Đề cương luận văn (dược học) đánh giá tác dụng ức chế tăng tính thấm thành mạch và chống ngưng kết tiểu cầu của viên nang “thạch cam ngưu giác” trên thực nghiệm

1 ĐẶT VẤN ĐỀ Sốt xuất huyết Dengue bệnh truyền nhiễm cấp tính, gây thành dịch virút Dengue gây nên, bệnh lan truyền chủ yếu muỗi Aedes aegypti Theo tổ chức Y tế giới (WHO), bệnh Sốt xuất huyết Dengue (SD/SXHD) trở nên trầm trọng Tỉ lệ mắc bệnh toàn giới gia tăng mạnh mẽ năm gần đây, có khoảng 2,5 tỷ người sống vùng lưu hành bệnh Bệnh trở thành dịch 100 quốc gia châu Phi, châu Mỹ, khu vực phía Đơng Địa Trung Hải, Đơng Nam Á Tây Thái Bình Dương Trong Đơng Nam Á Tây Thái Bình Dương khu vực chịu ảnh hưởng nặng nề Con số tăng lên gấp lần vào năm 1995 Ước tính năm có khoảng 50 đến 100 triệu người mắc bệnh Ở Việt Nam có số nghiên cứu Hoàng Thủy Nguyên (1990), điều tra mắc xuất huyết 40 tỉnh thành cho thấy tỷ lệ mắc là: 62,5% Cho đến năm 1997 bệnh sốt xuất huyết Dengue xảy 50/61 tỉnh thành nước, với 107.188 trường hợp mắc bệnh có 226 ca tử vong Khơng có số trường hợp mắc bệnh gia tăng mà khả nhiễm nhiều loại VR khác ngày đáng báo động Về việc điều trị Sốt xuất huyết Dengue (SD/SXHD) có nhiều đề tài nghiên cứu thuốc điều trị, mà tập trung điều trị triệu chứng điều trị biến chứng bệnh Đặc biệt phát huy vai trò tiềm to lớn Y học cổ truyền phòng chữa bệnh dược liệu nước, tiến hành nghiên cứu thuốc “ Thạch cam ngưu giác”, “ Thạch cam ngưu giác” xuất phát từ thuốc Lục tán gia thêm vị ngưu giác Lục tán thuốc cổ phương, ứng dụng lâm sàng từ nhiều năm nay, có tác dụng thử, lợi thấp dùng chữa bệnh thử thấp có triệu chứng sốt, khát nước Hiện Lục tán bốn thuốc Y học cổ truyền Bộ Y tế đưa vào phác đồ điều trị SD/SXHD độ I ,II Thủy ngưu giác vị đắng, tính hàn có tác dụng nhiệt, giải độc, lương huyết; dùng chữa ôn bệnh sốt cao, hôn mê nói nhảm, kinh phong điên cuồng, chữa chứng xuất huyết nôn máu, chảy máu cam, ban xuất huyết huyết nhiệt Tuy nhiên, việc sử dụng phối hợp thuốc với có ảnh hưởng đến chức quan thể sinh vật hay không, cần phải nghiên cứu, khảo sát cách tồn diện Vì vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài với mục tiêu sau: Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn viên nang “Thạch cam ngưu giác” Đánh giá tác dụng ức chế tăng tính thấm thành mạch chống ngưng kết tiểu cầu viên nang “Thạch cam ngưu giác” thực nghiệm CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 SƠ LƯỢC VỀ LỊCH SỬ CỦA BỆNH SỐT XUẤT HUYẾT 1.1.1 Trên giới - Bệnh Dengue nói đến cách gần 200 năm Năm 1879 Cairo Batavia (Indonesia) người ta nhận thấy loại bệnh dịch giống Dengue xuất Tiếp năm 1880 vụ dịch tương tự xảy Philadelphia Từ sau vụ dịch thường xảy phía nam đại tây dương thành phố cảng nước mỹ [ ] - Những vụ dịch Dengue nghi nhận kỷ 19 đầu kỷ 20 châu mỹ, Nam châu mỹ, Nam châu Âu, Bắc phi, Đông địa trung hải, châu Á Australia, trờn cỏc đảo khác Ấn độ dương, miền Nam miền Trung Thái bình Dương Sốt Dengue đặc biệt Dengue xuất huyết tăng dần tỷ lệ mắc phân bố qua 40 năm Tới năm 1996 có 2500 đến 3000 triệu người sống vùng có nguy tiềm tàng có lan truyền virut Dengue Người ta ước tính hàng năm có 20 triệu người nhiễm virỳt Dengue có tới 24.000 trường hợp tử vong […] - Ở đông nam Á tây thái bình dương, bệnh Dengue xuất huyết lần phát Philippin năm 1953 [ ] xuất thành dịch số địa phương Những năm sau dịch Dengue xuất huyết liên tục xuất nhiều vùng rộng lớn - Vào năm 60, bệnh lan rộng khắp nước khu vực Đông nam Á Năm 1962 bệnh xuất Malaysia mang tính chất lẻ tẻ tiờn phỏt Năm 1964 Thái lan xuất thành dịch nhiều vùng lãnh thổ [ ] Trong khoảng thập kỷ lien Dengue xuất huyết sốt xuất huyết có sốc (DSS) phát Cambodia, Trung quốc, Ấn độ, Lào, Malaisia, Myanma, Singapore, Indonesia, Việt Nam vài nhóm đảo Thái Bình Dương - Trong khoảng năm 1960 1970 Dengue xuất huyết DSS tăng dần, vấn đề y tế chủ yếu Khởi phát thành phố lớn, lan tới thành phố nhỏ thị trấn nước bị dịch Nó tạo nên hình thái dịch theo mùa có chu kỳ với hình thái dịch bựng phỏt lớn xảy theo giai đoạn cách đến năm Trong thời gian có khoảng 1.070.207 trường hợp bị mắc bệnh 42.868 trường hợp tử vong ghi nhận mà hầu hết trẻ em nước có dịch như: Trung quốc, Indonesia, Malaisia, Philippin, Thái lan Việt Nam Dengue xuất huyết/DSS phát triển dần ảnh hưởng tới cỏc vựng hẻo lánh Có vụ dịch bựng phỏt lớn đặc biệt năm 1987 Việt Nam có 354.517 trường hợp, Thái lan 174.285 Tổng số người nhiễm bệnh chết Dengue xuất huyết/DSS ghi nhận tất cỏc vựng Tõy Thái Bình Dương Đơng nam Á thập kỷ 1980 1.946.965 người mắc 23.793 người tử vong 1.1.2 Ở Việt Nam - Từ năm 1913 Gaide thông báo bệnh Dengue cổ điển miền bắc miền trung Năm 1929 Boyộ cú viết vụ dịch Dengue cổ điển miền nam [ ] Năm 1958 lần Chu Văn Tường cộng số bệnh nhân nhi bệnh viện Bạch Mai thông báo vụ dịch Dengue xuất huyết nhỏ Hà nội Năm 1960, dịch nhỏ phát Cái Bè An Giang chẩn đoán Dengue xuất huyết với 60 bệnh nhân tử vong, tiếp đến năm 1966 Halstead cộng thông báo 351 trường hợp sốt Dengue cỏc xó ven sơng Cửu Long từ tháng đến tháng 10 có 116 trẻ em tử vong Từ năm 1975 đến năm 1979 phạm vi nước, năm có Dengue xuất huyết xảy Năm 1997 xảy dịch 50/61 tỉnh thành phố với 107.188 trường hợp mắc 226 trường hợp tử vong 1.1.3 Virỳt Dengue - Virỳt Dengue thuộc họ Flaviviridae VR Dengue có týp huyết 1.1.4 Vật chủ trung gian - Virỳt Dengue truyền từ người bệnh sang người lành qua vết đốt muỗi nhiễm VR Dengue mà chủ yếu Aedes Aegypti xếp vào nhóm Arbovirut 1.2 CƠ CHẾ BỆNH SINH Chúng ta biết bệnh SD/SXHD týp týp vi rút Dengue gây nên Nhưng chưa biết rõ VR vào thể người người biểu lâm sàng nhẹ cá thể khác biểu lâm sàng lại ạt, đơi nặng gây tử vong Ngày nay, nhờ tiến y học sinh học phân tử đưa giả thuyết đáng tin cậy hợp lý: Giả thuyết thứ nhất: SD/SXHD nhiễm đồng thời týp huyết khác VR Dengue (do Hammon nêu lên) Giả thuyết phù hợp với bệnh SD/SXHD có kháng thể có vùng dịch lưu hành mà thường xuyên có týp VR Dengue Tuy nhiên người ta chưa phân lập týp VR mẫu huyết chưa có chứng nhiễm đồng thời týp VR gây nên SD/SXHD Giả thuyết thứ hai: Do Leon Rosen cho nguyên nhân SD/SXHD chủng VR cú mónh độc mạnh Tác giả thấy hầu hết chủng VR có khác độc lực, dựa vào tính chất nội sinh khả nhân lên, lý giải tế bào sinh miễn dịch , tớnh mónh độc phù hợp với số vụ dịch týp gây nên có nhiều trường hợp nặng tử vong cao Nhưng thông tin dịch tễ số nước, ca mắc bệnh nặng riêng týp mà gặp týp khác Giả thuyết thứ ba: Thuyết tăng cường miễn dịch Halstead, trẻ em Thái Lan có hiệu giá kháng thể cao Đó kết đáp ứng nhớ lại bị tái nhiễm với týp huyết khác VR Dengue Halstead nhận thấy hầu hết trẻ em bị SD/SXHD lần nhiễm VR thứ hai, lần thứ hay ba, bốn Nhiễm VR lần thứ ba, bốn gặp sau lần nhiễm VR lần thứ hai, để lại kháng thể cao kéo dài đủ để bảo vệ Vậy trẻ em hiệu giá kháng thể thấp thuộc loại nào? Không phải trẻ em lớn vỡ chỳng sống nhiều năm vùng dịch lưu hành cao nên bị nhiều lần nhiễm Dengue nờn chỳng cú hiệu giá kháng thể cao kéo dài, trẻ sơ sinh trẻ sơ sinh Thái Lan có hiệu giá kháng thể IgG chống Dengue cao từ mẹ truyền sang Như trẻ có nguy mắc SXHD rõ ràng tương ứng với lứa tuổi vùng dịch lưu hành cú kháng thể chống Dengue mức độ thấp, kháng thể mẹ truyền sang kháng thể giảm, kháng thể bị nhiễm lần đầu bị giảm dần, sau lại bị nhiễm VR Dengue lần hai 1.3 TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG VÀ CÁC MỨC ĐỘ SỐT XUẤT HUYẾT 1.3.1 SXHD thể thơng thường điển hình - Nung bệnh: từ 3-15 ngày - Khởi phát: biểu lâm sàng phụ thuộc vào lứa tuổi: + Trẻ bú mẹ trẻ nhỏ có triệu chứng sốt phát ban không đặc hiệu + Ở trẻ lớn người lớn: sốt cao đột ngột kèm theo nhức đầu, đau nhức hai bên hố mắt, đau khắp người, đau cơ, mệt mỏi, chán ăn - Toàn phát: Sốt cao 39-40oC, kèm theo triệu chứng: + Xuất huyết củng mạc mắt, đau nhức quanh nhãn cầu + Đau cơ, đau khớp, mệt mỏi, chán ăn + Sưng hạch bạch huyết + Phát ban da,ban dát sẩn ban kiểu sởi + Đơi có xuất huyết da, niêm mạc + Số lượng bạch cầu bình thường hạ + Số lượng tiểu cầu bình thường đơi hạ + Hematocrit khơng tăng 1.3.2 SXHD thể nhẹ, khơng điển hình (tương đương SXHD độ I): - Sốt, nhức đầu - Đau cơ, khớp (ít nhiều) - Giãn mạch ngoại vi - Dấu hiệu dây thắt dương tính - Bạch cầu giảm, tiểu cầu giảm nhẹ, hematocrit tăng nhẹ, chẩn đoán huyết Dengue dương tính - Khơng có sốc, mê - Khơng có xuất huyết 1.3.3 SXHD thể thơng thường điển hình: - Sốt cao đột ngột, kéo dài liên tục từ 2-7 ngày - Biểu xuất huyết: thường xảy vào ngày thứ 2,thứ bệnh nhiều hình thái như: + Nhẹ dấu hiệu dây thắt dương tính + Xuất huyết tự nhiên da , niêm mạc, vết bầm tím quanh nơi tiờm chớch + Xuất huyết da: chấm xuất huyết,thường mặt trước cẳng chân mặt sau cánh tay, đùi, bụng, mạng sườn, đám xuất huyết, mảng bầm tím + Xuất huyết niêm mạc: chảy máu mũi, chân răng, xuất huyết kết mạc - Xuất huyết phủ tạng: tiểu máu, kinh nguyệt kéo dài xuất kinh nguyệt sớm kỳ hạn Xuất huyết tiờu hoỏ nôn máu, đại tiện máu Xuất huyết tiờu hoỏ nhiều thường biểu nặng bệnh * Các triệu chứng khác : + Gan to, đau bụng (trẻ em gặp nhiều người lớn), số có rối loạn tiêu hóa ỉa lỏng táo bón, bụng chướng… + Nhức đầu, đau mỏi khớp, hạch ngoại vi to, mạch nhiệt phân ly, biến đổi điện tâm đồ, viêm đường hô hấp trên, viêm phổi bội nhiễm, rối loạn điện giải… * Cận lâm sàng: + Tiểu cầu giảm ≤100.000 tế bào/mm (trên thực tế thường hay thấy tiểu cầu giảm từ ngày thứ hai trở đi) + Biểu mỏu cụ: hematocrit tăng ≥20% so với giá trị bình thường (bình thường 36% - 40%) 1.3.4 Sốt xuất huyết Dengue có sốc 1.3.4.1 Dấu hiệu tiền sốc + Gồm số triệu chứng sau: - Vật vã, lừ đừ, li bì - Đau bụng dội - Da xung huyết đỏ - Tay chân lạnh - Tiểu + Xét nghiệm: - Hematocrit tăng cao - Tiểu cầu giảm nhanh chóng Ở bệnh nhân có dấu hiệu tiền sốc cần ý theo dõi mạch, huyết áp, nhiệt độ làm xét nghiệm hematocrit, tiểu cầu thường xuyên để xử trí kịp thời 1.3.4.2 Hội chứng sốc Dengue Bao gồm tất triệu chứng lâm sàng sốt xuất huyết Dengue kèm theo triệu chứng: - Mạch nhanh, nhỏ, khó bắt - Tụt huyết áp (HATT < 90 mmHg) huyết áp kẹt (HATT – HATTr ≤ 20 mmHg) Triệu chứng sốc thường xảy vào ngày thứ hai đến ngày thứ sáu bệnh 1.3.5 Sốt xuất huyết Dengue thể xuất huyết phủ tạng Thường gặp xuất huyết tiêu hóa, tử cung, đái máu Ít gặp ho máu, xuất huyết não 1.3.6 Sốt xuất huyết Dengue thể khác: - SXHD cú đỏi huyết cầu tố: Cơ chế chưa rõ, biến chứng SXHD tai biến dị ứng địa bệnh nhân thiếu hụt men G6PD - SXHD thể suy gan cấp: bệnh nhân có đủ tiêu chuẩn chẩn đoán SXHD, kèm theo: gan to teo, men SGOT SGPT tăng cao, vàng da - niêm mạc, bilirubin cao, tỉ lệ prothrombin thấp, N-NH cao, rối loạn ý thức suy gan 10 - SXHD thể não: có đủ tiêu chuẩn chẩn đốn SXHD, kèm theo hội chứng não cấp lan tỏa, định khu, hôn mê xuất sớm (không phải thứ phát sau sốc xuất huyết nặng) Nguyên nhân tác động đơn phối hợp rối loạn vi tuần hoàn não, xuất huyết đốm rải rác tổ chức não, hội chứng não cấp nước rối loạn điện giải 1.3.7 Biến chứng sốt xuất huyết Dengue: - Biến chứng (do tăng tính thấm thành mạch rối loạn đụng mỏu): + Sốc + Hôn mê hội chứng não cấp, phự nóo nặng + Xuất huyết phủ tạng nặng, giai đoạn muộn đụng mỏu nội mạch  Biến chứng khác + Phổi: tràn dịch màng phổi, phù phổi cấp + Tim: phù nề khe tim, xuất huyết tim, tràn dịch màng tim, suy mạch vành, rối loạn dẫn truyền + Thận: suy thận cấp + Ngoài ra: tràn dịch màng bụng, tràn dịch màng tinh hoàn (hay gặp trẻ em), phù thiểu dưỡng, xảy thai- đẻ non (ở phụ nữ có thai) 1.4 CHẨN ĐỐN 1.4.1 Dựa vào tiêu chuẩn WHO năm 1997 sau: - Sốt cao: đột ngột, liên tục 2-7 ngày - Xuất huyết : 29 - Liều cao (gấp lần liều lâm sàng): Phân tán lượng thuốc 234 viên nang 65,0ml dd hồ tinh bột 10,0% (Hỗn dịch B: chứa 3,6 viờn/ml) 2.3.3.2 Bố trí thí nghiệm - Thí nghiệm tiến hành 21 thỏ, chia nhóm (1 nhóm chứng nhóm thử), nhóm thỏ Cho thỏ uống trực tiếp xilanh với liều 1,0ml hỗn dịch thử /kg trọng lượng thỏ Bố trí thí nghiệm thử với mức liều bảng sau: Bảng 2.2: Thí nghiệm thử độc tính bán trường diễn mẫu “Thạch cam ngưu giác” Nhóm Chứng Thí nghiệm Thí nghiệm Số thỏ thí Thể tích cho uống Liều dùng nghiệm (ml hỗn dịch thử/kg thỏ) (viờn/kg thỏ) 1ml dd hồ tinh bột 10,0% / kg thỏ - 1ml hỗn dịch A/kg thỏ 1,2 viờn/kg thỏ ml hỗn dịch B/kg thỏ 3,6 viờn/kg thỏ Thỏ nuôi điều kiện thí nghiệm nhau, đủ chế độ dinh dưỡng 2.3.3.3 Theo dõi đánh giá - Theo dõi thỏ hàng ngày mức độ tiêu thụ thức ăn, khả hoạt động, tình trạng phõn, lụng 30 - Trước thí nghiệm, xác định cân nặng thỏ, dấu hiệu toàn thân, lấy máu xét nghiệm đánh giá số huyết học (số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hemoglobin, hematocrit), số sinh hóa (GOT, GPT, creatinin, urea, protein toàn phần) Theo dõi cân nặng thỏ hàng tuần Sau 28 ngày dùng thuốc, xác định cân nặng thỏ lấy máu để làm xét nghiệm So sánh kết nhóm thử nhóm chứng theo phương pháp thống kê 2.3.4 Nghiên cứu tác dụng ức chế tăng tính thấm thành mạch thuốc in vivo: - Mơ hình nghiên cứu ức chế tăng tính thấm thành mạch mạc treo chuột nhắt trắng(CNT) Anderson KW 2.3.4.1 Các bước tiến hành: Chuột nhắt trắng sau cân, đánh dấu, chia thành 02 nhóm nhóm, nhóm uống thuốc nghiên cứu nhóm đối chứng: + Nhóm nghiên cứu cho chuột uống thuốc “Thạch cam ngưu giác ” liên tục ngày + Nhóm đối chứng khơng uống thuốc - Ngày thứ 8, nhóm tiêm tĩnh mạch đuôi chuột dung dịch xanh Evans Sau phút, tiêm phúc mạc dung dịch histamin 0,1%; ml/ 10g trọng lượng thể - Sau tiêm histamin 60 phút, từ ổ bụng chuột nhắt trắng hút dịch phúc mạc, đem dịch li tâm, lấy dịch đo mật độ quang máy đo SINTRA (USA) bước sóng 612 nm, kết nối với máy tính, xác định nồng độ chất màu khỏi lòng mạch 2.3.4.2 Phương pháp đánh giá kết 31 - Hiệu lực ức chế tính thấm thành mạch tính cơng thức: I(%) = Cc - Ct Cc x 100 - Trong đó: I(%): Hiệu lực ức chế tính thấm thành mạch CNT thuốc nghiên cứu Cc: Nồng độ chất màu thoát vào ổ bụng lơ CNT chứng Ct: Nồng độ chất màu vào ổ bụng lô thuốc nghiên cứu 2.3.5 Nghiên cứu tác dụng chống ngưng kết tiểu cầu in vivo: - Phương pháp mô tả Margaretten – McKay, Longdell – Waaler – Margolis -Biggs Godal – Abigaard Nghiên cứu tiến hành nhóm thỏ thực nghiệm có khơng dùng thuốc nghiên cứu - Đánh giá tiêu máy xét nghiệm tự động kết nối với máy tính + Đánh giá tiêu đơng máu tồn + Các tiêu ngưng kết tiểu cầu 32 CHƯƠNG DỰ KIẾN KẾT QỦA NGHIÊN CỨU 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ THUỐC “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 3.1.1 Chất lượng thành phẩm 3.1.1.1 Hình thức 3.1.1.2 Độ đồng khối lượng 3.1.1.3 Mất khối lượng làm khô 3.1.1.4 Độ rã 3.1.1.5 Định tính 3.1.1.6 Độ nhiễm khuẩn 3.2.2 Đóng gói, ghi nhãn, bảo quản - Thuốc đóng bao bì kín - Nhãn rõ ràng, quy chế - Bảo quản nơi khơ ráo, thống mát - Hạn dùng 24 tháng kể từ ngày sản xuất 3.2 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP CỦA VIấN NANG “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 33 3.2.1 Trọng lượng thể chuột * Mức tăng trọng lượng chuột đánh giá theo bảng sau: Bảng 3.1: Bảng theo dõi trọng lượng chuột Nhóm chứng STT Trước TN (g) Sau TN (g) Nhóm STT 11 12 13 14 15 16 17 18 19 10 20 Nhóm STT Trước TN (g) Sau TN (g) Trước TN (g) Sau TN (g) Nhóm STT 21 31 22 32 23 33 24 34 25 35 Trước TN (g) Sau TN (g) 34 26 36 27 37 28 38 29 39 30 40 * Nhận xét: 3.2.2 Tiêu thụ thức ăn nước uống chuột - Nhóm chứng: - Cỏc nhóm thử: 3.2.3 Quan sát dấu hiệu ngộ độc: 3.2.4 Kết luận: Mẫu thử Thạch cam ngưu giác Viện Y học cổ truyền quân đội gửi tới yêu cầu thử độc tính cấp chuột nhắt trắng có kết sau: 3.3 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA VIấN NANG “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” Để đánh giá độ an toàn viên nang “Thạch cam ngưu giỏc” ảnh hưởng lên chức quan tạo máu, gan, thận thỏ, tiêu theo dõi cho kết sau: 3.3.1 Tình trạng thỏ: - Trong thời gian thí nghiệm, tất thỏ hoạt động bình thường, ăn uống tốt, phõn khụ, lụng mượt Khơng có tượng rụng lơng lơng bị khơ cứng Bảng 3.2:Kết theo dõi cân nặng thỏ Nhóm (n=7) Chứng (C) (mt-m0) Trước TN (m0) Kết cân nặng (kg) Sau Sau Sau tuần (m ) tuần (m1) tuần(m3) Sau tuần (m4) P Ptrước-sau= 35 Thử (T1) (mt-m0) Ptrước-sau= PT1-C trước= PT1-C sau= Ptrước-sau= PT2-C trước= PT2-C sau= Thử (T2) (mt-m0) * Nhận xét: 3.3.2 Kết theo dõi số huyết học Bảng 3.3: Các số huyết học trước thí nghiệm Chỉ tiêu Hồng cầu (x 1012/ lit) Bạch cầu (x 109/ lit) Tiểu cầu (x 109/ lit) Hematocrit (%) Hemoglobin (g/dL) Nhận xét: n Nhóm chứng Nhóm T1 PC-T1 Nhóm T2 trước PC-T2 trước 7 7 Bảng 3.3: Các số huyết học sau thí nghiệm Chỉ tiêu Hồng cầu (x 1012/ lit) Bạch cầu (x 109/ lit) Tiểu cầu (x 109/ lit) n 7 Nhóm chứng Nhóm T1 PC-T1 sau Nhóm T2 PC-T2 sau 36 Hematocrit (%) Hemoglobin (g/dL) * Nhận xét: 7 3.3.3 Kết theo dõi số sinh hóa Bảng 3.4: Các số sinh hóa trước thí nghiệm Chỉ tiêu SGOT n (UI/ lit) SGPT (UI/ lit) Creatinin (μmol/lit) Urea (mmol/lit) Bilirubin toàn phần (μmol/lit) Protein toàn phần (g/ lit) * Nhận xét: Nhóm chứng PC-T1 Nhóm T1 trước Nhóm T2 PC-T2 trước 37 Bảng 3.5: Các số sinh hóa sau thí nghiệm Chỉ tiêu n SGOT (UI/ lit) SGPT (UI/ lit) Creatinin (μmol/lit) Urea (mmol/lit) Bilirubin toàn phần (μmol/lit) Protein toàn phần (g/ lit) * Nhận xét: Nhóm chứng Nhóm T1 PC-T1 sau Nhóm T2 PC-T2 sau 38 3.3.4 Quan sát đại thể Gan, Thận, Phổi, Dạ dày, Ruột thỏ nhóm thử so với nhóm chứng sau thí nghiệm 3.3.5 Kết luận chung 3.4 TÁC DỤNG ỨC CHẾ SỰ TĂNG TÍNH THẤM THÀNH MẠCH MẠC TREO CHUỘT TRẮNG CỦA “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” Bảng 3.6: Hiệu ức chế tăng tính thấm thành mạch mạc treo chuột nhắt trắng “Thạch cam ngưu giỏc” mức liều Nhóm STT nghiên cứu n Liều thuốc mg/kg ttc/ngày Đường dùng thuốc Nồng độ Hiệu chất lực ức màu (x chế (%) 104)% P Nhóm chứng 12 “TCNG” Mức liều I 12 P1-2 “TCNG” Mức liều II 12 P1-3 “TCNG” Mức liều III 12 P1-4 “TCNG” Mức liều IV 12 P1-5 * Nhận xét: 39 Bảng 3.6: Hiệu ức chế tăng tính thấm thành mạch mạc treo chuột nhắt trắng “Thạch cam ngưu giỏc” mức liều STT Nhóm nghiên cứu n Nhóm chứng 12 * Nhận xét: Liều thuốc mg/kg ttc/ngày Đường dùng thuốc Nồng độ chất màu (x 104)% Hiệu lực ức chế (%) P 12 P1-2 12 P1-3 12 P1-4 12 P1-5 40 CHƯƠNG DỰ KIẾN BÀN LUẬN Các kết nghiên cứu  Các đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu  Độc tính cấp độc tính bán trường diễn Thạch cam ngưu giác  Hiệu ức chế tính thấm thành mạch thuốc KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 SƠ LƯỢC VỀ LỊCH SỬ CỦA BỆNH SỐT XUẤT HUYẾT 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Ở Việt Nam 1.1.3 Virút Dengue 1.1.4 Vật chủ trung gian 1.2 CƠ CHẾ BỆNH SINH 1.3 TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG VÀ CÁC MỨC ĐỘ SỐT XUẤT HUYẾT 1.3.1 SXHD thể thơng thường điển hình 1.3.2 SXHD thể nhẹ, khơng điển hình 1.3.3 SXHD thể thơng thường điển hình: 1.3.4 Sốt xuất huyết Dengue có sốc 1.3.5 Sốt xuất huyết Dengue thể xuất huyết phủ tạng 1.3.6 Sốt xuất huyết Dengue thể khác: 1.3.7 Biến chứng sốt xuất huyết Dengue: 10 1.4 CHẨN ĐOÁN 10 1.4.1 Dựa vào tiêu chuẩn WHO năm 1997 sau: 10 1.4.2 Cận lâm sàng: 11 1.5 ĐIỀU TRỊ: 11 1.5.1 Nguyên tắc chung: Điều trị triệu chứng 11 1.5.2 Điều trị SXHD khơng sốc 12 1.5.3 Điều trị SXHD có sốc 12 1.6 QUAN ĐIỂM CỦA Y HỌC CỔ TRUYỀN VỀ SỐT XUẤT HUYẾT DENGUE: 13 1.6.1 Tóm tắt lịch sử phát triển ôn bệnh: 13 1.6.2 Bệnh nguyên ôn bệnh: 14 1.6.3 Cơ chế bệnh sinh chứng trạng lâm sàng: 15 1.6.4 Điều trị SXHD theo Y học Cổ truyền: 18 1.7 TỔNG QUAN VỀ BÀI THUỐC NGHIÊN CỨU 18 1.7.1 Xuất xứ thuốc 18 1.7.2 Thành phần thuốc 19 1.7.3 Công dụng thuốc 19 1.7.4 Phân tích tác dụng thuốc 19 1.8 Các phương pháp nghiên cứu thực nghiệm thuốc động vật 21 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG- CHẤT LIỆU- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 22 2.1.1 Chuột nhắt trắng 22 2.1.2 Thỏ trắng 22 2.2 CHẤT LIỆU 22 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.3.1 Thẩm định tiêu chuẩn sở viên nang “Thạch cam ngưu giác” 23 2.3.2 Thư ®éc tÝnh cÊp chuột nhắt trắng 25 2.3.3 Thư ®éc tÝnh bán trường diễn thỏ trắng 27 2.3.4 Nghiªn cứu tác dụng ức chế tăng tính thấm thành mạch thuốc in vivo: 29 2.3.5 Nghiên cứu tác dơng chèng ngng kÕt tiĨu cÇu in vivo: 30 CHƯƠNG 3: DỰ KIẾN KẾT QỦA NGHIÊN CỨU 31 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ THUỐC “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 31 3.1.1 Chất lượng thành phẩm 31 3.2.2 §ãng gãi, ghi nh·n, b¶o qu¶n 31 3.2 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP CỦA VIÊN NANG “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 31 3.2.1 Trọng lượng thể chuột 31 3.2.2 Tiêu thụ thức ăn nước uống chuột33 3.2.3 Quan sát dấu hiệu ngộ độc: 33 3.2.4 Kết luận: 33 3.3 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA VIÊN NANG “THẠCH CAM NGƯU GIÁC”33 3.3.1 Tình trạng thỏ: 33 3.3.2 Kết theo dõi số huyết học 34 3.3.3 Kết theo dõi số sinh hóa 35 3.3.4 Quan sát đại thể 37 3.3.5 Kết luận chung 37 3.4 TÁC DỤNG ỨC CHẾ SỰ TĂNG TÍNH THẤM THÀNH MẠCH MẠC TREO CHUỘT TRẮNG CỦA “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 37 CHƯƠNG 4: DỰ KIẾN BÀN LUẬN 39 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 39 ... cứu đề tài với mục tiêu sau: Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn viên nang “Thạch cam ngưu giác” Đánh giá tác dụng ức chế tăng tính thấm thành mạch chống ngưng kết tiểu cầu viên nang. .. chứng sau thí nghiệm 3.3.5 Kết luận chung 3.4 TÁC DỤNG ỨC CHẾ SỰ TĂNG TÍNH THẤM THÀNH MẠCH MẠC TREO CHUỘT TRẮNG CỦA “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” Bảng 3.6: Hiệu ức chế tăng tính thấm thành mạch mạc treo... 3.3.5 Kết luận chung 37 3.4 TÁC DỤNG ỨC CHẾ SỰ TĂNG TÍNH THẤM THÀNH MẠCH MẠC TREO CHUỘT TRẮNG CỦA “THẠCH CAM NGƯU GIÁC” 37 CHƯƠNG 4: DỰ KIẾN BÀN LUẬN 39 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 39