Việc nghiên cứu về bản chất các loại bệnh hại cây và hệ thống các biện pháp phòng trừ tổng hợp nhằm bảo vệ và nâng cao năng suất, chất lượng cây trồng là việc làm rất cần thiết trong n[r]
(1)Y T TR T
-
TR
Ọ Ệ VỆ T V T
TR
Ban hành kèm theo Quyết định số: /QĐ-… ngày…….tháng….năm ………… của………
(2)(3)1 TU Ê Ố QU
Tài liệu thuộc loại sách giáo trình nên nguồn thơng tin phép dùng nguyên trích dùng cho mục đích đào tạo tham khảo
(4)2 T ỆU
Trong bối cảnh sản xuất nông nghiệp nay, việc phát triển trồng nhiều loại trồng có giá trị kinh tế cao góp phần tăng thu nhập cho nhà sản xuất Tuy nhiên bệnh hại trồng nguyên nhân làm hạn chế năng suất, chất lượng mở rộng diện tích loại trồng, đặc biệt rau hoa cao cấp Việc nghiên cứu chất loại bệnh hại hệ thống các biện pháp phòng trừ tổng hợp nhằm bảo vệ nâng cao suất, chất lượng cây trồng việc làm cần thiết sản xuất nông nghiệp đại, đặc biệt sản xuất nông nghiệp theo hướng công nghệ cao
Bệnh đại cương môn học sở chuyên ngành chương trình mơn học bắt buộc trình độ cao đẳng Bảo vệ thực vật, mơn học kết hợp lý thuyết thực hành
Xuất phát từ vị trí tính chất u cầu mơn học, q trình biên soạn tác giả cố gắng trình bày ngắn gọn, rõ ràng, dễ hiểu Sử dụng nhiều hình ảnh minh họa để giúp cho học sinh, sinh viên nghề Bảo vệ thực vật dễ dàng tiếp cận
Trong q trình biên soạn khó tránh khỏi thiếu sót, mong nhận nhiều ý kiến đóng góp để giáo trình ngàn hồn thiện
lạt, ngày 01 tháng 05 năm 2017
(5)3
ội du g Trang
Tuyê bố bả quyề
ời giới thiệu
ục ục
i đầu
hươ g Khái iệ chu g bệ h 10
Khoa học bệnh sản xuất nông nghiệp 10
Triệu chứng bệnh c y 14
Chẩn đoán bệnh c y 15
Thực hành chư ng 18
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 22
hi nhớ chư ng 23
hươ g ệ h khô g truyề hiễ 24
Khái niệm đặc điểm bệnh không truyền nhi m 24
Nguyên nhân g y bệnh không truyền nhi m 24
Chẩn đốn bệnh khơng truyền nhi m 26
ối liên quan bệnh truyền nhi m không truyền nhi m 30
Thực hành chư ng 32
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 41
hi nhớ chư ng 42
hươ g ệ h truyề hiễ 43
Khái niệm đặc điểm bệnh truyền nhi m 43
Nguyên nh n g y bệnh truyền nhi m 43
Chẩn đoán bệnh truyền nhi m phư ng hướng phòng trừ 63
Thực hành chư ng 63
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 82
hi nhớ chư ng 83
hươ g Si h thái v dịch bệ h 85
Sinh thái bệnh c y 85
(6)4
ịch bệnh 89
Thực hành chư ng 90
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 92
hi nhớ chư ng 93
hươ g guyê ý phò g trừ bệ h 94
Các nhóm biện pháp phịng trừ bệnh c y 94
Quản lý dịch hại tổng hợp 97
Thực hành chư ng 97
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 102
hi nhớ chư ng 103
Chươ g Phươ g pháp điều tra phát hiệ bệ h h i trồ g 104
Khái niệm bệnh hại, thành phần bệnh hại chủ yếu 104
Phư ng pháp điều tra phát bệnh hại thành phần 104
Phư ng pháp điều tra phát bệnh hại chủ yếu 106
Thực hành chư ng 110
C u hỏi sử dụng đánh giá học tập chư ng 113
hi nhớ chư ng 114
(7)5 TR Ọ
Tê ô học ệ h đ i cươ g ã ô học
Vị trí tí h chất ý ghĩa v vai trị học:
- Vị trí: mơn học c sở chư ng trình mơn học bắt buộc dùng đào tạo nghề bảo vệ thực vật trình độ cao đẳng
- Tính chất: môn học lý thuyết kết hợp với thực hành - Ý nghĩa vai trị mơn học:
+ Ý nghĩa: ứng dụng hiểu biết c bệnh hại c y vào mô đun “ ệnh c y chuyên khoa” vận dụng hiểu biết vào việc phòng trừ bệnh hại c y thực tế sản xuất hướng tới quản lý sức khỏe c y trồng
+ Vai trò: giúp cho sinh viên kiến thức c bản, khái niệm bệnh hại c y trồng, c sở cho môn học “ ệnh c y chuyên khoa”
ục tiêu ô học: - Về kiến thức:
+ Trình bày kiến thức tác hại bệnh c y + hận biết triệu chứng bệnh c y
+ Chẩn đoán nguyên nh n g y bệnh
+ ô tả đặc điểm nguyên nh n g y bệnh
+ Trình bày mối quan hệ nguyên nh n g y bệnh c y với điều kiện ngoại cảnh dịch bệnh c y
+ Ph n tích được nguyên lý c phòng trừ bệnh c y - Về kỹ năng:
+ iên hệ lý thuyết với thực tế bệnh c y, từ vận dụng vào thực ti n sản xuất
+ Thu thập mẫu bệnh đồng ruộng + Quan sát hình dạng nguyên nh n g y bệnh
+ Thực phư ng pháp điều tra phát bệnh hại thành phần bệnh hại chủ yếu c y trồng
- Về lực tự chủ trách nhiệm:
(8)6 + Có khả tự nghiên cứu, tham khảo tài liệu có liên quan đến mơn học + Có khả tìm hiểu tài liệu để làm thuyết trình theo yêu cầu giáo viên
+ Có khả vận dụng kiến thức liên quan vào mơn học/mơ đun
+ Có ý thức, động c học tập chủ động, đắn, tự rèn luyện tác phong làm việc công nghiệp, khoa học tu n thủ quy định hành
(9)7 Ở ẦU
T ỆU Ọ
iới thiệu
iới thiệu tổng quát môn học, cụ thể giới thiệu khái niệm bệnh c y, tính chất, yêu cầu nội dung ph n bổ học
ục tiêu
- Trình bày khái niệm bệnh c y
- Ph n tích tính chất, yêu cầu nội dung môn học ội du g chí h
Khái iệ bệ h
Khoa học bệnh c y hình thành từ nhu cầu sản xuất nơng nghiệp Thời thượng cổ, với đời sống hái lượm sau tiến h n du canh, du cư Con người không phát phá hoại bệnh c y mà cho r ng việc c y bị héo, bị chết, sản xuất nông nghiệp bị tàn phá trời, v.v Tới kỷ 18, khoa học kỹ thuật hình thành phát triển đ có nhiều nhà khoa học nghiên cứu bệnh c y
ến ngành khoa học bệnh c y giới Việt am phát triển mạnh
ệnh c y đ g y tác hại nghiêm trọng sản xuất nông nghiệp àm giảm suất, phẩm chất nông sản, làm giảm giá trị thư ng phẩm nông sản
ệnh c y động thái phức tạp, đặc trưng trình bệnh lý ệnh c y có nhiều nhóm nguyên nh n g y Về c chia thành nhóm nhóm bệnh truyền nhi m, bệnh khơng truyền nhi m
hóm bệnh truyền nhi m vi sinh vật ký sinh g y bệnh cho c y y nhóm quan trọng ảnh hưởng lớn tới sinh trưởng phát triển c y khó phịng trừ
hóm bệnh không truyền nhi m yếu tố môi trường không thuận lợi tác động tới c y trồng làm cho c y biểu bệnh lý bên
Vị trí tí h chất v yêu cầu ô học
- mơn học c sở chun ngành chư ng trình mơn học bắt buộc dùng đào tạo trình độ Cao đẳng nghề ảo vệ thực vật
- ôn học ệnh c y đại cư ng môn học lý thuyết kết hợp với thực hành
(10)8 - Trình bày kiến thức tác hại bệnh c y
- hận biết triệu chứng bệnh c y
- Chẩn đoán nguyên nh n g y bệnh
- Mô tả đặc điểm nguyên nh n g y bệnh
- Trình bày mối quan hệ nguyên nh n g y bệnh c y với điều kiện ngoại cảnh dịch bệnh c y
- Ph n tích nguyên lý c phòng trừ bệnh c y
- iên hệ lý thuyết với thực tế bệnh c y, từ vận dụng vào thực ti n sản xuất
- Thu thập mẫu bệnh đồng ruộng - Quan sát hình dạng nguyên nh n g y bệnh
- Thực phư ng pháp điều tra phát bệnh hại thành phần bệnh hại chủ yếu c y trồng
3 Kết cấu ội du g ô học
3.1 Thời gia ô học
75giờ ( ý thuyết: 45 giờ; Thực hành: 30 giờ) 3 Kết cấu ội du g ô học
ơn học gồm có chư ng Cụ thể sau:
3.2.1 Chương 1: Khái niệm chung bệnh Thời gian: ( T: 4, TH: 3,
KT: 1)
Mục tiêu: Sau học xong chư ng người học có khả năng: - Trình bày khái niệm
- Trình bày tác hại bệnh c y sản xuất nông nghiệp - Ph n loại nhận biết triệu chứng bệnh c y
3.2.2 Chương 2: Bệnh không truyền nhiễm Thời gian: 12 ( T:8, TH:4, KT: 1)
Mục tiêu: Sau học xong chư ng người học có khả năng: - Trình bày khái niệm đặc điểm bệnh
- Ph n tích nguyên nh n g y bệnh mối liên quan bệnh truyền nhi m với bệnh không truyền nhi m
- Thực phư ng pháp chẩn đoán bệnh, từ đưa phư ng hướng phịng trừ bệnh
(11)9 Trình bày ph n tích đặc điểm, nguyên nh n biện pháp phòng trừ bệnh truyền nhi m
3.2.4 Chương 4: Sinh thái dịch bệnh Thời gian: ( T:4, TH: 4, KT: 1) Mục tiêu: Sau học xong chư ng người học có khả năng:
- Trình bày mối quan hệ, tác nh n g y bệnh, c y trồng điều kiện ngoại cảnh
- Ph n tích trình x m nhi m tái x m nhi m bệnh
3.2.5 Chương 5: Nguyên lý phòng trừ bệnh Thời gian: 12 ( T: 6, T : 5,
KT: 1)
Mục tiêu: Sau học xong chư ng người học có khả năng:
Ph n tích nguyên lý thực biện pháp phòng trừ bệnh
3.2.6 Chương 6: Phương pháp điều tra phát bệnh hại trồng Thời gian:
12 ( T: 8, T : 3, KT: 1)
Mục tiêu:
(12)10
K Ệ U V Ệ ã chươ g MH 09 - 01
iới thiệu
ệnh c y môn khoa học nghiên cứu c y bị bệnh Trong ký sinh g y bệnh mơi trường ln điều kiện sinh thái quan trọng để vi sinh vật g y bệnh phát triển thuận lợi bị ức chế không phát triển g y hại ục tiêu
- Trình bày khái niệm
- Ph n tích tác hại bệnh c y sản xuất nông nghiệp - Ph n loại nhận biết triệu chứng bệnh c y
ội du g chí h
Kh a học bệ h v sả xuất ô g ghiệp ối tượ g ghiê cứu
Khoa học bệnh c y môn khoa học nghiên cứu c y bị bệnh Trong ký sinh g y bệnh môi trường điều kiện sinh thái quan trọng để vi sinh vật g y bệnh phát triển thuận lợi bị ức chế không phát triển g y hại ồng thời tính độc cao hay thấp vi sinh vật g y bệnh ảnh hưởng r đến mức độ nhi m bệnh c y Chính đối tượng nghiên cứu cụ thể môn bệnh c y chất nguyên nh n g y bệnh c y, ảnh hưởng môi trường tới phát triển bệnh, biện pháp phòng trừ có hiệu kinh tế bảo vệ môi trường
Chi tiết nội dung bao gồm:
- Các đặc điểm triệu chứng trình bệnh lý
- ặc điểm nguyên nh n g y bệnh phư ng pháp chẩn đốn xác định bệnh
- Tác hại, tính phổ biến, quy luật phát sinh dự tính bệnh theo vùng sinh thái
- ghiên cứu tính mi n dịch, kháng bệnh, chịu bệnh chất tượng để ứng dụng nghiên cứu tạo giống kháng bệnh
- ưa biện pháp phịng trừ có hiệu kinh tế bảo vệ môi trường
ịch sử tó tắt kh a học bệ h
(13)11 Thời thượng cổ, với đời sống hái lượm sau tiến h n du canh, du cư Con người không phát phá hoại bệnh c y mà cho r ng việc c y bị héo, bị chết, sản xuất nông nghiệp bị tàn phá trời, v.v không phát nguyên nh n g y bệnh Từ kỷ thứ trước công nguyên vào thời cổ y ạp, Theophraste đ mô tả bệnh g sắt hại c y tượng nấm kí sinh gốc c y ến kỷ 16 chế độ phong kiến tập quyền phát triển mạnh, vùng sản xuất chuyên canh với hàng ngàn hécta xuất ệnh c y ngày g y nhiều tác hại lớn cho sản xuất nhận thức bệnh ngày r rệt h n
Tới kỷ 18, khoa học kỹ thuật hình thành phát triển đ có nhiều nhà khoa học nghiên cứu bệnh c y Tillet (1775) Prevost (1807) người nghiên cứu bệnh than đen lúa mì Tài liệu nghiên cứu bệnh c y nton de ary (1853) xuất đ tạo móng cho phát triển khoa học bệnh c y sau allier (1875) phát vi khuẩn g y thối củ khoai t y ayer (1886), Ivanopski (1892), ayerinck (1898) tìm virus khảm thuốc
Tới năm 30 kỷ 20 khoa học giới phát triển, cơng trình nghiên cứu bệnh c y đ chuyển sang bước phát triển vượt bậc ăm 1895 - 1980, Smith đ nghiên cứu hệ thống vi khuẩn g y bệnh c y oi cộng tác viên (1967) lần đ xác định bệnh Phytoplasma hại thực vật hật ản ặc biệt, môn sinh học ph n tử phát triển đ mang lại phát triển vượt bậc khoa học bệnh c y cuối kỷ 20 - đầu kỷ 21 Các hội bệnh lý thực vật nước thành lập từ l u giới như: an (1891), ỹ (1908), hật ản (1916), Canada (1930), ấn ộ (1947)
Tình hình bệnh c y Việt am đầu thể kỷ 20 đ ghi nhận b ng cơng trình nghiên cứu tác giả người Pháp Vincens (1921) phát bệnh đạo ôn nấm Pyricularia hại lúa t nh ạc iêu, Cần Th , Sóc Trăng ougnicourt (1943) phát bệnh lúa von Việt am Roger (1951) phát bệnh đạo ôn miền ắc Việt am
ăm 1955, lần Tổ ệnh c y thuộc Viện Khảo cứu trồng trọt thành lập từ ngành bệnh c y Việt am đ phát triển mạnh mẽ, tới đ hình thành hệ thống nghiên cứu, giảng dạy quản lý công tác kiểm dịch phòng trừ bệnh hại rộng lớn với Cục ảo vệ thực vật, Viện ảo vệ thực vật, môn VTV trường đại học chi cục
Từ tháng 9/2001 ội Sinh học ph n tử bệnh lý thực vật Việt am đ thành lập tập hợp hầu hết nhà nghiên cứu bệnh c y Việt am
(14)12 tựu 50 năm nghiên cứu bệnh c y Việt am (1955 - 2005)” giới thiệu công trình nghiên cứu khoa học bệnh c y Việt am suốt 50 năm qua
Tác h i bệ h
Trên giới, lịch sử đ có nhiều trận dịch bệnh lớn ghi nhận trận dịch bệnh mốc sư ng nấm Phytophthora infestans g y ix len vào năm 1845 - 1847 làm triệu người chết h n triệu người phải di cư n i khác Trận dịch bệnh r sắt cà phê S rilanca đ g y thiệt hại h n 150 triệu frăng Pháp g y mùa đói
Theo thống kê tổ chức , mức độ thiệt hại dịch hại g y loại c y trồng phạm vi tồn giới tới 35% tổng sản lượng thu hoạch
Việt am, bệnh hại thực vật đ g y nên nhiều trận dịch nghiêm trọng g y thiệt hại lớn cho sản xuất: năm 1955 - 1956 bệnh đạo ôn đ hại 2000 ngàn mẫu ắc ông (cũ) ệnh lúa von đ phá hại đến hàng trăm mẫu ắc t nh đồng b ng sông ồng ệnh lúa vàng lụi xuất từ 1910 Yên Ch u, T y ắc tới năm 40, 50; bệnh xuất đồng b ng ắc tập trung phá hoại nặng từ 1963 - 1965 diện tích rộng hàng trăm ngàn đồng b ng ắc Ch tính riêng t nh Thanh ố, Thái ình, am ịnh, ơng am năm 1964 đ có 57.500 lúa bị bệnh vàng lụi tàn phá hoàn toàn hàng trăm ngàn bị nhi m bệnh
gày 4/11, TP C , Thủ tướng guy n Tấn ũng đ chủ trì ội nghị bàn giải pháp phịng trừ bệnh vàng lùn lùn xoắn hại lúa xảy t nh, thành phía am Tham dự ội nghị có đại diện l nh đạo ộ: Tài chính; ơng nghiệp Phát triển ơng thơn, Văn phịng Chính phủ, viện bảo vệ thực vật t nh, thành phía am từ Khánh òa trở vào Theo thông tin từ ội nghị, dịch bệnh đ l y lan 21 t nh, thành g y thiệt hại cho 500 nghìn làm giảm sản lượng 825 nghìn thiệt hại khoảng nghìn tỷ đồng cho nơng d n, tập trung 500 nghìn hộ với 2,5 triệu d n h m ngăn chặn dịch bệnh này, Thủ tướng đề nghị phải thực giải pháp đồng kiên không để dịch bệnh xảy vụ ông xu n này, phải diệt b ng dịch rầy n u thực biện pháp hỗ trợ d n gặp khó khăn dịch bệnh g y
(15)13 trọng, n ng với 60 bị nhi m bệnh làm giảm suất, chất lượng bí ăng suất, chất lượng cà phê bị giảm đáng kể nhiều diện tích bị nhi m nặng bệnh vàng lá, bệnh khô cành
hữ g thay đổi tr g bị bệ h
1.4.1 Những biến đổi cường độ quang hợp
C y bị bệnh nói chung cường độ quang hợp giảm Quá trình quang hợp giảm diện tích c y giảm sút r rệt bị biến vàng, hàm lượng diệp lục hiều c y bị bệnh rụng c y thấp lùn, nhỏ, biến dạng xoăn cuốn, c y cịi cọc trường hợp cường độ quang hợp giảm
1.4.2 Những biến đổi cường độ hô hấp
Sự thay đổi cường độ hô hấp c y bệnh chủ yếu phụ thuộc vào đặc tính ký sinh vật g y bệnh, đặc điểm giống nhi m hay chống bệnh đặc điểm vùng mô tế bào bị nhi m bệnh
a số trường hợp cường độ hô hấp tăng cao giai đoạn đầu nhi m bệnh sau giảm sút dần giảm nhanh chóng tuỳ theo đặc điểm kháng hay nhi m bệnh c y ký chủ
1.4.3 Phá huỷ trình trao đổi chất
Khi bị bệnh trình trao đổi chất cá thể, giống c y, loài c y nhi m bệnh có thay đổi khác Tuy nhiên, quy luật chung đạm tổng số gluxit tổng số giảm trình ph n huỷ mạnh h n Tỷ số dạng protein/phi protein giảm xuống Protein c y bị men protease ký sinh ph n huỷ tạo lượng lớn axit amin tự do, nhiều axit amin tự lại ph n giải cuối tạo thành 3, c y bị lượng đạm lớn ường đa thay đổi, dạng đường đa ph n giải thành dạng đường đ n Các dạng gluxit dự trữ ph n giải làm thay đổi số lượng chất lượng gluxit mô c y bệnh (như trường hợp bệnh mốc sư ng khoai t y, bệnh virus thực vật)
1.4.4 Sự biến đổi chế độ nước
Cường độ thoát h i nước tăng mạnh làm c y nước Sở dĩ xảy tượng ký sinh đ phá huỷ hệ r mạch dẫn c y ột số ký sinh phá vỡ th n c y chảy nhựa nước từ bó mạch ngồi (hiện tượng xì mủ cao su) Ký sinh tác động tới độ thẩm thấu màng tế bào, phá vỡ mô bảo vệ bề mặt lá, cành,v.v làm tê liệt khả đóng mở khí khổng thuỷ khổng
(16)14 khuẩn Ralstonia solanacearum)
1.4.5 Biến đổi cấu tạo tế bào
Khi nhi m bệnh, độ thẩm thấu màng nguyên sinh thay đổi, phá vỡ tính bán thẩm thấu màng tế bào, phá huỷ áp lực thẩm thấu tính trư ng tế bào
ộ keo nhớt chất nguyên sinh giảm sút Thay đổi số lượng độ lớn lạp thể, ty thể, nh n tế bào nhiều thành phần khác tế bào hững biến đổi đ y dẫn đến thay đổi hình thái tế bào mơ thực vật: ó sưng tế bào, tăng kích thước tế bào bất bình thường, tạo khối u so tế bào sinh sản độ, g y chết mô
Triệu g bệ h Khái iệ
- ệnh c y động thái phức tạp, đặc trưng trình bệnh lý - o ký sinh vật hay môi trường không thuận lợi g y nên
- ẫn đến phá vỡ chức sinh lý bình thường - àm biến đổi cấu tạo tế bào mô thực vật - àm giảm suất phẩm chất c y trồng
- Quá trình phụ thuộc vào chất ký chủ, ký sinh môi trường sống
Phâ i triệu g bả
- Vết đốm: iện tượng chết đám mô thực vật, tạo vết bệnh cục bộ, hình dạng to, nhỏ, trịn, bầu dục, bất định hình, màu sắc vết bệnh khác (đen, trắng, n u, đỏ, ) gọi chung bệnh đốm lá,
- Thối hỏng: iện tượng mô tế bào (củ, r , quả, th n chứa nhiều nước chất dự trữ), mảnh gian bào bị ph n huỷ, cấu trúc mô bị phá vỡ trở thành khối mềm nhũn, nát, nh?o khơ teo, có màu sắc khác (đen, n u sẫm, xám trắng ), có mùi
- Chảy gôm (nhựa): iện tượng chảy nhựa gốc, th n, cành c y, tế bào hoá gỗ bệnh phá hoại (bệnh chảy gôm cam, chanh)
- éo rũ: iện tượng c y héo chết, cành héo xanh, vàng, rũ xuống Các bó mạch dẫn bị phá huỷ, th m đen r bị thối chết dẫn đến tình trạng thiếu hụt n−ớc, tế bào sức trư ng
(17)15 với nhiều hình thức khác nhau: loang lổ (bệnh khảm lá), vàng lá, bạch tạng (trắng lợt),v.v…
- iến dạng: ộ phận c y bị bệnh dị hình: xoăn, dăn dúm, lá, cong queo, lùn thấp, cao vống, búi cành (chổi thần), chun
- U sưng: Khối lượng tế bào tăng lên độ, sinh sản tế bào rối loạn tạo u sưng phận bị bệnh (r , cành, củ) bệnh tuyến trùng nốt sưng ( eloidogyne sp.), bệnh sưng r cải bắp (Plasmodiophora brassicae), bệnh u sưng c y l u năm (như Agrobacterium tumefaciens)
- loét: ộ phận bị bệnh (quả, th n, cành, gốc) nứt vỡ, loét, l m bệnh loét cam, ghẻ khoai t y
- ớp phấn, mốc: Trên bề mặt phận bị bệnh (lá, ) bao phủ kín tồn chịm lớp sợi nấm c quan sinh sản bào tử mỏng, xốp, mịn lớp bột phấn màu trắng đen (bệnh phấn trắng, bệnh muội đen)
- ổ nấm: Vết bệnh ổ bào tử nấm lên, lộ bề mặt lớp biểu bì nứt vỡ oại triệu chứng ch đặc trưng cho số bệnh bệnh g sắt hại c y, bệnh đốm vòng nấm
3 hẩ đ bệ h 3 ục đích
Chẩn đốn bệnh c y nh m xác định nguyên nh n g y bệnh biểu bên bệnh, ph n biệt r với tượng bệnh ký sinh khác mơi trường g y nên, từ có biện pháp phòng trừ đắn
3 ác hó phươ g pháp chẩ đ bệ h chủ yếu
3.2.1 Phương pháp chẩn đoán triệu chứng bên ngồi
ù chẩn đốn b ng phư ng pháp nữa, cuối kết luận triệu chứng bên phư ng pháp quan trọng chẩn đoán bệnh c y Thông qua biểu b ng triệu chứng bên ngồi, hiểu biết nhiều nguyên nh n g y bệnh bên ngược lại iều quan trọng chẩn đốn triệu chứng phải tìm đặc điểm riêng biệt loại nhóm bệnh loại nguyên nh n g y bệnh để so sánh chúng với nhau, tránh mắc phải nhầm lẫn
uôn phải lưu ý tượng: nguyên nh n g y bệnh gây nhiều dạng triệu chứng khác ngược lại triệu chứng nhiều nguyên nh n khác g y
(18)16 sinh thái khí hậu khác vào chất nguyên nh n g y bệnh khác đặc biệt tính độc vi sinh vật khác
Chẩn đốn b ng triệu chứng ln quan trọng, kinh tế mang lại hiệu cao Tuy nhiên, chẩn đoán bệnh c y ch sử dụng phư ng pháp cịn phiến diện nên người ta thường dùng nhiều phư ng pháp phối hợp để kết luận nguyên nh n g y bệnh cách xác
3.2.2 Phương pháp chẩn đốn kính hiển vi quang học thơng thường
hững vi sinh vật kiểm tra b ng kính hiển vi bao gồm nấm, xạ khuẩn, vi khuẩn…Virus, phytoplasma, viroide khơng thể sử dụng kính hiển vi thường mà phải dùng kính hiển vi điện tử phóng đại hàng vạn đến hàng chục vạn lần để quan sát chúng nhỏ bé uốn chẩn đốn vi sinh vật b ng kính hiển vi thường phải có số điều kiện sau:
- Phải nắm vững phư ng pháp sử dụng kính hiển vi quang học
- Thu mẫu nấm, vi khuẩn ngồi đồng phải mẫu có vết bệnh phát triển hình thành ếu lấy vết bệnh đ cũ d nhầm nguyên nh n g y bệnh với vi sinh vật hoại sinh, phụ sinh r i ngẫu nhiên mọc tạp bề mặt vết bệnh
- ếu vết bệnh chưa có bào tử hay dịch bào tử cần để mẫu bệnh (th n, cành, quả) vào hộp ẩm petri có lót giấy ẩm để điều kiện nhiệt độ phòng hay tủ ấm nhiệt độ ấm (300C) hàng ngày phát sợi nấm bào tử xuất bề mặt vết bệnh để lấy mẫu quan sát
- Có thể quan sát trực tiếp bào tử vết bệnh kính hiển vi: hình dạng, màu sắc, đo kích thước bào tử, dùng phư ng pháp nhuộm methylen xanh, nitrat bạc 10% từ 3-5 phút, thấm khô nhẹ nhuộm tiếp vào dung dịch K 10%, hay nhuộm K n 5%, ucsin enol…để phát thể sợi nấm hay vi khuẩn có mơ bệnh
- Khi quan sát vi khuẩn thực kỹ thuật chẩn đốn nhanh ngâm
đầu bệnh vào dung dịch aCl 1% 15 - 30 phút quan sát giọt dịch vi khuẩn xuất đầu nhô lên mặt nước huộm gram, nhuộm lông roi, xem kính dầu độ phóng đại h n 400 lần mơ tả hình dạng, màu sắc, đo đếm kích thước, vi khuẩn cách xác Tế bào vi khuẩn cịn quan sát r kính hiển vi huỳnh quang dùng ph− ng pháp nhuộm kháng thể huỳnh quang vi khuẩn
(19)17 Với vi sinh vật chủ yếu nấm vi khuẩn cần phải ph n lập mơi trường dùng mẩu nhỏ mơ c y nhi m bệnh Cắt phần gần vết bệnh cấy vào môi trường, dùng phư ng pháp pha l ang cấy truyền để ph n ly Các loại môi trường thường dùng là: môi trường Water gar (W ) (thường dùng 20g gar 1000ml nước cất) Sau mơi trường ph n lập nấm (mP , C , P , C …) môi trường ph n lập vi khuẩn (SP , King’s , TZC, Wakimoto, PS, P , P …)
3.2.4 Phương pháp dùng kháng huyết chẩn đoán bệnh
Kháng huyết để chẩn đoán bệnh hại đ thử nghiệm dựa tượng có chất lạ (kháng nguyên) vào c thể, c thể có khả kháng lại b ng cách tạo đáp ứng mi n dịch hình thành kháng thể úc đầu, phư ng pháp sử dụng cho bệnh virus phổ biến chẩn đoán vi khuẩn số bệnh khác
3.2.5 Phương pháp chẩn đoán sinh học phân tử
phư ng pháp phát R PCR (polymeraza chain reaction) phư ng pháp sử dụng rộng r i mang lại hiệu cao Phư ng pháp thực c sở khả tái tổ hợp , R invitro uốn thực khả cần có điều kiện c sau: Tách lượng nhỏ nguyên bản, trộn với tập hợp chất môi trường muối đệm gồm Taq Polymeraza, d TPs ( eoxyribonucletit triphophates), gCl2 ột hai đoạn nucleotit làm mồi (primer)
3.2.6 Phương pháp hiển vi điện tử
Phư ng pháp kính hiển vi điện tử phư ng pháp quan trọng để phát virus, phytoplasma, viroide g y bệnh thực vật mà kính hiển vi thơng thường với độ phóng đại nhỏ khơng thực
Kính hiển vi điện tử truyền qua (transmission electron microscope) hiển vi điển tử quét (scaning electron microscope) Kính hiển vi điện tử truyền qua loại kính sử dụng phổ biến nghiên cứu bệnh c y ể thực kỹ thuật quan sát chụp ảnh hiển vi điện tử xem trực tiếp mẫu (phư ng pháp IP) xem mẫu vi sinh vật (chủ yếu virus) đ làm tinh khiết oặc cắt lát cắt mô bệnh cực mỏng b ng máy cắt siêu mỏng (Ultra microtom) để quan sát virus mô tế bào c y bị nhi m bệnh Tất phư ng pháp tạo mẫu sử dụng nhiều thuốc nhuộm hoá chất để cố định mẫu vật thực lát cắt siêu mỏng phải tiến hành với máy cắt chân không
(20)18 4 Qua sát h h ả h triệu g bệ h h i ( a số hình ảnh tác giả tự sưu tầm chụp ình 1.2, 1.6, 1.7, 1.10 trích dẫn từ tài liệu sâu bệnh hại rau, Chi cục ảo vệ thực vật m ồng, 1995)
ình 1.1 Triệu chứng vết đốm
ình 1.2 Triệu chứng thối hỏng
ình 1.3 Triệu chứng chảy gôm