Phenylpropano và flavonol glycosides được cô lập từ lá tươi cây trinh nữ hoàng cung

Phenylpropano và flavonol glycosides được cô lập từ lá tươi cây trinh nữ hoàng cung.

162Tạp chí Hóa học, T. 43 (2), Tr. 162 - 164, 2005 PHENYLPROPANOIt và flavonol glycosides ĐƯợC CÔ LậP Từ Lá TƯƠI CÂY TRINH Nữ HOàNG CUNG (CRINUM LATIFOLIUM L.) Đến Tòa soạn 3-3-2004 Mai Đình Trị, Nguyễn Công HoPhân Viện Hóa học các hợp chất Thiên nhiên tại Tp. Hồ Chí Minh SUMMARY From the ethanolic extract of the fresh leaves of Crinum latifolium L. four compounds: methyl (E)-p-hydroxycinnamate, ethyl (E)-3,4-dihydroxycinnamate, kaempferol-3-O--D-glucopyrano-side, and kaempferol-3-4-di-O--D-glucopyranoside were isolated and identified. Their structures were established by analysis of chemical and spectral evidence. I - Mở ĐầU Cây Trinh nữ hong cung có tên khoa học lCrinum latifolium L. th"ờng mọc hoang khắp khu vực Đông Nam á. Riêng ở Việt Nam cây đ"ợc tìm thấy ở các tỉnh nh" Quảng Nam, Bình Thuận, Đồng Nai, B Rịa Vũng Tu Về thnh phần hóa học, hầu hết các nhkhoa học ở ấn Độ, Nhật Bản, cũng nh" Việt Nam phần lớn nghiên cứu thnh phần chính lalkaloit, một số thnh phần ny l những l hợp chất có khả năng kháng khối u. Nh"ng dịch chiết ancol cho đến nay vẫn ch"a đ"ợc nghiên cứu nhiều. Để tìm hiểu kỹ hơn về phân đoạn ny, chúng tôi tiến hnh khảo sát các hợp chất kháng oxi hóa của dịch chiết EtOH từ lá Trinh nữ hong cung, đặc biệt l thnh phần trong lá t"ơi. II - THựC NGHIệM 1. Thiết bị Sắc ký lớp mỏng (TLC): Loại tráng sẵn silicagel 60F254 (Merck), hiện hình bằng đèn UV v hơi iot, FeCl3/MeOH, H2SO410%/Et-OH Sắc ký cột: Cột sắc ký 15ì80 cm, chất hấp phụ sử dụng l silicagel 0,04 - 0,063 mm, diaion HP-20, silicagel RP-18. Khối phổ: Phổ MS đ"ợc ghi trên máy Hewlett Packard 5989B MS. Phổ NMR: 1H-NMR v13C-NMR v DEPT ghi trên máy Brucker AM 400, 500 MHz v 125MHz. Phổ IR: đ"ợc ghi trên máy BRUKER-IFS 48 CARLO ERBA-GC 6130. 2. Nguyên liệu v phơng pháp Nguyên liệu lá t"ơi cây Trinh Nữ Hong Cung đ"ợc thu hái tại v"ờn cây thuốc Phân viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên, rửa sạch loại bỏ những phần bị sâu bọ ăn. Tiến hnh xay lá t"ơi 5 kg với 10 lít EtOH 96%, lọc thu dịch chiết. Cô dung môi d"ới áp suất thấp còn 1/4 thể tích. Lần l"ợt tận trích với ete dầu hỏa, v CHCl3thu đ"ợc cao ete dầu hỏa (3 g), v cao CHCl3(7 g). Phần n"ớc cái cô cạn d"ới áp suất thấp thu đ"ợc cao EtOH (20g) Để tách riêng các hợp chất chúng tôi tiến hnh tinh chế cao CHCl3v cao EtOH bằng các ph"ơng pháp sắc ký cột sử dụng các chất nhồi 163cột: Diaion HP-20, silicagel RP-18, silicagel F254 v kết hợp sắc ký bản mỏng điều chế với các hệ dung môi khác nhau, chúng tôi cô lập đ"ợc 4 hợp chất từ hai cao trên: (E)-p-hydroxycinnamat metyl; (E)-3,4-dihiđroxycin-namat etyl, kaempferol-3-O--D-glucopyranosit v kaempferol-3-4-di-O--D-glucopyranosit. Những hợp chất trên cho phản ứng d"ơng tính với thuốc thử của hợp chất phenolic, cấu trúc đ"ợc khảo sát bằng các ph"ơng pháp phổ nghiệm. III - KếT QUả V THảO LUậN Thực hiện sắc ký cột trên cao CHCl32 g với chất nhồi cột l silicagel với hệ dung môi giải ly l CHCl3v MeOH v hỗn hợp của chúng thu đ"ợc 2 hợp chất sau: -(E)-p-hidroxycinnamat metyl: (dung ly CHCl3: MeOH, 95 : 5). Bột vô định hình mutrắng, 1 vết Rf= 0,55 (CHCl3: MeOH 9 : 1), điểm nóng chảy 124 - 127oCKhối phổ cho thấy đỉnh ion phân tử ứng với m/z 178 (M +), 147, 119, 91, 65. Phổ IR (KBr) ( cm-1) cho các đỉnh hấp thu ứng với dao động của nhóm O-H (3398), C=O tiếp cách (1708), C=C vòng thơm (1600, 1513) v C-O (1034). Phổ 1H-NMR (, ppm) dung môi CDCl3cho thấy xuất hiện các pic ở 3,79 (s, O-CH3); 6,28 (d, J = 15 Hz, H-8); 7,62 (d, J = 15 Hz, H-7); 7,41 (d, J = 8,5 Hz, H-2, H-6); 6,82 (d, J = 8,5 Hz, H-3, H-5). Phổ 13C-NMR (, ppm) dung môi CDCl3cho thấy xuất hiện các pic cộng h"ởng ứng với các vị trí 168 (C-9), 157,8 (C-4), 144,6 (C-7), 130,0 (C-2, C-6), 126 (C-1), 115,9 (C-3, C-5), 115,2 (C-8), 51,6 (C-10). -(E)-3,4-dihiđroxy cinnamat etyl: (dung ly CHCl3: MeOH = 95 : 10), bột vô định hình mu vng nhạt, 1 vết Rf= 0,44 (CHCl3: MeOH = 9 : 1), điểm nóng chảy 154 - 156oC. Khối phổ cho thấy pic ion phân tử ứng với m/z: 208 (M+), 180, 163, 136, 117, 89, 77. Phổ IR (KBr) ( cm-1) cho các đỉnh hấp thu ở 3452 (OH), 1662 (C=O), 1602, 1533 (C=C vòng thơm), 1038 (C-O). Phổ 1H-NMR (, ppm) dung môi axeton d-6 cho thấy xuất hiện các tín hiệu cộng h"ởng của các proton ở 1,28 (t, 3H-11); 4,20 (q, 2H-10); 6,28 (d, J = 15,5 Hz, H-8); 7,51 (d, J = 15,5 Hz, H-7); 6,87 (d, J = 8 Hz, H-5); 7,04 (dd, J = 2 Hz, 8 Hz, H-6); 7,15 (d, J = 2 Hz, H-2). Phổ 13C-NMR (, ppm) dung môi axeton d-6 cho thấy xuất hiện các pic ở 167,3 (C-9); 148,7 (C-4); 146,3 (C-3); 145,5 (C-7); 127,6 (C-1); 122,4 (C-6); 116,3 (C-8); 115,7 (C-2); 115,1 (C-5); 60,4 (C-10); 14,6 (C-11). Từ cao EtOH tiến hnh sắc ký cột silicagel dung ly CHCl3, MeOH v H2O với độ phân cực tăng dần, ở phân đoạn CHCl3: MeOH : H2O =65 : 35 : 2 thu đ"ợc hợp chất l kaempferol-3-O--D-glucopyranosit, phân đoạn CHCl3: MeOH : H2O = 65 : 35 : 4 thu đ"ợc hợp chất lkaempferol-3-4-di-O--D-glucopyranosit. Cấu trúc của chúng đ"ợc xác định bằng các ph"ơngpháp phổ. - Kaempferol-3-O--D-glucopyranosit: thu đ"ợc d"ới dạng bột định hình mu vngnhạt, 1 vết Rf= 0,49 (CHCl3: MeOH : H2O = 65: 35 : 10). Phổ IR (KBr) ( cm-1) cho các đỉnh hấp thu ở 3430 (OH); 1658 (C=O); 1608, 1506 (C=C vòng thơm); 1061 (C-O). Phổ 1H-NMR (, ppm) dung môi MeOD cho thấy xuất hiện các pic ở: 6,42 (d, J = 2 Hz, H-8); 6,23 (d, J = 2 Hz, H-6); 6,90 (d, J = 8,5 Hz, H-3 v H-5); 8,08 (d, J = 8,5 Hz, H-2 v H-6); 5,27(d, 7,5 Hz, H-1); 3,20 (H-2); 3,45 (H-3); 3,41 (H-4); 3,48 (H-5), 3,69 v 3,53(2H-6). Phổ 13C-NMR (, ppm) dung môi MeOD cho thấy có 21 cacbon trong đó : 9C tứ cấp, 11 CH v 1CH2xuất hiện các tín hiệu cộng h"ởng ở các vị trí: 179,5 (C-4); 166,0 (C-7); 163,0 (C-5); 161,5 (C-4); 159,1 (C-2); 158,5 (C-9); 135,4 (C-3); 132,2 (C-2 v C-6); 122,8 (C-1); 116,0 (C-3 v C-5); 105,7 (C-10); 99,9 (C-6); 94,7 (C-8). Phần đ"ờng xuất hiện các pic ở: 104,1 (C-1); 75,7 (C-2); 78,0 (C-3); 71,3 (C-4); 78,4 (C-5) v 62,6 (C-6). 164- Kaempferol-3-4-di-O--D-glucopyrano-sit: thu đ"ợc d"ới dạng bột định hình mu vngnhạt, 1 vết Rf= 0,34 (CHCl3: MeOH : H2O = 65: 35 : 10). Phổ IR (KBr) (, cm-1) cho các đỉnh hấp thu ở 3397 (OH); 1656 (C=O); 1603, 1501 (C=C vòng thơm); 1074 (C-O). Phổ 1H-NMR (, ppm) dung môi MeOD cho thấy xuất hiện các pic ở: 6,42 (d, J = 2 Hz, H-8); 6,23 (d, J = 2 Hz, H-6); 7,21 (d, J = 8,5 Hz, H-3 v H-5); 8,14 (d, J = 8,5 Hz, H-2 v H-6); 5,27 (d, 7,5 Hz, H-1); 5,07 (d, 7,5 Hz, H-1) 3,23 - 3,80 (H của phần đ"ờng gluco). Phổ 13C-NMR (, ppm) dung môi MeOD cho thấy có 27 cacbon trong đó: 9C tứ cấp, 11 CH v 1CH2xuất hiện các mũi ở các vị trí: 179,5 (C-4); 166,3 (C-7); 164,7 (C-5); 161,0 (C-4); 158,6 (C-2); 158,4 (C-9); 135,9 (C-3); 132,4 (C-2 v C-6); 122,8 (C-1); 116,1 (C-3 v C-5); 105,8 (C-10); 100,1 (C-6); 94,8 (C-8). Phần đ"ờng xuất hiện các tín hiệu cộng h"ởng ở các vị trí: 104,1 (C-1); 75,6 (C-2); 78,2 (C-3); 71,3 (C-4); 78,4 (C-5) v 62,5 (C-6); 103,2 (C-1); 74,7 (C-2); 77,9 (C-3); 72,2 (C-4); 78,3 (C-5); 62,4 (C-6). 123456789101'2'3'4'5'6'OOOHHOOHOOHOOHHOHHHOHHH1''2''3''4''5''6'' Kaempferol-3-O--D-glucopyranosit OOOHHOOOOHOOHHOHHHOHHH123456789101'2'3'4'5'6'1''2''3''4''5''6''OHOOHHOHHHHOHH1'''2'''3'''4'''5'''6''' Kaempferol-3-4-di-O--D-glucopyranosit C=C C OOCH3HOHH12345678910 C=C C OOCH2HOHHHOCH31245678910113(E)-p-hydroxycinnamat metyl (E)-3,4-dihiđroxycinnamat etyl IV - KếT LUậN Từ lá t"ơi cây Trinh nữ hong cung, lần đầu tiên chúng tôi đ~ cô lập đ"ợc 4 hợp chất (E)-p-hydroxycinnamat metyl, (E)-3,4-dihidro-xycinnamat etyl, kaempferol-3-O--D-gluco-pyranosit v kaempferol-3-4-di-O--D-gluco-pyranosit. Cấu trúc các hợp chất đ"ợc xác định bằng các ph"ơng pháp hóa lý hiện đại. Các hợp chất đựoc trích từ lá t"ơi v trong dung môi Et-OH lo~ng, đây l những hợp chất có thể giữ vai trò quan trọng trong điều trị, chúng có nhiều trong n"ớc sắc uống theo ph"ơng pháp y học cổ truyền. Công trình nAy đCợc hoAn thAnh với sự hỗ trợ kinh phí của ChCơng trình nghiên cứu cơ bản trong lĩnh vực khoa học tự nhiên. TI LIệU THAM KHảo 1. E. A. Stroev, V. G. Makarova. Moscow, P. 243 - 256 (1998). 2. Vlatka Vajs, Dragoslav Jeremic. Phyto-chemistry, 17, No. 7, P. 1659 - 1660 (1974). 3. Tadao Kondo, et al. Phytochem., 51, P. 1113 - 1119 (1999). 4. V. Seidel, et al. Planta Medica, 62, P. 186 - 187 (1996). 5. YingmeiHan, Sansei Nishibe. Phytochem. No. 4, Vol. 58, P. 577 - 580 (2001). 6. Rikke Norbek, Tadao Kondo. Phytochem., No. 4, Vol. 58, P. 1113 - 1119 (2001). 165 . học, T. 43 (2), Tr. 162 - 164, 2005 PHENYLPROPANOIt và flavonol glycosides ĐƯợC CÔ LậP Từ Lá TƯƠI CÂY TRINH Nữ HOàNG CUNG (CRINUM LATIFOLIUM L.) Đến Tòa. (E)-3,4-dihiđroxycinnamat etyl IV - KếT LUậN Từ lá t"ơi cây Trinh nữ hong cung, lần đầu tiên chúng tôi đ~ cô lập đ"ợc 4 hợp chất (E)-p-hydroxycinnamat