Nghiên cứu chiết tách xác định một số thành phần hóa học trong dịch chiết lá lốt ở huyện hòa vang, TP đà nẵng

-1- ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA -   - NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HOÁ HỌC TRONG DỊCH CHIẾT LÁ LỐT Ở HUYỆN HOÀ VANG - ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Sinh viên thực : Trương Đình Xuân Tịnh Giáo viên hướng dẫn : ThS Võ Kim Thành Lớp : 08CHD -2- MỞ ĐẦU Ngày mà xã hội không ngừng phát triển, đời sống vật chất tinh thần người ngày nâng cao, vấn đề chăm sóc bảo vệ sức khỏe người ngày trọng Với việc ứng dụng tiến khoa học vào lĩnh vực y học người nghiên cứu tổng hợp điều chế nhiều loại dược phẩm có nguồn gốc thiên nhiên Các dược liệu có hợp chất tự nhiên ngồi tác dụng chữa bệnh bổ sung cho thể dưỡng chất , không độc hại, thể hấp thụ tốt khơng gây tác dụng phụ Do đó, việc phát sâu nghiên cứu hợp chất có thảo dược ln trọng Việt Nam ta nước nhiệt đới, nóng, ẩm mưa nhiều, có nguồn dược liệu phong phú lên đến 12000 loài, đa dạng y học dân tộc phát triển lâu đời Từ xa xưa, ông cha ta biết sử dụng nhiều loại thảo dược việc dưỡng thương, trị bệnh bồi bổ thể Những năm gần đây, thuốc tân dược y học đại sử dụng cách rộng rãi vị thuốc dân gian đóng vai trò quan trọng đời sống ngày người, có nhiều bệnh tật chữa khỏi nhờ loại thảo Cây lốt loại thân thuộc chúng ta, thường sử dụng bữa ăn hàng ngày, ngồi cịn loại rau kiêm vị thuốc Trong y học cổ truyền, lốt có vị nồng, cay, tính ấm, cơng dụng ơn trung ( làm ấm bụng), tán hàn (trừ lạnh), hạ khí ( đưa khí xuống), thơng ( giảm đau), yêu cước thống (đau lưng, đau chân), tỵ uyên (mũi chảy nước kéo dài ), trị nôn mửa, đầy hơi, khó tiêu… Mặc dù lốt vị thuốc tốt, có nhiều ứng dụng điều trị bệnh xem lốt loại rau bình thường để ăn hàng ngày So với nhiều loại dược liệu khác thông tin khoa học lốt chưa đầy đủ, cơng trình nghiên cứu khoa học lồi cịn Trên tinh thần mong muốn đóng góp phần tìm hiểu mối quan hệ thành phần hóa học với cơng dụng dược tính sử dụng em chọn đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định số thành phần hóa học dịch chiết lốt huyện Hòa Vang, TP Đà Nẵng” -3- Mục tiêu nghiên cứu: - Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học lốt - Đóng góp vào nguồn thơng tin tư liệu khoa học lốt, tạo sở khoa học phát huy tác dụng chữa bệnh - Tạo tiên đề cho nghiên cứu sâu lốt sau này, từ có giải pháp phát huy tính ưu việt Đối tượng nghiên cứu : Lá lốt hái xã Hòa Bắc, huyện Hòa Vang, TP.Đà Nẵng vào buổi sáng tháng Phương pháp nghiên cứu: 4.1 Nghiên cứu lý thuyết - Thu thập, tổng hợp tài liệu, tư liệu, sách báo ngồi nước có liên quan đến đề tài - Trao đổi kinh nghiệm với chuyên gia, thầy cô giáo đồng nghiệp 4.2 Phương pháp thực nghiệm - Phương pháp lấy mẫu, thu hái xử lý mẫu - Phương pháp phân tích trọng lượng để xác định độ ẩm - Phương pháp phân hủy mẫu phân tích để khảo sát hàm lượng hữu - Phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử để xác định hàm lượng kim loại có lốt - Chiết phương pháp chiết nóng soxhlet phương pháp ngâm kiệt với dung môi hữu - Phương pháp sắc ký khí - phổ khối liên hợp (GC - MS) nhằm phân tách xác định thành phần định tính định lượng hoạt chất dịch chiết Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài :  Ý nghĩa thực tiễn: Giải thích cách khoa học kinh nghiệm dân gian, thuận tiện cho việc ứng dụng thuốc -4-  Ý nghĩa khoa học: Cung cấp thêm thông tin lốt sữa số tiêu hóa lý, khảo sát thành phần hóa học cấu tạo số hợp chất có lốt Bố cục khóa luận: Nội dung khóa luận chia làm chương : Chương : Tổng quan Chương : Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Chương : Kết thảo luận -5- CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ HỌ HỒ TIÊU Họ Hồ tiêu ( Piperaceae) loại thực vật chứa 2.000 lồi nhóm chi Chúng loại thân gỗ nhỏ, bụi hay dây leo khu vực nhiệt đới Cây trầu Cây lốt Hồ tiêu Hình 1.1 Một số thuộc họ Hồ tiêu 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CÂY LÁ LỐT 1.2.1 Sơ lược lốt giới thực vật: - Tên thường gọi : Lá lốt, Tất bát, Lotlot (Anh) - Tên khoa học: Piper lolot C DC, họ Hồ tiêu (Piperaceae) -6-  Phân bố: Lá lốt đặc thù vùng Đông Nam Á, chúng mọc hoang trồng để lấy gia vị làm thuốc.Người ta cắt thành khúc ngắn khoảng 30-25 cm giâm vào đất ẩm ướt, nơi đốt mọc rể thành Lá lốt thu hoặch quanh năm, dùng tươi hay phơi khô để bảo quản dùng từ từ lâu dài  Mô tả thực vật: Cây thảo sống lâu, cao 30-40cm hay hơn, mọc bò, mọc thẳng cịn non, lớn có thân dài khơng thể mọc thẳng mà trườn mặt đất Thân phồng lên mấu, mặt ngồi có nhiều đường rãnh dọc Lá đơn, có mùi thơm đặc sắc, nguyên, mọc so le, hình tim, mặt láng bóng, có năm gân phân từ cuống lá; cuống có bẹ Cụm hoa dạng đơn mọc nách Quả mọng chứa hạt Thân màu xanh lục sậm, đốt lóng phù to, trịn, có rảnh nhỏ lông mịn Lá đơn mọc cách, phiến gồm dạng, phía rộng hình bầu dục, – cm dài, mặt mịn láng, mặt màu xanh lục nhạt có lơng mịn gân, phiến khơng đối xứng 10-12 cm dài, 8-11 cm rộng, mép nguyên, gân hình chân vịt với gân gốc, gân cong hướng Cuống 2-5 cm, hình trụ, lõm mặt trên, gốc mở rộng, bắc rụng sớm, hình tam giác, màu xanh lục, có dạng : phiến mỏng bao chồi phiến mỏng dài 1-1,5 cm, dính bên đáy cuống rụng sớm để lại vết sẹo Cụm hoa, gié hoa mọc đối diện với lá, hình trụ, màu trắng, dài 10-12 mm, mm đường kính Cuống cụm hoa màu xanh lục, hình trụ, dài 10-12 mm, 1-2 mm đường kính, có lơng mịn màu trắng Hoa nhỏ, hoa trần, đơn tính Trái, mộng, chứa hạt, cô lập trái tiêu Piper nigrum.L Bộ phận sử dụng :Lá, rể, cành -7- Hình 1.2 : Các phận lốt 1.2.2 Công dụng: a) Dùng làm thức ăn Lá lốt loại rau thông dụng thường dùng ăn ngày như: thịt bị lốt, lốt chung quanh thịt bò nướng, thịt bị có mùi thơm đặc biệt Ngồi cịn nấu canh xào với thịt, có thái nhỏ nấu cháo …v.v Khơng Việt Nam mà nghệ thuật nấu ăn Thái Lan, lốt sử dụng nhiều hình thức, chúng có thểdùng ăn kèm với nhiều loại thức ăn khác Ở Lào, người ta thường dùng lốt salade b) Dùng làm thuốc : Lá lốt có vị nồng, cay, có tính ấm, chống hàn (như bị lạnh bụng), giảm đau, chống phong hàn mức thấp, tay chân lạnh, tê tê, nơn mửa, đầy hơi, khó tiêu (có lẽ mà dùng với thịt bị nướng vốn khó tiêu), đau đầu cảm lạnh Nước sắc tồn trị đầy bụng, nơn mửa bị hàn Nước sắc rễ chữa tê thấp bị khí hàn Cành sắc đặc ngậm chữa đau Lá tươi giã nát, phối hợp với khế, đậu ván trắng, thứ 50g thêm nước gạn uống giải độc, chữa say nắng Lá lốt dùng để nấu nước ngâm tay chân cho người bị bệnh tê thấp, hay đổ mồ hôi tay, mồ hôi chân -8- Hình 1.3 Các ăn chế biến từ lốt 1.2.3 Dược tính  Theo kết nghiên cứu gần thân lốt chứa chất ancaloit, flavonoid tinh dầu với thành phần chủ yếu beta-caryophylen; rễ có chứa tinh dầu thành phần benzylaxetat Lá lốt có tác dụng kháng khuẩn, chống viêm giảm đau  Theo nghiên cứu Trường đại học Dược Hà Nội: thành phần hoá học Lá lốt chủ yếu tinh dầu (tỷ lệ 0,57%), piperin, piperidin Kết thực nghiệm súc vật cho thấy nước ép Lá lốt, cao Lá lốt tươi cao Lá lốt khơ có tác dụng kháng sinh, chống viêm rõ rệt súc vật gây viêm thực nghiệm  Theo nghiên cứu kháng sinh thảo mộc Viện y học dân tộc: Lá lốt (giã dập) có tác dụng mạnh nhiều loại vi khuẩn gây bệnh Staphylococcus, Streptococcus, Salmonella typhi, Shigella flexneri, sonnei, Shiga, B subtilis, Es coli, C diphteriae, D pneumoniae, H pertusis  Kinh nghiệm dân gian, lốt kết hợp với vài dược thảo khác dung dịch trích rể bưởi…., dùng nước uống tốt hay sử dụng ngâm tay chân để chữa trị đau nhức trường hợp viêm khớp, đau ngực, đau bụng lạnh, chứng cho thấy chữa trị có hiệu : - trường hợp đổ mồ hôi tay - mồ hôi chân - bị mụn nhọt - đau đầu -9- - hay đau  Những thông tin mà người ta nhận được, tin ăn lốt điều trị thống phong goutte giảm đau, cách chửa trị tìm thấy kinh nghiệm dân gian địa phương kết số định bệnh nhân  Chữa đau nhức xương khớp: Bài 1: Dùng 5-10g lốt phơi khô, hay 15-30g tươi, sắc với nước, chia 2-3 lần uống ngày Bài 2: Lá lốt rễ bưởi bung, vòi voi, cỏ xước, tất dùng tươi thái mỏng, vàng, liều lượng (khoảng 15g khơ loại), sắc với 600ml nước, cịn 200ml chia lần uống ngày Bài 3: Lá lốt 20g, thiên niên kiện 12g, gai tầm xoong 16g, tất sắc với 400ml, 100ml dùng uống ngày Có thể dùng thuốc này, sắc uống liên tục 7-8 ngày có tác dụng tốt  Chữa bệnh phụ khoa (các viêm nhiễm vùng âm đạo, ngứa, khí hư): Lá lốt 50g, nghệ 40g, phèn chua 20g, đổ nước ngập lên mặt thuốc đốt ngón tay, đun sơi, bớt lửa giữ cho sôi lăn tăn 10-15 phút, chắt lấy bát, gạn lấy nước dùng rửa âm đạo Phần lại tiếp tục đun sôi dùng để xông vào âm đạo, xơng nhiều lần  Chữa đổ mồ hôi nhiều tay chân: Dùng 30g lốt tươi cho vào lít nước nấu sơi, cho thêm muối, để nguội dần dùng ngâm hai bàn tay, hai bàn chân thường xuyên trước ngủ  Chữa lỵ: Lấy nắm nhỏ lốt, sắc với 300ml nước, dùng uống  Chữa bệnh tổ đỉa bàn tay: Đồng bào Mường có kinh nghiệm lấy nắm thật to lốt, rửa sạch, giã nát, vắt lấy bát nước đặc, uống làm lần Còn bã cho vào nồi đun với bát nước, đun sôi vài lần vớt bã để riêng Khi nước âm ấm dùng rửa tổ đỉa Lau khô lấy bã đắp lên, băng lại Ngày làm 1-2 lần, liên tục 5-7 ngày khỏi - 10 - 1.2.4 Một số thành phần hóa học lốt: Theo số tài liệu, hợp chất có lốt ancaloit, flavonoit tinh dầu Trong thân chứa alcaloit tinh dầu có thành phần chủ yếu beta-caryophyllen, rễ chứa tinh dầu có thành phần benzylaxetat a) Ancaloit: Khái niệm: Ancaloit hợp chất hữu có chứa dị vịng nitơ, có tính bazơ, thường gặp nhiều lồi thực vật có nhiều họ Cà, họ Thuốc phiện, vv Trong thực vật, ancaloit thường tồn dạng muối axit (vd axit nitric, malic, sucxinic) đơi cịn tìm thấy vài lồi động vật Đặc biệt, ancaloit có hoạt tính sinh lý cao thể người động vật, hệ thần kinh Với lượng nhỏ có ancaloit chất độc gây chết người lại có thần dược trị bệnh đặc hiệu Bảng 1.1 Một số ancaloit có N dị vịng Tên cấu trúc Cơng thức Pyrol N Hợp chất ví dụ H Hygrin Pyrolidin N N CH2-CO-CH3 H CH3 Rixinin OCH3 CN Piridin N N O CH3 - 30 - 2.2.3 Khảo sát thành phần khối lượng lốt 2.2.3.1.Độ ẩm Để xác định độ ẩm ta sử dụng phương pháp trọng lượng Nguyên tắc: Sấy nguyên liệu ẩm 1000C đến khối lượng không đổi Cách tiến hành: Chuẩn bị sẵn chén sứ sạch, đánh dấu sấy tủ sấy đến t0=1000C Sau sấy xong, đặt chén sứ vào bình hút ẩm, để nguội nhiệt độ phòng, cân chén sứ ta dược khối lượng m1 Cho vào chén sứ m2 g lốt Sau đó, tiến hành sấy tủ sấy đến t0=1000C, sau 5h lại lấy cho vào bình hút ẩm để làm nguội đem cân, khối lượng m3 mẫu chén không đổi Độ ẩm mẫu tính theo cơng thức: W = (m1 + m2 – m3) / m2 *100 Trong đó: m1: khối lượng chén sứ m2: khối lượng m3: khối lượng cốc sau sấy W: độ ẩm 2.2.3.2.Hàm lượng tro, vô Xác định hàm lượng tro: Ngun tắc: Tro hóa hồn tồn mẫu nhiệt độ 5000C Tiến hành: Chuẩn bị chén sứ sạch, đánh số sấy khô 1000C , sau đặt chén sứ vào bình hút ẩm, làm nguội đến nhiệt độ phịng cân khối lượng chán sứ m1 (g) Cho vào chén sứ m (g) nguyên liệu xử lý cân khối lượng chén nguyên liệu Tiến hành tro hóa 5000C tro có màu trắng lấy mẫu làm nguội bình hút ẩm cân lại mẫu để xác định lượng tro Hàm lượng tro tính theo cơng thức: H = (m3-m4)/ m2 * 100% - 31 - Trong đó: m2: khối lượng m3: khối lượng cốc nguyên liệu m4 : khối lượng chén sứ mẫu sau tro hóa Xác định hàm lượng vơ Dùng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS để xác định hàm kượng kim loại: Pb, Cu, Zn, Fe, Cr… lốt Tiến hành: tro thu sau nung đem hòa tan dung dịch HNO3 loãng, định mức nước cất xác định hàm lượng kim loại 2.2.4 Khảo sát điều kiện chiết tối ưu: 2.2.4.1 Khảo sát dung môi chiết: Để lựa chọn dung mơi chiết thích hợp, tiến hành ngâm khơ xay mịn dung mơi có độ phân cực khác nhau: n-hexan, clorofom, ethyacetat, etanol nước cất - Chuẩn bị mẫu để ngâm: cân xác mẫu khối lượng 2g bột khơ cho vào bình tam giác có nút mài rửa sấy khơ - Cho vào bình tam giác xác 100 ml dung mơi khác - Ngâm ngày, quan sát dịch bình tam giác có màu với mức độ đậm nhạt khác - Chuẩn bị cốc sứ đánh kí hiệu, rửa sạch, sấy khơ để vào bình hút ẩm cho nguội đem cân - Lọc bỏ bã, lấy 50 ml cho vào cốc thủy tinh chuẩn bị đuổi dung môi tủ sấy nhiệt độ 400 C đến dung môi bay hồn tồn Đem cốc sứ làm nguội bình hút ẩm đem cân xác định tổng khối lượng chất hịa tan dung mơi Dung mơi hào tan nhiều chất tan chọn 2.2.4.2 Khảo sát chọn mẫu lốt: Bột lốt ngâm dung mơi cồn tuyệt đối có màu xanh đậm, dùng phương pháp quang phổ hấp thụ UV-VIS đo mật độ quang xác định - 32 - bước sóng cực đại dịch chiết từ mẫu cần khảo sát Bằng cách ta chọn mẫu lốt điều kiện chiến tối ưu Các dịch chiết mẫu khác ta xác định hàm lươnhj chất hòa tan lớn mẫu phương pháp đo quang Hàm lượng chất tỉ lệ với mật độ đo quang D theo định luật Lambe-Bia D=lg(I/I0)= εlC Như bước sóng có cường độ hấp thụ lớn tướng ứng với mẫu có hàm lượng chất cao Cân xác 5g bột lốt non 5g bột lốt già Tiến hành chiết soxlet với dung môi cồn tuyệt đối 6h Thu dịch chiết đem đo UV-VIS, dựa mật độ quang để chọn mẫu chiết thích hợp 2.2.4.3 Khảo sát thời gian chiết: Cân xác 5g bột lốt cho lần chiết Tiến hành chiết soxlet với dung môi cồn tuyệt đối khoảng thời gian 2h, 4h, 6h,8h Thu dịch chiết đem đo UV-VIS, dựa mật độ quang để chọn thời gian chiết tối ưu 2.2.4.4 Khảo sát tỉ lệ rắn-lỏng: Cân xác 5g bột lốt cho lần chiết Tiến hành chiết soxlet với dung môi cồn tuyệt đối 6h với thay đổi thể tích dung mơi 100ml, 150ml, 200ml, 250ml Thu dịch chiết đem đo UV-VIS, thể tích dung mơi chiết tối ưu thể tích nhỏ đảm bảo cho lượng chất chiết lớn 2.2.5.Phương pháp chiết tách xác định thành phần hóa học lốt Chiết phương pháp soxlet với 5g bột nguyên liệu 150ml dung môi cồn tuyệt đối 6h - 33 - Hình 2.3 Bộ chiết soxlet Xác định thành phần hóa học định danh cấu tử dịch chiết lốt theophương pháp phân tích sắc kí khí-khối phổ (GC-MS) máy GC-MS Trung tâm Phân tích phân loại hàng hóa xuất nhập Miền Trung, số 10 Ngô Quyền, Thành Phố Đà Nẵng - 34 - CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát thành phần khối lượng 3.1.1 Độ ẩm Kết xác định độ ẩm trung bình trình bày bảng 3.1 Bảng 3.1 Kết khảo sát độ ẩm STT m1 m2 m3 W (%) 30,712 5,078 31,769 79,36 32,793 5,006 33,851 79,94 27,631 5,076 28,709 78,76 31,672 5,000 32,741 78.62 31,553 5,061 32,624 78,83 Độ ẩm trung bình 79,102 Nhận xét: Từ bảng 3.1 cho thấy lốt có độ ẩm 79,1% Giá trị khác phụ thuộc vào thời gian thu hái, độ tuổi lá, điều kiện trồng chăm sóc cây…Ta lấy mẫu cách ngẫu nhiên độ ẩm mẫu mang tính tương đối 3.1.2 Hàm lượng tro kim loại nặng 3.1.2.1.Hàm lượng tro Hàm lượng tro lốt trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Hàm lượng tro lốt STT m2 m3 m4 H (%) 5,078 31,769 31,045 14,23 5,006 33,851 33,097 15,06 5,076 28,709 27,999 13,97 5,000 32,741 31,849 14,85 5,061 32,624 31.884 14,62 Hàm lượng tro trung bình 14,546 - 35 - Nhận xét: hàm lượng tro trung bình lốt 14,546 3.1.2.2 Hàm lượng kim loại nặng Kết xác định hàm lượng số kim loại lốt phổ AAS trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Hàm lượng số kim loại lốt Kim loại Hàm lượng Kết Hàm lượng (mg/l) (mg/kg) cho phép Pb 0,0094 0,0627 0,5-1 Cu 0,1212 0,808 Zn 0,2319 0,1546 10 Nhận xét: Từ kết thu ta thấy hàm lượng Zn cao (0.1546 mg/kg) Hàm lượng kim loại không ảnh hưởng đến sức khỏe người thấp hàm lượng cho phép kim loại rau củ theo cẩm nang trồng rau ăn an tồn sở nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh năm 2009 3.2 Kết khảo sát điều kiện chiết tối ưu: 3.2.1.Kết khảo sát dung môi chiết Bảng 3.4 : Kết khảo sát dung môi Tên dung môi V (ml) m0 (g) m1(g) m2 (g) n-hexan 50 ml 120,493 120,522 0,029 chlorofom 50 ml 112,178 113,707 1.592 Ethyacetat 50 ml 109,080 109,116 0,036 Etanol 50 ml 112,882 115,203 2,321 Nước 50 ml 116,555 116,571 0,016 - 36 - Trong đó: m0 : khối lượng cốc thủy tinh m1 : khối lượng cốc khối lượng chất hòa tan m2 = ( m1- m2 ): tổng khối lượng chất hòa tan Nhận xét: Trong dung mơi etanol dung mơi chiết đượclượng chất hòa tan nhiều nên etanol chọn làm dung môi chiết 3.2.2.Kết khảo sát chọn mẫu lốt: Dịch chiết mẫu lốt non lốt già sau đo UV-VIS ta kết sau: Bảng 3.5: Kết mật độ quang chọn mẫu lốt Bước sóng cực đại (λmax) Mật độ quang (A) Lá non 207,00 3,2413 Lá già 208,00 3,4350 Hình 3.1 Biểu đồ mật độ quang non già - 37 - Nhận xét: Từ kết cho thấy mật độ quang lớn tương ứng với lượng chất chiết lớn Như theo thời gian hàm lượng chất sinh tích lũy mơ ngày nhiều mẫu già có mật độ quang (A) lớn chọn làm mẫu dùng để khảo sát cho giai đoạn sau 3.2.3 Kết khảo sát thời gian chiết: Bảng 3.6.: Mật độ quang dịch chiết với thời gian chiết khác Mẫu Thời gian chiết Mật độ quang (λmax= 208) 2h 2,5430 4h 3,4393 6h 3,7394 8h 3,1217 Hình 3.2.: Biểu đồ hấp thụ phân tử dịch chiết theo thời gian - 38 - Nhận xét: Từ kết ta chọn thời gian chiết tói ưu 6h Lúc lượng chất hịa tan dung mơi lớn tăng thời gian khơng tăng hàm lượng chất tan 3.2.4 Kết khảo sát tỉ lệ rắn –lỏng Dịch chiết 5g lốt với tỉ lệ dung môi 100ml, 150ml, 200ml, 250ml sau đo UV-VIS ta kết sau Bảng 3.7: Mật độ quang dịch chiết với tỉ lệ R/L khác Mẫu Tỉ lệ R/L Mật độ quang (λmax= 208) 5/100 3,8544 5/150 3,0427 5/200 2,7431 5/250 2,3962 Hình 3.3: Biểu đồ hấp thụ phân tử dịch chiết theo tỉ lệ R/L Nhận xét : từ kết ta chọn tỉ lệ chiết tối ưu 5g lốt 100ml dung môi etanol Như tỉ lệ R/L 5/100 rút gọn ta tỉ lệ tối ưu 1/20 - 39 - 3.3 Kết xác định thành phần hóa học dịch chiết Bằng phương pháp phân tích sắc ký khí kết hợp khối phổ GC-MS, ta có phổ đồ sau: Hình 3.4 Phổ đo GC-MS Từ kết phân tích phổ GC-MS, số cấu tử có dịch chiết lốt trình bày bảng Bảng 3.8 : Một số cấu tử dịch chiết lốt STT Thời gian lưu (phút) CTPT 6.859 C15H24 CTCT- Tên gọi Tỉ lệ (%) 1.96 Caryophyllene 7.550 C15H24 1.83 - 40 - 1H- Cyclopenta 1,3 cyclopropa 1.2 benzen, octahydro-7-methyl-3methylene-4-(1-methylethyl)-, 10.021 C6H10 12.97 Cyclopentene,3-methyl- 11.265 C10H18 4.16 Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6trimethyl-,( 11.704 C10H18 1.32 Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6trimethyl-, 12.680 C11H14O 19.44 1-cyclopropylmethyl-4-methyloxy benzen - 41 - 13.915 C20H40O 3.48 Phytol 14.704 C13H13NO4 6.85 Pyrrolidine-2,5-dione,1-isopropyl3,2’-spiro(benz[d]1,3-dioxolane)- 16.517 C15H15BrO3 12.81 5-bromo-4-hydroxy-1-(4-methoxyphenyl)-pent-1-en-3-one 10 28.052 C29H50O 2.47 Gamma-sitosterol Nhận xét: Bằng phương pháp sắc kí ghép khối phổ (GC-MS) xác định thành phần hóa học dịch chiết lốt gồm 10 cấu tử - Caryophyllene - 42 - Cyclopenta 1,3 cyclopropa 1.2 benzen, octahydro-7-methyl-3-methylene-4-(1methylethyl)-, - Cyclopentene,3-methyl- - Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6-trimethyl-,( - Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6-trimethyl-, - 1-cyclopropylmethyl-4-methyloxy benzen - Phytol - Pyrrolidine-2,5-dione,1-isopropyl-3,2’-spiro(benz[d]1,3-dioxolane)- - Gamma-sitosterol - 5-bromo-4-hydroxy-1-(4-methoxy-phenyl)-pent-1-en-3-one Trong có chất có hoạt tính sinh học như:  Caryophyllene: Đó chất thường có thành phần tinh dầu đinh hương Ngồi cịn chất góp phần tạo nên vị cay tiêu, lốt Theo số nghiên cứu tiến hành Viện Công nghệ Liên bang Thụy Sĩ ( ETH Zurich ) caryophyllene liên kết với thụ thể cannabinoid cho tác dụng kháng viêm chuột Ngồi cịn dùng sản xuất phụ gia thực phẩm  Gamma-sitosterol: Là saponin có hoạt tính sinh học Là hợp chất sterol polysterol có mầm lúa mì, dầu đậu tương Theo báo cáo nghiên cứu Hiệp hội Lâm sàng tim mạch (America Heart) Chicago Gamma- sitosterol có tác dụng giảm khả hấp thụ cholestreol thể giảm nguy mắc bệnh tim mạch sử dụng để hỗ trợ điều trị cho bệnh nhân mắc bệnh tim mạch - 43 - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A Kết luận: Qua việc nghiên cứu chiết xác định số hợp chất hóa học có dịch chiết lốt ta thu kết sau:  Điều kiện chiết tối ưu:  Nhiệt độ : 850C  Thời gian chiết : 6h  Tỉ lệ rắn lỏng: 1/20 Dịch chiết sau đuổi dung môi đem định danh phương pháp sắc ký khí khối phổ xác định 10 cấu tử - Caryophyllene - 1H-Cyclopenta 1,3 cyclopropa 1.2 benzen, octahydro-7-methyl-3-methylene-4(1-methylethyl)-, - Cyclopentene,3-methyl- Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6-trimethyl- Bicyclo 3,1,1 heptane,2,2,6-trimethyl-, - 1-cyclopropylmethyl-4-methyloxy benzen - Phytol - Pyrrolidine-2,5-dione,1-isopropyl-3,2’-spiro(benz[d]1,3-dioxolane)- Gamma-sitosterol - 5-bromo-4-hydroxy-1-(4-methoxy-phenyl)-pent-1-en-3-one B Kiến nghị:  Chiết với nhiều loại dung mơi khác để tìm hiểu thêm thành phần hóa học khác có lốt,  Phân lập chất có hàm lượng cao lốt  Thử hoạt tính sinh học hợp chất có lốt - 44 - TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Đào Hùng Cường, (2002), Cơ sở hóa học hữu , Nhà xuất Đà Nẵng [2] Đỗ Tất Lợi,(2001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Hà Nội [3] Phạm Thành Kỳ,(2002), Bài giảng dược liệu, tập 2, Nhà xuất Y học Hà Nội [4].Hồ Viết Quý,(1998), Các phương pháp phân tích đại ứng dụng hóa học, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội [5] Trương Thị Thuận,(2010), “ Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học tinh dầu dịch chiết trầu khơng”, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng [6] Lương Thị Thùy Trang (2006), “Nghiên cứu chiết tách xác định số thành phần hóa học dịch chiết hồn ngọc”, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng [7] Bùi Xn Vững ,(2011), Bài giảng phân tích cơng cụ, Khoa hóa, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng Lương Thị Thùy Trang (2006), “Nghiên cứu chiết tách xác định số thành phần hóa học dịch chiết hồn ngọc”, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng [8] http://dantri.com.vn/c7/s7-434789/la-lot-tri-nhieu-chung-benh.htm [9] http://suckhoedoisong.vn/2008106162535653p44c60/la-lot-chua-dau-nhuc-xuongkhop.htm [10] http://www.uphcm.edu.vn/caythuoc/index.php?q=node/375 ... học dịch chiết lốt huyện Hòa Vang, TP Đà Nẵng? ?? -3- Mục tiêu nghiên cứu: - Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học lốt - Đóng góp vào nguồn thơng tin tư liệu khoa học lốt, tạo sở khoa... dầu dịch chiết trầu khơng”, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng [6] Lương Thị Thùy Trang (2006), ? ?Nghiên cứu chiết tách xác định số thành phần hóa học dịch chiết. .. Thùy Trang (2006), ? ?Nghiên cứu chiết tách xác định số thành phần hóa học dịch chiết hồn ngọc”, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm, Đại học Sư Phạm-Đại học Đà Nẵng [8] http://dantri.com.vn/c7/s7-434789/la-lot-tri-nhieu-chung-benh.htm