Những biến đổi bệnh lý trong mô và tế bào tổ chức gan tụy được ghi nhận như: hoại tử từ cục bộ đến diện rộng ở mô gan tụy, các tế bào biểu mô bị hoại tử và bị bong tróc làm cho cá[r]
(1)BỆNH LÝ CỦA HỘI CHỨNG HOẠI TƯ GAN TỤY HOẠI TỬ Ở TÔM CHÂN TRẮNG (LITOPENAEUS VANNAMEI) NUÔI TẠI NINH THUẬN
Nguyễn Thị Thùy Giang, Phạm Quốc Hùng Viện Nuôi trồng thủy sản, Trường Đại học Nha Trang TĨM TẮT
Tơm chân trắng ni thương phẩm tỉnh Ninh Thuận bị hội chứng hoại tử gan tụy với dấu hiệu bất thường như: gan tụy teo nhỏ, chai cứng, màu sắc gan tụy đen tối nhợt nhạt, ruột rỗng, phân trắng… Tôm bị bệnh chết từ rải rác đến hàng loạt, điều gây tổn thất lớn cho người nuôi tôm Nghiên cứu mô bệnh học tiến hành 40 mẫu tôm bị bệnh 10 mẫu tôm khỏe thu từ ao nuôi tỉnh Ninh Thuận Kết nghiên cứu cho thấy mô gan tụy tôm bệnh bị hoại tử nghiêm trọng, thể dấu hiệu bệnh lý rõ ràng đa dạng tùy vào giai đoạn mức độ nặng nhẹ bệnh Sự hoại tử biến dạng tế bào ống mơ gan tụy diễn vùng toàn gan tụy Sự biến tế bào B R ống mơ gan tụy đặc điểm điển hình ghi nhận Các tế bào biểu mô gan tụy có tượng bong tróc rơi vào bên ống mô gan Sự hoại tử biến tế bào biểu mô gan tụy để lại ống gan tụy trống rỗng biến dạng cấu trúc toàn gan tụy Đồng thời, quan sát thấy xâm nhập bao quanh tác tế bào máu vùng mô bị thương tổn ổ viêm Khơng tìm thấy biến đổi bất thường quan khác tơm Do đó, tổn thương nghiêm trọng tổ chức gan tụy tơm ngun nhân gây chết tôm Không phát thể vùi virus biểu mô gan tụy mẫu tôm bị bệnh
Từ khóa: Mơ bệnh học, Tơm chân trắng, Hội chứng hoại tử gan tụy, Ninh Thuận
Pathological features of hepatopancreas necrosis syndrome in farmed white-leg shrimp (Litopenaeus vannamei) in Ninh Thuan province
Nguyen Thi Thuy Giang, Pham Quoc Hung
SUMMARY
The farmed white leg shrimp in Ninh Thuan province was died with the un-normal clinic signs such as: empty gut, anorexia, pale, white feces The shrimp mortality rate could be up to 100%, this caused the heavy loss for the shrimp farmers Histological study was conducted on 40 diseased and 10 healthy shrimps in order to identify the pathological signs The studied result showed that severe necrosis inside hepatopancreas was noted in all of the diseased shrimps with the clearly biological signs basing on the diseased stage and level The abnormalities of hepatopancreas such as: disappearance of the hepatic cells: type B, F and R, sloughing of the epithelial cells, gathering of the blood cells surrounding the lesions and inflammation areas were observed The abnormalities were not found in other organs of the diseased shrimps The serious lesions in hepatopancreas could be the cause of mortality Inclusion body was not found in the epithelial cells of hepatopancreas of the diseased shrimps
Keywords: Histopathology, Litopenaeus vannamei, Hepatopancreatic necrosis syndrome, Ninh Thuan province
I ĐẶT VẤN ĐỀ
Hội chứng hoại tử gan tụy thường gây chết từ rải rác đến hàng loạt tôm chân trắng nuôi
(2)2.1 Vật liệu
Bằng phương pháp thu mẫu chọn lọc, 40 mẫu tôm chân trắng (25-30 con/mẫu) bị hội chứng gan tụy thu từ 40 ao bị bệnh Ninh Thuận với 10 mẫu tơm khỏe khơng có dấu hiệu bệnh gan tụy Khi thu mẫu, lựa chọn tôm bị bệnh có bộc lộ dấu hiệu bất thường: lờ đờ, màu sắc thể thay đổi, bỏ ăn, ruột rỗng, gan tụy biến đổi hình dạng màu sắc, sống 2-3 ml dung dịch Davidson (cồn 95%: 330 ml, formol 40%: 220 ml, acid acetic: 115 ml nước cất 335 ml)
Phương pháp mô bệnh học ứng dụng cho động vật giáp xác giới thiệu Lightner, 1996 sử dụng nghiên cứu để xác định biến đổi bệnh lý mô tế bào gan tụy tôm bệnh So sánh bệnh lý với mô tôm khỏe biến đổi đặc trưng gan tụy tôm bị loại bệnh khác công bố nhiều tác giả (Lightner, 1996; Hasson et al., 2009; Lightner et al., 2012; Tran Loc et al., 2013; Flegel & Lo, 2014; Joshi et al., 2014 Nunan et al., 2014) Các bước tiến hành mơ tả hình
III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1 Dấu hiệu bệnh
Hội chứng gan tụy hoại tử xuất phổ biến vùng nuôi tôm Ninh Thuận nguyên nhân gây thất thu cho nhiều hộ nuôi tôm địa phương vài năm gần Khi gặp vấn đề gan tụy, tôm chân trắng thường
bộc lộ số dấu hiệu bất thường như: bắt mồi, bỏ ăn nên đường ruột khơng có đứt đoạn, tổ chức gan tụy chuyển màu trắng nhợt, khối gan tụy bị teo nhỏ, chai cứng hoại tử, tôm bệnh thường chết rải rác chết hàng loạt tùy theo ao (hình 2) Bệnh gặp nhiều tơm ni tháng đầu sau thả giống, nhiên có số ao xuất bệnh muộn hơn, xảy vào cuối tháng nuôi thứ
(3)3.2 Các biến đổi bệnh lý mô tế bào gan tụy
Tổ chức gan tụy giữ vai trị quan trọng việc trì sống tơm chân trắng: tiêu hóa thức ăn để trì sống, giải độc để bảo vệ thể… Do vậy, thương tổn tổ chức này, virus, vi khuẩn, ký sinh trùng độc tố, ảnh hưởng tới sống cịn tôm Khi tôm chân trắng bị hội chứng gan tụy hoại tử, bệnh lý mô tế bào thể rõ rệt tổ chức gan tụy tôm bệnh 3.2.1 Mô học tổ chức gan tụy tơm he bình thường
Tổ chức gan tụy tơm he nằm phần đầu ngực, có hình dạng dâu tây chiếm thể tích đáng kể phần đầu Ở trạng thái bình thường, tổ chức gan tụy tơm he có màu nâu vàng Gan tụy tạo nên biểu mô dạng hình ống mơ liên kết nối ống gan lại tạo nên chặt chẽ tổ chức gan tụy Biểu mơ hình ống tổ chức gan tụy tạo nên bới số loại tế bào: tế bào B có chức tiết men tiêu hóa, tế bào R có chức dự trữ, tế bào F có chức chuyển tiếp tế bào E tập trung đầu mút biểu mô dạng ống (Flegel, 2006) (Hình 3)
Ruột rỗng có thức ăn Gan tụy teo nhỏ, nhợt nhạt, dần sắc tố nâu vàng, chuyển mầu trắng
Hình Hội chứng hoại tử gan tụy tơm chân trắng
Biểu mơ gan tụy bình thường cắt ngang Biểu mơ gan tụy bình thường cắt dọc
Hình Cấu trúc mơ tế bào gan tụy tơm chân trắng bình thường
3.2.2 Bệnh lý mô và tế bào gan tụy tôm bị hội chứng gan tụy
100% mẫu tôm bị hội chứng gan tụy (40
(4)chết cho tôm Sự hoại tử quan gan tụy
một đặc điểm bệnh lý quan trọng tìm thấy thể có khơng có cơng tế bào máu
Hoại tử xảy đầu mút vài biểu mơ hình ống, có bong tróc tế bào, biến tế bào B F, khơng có tế bào máu cơng (mũi tên trên) có công tế bào máu (mũi tên dưới)
Một vài biểu mơ hình ống khơng cịn cấu trúc tế bào tế bào máu bao quanh vị trí này
Hình Mơ gan tụy bị hoại tử cục (H&E, 200x)
Sự hoại tử nghiêm trọng tổ chức gan tụy với mức độ bệnh lý khác nhau: ống gan co nhỏ thể viêm teo; tế bào biểu mơ bị bong tróc hàng loạt rơi vào khoảng rỗng ống gan; tế bào biểu mơ ống gan biến mất, khơng cịn quan sát loại tế bào B, R F, để lại hàng loạt biểu mơ hình ống bị trống rỗng; có xâm nhập nhiều, nhiều tế bào máu, chiếm chỗ mô liên kết, bao vây xung quanh ống gan tụy bị hoại tử (hình 5, 6, 7, 8)
(5)Ở mẫu tơm bệnh nặng, biểu mơ hình ống gan tụy bị hoại tử nghiêm trọng, làm biến cấu trúc bình thường tổ chức này, làm
các tế bào biểu mô bị bong tróc khỏi thành ống gan, nặng tạo thành biểu mơ hình ống bị rỗng (hình 6)
Khối gan tụy với biểu mơ hình ống bị hoại tử nghiêm trọng tạo thành ống rỗng, không quan sát thấy loại tế bào B, F R Các tế bào E có nhân bị phình to, khơng quan sát thấy phản ứng viêm (H&E).
1 Lát cắt ngang khối gan tụy có biểu mơ hình ống bị rỗng, hoại tử nghiêm trọng (200x) 2 Lát cắt ngang thể nhân tế bào E bị phì đại (400x)
3 Lát cắt dọc khối gan tụy có biểu mơ hình ống bị rỗng, hoại tử nặng (200x).
Hình Mơ gan tụy bị hoại tử nghiêm trọng
Các biểu mơ hình ống gan tụy bị thối hóa nghiêm trọng diện rộng, gặp vùng khác nhau gan tụy với số tế bào máu xâm nhập Các tế bào biểu mơ bị thối hóa, bong tróc và rơi vào vùng rỗng biểu mơ hình ống gan tụy.
Hình Sự thối hóa bong tróc tế bào biểu mơ gan tụy
Quan sát thấy có xâm nhập bao vây
các tế bào máu ổ viêm, thể phản ứng miễn dịch tôm với xâm nhập tác nhân bên ngồi (hình 8)
(6)Phản ứng viêm xâm nhập dày đặc tế bào máu vào mô liên kết bao quanh ống biểu mô gan tụy thể bệnh lý cảm nhiễm tác nhân vi khuẩn Sự biến tế bào B R ống mô gan tụy đặc điểm ghi nhận Các tế bào biểu mơ gan tụy có tượng bong tróc rơi vào bên ống mơ gan Sự hoại tử biến dạng tế bào ống mơ gan tụy quan sát cục tồn gan tụy Ngồi ra, cịn quan sát thấy hình thành tế bào dạng sợi bao quanh ổ viêm, xem giai đoạn cuối phản ứng viêm Sự hoại tử biến tế bào biểu mô gan tụy để lại
ống gan tụy rỗng biến dạng cấu trúc toàn thể quan gan tụy Sự tổn thương nghiêm trọng tổ chức mô tế bào quan gan tụy chắn ảnh hưởng đến chức hoạt động quan nói riêng tồn thể tơm nói chung
Đặc điểm biến đổi bệnh lý xảy 40 mẫu tôm chân trắng bị hoại tử gan tụy thu ao nuôi Ninh Thuận tương tự báo cáo nhiều tác giả ngồi nước cơng bố gần dịch bệnh hoại tử gan tụy cấp hay hội chứng chết sớm EMS/AHPNS tôm he nuôi châu Á (Lightner et al., 2012, Loc Tran et al., 2013, Joshi et al., 2012)
Sự biến tế bào B, R F, với xâm nhập chiếm chỗ nhiều tế bào máu vào vùng mô liên kết, bao vây biểu mơ hình ống (H &E; trái: 200x & phải: 400x).
Hình Sự xâm nhập bao quanh tế bào máu gan tụy tôm
Các loại tế bào biểu mơ hình ống gan tụy bị hoại tử, khơng cịn quan sát thấy loại tế bào B, F R Nhiều lớp tế bào máu bao vây ống gan bị hoại tử rỗng, tạo nên ổ viêm Có xâm nhập tế bào vi khuẩn vùng viêm Ngồi ra, cịn quan sát thấy sự hình thành tế bào dạng sợi bao quanh ổ viêm, xem giai đoạn cuối phản ứng viêm
(7)IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN Tôm chân trắng nuôi ao tỉnh Ninh Thuận bị hội chứng gan tụy hoại tử với dấu hiệu bệnh thường bắt gặp như: gan tụy teo nhỏ, nhợt nhạt chuyển màu trắng đục, ruột có thức ăn, tơm bỏ ăn bắt mồi, vào bờ rớt đáy, chết từ rải rác tới hàng loạt
Kết nghiên cứu xác định bệnh lý rõ ràng tổ chức gan tụy, quan khác tơm bệnh lại khơng có biểu bất thường Những biến đổi bệnh lý mô tế bào tổ chức gan tụy ghi nhận như: hoại tử từ cục đến diện rộng mô gan tụy, tế bào biểu mô bị hoại tử bị bong tróc làm cho ống gan bị trống rỗng teo nhỏ, nhiều trường hợp loại tế bào B, R F biến mất, tế bào máu xâm nhập, chiếm chỗ bao vây xung quanh ống gan hoại tử Các tổn thương nghiêm trọng gan tụy ngun nhân gây chết cho tôm bị bệnh
Những biến đổi bệnh lý thể tổ chức gan tụy cho thấy vi khuẩn độc tố vi khuẩn có liên quan tới hội chứng hoại tử gan tụy tôm chân trắng nuôi Ninh Thuận
Do vậy, cần tiếp tục nghiên cứu để xác định xác tác nhân gây bệnh, độc lực tác nhân giải pháp phòng trị bệnh hiệu
Lời cảm ơn
Xin chân thành cảm ơn Sở KH&CN Tỉnh Ninh Thuận hỗ trợ kinh phí để chúng tơi thực hiện nghiên cứu
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Flegel, TW (2006) Detection of major penaeid shrimp viruses in Asia, a histori-cal perspective with emphasis on Thailand Aquaculture, 258, - 33
2 Flegel, T W., & Lo, C.-F (2014) Announce-ment regarding free release of primers
for specific detection of bacterial isolates that cause acute hepatopancreatic necrosis disease (ahpnd) doi: http://www.enaca.org/ modules/news/article.php?article_id=2015 Hasson, K W., Wyld, E M., Fan, Y.,
Ling-sweiller, S W., Weaver, S J., Cheng, J., & Varner, P W (2009) Streptococcosis in farmed litopenaeus vannamei: A new emerg-ing bacterial disease of penaeid shrimp Dis Aquat Organ, 86(2), 93-106 doi: 10.3354/ dao020132
4 Joshi, J., Srisala, J., Sakaew, W., Prachum-wat, A., Sritunyalucksana, K., Flegel, T W., & Thitamadee, S (2014) Identification of bacterial agent (s) for acute hepatopancreatic necrosis syndrome, a new emerging shrimp Suranaree J Sci Technol doi: http://ird.sut. ac.th/e-journal/ Journal/pdf/140283.pdf Lightner, D V (1996) A handbook of
shrimp pathology and diagnostic procedures for diseases of cultured penaeid shrimp: World Aquaculture Society
6 Lightner, D V., Redman, R M., Pantoja, C R., Noble, B I., & Tran, L (2012) Early mortality syndrome affects shrimp in Asia Global Aquaculture Advocate Magazine, 40 Nunan, L., Lightner, D., Pantoja, C., & Gomez-Jimenez, S (2014) Detection of acute hepatopancreatic necrosis disease (ahpnd) in Mexico Dis Aquat Organ, 111(1), 81-86 doi: 10.3354/dao02776
8 Tran, L., Nunan, L., Redman, R M., Moh-ney, L L., Pantoja, C R., Fitzsimmons, K., & Lightner, D V (2013) Determina-tion of the infectious nature of the agent of acute hepatopancreatic necrosis syndrome affecting penaeid shrimp Dis Aquat Organ, 105, 45-55