lợn mệt mỏi lười vận động Hình Lợn xuất huyết Hình Mí mắt sưng, có nhiều dử mắt Hình Lợn thở chó ngồi 3.3 Nghiên cứu biến đổi bệnh lý lợn thực nghiệm 3.3.1 Kết bệnh tích đại thể lợn gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 Sau gây nhiễm virus PRRS, lợn bị chết tiến hành mổ khám để quan sát bệnh tích lợn cịn lại mổ khám ngày 21 (sau kết thúc thí nghiệm) để quan sát, ghi chép lại bệnh tích đại thể Bệnh tích đại thể quan lợn thí nghiệm trình bày bảng Từ bảng thấy mổ khám lợn thí nghiệm lơ gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 có biểu bệnh tích đại thể phổi, hạch lympho chiếm tỷ lệ cao 1926 Bệnh tích phổi: Phổi xuất huyết tạo đám, mảng loang lổ, hình dạng phổi bẹp áp sát vào khung sườn, bề mặt phổi, rìa phổi có dịch nhầy đặc, mặt cắt phổi có mủ, số lợn bệnh có bệnh tích viêm phổi dính sườn Phổi lợn mắc PRRS bị thuỷ thũng, sưng to làm cho bề mặt phổi căng lên bóng láng, viêm kẽ phổi điển hình Nghiên cứu bệnh tích lợn mắc PRRS XiaoLei et al (2009) trường Đại học Nông nghiệp Shandong Trung Quốc (2009) gây nhiễm nhân tạo chủng virus PRRS (VR2332) cho lợn thí nghiệm quan sát thấy triệu chứng phổi nhục hóa nghiêm trọng Hạch lympho: Các lợn thí nghiệm có biểu bệnh tích hạch lympho, đặc biệt hạch phổi, hạch amidan, hạch hàm, hạch Lê Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Thị Ngọc, Nguyễn Thị Hoa Bảng Bệnh tích đại thể lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng PRRS HUA 02 Gây nhiễm PRRS HUA 02 Cơ quan Đối chứng Bệnh tích quan TN1 TN2 TN3 TN4 TN5 ĐC1 ĐC2 ĐC3 +++ +++ +++ +++ +++ - - - Hạch lympho Sưng Xuất huyết ++ ++ ++ +++ +++ - - - Phổi Viêm +++ +++ +++ +++ +++ - - - Xuất huyết +++ +++ +++ +++ ++ - - - Mặt cắt phổi nhớt ++ ++ ++ + ++ - - - Tích nước xoang bao tim ++ - ++ + - - - - Tim Cơ tim nhão + ++ ++ + - - - - Sưng +++ ++ + + ++ - - - Nhồi huyết ++ ++ ++ + - - - - Điểm hoại tử + ++ + - - - - - Sung huyết ++ ++ ++ + + - - - Bị bào mòn + ++ ++ + - - - - Xuất huyết ++ ++ ++ - - - - - Xuất huyết điểm +++ - ++ +++ ++ - - - Sung huyết ++ - + ++ ++ - - - Dạ dày Xuất huyết + ++ ++ - - - - - Não Sung huyết + ++ + - - - - - Gan Sưng + + ++ - - - - - Sung huyết ++ + + - - - - - Điểm thoái hoá, hoại tử ++ - + - - - - - Lách Ruột Thận Ghi chú: (+++): Nặng, (++): Trung bình, (+): Nhẹ, (-): Khơng biểu hiện; TN1 - TN5: lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02; ĐC1, ĐC2, ĐC3: Lợn đối chứng 1, lợn đối chứng lợn đối chứng bẹn nông sưng to xuất huyết Các hạch lympho tụ máu sưng to, tụ máu hạch lympho vùng phổi Quan sát hạch thấy hạch to bình thường - lần, màu đỏ thẫm, có trường hợp xuất huyết, cắt đơi hạch có dịch màu hồng chảy Tác giả Li et al (2010) thuộc trường Đại học Nông nghiệp Mongolia cho biết, lợn mắc PRRS hạch màng treo ruột xuất huyết nặng Tổn thương hệ thống hạch phổi, hạch amidan, hạch màng treo ruột khẳng định qua nghiên cứu Ding et al (2005) Bệnh tích tim: Màng bao tim có tượng viêm dính, xoang ngực có chứa nhiều dịch trắng đục Cơ tim thường nhạt màu, nhão, độ rắn Nguyên nhân trình viêm phổi làm cho lợn mắc PRRS khó thở để đáp ứng nhu cầu oxi cho hô hấp tim phải tăng cường hoạt động bù hoạt động mức tim bị thoái hoá điều khơng tránh khỏi Bệnh tích thận: Thận xuất huyết lấm chấm giống đầu đinh ghim, bổ đôi thận thấy bể thận xuất huyết nặng Nếu quan sát bệnh tích lách, thận hạch màng treo nhầm với bệnh dịch tả lợn Nghi ngờ điều này, chẩn đốn có mặt virus dịch tả lợn, nhiên mẫu nghi cho kết âm tính Thận xuất huyết điểm bệnh tích chủ yếu thận Có nhiều điểm xuất huyết bề mặt thận mơ thận Ngồi ra, cịn thấy tượng tụ huyết thận, biến đổi Bệnh tích gan: Nhiều có biểu gan khác thường, sưng, bề mặt có mảng đen hoại tử, bệnh tích chiếm tỷ lệ nhỏ Bệnh tích dày, ruột: Bệnh tích dày ruột lợn thí nghiệm gây bệnh thực 1927 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam nghiệm bệnh tích chủ yếu Tuy nhiên, chúng tơi quan sát số lợn có biểu dày xuất huyết, ruột xuất huyết nhiều đoạn khác nhau, nhiên bệnh tích nặng hạch màng treo ruột tượng nhồi huyết vùng rìa lách Qua quan sát bệnh tích lách lợn thí nghiệm chúng tơi thấy có nhiều nét tương đồng với nghiên cứu Bệnh tích lách: Lách lợn thí nghiệm thường sần sùi Lách nhồi huyết biểu mà quan sát được, nhiên tượng nhồi huyết khơng đặc trưng thấy tồn lách lợn mắc PRRS tụ máu làm cho lách to bình thường, có trường hợp lách tím lại tụ máu Năm 2009, gây bệnh thực nghiệm cho lợn với chủng virus cường độc VR 2332, XiaoLei et al (2009) mơ tả bệnh tích lách viêm, xuất huyết kèm theo Theo kết nghiên cứu Nguyễn Thị Lan cs (2014) sau gây nhiễm thực nghiệm chủng virus cường độc BN-10 cho lợn thí nghiệm bệnh tích đại thể tập trung chủ yếu phổi, hạch lympho, thận, lách, kết phù hợp với nhận định nhiều tác giả nghiên cứu (Phạm Ngọc Thạch Đàm Văn Phải, 2007) (Nguyễn Thị Lan cs., 2010) Có thể kết luận chủng virus PRRS HUA 02 chủng virus có khả gây bệnh tương đương với chủng virus cường độc Hình Viêm kẽ phổi Hình Phổi viêm, xuất huyết Hình 10 Phổi viêm, bề mặt phổi căng bóng Hình 11 Hạch màng treo ruột tụ máu 1928 Lê Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Cơng Hoạt, Nguyễn Thị Ngọc, Nguyễn Thị Hoa Hình 12 Xoang bao tim tích nước Hình 13 Hạch bẹn nơng xuất huyết 3.3.2 Kết bệnh tích vi thể lợn Trong tiêu bệnh phẩm xuất vùng phế quản - phế viêm, vùng tổn thương xen kẽ vùng lành Vùng trung tâm phế quản viêm nặng xung quanh phế nang viêm mức độ khác nhau, nặng phế nang tiếp giáp với phế quản, phế nang xa phế quản viêm nhẹ Trong lịng phế quản chứa đầy BCĐNTT thối hố khơng thối hố, tế bào biểu mơ long Vách phế quản xung huyết đơi bị phù, thâm nhiễm BCĐNTT có tập trung thành đám lớn che khuất cấu trúc phế quản Ngồi chúng tơi cịn tìm thấy thể vùi nguyên sinh chất tế bào bị virus phá huỷ Những biến đổi thấy báo cáo kết Li et al (2007) nghiên cứu virus chủng độc lực cao miền Trung Trung Quốc gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 Với lợn thí nghiệm sau mổ khám quan sát bệnh tích đại thể, chúng tơi tiến hành lấy mẫu phận như: Gan, thận, lách, phổi, hạch lympho, tim, ruột, dày, não ngâm bảo quản formol 10%, làm tiêu vi thể Bệnh tích vi thể lợn thí nghiệm trình bày bảng Nhận xét: Qua kết nghiên cứu đặc điểm bệnh tích vi thể lơ gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 cho kết bệnh tích vi thể tương tự phù hợp với bệnh tích đại thể lợn nghiên cứu Bệnh tích vi thể phổi: Kết cho thấy phổi tất lợn bệnh có bệnh tích vi thể chủ yếu thâm nhiễm viêm, lòng phế nang chứa đầy dịch rỉ viêm, tế bào viêm, phế nang bị nhăn, hình thành tế bào khổng lồ nhiều nhân đại thực bào bị phân hủy phế nang Qua nghiên cứu chúng tơi thấy bệnh tích vi thể đáng ý lợn thí nghiệm biến đổi phổi Lợn thí nghiệm có tượng viêm kẽ phổi tăng sinh Cặn tế bào đại thực bào tế bào lympho nằm kẽ phổi đồng thời phổi xuất tế bào xơ Mức độ xơ hóa khơng đồng mà tuỳ thuộc vào tiến triển bệnh Virus xâm nhiễm phá hủy đại thực bào phế nang Lòng phế nang tràn dịch xâm nhiễm tế bào viêm tế bào đơn nhân lớn, bạch cầu đa nhân trung tính (BCĐNTT), lympho bào Phổi xuất huyết lòng phế quản phế nang chứa đầy hồng cầu màu đỏ tươi Nhiều tế bào phổi bị hoại tử có huyết khối nhỏ lịng mạch quản thành phần máu tách đông lại Kết bệnh tích phổi cho thấy tương đồng với kết nghiên cứu Tiêu Quang An Nguyễn Hữu Nam (2011) Bệnh tích vi thể hạch lympho: Quan sát cho thấy đa số hạch bị xuất huyết Hạch bị thối hóa, hoại tử thâm nhiễm tế bào viêm đại thực bào, bạch cầu đa nhân trung tính, lympho bào… Bệnh tích vi thể lách: Lách sung huyết, thoái hoá hoại tử Trên tiêu lách thấy 1929 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam Bảng Bệnh tích vi thể chủ yếu lợn gây bệnh thực nghiệm chủng virus PRRS HUA 02 Cơ quan Phổi Hạch lympho Gan Lách Thận Ruột Lô gây nhiễm virus PRRS HUA 02 Đối chứng Bệnh tích quan TN1 TN2 TN3 TN4 TN5 ĐC1 ĐC2 ĐC3 Xuất huyết +++ +++ +++ +++ +++ - - - Sung huyết +++ +++ +++ +++ +++ - - - Thâm nhiễm tế bào viêm +++ +++ +++ +++ +++ - - - Phế quản- phế viêm +++ +++ +++ ++ +++ - - - Xuất huyết +++ +++ +++ ++ +++ - - - Sung huyết ++ ++ +++ ++ +++ - - - Tăng sinh nang lympho ++ ++ ++ ++ ++ - - - Sung huyết ++ + ++ + + - - - Thối hóa tế bào ++ - + - - - - - Xuất huyết ++ - ++ ++ ++ - - - Thối hóa tế bào + + ++ - - - - - Viêm kẽ thận ++ ++ ++ ++ ++ - - - Sung huyết +++ +++ ++ +++ +++ - - - Xuất huyết +++ +++ +++ +++ +++ - - - Thâm nhiễm tế bào viêm ++ ++ ++ + + - - - Sung huyết + + - + - - - - Xuất huyết ++ ++ ++ + + - - - Não Sung huyết + ++ + - - - - - Dạ dày Xuất huyết + ++ ++ - - - - - Tim Thâm nhiễm tế bào viêm + + + - - - - - Thối hóa tế bào - + + - - - - - ++ - ++ + - - - - Xuất huyết Ghi chú: (+++): Nặng, (++): Trung bình, (+): Nhẹ, (-): Không biểu hiện; TN1 - TN5: lợn thí nghiệm gây nhiễm chủng virus PRRS HUA 02 ; ĐC1, ĐC2, ĐC3: Lợn đối chứng 1, lợn đối chứng lợn đối chứng vách đứt nát, tế bào thoái hoá xen kẽ với tế bào lành, thâm nhiễm hồng cầu lan tràn nhu mơ lách Lách có tượng nhời hút, thâm nhiễm tế bào viêm vùng tủy trắng tủy đỏ Bệnh tích vi thể thận: Bệnh tích vi thể thận chủ yếu biểu viêm kẽ thận Ngồi cịn quan sát thấy biến đổi bệnh lý thâm nhiễm tế bào viêm cịn có biến đổi kẽ thận xuất huyết Bên cạnh biến đổi vi thể nêu trên, q trình nghiên cứu chúng tơi cịn phát thêm số biến đổi khác như: Lớp lông nhung lớp niêm mạc ruột bị bong tróc 1930 tiêu vi thể ruột, niêm mạc ruột xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm Não bị sung huyết, hồng cầu tràn ngập lòng mạch quản Gan có tượng sung huyết, hồng cầu xâm lấn Dạ dày tim xuất huyết thâm nhiễm tế bào viêm Qua kết biến đổi bệnh tích vi thể lợn gây nhiễm thực nghiệm chủng virus PRRS HUA 02 kết hợp với việc so sánh bệnh tích vi thể gây chủng virus cường độc nghiên cứu khác, thấy chủng virus PRRS HUA 02 có khả gây bệnh tích vi thể tương tự chủng cường độc cao Lê Thị Toan, Nguyễn Thị Lan, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Thị Ngọc, Nguyễn Thị Hoa Hình 14 Phế quản có dịch viêm (HE 40X) Hình 15 Viêm kẽ phổi (HE 10X) Hình 16 Xuất huyết kẽ thận, Hình 17 Gan sung huyết (HE 40X) tế bào viêm tăng sinh (HE 10X) KẾT LUẬN Chủng virus PRRS HUA 02 có độc lực khả gây Hội chứng rới loạn hơ hấp sinh sản (PRRS) lợn thí nghiệm tương đương với chủng virus cường độc, với triệu chứng bệnh tích điển hình lợn mắc PRRS Triệu chứng lâm sàng chủ yếu lợn gây nhiễm là: sốt, ho, khó thở, giảm ăn, phát ban, sưng phù mí mắt Chỉ tiêu virus huyết: sau gây nhiễm ngày xuất virus PRRS máu sau ngày thấy virus xuất dịch ngoáy mũi, virus kéo dài máu đến hết thời gian theo dõi thí nghiệm (21 ngày) Bệnh tích đại thể chủ yếu lợn thí nghiệm mắc PRRS tập trung phổi, phổi viêm, xuất huyết, phổi bị nhục hóa Hạch lympho sưng, tụ máu, xuất huyết Thận xuất huyết điểm Lách nhồi huyết Não sung huyết, xuất huyết Ruột, dày sung huyết xuất huyết Bệnh tích vi thể chủ yếu lợn mắc PRRS thí nghiệm: Phổi xuất huyết, phế quản - phế viêm, tế bào viêm tràn lan phổi Hạch lympho xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, nang lympho thối hóa Thận có tượng viêm kẽ thận, thâm nhiễm tế bào viêm Não sung huyết Dựa vào kết trên, chủng virus PRRS HUA 02 lựa chọn để tiến hành nghiên cứu sâu phục vụ cho nghiên cứu chọn chủng virus tiềm để sản xuất vacxin, thử độc lực vacxin sản xuất chế phẩm sinh học phục vụ cho chẩn đốn, phịng trị PRRS 1931 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam TÀI LIỆU THAM KHẢO Ding B.-l., C.-l Sang, M.-h Yan, X.-l Li, Y.-z Wang and J.-h Huang (2005) Pathological Changes in Piglets Infected with SJ Strain of PRRSV [J] Chinese Journal of Veterinary, 5: 002 Done S., D Paton and M White (1996) Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS): a review, with emphasis on pathological, virological and diagnostic aspects British veterinary journal, 152(2): 153-174 Feng Y., T Zhao, T Nguyen, K Inui, Y Ma, T H Nguyen, V C Nguyen, D Liu, Q A Bui and L T To (2008) Porcine respiratory and reproductive syndrome virus variants, Vietnam and China, 2007 Emerg Infect Dis., 14(11): 1774-6 Halbur P., P S Paul, M Frey, J Landgraf, K Eernisse, X.-J Meng, M Lum, J Andrews and J Rathje (1995) Comparison of the pathogenicity of two US porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates with that of the Lelystad virus Veterinary Pathology Online, 32(6): 648-660 Hill, H (1990) Overview and history of mystery swine disease (swine infertility and respiratory syndrome) In: Proceedings of the Mystery Swine Disease Communication Meeting Denver, CO, pp 29-31 Ishibata s., M MORI and h SYAZAWA (2000) Experimental reinfection with homologous porcine reproductive and respiratory syndrome virus in SPF pigs Journal of Veterinary Medical Science, 62(1): 105-108 Kim T., C Park, K Choi, J Jeong, I Kang, S.-J Park and C Chae (2015) Comparison of two commercial type porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) modified live vaccines against heterologous type and type PRRSV challenge in growing pigs Clinical and Vaccine Immunology, 22(6): 631-640 Leng X., Z Li, M Xia, Y He and H Wu (2012) Evaluation of the efficacy of an attenuated live vaccine against highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus in young pigs Clinical and Vaccine Immunology, 19(8): 1199-1206 Li B., L Fang, Y J S Liu and H Chen and S Xiao (2014) The genomic and pathogenic characteristics of the highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolate WUH2 ISRN Virology Li Y., X Wang, K Bo, X Wang, B Tang, B Yang, W Jiang and P Jiang (2007) Emergence of a highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus in the Mid-Eastern region of China The Veterinary Journal, 174(3): 577-584 1932 Liu Y., W Shi, E Zhou, S Wang, S Hu, X Cai, F Rong, J Wu, M Xu and M Xu (2010) Dynamic changes in inflammatory cytokines in pigs infected with highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus Clinical and Vaccine Immunology 17(9): 1439-1445 Nguyễn Bá Hiên, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Hữu Nam, Trịnh Đình Thâu, Phạm Hồng Ngân, Phạm Ngọc Thạch, Lê Huỳnh Thanh Phương, Chu Đức Thắng, Huỳnh Thị Mỹ Lệ Nguyễn Bá Tiếp (2015) Nghiên cứu công nghệ sản xuất vacxin vơ hoạt phịng hội chứng rối loạn hơ hấp sinh sản lợn Đề tài cấp Nhà nước Nguyễn Thị Lan Dương Thị Minh Huyền (2012a) Đặc điểm bệnh lý hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp (PRRS) lợn sau cai sữa lợn choai xác định kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang Tạp chí khoa học Kỹ thuật thú y, XIX(3): 18-25 Nguyễn Thị Lan Lương Quốc Hưng (2012b) Nghiên cứu số đặc tính sinh học virus gây hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) phân lập đàn lợn nuôi số tỉnh phía Bắc, Việt Nam Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, kỳ tháng 7, tr 82 - 87 Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Hữu Nam, Bùi Trần Anh Đào, Trần Quốc Tuấn Phạm Văn Sơn (2014) Nghiên cứu khả gây bệnh thực nghiệm lợn virus gây hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp (PRRS) chủng BN-10 phân lập Việt Nam Tạp chí khoa học Kỹ thuật thú y, XXI(5): 5-13 Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Thị Hoa, Bùi Tố Nga, Nguyễn Thị Thanh Nhàn Lê Huỳnh Thanh Phương (2010) Một số đặc điểm bệnh lý lợn nái mắc hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản Tạp chí Khoa học Phát triển, 8(1): 68-75 Nodelijk G., M Nielen, M De Jong and J Verheijden (2003) A review of porcine reproductive and respiratory syndrome virus in Dutch breeding herds: population dynamics and clinical relevance Preventive veterinary medicine, 60(1): 37-52 Park C., H W Seo, I Kang, J Jeong, K Choi and C Chae (2014) A New Modified Live Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Vaccine Improves Growth Performance in Pigs under Field Conditions Clinical and Vaccine Immunology, 21 (9): 1350-1356 Phạm Ngọc Thạch Đàm Văn Phải (2007) Một số tiêu lâm sàng, tiêu máu lợn mắc hội chứng rố loạn sinh sản hô hấp (bệnh tai xanh) số đàn lợn tỉnh Hải Dương Hưng Yên Hội thảo Hội chứng rối loạn hô hấp - sinh sản bệnh liên cầu khuẩn lợn, ngày 11/10/2007, Đại học Nông nghiệp Hà Nội Vietnam J Agri Sci 2016, Vol 14, No 12: 1919-1933 Terpstra C., G Wensvoort and J Pol (1991) Experimental reproduction of porcine epidemic abortion and respiratory syndrome (mystery swine disease) by infection with Lelystad virus: Koch's postulates fulfilled Veterinary Quarterly, 13(3): 131-136 Tiêu Quang An Nguyễn Hữu Nam (2011) Một số đặc điểm bệnh lý đại thể vi thể lợn bị hội chứng Tạp chí KH Nông nghiệp Việt Nam 2016, tập 14, số 12: 1919-1933 www.vnua.edu.vn rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) Tạp chí khoa học Kỹ thuật thú y, XVIII (6): 24-30 XiaoLei G., L SiDang, L ZhongZi and W TianHu (2009) Comparative pathology of piglets naturally infected with high-pathogenic PRRSV and artificially infected with American strains PRRSV (VR-2332) Chinese Journal of Veterinary Science, 29(4): 451-455 1933 ... nghiên cứu độc lực hay khả gây bệnh chủng virus phân lập vô quan trọng cấp thiết Xuất phát từ thực tế tiến hành nghiên cứu: ? ?Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS Hua 02 phân lập miền Bắc Việt. .. hoại tử Trên tiêu lách thấy 1929 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam Bảng Bệnh tích vi thể chủ yếu lợn gây bệnh thực nghiệm chủng virus PRRS HUA 02 Cơ quan... trung bình lợn thí nghiệm; (+) Mẫu dương tính; (-) Mẫu âm tính 1923 Nghiên cứu độc lực lợn chủng virus PRRS HUA 02 phân lập miền Bắc Việt Nam lợn chết thí nghiệm dương tính với virus PRRS Dựa vào

Ngày đăng: 21/05/2021, 10:29

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan