Nghiên cứu chiết tách và xác định một số hợp chất hóa học trong dịch chiết lá sakê bằng ethanol

1 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA -   - NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT LÁ SAKÊ BẰNG ETHANOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC SVTH: Phạm Thị Thanh Huệ Lớp: 08CHD GVHD: Th.S Phan Thảo Thơ MỞ ĐẦU 1.Đặt vấn đề Việt Nam nước nhiệt đới có khí hậu nóng ẩm, thuận lợi cho phát triển thực vật Đây coi kho tàng vơ q giá nguồn hợp chất thiên nhiên Trên giới, người ta nghiên cứu chiết tách hợp chất thiên nhiên từ năm 1950 Ngày nay, công nghiệp chiết tách hợp chất từ thực vật không ngừng phát triển ứng dụng nhiều vào phục vụ đời sống xã hội Chúng làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp, sản xuất dược phẩm, mỹ phẩm, thực phẩm, thuốc bảo vệ thực vật… Đặc biệt 30.000 hợp chất có hoạt tính có giá trị với sống chúng ta, biết đến nhiều coi hợp chất thứ cấp alkaloid, terpenoid, phenolic Các hợp chất tồn số tế bào thực vật định gồm tế bào biểu mơ, rễ, hoa, Mặc dù, hóa học tổng hợp hữu đạt nhiều thành tựu quan trọng nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học (thường gọi chất thứ cấp) cịn khó tổng hợp tổng hợp chi phí đắt Mà ví dụ số hỗn hợp phức tạp tinh dầu hoa hồng tổng hợp hóa học Cơng nghệ hóa dược giới phát triển mạnh mẽ, tạo biệt dược phòng chống, điều trị bệnh tật cách nhanh chóng, thuận tiện Nhưng khơng mà thảo dược vị Y học, Dược học Nó tiếp tục dùng làm nguồn nguyên liệu trực tiếp, gián tiếp cung cấp chất đầu cho cơng nghệ bán tổng hợp nhằm tìm kiếm loại dược phẩm Cây sakê dân gian sử dụng nhiều vào thuốc để chữa bệnh (gút, viêm gan vàng da, huyết áp cao, tiểu đường,…) nấu nước uống thay trà phổ biến Hiện ít cơng trình đề cập tới việc xác định thành phần hoạt tính sinh học loại Với mong muốn đóng góp số thông tin khoa học vào kho tàng hợp chất thiên nhiên, em chọn đề tài “Nghiên cứu chiết tách xác định số hợp chất hóa học dịch chiết sakê ethanol” Đối tượng phạm vi nghiên cứu Lá sakê hái trường Đại học Bách Khoa – Đại học Đà Nẵng, Quận Liên Chiểu -TP.Đà Nẵng 3 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số tiêu hóa lý sakê - Khảo sát số điều kiện chiết thích hợp - Xác định thành phần hóa học, công thức cấu tạo số cấu tử dịch chiết sakê Phương pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lí thuyết - Thu thập tổng hợp tài liệu, tư liệu, sách báo nước có liên quan đến đề tài - Trao đổi kinh nghiệm với thầy cô bạn bè 4.2 Phương pháp thực nghiệm - Phương pháp thu hái, lấy mẫu xử lí mẫu - Phương pháp trọng lượng xác định độ ẩm, hàm lượng hữu - Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) để xác định hàm lượng kim loại - Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (UV-VIS) để khảo sát điều kiện chiết - Phương pháp sắc ký khí – khối phổ (GC-MS) để xác định thành phần, công thức cấu tạo số hợp chất dịch chiết sakê Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 5.1 Ý nghĩa khoa học - Cung cấp thông tin khoa học điều kiện chiết tách, xác định thành phần hóa học dịch chiết sakê - Là sở khoa học cho nghiên cứu sau 5.2 Ý nghĩa thực tiễn - Nhằm giúp ứng dụng rộng rãi sakê cách khoa học vấn đề chăm sóc sức khỏe đời sống ngày - Giải thích cách khoa học thuốc dân gian sakê - Tổng hợp kiến thức hợp chất thiên nhiên phục vụ cho công tác sau CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1.Cây sakê 1.1.1 Giới thiệu sakê 1.1.1.1 Sơ lược họ Dâu tằm (Moraceae) Họ Dâu tằm (danh pháp khoa học: Moraceae) xếp vào Gai(Urticales) Bộ hệ thống phát sinh loài khác coi phân Hoa hồng (Rosales) Họ họ lớn, chứa từ 40-60 chi khoảng 1.000-1.500 loài thực vật phổ biến rộng rãi khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới, ít phổ biến vùng ôn đới Trong họ có số lồi biết đến nhiều đa, đề, dâu tằm, dâu đỏ hay mít Họ chứa loài thân gỗ hay bụi, thường xanh rụng theo mùa Cây thường có nhựa mủ màu trắng sữa Lá mọc cách, đơn, kèm bọc lấy chồi, sớm rụng để lại vết sẹo Trong họ này, nhiều loài có rễ mọc từ cành, cắm xuống đất (ví dụ: loài chi Ficus) Một số loài Ficus bám lên thân to khác, đâm nhiều rễ phụ bám thân chủ, gây nên tượng thắt nghẹn làm cho chủ bị chết Hoa đơn tính hay khác cây, hợp thành cụm hoa xim, đuôi sóc, hay hình đầu nằm trục chung lồi (như mít, dâu tằm) hay lõm bọc lấy hoa bên (như sung, ngái) Bao hoa có - mảnh, nhị số mảnh bao hoa mọc đối diện với bao hoa Bộ nhụy gồm noãn mà thường sớm tiêu giảm, bầu buồng chứa nỗn đảo hay cong, bầu nỗn thượng, đơi hạ Quả phức nhiều đơn dính lại với Hạt phần lớn có nội nhũ, không có Đặc điểm thừa hưởng từ tổ tiên chung gần phạm vi họ Dâu tằm diện ống tiết sữa nhựa màu trắng sữa tất nhu mô, đặc trưng hữu ích thực địa nói chung nỗn đơi với bị tiêu giảm, hoa phức không dễ thấy phức hợp Họ Moraceae bao gồm tông lớn là: Artocarpea, Moreae, Dorstenieae, Ficeae Castilleae Ngoại trừ tông Moreae với đa dạng lớn hình thái phân bố rộng, tơng cịn lại đơn ngành Dựa phân tích phân tử phát sinh lồi tông này, Moraceae cho rẽ khoảng 73-110 triệu năm trước Các kết từ phân tích phát sinh lồi họ Moraceae gợi ý ngược với nguyên lý thông thường dạng đơn tính khác gốc tiến hóa từ dạng đơn tính gốc họ dạng đơn tính khác gốc dạng nguyên thủy họ dạng đơn tính gốc tiến hóa từ đó tới lần 1.1.1.2 Một số làm thuốc thuộc họ Dâu tằm  Cây Dướng: có tên “chử thụ”, “chử đào thụ”, “giác thụ tử”, “dã xương mai tử”, “xa”; tên khoa học Broussonetia papyrifera Vent Nó loài thân gỗ nhỏ, sớm rụng, có thể cao tới 15 m Các có hình dạng khơng cố định (thậm chí cành), nói chung có dạng hình tim hay hình trứng từ khơng thùy tới xẻ thùy sâu, với xẻ thùy thường có non mau lớn Các hoa đực (cỏ nhị) sinh thành cụm hoa thn dài, cịn hoa (nhụy hoa) mọc thành cụm hoa hình cầu Về mùa hè, hoa phát triển thành dạng tụ nhiều nước, vị màu đỏ hay cam, đường kính 3–4 cm, nguồn thức ăn quan trọng cho động vật hoang dã Quả ăn ngọt, mỏng mảnh để có thể thương mại hóa Trong dân gian có nhiều thuốc chữa thổ huyết, chảy máu cam, lỵ máu, phụ nữ rong huyết, trị hoa mắt, đau thần kinh tọa, có tác dụng bổ âm chữa bệnh đêm ngủ hay vã mồ hôi trộm, nam giới di tinh mộng tinh Hình 1.1 Cây dướng  Cây Đa: có tên đa đa, da; tên khoa học Ficus bengalensis, có nhiều loại đa đa búp đỏ, đa nhiều rễ, đa tròn Đa có phương thức sinh trưởng khơng bình thường Chúng lồi lớn mà thơng thường bắt đầu sống loại biểu sinh trồng từ hạt loại khác (hoặc công trình kiến trúc nhà cửa, cầu cống) loài chim ăn phân tán hạt Cây trồng từ hạt nhanh chóng phát triển rễ khí từ cành cây, rễ khí phát triển thành thân thực thụ chúng chạm tới mặt đất Cây chủ cuối bị bóp nghẹt hay bị phân chia phát triển nhanh đa Thường trồng nhiều lấy bóng mát, dân gian dùng tua rễ mọc từ cành rủ xuống làm thuốc lợi tiểu dùng trường hợp xơ gan kèm cổ trướng Hình 1.2 Cây đa  Cây Đề: gọi Bồ Đề; tên khoa học Ficus religiosa Các phận có chứa hoạt chất khác : Lá chứa sterol Campestrol, Stigmasterol, 28-isofucosterol, Alpha-amyrin, Beta-amyrin lupeol, Tannic acid Acid amin serine, Aspartic acid, Glycine, Tyrosine, Methionine Hydrocarbone Alcohol aliphatic n-Nonacosane, nhentriacon tanen-hexacosanol, n-octacosanol…Các khoáng chất Calcium, Sắt, Đồng, Mangan, Kẽm Vỏ thân chứa sterol Lanosterol, beta-sitosterol glucosid, Stigmasterol, Lupen-3-one; coumarin Bergapten bergaptol; Vitamin K (trong vỏ đọt); tannins (4%) Quả có acid amin Asparagine, Tyrosine…Hạt có Alanine, Threonine, Tyrosine Valine Về phương diện dinh dưỡng: Lá Bồ Đề chứa khoảng 9% chất đạm, 2.7 % chất béo, 68.3 % chất carbohydrat tổng cộng, 15.9 % chất xơ Trong 100 gram có 2.97 mg Calcium, 210 mg Phosphorus Đọt chứa 11.7 % chất đạm, 2.9% chất béo, 70.1 % carbohydrat tổng cộng, 26.1 % chất xơ Các nghiên cứu khoa học Bồ Đề: Hoạt tính giúp hạ đường máu: Hợp chất beta-sitosteryl-D-glucoside (phytosterolin) ly trích từ bột vỏ thân khơ, dùng chích qua tĩnh mạch, gây sụt giảm đường máu Hợp chất này, cho uống với liều 25 mg/ kg trọng lượng thể, tạo giãm dần lượng đường máu, giảm đạt mức cao sau giờ.Tolbutamide, dùng liều tương đương gây giảm hạ đường sau Hoạt tính làm hạ mỡ máu: Chất xơ chế tạo từ Ficus religiosa, trộn thực phẩm (10%) cho chuột, tạo tác động đối kháng với tăng chất béo máu tốt cellulose Các thông số lipid, cholesterol, triglycerides phospholipid gan thay đổi chiều hướng tốt Hoạt tính chống ung loét bao tử: Nước chiết từ vỏ Bồ Đề, dùng liều 500 mg/kg, dùng để thử nghiệm điều trị số trường hợp ung loét bao tử tiêu biểu nơi chuột Nước chiết cho chuột uống ngày Kết ghi nhận nước chiết bảo vệ chuột chống lại ung loét bao tử gây thắt pylorus ung loét bao tử gây cystamin Tuy nhiên hoạt tính khơng cơng hiệu với ung lt cấp tính gây aspirin Hoạt tính chống ung loét cho tác động ức chế tiết acid-pepsin làm tăng tiết yếu tố bảo vệ màng nhày đưa đến cải thiện tiết mucin bao tử Vỏ sử dụng y học dân gian để chữa bệnh chàm, viêm dày, tả lỵ có nơi dùng cho bệnh nhân tiểu đường Hoạt tính trị suyễn tác động thần kinh đối giao cảm (para sympatholytic): Dịch chiết từ vỏ thân ethanol 95% có hoạt tính gây thư giãn ruột chuột, bọ, thỏ chó; thư giãn tử cung chuột Dịch chiết có hoạt tính đối kháng hiệu ứng acetylcholine, histamine, barium chloride serotonine; phong bế hiệu ứng tim mạch Acetylcholine bảo vệ chuột bọ chống lại suyễn gây acetylcholine histamine Ngồi dịch chiết cịn tạo thư giãn bắp thịt cuống phổi đối kháng hoạt tính gây co thắt thực quản gây acetylcholine nơi chó Bột vỏ thân Ficus religiosa thử dùng để trị suyễn nơi người Các hoạt tính kháng sinh, kháng siêu vi trùng: Nước trích từ có số hoạt tính kháng sinh đáng ý vi khuẩn Staphylococcus, Escherichia coli Các chất Bergapten bergaptol, trích từ vỏ thân có hoạt tính kháng sinh Dịch chiết từ vỏ đọt, alcohol 50%, liều dùng 0.05 mg/ml, có hoạt tính kháng siêu vi trùng gây bệnh Ranikhet: gây sụt giảm đến 75% sinh sản siêu vi trùng môi trường cấy dùng phôi trứng gà Tác động ký sinh trùng: Dịch chiết từ vỏ thân alcohol 50% diệt Entamoeba histolytica (gây kiết lỵ) Tác động giun sán : Dịch chiết diệt giun Ascarigia galli (thử in vitro), pH môi trường điều chỉnh 7.2 thời gian ủ 48 Các phương thức sử dụng dân gian: Tại Ấn Độ Pakistan, phận dùng phổ biến để trị số bệnh thông thường Vỏ thân dùng để trị tiêu chảy kiết lỵ, dùng trị táo bón Lá tán mịn, trộn với mỡ để làm thuốc đắp trị mụn nhọt, sưng hạch quai bị Quả, tán thành bột trị suyễn Nhựa dùng trị mụn cóc Vỏ thân có hoạt tính làm mát, cầm máu dùng trị tiểu đường, tiêu chảy, kinh nguyệt rối loạn, thần kinh bất ổn, bệnh đường tiểu đường sinh dục phụ nữ Nước sắc vỏ thân, thêm với mật ong dùng để trị lậu mủ Vỏ thân đốt thành than, hòa nước dùng trị nấc cục, trị buồn nơn ói mửa Vỏ thân nấu sơi với sữa xem phương thuốc kích dục Vỏ rễ, phơi khô, tán mịn, trộn với mỡ, dùng làm thuốc thoa trị bệnh da eczema, cùi Tại Trung Hoa: Hoa đun sôi, lấy nước làm thuốc giải nhiệt cho người bị sốt cao 10 Hình 1.3 Cây bồ đề  Cây Dâu tằm: thuộc chi Morus, gồm nhiều loại dâu trắng, dâu đỏ, dâu đen Ở Việt Nam có dâu trắng Lá thức ăn ưa thích tằm dâu nên gọi dâu tằm Hầu hết phận dâu tằm có vị thuốc quý - Lá dâu gọi Tang diệp (Folium Mori) - Vỏ rễ dâu gọi Tang bạch bì (Cortex, Mori radicis) - Quả dâu gọi Tang thầm (Fructus Mori) - Cây mọc ký sinh dâu gọi Tang ký sinh (Ramulus loranthi) - Tổ bọ ngựa dâu gọi Tang phiêu tiêu (Ootheca mantidis) - Sâu dâu: Con sâu nằm thân dâu, vốn ấu trùng loại xén tóc Cây dâu có thể cao 10-15m không thu hái thường xuyên Lá mọc so le, hình bầu dục, nguyên chia thùy, có kèm, đầu nhọn tù Phía cuống tròn bằng, mép có cưa to Từ cuống tỏa gân rõ rệt Hoa đực mọc thành bông, có đài, nhị (có 3) Hoa mọc thành hay thành khối hình cầu, có đài Quả mọc đài, màu đỏ, sau đen sẫm, ăn được, dùng làm thuốc ngâm rượu để uống, mùi thơm, vị chua Tang bạch bì, tang diệp dùng làm thuốc lợi tiểu bệnh thủy thũng, chữa ho lâu ngày, băng huyết, hen phế quản, ho có đờm, sốt, cao huyết áp, giúp sáng mắt Liều dùng hàng ngày từ - 18h dạng sắc hay thuốc bột Tang thầm: Bổ thận, chữa ngủ, giúp ăn ngon Tang phiêu tiêu: Chữa bệnh đường tiết niệu, di tinh, trẻ đái dầm 42 Dung môi ethanol cho phép chiết nhiều hợp chất có độ phân cực khác nên nồng độ cao khả thẩm thấu khuếch tán hợp chất cao Tuy nhiên, nồng độ cồn cao gây biến tính làm thành tế bào nước cục dẫn đến tượng tế bào bị khơ co lại ngăn chặn q trình chiết tách chất 3.2.3 Khảo sát tỉ lệ rắn/ lỏng Điều kiện chiết: - Nhiệt độ phòng - Thời gian: 48h - Phương pháp: chiết soxhlet - Nguyên liệu: sakê vàng - Dung môi: ethanol 700 - Tỉ lệ: 10g nguyên liệu với 100ml, 200ml, 300ml, 400ml dung mơi 1:10 1:20 1:30 1:40 Hình 3.2.3a Dịch chiết theo tỉ lệ rắn/lỏng 43 Kết đo mật độ quang trình bày bảng sau: Bảng 3.2.3 Khảo sát tỉ lệ rắn/lỏng Mẫu Tỉ lệ R/L Mật độ quang (λmax= 279,5) Cảm quang 1:10 3,3737 Vàng đậm 1:20 3,6123 Vàng đậm 1:30 2,6469 Vàng nhạt 1:40 1,2786 Vàng nhạt Mật độ quang 3.5 2.5 1.5 0.5 1:10 1:20 1:30 1:40 Hình 3.2.3b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang theo tỉ lệ rắn/lỏng Theo đánh giá cảm quang bảng 3.2.3, dịch chiết có màu vàng đậm mẫu (tỉ lệ nguyên liệu:dung môi 1:20) so với mẫu dịch chiết khác thời điểm Kết bảng 3.2.3 cho thấy giá trị mật độ quang mẫu lớn Tiến hành khảo sát tỉ lệ rắn/lỏng nhằm chọn tỉ lệ nhỏ để trình chiết tách thu hàm lượng chất lớn nhất, tăng hiệu suất cho q trình Nếu dùng lượng dung mơi lớn gây khó khăn cho giai đoạn sau không tiết kiệm mặt kinh tế 44 3.2.4 Khảo sát thời gian chiết Điều kiện chiết: - Thời gian: 2h, 4h, 6h, 8h - Phương pháp: chiết soxhlet - Nguyên liệu: sakê vàng - Dung môi: ethanol 700C - Tỉ lệ nguyên liệu: dung mơi 1:20 (10g/200ml) 2h 4h 6h 8h Hình 3.2.4a Dịch chiết theo thời gian Kết đo mật độ quang trình bày bảng sau: Bảng 3.2.4 Khảo sát thời gian chiết Thời gian Mật độ quang (λmax=279,5) Cảm quang 2h 0,8834 Vàng nhạt 4h 0,9148 Vàng đậm 6h 0,8643 Vàng nhạt 8h 0,7618 Vàng nhạt 45 Mật độ quang 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 2h 4h 6h 8h Hình 3.2.4b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang theo thời gian chiết Theo đánh giá cảm quang bảng 3.2.4, ta dễ dàng nhận thấy dịch chiết thời gian chiết 4h có màu vàng đậm so với dịch chiết lại thời điểm khảo sát Tăng thời gian chiết tách giúp ngun liệu dung mơi có thời gian tiếp xúc lâu hơn, chất hòa tan nhiều Theo kết đo mật độ quang thể bảng 3.2.4 ta thấy giá trị mật độ quang 4h lớn Do đó, ta chọn thời gian chiết 4h thích hợp Khi tăng thời gian chất chiết tách nhiều thời gian kéo dài làm tiêu tốn cơng sức chi phí 3.2.5 Định tính khảo sát polyphenol Cho giọt dung dịch FeCl3 0,5M vào dịch chiết thấy dịch chiết chuyển màu từ vàng sang xanh đen Trước Sau Hình 3.2.5a Dịch chiết trước sau thêm FeCl3 46 Nhận xét: Có đổi màu từ vàng sang xanh lục đen q trình tạo phức nhóm –OH với Fe3+ Đây phản ứng đặc trưng nhận biết polyphenol, tùy theo nhiều hay nhóm –OH mà dung dịch có màu xanh lục, xanh thẫm hay nâu Qua phần định tính này, ta nhận thấy hợp chất polyphenol có tồn dịch chiết sakê Polyphenol hợp chất có tác dụng sinh học kháng khuẩn, chống oxy hóa có khả chống tế bào ung thư Định tính polyphenol dịch chiết sa kê giúp cho ta có hướng nghiên cứu sau Nếu có điều kiện, nghiên cứu phân tách hợp chất có giá trị nhằm phục vụ đời sống người 3.3 Đo phổ hồng ngoại IR Hình 3.3.1 Dịch chiết sakê trước sau đuổi bớt dung mơi Hình 3.3.2 Dịch chiết nhiệt độ khác 47 Hình 3.3.4 Dịch chiết mơi trường pH khác Dao động hóa trị nhóm chức dịch chiết sakê trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Kết phổ IR Mẫu dịch chiết Nhóm chức 3686,81 3673,74 O–H 3667,81 Số sóng (cm-1) 3646,17 3626,88 2921,39 C-H 1714,03 C=O (axit cacboxylic) 1634,05 C=O (amit) 48 3.4 Đo GC-MS: Thành phần hóa học dịch chiết sakê xác định phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) Phổ GC-MS dịch chiết sakê trình bày hình sau: Hình 3.4 Phổ GC-MS dịch chiết sakê 49 Từ kết phân tích phổ GC-MS, xác định hàm lượng số cấu tử dịch chiết sakê trình bày bảng sau: Bảng 3.4 Một số cấu tử STT Thời gian CTPT Tỉ lệ CTCT - Tên gọi lưu (phút) 5.539 % C9H10O2 4.17 HO O 2-methoxy -4-vinyphenol 8.154 C11H18O2 1.91 O O (4H)-Benzofuranone, 5,6,7,7tetrahydro-4, 4,7-trimethyl3 8.606 C13H18O 4.72 9.146 4.79 O Megastigmatrienone 50 9.970 C6H8O 6.17 2-Cyclohexen-1-1 Nhận xét: Bằng phương pháp GC-MS định danh xác định công thức cấu tạo số cấu tử dịch chiết sa kê sau: 2-methoxy -4vinyphenol, (4H)-Benzofuranone, 5,6,7,7-tetrahydro-4, 4,7-trimethyl-, Megastigmatrienone, 2-Cyclohexen-1-1 Trong đó:  2-methoxy -4-vinyphenol:  Là chất thơm sử dụng hương liệu  Tên IUPAC: 4-Ethenyl-2-methoxyphenol  Một số tên gọi khác : 4-Hydroxy-3-methoxystyrene 4-Vinylguaiacol p-Vinylguaiacol p-Vinicatechol-o-methyl ether  CTPT: C9H10O2  Khối lượng phân tử: 150.1745 g  Nhiệt độ sôi: 2240C  (4H)-Benzofuranone, 5,6,7,7-tetrahydro-4, 4,7-trimethyl CTPT: C11H14O2  Khối lượng phân tử: 180.2435 g  Tên gọi khác: : (2,6,6-trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene) acid acetic lacton; 4,5,7,7-Tetrahydro-4, 4,7 a-trimethyl-2 (6H) benzofuranone; 4,4,7 trimethyl-5, 6,7,7- 51 tetrahydro-4H-Benzofuran-2-one; 5,6,7,7-tetrahydro-4, 4,7-trimethyl-2; (4H)benzofuranone (2,6, 6-trimethy1-2-hydroxycyclohexylidene) acid acetic lacton; 5,6,7,7-Tetrahydro-4, 4,7-trimethyl-4H-benzo [b] furan-2-one; Dihydroactinolide; 5,6,7 7a-tetrahydro-4, 4,7-trimethylbenzofuran-2 (4H)  Megastigmatrienone  CTPT: C13H18O  Tên gọi khác: Tabanone  Khối lượng phân tử: 190.28  Nhiệt độ sôi: 2890  2-Cyclohexen-1-1  Cyclohex-2-enone  CTPT: C6H8O  Khối lượng phân tử: 96.13  Nhiệt độ sôi: 1680C 52 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1.Kết luận: Trong trình nghiên cứu, kết thu là:  Xác định thông số vật lí sau:  Độ ẩm trung bình mẫu sakê 7,439%  Hàm lượng tro trung bình mẫu sakê 5,137%  Hàm lượng kim loại có mẫu sakê Cu: 0,0292 mg/kg, Pb: 0,0522 mg/kg, Zn: 2,2915 mg/kg  Khảo sát số điều kiện chiết thích hợp:  Nguyên liệu: sakê vàng  Dung môi: ethanol 700  Tỉ lệ rắn/lỏng: 1g nguyên liệu/20ml dung môi  Thời gian chiết: 4h  Bằng phương pháp IR, GC-MS định danh xác định công thức cấu tạo số cấu tử dịch chiết sa kê sau: 2-methoxy -4-vinyphenol, (4H)-Benzofuranone, 5,6,7,7-tetrahydro-4, 4,7-trimethyl-, Megastigmatrienone, 2-Cyclohexen-1-1 4.2 Kiến nghị:  Khảo sát đánh giá hàm lượng chất dịch chiết sakê vùng thổ nhưỡng khác  Tìm hiểu cấu trúc hóa học hoạt tính sinh học thành phần có dịch chiết sakê  Phân lập, tách hợp chất có dịch chiết sakê 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Bộ Y Tế (2002), Dược điển Việt Nam, Nhà xuất Y học [2] Bùi Xn Vững, Phương pháp phân tích cơng cụ, Tài liệu chuyên ngành Hóa – Đại học Đà Nẵng [3] Đái Duy Ban (2008), Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phịng chống số bệnh cho người vật nuôi, NXB Khoa học tự nhiên công nghệ Hà Nội [4] Đỗ Tất Lợi (1995), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật [5] Lê Thị Mùi (2007), Giáo trình hóa phân tích, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng [6] Hồ Viết Quý, Chiết tách phân chia chất dung môi hữu (Lý thuyếtThực hành-Ứng dụng)Tập 2, Nhà xuất khoa học kĩ thuật [7] http://agriviet.com/home/threads/67084-Cay-Sa-ke#axzz1sXgmq8wQ [8] http://vietbao.vn/Suc-khoe/Cay-sa-ke-chua-duoc-benh-gi/45261329/248/ 54 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng: 1.2.a.Thành phần hóa học 17 1.2.b Thành phần hóa học hạt 18 1.2.c Thành phần hóa học 18 3.1.1 Kết đo độ ẩm 35 3.1.2 Kết hàm lượng tro 36 3.1.3 Hàm lượng số kim loại sakê 37 3.2.1 Khảo sát chọn mẫu 38 3.2.2 Khảo sát nồng độ ethanol 40 3.2.3 Khảo sát tỉ lệ rắn /lỏng 42 3.2.4 Khảo sát thời gian chiết 43 3.3 Kết phổ IR 46 3.4 Một số cấu tử 48 55 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình: 1.1 Cây dướng 1.2 Cây đa 1.3 Cây bồ đề 1.4 Cây dâu tằm 10 1.5 Cây mít 11 1.6 Cây vả 11 1.7 Cây sakê 13 1.8 Thân cành sakê 14 1.9 Chồi sakê 15 1.10 Quả sakê 16 1.2.7 Sơ đồ thiết bị sắc ký khí ghép khối gỗ 26 2.3.1 Lá sakê non 29 2.3.2 Lá sakê xnh 29 2.3.3 Lá sakê vàng 30 2.5.1.a Mẫu non 32 2.5.1.b Mẫu xanh 32 2.5.1.c Mẫu vàng 33 56 2.5.4 Khảo sát thời gian chiết 34 3.2.1.a.Dịch chiết mẫu 38 3.2.1.b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào mẫu 38 3.2.2.a Dịch chiết theo nồng độ ethanol 39 3.2 2.b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang theo nồng độ ethanol 40 3.2.3.a Dịch chiết theo tỉ lệ rắn/lỏng .41 3.2.3.b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang theo tỉ lệ rắn/lỏng 42 3.2.4.a Dịch chiết theo thời gian .43 3.2.4.b Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang theo thời gian chiết 44 3.2.5.a Dịch chiết trước sau thêm FeCl3 44 3.3.1 Dịch chiết sakê trước sau đuổi bớt dung môi .45 3.3.2 Dịch chiết nhiệt độ khác .45 3.3.4 Dịch chiết môi trường pH khác 46 3.4 Phổ GC – MS dịch chiết sakê 47 ... khoa học vào kho tàng hợp chất thiên nhiên, em chọn đề tài ? ?Nghiên cứu chiết tách xác định số hợp chất hóa học dịch chiết sakê ethanol? ?? Đối tượng phạm vi nghiên cứu Lá sakê hái trường Đại học. .. Đại học Đà Nẵng, Quận Liên Chiểu -TP.Đà Nẵng 3 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số tiêu hóa lý sakê - Khảo sát số điều kiện chiết thích hợp - Xác định thành phần hóa học, cơng thức cấu tạo số cấu... (GC-MS) để xác định thành phần, công thức cấu tạo số hợp chất dịch chiết sakê 4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 5.1 Ý nghĩa khoa học - Cung cấp thông tin khoa học điều kiện chiết tách, xác định