KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (CND và BC) nghiên cứu bào chế hệ nano lipid rắn chứa fluconazol

LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: Th.S Nguyễn Thị Mai Anh DS Đào Minh Huy Là người thày ln tận tình bảo, hướng dẫn giúp đỡ em suốt trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em chân thành cảm ơn: Các thầy Ban giám hiệu, phịng Đào tạo tồn thể thầy mơn cán phịng ban trường Đại học Dược Hà Nội tận tình dạy dỗ em năm tháng học tập trường Các thầy cô kỹ thuật viên môn Bào chế, môn Công nghiệp Dược, môn Dược lực trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ em q trình thực khóa luận Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè, đặc biệt người bạn thân thiết nhóm NNCC ln bên cạnh, động viên, cổ vũ em thời điểm khó khăn để em hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 17 tháng 05 năm Sinh viên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VÀI NÉT VỀ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID .2 1.1.1 Cấu tạo 1.1.2 Thành phần .3 1.1.3 Phương pháp bào chế .6 1.1.4 Những hạn chế hệ tiểu phân nano lipid 1.2 FLUCONAZOL 11 1.2.1 Cơng thức hố học 11 1.2.2 Tính chất .11 1.2.3 Tác dụng, định 12 1.2.4 Các dạng thuốc chứa fluconazol 12 1.2.5 Một số nghiên cứu hệ nano lipid điều trị nấm 13 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ THIẾT BỊ 15 2.1.1 Nguyên vật liệu .15 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu .16 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.2.1 Phương pháp bào chế hệ tiểu phân nano lipid fluconazol 16 2.2.2 Phương pháp đánh giá hệ tiểu phân nano lipid 18 CHƯƠNG KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 23 3.1 KHẢO SÁT PHƯƠNG PHÁP BÀO CHẾ NLC FLUCONAZOL .23 3.1.1 Phương pháp nhũ hóa khuếch tán dung môi 23 3.1.2 Phương pháp đun chảy nhũ hóa 24 3.2 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA TÁ DƯỢC 29 3.2.1 Lựa chọn lipid rắn 29 Hình 3.3: Ảnh hưởng tá dược lipid rắn tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol 30 3.2.2 Lựa chọn chất diện hoạt thân nước 31 3.2.3 Lựa chọn nồng độ chất diện hoạt (Tween 40) 33 3.2.4 Lựa chọn lipid lỏng 34 3.2.5 Lựa chọn nồng độ lipid sử dụng 35 3.2.6 Lựa chọn nồng độ dược chất 36 3.3 ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA NLC FLUCONAZOL 38 3.3.1 Hàm lượng dược chất 38 3.3.2 KTTP, phân bố KTTP Zeta 38 3.3.3 Xác định cấu trúc NLC kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) 39 39 3.3.4 Xác định trạng thái kết tinh dược chất 40 3.3.5 Sơ đánh giá khả giải phóng dược chất từ NLC fluconazol 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT .45 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CDH : Chất diện hoạt DSC (differential scanning calorimetry) : Nhiệt lượng vi sai quét FLZ : Fluconazol HLB (hydrophilic-lipophilic balance) : Hệ số cân dầu – nước HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (high performance liquid chromatography) HSH (high shear homogenization) : Đồng hóa nhờ lực phân cắt lớn KHV : Kính hiển vi KTTP : Kích thước tiểu phân NLC (nanostructure lipid carries) : Hệ tiểu phân nano lipid PDI (polydispersity index) : Chỉ số đa phân tán TEM (transmission electron microscopy) : Kính hiển vi điện tử truyền qua SLN (solid lipid nanoparticles) : Hệ tiểu phân nano lipid rắn DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Bảng tóm tắt thí nghiệm Fu-Qiang Hu cộng tiến hành Bảng 2.1: Nguyên vật liệu sử dụng trình thực nghiệm 15 Bảng 3.1: Công thức, thông số thiết bị bào chế NLC fluconazol phương pháp nhũ hóa khuếch tán dung mơi .23 Bảng 3.2: Công thức, thông số thiết bị bào chế NLC fluconazol sử dụng thiết bị đồng hóa rotor – stator 24 Bảng 3.3: Ảnh hưởng thiết bị đồng hóa tới KTTP NLC 25 Bảng 3.4: Công thức bào chế khảo sát ảnh hưởng thời gian siêu âm .26 Bảng 3.5: Công thức bào chế khảo sát ảnh hưởng loại lipid rắn 29 Bảng 3.6: Công thức bào chế khảo sát nồng độ Tween 40 33 Bảng 3.7: Ảnh hưởng nồng độ Tween 40 tới KTTP hệ NLC fluconazol 33 Bảng 3.8: Công thức bào chế khảo sát số lipid lỏng 34 Bảng 3.9: Công thức bào chế khảo sát nồng độ dược chất .36 Bảng 3.10: Công thức phương pháp bào chế NLC fluconazol .37 Bảng 3.11: Diện tích pic dung dịch fluconazol chuẩn nồng độ khác 41 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Cấu trúc tiểu phân SLN (trái) NLC (phải) .2 Hình 1.2: Ba kiểu phân bố dược chất tiểu phân nano lipid .3 Hình 1.3: Ảnh hưởng nồng độ chất diện hoạt lên bề mặt, cấu trúc tiểu phân 10 Hình 2.1: Sơ đồ bào chế NLC fluconazol phương pháp nhũ hóa khuếch tán dung môi 16 Hình 2.2: Sơ đồ bào chế NLC fluconazol phương pháp đun chảy nhũ hóa 17 Hình 2.3: Bình Franz .20 Hình 3.1: Ảnh hưởng thời gian siêu âm tới KTTP hệ NLC fluconazol 27 Hình 3.2: Ảnh hưởng phương pháp làm lạnh tới KTTP hệ NLC fluconazol 28 Hình 3.3: Ảnh hưởng tá dược lipid rắn tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol 30 Hình 3.4: Ảnh hưởng loại chất diện hoạt tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol 31 Hình 3.5: Đồ thị phân bố KTTP hệ NLC fluconazol sử dụng CDH benzalkonium clorid 32 Hình 3.6: Ảnh hưởng số lipid lỏng tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol 34 Hình 3.7: Ảnh hưởng nồng độ hỗn hợp lipid lên KTTP hệ NLC fluconazol 35 Hình 3.8: Độ nhớt hệ NLC fluconazol 35 Hình 3.9: Phần trăm fluconazol giải phóng qua màng thẩm tích với mẫu NLC fluconazol có nồng độ dược chất khác 37 Hình 3.10: Kết đo KTTP hệ NLC fluconazol 38 Hình 3.11: Kết đo Zeta hệ NLC fluconazol 39 Hình 3.12: Hình ảnh chụp TEM NLC fluconazol 39 Hình 3.13: Phổ nhiệt lượng vi sai quét mẫu fluconazol, alcol cetylic, FNLC 0; 2; 20% .40 Hình 3.14: Đường chuẩn biểu thị mối tương quan diện tích pic nồng độ fluconazol .41 Hình 3.15: Phần trăm fluconazol giải phóng qua màng thẩm tích 42 Hình 3.16: Phần trăm fluconazol giải phóng qua da thỏ 43 Hình 3.17: Hiện tượng tháo thuốc khỏi hệ tiểu phân nano lipid rắn (SLN) 44 ĐẶT VẤN ĐỀ Công nghệ nano đời đánh dấu bước ngoặt lịch sử công nghiệp dược phẩm, mở hướng phát triển việc nghiên cứu, bào chế sản phẩm với nhiều ưu điểm vượt trội so với dạng bào chế quy ước Hệ tiểu phân nano lipid lần nghiên cứu vào năm đầu thập niên 90 thu nhiều thành công lớn, đặc biệt việc bào chế dạng thuốc hấp thu qua da niêm mạc Trong năm gần đây, việc điều trị bệnh nấm loại nấm men hoại sinh gây bệnh da niêm mạc ngày quan tâm Nguyên nhân loại nấm điều kiện xác định có khả xâm nhập vào khoang ổ sâu thể, làm gia tăng tỉ lệ người bị nhiễm nấm hội Thêm vào đó, tổ chức nấm phát triển chậm thường tồn mơ khó thấm thuốc nên điều trị bệnh nấm gây thường lâu dài khó bệnh nhiễm khuẩn khác [2] Fluconazol dẫn chất azol – nhóm thuốc ứng dụng rộng rãi lâm sàng, điều trị nhiễm nấm bề mặt da, niêm mạc tồn thân chúng có phổ kháng nấm rộng [2] Việc ứng dụng hệ đưa thuốc có cấu trúc nano sử dụng chất mang lipid vào nghiên cứu bào chế mở hướng giúp làm kiểm sốt giải phóng, tăng tính thấm, làm tăng sinh khả dụng chế phẩm Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu bào chế hệ nano lipid rắn chứa fluconazol” tiến hành với mục tiêu sau: Bào chế hệ nano lipid chứa fluconazol Sơ đánh giá số đặc tính hệ nano lipid chứa fluconazol CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VÀI NÉT VỀ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID 1.1.1 Cấu tạo Hệ đưa thuốc có cấu trúc nano (nanostructured systems, nanoparticles-based system) hệ đưa thuốc kích cỡ nano, đó, dược chất có tính chất khác lồng hay gắn vào chất mang có nguồn gốc hữu hay vô Các giá mang thuốc thường đưa vào thể dạng thuốc tiêm truyền tĩnh mạch, thuốc uống, thuốc phun mù, thuốc giọt… với mục đích nâng cao sinh khả dụng, kéo dài tác dụng đưa thuốc tới đích [5] Trong thời gian gần đây, chất mang lipid đặc biệt ý với hai dạng bào chế SLN (solid lipid nanoparticles) NLC (nanostructures lipid carries) Hình 1.1: Cấu trúc tiểu phân SLN (trái) NLC (phải) Hệ tiểu phân nano lipid rắn (SLN) nghiên cứu phát triển từ năm 1990 việc thay lipid lỏng nhũ tương D/N lipid rắn hỗn hợp nhiều lipid rắn [23] Mỗi tiểu phân có cấu tạo gồm màng lipid đơn, bao quanh lõi chứa cốt lipid rắn, dược chất nằm xen kẽ cốt lipid dạng hoà tan kết tinh Kích thước trung bình SLN nằm khoảng từ 40 – 1000 nm phân tán nước dung dịch chất diện hoạt thân nước [23], [27] SLN nghiên cứu nhiều bào chế dạng thuốc nhờ ưu điểm như: độ ổn định vật lý cao, bảo vệ dược chất bền, kiểm sốt giải phóng dược chất (giải phóng nhanh trì), dung nạp tốt (đặc biệt thích hợp sử dụng cho chế phẩm hấp thu qua da niêm mạc), phối hợp dược chất thân nước thân dầu, tránh việc sử dụng dung môi hữu cơ, dễ dàng mở rộng quy mơ sản xuất [21], [27], [31] Tuy nhiên, SLN có nhiều nhược điểm như: hiệu suất nạp thuốc không cao, có tượng tháo thuốc khỏi tiểu phân q trình bảo quản có chuyển dạng lipid từ dạng bền sang dạng bền vững (hai dạng α β’ bền so với dạng β), tượng xếp lại mạng lưới tinh thể lipid làm giảm không gian chứa dược chất [22], [23], [27], [31] Hệ tiểu phân nano lipid hệ hai (NLC) phát triển để khắc phục hạn chế SLN NLC bào chế cách thay lipid rắn SLN hỗn hợp lipid rắn lipid lỏng, với tỉ lệ lipid lỏng từ 0,1% đến 30% Do thêm vào lượng lipid lỏng thành phần, hỗn hợp lipid có nhiệt độ nóng chảy thấp hẳn so với sử dụng lipid rắn, tồn thể rắn o nhiệt độ 40 C Sử dụng thêm lipid lỏng giúp ức chế trình tái kết tinh phân tử dược chất chúng bị “trộn” lẫn “mạng lưới không gian” chất mang lipid [5] So với SLN, NLC có hiệu suất nạp thuốc cao hơn, tránh tượng tháo thuốc khỏi hệ tiểu phân nano lipid Dược chất nằm chuỗi acid béo lớp lipid cấu trúc tiểu phân NLC [23] Chất Lớp vỏ dược lipid đồng chất bao quanh lõi lipid Lớp vỏ lipid bao quanh lõi dược chất Hình 1.2: Ba kiểu phân bố dược chất tiểu phân nano lipid 1.1.2 Thành phần Các thành phần hệ tiểu phân nano lipid gồm có: dược chất (có thể thân dầu thân nước), lipid rắn, lipid lỏng (đối với NLC), chất diện hoạt nước Trong mẫu NLC fluconazol 0%, 2% 20%, có mặt Tween 40, acid oleic (có điểm chảy thấp - thể pic thu nhiệt khoảng O 10 - 20 C) fluconazol ngăn cản hình thành tinh thể hồn chỉnh O alcol cetylic pic thu nhiệt tương ứng với điểm chảy alcol cetylic (60 C) O bị dịch chuyển (từ 60 xuống 50 C) 3.3.5 Sơ đánh giá khả giải phóng dược chất từ NLC fluconazol 3.3.5.1 Đường chuẩn biểu thị mối quan hệ nồng độ fluconazol diện tích pic Pha dãy dung dịch fluconazol chuẩn có nồng độ 120; 240; 450; 600; 900 µg/ml mục 2.2.2.4 tiến hành chạy HPLC theo điều kiện nêu mục 2.2.2.5 Giá trị diện tích pic dãy chuẩn ghi bảng 3.10 Bảng 3.11: Diện tích pic dung dịch fluconazol chuẩn nồng độ khác Nồng độ (µg/ml) 120 240 450 600 900 Diện tích pic (mAu.giây) 234,91 630,53 1114,54 1450,65 2144,84 y = 2.401x + 5.724 R² = 0.996 2500 Di 2000 ện tíc 1500 h 1000 pi 500 c ( 0 m A u 200 400 600 800 1000 Nồng độ (µg/ml) Hình 3.14: Đường chuẩn biểu thị mối tương quan diện tích pic nồng độ fluconazol Mối tương quan diện tích pic nồng độ fluconazol biểu thị đường thẳng y = 2,401x + 5,724 với hệ số tương quan R = 0,996; chứng tỏ có tương quan tuyến tính giá trị diện tích pic với nồng độ fluconazol khoảng nồng độ từ 120 đến 900 µg/ml 3.3.5.2 Sơ đánh giá khả giải phóng dược chất từ NLC-FLZ qua màng thẩm tích Các mẫu NLC fluconazol đánh giá khả giải phóng sử dụng lượng lipid lỏng (acid oleic) hệ tăng dần 0; 2; 20; 100%, nồng độ FLZ mẫu Tiến hành thử giải phóng theo phương pháp trình bày mục 2.2.3.6 % F L Z gi ải p hó 80 70 dd 60 NLC-F 0% 50 NLC-F 2% 40 30 NLC-F 20% 20 10 -1 NLC-F 100% 14 19 24 Thời gian (giờ) Hình 3.15: Phần trăm fluconazol giải phóng qua màng thẩm tích (DD: dung dịch fluconazol, NLC-F 0; 2; 20 100: hệ NLC fluconazol sử dụng 0; 2; 20 100% lipid lỏng) Kết thử giải phóng qua màng thẩm tích cho thấy lượng FLZ giải phóng từ dung dịch thấm qua màng thẩm tích lớn (đạt gần 80% sau 24 giờ) Các mẫu NLC fluconazol thể khả kiểm sốt giải phóng FLZ mức độ khác Trong đó, NLC-F 2% lipid lỏng kiểm sốt giải phóng tốt (khoảng 34% dược chất giải phóng khỏi hệ sau 24 giờ); hệ NLC fluconazol lại kiểm sốt giải phóng 3.3.5.3 Sơ đánh giá khả giải phóng dược chất từ NLC fluconazol qua da thỏ Khả giải phóng dược chất từ NLC fluconazol qua da thỏ tiến hành theo phương pháp trình bày mục 2.2.3.6 80 70 % F L Z gi ải p hó dd 60 NLC-F 0% 50 NLC-F 2% 40 NLC-F 20% 30 NLC-F 100% 20 10 -1 14 19 24 Thời gian (giờ) Hình 3.16: Phần trăm fluconazol giải phóng qua da thỏ (DD: dung dịch fluconazol, NLC-F 0; 2; 20 100: hệ NLC fluconazol sử dụng 0; 2; 20 100% lipid lỏng) Kết thử giải phóng qua da thỏ cho thấy lượng FLZ giải phóng từ tất mẫu giảm Nguyên nhân cấu trúc da thỏ có nhiều rào cản sinh lý phức tạp, làm giảm tính thấm dược chất Khả giải phóng FLZ từ dung dịch FLZ giảm xuống cịn khoảng 60% (so với thử qua màng thẩm tích 80%), cao mẫu nano lipid So với mẫu dung dịch, tất mẫu SLN NLC fluconazol có khả kiểm sốt giải phóng Phần trăm dược chất giải phóng từ hệ NLC fluconazol phụ thuộc vào nồng độ lipid lỏng sử dụng công thức Cụ thể là, nồng độ lipid lỏng sử dụng tăng dần từ 2; 20 đến 100%, phần trăm dược chất giải phóng từ hệ NLC fluconazol tăng dần (lần lượt 25; 30 45% dược chất giải phóng khỏi hệ sau 24 giờ) NLC-F 2% có khả giải phóng dược chất chậm Nguyên nhân nồng độ 2% lipid lỏng vừa đủ để tạo khoảng “không gian trống” cần thiết cho dược chất Nồng độ lipid lỏng 20% lớn, tạo linh động, ổn định cấu trúc lipid so với sử dụng 2% lipid lỏng nên phần trăm dược chất giải phóng nhiều Lượng fluconazol giải phóng từ NLC fluconazol 0% 100% tương đương Nguyên nhân SLN có tượng tháo thuốc khỏi hệ [10], fluconazol khơng phân bố vào lõi lipid mà nằm ngồi pha nước NLC-F 100% nano nhũ tương nên linh động khơng có khả kiểm sốt giải phóng Hình 3.17: Hiện tượng tháo thuốc khỏi hệ tiểu phân nano lipid rắn (SLN) Nhìn chung, NLC fluconazol có khả kiểm sốt giải phóng tốt SLN Tùy thuộc vào mục đích chế phẩm sử dụng mà lựa chọn nồng độ lipid lỏng cho phù hợp Với mục đích ứng dụng vào bào chế dạng thuốc hấp thu qua da niêm mạc, nồng độ lipid lỏng 20% lựa chọn để bào chế NLC fluconazol KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN  Sau thời gian nghiên cứu, khảo sát, đánh giá ảnh hưởng yếu tố kĩ thuật tá dược đến hình thành hệ, NLC fluconazol bào chế với thành phần tá dược điều kiện kĩ thuật sau: Pha dầu Pha nước Alcol cetylic 1,60 g Acid oleic 0,40 g Tween 40 3,00 g Nước 100 ml 0,40 g Fluconazol - Phương pháp đun chảy nhũ hóa sử dụng kỹ thuật siêu âm kết hợp khuấy từ + Tần số 30.000 Hz, biên độ 100 µm Phương pháp bào chế + Thời gian : 15 phút o - Duy trì nhiệt độ 60 – 70 C giai đoạn nhũ hóa - Làm lạnh nhanh kết hợp với khuấy từ nhiệt độ phịng  Hệ NLC fluconazol mang đặc tính sau: - KTTP trung bình khoảng từ 100 đến 200 nm với PDI < 0,2 - Tiểu phân nano có dạng hình cầu, dược chất phân tán dạng vơ định hình cốt lipid - Thử nghiệm in vitro: hệ tiểu phân nano lipid FLZ có khả kiểm sốt giải phóng dược chất, mức độ kiểm sốt tùy thuộc vào nồng độ lipid lỏng sử dụng công thức bào chế Trong đó, NLC fluconazol sử dụng 2% lipid lỏng có khả giải phóng dược chất chậm ĐỀ XUẤT Do điều kiện hạn chế thiết bị máy móc thời gian thực nên kết khóa luận bước đầu chế tạo hệ tiểu phân nano lipid fluconazol phương pháp đun chảy nhũ hóa sử dụng kỹ thuật siêu âm Trên sở đó, đề tài đưa số đề xuất sau: - Tiếp tục nghiên cứu yếu tố khác ảnh hưởng đến hình thành ổn định hệ tiểu phân nano fluconazol - Tiến hành theo dõi đánh giá độ ổn định hệ điều kiện khác nhau: nhiệt độ phòng chống ẩm khơng chống ẩm, tủ vi khí hậu, ngồi trời - Tiếp tục nghiên cứu đưa NLC fluconazol vào dạng bào chế để khai thác ưu điểm NLC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ y tế (2007), Dược lý học, tập 2, NXB Y học, Hà Nội, pp 221-229 Bộ y tế (2007), Hoá dược tập 2, NXB Y học, Hà Nội, pp 188-198 Bộ y tế (2002), Dược thư Quốc gia Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội, pp 464467 Ngô Thị Thu Trang (2012), Nghiên cứu bào chế tiểu phân nano lipid rắn chứa Vitamin K1, ứng dụng vào dạng gel, Luận văn thạc sĩ, Đại học Dược Hà Nội Tiếng Anh Beck Ruy, Guterres Silvia, Pohlmann Adriana (2011), Nanocosmetics and Nanomedicines: New Approaches for Skin Care, Springer, pp 69-86, 101122 Bhalekar Mangesh R, Pokharkar Varsha, Madgulkar Ashwini, et al (2009), "Preparation and evaluation of miconazole nitrate-loaded solid lipid nanoparticles for topical delivery", AAPS PharmSciTech, 10(1), pp 289-296 British Pharmacopoeia (2009), British Pharmacopoeia, pp 2534 - 2539 Caira Mino R, Alkhamis Khouloud A, Obaidat Rana M (2004), "Preparation and crystal characterization of a polymorph, a monohydrate, and an ethyl acetate solvate of the antifungal fluconazole", J Pharm Sci, 93(3), pp 601611 Corrêa Josilene Chaves Ruela, Chaves Josilene, Corrêa Ruela (2011), "Stability study of fluconazole applying validated bioassay and stabilityindicating LC methods", J Ana Bioana Tech 10 Das Surajit, Ng Wai Kiong, Tan Reginald BH (2012), "Are nanostructured lipid carriers (NLCs) better than solid lipid nanoparticles (SLNs): Development, characterizations and comparative evaluations of clotrimazoleloaded SLNs and NLCs?", Eur J of Pharm Sci., 47, pp 139-151 11 Gambhire Makarand Suresh, Bhalekar Mangesh Ramesh, Gambhire Vaishali Makarand (2011), "Statistical optimization of dithranol-loaded solid lipid nanoparticles using factorial design", Brazilian J Pharma Sci., 47(3), pp 503-511 12 Ghadiri Maryam, Vatanara Alireza, Doroud Delaram, et al (2011), "Paromomycin loaded solid lipid nanoparticles: Characterization of production parameters", Biotechnology and bioprocess engineering, 16(3), pp 617-623 13 Gupta Madhu, Vyas Suresh P (2012), "Development, characterization and in vivo assessment of effective lipidic nanoparticles for dermal delivery of fluconazole against cutaneous candidiasis", Chemistry and Physics of Lipids, 165(4), pp 454-461 14 Helgason T, Awad TS, Kristbergsson K, et al (2009), "Effect of surfactant surface coverage on formation of solid lipid nanoparticles (SLN)", Journal of colloid and interface science, 334(1), pp 75-81 15 Hu FQ, Yuan H, Zhang HH, et al (2002), "Preparation of solid lipid nanoparticles with clobetasol propionate by a novel solvent diffusion method in aqueous system and physicochemical characterization", International Journal of Pharmaceutics, 239(1), pp 121-128 16 Hu Fu-Qiang, Jiang Sai-Ping, Du Yong-Zhong, et al (2006), "Preparation and characteristics of monostearin nanostructured lipid carriers", International Journal of Pharmaceutics, 314(1), pp 83-89 17 Hu Fu-Qiang, Jiang Sai-Ping, Du Yong-Zhong, et al (2005), "Preparation and characterization of stearic acid nanostructured lipid carriers by solvent diffusion method in an aqueous system", Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 45(3), pp 167-173 18 Jensen Louise B, Magnussson Emily, Gunnarsson Linda, et al (2010), "Corticosteroid solubility and lipid polarity control release from solid lipid nanoparticles", International Journal of Pharmaceutics, 390(1), pp 53-60 19 Kim Jin-Ki, Park Jeong-Sook, Kim Chong-Kook (2010), "Development of a binary lipid nanoparticles formulation of itraconazole for parenteral administration and controlled release", International Journal of Pharmaceutics, 383(1), pp 209-215 20 Liu Chi-Hsien, Wu Chao-Ting, Fang Jia-You (2010), "Characterization and formulation optimization of solid lipid nanoparticles in vitamin K1 delivery", Drug Development and Industrial Pharmacy, 36(7), pp 751-761 21 Mehnert Wolfgang, Mäder Karsten (2012), "Solid lipid nanoparticles production, characterization and applications", Advanced drug delivery reviews, 64, pp 83-101 22 Müller Rainer H, Mäder Karsten, Gohla Sven (2000), "Solid lipid nanoparticles (SLN) for controlled drug delivery–a review of the state of the art", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 50(1), pp 161-177 23 Pardeike Jana, Hommoss Aiman, Müller Rainer H (2009), "Lipid nanoparticles (SLN, NLC) in cosmetic and pharmaceutical dermal products", International Journal of Pharmaceutics, 366(1), pp 170-184 24 Parhi Rabinarayan, Suresh Padilama (2012), "Preparation and Characterization of Solid Lipid Nanoparticles-A Review", Current Drug Discovery Technologies, 9, pp 2-16 25 Sanna Vanna, Caria Giuseppe, Mariani Alberto (2010), "Effect of lipid nanoparticles containing fatty alcohols having different chain length on the ex vivo skin permeability of Econazole nitrate", Powder Technology, 201(1), pp 32-36 26 Shah Kumar A, Date Abhijit A, Joshi Medha D, et al (2007), "Solid lipid nanoparticles (SLN) of tretinoin: potential in topical delivery", International Journal of Pharmaceutics, 345(1), pp 163-171 27 Sinha Vivek Ranjan, Srivastava Saurabh, Goel Honey, et al (2011), "Solid Lipid Nanoparticles (SLN’S)–Trends and Implications in Drug Targeting", International Journal of Advances in Pharmaceutical Sciences, 1(3), pp 212-238 28 The United States Pharmacopeial (2009), USP 32 29 Triplett Michael David (2004), Enabling solid lipid nanoparticle drug delivery technology by investigating improved production techniques, Ohio State University 30 Wang Ruihua, Li Longnian, Wang Bing, et al (2012), "FK506-loaded solid lipid nanoparticles: Preparation, characterization and in vitro transdermal drug delivery", African J Pharma Pharmacol, 6(12), pp 904-13 31 Wissing SA, Kayser O, Müller RH (2004), "Solid lipid nanoparticles for parenteral drug delivery", Advanced drug delivery reviews, 56(9), pp 12571272 PHỤ LỤC Phụ lục 3.1: Kết đo KTTP, PDI mẫu khảo sát thời gian siêu âm Thời KTTP (nm) PDI (phút) 302,60 0,577 225,60 0,436 197,10 0,278 10 174,00 0,299 gian Thời KTTP (nm) PDI (phút) 15 183,55 0,2195 20 171,30 0,200 25 180,45 0,201 30 178,00 0,201 gian Phụ lục 3.2: Ảnh hưởng trình làm lạnh tới KTTP hệ NLC fluconazol CDH Tween 40 Mới Mẫu KTTP (nm) PDI Làm Natri lauryl sulfat Làm Mới Làm Làm lạnh bào lạnh lạnh bào lạnh chậm chếT0 nhanh T1 chậm T2 chế N0 nhanh N1 N2 92,18 122,9 284,9 187,3 190,1 208,9 0,266 0,29 0,501 0,212 0,546 0,269 Phụ lục 3.3: Ảnh hưởng tá dược lipid rắn tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol Loại lipid lỏng Labrafac Triglycerid Parafin lỏng Acid oleic KTTP (nm) 98,81 83,93 90,46 147,60 PDI 0,213 0,145 0,154 0,219 Zeta (mV) - 22,72 - 18,79 - 17,81 - 24,70 Phụ lục 3.4: Ảnh hưởng loại chất diện hoạt tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol CDH KTTP (nm) PDI Thế Zeta (mV) Tween 40 153,80 0,208 -24,07 Tween 20 218,80 0,387 -30,60 Tween 80 244,00 0,729 -60,55 Tween 80 : Span 80 = : 165,55 0,315 -26,15 Cremophor RH40 196,75 0,353 -19,30 Poloxame 188 727,00 0,975 -21,90 Benzalkonium clorid 409,00 0,657 + 46,90 NaDC 338,30 0,729 -60,55 NaLS 232,25 0,212 -48,10 Tween 20 : Tween 80 = 1:1 409,80 0,744 -29,10 Tween 20: Span = 14:1 224,00 0,565 -28,65 Poloxame 188 : Span 80 = 1:1 133,50 0,228 -30,80 Natri lauryl sulfat : Span 80 = 1:2 203,95 0,197 -56,00 Phụ lục 3.5: Ảnh hưởng lipid lỏng tới KTTP Zeta hệ NLC fluconazol Loại lipid lỏng Labrafac Triglycerid Parafin lỏng Acid oleic KTTP (nm) 98,81 83,93 90,46 147,60 PDI 0,213 0,145 0,154 0,219 Zeta (mV) - 22,72 - 18,79 - 17,81 - 24,70 Phụ lục 3.6: Ảnh hưởng hỗn hợp lipid sử dụng Nồng độ lipid ngày tháng KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI 1% 98.08 0.161 104.1 0.204 2% 141.70 0.200 151.9 0.145 5% 174.40 0.169 454.5 0.707 7% 195.6 0.274 277.4 0.373 10% 215.2 0.287 434.7 0.57 Nồng độ lipid 1% 2% 5% 7% 10% Độ nhớt sau bào chế (cps) 4,8 7,5 15,76 5200 50000 Độ nhớt sau tuần (cps) 15 20 3000 6400 25000 Phụ lục 3.7: Phổ DSC ... sau: Bào chế hệ nano lipid chứa fluconazol Sơ đánh giá số đặc tính hệ nano lipid chứa fluconazol CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VÀI NÉT VỀ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID 1.1.1 Cấu tạo Hệ đưa thuốc có cấu trúc nano. .. chất mang lipid vào nghiên cứu bào chế mở hướng giúp làm kiểm sốt giải phóng, tăng tính thấm, làm tăng sinh khả dụng chế phẩm Vì vậy, đề tài ? ?Nghiên cứu bào chế hệ nano lipid rắn chứa fluconazol? ??... hạn chế hệ tiểu phân nano lipid Mặc dù có nhiều ưu điểm nêu hệ nano lipid gặp số hạn chế trình bào chế bảo quản 1.1.4.1 Sự phân huỷ dược chất hình thành hệ nano lipid Các phương pháp bào chế