Hội nghị Khoa học Cống nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lăn II Hà Nội - 2015 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN SAPONIN VÀ ĐIỀU CHẾ PHỨC SAPONIN PHYTOSOM E CỦA c ủ CÂY TAM THẤT PANAX NOTOGINSENG TRÒNG TÂY BẮC VIỆT NAM Nguyễn Thi Thủy Đào Thị Hồng Bích Nguyễn Việt Anh Giáo viên hướng dẫn: Vũ Đức Lợi Nguyễn Thanh Hải Nguyễn Hữu Tùng * * Khoa Y Dược, Đại học Quốc ^ Khoa sau Đại học - Đại học Khoa học Công nghệ Hà Nội (USTH) TÓM TẤT Tam thất (Panax notoginseng), loại dược liệu quý, đặc hữu vùng Tây Bắc trồng tìiành cơng, cho suất tốt có giá trị kinh tế cao Theo y học truyền thống, tam thất dùng nhiều thuốc bổ, tăng cường sức khỏe điều trị bệnh bao gồm ung thư, tim mạch, nước ta, cơng bố thành phần hóa thực vật, hoạt tính sinh học tác dụng dược lý tam ứiất tản mạn; chưa có nghiên cứu hệ thống hóa thực vật làm sở liệu cho việc phân tích định tính, kiểm nghiệm nguồn dược liệu quý để phát triển ứng dụng tam thất làm thuốc dạng bào chế đại Trên sở chúng tơi đề xuất mục tiêu nghiên cứu nghiên cứu thành phần saponin điều chế phức saponin-phytosome củ Tam thất p notogỉnseng trồng Tây Bắc nước ta Các kết thu bao gồm thành phần saponin phân lập phức saponin-phytosome trình bày nội dung báo cáo T khóa: Tam thất, Panax notoginseng, saponin, phytosome, Tây Bắc STUDY ON SAPONIN COMPOSITION AND PREPARATION OF SAPONINPHYTOSOM E CO M PLEX FROM TH E ROOTS OF PANAX NOTOGINSENG CULTIVATED IN THE NORTHWEST REGION OF VIET NAM SUMMARY Panax notogỉnseng, a well-known medicinal herb, has been cultivated sucessfully in some Northvvestem provinces of Vietnam for good productivity and high economic value In the Oriental traditional medicine, the root o f Panax notoginseng has been used effectiveỉy for tonic, health promotion and treatment of cancer, cardiovascular diseases In our country, until now there is a general lack of scientific publication on the chemical composition, biological activities, phamarcological actions; and there is also no a systematic phytochemical database for quatitative analysis and quality control of this precious medicinal material as well as advancing the application of this herb in modem medicines in dnig formulation Therefore, we have carried out the study on saponin composition and preparation of saponin-phytosome 62 Hội nghị Khoa học Công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lần II Hà Nội - 2015 complex from the roots of panax notoginseng cultivated in the Northvvest region o f Vietnam The obtained results including the isolated saponin composition and prepared saponinphytosome complex will be presented herein Keywords: Panax notoginseng, saponin, phytosome, Northwest of Vietnam ĐẶT VẨN ĐỀ Với điều kiện thiên nhiên nhiều iru đãi, Việt Nam có hệ sinh thái phong phú đa dạng, có tiềm to lớn tài nguyên phát triển thuốc làm dược liệu Từ xa xưa, tam thất coi vị thuốc y học cổ truyền quý Tam thất thường dùng cho phụ nữ sau sinh, người ốm dậy, suy nhược thể, người già yếu, có tác dụng bổ dưỡng, cầm máu, giảm đau, chống sưng viêm, hỗ trợ hệ miễn dịch điều trị số bệnh tim mạch [1,2] Tam thất đặc hữu vùng Tây Bắc, trồng thành công cho suất tốt Tuy nhiên, sau thu hoạch chúng chủ yểu dùng dạng thô, theo số thuốc cổ truyền Hơn nữa, tam thất bán thị trường chưa có đảm bảo chất lượng chưa có tiêu chuẩn đánh giá thành phần hoạt chất Thực tế yêu cầu cấp bách đặt cần có nghiên cứu tập trung hệ thống thành phần hóa học, tác dụng sinh học, tác dụng dược lý Thành phần hóa học tam thất saponin [6,9] số tác dụng sinh học, dược lý saponin chứng minh bao gồm chống ung thư, đông máu, chống tiểu đường [2,8,11] Tuy nhiên, saponin tồn phần khả hịa tan kém, độ hấp thu thấp khơng có tính ưa dầu, tan lipid khó hấp thu qua hệ tiêu hóa, phân tử cồng kềnh gồm nhiều vịng polyphenol nên khó hấp thu theo chế khuyểch tán bình thường Do đó, thời gian bán thải thể ngắn, sinh khả dụng thấp [8] Với mục đích nâng cao sinh khả dụng saponin toàn phần, phương pháp chuyên chở thuốc tiềm “Phytosome” nghiên cứu [7,10,13] Hệ thống bao gồm phần ưa nước saponin bên màng phospholipid ưa dầu bao bên ngoài, saponin toàn phần tạo phức với phospholipid, thu phức saponin- phytosome [4,5] Sau hiệu suất q trình tách chiết trình tạo phức xác định; đặc điểm, tính chất phức hợp phytosome saponin tồn phần chiết xuất từ tam thất với phospholipid phân tích so sánh với kết thu đề tài nghiên cứu trước ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 Đối tượng nghiên cứu 63 Hội nghị Khoa học Công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lần II Hà Nội-2015 Củ tam thất thu hái Simacai, Lào Cai vào tháng 10/2014 giám định thực vật học Bộ môn Dược liệu & Dược học cổ truyền - BChoa Y Dược Mẩu tiêu (PNS001) lưu giữ Khoa Y Dược, ĐHQGHN 2.1 Phương pháp nghiên cứu thành phần saponỉn tam thất 2.1.1 Phương pháp phân lập hợp chẩt sắc ký lớp mỏng (TLC); sắc kí lớp mỏng thực frên mỏng ừáng sẵn DC-Alufolien 60 p 254 (Merck 1,05715) Phát chất đèn tử ngoại bước sóng 254 366 nm dùng thuốc thử màu dung dịch H2 SO 10% phun lên mỏng, sấy khô hơ nóng bếp điện từ từ đến màu sắc kí cột (CC): sắc ký cột tiến hành với chất hấp phụ silica gel pha thường pha đảo (cỡ hạt 63-200,40-63 |im, Merck, Đức) 2.1.2 Phương pháp xác định cẩu trúc hóa học hợp chất Điểm nóng chảy đo ữên máy Stuart SMP3 Phổ khối lượng ESI-MS đo hệ thống Alient 1260 series LC-MS ion trap Phổ cộng hường từ hạt nhân 'H-NMR, '^C-NMR, DEPT ghi máy JEOL ECX 400 MHz, chuẩn nội TMS (tetramethyl silan) 2.1.3 Qui trình chiết xuất phân lập Mẩu củ tam thất (500 g) sau rửa sạch, phơi khô, xay-nghiền nhỏ ngâm chiết kỹ dung môi ethanol 80% lần (mỗi lần L) sử dụng thiết bị chiết siêu âm 40°c Các dịch chiết ethanol thu được lọc qua giấy lọc, gom lại cất loại dung môi áp suất giảm cho 86,4 g (17,28% khối lượng khô) cao chiết tổng ethanol Lấy 86,0 g cao chiết hòa tan nước cất (600 lĩiL) chiết phân bố hexane, axetat BuOH (mỗi dung môi lần, lần 600 mL) Các phân đoạn hexane, etyl axetat, BuOH cất loại dung môi áp suất giảm để thu phân đoạn tương ứng hexane (2,6 g), etyl axetat (33,8 g) BuOH (60,7 g) (Phân đoạn saponin toàn phần) Tiến hành phân đoạn dịch chiết saponin toàn phần (BuOH) (40,0 g) cột sắc ký silica gel (085 mm X 90 mm) với hệ dung mơi có độ phân cực tăng dần bao gồm CH 2CI2MeOH (20:1—>1:1, v/v, phân đoạn 600 mL) thu phân đoạn ký hiệu F1~F5 Từ phân đoạn F2 (3,3 g), chạy sắc ký cột silica gel (^40 mm X 300 mm) với hệ pha động CHCb-Me0H-H20 (5; 1:0,1, v/v/v, 2,5 L) thu phân đoạn nhỏ F2.1~F2.4 Tinh chế phân đoạn nhỏ F2.2 (380 mg) sắc ký cột pha đảo YMC C-18 sử dụng hệ dung môi rửa giải MeOH-H 2Ơ (6:5, v/v, 1,5 L) thu hợp chất (65 mg) Tương tự, phân đoạn F2.4 (550 mg) cho qua cột sắc ký pha đảo YMC C-18 sử dụng hệ dung môi rửa giải MeOHH 2O (2:1, v/v, 1,5 L) thu hợp chất (53 mg) Từ phân đoạn F4 (12.0 g), chạy sắc ký cột silica gel (060 mm X 300 mm) với hệ pha động CHCl3-Me0H-H20 (4:1:0,15, v/v/v, 2,5 L) thu phân đoạn nhỏ F4.1~F4.6 64 Hội nghị Khoa học Cống nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lần II Hà Nội - 2015 Sau đó, phân đoạn F4.3 (2300 mg) tinh chế sắc ký pha đảo YMC C-18 sử dụng hệ dung môi rửa giải MeOH-HiO (5:3, v/v, 1,8 L) thu hợp chất (50 mg) (47 mg) Cuối cùng, hợp chất (86 mg) phân lập từ phân đoạn F4.5 (1100 mg) sắc ký pha đảo YMC C-18 sử dụng hệ dung môi rửa giải MeOH-HiO (7:3, v/v, 1,4 L) 2.2 Phương pháp điều chế phức saponỉn-phytosome 2.2.1 Nguyên liệu thiết bị tiến hành thí nghiệm: Saponin tồn phần tách chiết từ củ tam thất vùng Tây Bắc Phospholipid dùng thí nghiệm là: PEG-phospholipid N(carbonyl- methoxypoyethyleneglycol 2000)-1,2-distearoyl-sn-glyero-3-phosphoethanolamine, sodium salt (MW= 2810) mua tìr Lipoid GmbH Corp (Đức) 2.2.2 Các bước tiến hành thỉ nghiệm: Từ saponin toàn phần tách chiết từ tam thất (1.0 g) hòa tan với 10 ml aceton với khuấy từ gia nhiệt bình 250 mL Phospholipid hịa tan 40 mL methylene chloride (CH 2CI2) khuấy đun nhẹ, sau đưa vào bình chứa saponin 250mL Đun hồi lưu nhẹ nhiệt độ khoảng 50°c thời gian 3h, sau đỏ đem chưng cất máy cô quay để loại bỏ dung môi Sản phẩm cho tủa ừong 50 mL hexan (CôHh), lọc tủa rửa tủa 40 mL hexane lạnh 40 ml acetone lạnh, sấy hút ẩm chân không Thực với tỉ lệ khối lượng saponin: phospholipid 2.2.3 Xác định hàm lượng saponin tạo phức saponin -phytosome Saponin- phytosome điều chế cho vào etanol 10% nước 4°c, cho siêu âm phút, lọc qua màng lọc 0,45micromet (3 lần).Thu lấy dịch lọc, ly tâm 13000 vòng/phút ừong 10 phút, hút lấy phần dịch suốt Cô quay phần dịch suốt, sấy chân không, xác định khối lượng cân phân tích Hàm lượng saponin phytosome(%) = ( khối lượng saponin toàn phần-khối lượng saponin tự do) / khối lượng saponin tự do) X 100% [3,14] 2.2.4 Phân tích quang phổ hồng ngoại (ỈR) phân tích nhiệt quét visaỉ DSC Phân tích quang phổ hồng ngoại nhằm tìm diện liên kết hidro phức saponin phytosome Phân tích nhiệt quét vi sai (DSC) thực Mettler DSC 30S (Mettler Toledo, US) Tiến hành đánh giá mẫu nguyên liệu phytosome, niêm phong nhôm uốn, tốc độ gia nhiệt 10 °c/phút, thối khí nitrogen lưu lượng 60 ml/phút Xác định tính chất chuyển pha nhiệt mẫu thơng qua việc đo dịng nhiệt tỏa (hoặc thu vào) từ mẫu đốt nóng dòng nhiệt tốc độ khác KẾT QUẢ NGHIÊN c ứ u VÀ BÀN LUẬN 3.1 Nghiên cứu qui trình chiết cao saponin tồn phần thành phần saponỉn tam thất thu hái Tây Bắc 65 Hội nghị Khoa học Công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lần II Hà Nội - 2015 I ỉ Qui trình chiết cao saponin tồn phần Bằng kĩ thuật sơ chế, chiết siêu âm, phân đoạn dung môi phân cực khác phương pháp sắc ký cột dung diaion thu cao saponin toàn phần tam thất với hiệu suất cao (12,14 % khối lượng khơ dược liệu) Kết phân tích định tính SKLM cho thấy cao saponin tồn phần có hàm lượng saponin cao bao gồm ginsenoside R gl, R bl, Rc, Rd Re 1.2 Chiết tách xác định cấu trúc thành phần saponin tam thất Bằng phối hợp đa dạng phương pháp sắc ký bao gồm SKLM sắc ký cột dung silica gel pha thường pha đảo thu hợp chất saponin từ phân đoạn saponin tồn phần củ tam thất Tây Bắc Các hợp chất phân lập được xác định cấu trúc hóa học sở phưong pháp hóa lý bao gồm phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân NMR (Nuclear Magnetic Resonance) phổ khối MS (Mass Spectroscopy) kết hợp với so sánh với liệu công bố tài liệu tíiam khảo [12,16] cấu trúc hóa học hợp chất minh họa hình sau: R, Ginsenosỉđe Re (1) Ginsenoskle Rg^ (2) Glc - ^ h a Glc Ginsenoskle Rđ (3) Glc G íc - ^ lc Ginsenoside Rc (4) Gk: Ginsenoside Rbi (5) Gk: -?-Ara(f) Glc-2-Gte G to -^ lc Gic: /ỉ-D-gÌucopyranosyl Rha; a-L-rhamr^yranos^ Ara (f): a-L-arabinơfur8nosyl Hình 3.1 Cấu trú c hợp chất saponin thu từ tam thất Tây Bắc Điều chế, tối ưu hóa qui trình phân tích dạng bào chế phức saponỉn-phytosome từ cao saponin toàn phần tam th ất trồng Tây Bắc ỉ Điều chế tối im hóa quỉ trình bào chế phức saponin-phytosome saponin tam thất Hiệu suất trình điều chế phức saponin -phytosome từ saponin phospholipid: Sample Mass of saponỉn(S) Mass of phosphoiỉpid (gr) 1.003 1.000 1.007 1.000 (P) (gr) 1.004 2.000 3.007 4.000 66 Ratìo (S:P) by mass Mass of S-P complex (gr) Yield (% ) 1:1 1:2 1:3 1:4 1.405 2.175 3.563 3.626 70.00% 72.50% 88.76% 72.52% Hội nghị Khoa học Công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dưọ-C lăn II Hà Nội - 2015 Trong khoảng 3200 - 3600 cm ', xuất đinh phức saponin-phytosome (C) 3564.45 cm'*, chửng tỏ có hình thành liên kết H saponin phospholipid tạo phức có saponin ưa nước bên màng phospholipid phía ngồi Trong khoảng tị 1760 - 1670 cm \ xuất đinh 1734.0 Icm ' phức (B) phức tinh chế (C),chứng tỏ có mặt phospholipid frong phức (Hình 3.2) Trong biểu đồ saponin (A) phức tinh chế (C), số đinh từ miền dao động có vị trí tương quan thể lớp phospholipid bao phía ngồi quanh saponin, điều dẫn đến thay đổi số liệu (B) (C), có đinh đặc trưng vị trí giống chứng tỏ tham gia phospholipid phức saponin - phytosome.Hom nữa, hấp thu IR 1641cm‘* liên kết c = c C-24 phân tử nhóm dammarane - loại triterpenoid chuyển lên số sóng 1649 c m c h ứ n g tỏ tạo thành phức saponin - phytosome saponin bao quanh phân tử phospholipid 2.5 Phân tích nhiệt quét vi sai (DSC) Phức hợp cho hai đỉnh thu nhiệt, đỉnh thu nhiệt thứ tìiấp 84,40°c, đỉnh tạo thành di chuyển mạnh nhiệt độ cao phần phân cực phân tử phospholipid Còn đỉnh thứ hai xuất đỉnh nhọn cao 381,39°c chuyển trạng thái tìr gel sang lỏng, phân hủy gây khối lượng tạo khí nhiệt độ cao, chuỗi PEG phân tử phospholipid bị phân hủy, giải phóng ethylene glycol KÉT LUẬN Theo mục tiêu nghiên cứu đề ra, trình thực nghiệm thu kết quả; - Chiết lấy cao tổng saponin toàn phần, hàm lượng cao chiết cao - Đã tiển hành phân đoạn với dung môi khác nhau, butanol thu phần dịch chiết saponin tồn phần có hiệu suất cao Bằng phương pháp sắc ký phân lập chất saponin từ phân đoạn saponin tồn phần, cấu trúc hợp chất chứng minh dựa frên sở phân tích phổ khối lượng MS, phổ cộng hưởng từ NMR so sánh với số liệu công bổ tài liệu tham khảo - Tổng hợp thành cơng, tối ưu hóa qui trình nghiên cứu số đặc điểm dạng bào chế phức saponin- phytosome tam thất thu hái Tây Bắc Trong nghiên cứu tiến hành, tác dụng dược lí sinh khả dụng phức saponin-phytosome thử nghiệm phân tích để thấy ưu điểm dạng bào chế phytosome so với dạng cao chiết saponin tự bao gồm: gia tăng khả 68 Hội nghị Khoa học Cống nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dưọ-C lăn II Hà Nội-2015 Hiệu suất trình điều chế saponin-phytosome theo tỉ lệ m saponin : m phospholipid 1:1, 1:2, 1:3, 1:4 tỉ lệ 1:3 cho hiệu suất cao (88,76%) frong tỉ lệ 1:1 đạt nhỏ (70%) 2.2 Hàm lượng saponin tạo phức saponin -phytosome Kết phân tích hàm lượng saponũi tạo phức saponm-phytosome; Sample Mass of totaỉ saponins (gr) Mass of saponinphytosome (gr) Mass of free saponin (gr) Entrapment capacity (%) 0.504 0.310 0.194 46.08% 0.07 0.041 0.036 xác định tỉ lệ 69.55% 7139% 73.89% 1:3 (71,39%) 0.430 0.500 0.466 0.507 0.464 0.500 Hàm lượng saponin tạo phức saponin-phytosome ti lệ 1:4 (73,89%) cho hàm lượng cao, 1:1 (46,08%) 1:2 (69,55%) thấp Dựa vào phân tử khối phospholipid (MW=2810) phân tử khối saponin toàn phần (khoảng từ 800-1200) tức gấp 2,3-3,5 lần ta thấy tỉ lệ tối ưu để điều chế phức cho hiệu suất cao tỉ lệ khối lượng 1:3 ti lệ mol 1:1 saponin phospholipid 2.3 Cảm quan, nhiệt độ nóng chảy Phức saponin-phytosome thu chất bột min, màu ừắng ngà; có nhiệt độ nóng chảy 143-145°c 2.4 Kết phân tích quang phổ hồng ngoại (IR) ìị ' VJ-Í \ í ' ' " M ằ ' w iị ' ■ ' i ' ■ ■ ■»!*■ ■ ' - i ' • - - u f ị VA,- ' • -ứ ^ : *rvy* *p vf| /^ » ẩ Ui — ; «— -.Sỉ - - 3; s s r — •V& — Ịj ' I ' r ịịi “ Hình 3.2 Phổ hồng ngoại IR mẫu saponin tồn phần (A) dạng bào chế phức saponin-phytosome (B,C) 67 Hội nghị Khoa học Công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lần II Hà Nội - 2015 hấp thu hoạt chất chiết xuất từ thảo dược, sử dụng với liều nhỏ đạt hiệu điều trị mong muốn, cải thiện đặc tính dược động học hoạt chất, tăng hiệu điều trị Phytosome tiềm hi vọng sử dụng phổ biến để tăng sinh khả dụng khơng saponin tồn phần từ Tam thất mà hoạt chất khác ílavonoid, tanin, terpenoid, Phytosome mở hướng phát triển mới, cho phép nhà sản xuất dược cung cấp sản phẩm dược phẩm đặc biệt dạng thuốc theo đường uống bôi qua da cách sử dụng hoạt chất từ thiên nhiên [15] LỜI CÁM ƠN Nhóm nghiên cứu xin gửi lịã cảm om hỗ trợ tìt Chương trình Khoa học Công nghệ phục vụ phát triển bền vững vùng Tây Bắc, Đề tài: “Nghiên cứu phát triển (theo hướng GACP) bào chế số chế phẩm từ dược liệu Ô đầu, Ý dĩ, Tam thất, Đan sâm vùng Tây Bắc ” (mã số: KHCN-TB/13-18) TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đồ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập II, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội, tr.383-386 Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXB Y học (2004), pp 961-964 Tiếng Anh Bhupen K, Malay KD, Anil KS Novel phytosome formulation in making herbal extracts more effective Research joumal Pharma and Technology 6(11), 2013 Bombardeli E, Cuưi SB, Garibldi p Cosmetic utilization of complexes of Panax ginseng saponins with phospholipid in phytosome form Pitoterapia 60, 55-70, 1989 Chen XY, Wang DK, Gu YL Study on preparation of ginsenoside phytosome and their pellets coated with HPMC Chinese Pharmaceutical joumal 38(6), 438-441, 2003 Dong TTX, Cui XM, Song ZH, Zhao KJ, Ji ZN, Lo CK, Tsim KWK Chemical assessment of roots of Panax notoginseng in China: Regional and seasonal variations in its active constituents J Agric Food Chem 51,4617-4623, 2003 loseph AK et al Phytosome: a novel revolution in herbal drug International jouraal of Research in Phaưnacy and Chemistry 2(2), 2231-2781, 2012 69 Hội nghị Khoa học công nghệ Tuổi trẻ Khoa Y Dược lăn li HàNội-201S Kar Wah L, Alice w Pharmacology of ginsenosides: a literature review Chinese medicine 5(20), 2010 Lei J, Li X, Gong XJ, Zheng YN Isolation, synthesis and structures of cytotoxic ginsenoside dervatives Molecules 12(2), 140-2150,2007 10 Niyati SA, Parihar GV, Acharya SR Phytosomes: novel approach for delivering herbal extract with improved bioavailability International joumal o f Pharmaceutical sciences 2(1), 2011 11 Rosette u, Peter AA, Yi w Anti-diabetic potential o f Panax notoginseng saponins: a review Phytotìierapy research 28, 510-516,2014 12 Runner RTM Extraction and isolation o f saponins Methods of Molecular Biology 864, 415-426, 2012 13 Sandeep A, Arvind s, Pameet K Preparatíon and characterization of phytosomal- phospholipid complex of p Amarus and its tablet formulatíon loumal of Pharmaceutical technology 1,1-18,2013 14 Semalty A, Semalty M, Singh R Phytosomes in herbal drug delivery: a review Indian Drugs 43(12), 937-946, 2006 15 Shalini s, Ram KR Phytosomes: an emerging technology International joumal of Pharma Research and Development 2(5), 2010 16 Shibata s, Tanaka o, Soma K, Ando T, lida Y, Nakamura H Studies on saponins and sapogenins o f ginseng Tetrehedron let 42, 207-213,1965 70 ... trú c hợp chất saponin thu từ tam thất Tây Bắc Điều chế, tối ưu hóa qui trình phân tích dạng bào chế phức saponỉn -phytosome từ cao saponin toàn phần tam th ất trồng Tây Bắc ỉ Điều chế tối im hóa... thành cơng, tối ưu hóa qui trình nghiên cứu số đặc điểm dạng bào chế phức saponin- phytosome tam thất thu hái Tây Bắc Trong nghiên cứu tiến hành, tác dụng dược lí sinh khả dụng phức saponin- phytosome. .. trồng Tây Bắc ỉ Điều chế tối im hóa quỉ trình bào chế phức saponin- phytosome saponin tam thất Hiệu suất trình điều chế phức saponin -phytosome từ saponin phospholipid: Sample Mass of saponỉn(S)