Ung thư dạ dày là một bệnh phổ biến với tỷ lệ sống thấp. Thuốc hóa trị thường có giá cao, hiệu quả thấp và nhiều độc tính. Vì vậy, các thuốc từ dược liệu được quan tâm phát triển, dẫn đến sự cần thiết xây dựng mô hình gây khối u dạ dày trên động vật cho thử nghiệm tiền lâm sàng. Mục tiêu của đề tài là xây dựng mô hình gây khối u dạ dày bằng benzo(a)pyren [B(a)P] và kiểm tra khả năng đáp ứng của mô hình với thuốc kháng ung thư dạ dày (5-FU).
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG MƠ HÌNH GÂY KHỐI U DẠ DÀY BẰNG BENZO(A)PYREN TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Lê Xuân Lộc*, Đỗ Thị Hồng Tươi* TÓM TẮT Mở đầu: Ung thư dày bệnh phổ biến với tỷ lệ sống thấp Thuốc hóa trị thường có giá cao, hiệu thấp nhiều độc tính Vì vậy, thuốc từ dược liệu quan tâm phát triển, dẫn đến cần thiết xây dựng mơ hình gây khối u dày động vật cho thử nghiệm tiền lâm sàng Mục tiêu đề tài xây dựng mô hình gây khối u dày benzo(a)pyren [B(a)P] kiểm tra khả đáp ứng mơ hình với thuốc kháng ung thư dày (5-FU) Đối tượng - Phương pháp nghiên cứu: Chuột Swiss albino đực gây giảm miễn dịch cách ip cyclophosphamid (CYP) liều 100 mg/kg vào ngày thứ 1, Sau vào ngày thứ 5, 19 cho uống mg B(a)P 0,25 ml dầu bắp để gây khối u dày Từ ngày 20 đến ngày 103, chuột cho uống 0,2 ml dầu bắp lô chứng bệnh 5-FU 20 mg/kg/ngày lô điều trị Vào ngày 104, chuột giết, quan sát đại thể quan tách lấy dày để khảo sát mức độ tổn thương, tình trạng tạo khối u dày, sau nhuộm HE để phân tích vi thể dày Kết quả: Sau 104 ngày, tỷ lệ tử vong lô chứng bệnh 46,7% lô điều trị 33,3% Trọng lượng chuột lô chứng bệnh lô điều trị tăng nhẹ, thấp lô sinh lý Tỷ lệ chuột có khối u dày lơ chứng bệnh lô điều trị 87,5% 40% Chuột chứng bệnh có trung bình khoảng 2,45 khối u/con lô điều trị 1,21 Về kích thước khối u trung bình, lơ điều trị 1,94 mm3 so với 4,44 mm3 lô chứng bệnh Quan sát vi thể dày sau nhuộm HE thấy tình trạng viêm mạn tính kèm theo tăng sản tế bào gai tế bào biểu mô nhiều lớp; nhiên khơng có chuột xuất tình trạng carcinom Kết luận: Mơ hình chuột nhắt tiêm phúc mô cyclophosphamid liều 100 mg/kg vào ngày 1, 3, sau cho uống benzo(a)pyren liều mg/250 µl dầu bắp/chuột vào ngày 5, ngày 19 gây khối u dày tình trạng viêm mạn tính kèm tăng sản tế bào gai tế bào biểu mô chưa gây carcinom sau 104 ngày Từ khóa: benzo[a]pyren, cyclophosphamid, 5-fluorouracil, ung thư dày, Swiss albino ABSTRACT ESTABLISH A MOUSE MODEL OF BENZO[a]PYRENE-INDUCED GASTRIC TUMOR Le Xuan Loc, Do Thi Hong Tuoi * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: 210 - 216 Background: Gastric cancer is a popular disease with low survival rate Chemotherapy is an essential, but expensive and toxic treatment; however, its effect is still modest Recently, herbal medicine has been researched and developed due to its low toxicity, resulting in the need of an animal model of gastric tumor for preclinical trials The aim of this work was to establish a mouse model of benzo[a]pyren induced gastric tumor and to evaluate its response to 5-FU Methods: Male Swiss albino mice were ip injected cyclophosphamide, 100 mg/kg on day 1, to cause immune deficiency On day and 19, mice were fed mg B(a)P in 0.25 ml corn oil to induce gastric tumor From day 20 to 103, mice were fed 0.2 ml corn oil in pathological group or 5-FU 20 mg/kg in treatment group On day *Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS TS Đỗ Thị Hồng Tươi ĐT: 0908683080 210 Email: hongtuoid99@gmail.com Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học 104, mice were sacrificed and observed macroscopic changes The fore stomach was then excised, evaluated lesion and presence of stomach tumors as well as histologically analyzed after HE staining Results: After 104 days, mouse death rate in pathological group and treatment group were 46.7% and 33.3% respectively Average body weight in pathological group and treatment group slightly increased but were lower than that of control group Tumor rate in pathological group and treatment group were 87.5% and 40% Approximately 2.45 tumors/mouse but only 1.21 tumors/mouse were counted from mice in pathological group and in treatment group respectively Average tumor size in treatment groups was 1.94 mm3 compared to 4.44 mm3 in pathological group Microscopic images indicated the chronic inflammation associated with the proliferation of squamous cells or epithelial cells; however, carcinoma cells were not seen Conclusion: Mouse model involved ip injection of 100 mg/kg cyclophosphamide on day 1, and oral administration of mg benzo(a)pyrene in 0.25 ml corn oil on day 5, 19 only established stomach tumors at chronic inflammatory states associated with proliferation of squamous or epithelial cells and did not cause carcinoma after 104 days Key words: benzo[a]pyrene, cyclophosphamide, 5-fluorouracil, gastric cancer, Swiss albino ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư nguyên nhân gây tử vong thứ hai sau bệnh tim mạch Trong đó, ung thư dày ung thư phổ biến thứ tư, tỷ lệ tử vong cao Trên giới, số ca mắc 989.600 ước tính 738.000 ca chết năm 2008, chiếm 10% số trường hợp tử vong(13) Việt Nam thuộc khu vực nguy ung thư dày trung bình cao, tỷ lệ mắc 21,8 nam 10,0 nữ 100.000 dân(11) Các thuốc điều trị ung thư nói chung ung thư dày nói riêng giá thành cịn cao cải thiện tiên lượng số bệnh nhân có chọn lọc nhiều độc tính(10) Do đó, thuốc có nguồn gốc dược liệu trọng nghiên cứu phát triển sản xuất Để phục vụ định hướng trên, cần phát triển mơ hình động vật cho thử nghiệm tiền lâm sàng Hiện nay, có ba loại mơ hình gây khối u chuột: ghép dị/đồng lồi; cảm ứng hóa chất; chuột biến đổi gen; đó, tiêm phúc mơ cho uống tác nhân gây ung thư, kết hợp với chất kích thích khối u mơ hình tiền lâm sàng lâu đời đa dạng mô hiệu sinh bệnh học tiến triển theo thời gian khối u liên quan đến chất gây ung thư tác nhân thúc đẩy khối u Chuyên Đề Dược Benzo(a)pyren [B(a)P] chất gây ung thư dùng phổ biến mơ hình gây khối u dày chuột nhắt cách cho uống liều khác từ đến mg, lần/tuần x tuần, mổ sau từ 14 đến 20 tuần(2,7,12,14) Về chế gây ung thư, B(a)P sản phẩm chuyển hóa epoxidediol liên kết cộng hóa trị với guanin vị trí N2 làm thay đổi cấu trúc ADN, phá vỡ trình chép ADN, gây đột biến dẫn đến ung thư da, phổi, dày… (4,7) Ngoài ra, B(a)P tương tác với lipid màng tế bào tạo gốc tự gây peroxy hóa, tổn thương màng, ức chế enzym chức tế bào ức chế lympho B(13,14) Các nghiên cứu thực chuột bình thường chuột suy giảm miễn dịch để tăng khả gây khối u ung thư hóa(1,8) Khi đó, gây suy giảm miễn dịch chuột Swiss albino (đực/cái) tác nhân thích hợp, phổ biến tiêm phúc mô cyclophosphamid (CYP) ức chế tăng sinh tế bào, gây giảm bạch cầu, hồng cầu, tiểu cầu, lympho B, T… liều khác từ 50 đến 200 mg/kg, liều liều cách liên tiếp(3,5,6,9) Xuất phát từ tình hình trên, đề tài tiến hành xây dựng mơ hình gây khối u dày chuột nhắt benzo(a)pyren sau gây suy 211 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 giảm miễn dịch CYP để ứng dụng nghiên cứu tiền lâm sàng ung thư dày đến ngày 103 (12 tuần), cho chuột uống 0,2 ml dầu bắp VẬTLIỆU–PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Lô chứng bệnh (15 con): ip CYP liều 100 mg/kg vào ngày 1, Ngày thứ 5, 19 cho chuột uống mg B(a)P 0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 đến ngày 103 (12 tuần), cho chuột uống 0,2 ml dầu bắp từ cho uống dầu bắp Động vật nghiên cứu Chuột Swiss albino đực, 7-8 tuần tuổi, khỏe mạnh, trọng lượng 20 ± g, cung cấp Viện vaccin sinh phẩm y tế Nha Trang Chuột nuôi ổn định mơi trường thí nghiệm từ - ngày, cung cấp thức ăn nước uống đầy đủ suốt thời gian thử nghiệm Hóa chất Benzo(a)pyren [B(a)P] (Sigma-Aldrich, Mỹ); dầu bắp (Arcor, Argentina); NaCl 0,9% (Bidiphar, Việt Nam); formalin (Guangdong Guanghua, Trung Quốc), cyclophosphamid (Endoxan® 500 mg, Baxter, Đức); 5-FU (Ebewe® 500 mg/10 ml, Ebewe Pharma, Áo) Thiết bị Cân phân tích Kern (Đức), thước kẹp Digitronic (Anh), máy siêu âm Misonix (Mỹ), tủ sấy Nuaire (Mỹ), tủ an toàn sinh học Trần Vũ (Việt Nam), tủ lạnh oC Toshiba (Nhật) Xây dựng đánh giá đáp ứng mơ hình gây u dày chuột nhắt benzo(a)pyren Dựa kết số thử nghiệm sơ bộ, đề tài chọn tiêm phúc mô (ip) cyclophosphamid liều 100 mg/kg vào ngày 1, gây suy giảm miễn dịch chuột với số lượng bạch cầu thấp vào ngày Để gây khối u dày, đề tài thực theo mơ hình nhóm Shishu (2007): cho chuột uống mg B(a)P pha 0,25 ml dầu bắp lần cách tuần (vào ngày 5, 19) điều trị 5-FU, uống 20 mg/kg/ngày, ngày/tuần sau liều B(a)P cuối 12 tuần(12) Chuột thí nghiệm chia thành lô theo trọng lượng thể: Lô sinh lý (8 con): ip NaCl 0,9% liều 0,1ml/10g vào ngày 1, Ngày thứ 5, 19 cho chuột uống 0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 212 Lô điều trị (15 con): ip CYP 100 mg/kg ngày thứ 1, Ngày thứ 5, 19 cho uống mg B(a)P 0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 đến ngày 103, cho chuột uống 5-FU liều 20 mg/kg/ngày, ngày/tuần, pha 0,2 ml dầu bắp Chuột thí nghiệm chia ngẫu nhiên thành lô theo trọng lượng thể: Lô sinh lý (n = 8): ip NaCl 0,9% liều 0,1 ml/10 g vào ngày 1, Ngày thứ 5, 19 cho chuột uống 0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 đến ngày 103 (12 tuần), cho chuột uống 0,2 ml dầu bắp Lô chứng bệnh (n =15): ip CYP 100 mg/kg vào ngày 1, Ngày thứ 5, 19 cho chuột uống mg B(a)P/0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 đến ngày 103 (12 tuần), cho chuột uống 0,2 ml dầu bắp Lô điều trị (n = 15): ip CYP 100 mg/kg ngày thứ 1, Ngày thứ 5, 19 cho uống mg B(a)P 0,25 ml dầu bắp Từ ngày 20 đến ngày 103 (12 tuần), cho chuột uống 5-FU liều 20 mg/kg/ngày, ngày/tuần, pha 0,2 ml dầu bắp Theo dõi trọng lượng thể chuột thử nghiệm Sự thay đổi trọng lượng thể chuột thí nghiệm ghi nhận cách cân chuột thời điểm tiêm CYP cho uống B(a)P lần/tuần vào tuần sau Đánh giá hiệu mơ hình gây u dày Ngày 104, chuột gây mê đá CO2, mở khoang bụng quan sát đại thể (ghi nhận đặc điểm màu sắc, tình trạng bề mặt, tổn thương) Tách lấy dày, cắt dọc để loại bỏ thức ăn, rửa dung dịch NaCl 0,9% lạnh ngâm Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 formalin 10% Sau 24-48 giờ, tiến hành đếm số khối u có kích thước lớn 0,5 mm đo kích thước khối u lơ thước kẹp Tính kết quả(5): Hiệu suất gây u dày (%) = [Số chuột có khối u dày/số chuột cịn sống] × 100% Số lượng khối u trung bình chuột có khối u = Tổng số khối u lơ/số chuột có khối u Kích thước khối u: V (mm3) = 1/2 × a × b2; a, b đường kính lớn nhất, nhỏ (mm) Kích thước khối u trung bình: Vtb = Tổng kích thước khối u lơ/Tổng số khối u lơ Tiến hành phân tích vi thể phương pháp nhuộm hematoxylin - eosin khoa Giải phẫu bệnh, Bệnh viện Quận 2, Thành phố Hồ Chí Minh Cấu trúc, hình thái tế bào dày quan sát kính hiển vi để đánh giá mức độ tổn thương (viêm, tăng sinh, carcinom…) Xử lý kết thống kê Kết xử lý phần mềm Excel, trình bày dạng trung bình ± sai số chuẩn giá trị trung bình (Mean ± SEM) phân tích thống kê phần mềm SPSS 20.0 Với biến số không theo quy luật phân phối chuẩn, sử dụng phép kiểm Mann - Whitney để Nghiên cứu Y học kiểm định khác có ý nghĩa Sự khác có ý nghĩa giá trị p < 0,05 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN Tỷ lệ tử vong Tỷ lệ chuột tử vong theo thời gian thử nghiệm trình bày Bảng Bảng 1: Tỉ lệ chết chuột lô thử nghiệm Giai đoạn Tiêm CYP Uống B(a)P Theo dõi/ Điều trị Tổng số chết Tổng số sống Tỷ lệ chết (%) Lô sinh lý Lô chứng bệnh (n = 8) (n = 15) 0 0 Lô điều trị (n = 15) 0 8 10 46,7 33,3 Sau 104 ngày, tỷ lệ tử vong lô sinh lý 0% (0/8 chuột), lô chứng bệnh 46,7% (7/15 chuột) lô điều trị 33,3% (5/15 chuột) Như vậy, tỷ lệ tử vong lô chứng bệnh cao lơ sinh lý độc tính B(a)P, liên quan đến khả gây khối u dày tác nhân chuột chủ yếu chết vào tuần thứ sau uống B(a)P liều thứ Sự thay đổi trọng lượng thể chuột Kết trọng lượng theo thời gian chuột sống sau thử nghiệm trình bày Bảng Bảng 2: Kết theo dõi trọng lượng chuột lô thử nghiệm Thời gian Ngày (CYP/NaCl) Ngày (CYP/NaCl) Ngày (BaP/dầu bắp) Ngày 19 (BaP/dầu bắp) Ngày 26 Ngày 33 Ngày 40 Ngày 47 Ngày 54 Ngày 61 Ngày 68 Ngày 75 Ngày 82 Ngày 89 Chuyên Đề Dược Lô sinh lý (n = 8) 21,61 ± 0,76 22,48 ± 0,69 25,25 ± 0,49 27,30 ± 0,78 28,60 ± 1,04 32,14 ± 1,49 33,49 ± 1,31 34,97 ± 1,29 36,21 ± 1,14 37,31 ± 1,12 40,41 ± 1,24 41,13 ± 1,50 41,71 ± 1,74 41,63 ± 1,15 Trọng lượng chuột (g) Lô chứng bệnh (n = 8) 21,55 ± 1,75 21,67 ± 1,75 21,74 ± 1,69 25,23 ± 3,73 25,34 ± 3,71* 26,89 ± 4,01* 26,79 ± 3,77* 26,94 ± 3,60* 26,67 ± 3,59* 26,77 ± 3,78* 28,97 ± 4,24* 28,63 ± 3,90* 28,57 ± 3,84* 29,94 ± 3,90* Lô điều trị (n = 10) 21,05 ± 1,65 21,14 ± 1,31 22,65 ± 0,95 23,68 ± 1,47 23,68 ± 1,35* 25,08 ± 1,60* 24,41 ± 1,19* 25,01 ± 1,24* 26,00 ± 1,15* 25,39 ± 0,93* 25,56 ± 1,23* 26,04 ± 1,81* 26,21 ± 2,08* 26,43 ± 2,50* 213 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Thời gian Ngày 96 Ngày 103 Lô sinh lý (n = 8) 41,96 ± 1,19 42,61 ± 1,48 *: p < 0,05 so với lô sinh lý thời điểm Kết cho thấy chuột sinh lý có trọng lượng thể tăng Chuột lô chứng bệnh lô điều trị tăng mức độ thấp lô sinh lý Đặc biệt, từ ngày 26 chuột lơ cho uống B(a)P có trọng lượng tăng khơng đáng kể thấp có ý nghĩa thống kê so với chuột sinh lý (p < 0,05) Trọng lượng thể chuột lô điều trị 5-FU lơ chứng bệnh khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê tất thời điểm khảo sát (p > 0,05) Sự tạo thành khối u dày Quan sát đại thể cho thấy chuột lô sinh lý uống dầu bắp, dày màu trắng xám nhạt, bề mặt nhẵn; chuột uống B(a)P, dày màu trắng Trọng lượng chuột (g) Lô chứng bệnh (n = 8) 28,59 ± 3,76* 27,89 ± 3,89* Lô điều trị (n = 10) 26,09 ± 2,07* 25,19 ± 1,81* nâu nhạt, bề mặt có số vị trí lồi lên Tất dày có mật độ mềm, khơng phù nề, không sung huyết Tách lấy dày, cắt dọc, loại bỏ thức ăn, quan sát thấy khơng có tình trạng xuất huyết Rửa NaCl 0,9%, ngâm formol 10% Sau 48 giờ, khảo sát hình thành khối u dày cho thấy lô sinh lý khơng có khối u dày Ở lơ chứng bệnh lơ điều trị 5-FU, số chuột có khối u dày, tập trung chủ yếu mặt dày trước (Hình 1) Khối u rắn, cứng, chắc, màu trắng xám Ở lô chứng bệnh, thành dày mỏng hơn, giảm nếp gấp Đếm số khối u có kích thước lớn 0,5 mm đo kích thước khối u thước kẹp Kết trình bày Bảng Bảng 3: Kết khảo sát khối u dày chuột lô Lô Sinh lý Chứng bệnh Điều trị Số chuột Số chuột có Tỷ lệ chuột có sống (con) khối u (con) khối u (%) 0 87,5 10 40,0 *p < 0,05 so sánh với lô sinh lý; #p < 0,05 so sánh với lơ chứng bệnh Tỷ lệ chuột có khối u dày lô chứng bệnh lô điều trị 87,5% 40% Chuột chứng bệnh có trung bình 2,45 khối u/con lơ điều trị 1,21 Về kích thước khối u trung bình, lơ điều trị 1,94 mm3 so với 4,44 mm3 lô chứng bệnh (p < 0,05) Như vậy, ba Lô sinh lý Số khối u trung bình (trung bình ± SEM) 2,45 ± 0,41* 1,21 ± 0,62* Kích thước khối u trung bình (trung bình ± SEM) 4,44 ± 1,01* # 1,94 ± 0,34* số tỷ lệ chuột có khối u, số khối u kích thước khối u trung bình lơ điều trị giảm khoảng 50% so với lô chứng bệnh Kết chứng tỏ uống 5-FU làm giảm tỷ lệ gây u tổn thương dày Hình ảnh đại thể khối u dày chuột lơ trình bày Hình Lơ chứng bệnh Lơ điều trị Hình 1: Đại thể dày chuột lô thử nghiệm 214 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Phân tích vi thể dày chuột Theo kết phân tích vi thể (Hình 2), 5/7 chuột có khối u (71,4%) lơ chứng bệnh 2/4 chuột có khối u (50%) lơ điều trị có tình trạng viêm mạn tính thấm nhập bạch cầu đa nhân Nghiên cứu Y học trung tính lympho kèm theo tăng sản tế bào gai tế bào biểu mơ nhiều lớp; chuột cịn lại có cấu trúc tế bào dày bình thường; khơng có chuột xuất tình trạng carcinom Tăng sản tế bào đáy nhiều lớp Dạ dày có cấu trúc bình thường Dạ dày viêm mạn tính Thấm nhập bạch cầu lympho Tăng sản tế bào gai đa nhân trung tính Dạ dày có cấu trúc bình thường Hình 2: Hình ảnh phân tích vi thể dày chuột sau nhuộm HE (40X) hồi đạt khoảng 33,3% ban đầu Như vậy, cho Như vậy, cho chuột uống B(a)P gây khối chuột uống B(a)P vào ngày 5, 19 khoảng thời u dày tình trạng viêm mạn tính kèm tăng gian chuột bị giảm miễn dịch làm tăng sản tế bào gai tế bào biểu mô, chưa gây khả gây u Điều giải thích cho carcinom Uống 5-FU sau liều B(a)P cuối kết hiệu suất gây khối u dày; số lượng đến ngày 103 làm giảm số khối u dày kích thước khối u trung bình cao báo cáo đại thể tỷ lệ chuột viêm dày mạn tính Shishu (2007) sử dụng chế độ vi thể liều B(a)P mg 0,25 ml dầu bắp x lần(12) BÀN LUẬN Tuy nhiên, đề tài có tỷ lệ chuột tử vong cao Để gây ung thư dày thực nghiệm có hiệu suất gây u dày thấp số báo cáo thể dùng nhiều tác nhân gây khác khác(6-8,10) Khác biệt điều kiện thí B(a)P, DMBA [1,7-dimethyl nghiệm (phịng ni thú khơng có thiết bị điều benzo(a)anthracen]… Đề tài chọn B(a)P chất hòa nhiệt độ), chủng thú vật (đề tài sử dụng sinh từ q trình cháy khơng hồn toàn, chuột Swiss albino báo cáo có nhiều khí thải cơng nghiệp, tơ khói dùng chuột ICR, Balb/C A/J) So với lơ thuốc lá, sử dụng để gây ung thư chứng bệnh, việc uống 5-FU sau liều B(a)P dày chuột nhiều nghiên cứu nước cuối làm giảm tỷ lệ chuột có khối u dày, ngoài(2,7,13,14) Điểm đề tài dùng chuột số khối u kích thước khối u trung bình Kết Swiss albino gây giảm miễn dịch CYP Theo tương tự nghiên cứu Shishu kết thử nghiệm (kết không báo cáo), cộng năm 2007 (12) chuột yếu, lông xù hoạt động bình Kết vi thể cho thấy khối u chuột thường, không bị chết, lượng bạch cầu thấp uống B(a)P tình trạng viêm mạn tính kèm vào ngày thứ 5; đến ngày thứ 21 bạch cầu phục tăng sản tế bào gai tế bào biểu mô nhiều lớp Chuyên Đề Dược 215 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 chưa tạo carcinom Tình trạng viêm dày mạn tính tạo điều kiện để ung thư dày phát triển xuất tác nhân gây ung thư Điều gợi ý cải tiến mơ hình theo hướng tăng thời gian thử nghiệm để tăng khả gây carcinom dày Thực tế, số nghiên cứu gây khối u dày có thời gian thử nghiệm đến 20 tuần(7,14) KẾT LUẬN Mơ hình chuột nhắt tiêm ip cyclophosphamid 100 mg/kg vào ngày 1, 3; sau cho uống benzo(a)pyren liều mg/0,25 ml dầu bắp/chuột vào ngày 5, ngày 19 gây khối u dày tình trạng viêm mạn tính kèm tăng sản tế bào gai tế bào biểu mô chưa gây carcinom sau 104 ngày Cần tăng thời gian thử nghiệm mơ hình để tăng khả gây carcinom dày TÀI LIỆU THAM KHẢO 216 Carreno BM, Joel RG, Grant RK, Erin NJ, John AE, BeckerHapak M, Gerald PL (2009) “Immunodeficient mouse strains display marked variability in growth of human melanoma lung metastases”, Clinical Cancer Research, 15(10): 3277-3286 Deshpande SS, Ingle AD, Maru GB (1997), “Inhibitory effects of curcumin-free aqueous turmeric extract on benzo[a]pyreneinduced forestomach papillomas in mice”, Cancer Lett, 118, 7985 Emadi A, Jones JR, Brodsky AR (2009), “Cyclophosphamide and cancer: golden aniversary”, Nature reviews clinical oncology, (11): 638 - 647 Ferlay J, Shin HR, Bray F, Forman D, Mathers C, Parkin DM (2010), “Estimates of worldwide burden of cancer in 2008: 10 11 12 13 14 GLOBOCAN 2008”, International Journal of Cancer, 127, 28932917 Hattori K, Shimizu K, Takahashi M (1990), “Quantitative in vivo assay of human granulocyte colony-stimulating factor using cyclophosphamide-induced neutropenic mice”, Blood, 75(6), 1228 - 1233 Huyan, Xiao-Hui (2011), “Immunosuppressive effect of cyclophosphamide on white blood cells and lymphocyte subpopulations from peripheral blood of Balb/c mice”, International immunopharmacology, 11(9): 1293-1297 Lee WW, Judith BC, Luke KTL (1980), “Inhibitory Effects of Phenolic Compounds on Benzo(a)pyrene-induced neoplasia”, Cancer research, 40, 2820-282 Leenders WH, Nijkamp MW, Rinkes IH (2008), “Mouse models in liver cancer research: A review of current literature”, World journal of gastroenterology, 14(45): 6915 - 6923 Ohmori H, Kamo M, Yamakoshi K, Nitta MH, Hikida M (2001) Restoration of immunocyte functions by thymosin a1 in cyclophosphamide-induced immunodeficient mice Immunopharmacol Immunotoxicol, 23:75–82 Ohtsu A (2008), “Chemotherapy for metastatic gastric cancer: past, present, and future”, Journal of Gastroenterology, 43, 256-264 Phạm Duy Hiển (2007), Ung thư dày, NXB Y học, tr 20-86 Shishu NG, Gupta N, Aggarwal N (2007), “Stomach-specific drug delivery of 5-fluorouracil using floating alginate beads”, AAPS PharmSciTech., 8(2): Article 48 World Health Organization (2000), Pathology and Genetics of Tumours of the Digestive System, IARC Press, 3, 37-66 Wu K, Shan YJ, Zhao Y, Yu JW, Liu BH (2001), “Inhibitory effects of RRR-a-tocopheryl succinateon benzo(a)pyrene (B(a)P-induced forestomach carcinogenesis in female mice”, World J Gastroenterol, 7(1), 60 - 65 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: Ngày báo đăng: 30/10/2015 20/11/2015 20/02/2016 Chuyên Đề Dược ... thước khối u lơ thước kẹp Tính kết quả(5): Hi? ?u suất gây u dày (%) = [Số chuột có khối u dày/ số chuột cịn sống] × 100% Số lượng khối u trung bình chuột có khối u = Tổng số khối u lơ/số chuột có khối. .. thành khối u dày cho thấy lô sinh lý khơng có khối u dày Ở lơ chứng bệnh lơ đi? ?u trị 5-FU, số chuột có khối u dày, tập trung chủ y? ?u mặt dày trước (Hình 1) Khối u rắn, cứng, chắc, m? ?u trắng xám... hành xây dựng mơ hình gây khối u dày chuột nhắt benzo(a)pyren sau gây suy 211 Nghiên c? ?u Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 giảm miễn dịch CYP để ứng dụng nghiên c? ?u tiền