Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của lá cây bù dẻ lá lớn

6 Marrero­Ponce Y Total and local (atom and atom type) molecular quadratic indices: significance interpretation, comparison to other molecular descriptors, and QSPR/QSAR applications Bioorg Med Chem 2004,12 (24), pp.6351­6369 Marrero­Ponce Y, et al Non­stochastic and Stochastic Linear Indices of the "Molecular Pseudograph’s Atom Adjacency Matrix”: Application to 'in silico' studies for the rational discovery of new antimalariai compounds Bioorg Med Chein 2005,13 (4), pp 1293­304 Marrero­Ponce Y; F Torrens Novel 2D TOMOCOMD­CARĐD Descriptors: Atom­based stochastic and non­ stochastic bilinear indices and their QSPR applications J Math Chem, 2008.44 (3): pp.650­673 Onctor cirmifir'ST'i^i* jmfllircic m rhprnoìYiptĩic rrietfrods in molecular đesion rV-y TiT CiiidijfOiOyail Un ’por1r>r -ri JTW Editor 1995, VCH Publishers: Weinheim, Ger pp.295­307 i v i v i o i i a i i u v iu iik J w iU & iw i U v U Ỉ V U G *•* H • \vnterbeem W V V i V W i S i Vd S, 10 STATISTICA (data analysis software system) V 2009, Tulsa,OK: StatSoft Inc 11 Jeliazkova, NN, AMBIT Building blocks for a future (Q)SAR decision support system 2006: hltp://ambit.acad.bg 12 OECD, in guidance document on the validation of (quantitative) structure­activity relationship [(Q)SAR] models, series on testing and assessment N°69,2007, Paris, pp 154 13 Alvarez­Ginarte YM, et al Chemometric and chemoinformatic analyses of anabolic and androgenic activities of Testosterone and dihydrotestosterone analogues Bioorg Med Chem 2008.16 (12): pp.6448­6459 NGHIÊN c ứ u THẰNH PHẦN HỐ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA L Á C Â Y B Ù D Ẻ L Á L Ớ N ( U V A R IA C O R D A T A (D U N ) W A L L E X A L S T O N ) ThS H ề Việt B ức*; B S H oàn g X u â n H u yền Trang* H ưởng dẫn: P G S.TS Ngu yễn T h ị H ồi TĨM T T Từ bao đời nay, loài Bù dẻ lớn đồng bào dân tộc Pako, Vấn Kiều, tỉnh Quảng Trị dùng để chữa bệnh Hên quan đến khối u Các nghiên cứu tnrớc chứng cho thấy, iá lồi có tác dụng ức chế với dòng tế bào ung thư (TBUT) thử nghiệm Do vậy, việc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi cần thiết, nhằm cung cấp sở khoa học, định hướng việc bào tồn phát triển thuốc phục vụ công tác chữa bệnh Mục tiêu nghiên cứu: Phân lập, xác định cấu trúc thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào (TB) hợp chất từ Bù dẻ lớn Đổi tượng phương pháp nghiên cứu: Mầu nghiến cứu thu huyện Đakrông, tỉnh Quảng Trị vào tháng 10 ­2011, sau chiết xuất dung môi hữu Các hợp chất tinh khiết phân lập phưcmg pháp sắc ký, xác định cấu trúc phương pháp phổ (NMR, MS )­ Hoạt tính gây độc TB in vitro chất tinh khiết thử nghiệm đòng TBƯT phổi người (LU­1) Kết quả: Một hợp chất thơm mới, corđauvarin A (2) với họp chẩí biết, pentađecan­l­oỉ (1), cyathoviridin (3), ỈO(14)­aromađendren­4­ol (4), v5p,6p­epoxyalnusane­3|3­ol (5), glutinol (6), taraxerol (7), stigmasteroi (8), velutinam (9) aristoiactam A la (10) đuợc phân lập Các hợp chất (2, 3,4, 10) có tác đụng ức chế dịng TB LU­1 với giá trị IC50lần lượt 53,44; 43,56; 35,0Ỉ 20,25 ịig/mL Kết luận: Từ loài Bù dẻ ỉá lởn phân lập 10 hợp chất Trong đó, cordauvarin A (2) chất mới, cyathoviridin (3), 10(14)­aromadendren­4­ol (4), 5p,6p­epoxyalnusane­3p­oi (5) phân lậplần từ chi Bù dẻ Corđauvarin A (2), cyathoviridin (3), 10(14)­aromadendren­ 4-oỉ (4) aristolactam A la (10) thể khả ửc chế trung b nh vởi dịng TB LƯ­1 * Từ khố: * varia cordaía; Corđauvarin A; Cytotoxic Đại học Y Dược H u ế 640 Study on chemical constituent and biological activity of the leaves o f uvaria cordata Sum m ary From the result of screening medicinal plants of ethnic minorities in Quang Tri province, Uvaria cordata was investigated This article is the first report of the chemical constituents and biological activity of this species Materials and methods: The leaves of Uvaria cordata were collected in Dakrong, Quang Tri province The fractionation was performed by using organic solvents Afterward, the pure compounds were obtained by using a combination of chromatography, which were then determined on the basis of NMR, MS spectral evidence and in comparison with the reported data Their cytotoxic activity was tested on human lung cancer cell line (LƯ­1) Results: A new aromatic compound, cordauvarin A (2), along with nine known compounds, pentadecan ­1 ­ oi (1), cyathoviridin (3), 10(14) ­ aromadendren ­ ­ ol (4), 5p,6p ­ epoxyalnusane “ 3p ­ ol (5), glutinol (6), íaraxeroỉ (7), stigmasterol (8), velutinam (9) and aristolactam A la (10) were isolated from the leaves of Uvaria cordata Among them, compounds (2), (3), (4) and (10) showed significant cytotoxic activity against LU ­ cancer cell line with IC50 values of 53.44; 43.56; 35.01 and 20.25 ^g/mL, respectively Conclusion: Ten compounds were isolated from Uvaria cordata including a new one, cordauvarin A (2) as well as cyathoviridin (3), 10(14) ­ aromadendren ­ ­ ol (4) and 5p,6p ­ epoxyalnusane ­ 3p ­ ol (5) have been discovered for the first time from Uvaria genus In addition, compounds (2), (3), (4) exhibited moderate inhibitory activity against LƯ ­1 cancer cell line * Key words: Uvaria cordata; Cordauvarin A; Cytotoxic I Đ Ậ T V Ấ N Đ Ề Ở nước ta, chi Uvaria gồm 15 loài, phân bố rải rác từ Thanh Hóa trở vào [43 Lồi Uvaria corđata có tên thường gọi Bù dẻ lớn, mọc hoang b a rừng tới độ cao 700 m, từ Thái Nguyên, Hà Nội (Ba V ) qua Quảng Trị, tỉnh Tây Nguyên đến Đồng Nai, Bà Rịa ­ Vũng Tàu, An Giang, Kiên Giang Theo kinh nghiệm dân gian, Bù dẻ lớn có tác đụng trù phong thấp, bổ gân cốt, tiêu thủng, trừ ho [1] Nghiên cứu trước cho thấy dịch chiết M eOH từ Uvaría cordata có tác dụng ức chế đổi vói địng TB thử nghiệm LU­1, KB, M DA­BA­321, H ep G2, SW­480 MKN7 với giá trị IC 50 15,63 ­ 18,51 M­g/mL, phần thân khơng thể hoạt tính [23 Đến nay, loài Uvaria cordata chưa nghiên cứu nhiều thành phần hóa học hoạt tính sinh học Bài báo công bố kết chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ loài Bù dẻ lớn Ngồi ra, hoạt tính gây độc TB in vitro c ủ a c h ấ t tin h khiết đư ợc th nghi m dòng T B U T phổi ngư ời (LƯ -1) II ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 Đ ố i tượng M ầu Uvaria cordata thu hái huyện Đakrông, tỉnh Quảng Trị vào tháng 10 » 201Ỉ M âu xác định tên khoa học TS Nguyễn Thế Cường ­ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật ­ V iện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam T nghiệm hoạt tính gây độc TB tiến hành dòng TBUT phổi người (LƯ­1) GS JM Pezzuto, Đại học Hawaii v GS Jeanette M aier, Đại học M ilan, ĩtalia cung cẩp 2.2 Phưotig pháp nghiên cứu Phương pháp tách chiết Sắc ký mỏng (TLC) thực mỏng trắng sẵn DC­Alufolien 60 F 254 RPis F254 (Merck) Các chất phát đèn tử ngoại bước sóng 254 nm dùng thuốc thử H 2SO4 10% phun lên mỏng sấy nhiệt độ cao vài phút màu s ắ c ký cột (CC) thực chất hấp phụ p thường (Silica gel 240 ­ 430 mesh, M erck) pha đảo (ODS ­ 60 ­ 14/63, Fujisilisa ­ Nhật), s ắ c ký lọc gel tiến hành Sephađex LH­20 Phương pháp phổ Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NM R) ghi máy Bruker AM 500 FT­NM R spectrom eter (vód TMS ỉà chất chuẩn nộị) V iện Hoá học, phổ khối phun mù điện (ESI­MS) ghi máy AGILENT 6310 641 Ion Trap Viện Hóa học Gác hợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm Khoa học C ông'nghệ Việt Nam Phổ khối phân giải cao (HR­ESI­MS) ghi máy micrOTOT~Q10187 Phịng thí nghiệm phân tích trung tâm, Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia TP HCM Phương pháp ni cấy TB in vitro Các dịng TBUT nuôi cấy dạng đơn lớp môi trurờng nuôi cấy DM EM với thành phần kèm theo gồm mM L­glutamin, 10 mM HEPES, 1,0 mM sodium pyruvat bổ sung 10% FBS (fetal bovine serum) (GIBCO) TB cấy chuyển sau ­ ngày với tỷ lệ 1/3 vàiiuôi tủ ấm COz 37°c, 5% C Phép thử sinh học xác định tính độc TB (cytotoxic assay) [5,6 , 10] Phép thử xác định hàm lượng protein TB tổng số dựa vào mật độ quang học (OD­Optical Density) đo thành phân protein TB nhuộm sulforhodamin B (SRB) G iá trị OD đo tỷ lệ thuận với lượng SRB gắn với phân tử protein, đo lượng TB nhiều (lượng protein nhiều) th giá trị OD lớn K ức chế sống sót TB có mặt chất thử xác định qua công thức sau: % sổ n g s ó t = loDtehÃỔi*)­ ODCọsỊy o)1*100 [O D Cđoi eh ứ g âm DM SO lữ % ) - O B Í g sr >]’ % ức chế “ 0 % — % S ố n g SÓI Phép thử lặp lại lần Ellipticine (Sigma) chất đối chứng dương thử nghiệm nồng độ 10; 2; 0,4; 0,08 Ịig/mL DM SO 10% đối chứng âm G iá trị ICso (nồng độ ức chế 50% phát triển) xác định nhờ phần mềm máy tính Table Curve 2.3 Ph ân lập h ợp chất Bột u.cordata khô (5,0 kg) ngâm chiết metanol (3 X 10 L), cất ỉoại dung môi áp suât giảm thu cặn chiết tổng (400 g) Cặn chiết hịa vào lít nước cất, sau chiết phân bo lân ỉưọt với clorofoc (3 X L)f etyỉ axetat ( x L), c ấ t loại dung môi áp suất giảm thu cặn chiết tương ứng clorofoc (ƯC, 150 g), etyl axétat (UE, 180 g) cặn nước (UCW , 50 g) Cặh chiet ƯC tách thô thành phân đoạn (UCị ­ ƯC7) cột silica gel pha thường, rửa giải gradient «~hexan/axeton (10Ĩ : ,4 : 1,20 : 1, 10: : ,0 : 100, v/v, hệ ,0 L) Phân đoạn UC, (30 g) tiếp tục phân tách cột silica gel pha thường, rửa giải hệ rt­hexan/etyl axetat ( lô / ỉ v/v 3,0 L) thu phẫn đoạn (ƯCfA ­ ƯCịG) Tinh chế phân đoạn Ư Q C (5 g) 'cột silica gel pha thưcmg rửa giải gradient «~hexan/axeton (100 : ,4 : 1, 20 : , 10 : 1, : 1, v/v, moi hệ 0,5 L, v/v) thu phân đoạn (UCịCi ­ ƯC,C5) Phân đoạn UC Cị (0,5 g) tách cột sắc ky pha đảo, rửa giải bang hẹ axeton/metanol/nước/axit fomic (300 : 150 : 10 : 0,1, v/v/v/v, 1,0 L) thu chất (4) (50 mg) Phân đoạn ƯCtCs (100 mg) sau qua cột sephadex LH­20, rửa giải metanol (0,5 L) thu chất (5) (3 mg) Phân đoạn ƯCiD (0,5 g) tinh che băng cột sắc ký pha đảo, rửa giải hệ axeton/metanol/nứớc (l/2/0,3, v/v/v, 0,5 L) thu hợp chẩt (1) (50 mg) Phân đoạn Ư C,F (1,5 g) đuợc tách thành phân đoạn (UCiFi ­ ƯC[F4) cột sắc ký pha đảo, rửa giải hệ axeton/metanoỉ/nưóc (1/2/1, v/v/v, 1,0 L) Tinh chế phân đoạn ƯC,F2 cột sắc ký sephadex LH­20, rửa giải metanol (0,5 L) thu chất (2) (50 mg) Phân đoạn UC 1F tinh cha cột silica gel pha thường, rửa giải gradient hệ «­hexan/axeton (12/1 “ > 7,5/1, v/v, 0,5 L) thu chất (3) (45 mg) Cặn chiet UE tách thành 11 phân đoạn (ƯE| ­ Ư Eu) cột silica gel p thường, rửa giải gradient clorofoc/metanoỉ (100/0 ­ » 0/100, v/v) Phân đoạn UE3 (20 g) tiếp tục phân tách cột silica gel pha thường, rửa giải hệ n­hexan/etyl axetat (10 /l, v/v, l,2 L) thu phân đoạn (UE3A ­ UE 3D) Lọc rửa ket tủa từ phân đoạn UE3B (5 g) axeton,kết tinh lại hỗn hợp clorofoc/metanol thu chất (6) (30 mg) Lọc, rửa tinh thể từ phân đoạn ƯE4 (10 g) thu chất (7) (20 mg) Phâh đoạn ƯES (15 g) tinh chế tiếp cột silica gel pha thường sử dụng hệ n­hexan/axeton (12/1, v/v, 1,0 L) thu chat (8) (50 mg) Phân đoạn ƯEy (5 g) tinh chế tiếp CỘÉ silica gel pha thường, giai ỉi bang hệ 642 clorofoc/etyl axẹtaưmetanol (4/1/0,15, v/v/v, 0,5 L) thu chất (9) (5 mg) Phân đoạn ƯEg (10 g) tách cột silica gel pha thường, rửa giải hệ clorofoc/metanol (10/1, v/v, 1,0 L) thu phân đoạn (ƯEgA ­ UEgC) Tiếp tục tinh chế phân đoạn ƯEgC (3 g) cột pha đảo, rửa giải hệ metanol/mrớc (3 /ỉ, v/v, 0,6 L) thu chất (10) (9 mg) III K Ế T Q UẢ VÀ BÀN LUẬN Hợp chất (2) tách dạng đầu, màu vàng nhạt, tan tốt clorofoc, axeton, metanoỉ, Rf = 0,3 (Silica gel, H/A 10/i), Rf = 0,5 (Rp 18, A/M /W 2/1/1), vệt màu nau đen với axit H2SC>4 10% Phổ ESI­ MS (+) (2) eho píc ion giả phân tử m/z 333,6 [M 4­ H ] \ Phổ HR­ESĨ­MS (+) cho píc ion giả phân tử m/z 355,1159 [M + Na]+ (tính tốn cho công thức C i8H2o06Na 355,1158) cho phép xác lập cơng thức phân tử (2) C 18ÌH20O H nh Cấu trúc hoá học hợp chất (1­10) phân lập từ Bù dẻ lớn Trên phổ ‘H NM R xuất tín hiệu proton olefinic 6,69 (1H, đ, 11,5), 6,54 (ỈH , t, 11,5), 5,77 (1H, m); proton nhóm axetyl 2,06 (3H, s) 2,03 (3H, s); proton aromatic nhóm benzoyloxy s 7,45 ­ 8,05 (5H) proton nhóm oximetilen s 4,77 ­ 4,94 ppm Phổ l3C NMR, D E PT ­9 0,135 tín hiệu nhóm cacboxyl 170,64 (x 2) 166,00; cacbon olefinic aromatic vùng 125,93 ­ 133,05; nhóm oximetilen s 66,67; 59,84; 59,44 nhóm axetyl metyl ỗ 20,75; 20,66 Các tứơng tác phổ COSY H­3 H~4, H­4 H­5, H­5 H ­6 chứng tỏ tồn đoạn mạch C3-C4-C 5-C6 phân tử Vị trí nhóm benzoyloxy C -l nhóm axetoxy C­6, C-7 thiết ỉập qua tữơng tác HMBC H ­l C­7% H­6 C ­ l” , H­7 C ­ l” c ấ u h nh liên kết đôi xác định phổ NOESỸ H­3 có tương tác NOESY với H ­ỉ, H­4 nên liên kết đơi c 2= c3phải có cấu h nh (E) Trong đó, cấu h nh (Z) gán cho liên kết c 4= c dựa tương tác NOESY H­4 H­5 Phân tích liệu phổ N M R cho thấy, họp chất (2) có cấu trúc tương tự granđiuvarin c tách từ 643 vỏ v aria grandiflora trước [13] So với grandiuvarin c (2a), hợp chất (2) thiếu nhóm benzoyloxy vị trí c~6 thay vào nhóm axetoxy Như vậy, cấu trúc hợp chất (2) xác định (2E, 4Z)­2­ (benzoyloxymethyl) hex a­2 ,4 ­diene­l, ­điyl điacetate, hợp chất đặt tên ỉà corđauvarin A, Hợp chất (3) tách dạng bột màu vàng, tan clorofoc, Rf = 0,5 (hexan/axeton 8/1) Phổ ESĨ­MS ) (3) cho píc ion phân tử m/z 436,2 [M + e]‘ Cùng với phổ 3C, DEPT, công thức phân tử (3) đề nghị C 25H 24O (m = 436,5 g/mol) Phổ H NM R hai tín hiệu doublet 8,18 (H“ 15); 7,98 (H­16) với hàng số J lớn (15,5 Hz) Hai proton có tương tác COSY với nhau, tương ứng với c 121,5 (C­15); 146,7 (C­16) xác định qua phổ HSQC Điều chứng tỏ, hợp chất (3) có chứa liên két đơi có cấu h nh trans Ngồi ra, phổ NMR cho thấy tín hiệu vịng benzen mono 7,61 (2H, d, 7,5) 7,35 ­ 7,41 (3H, m), tương ứng tín hiệu c 5C 128,9 ­ 134,7 Các tương tác phổ HMBC H­15/C­1’ (134,7), H“1 /0 ’ (129,1) cho biết vịng benzen gắn trực tiếp với nối đơi C 15 = c 16 M ặt khác, tương tác HMBC H­15, H­16 với C­14 (187,6) khẳng định nhóm cacbonyl nối trực tiếp với nối đơi Tín hiệu proton 6,74 (1H, d, 9,0); 6,73 (1H, d, 2,5); 6,67 (ỈH , dd, 9,0; 2,5) chứng tỏ có m ặt vịng benzen thể lần Các tươĩ g tác H­13/C­7, H­5/C­5a, H ­l i/c~la, H­12/C­ 4a phổ HMBC khẳng định nhóm metoxi C­7, C ­la C­4a Từ liệu phổ việc so sánh với chất tham khảo tài liệu [9] cho phép xác định (3) cyathoviridine, hợp chất tách lần từ lồi Cyathost mma viridiflorum (họ Na) có khả ức chế dịng TBUT biểu mơ (KB) với giá trị ICso = 4,5 Ịlg/mL Bảng Số liệu phổ NM R hợp chất ( ,2a, 3) 2a 644 2a 3a c sOc# ơcb sHc c 6c$ Scb ƠHC 67,0 66,67 4,94 (2H, s) 39,8 39,5 3,25 (IH , d, 18) Ỉ32t8 132,41 _ 127,5 127,10 6,69 (ỈH ,d , 11,5) la 97,9 97,2 ­ 126,4 125,93 6,54 (1H, t, l í , 5) Ỉ99,6 199,0 _ 128,8 128,46 5,77 (1H, m) ­ ­ ­ 59,84 4,77 (2H, d, 7,0) 195,0 190,9 ­ 60,6 59,8 59,44 4,85 (2H, s) 4a 79,7 79,2 ­ 1’ 130,2 129,82 ­ 25,4 24,9 2\6’ \5’ 129,9 128,7 129,53 8,05 (2H, d, 7,5) 128,35 7,45 (2H, đ, 7,5) 3,00 (lH,d, 15) 3,70 (ỈH, đ, 15) 5a 123,1 122,3 4’ 133,3 133,05 7,57 (ÍH , t, 7,5) 114,2 113,5 6,73 (1H, đ, 2,5) T 166,3 166,00 _ 155,2 154,7 _ 1” 130,2 170,64 ­ 114,1 113,7 6,67 (1H, dd, 9,0; 2,5) 2” , 6” 129,9 20,66 2,03 (3H, s) 117,9 117,5 6,74 (1H, d, 9,0) 3” ,5 ” 128,6 ­ _ 9a 144,3 143,8 4” 134,4 ­ ­ 11 49,0 49,2 3,35 (3H, s) 7” 166,6 ­ ­ 12 52,0 52,2 3,32 (3H, s) 3,37 lH ,đ , 18) • _ ỊM) 170,9 170,64 ­ 13 55,4 55,5 3,76 (3H, s) 2” ’ 21,0 20,75 2,06 (3H, s) 14 188,3 187,6 ­ 15 122,3 121,5 8,18 (1H, d, 15,5) Ỉ6 146,8 146,7 7,98 (1H, d, 15,5) r 135,4 134,7 ­ \6 ’ 129,1 129,1 7,61 (2H, đ, 7,5) \ 5’ 128,1 128,9 7,35­7,41 (2H, m) 4’ 131,2 131,1 7,35­7,41 (1H, m) OH ­ ­ 6,42 aĐo CDC13, b125MHz, c500M Hz, #ỗc granđiuvarin c [13], $5c cyathoviridine [9] Các hợp chất lại xác định pentadecan­l­ol (1), 10(14)­aromađenđren­4­ol (4) [8], 5p,6p­ epoxyalnusane­3Ị3­oI (5) [3], gỉutinol (6) [3], taraxerol (7) [14], stigmasterol (8) [11], velutmam (9) [7] aristolactam A la (10) [12] c ấ u trúc chúng thiết lập dựa vào kiện phổ phù hợp với nghiên cứu trước Hoạt tính gây độc TBƯT hợp chất thử nghiệm dòng TBƯT phổi (LU­1) Kết cho thấy, hợp chất (2, 3, 4, 10) thể khả ức chế yếu với giá trị IC50 khoảng 20,25 ­ 53,44 Ịig/mL hợp chất (10) có hoạt tính tốt Bảng Hoạt tính gây độc TB hợp chất (2, ,4 ,1 ) dòng TBƯT LU­1 % ức chế 10 Eỉlipticine 95,61 106,18 109,57 91,06 86,66 20 41,31 30,38 34,00 48,44 76,23 40,16 17,65 15,85 35,70 30,31 0,8 38,87 6,59 7,20 25,92 13,12 ĨC50 53,44 43,56 35,01 20,25 0,67 *—< o o Nồng độ (ng/ml) Kết góp phần làm sáng tỏ tác dụng chữa bệnh liên quan đến khối u thuốc đồng thời mờ triển vọng việc t m kiếm hoạt chất kháng ung thư tiềm từ thuốc dân tộc phục vụ cho công tác điều trị bệnh 645 IV KẾT LUẬN Từ loài Bù dẻ ỉớn đ ã phân lập 10 hợp chất, c ấ u trúc hợp chất xác định phương pháp phổ (ID , 2D­NMR, ESI­MS, HR­MS) so sánh với tài liệu tham khảo Trong đó, cordauvarin A (2) chất mới, cyat ioviridin (3), 10(14)­aromađendren­4­ol (4), 5p,6p­epoxyalnusanẹ~3p­ol (5) phân lập lần từ chi Bù dẻ Corđauvarin A (2), cyathoviriđin (3), 10( 14)~aromađenđren­4~ ol (4) aristoỉactam A la (10) ức chể đòng TB U M với giá trị ICso 53,44; 43,56; 35,01 20,25 (xg/mL Ti íẰi iì ĩ TFTT TãaaAÌVẲ HAM A Ị+ ^JLJU Ị Ị Ỉ nXj A Nguyễn Tiến Bân (2000), Thực vật chí Việt Nam: Tập ­ Annonaceae, NXB Khoa học Kỹ thuật, 45­67 Hồ Việt Đức, Lê Thị Hồng Oanh, Nguyễn Thị Hoài, Phan Văn Kiệm, Đỗ Thị Thảo (2013), Tác đụng gây độc TBƯT dịch chiết ưvaria cordata (Dun.) Wall, ex Alston ­ Annonaceae, Tạp chí Dược liệu, Ỉ8 (2), 77­82 Nguyễn Thị Minh Hằng, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Quyết Chiến (2007), Các tritecpen ancoỉ từ vỏ Cịng Ninh Thuận (Calopyllum spp.), Tạp chí Hóa học, 45 (6A), 210 ­213 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cd Việt Nam, NXB Trẻ, 1,247­250 A Monks, D Scudiero, p Skehan, R Shoemake, K Pauli, D, Vistica, c Hose, J Langley, p Cronise, H Campbell, J Mayo, M Boyd (1991), Feasibility of a high­flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines, Journal of National Cancer Institute, 1Ỉ (83), 757­766 D A Scudiero, R H Shoemaker, K D Pauli, A Monks, s Tierney, T H Nofziger, M J Currens, D Seniff, M R Boyd (1988), Evaluation of a soluble Tetrazoiium/Formazan assay for cell growth and drug sensivity in culture using human and other tumor cell lines, Cancer Research, 48,4827­4833 Horacio A Priestap (1985), Seven aristololactams from Aristolochia argentine Phytochemistry, 24 (4), 849­852 II Kyun Lee, Min Ah Kim, Seung Young Lee, Jong Ki Hong, Jei Hyun Lee and Kang Ro Lee (2008), Phytochemical constituents of Schizonepeta tenuifolia briquet, Natural Products Sciences, 14 (2),100­106 K Mahmood, s Sabié, M Pais, H M All, A Hamid A Hadi and E Guittet (1993), Cyathoviridine, a cytotoxic metabolite from Cyathostemma viridiflomm, Natural Product Letters, (4), 245­249 10 M c Alley, D A scudiero, A Monks, M L Hursey, M J Czerwinski, Đ L Fine, B J Abbott, J G Mayo, R H Shoemaker, M R Boyd (1988), Feasibility of drag screening with panels of human tumor cell lines using a microculture teirazoiium assay, Cancer Research, 48, 589­601 11 Peter Forgo, Katalin E Kovér (2004), Gradient enhanced selective experiments in the 1H NMR chemical shift assignment of the skeleton and side­chain resonances of stigmasterol, a phytosterol derivative”, Steroids, 69 43­50 12 Siraj Omar, Chang Leng Chee, Fasihuddin Ahmad, Jiu Xiang Ni, Hasan Jaber, Jinasheng Huang And Tetsuo Nakatsu (1992), Phenanthrene lactams from Goniothalamus velutinus, Phytochemistry, 31 (12), 4395­4397 13 Sridevi Ankisetty, Hala N ElSohỉy, Xing­Cong Li, Shabana I Khan, Babu L Tekwani, Troy Smillie and Larry Walker (2006), Aromatic constituents of Uvaria grandiflora, J Nat Prod., 69,692­694 Ỉ4 Trinh Thi Thuy, Tran Van Sung, Katrin Frank and Ludger Wessjohann (2008), Triterpenes from the roots of Codonopsis Pilosula, Journal of Chemistry, 46 (4), 515­520 646 ... M­g/mL, phần thân hoạt tính [23 Đến nay, lồi Uvaria cordata chưa nghiên cứu nhiều thành phần hóa học hoạt tính sinh học Bài báo cơng bố kết chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ loài Bù. .. tỉnh Quảng Trị vào tháng 10 » 201Ỉ M âu xác định tên khoa học TS Nguyễn Thế Cường ­ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật ­ V iện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam T nghiệm hoạt tính gây độc TB... trúc hợp chất từ loài Bù dẻ lớn Ngồi ra, hoạt tính gây độc TB in vitro c ủ a c h ấ t tin h khiết đư ợc th nghi m dòng T B U T phổi ngư ời (LƯ -1) II ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 Đ ố