Xác định đồng thời paracetamol, lopheniramin maleat và dextromethorphan hydrobromit trong thuốc viên nén coldko theo phương pháp trắc quang

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM LÊ ĐÀO THỤC ANH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CLOPHENIRAMIN MALEAT VÀ DEXTROMETHORPHAN HYDROBROMIT TRONG THUỐC VIÊN NÉN COLDKO THEO PHƢƠNG PHÁP TRẮC QUANG CHUN NGÀNH: HĨA PHÂN TÍCH Mã số: 60.44.29 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Mai Xuân Trường Thái Nguyên, năm 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Hiện nay, thị trường có nhiều loại thuốc giảm đau, hạ sốt, chống viêm với thành phần khác Để định lượng chất thuốc này, theo tiêu chuẩn nhà sản xuất phải chiết tách riêng chất định lượng phương pháp khác nhau, kĩ thuật tiến hành phức tạp, tốn nhiều thời gian, dung mơi, hóa chất Bên cạnh với thiếu thốn sở vật chất nhiều địa phương, việc định lượng đồng thời chất mà tách riêng chất khỏi hỗn hợp vấn đề quan tâm Trên giới Việt Nam có nhiều cơng trình nghiên cứu áp dụng phương pháp sai phân, phương pháp phổ đạo hàm, phương pháp bình phương tối thiểu, phương pháp lọc Kalman, phương pháp phân tích hồi quy đa biến tuyến tính, phương pháp hồi quy đa biến phi tuyến tính…để xác định đồng thời chất hỗn hợp Một hướng nghiên cứu phân tích xác định đồng thời chất hỗn hợp mà không cần phải tách loại trước tiến hành phân tích Hướng nghiên cứu bao gồm số phương pháp phân tích kết hợp với kỹ thuật tính tốn, thống kê đồ thị [4-8] Sử dụng phương pháp trắc quang việc xác định thành phần chất hiệu phương pháp trắc quang, người ta sử dụng nguyên lý định luật Bughe-Lămbe-Bia, có tỉ lệ thuận độ hấp thụ quang chất vào nồng độ chất có dung dịch Phương pháp trắc quang có nhiều ưu điểm độ nhạy, độ lặp, độ xác, độ tin cậy phép phân tích; phân tích nhanh, tiện lợi Với lí nêu trên, chọn đề tài nghiên cứu: “Xác định đồng thời paracetamol , clopheniramin maleat dextromethorphan hidrobomit thuốc Coldko theo phương pháp trắc quang” Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan paracetamol, clopheniramin maleat, dextromethrophan hidrobromit 1.1.1 Paracetamol 1.1.1.1 Giới thiệu chung Paracetamol (Acetaminophel hay N-acetyl-p-aminophenol) chất chuyển hóa có hoạt tính phenacetin, thuốc giảm đau, hạ sốt hữu hiệu thay aspirin Paracetamol, với liều điều trị, tác động đến hệ tim mạch hơ hấp, không làm thay đổi cân axit-bazơ, không gây kích ứng, xước chảy máu dày dùng salicylat Paracetamol cung cấp không cần kê đơn hầu hết tất nước Tên gọi paracetamol acetaminophen lấy từ tên hóa học hợp chất para-acetylaminophenol acetylaminophenol Paracetamol có cơng thức phân tử là: C8H9NO2 Công thức cấu tạo Tên IUPAC: N-(4-hydroxyphenyl) axetamit hay N-axetyl-P-aminophenol Khối lượng mol phân tử: 151,17 (g/mol) Khối lượng riêng: 1,263 (g/cm3) Nhiệt độ nóng chảy: 1690C Độ tan nước: 0,1-0,5g/100 ml 220C Hiệu lực sinh học: gần 100% Chuyển hóa: 90-95% Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.1.1.2 Tổng hợp Paracetamol gồm có vịng nhân bezen, thay nhóm hydroxyl nguyên tử nitơ nhóm amit theo kiểu para(1,4) Nhóm amit axetamite (ethanamite) Đó hệ thống liên kết đôi rộng rãi, cặp đôi e đơn độc ngun tử oxi nhóm hydroxyl, cặp đơi đơn độc nguyên tử nitơ, quỹ đạo p nguyên tử cacbon nhóm cacbonxyl cặp đơi e đơn độc cacbonyl oxigen, tất nối đôi Sự có mặt hai nhóm hoạt tính làm cho vòng benzen phản ứng với chất thay thơm có lực điện Khi nhóm thay đoạn mạch thẳng ortho para khác, tất vị trí vịng hoạt hóa Sự liên kết làm giảm đáng kể tính bazơ oxi nitơ, tạo hydroxyl có tính axit Q trình điều chế: Từ nguyên liệu ban đầu phenol, paracetamol tạo theo sơ đồ hình 1.1 O NH2 NH C CH3 O + OH p aminophenol CH3 C O O O C CH3 + CH3 C OH OH anhidrit axetic paracetamol axit axetic Hình 1.1 : Quá trình tổng hợp paracetamol -Phenol nitrat hóa axit sunfuric natri nitrat (phenol chất có tính hoạt tích cao, nitrat hóa địi hỏi điều kiện thông thường hỗn hợp axit sunfuric axit nitric cần có nitrat benzen) - Chất đồng phân para tách từ chất đồng phân ortho phản ứng thủy phân (sẽ có meta, OH mạch thẳng o-p) - Chất 4-nitrophenol biến đổi thành 4-aminophenol sử dụng chất khử natri borohydrit dung mơi bazơ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 4-aminophenol phản ứng với anhydrit axetic paracetamol 1.1.1.3 Dược lý  Dược động học Paracetamol hấp thụ nhanh qua ống tiêu hóa, sinh khả dụng 80-90%, khơng gắn protein huyết tương Chuyển hóa lớn gan phần thận, cho dẫn xuất glucuro sulfo-hợp, thải trừ qua thận  Đặc điểm tác dụng Cũng thuốc chống viêm non-steroid khác, paracetamol có tác dụng hạ sốt giảm đau, nhiên khơng có tác dụng chống viêm thải trừ axit uric, khơng kích ứng tiêu hóa, khơng ảnh hưởng đến tiểu cầu đông máu  Cơ chế tác dụng Cơ chế tác dụng paracetamol tranh cãi, thực tế có tác dụng ức chế men cyclooxygenase (COX) làm giảm tổng hợp prostagalandin giống asprin, nhiên paracetamol lại tác dụng chống viêm Các nghiên cứu tập trung khám phá cách thức ức chế COX paracetamol hai đường Các men COX chịu trách nhiệm chuyển hóa arachidonic thành prostaglandinH2, chất khơng bền vững vị chuyển hóa thành nhiều loại chất trung gian khác Các thuốc chống viêm kinh điển NSAIDS tác động khâu Hoạt tính COX dựa vào tồn dạng oxihóa đặc trưng, tyrosine 385 bị oxi hóa thành gốc Người ta rằng, paracetamol làm giảm oxi hóa men từ ngăn chặn chuyển hóa chất trung gian viêm Nghiên cứu sâu cho thấy, paracetamol điều chỉnh hệ cannabinoid nội sinh Paracetamol bị chuyển hóa thành AM404, chất có hoạt tính riêng biệt, quan trọng ức chế hấp thu cannabinoid nội sinh neuron Sự hấp thu gây hoạt hóa thụ thể tổn thương thể Hơn nữa, AM404 ức chế kênh natri giống thuốc tê lidocaine procaine Một giả thiết đáng ý bị loại bỏ cho paracetamol ức chế men COX-3 Men thí nghiệm chó cho hiệu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn lực giống COX khác, làm tăng tổng hợp chất trung gian viêm bị ức chế paracetamol Tuy nhiên người chuột men COX-3 lại khơng có hoạt tính viêm khơng bị tác động paracetamol  Chuyển hóa Paracetamol trước tiên chuyển hóa gan, nơi sản phẩm chuyển hóa gồm tổ hợp sulfate glucuronide không hoạt động tiết thận Chỉ lượng nhỏ quan trọng chuyển hóa qua đường hệ enzyme cytonchrome P450 gan (các CYP2E1 isoenzymes CYP1A2) có liên quan đến tác dụng độc tính paracetamol sản phẩm alkyl hóa nhỏ (N-acetyl-p-benzo-quinone imiene, viết tắt NAPQ) Có nhiều tượng đa dạng zen P450, đa hình thái gien CYP2D6 nghiên cứu rộng rãi Nhóm chia thành chuyển hóa rộng rãi, cực nhanh chuyển hóa dựa vào biểu lộ CYP2D6, CYP2D6 góp phần hình thành NSPQI, dù tác động P450 isozymens khác, hoạt tính tham gia độc tính paracetamol dạng chuyển hóa rộng rãi cực nhanh paracetamol dùng liều lớn Hình 1.2: Các phản ứng chuyển hóa Paracetamol Sự chuyển hóa paracetamol ví dụ điển hình ngộ độc, chất chuyển hóa NAPQI chịu trách nhiệm trước tiên độc tính Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn thân paracetamol Ở liều thơng thường chất chuyển hóa độc tính NAPQI nhanh chóng bị khử độc cách liên kết bền vững với nhóm sulfhydryl glutathione hay kiểm soát hợp chất sulfhydryl N-acetylcysteine, để tạo tổ hợp không độc thải trừ qua thận Hơn nữa, methionine nhắc đến số trường hợp , nghiên cứu gần N-acetylcysteine thuốc giải độc liều paracetamol hiệu Cấu trúc N-Acetyl-p-benzochinonimin (NAPQI)  Tương tác - Uống paracetamol liều cao dài ngày làm tăng nhẹ tác dụng chống đông coumarin dẫn chất indandion - Cần phải ý đến khả gây hạ sốt nghiêm trọng người bệnh dùng đồng thời phenothiazin liệu pháp hạ nhiệt - Các thuốc chống giật (như phenytoin, barbiturat,carbamazepin ) gây cảm ứng enzim microsom thể gan, làm tăng tính độc hại gan paracetamol tăng chuyển hóa thuốc thành chất độc hại với gan Ngoài ra, dùng đồng thời isoniazid với paracetamol dẫn đến tăng nguy gây độc tính với gan, chưa xác định chế xác tương tác Nguy paracetamol gây độc tính gan gia tăng đáng kể người bệnh uống liều paracetamol lớn liều khuyên dùng dùng thuốc chống co giật isoniazid Thường không cần giảm liều người bệnh dùng đồng thời liều điều trị paracetamol thuốc chống co giật, người bệnh phải hạn chế tự dùng paracetamol dùng thuốc chống co giật isoniazid  Tác dụng phụ - Ở liều thơng thường, paracetamol khơng gây kích ứng niêm mạcdạ dày, không ảnh hưởng đông máu NSAIDS, không ảnh hưởng chức thận Tuy nhiên, số nghiên cứu cho biết dùng paracetamol liều cao (trên 2000 mg/ngày) làm tăng nguy biến chứng dày - Đôi xảy ban da phản ứng dị ứng khác Thường Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ban đỏ ban mề đay, nặng kèm theo sốt thuốc thương tổn niêm mạc Người bệnh mẫn cảm với salicylat mẫn cảm với paracetamol thuốc có liên quan - Ở số trường hợp riêng lẻ, paracetamol gây giảm bạch cầu trung tính, giảm tiểu cầu giảm toàn thể huyết cầu - Sử dụng paracetamol năm sống sau thời kỳ thơ ấu tăng nguy bị hen, viêm mũi kết mạc mắt eczema lúc đến tuổi, theo kết giai đoạn chương trình nghiên cứu quốc tế Hen bệnh dị ứng trẻ em 1.1.1.4.Độc tính Với liều điều trị khơng có tác dụng phụ, khơng gây tổn thương đường tiêu hóa, không gây thăng kiềm toan, không gây rối loạn đông máu Tuy nhiên, dùng liều cao (>4g/ngày) sau thời gian tiềm tàng 24 giờ, xuất hoại tử tế bào gan tiến triển đến chết sau 5-6 ngày  Biểu hiện: - Buồn nôn, nôn đau bụng thường xảy vòng 2-3 sau uống liều độc thuốc - Met-hemoglobin máu, dẫn đến chứng xanh tím da, niêm mạc dấu hiệu đặc trưng nhiễm độc cấp tính dẫn chất p-aminophenol, lượng nhỏ sulfthemoglobin sản sinh Trẻ em có khuynh hướng tạo met-hemoglobin dễ người lớn sau uống paracetamol - Khi bị ngộ độc nặng, ban đầu vật vã, kích thích mê sảng Sau ức chế hệ thần kinh trung ương, sững sờ, hạ thân nhiệt, mệt lả, thở nhanh, nôn, mạch nhanh yếu, huyết áp tụt suy tuần hoàn - Truy mạch giảm oxy huyết tương đối tác dụng ức chế trung tâm, tác dụng xảy với liều lớn - Sốc xảy co giãn mạch nhiều Cơn co giật ngẹt thở gây tử vong xảy - Thường mê xảy trước tử vong sau vài ngày hôn mê Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn  Nguyên nhân gây ngộ độc: Do paracetamol bị oxi-hóa gan cho N-acetyl parabenxoquinonimin Bình thường, chuyển hóa bị khử độc liên hợp glutathion gan Nhưng dùng liều cao, N-acetyl parabenzo quinonimin thừa (glotathion gan khơng cịn đủ để trung hịa nữa) gắn vào protein tế bào gan gây hoại tử tế bào  Cách điều trị: - Cần rửa dày trường hợp, tốt vòng sau uống - Liệu pháp giải độc dùng hợp chất sulfhydryl, có lẽ tác động phần bổ sung dự trữ glutathion gan N-acetylcystein (NAC) tiền chất glutathion có tác dụng uống tiêm tĩnh mạch Phải cho uống thuốc giải chưa đến 36 kể từ uống, sau 36 gan bị tổn thương kết điều trị -Ngồi dùng than hoạt tính, thuốc tẩy muối, nước chè đặc để làm giảm hấp thụ paracetamol 1.1.1.5.Dạng thuốc Paracetamol có dạng khác như: dạng uống viên nang, dạng gói để pha dung dịch, dạng dung dịch để uống hay truyền 1.1.1.6 Tính chất paracetamol Paracetamol hấp thu nhanh chóng hồn tồn qua đường tiêu hóa Thức ăn làm viên nén giải phóng kéo dài paracetamol chậm hấp thu phần thức ăn giàu cacbon hydrat làm giảm tỷ lệ hấp thu paracetamol Nồng độ đỉnh huyết tương đạt vòng 30 đến 60 phút sau uống với liều điều trị Paracetamol phân bố nhanh đồng phần lớn mô thể Khoảng 25% paracetamol máu kết hợp với protein huyết tương Thời gian bán hủy huyết tương paracetamol 1,25 - giờ, kéo dài với liều gây độc người bệnh có thương tổn gan Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Sau liều điều trị, tìm thấy 90 đến 100% thuốc nước tiểu ngày thứ nhất, chủ yếu sau liên hợp gan với axit glucuronic (khoảng 60%), axit sunfuric (khoảng 35%) cystein (khoảng 3%); phát thấy lượng nhỏ chất chuyển hóa hydroxyl - hố khử axetyl Trẻ nhỏ khả glucuro liên hợp với thuốc so với người lớn Paracetamol bị N-hydroxyl hóa cytocrom P450 để tạo nên N-acetylbenzoquinonimin, chất trung gian có tính phản ứng cao Chất chuyển hóa bình thường phản ứng với nhóm sunfuhydryl glutathion bị khử hoạt tính Tuy nhiên, uống liều cao paracetamol, chất chuyển hóa tạo thành với lượng đủ để làm cạn kiệt glutathion gan; tình trạng đó, phản ứng với nhóm sunfhydryl protein gan tăng lên, dẫn đến hoại tử gan - Chỉ định: Paracetamol dùng rộng rãi điều trị chứng đau sốt từ nhẹ đến vừa Paracetamol dùng giảm đau tạm thời điều trị chứng đau nhẹ vừa Thuốc có hiệu làm giảm đau cường độ thấp có nguồn gốc khơng phải nội tạng Paracetamol khơng có tác dụng trị thấp khớp Paracetamol thuốc thay salicylat (được ưa thích người bệnh chống định không dung nạp salicylat) để giảm đau nhẹ hạ sốt Paracetamol thường dùng để giảm thân nhiệt người bị bệnh sốt, sốt có hại hạ sốt người bệnh dễ chịu Tuy vậy, liệu pháp hạ sốt nói chung khơng đặc hiệu, khơng ảnh hưởng đến tiến trình bệnh bản, che lấp tình trạng bệnh người bệnh - Chống định: Người bệnh nhiều lần thiếu máu có bệnh tim, phổi, thận gan Người bệnh mẫn với paracetamol Người bệnh thiếu hụt glucozơ-6-phosphat dehydro-genat (G6PD) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 10 Trong đó: VPAR(1), VPAR(2), VPAR(3) thể tích dung dịch PAR tương ứng với nồng độ µg/mL , 25 µg/mL, 50 µg/mL VDEX(1), VDEX(2), VDEX(3), VDEX(4) thể tích dung dịch DEX tương ứng với nồng độ 0,5 µg/mL, µg/mL, 25 µg/mL, 100 µg/mL C0PAR C0DEX (µg/mL) hàm lượng PAR, DEX tự pha hỡn hợ.p CPAR CDEX (µg/mL) hàm lượng PAR, DEX xác định RE% CPAR RE% CDEX sai số phép xác định hàm lượng PAR, DEX Nhận xét: Kết thu bảng 3.21 3.22 cho thấy hàm lượng PAR> DEX 40 lần DEX > PAR 55 phương pháp lọc Kalman mắc sai số lớn 5% cấu tử có nồng độ nhỏ cấu tử có nồng độ lớp mắc sai số nhỏ ( DEX 40 lần DEX > PAR 55 lần hàm lượng DEX > CPM lớn 40 lần CPM > DEX 10 lần phương pháp lọc Kalman mắc sai số lớn 5% cấu tử có nồng độ nhỏ mắc sai số nhỏ cấu tử có nồng độ lớn (