Virus gây bệnh hoại tử cơ quan tạo máu và lập biểu mô (IHHNV) là nguyên nhân gây chết trên tôm xanh, hội chứng biến dạng và còi cọc chậm lớn trên tôm thẻ chân trắng. Mẫu tôm sú được thu từ các mô hình nuôi (thâm canh, bán thâm canh và quảng canh) và trại giống ở Đồng bằng sông Cửu Long và miền Trung từ năm 2012-2013.
VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN TÌNH TRẠNG NHIỄM IHHNV Ở TÔM SÚ NUÔI (Peneaus monodon) TRÊN CÁC MƠ HÌNH NI Ở ĐỒNG BẰNG SƠNG CỬU LONG Cao Thành Trung1*, Nguyễn Hồng Lộc1, Phạm Công Nguyên2 Nguyễn Văn Hảo3 TÓM TẮT Virus gây bệnh hoại tử quan tạo máu lập biểu mô (IHHNV) nguyên nhân gây chết tôm xanh, hội chứng biến dạng cịi cọc chậm lớn tơm thẻ chân trắng Mẫu tơm sú thu từ mơ hình nuôi (thâm canh, bán thâm canh quảng canh) trại giống Đồng sông Cửu Long miền Trung từ năm 2012-2013 Mẫu tôm thu mô hình ni theo dõi thu đợt suốt vụ nuôi Mẫu tôm bố mẹ ấu trùng trại giống thu theo giai đoạn biến thái (Nauplii, Zoea, Mysis Postlarve) phân tích PCR Kết phân tích PCR tơm sú mơ hình ni quảng canh Cà Mau Bạc Liêu 46,59±10,52 32,53±10,07% Trên mơ hình bán thâm canh Trà Vinh Bạc Liêu có tỷ lệ nhiễm trung bình 62,77 ±14,4% 36,77±7,6% Trong tỷ lệ nhiễm thấp đầu vụ ni 22,22±10,3% cao cuối vụ nuôi 92,31±14,5% Trên mơ hình thâm canh tỷ lệ nhiễm trung bình Kiên Giang 38,64±14,4% Sóc Trăng 31,25±22,7%, tỷ lệ thấp 16,67±21,1%, cao 62,50±33,5% Trên trại giống, trại quy mô lớn có tỷ lệ nhiễm IHHNV thấp so với trại ương nhỏ vùng miền Nam miền Trung Tỷ lệ nhiễm IHHNV mẹ tham gia sinh sản tự nhiên có tỷ lệ nhiễm cao 50% quần đàn Kết nghiên cứu cho thấy, tôm sú ni tất mơ hình trại giống có diện IHHNV Tỷ lệ nhiễm IHHNV phụ thuộc vào thời gian, độ tuổi tôm nuôi, điều kiện mơi trường q trình chăm sóc, Kết điều tra cho thấy suất khơng có khác biệt rõ ràng đàn tôm sú nhiễm không nhiễm mơ hình ni Tuy nhiên, để hạn chết lây lan tôm nuôi phát triển tốt quần đàn khơng nhiễm virus nào, nên xét nghiệm mẹ giống trước đưa vào sinh sản ương nuôi Từ khóa: IHHNV, PCR, tơm sú, mơ hình ni tơm, trại giống I MỞ ĐẦU Ngành nuôi tôm công nghiệp toàn cầu phát triển mạnh năm qua, với giá trị xuất lên đến hàng tỷ đô la ngành mũi nhọn kinh tế nước Châu Á Châu Mỹ Tuy nhiên, bên cạnh giá trị mang lại nghề nuôi tôm đối mặt với mối nguy dịch bệnh virus, vi khuẩn làm ảnh hưởng đến suất sản lượng tôm nuôi Virus hoại tử quan lập biểu mô quan tạo máu (IHHNV) tác nhân gây bệnh có độc lực cao tơm xanh Thái Bình Dương (Litopenaeus stylirostris), tỷ lệ tơm chết lên Trung tâm Quốc gia Quan trắc Cảnh báo Môi trường Phòng ngừa Dịch bệnh Thủy sản Khu vực Nam bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản 2 Trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản * Email: thanhtrung77@yahoo.com 102 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 90 % sau 14 ngày lây nhiễm tôm 30-50 ngày tuổi Tuy nhiên, tôm thể chân trắng tôm sú nuôi (Penaeus vannamei Penaeus monodon) tơm mang nhiễm virus này, không gây chết ghi nhận Chúng gây hội chứng chậm lớn dị dạng tôm nuôi (Bell Lightner., 1984; Primavera Quinito., 2000) Sự lây nhiễm IHHNV tôm sú Penaeus monodon trước không quan tâm Mặc dù vậy, số nghiên cứu IHHNV diện lồi tơm gây hội chứng RDS mẫu tôm sú nuôi bị nhiễm IHHNV Philippine Kết nghiên cứu Philippine Ấn Độ cho thấy tôm sú nuôi nhiễm IHHNV làm cho tôm chậm lớn, kích thước nhỏ biến dạng lớp kitin Bên cạnh đó, biến dạng xuất tơm kích thước lớn (hoặc ni lâu ngày) cho thấy hội chứng RDS biểu phụ thuộc vào độ tuổi kích thước tơm sú ni (Primavera Quinito., 2000; Rai ctv., 2009) IHHNV phát phân bố rộng rãi tôm sú nuôi khu vực Đông Đông Nam Á dường không ảnh đến phát triển tôm nuôi số lượng trứng đẻ tỷ lệ nở trứng từ tôm mẹ nhiễm hay không nhiễm sản lượng nuôi sản lượng (Flegel., 1997; Withyachumnarnkul ctv., 2006) Một nghiên cứu khác Brazil tôm thẻ chân trắng cho thấy, diện IHHNV với tỷ lệ cao phân tích thống kê thấy khơng có mối tương quan nhiễm IHHNV dấu hiệu RDS hay trọng lượng thể tôm thời gian nuôi ao (Braz ctv., 2009) Đây điều thú vị câu hỏi đặt IHHNV có ảnh hưởng đến quần đàn tơm sú Việt Nam có hay khơng? Trên tôm sú nuôi Đồng sông Cửu Long nói riêng Việt Nam nói chung, có nghiên cứu liên quan đến việc phát IHHNV nhiễm tơm sú ảnh hưởng Nghiên cứu tần xuất diện lan truyền IHHNV tôm sú nuôi hạn chế Chỉ có vài nghiên cứu gần nhóm nghiên cứu Hùng ctv., (2009) đánh giá tần xuất xuất IHHNV tôm sú số lượng mẫu hạn chế, 307 mẫu (tỷ lệ nhiễm 160/307 ≈ 52,12%) Do đó, cịn nhiều vấn đề cần làm rõ liên quan đến virus IHHN Việt Nam như: Tình trạng nhiễm IHHNV quần đàn tơm bố mẹ; Khả lây truyền chúng sang hệ điều kiện sản suất an toàn sinh học thực tế Việt Nam; Tỷ lệ nhiễm IHHNV giai đoạn tôm sú giống xuất bán giai đoạn nuôi thương phẩm Trong điều kiện nuôi trồng thực tế, vật mang virus IHHN yếu tố quan trọng góp phần lây lan tác nhân virus theo chiều ngang, khảo sát vật mang IHHNV quanh khu vực nuôi cần Sự chậm lớn kích thước nhỏ tôm sú thương phẩm gần ghi nhận Tuy nhiên, mối quan hệ với việc lây nhiễm IHHNV câu hỏi chưa có lời giải Để có hiểu biết rõ diện IHHNV nhằm đưa đề xuất giải pháp phòng trị hiệu virus quần đàn tôm sú nuôi Việt Nam Trong nghiên cứu này, mục tiêu khảo diện virus quần đàn tơm ni mơ hình khu vực ĐBSCL thông qua việc sử dụng kỹ thuật PCR tơm ni mơ hình trại giống, mơ hình ni thâm canh, bán thâm canh quảng canh Từ xác định giai đoạn mơ hình ni tơm sú có diện IHHNV cao để có đề xuất pháp phòng ngừa lan truyền virus II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Thời gian, địa diểm, đối tượng nghiên cứu - Địa điểm thu mẫu: Các vị trí thu mẫu tơm sú tơm thẻ ni thể sơ đồ hình Thời gian thu mẫu năm 2012-2013 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 103 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Hình Vị trí hình vùng thu mẫu tơm sú ni mơ hình ni Đồng Bằng Sơng Cửu Long 2.2 Khảo sát thu tôm mơ hình ni, trại ương giống Để xác định diện IHHNV tôm sú nuôi mơ hình ni khác Đồng sơng Cửu Long, tiến hành thu mẫu địa điểm thể bảng đồ hình Mẫu tôm sú nuôi thu thời khu vực thu mẫu điểm khác suốt chu kỳ nuôi, vào thời điểm từ 15 ngày thả giống trở Thông tin lưu trữ xử lý MS-Excel 2013 Số lượng ao thu mẫu theo dõi mơ hình ni tơm sú thực tháng/1lần, thu mẫu lần suốt vụ nuôi theo bảng Đối với trại sản xuất giống, thu thập thông tin trang trại nguồn gốc tôm bố mẹ Mẫu tôm mẹ khu vực miền Trung tỉnh Ninh Thuận (trại có quy mơ lớn, 01 trại có quy mơ nhỏ hơn) Mẫu tơm thu vụ sản xuất năm Tại điểm nghiên cứu mẫu thu nhiều đợt, tổng số tôm bố mẹ thu từ 30 cá thể tơm giống phân tích IHHNV qua nhiều giai đoạn phát triển (50 bể x giai đoạn phát triển Nauplli, Zoea, Mysis Postlarvae) Tơm mẹ tơm giống phân tích IHHNV PCR (Bảng 2) Nguồn tôm bố mẹ thu nhận từ địa phương Đà Nẵng, Rạch Gốc, Phú Yên quần đàn tôm nhập nội Ấn Độ Dương Thái Bình Dương được cắt chân bơi để sử dụng cho quy trình PCR phát IHHNV Bảng Số lượng mẫu mơ hình ni Số lượng mẫu thu mơ hình Vị trí Quảng canh (1-2 con/m2) Bán thâm canh (10-20 con/m2) Thâm canh (30-40 con/ m2) Trại giống lớn Trại giống nhỏ Cà Mau 20 ao - - - - Bạc Liêu 20 ao 63 ao - - - Trà Vinh - 34 ao - - - Sóc Trăng - - ao - - Kiên Giang - - 12 ao - - Miền Nam - - - - 50 bể 30 mẹ Miền Trung - - 68 bể 30 mẹ 45 bể 30 mẹ 104 - TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Phân loại quy mô trại sản xuất giống Các tiêu Quy mô nhỏ Quy mô lớn Sở hữu điều hành hoạt động Các thành viên gia đình Hợp tác lớn, quan Nhà nước, giống sản xuất bán đại trà Diện tích Tận dụng diện tích đất quanh nhà 5.000m2– Sản lượng 1-5 triệu PL/ năm Tổng thể tích bể ương 20-100m3 Trên 20 triệu PL/năm 3-6 kỹ thuật, 6-10 cơng nhân Trên 1.000m3 Hệ thống an tồn sinh học Một người quản lý nhiều bể ương Khơng có xét nghiệm bố mẹ Mỗi công nhân quản lý nhà ương riêng biệt Có xét nghiệm bố mẹ Số công nhân, kỹ thuật kỹ thuật, công nhân 2.3 Kiểm tra diện IHHNV tôm kỹ thuật PCR 2.3.1 Ly trích DNA Sử dụng 200 − 500 mg mô tôm nghiền ml dung dịch NaOH − SDS (NaOH 0,025N, SDS 0,0125%), sau đó, đem dung dịch đun sôi 10 phút làm lạnh nhanh nước đá, tiếp tục ly tâm 13.000 vòng/phút 10 phút, dịch sử dụng trực tiếp Thu thập thông tin thu mẫu tôm mơ hình ni tính nêu Vì vậy, sử dụng thuật toán ước lượng xác suất để thống kê kết phân tích Theo đó, giả sử tổng thể nghiên cứu gồm N phần tử Trong M phần tử có tính chất A M tỷ lệ phần tử có tính chất P = ― N A tổng thể Ở đây, P chưa biết cần ước lượng P xác suất để lấy phần tử có tính chất A lấy ngẫu nhiên từ tổng thể Đây ước lượng xác suất Khoảng tin cậy P tính theo cơng thức: 2.3.2 Quy trình PCR Quy trình Multiplex PCR quy trình PCR (OIE, 2009) sử dụng để khuếch đại gen IHHNV type lây nhiễm với cặp mồi vnIHF/R 309F/R Thành phần phản ứng Multiplex PCR bao gồm: 25 pmol/ µl mồi vnIHF, vnIHR 12 pmol/ µl 309F, 309R, 25 µl mix Taq buffer (Promega, Mỹ) µl mẫu DNA thêm nước vào đủ thể tích cuối phản ứng 50 µl Sản phẩm sau khuếch đại phân tích gel agarose 1,5% có nhuộm ethidium bromide 2.4 Xử lý kết phân tích thống kê ước lượng Mẫu tôm sau thu nhận trường phân tích quy trình PCR định Trong đó: P: ước lượng tổng thể, f: tỷ lệ mẫu nhiễm IHHNV, n: số mẫu phân tích, zα: giá trị tra Bảng zα III KẾT QUẢ 3.1 Thông tin ao ni tơm mơ hình Qua điều tra, thơng tin chi tiết diện tích, mật độ, nguồn gốc giống kiểm tra mầm bệnh mơ hình ni tỉnh thể bảng Diện tích mơ hình quản canh TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 105 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Cà Mau Bạc Liêu cho thấy nhỏ 0.4 lớn 2,6 ha, đa số giống không xét nghiệm giống địa phương mật độ thấp 1-2con/m2 Trong mơ hình bán thâm canh thâm canh có diện tích nhỏ hơn, mơ hình ni bán thâm canh chủ yếu nông hộ nuôi nhỏ lẻ, 2-3 ao/hộ nuôi, ao có diện tích cao 5.000 m2 nhỏ 1000 m2, mật độ thả giống 20 con/ m2 Trong đó, mơ hình thâm canh diện tích lớn bán thâm canh, đa số tư nhân danh nghiệp có vốn lớn diện tích lớn Mật độ thả cao 30-40 con/m2, hệ thống ao ni có đầu từ máy móc nguồn lực cao Ở mơ hình ni bán thâm canh thâm canh, giống có nguồn gốc rõ ràng xét nghiệm tiêu virus gây bệnh nguy hiểm bảng Bảng Thơng tin chi tiết mơ hình ni Mơ hình Diện tích trung bình Diện tích nhỏ 1,5 ha 4.000m2 0,5-1 Bạc Liêu 2.500 m2 5.000 m2 1.000 m2 Trà Vinh - - - Kiên Giang, Sóc Trăng 6.000 m2 8.700 m2 2.500 m2 Tỉnh Quảng Bạc Liêu 2,6 canh Cà Mau 1,4 Bán thâm canh Thâm Canh 3.2 Sự diện IHHNV tơm ni mơ hình ni 3.2.1 Mơ hình quảng canh Kết phân tích ao nuôi quảng canh cho thấy tôm nuôi Cà Mau có tỷ lệ nhiễm IHHNV cao khoảng 46,59±10,52%, đó, Bạc Liêu có tỷ lệ nhiễm thấp hơn, khoảng 32,53±10,07% Phân tích theo đợt thu mẫu, mẫu tôm thu đợt (tháng 8/2012) có tỷ lệ nhiễm IHHNV cao so với tháng khác hai tỉnh Bạc Liêu Cà Mau, tỷ lệ 59,09±20,5% 86,36±14,3% Năng suất thu hoạch ao quản canh 25 kg/tháng/ha Kích cỡ tơm thu hoạch lớn 30 con/kg 3.2.2 Mơ hình bán thâm canh Kết phân tích ao ni bán thâm 106 Mật độ thả giống (con/ m2) 1-2 Diện tích lớn Nguồn gốc Xét nghiệm mầm bệnh Sản lượng thu hoạch Không rõ ʺ Không 19 Miền Trung, Địa phương WSSV, MBV, HPV, YHV 5-7 tấn/ha 15-20 ʺ ʺ 5-7 tấn/ha 30-40 Miền Trung WSSV, MBV, HPV, YHV 5-6 tấn/ha ʺ 25 kg/ha/ tháng “ canh cho thấy tỷ lệ nhiễm IHHNV trung bình tơm ni Trà Vinh 62,77 ±14,4% Bạc Liêu 36,77±7,6% Tỷ lệ nhiễm IHHNV tơm cao mơ hình bán canh đợt thu mẫu thứ tư (cuối vụ nuôi, tôm lúc tháng tuổi), Trà Vinh 92,31±14,5% Bạc Liêu 64,71±22,7% Năng suất ao ni ao nhiễm khơng nhiễm khơng có khác biệt mơ hình ni hai tỉnh trung bình 5-7 tấn/ Kích cỡ tơm thu khoảng 40-50 con/kg 3.2.3 Mơ hình thâm canh Kết phân tích ao ni thâm canh cho thấy tỷ lệ nhiễm IHHNV tôm sú nuôi Kiên Giang 38,64±14,4% Sóc Trăng 31,25±22,7% Năng suất nghi nhận ao ni có thu hoạch Kiên Giang 5-6 tấn/ha TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Tỷ lệ nhiễm IHHNV tơm mơ hình ni khác Hình thức ni Loại tơm Năm Khu vực Cà mau Sú 2012 Sú 2012 Bạc Liêu Sú 20122013 Trà Vinh 20122013 Bạc Liêu Sú 2012 Kiên Giang Sú 2012 Sóc Trăng Quảng canh Bán thâm canh Thâm canh Đợt thu mẫu Mẫu phân tích Mẫu nhiễm IHHNV Tỉ lệ nhiễm (%) (tháng 5) (tháng 6) (tháng 7) (tháng 8) Tổng (tháng 5) (tháng 6) (tháng 7) (tháng 8) Tổng (tháng 7) (tháng 8) (tháng 9) (tháng 10) Tổng (tháng 7) (tháng 8) (tháng 9) (tháng 10) Tổng (tháng 6) (tháng 7) (tháng 8) (tháng 9) Tổng Tổng 22 22 22 22 88 19 20 22 22 83 44 26 18 13 101 63 42 33 17 155 12 12 12 44 8 16 11 19 41 2 10 13 27 18 17 16 12 63 14 16 16 11 57 17 9,09±12% 40,91±20,5% 50,0±20,9% 86,36±14,3% 46,59±10,4% 10,53±13,8% 10,00±13,1% 45,45±20,8% 59,09±20,5% 32,53±10,1% 40,91±14,5% 65,38±18,3% 88,89±14,5% 92,31±14,5% 62,38±14,4% 22,22±10,3% 38,10±14,7% 48,48±17,1% 64,71±22,7% 36,77±7,6% 16,67±21,1% 50,00±28,3% 33,33±26,7% 62,50±33,5% 38,64±14,4% 37,50±33,5% 25,00±30,0% 31,25±22,7% 3.3 Sự diện IHHNV tôm giống Trong 68 bể ương tôm trại giống quy mô lớn 45 bể ương tôm trại giống quy mô nhỏ miền Trung, tỷ lệ nhiễm IHHNV giai đoạn ấu trùng bể ương trại ương giống quy mơ lớn có Nauplii: 2,94±4,0%, Zoea: 8,82±6,7%, Mysis: 14,70±8,4%, Postlarvae: 26,47±10,5% tôm mẹ: 45,3±13,4% tỷ lệ nhiễm IHHNV giai đoạn ấu trùng bể ương trại giống quy mô nhỏ Nauplii: 47,83±14,4%, Zoea: 67,39±13,5%, Mysis: 80,43±11,5%, Postlarve: 80,43±11,5% tôm mẹ: 73,33±15,8% Trong 50 bể ương trại giống nhỏ miền Nam, tỷ lệ nhiễm IHHNV Nauplii 37,25±13,3%, Zoea 39,22±13,4%, Mysis 47,06±13,7%, Postlarvae 39,53±14,6% tôm mẹ 51,43±16,6% (Bảng 5) TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 107 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Tỷ lệ nhiễm IHHNV tôm giống Tỷ lệ nhiễm (%) giai đoạn tôm ương Nauplii Zoea Mysis Postlarvae Tôm mẹ Miền Trung Trại lớn 2,94±4,0 8,82±6,7 14,70±8,4 26,47±10,5 45,3±13,4 Miền Trung Trại nhỏ 47,83±14,4 67,39±13,5 80,43±11,5 80,43±11,5 73,33±15,8 39,53±14,6 51,43±16,6 Địa điểm Miền Nam 37,25±13,3 39,22±13,4 47,06±13,7 Trại nhỏ 3.4 Sự diện IHHNV tôm bố mẹ tự nhiên Tôm bố mẹ thu thu nhận từ tháng đến tháng 10/2013 vùng đánh bắt tôm sú Việt Nam nhập từ nước (bảng 6) Trong tổng số có 555 mẹ tơm đánh bắt tự nhiện phân tích PCR Tất mẹ cắt chân bơi để sàn lọc diện IHHNV trước đưa vào cho sinh sản Kết phân tích cho thấy, IHHNV diện tôm bố mẹ địa phương Việt Nam cao (bảng 6) Bảng Tỷ lệ nhiễm IHHNV quần đàn tôm sú bố mẹ Việt Nam ngoại nhập Nguồn tôm bố mẹ Số tơm phân tích Số tơm nhiễm IHHNV Tỷ lệ nhiễm (%) Đà Nẵng 113 52 46,01±9,2 Phú Yên 47 30 63,83±13,7 Rạch Gốc 135 79 58,51±8,3 Thái Bình Dương 126 15 11,90±5.7 Ấn Độ Dương 134 13 9,70±5,0 IV THẢO LUẬN IHHNV ghi nhận diện nhiều trang trại nuôi tôm nhiều quốc gia Đông Bắc Mỹ: Mexico, Ecuador, Peru, Brazil, Caribbean Quốc gia Trung Mỹ: Hawaii, Guam, Tahiti New Caledonia Lightner ctv., (1997) cho IHHNV tác nhân gây bệnh không đáng kể trang trại nuôi tôm sú Châu Á Singapore, Brunei, Philipine, Malaysia Ấn Độ Ngồi ra, có chứng cho thấy tơm sú lồi dễ mẫn cảm với virus này, khơng có biểu bệnh hay gây chết virus Dịch bệnh virus IHHN quần đàn tôm sú nuôi xảy chúng tiếp xúc tương đối lớn với số lượng virus (Lightner ctv., 1983) Nhìn chung, tỉ lệ nhiễm IHHNV trung bình tơm sú tất 108 mơ hình nuôi nghiên cứu dao động từ 31,25±22,7% đến 62,38±14,4%, tỷ lệ thấp tỷ lệ nhiễm virus tôm sú nuôi Thái Lan (69%) Philipine (100%), cao so với Brunei (14,1%) (Claydon ctv., 2010) Ở Việt Nam, nhóm nghiên cứu Hùng ctv., (2009) ghi nhận tỷ lệ xuất IHHNV tôm sú nuôi 52,12% (160/307 mẫu) Ở mơ hình ni quảng canh, tỷ lệ nhiễm IHHNV Cà Mau (46,59±10,4%) cao so với Bạc Liêu (32,53±10,1%) Nguyên nhân gây khác biệt khó xác định mơ hình quảng canh mơ hình mở, nguồn nước lấy theo thủy triều khơng xử lý trước đưa vào ao nuôi Hơn nữa, tỷ lệ nhiễm virus lại phụ thuộc vào nhiều yếu tố chất lượng giống trước thả, chất lượng nước TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN ao nuôi điều kiện thổ nhưỡng vùng ni Ở mơ hình ni bán thâm canh, tỷ lệ nhiễm IHHNV Trà Vinh (62,38±14,4%) cao gần gấp đôi so với tỷ lệ nhiễm IHHNV Bạc Liêu (36,77±7,6%) Sự khác biệt đặc thù vùng địa lý thổ nhưỡng tập quán canh tác vùng Trong vùng nuôi Trà Vinh, hệ thống thủy lợi nhỏ hẹp, hoạt động lấy nước thải nước diễn dòng kênh nhỏ Trong khu vực thu mẫu Bạc Liêu, nước nuôi cung cấp từ nguồn nước gần bờ biển Theo Pantoja ctv., (1999), nguồn nước bị ô nhiễm ảnh hưởng mạnh mẽ đến tỷ lệ nhiễm IHHNV tôm thẻ chân trắng tôm xanh sống vùng Sự diện virus IHHN tôm xanh P stylirostris cao quanh khu vực vịnh California, Mỹ vịnh Sonora, Mehico nguồn nước vịnh thường xuyên bị ô nhiễm hoạt động ngành nơng nghiệp Ở mơ hình ni thâm canh, tỷ lệ nhiễm IHHNV Kiên Giang 38,64±14,4% Sóc Trăng 31,25±22,7% Tuy nhiên, ao ni mà chúng tơi thu Sóc Trăng bị dịch bệnh gan tụy cấp nên chết sớm giai đoạn 1-2 tháng tuổi nên nghi nhận tỷ lệ nhiễm IHHNV giai đoạn tôm nuôi 3-4 tháng tuổi Ngồi ra, kết phân tích cho thấy tất mơ hình ni khảo sát tỷ lệ tôm nhiễm IHHNV cao đợt thu mẫu tôm lúc tháng tuổi Thời điểm ghi nhận rơi vào mùa mưa, thời tiết có xu hướng lạnh độ mặn giảm Do đó, tỷ lệ nhiễm cao tôm lúc dễ bị stress ảnh hưởng biến đổi nhiệt độ độ mặn dẫn đến thay đổi áp suất thẩm thấu tế bào chủ, khiến cho trình xâm nhiễm virus xảy dễ dàng (Jimenez ctv., 1999) Theo MontgomeryBrock ctv., (2007), virus lây truyền phát triển nhanh nhiệt độ thấp Cụ thể, lây nhiễm virus cho tôm phương pháp tiêm nhiệt độ thấp 240C, sau ngày virus bắt đầu nhân sinh mạnh, nhiệt độ 300C trở lên virus nhân sinh mạnh ngày thứ 17 Một nghiên cứu khác virus đốm trắng WSSV Hảo ctv., (2007) tỷ lệ WSSV nhiễm tôm nuôi mô hình quảng canh mùa mưa ĐBSCL (tháng dương lịch) lớn, chiếm 30% ao nuôi mùa mưa thay đổi đột ngột môi trường nhiệt độ độ mặn Chính nhiệt độ độ mặn nhân tố quan trọng, ảnh hưởng trực tiếp đến trình lây nhiễm nhân sinh virus Có nhiều thống kê cho thấy tỷ lệ nhiễm IHHNV cao quần đàn tôm bố mẹ, đặc biệt tôm thẻ chân trắng Theo Motte ctv., (2003), tỷ nhiễm IHHNV quần đàn tôm bố mẹ cao 63% Ecuador 95% IHHNV Panama Tỷ lệ nhiễm virus cao nhanh chóng lan truyền truyền dọc cho hệ hệ thống nuôi trồng thủy sản mở chứng minh (Pantoja ctv., 1999) Bên cạnh đó, số tơm mẹ nhiễm IHHNV khơng có biểu lâm sàng bệnh virus này, chúng mang mầm bệnh truyền virus qua hệ chúng Trong nghiên cứu này, trại ương giống quy mô lớn miền Trung, giai đoạn Nauplii có tỷ lệ nhiễm 2,94±4,0% đến giai đoạn postlarvae, tỷ lệ nhiễm IHHNV tăng lên 26,47±10,5% Trong trại ương quy mô nhỏ, tỷ lệ nhiễm IHHNV tất giai đoạn cao nhiều Nauplii: 47,83±14,4%, Zoea: 67,39±13,5%, Mysis: 80,43±11,5%, Postlarve: 80,43±11,5% Tỷ lệ nhiễm virus tôm bố mẹ trại ương quy mô lớn 45,3±13,4, thấp nhiều so với tỷ lệ nhiễm tôm bố mẹ trại ương quy mô nhỏ (73,33±15,8 %) Kết chứng tỏ tỷ lệ nhiễm IHHNV tùy thuộc vào tỷ lệ nhiễm IHHNV bố mẹ tham gia sinh sản Tuy nhiên, có ghi nhận thú vị trại ương quy mô TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 109 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN nhỏ miền Trung, tỷ lệ tôm bố mẹ nhiễm virus IHHN 45,3 ±13,4%, không cao so với tỷ lệ nhiễm tôm bố mẹ trang trại nhỏ miền Nam (51,43±16,6), tỷ lệ nhiễm virus tất giai đoạn từ Nauplii đến postlarve cao nhiều 47% Ngoài ra, diện IHHNV quần đàn tôm sú trại ương có tỷ lệ thuận với phát triển giai đoạn ấu trùng hai loại trang trại Sự tăng lên q trình ương ni, trại giống không tuân thủ nghiêm ngặt điều kiên an tồn sinh học dẫn đến q trình nhiễm chéo hay trình lây lan virus theo đường truyền ngang ăn lẫn Cũng bố mẹ nhiễm virus mức độ nhẹ trứng chúng có mức độ nhiễm nhẹ, chưa nhiễm tỷ lệ nhiễm đàn ấu trùng giai đoạn đầu thấp Điều chứng minh trại ương tôm sú tôm thẻ chân trắng nghiên cứu Motte ctv., (2003) Withyachumnarnkul ctv., (2006) Những nghiên cứu trước cho thấy diện quần đàn tôm bố mẹ tự nhiên quần đàn tơm ni có mối liên hệ mật thiết với việc lan truyền virus từ trại giống đến ao nuôi (Motte ctv., 2003) Sự diện IHHNV quần đàn tôm sú bố mẹ Phú Yên 63,83%, cao Rạch Gốc 58,51±8,3% Đà Nẵng 46,01±9,2% Có thể Phú n có địa lý gần với tỉnh Ninh Thuận, Bình Thuận Khánh Hịa tỉnh có mật độ trại sản xuất tôm giống cao dẫn đến ô nhiễm môi trường phát tán mầm bệnh mơi trường Chính điều tạo điều kiện mầm bệnh phát tán quần đàn tôm bố mẹ tự nhiên dễ dàng Ngoài ra, mối liên hệ thay đổi địa lý vùng với diện IHHNV Pantoja ctv., (1999) chứng minh Sự thay đổi điều kiện địa lý 110 độ sâu nước, bay hơi, hay lưu lượng luân chuyển vùng nông vùng sâu dẫn đến diện IHHNV cao quần tôm xanh Vùng Gulf nằm sông Colorado đến đảo Angel de la Guarda Tiburón Mexico Thêm vào đó, cịn có ngun nhân khác liên quan đến q trình đánh bắt bảo quản tơm bố mẹ Ở Việt Nam, sau đánh bắt tôm bố mẹ tự nhiên thường nuôi dưỡng thời gian dài trước bán cho trại sản xuất giống dẫn đến lây truyền lẫn mang virus không mang virus Mặc dù IHHNV diện tỷ lệ nhiễm mức cao tất gia đoạn tôm sú từ ấu trùng, tơm ni bố mẹ nhiều mơ hình ương nuôi khác Tuy nhiên, kết điều tra cho thấy tác động IHHNV không lớn suất thu hoạch Ở ao nuôi tôm sú nhiễm khơng nhiễm IHHNV khơng có chênh lệch suất ni Trung bình mơ hình quảng canh 30 kg/tháng/ha, mơ hình ni bán thâm canh 5-7 tấn/ha Ở trại giống, tỷ lệ nở trứng mẹ trại ương khơng có thay đổi chất lượng số lượng đàn ấu trùng ương Kết nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu tôm sú trưởng thành tôm sú bố mẹ ni Thái Lan, IHHNV khơng có ảnh hưởng đến trọng lượng thân tôm nuôi số lượng trứng nauplii từ mẹ nhiễm không nhiễm (Withyachumnarnkul ctv., 2006) Nghiên cứu cho thấy rằng, tơm bố mẹ có nguồn gốc Việt Nam có tỷ lệ nhiễm IHHNV cao nhiều Do đó, Việt Nam cần phải ý việc quản lý môi trường, hạn chế tối đa việc sử dụng mẹ cho sinh sản không xét nghiệm mầm bệnh Đồng thời cần phải nâng cao kiến thức nuôi dưỡng tôm mẹ sau đánh bắt cho ngư dân quản lý trại ương ni TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Văn Hảo, 2007 Các giải pháp quản lý bệnh virus cho nghề nuôi tôm Việt Nam Nhiệm vụ hợp tác quốc tế khoa học, công nghệ môi trường Trang 68 Phạm Văn Hùng, Nguyễn Tấn Bình, Nguyễn Đăng Ninh, Phạm Hùng Vân, Phạm Thành Hổ, 2009 Sự phổ biến virus gây bệnh hoại tử vỏ quan tạo máu tôm sú ni Việt Nam Tạp chí Y Học TP Hồ Chí Minh Tập 13 (2) Trang 234-238 Tài liệu tiếng Anh Bell, T.A., and Lightner, D.V., 1984 IHHN virus: Infectivity and pathogenicity studies in Penaeus stylirostris and Penaeus vannamei Aquaculture 38: 185-194 Braz RFS, Silva CPRO, Reis L.G., Martins P.C.C., Sales M.P.,, Meissner R.V., 2009 Prevalence of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV) in Penaeus vannamei cultured in Northeastern Brazil Aquaculture 288:143–6 Claydon, K., Haji-Tajir, R,A., Said, H.M., Lakim, M.H., Tamat, W., 2010 Prevalence of shrimp viruses in wild Penaeus monodon from Brunei Darussalam Aquaculture 308:71–4 Flegel, T.W., 1997 Special Topic Review: Major viral diseases of the black tiger prawn (Penaeus monodon) in Thailand World Journal of Microbiology and Biotechnology 13: 433-442 Lightner, D.V., Redman, R.M., Bell, T.A., Brock, J.A., 1983 Detection of IHHN virus in Penaeus stylirostris and Penaeus vannamei imported into Hawaii J World Maricult Soc., 14: 212-225 Lightner, D.V., Redman, R.M., Nunan, L.N., Mohney, L.L., Mari, J.L., Poulos, B.T., 1997 Occurrence of WSSV, YHV and TSV in Texas shrimp farms in 1995: Possible mechanisms for introduction World Aquaculture ’97 Book of Abstracts, World Aquaculture Society, Baton Rouge, LA p 288 Montgomery-Brock, D., Tacon, A.G.J., Poulos, B., & Lightner, D.V., 2007 Reduced replication of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV) in Litopenaeus vannamei held in warm water Aquaculture, 265, 41–48 Motte, E., Yugcha, E., Luzardo, O.J., Castro, F., Leclercq, G., Rodrisguezj, J., Miranda, P., Borja, O., Serrano, J., Terreros, M., Montalvo, K., Narvasez, A., Tenorio, N., Cedno, V., Mialhe, E., and Boulo, V., 2003 Prevention of IHHNV vertical transmission in the white shrimp Litopenaeus vannamei Aquaculture 219, 57–70 OIE, 2009 Diagnostic Manual for Aquatic Animal Diseases 6th Edition Office International des Epizooties (OIE), Paris Chapter 2.2.2 Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis pp 78-95 Pantoja Lightner, D.V., and Holtschmit, K.H., 1999 Prevalence and Geographic Distribution of Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus (IHHNV) in Wild Blue Shrimp Penaeus stylirostris from the Gulf of California, Mexico Journal of Aquatic Animal Health 1, 23-34 Primavera, J.H., Quinitio, E.T., 2000 Runt-deformity syndrome in cultures of the giant tiger prawn Penaeus monodon J Crust Biol 20, 796–802 Rai, P., Pradeep B., Safeena, M.P., Krabsetsve, K., La Fauce, K., Owens, L., and Karunasagar, I., 2013 Genomics, molecular epidemiology and diagnostics of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus Indian Journal of Virology, 23 (2) pp 203-214 Withyachumnarnkul, B., Chayaburakul, K., Supak, L.A., Plodpai, P., Sritunyalucksana, K., Nash, G., 2006 Low impact of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV) on growth and reproductive performance of Penaeus monodon, Dis Aquat Org 69:129–136 TAÏP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 111 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN PREVELENCE OF IHHNV INFECTED BLACK TIGER SHIMPS IN DIFFERENCE OF CULTURE SYSTEMS IN MEKONG DELTA Cao Thanh Trung1*, Nguyen Hong Loc1, Pham Cong Nguyen2, Nguyen Van Hao3 ABSTRACT Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV) is the causative agent of pathogenic for Litopeneaus stylirostris whereas in Peneaus vannamei shrimp known to induce development and grown abnormalities The survey performed at different black tiger shrimp state in difference of culture systems (intensive, semi-extensive and extensive) and the harcheries in Mekong Delta and Centrer Region during from 2012-2013 The presence of IHHNV infected samples at the farms and the hatcheries will be analyzed by PCR assay The PCR results, showed the average prevalence of IHHNV infection to be 46,59±10,52 and 32,53±10,07% in shrimp of intensive culture in Ca Mau and Bac Lieu province, 62,77 ±14,4% and 36,77±7,6% in shrimp of semi-extensive culture in Tra Vinh and Bac Lieu province In it the lowest infection rates in the first crop is 22,22 ± 10,3% and the highest at the end of the crop was 92,31 ± 14,5% The average prevalence off IHHNV infected shrimp in the culture intensive in Kien Giang and Soc Trang are 38,64 ± 14,4% and 31,25 ± 22,7 The lowest infection rate in shrimp culture intensive was 16,67 ± 21,1%, and the highest infection rate was 62,50±33,5% On the hatcheries in the southern and central regions, IHHNV prevalence infected shirmp in the large hatcheries is lower than both the small hatcheries in regions The captured wild brookstoks were also analyzed by PCR assay The result showed that average prevalence of IHHNV infection was more than 50% in wild populations of peneaus monodon The survey demonstrated that IHHNV had widespread distribution in all P monodon shrimp state of the different culture system in a region Prevalent of IHHNV rate in shrimp was depent on the shrimp age, culture time, environment condition and management The survey show that shirmp production are not clear diffence between unfected and infected IHHNV shrimp or negatively affect the growth of their offspring However, to limit the wildspread virus, the shrimp populations that are not yet infected with any virus and the brookstock and postlarvae were tested negative for these viruses before breeding, rearing and stocking Keywords: Hatchery; PCR; Penaeus monodon; Culture system Người phản biện: TS Lê Hồng Phước Ngày nhận bài: 10/8/2014 Ngày thông qua phản biện: 28/8/2014 Ngày duyệt đăng: 05/9/2014 Southern Monitoring Center for Aquaculture Environment and Epidemic, Research Institute for Aquaculture No2 University of Science Ho Chi Minh City Research Institute for Aquaculture No2 * Email: thanhtrung77@yahoo.com 112 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 ... mơ hình ni Đồng Bằng Sông Cửu Long 2.2 Khảo sát thu tơm mơ hình ni, trại ương giống Để xác định diện IHHNV tôm sú ni mơ hình ni khác Đồng sông Cửu Long, tiến hành thu mẫu địa điểm thể bảng đồ hình. .. quần đàn tôm sú nuôi Việt Nam Trong nghiên cứu này, mục tiêu khảo diện virus quần đàn tôm nuôi mô hình khu vực ĐBSCL thơng qua việc sử dụng kỹ thuật PCR tôm nuôi mô hình trại giống, mơ hình ni... phù hợp với nghiên cứu tôm sú trưởng thành tôm sú bố mẹ nuôi Thái Lan, IHHNV khơng có ảnh hưởng đến trọng lượng thân tôm nuôi số lượng trứng nauplii từ mẹ nhiễm không nhiễm (Withyachumnarnkul