KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG MELOXICAM BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV - VIS

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC HỌC MÃ SỐ: 52720401 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG MELOXICAM BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV - VIS Cán hướng dẫn: DS.CKI TRẦM HẠNH DUNG Sinh viên thực hiện: LÊ KHÁNH VINH MSSV: 12D720401186 LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 7B Cần Thơ, năm 2017 LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Cô DS.CK1 Trầm Hạnh Dung nhiệt tình hướng dẫn, góp ý, hỗ trợ tạo điều kiện giúp tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban Giám Hiệu Trường Đại học Tây Đô, Khoa Dược Trường Đại học Tây Đô Cô DS.CK1 Trầm Hạnh Dung tạo điều kiện giúp tơi hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý Thầy Cô bạn Khoa DượcĐiều dưỡng Trường Đại Học Tây Đô; q Thầy Cơ phịng Bào chế Kiểm nghiệm trường Đại học Tây Đô; Cô ThS Huỳnh Thị Mỹ Duyên trường Đại học Y dược Cần Thơ hỗ trợ tơi nhiều q trình nghiên cứu thực nghiệm Tác giả luận văn Lê Khánh Vinh i LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Cần Thơ, ngày 14 tháng 06 năm 2017 Tác giả luận văn Lê Khánh Vinh ii TÓM TẮT Bệnh xương khớp bệnh mãn tính, chiếm tỉ lệ lớn cộng đồng gặp khó khăn sinh hoạt vận động cho bệnh nhân Trong ngành khớp học, nhóm thuốc kháng viêm không steroid (NSAID) thuốc thiết yếu, sử dụng rộng rãi để điều trị hầu hết triệu chứng bệnh khớp cấp tính, mạn tính viêm phần mềm cạnh khớp Meloxicam thuộc nhóm NSAID, ức chế chọn lọc COX – dùng qua đường uống lâu dài gây tác dụng phụ, đáng kể gây tổn hại niêm mạc dày – tá tràng, làm viêm loét gây xuất huyết tiêu hóa Cần có dạng thuốc dùng ngồi nhằm hạn chế tác dụng phụ đường uống cho bệnh nhân Hiện nay, thị trường Việt Nam chưa có chế phẩm dùng da chứa hoạt chất này, nghiên cứu bào chế chế phẩm dùng chứa meloxicam cần thiết Để tiến hành nghiên cứu dạng bào chế mới, việc phải tiến hành xây dựng thẩm định quy trình định lượng phù hợp với điều kiện thực tế Trong nghiên cứu này, phương pháp quang phổ UV – Vis sử dụng để định lượng meloxicam chế phẩm dùng Nguyên liệu sử dụng đề tài gồm meloxicam, HEC, l – menthol, borneol, PG, đệm phosphate pH 7,4, ethanol, hóa chất dung mơi đạt tiêu chuẩn phân tích Vì độ tan meloxicam thay đổi mơi trường pH khác nhau, đề tài chọn xây dựng thẩm định quy trình định lượng meloxicam gel phương pháp quang phổ UV – Vis môi trường đệm phosphate pH 7,4 bước sóng 362 nm Quy trình định lượng meloxicam gel phương pháp quang phổ hấp thu tử ngoại – khả kiến (UV – Vis) bước sóng 362 nm thẩm định đạt tính đặc hiệu, tính tuyến tính, độ xác độ Về độ đặc hiệu, dung môi, tá dược hấp thu vùng bước sóng ngắn khơng ảnh hưởng đến độ hấp thu mẫu thử bước sóng dài 362 nm Dung mơi, tá dược sử dụng kèm công thức không ảnh hưởng đến độ hấp thu hoạt chất nên phương pháp định lượng đạt độ đặc hiệu Về tính tuyến tính, đề tài thu phương trình hồi quy tuyến tính y = 0,0522411x + 5,56292-4 hệ số tương quan R2 = 0,99976 khoảng tuyến tính khảo sát nên phương pháp đạt tính tuyến tính Về độ xác, RSD hàm lượng mẫu 1,48 % so với giá trị trung bình ≤ % nên quy trình định lượng đạt độ đặc hiệu Về độ đúng, tỉ lệ phục hồi nằm khoảng 98 % - 102 % nên phương trình định lượng đạt độ Sau trình thực nghiệm, “Nghiên cứu xây dựng thẩm định quy trình định lượng meloxicam phương pháp quang phổ UV – Vis” đạt tiêu độ đặc hiệu, tính tuyến tính, độ xác (độ lặp lại), độ iii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH HÌNH viii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ix CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN MELOXICAM (ME) .3 2.1.1 Cơng thức hóa học .3 2.1.2 Tính chất độ ổn định .3 2.1.3 Một số phương pháp định tính meloxicam 2.1.4 Một số phương pháp định lượng meloxicam 2.1.5 Tổng quan số tính chất dược lý thuốc NSAID chứa meloxicam 2.1.6 Một số dạng bào chế có chứa meloxicam 2.2 TỔNG QUAN VÀI NÉT VỀ THUỐC MỀM DÙNG NGOÀI DA VÀ NIÊM MẠC 2.2.1 Định nghĩa 2.2.2 Kỹ thuật điều chế - sản xuất thuốc mỡ 2.2.3 Phân loại: .8 2.2.4 Yêu cầu chất lượng thuốc mỡ .8 2.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ GEL 2.3.1 Định nghĩa 2.3.2 Ưu – nhược điểm dạng thuốc gel 2.3.3 Phân loại 2.3.4 Một số đặc tính gel .10 2.3.5 Phương pháp đánh giá số tiêu chất lượng gel 11 2.3.6 Hydrogel 12 iv 2.4 ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MƠI VÀ CHẤT TĂNG TÍNH THẤM ĐẾN GIẢI PHÓNG VÀ HẤP THỤ QUA DA 13 2.4.1 Cấu tạo da đường vận chuyển thuốc qua da 13 2.4.2 Quá trình thấm thuốc qua da .15 2.4.3 Các phương pháp làm tăng tính thấm thuốc qua da 17 2.4.4 Một số phương pháp làm tăng tính tan tính thấm meloxicam .18 2.5 MỘT SỐ CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN TỚI MELOXICAM VÀ DẠNG THUỐC DÙNG QUA DA 19 2.6 TỔNG QUAN PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ TỬ NGOẠI KHẢ KIẾN (UV – VIS) 24 2.6.1 Cấu tạo máy quang phổ .24 2.6.2 Nguyên tắc hoạt động máy UV – Vis 24 2.6.3 Ưu điểm phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến 25 2.6.4 Sai số phép đo phổ hấp thu UV – Vis 25 2.6.5 Các ứng dụng quang phổ UV – Vis 25 2.7 TỔNG QUAN QUY TRÌNH PHÂN TÍCH .26 2.7.1 Các yêu cầu quy trình phân tích 26 2.7.2 Tầm quan trọng việc thẩm định quy trình phân tích 27 2.7.3 Nội dung thẩm định quy trình phân tích 27 CHƯƠNG : PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 31 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 31 3.1.2 Tiêu chuẩn chọn mẫu 31 3.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ 31 3.1.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu .31 3.2 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 31 3.2.1 Nguyên liệu, hóa chất 31 3.2.2 Thiết bị máy móc .32 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 3.3.1 Xây dựng quy trình định lượng meloxicam 33 3.3.2 Thẩm định quy trình định lượng ME gel thành phẩm phương pháp quang phổ UV – Vis 33 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 v 4.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ME BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-VIS (Cục quản lý dược, 2010) 36 4.1.1 Tính đặc hiệu .36 4.1.2 Tính tuyến tính 37 4.1.3 Độ xác 38 4.1.4 Độ .39 4.2 THẢO LUẬN 39 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 42 5.1 KẾT LUẬN 42 5.2 ĐỀ XUẤT 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO .43 vi DANH SÁCH BẢNG Bảng 3.1 Danh sách nguyên liệu hóa chất dùng cho nghiên cứu 31 Bảng 3.2 Danh sách thiết bị dùng bào chế kiểm nghiệm 32 Bảng 3.3 Thành phần mẫu thử giả định mẫu trắng giả định .34 Bảng 3.4 Nồng độ dãy dung dịch chuẩn 35 Bảng 3.5 Nồng độ dung dịch thử thêm chuẩn 35 Bảng 4.1 Kết kiểm nghiệm nguyên liệu ME 36 Bảng 4.2 Kết khảo sát tính đặc hiệu bước sóng 362 nm 37 Bảng 4.3 Độ hấp thu mẫu khảo sát tính tuyến tính 362 nm 37 Bảng 4.4 Kết thẩm định độ xác quy trình định lượng gel ME 38 Bảng 4.5 Kết thẩm định độ quy trình định lượng gel ME 39 vii DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Cơng thức cấu tạo meloxicam Hình 2.2 Thuốc tiêm Mobic 15 Hình 2.3 Viên nang Metolop 7,5 mg Hình 2.4 Viên nén Meloxicam STADA 7,5 mg .7 Hình 2.5 Viên đạn meloxicam 15 mg .7 Hình 2.6 Sơ đồ cấu tạo da 14 Hình 2.7 Các đường vận chuyển thuốc qua da 16 Hình 2.8 Sơ đồ cấu tạo máy quang phổ UV – Vis .24 Hình 4.1 Phổ hấp thu UV-Vis nguyên liệu ME, mẫu chuẩn ME dung dịch mẫu trắng .36 Hình 4.2 Phổ hấp thu UV-Vis mẫu thử giả định mẫu trắng giả định 37 Hình 4.3 Đồ thị tuyến tính độ hấp thu ME theo nồng độ 38 viii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ME Non – Steroid Anti – Inflammatory Drug (thuốc kháng viêm không steroid) Meloxicam PEG UV – Vis Polyethylen glycol Ultraviolet Visible (tử ngoại khả kiến) COX MC Cyclo – oxygenase Methyl cellulose CMC Cacboxylmethyl cellulose HEC Hydroxyethyl cellulose HPMC HEMA NVP Hydroxypropyl methycellulose Hydroxyethyl methacrylat N – vinyl - –pyrrolidone HPMA N/D DMSO EC N – (2 – hydroxypropyl) methacrylat Nước dầu Dimethyl sulfoxid Emulsifiable concentrate TEA NaLS EO Triethanolamine Natri lauryl sulfat Ethyl oleat OA HPC HPLC EF RQ48h Acid oleic Hydroxypropyl cellulose Sắc ký lỏng hiệu cao Hiệu chất làm tăng tính thấm Lượng chất giải phóng sau 48 LT Cmax AUC IPM ED50 RSD SD λmax Thời gian tiềm tàng Nồng độ tối đa Diện tích đường cong Isopropyl myristat Effective dose 50 % (liều có hiệu 50 %) Relative Standard Deviation (độ lệch chuẩn tương đối) Standard Deviation (độ lệch chuẩn) Bước sóng cực đại TNHH Trách nhiệm hữu hạn NSAID ix PL.5 PL.6 PL.7 PL.8 PL.9 PL.10 PL.11 PL.12 PL.13 PL.14 PL.15 PL.16 PL.17 PL.18 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC-ĐIỀU DƯỠNG ……… CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc ……… GIẤY XÁC NHẬN ĐÃ BỔ SUNG, SỬA CHỮA LUẬN VĂN THEO Ý KIẾN ĐÓNG GÓP CỦA HỘI ĐỒNG CHẤM KHÓA LUẬN Họ tên sinh viên: LÊ KHÁNH VINH Tên đề tài luận văn: NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG MELOXICAM BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV – VIS Chuyên ngành: Dược học MSSV: 12D720401186 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Công Luận, ThS Đỗ Văn Mãi Khóa luận bổ sung sửa chữa điểm sau: - Đã sửa lỗi tả - Đã bổ sung phần khoảng xác định theo sổ tay đăng ký thuốc - Đã chỉnh sửa hình thức - Đã sửa lại phần tài liệu tham khảo TP Cần Thơ, ngày tháng năm 2017 Giảng viên hướng dẫn Sinh viên Thư ký hội đồng Chủ tịch hội đồng ... Inflammatory Drug (thuốc kháng viêm không steroid) Meloxicam PEG UV – Vis Polyethylen glycol Ultraviolet Visible (tử ngoại khả kiến) COX MC Cyclo – oxygenase Methyl cellulose CMC Cacboxylmethyl... methacrylat Nước dầu Dimethyl sulfoxid Emulsifiable concentrate TEA NaLS EO Triethanolamine Natri lauryl sulfat Ethyl oleat OA HPC HPLC EF RQ48h Acid oleic Hydroxypropyl cellulose Sắc ký lỏng hiệu... menthol acid oleic có 22 làm tăng tính thấm Nồng độ acid oleic tăng tới 1% tốc độ thấm kp tăng 6,09 lần so với mẫu chứng, sau giảm xuống 4,92 lần 5% Theo tác giả, nồng độ acid oleic cao cản trở