Đặc điểm bộc lộ một số dấu ấn hóa mô miễn dịch trong ung thư biểu mô phổi không tế bào nhỏ

Nội dung nghiên cứu của bài viết này là xác định một số đặc mô học của ung thư phổi không tế bào nhỏ tại Bệnh viện Phổi Trung ương; đánh giá sự bộc lộ của một số dấu ấn hóa mô miễn dịch trong ung thư biểu mô phổi không tế bào nhỏ.

NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐẶC ĐIỂM BỘC LỘ MỘT SÔ DẤU ẤN HĨA MƠ MIỄN DỊCH TRONG UNG THƯ BIỂU MÔ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ Phạm Nguyên Cường1, Lê Đình Roanh2, Nguyễn Văn Hưng3, Ngơ Thế Qn4 Bệnh viện Trung ương Huế , Trung tâm Nghiên cứu phát sớm ung thư Đại học Y Hà Nội, Bệnh viện Phổi Trung ương TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định số đặc mô học ung thư phổi không tế bào nhỏ Bệnh viện Phổi Trung ương Đánh giá bộc lộ số dấu ấn hóa mơ miễn dịch ung thư biểu mô phổi không tế bào nhỏ Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Bảy mươi bảy trường hợp UTBM phổi không tế bào nhỏ lựa chọn để nghiên cứu số đặc điểm lâm sàng, phân loại mô học theo WHO 2004 bộc lộ số dấu hóa mơ miễn dịch (CK7, TTF1, p53, p63, Ki67) Phương pháp nghiên cứu mô tả cắt ngang Kết (1) Tỷ lệ nam/nữ =4/1, tuổi trung bình 57,50 ± 9,27 tuổi (nhỏ nhất: 33 tuổi, lớn 76 tuổi) Về mô học, UTBM tuyến chiếm tỷ lệ cao (49,3%), sau UTBM vảy (31,2%), UTBM tuyến vảy đứng hàng thứ ba (15,6%), UTBM tế bào lớn thần kinh nội tiết chiếm tỷ lệ thấp (2) UTBM tuyến có tỷ lệ dương tính với CK7 cao (97,4%), sau UTBM tuyến vảy (83,3%), UTBM vảy có 41,6% d­ương tính với CK7 UTBM mơ tuyến vảy có tỷ lệ dương tính với Ki-67 cao (75%), sau UTBM vảy (66,6%), UTBM tuyến có tỷ lệ d­ương tính với Ki-67 thấp (36,8%) Có 70,8% tr­ường hợp UTBM vảy dư­ơng tính với p63, 25% trường hợp UTBM tuyến vảy dư­ơng tính với p63 18,8% tr­ường hợp UTBM tuyến d­ương tính với p63 UTBM tuyến có tỷ lệ dư­ơng tính với TTF-1 cao so với UTBM vảy (53,8% so với 46,1%) Có 2/4 trường hợp UTBM tuyến vảy dương tính với TTF1 Các loại UTBM vảy, UTBM tuyến UTBM tuyến vảy có nửa số trường hợp (50%) d­ương tính với p53, trường hợp UTBM thần kinh nội tiết âm tính với p53 SUMMARY Objectives: To identify some clinical and histologic characteristics of non-small cell lung carcinomas at Central Lung Disease Hospital To evaluate the expression of some immunohistochemical marker in non-small cell lung carcinoma Materials and Methods: Seventy seven non-small cell lung carcinomas were selected to study some clinical characterstics, the histologic classification according to WHO 2004 histologic classification of lung tumors and the expression of some immunohistochemical markers (CK7, TTF1, p53, p63, Ki67) by crosssection method Results: (1) Male/female rate was 4/1, average age was 57,50 ± 9,27 (range: 33-76) Adenocarcinomas Người phản hồi: Ngô Thế Quân Email: quannt53@yahoo.com Ngày nhận bài: 19/11/2013 Ngày báo đăng: 12/2013 Ngày phản biện đánh giá báo cáo: 11/2013 ISSN 1859 - 3925 Số 15 tháng 12/ 2013 TẠP CHÍ LAO VÀ BỆNH PHỔI 31 32 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC accounted for the highest percentage (49.3%), followed by the squamous cell carcinomas (31.2%) and adenosquamous carcinomas (15.6%); large cell and neuroendocrine carcinomas have a low percentage CK7 - positive rate of adenocarcinomas was highest (97.4%), followed by adenosquamous carcinomas (83.3%) and squamous cell carcinomas (41.6%) Adenosquamous carcinomas had highest Ki-67 positive rate (75%), followed by the squamous cell carcinomas (66.6%), and adenocarcinomas with lowest rate (36.8%) Squamous cell carcinomas were positive for p63 in 70.8%, adenosquamous carcinomas in 25% and adenocarcinomas in 18.8% The percentage of TTF-1 positive of adenocarcinoma is higher than squamous cell carcinoma (53.8% versus 46.1%) There were 2/4 cases of adenocarcinomas that were positive for TTF1 The squamous cell carcinomas, adenocarcinomas and adenosquamous carcinomas were positive for p53 in 50% of cases, One neuroendocarcinoma was negative for p53 I ĐẶT VẤN ĐỀ II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Ung thư phổi loại ung thư gây tử vong hàng đầu bệnh ung thư hai giới [2] Ung thư phổi không tế bào nhỏ lại chiếm khoảng gần 85% tổng số ung thư phổi Ở Việt Nam, theo ghi nhận dịch tễ học ung thư năm 2004, ung thư phổi loại ung thư đứng hàng đầu nam giới với tỉ lệ mắc Hà Nội 39,8/100.000 dân 10,6/100.000 nữ Tần số mắc UTP tăng dần theo lứa tuổi [3] Mặc dù điều trị tích cực tỉ lệ sống thêm toàn năm khoảng 15,7% [1] Vì vậy, việc phát sớm ung thư phổi có tầm quan trọng lớn, mang ý nghĩa sống cịn người khơng may mắc phải bệnh nguy hiểm 2.1 Đối tượng Để việc điều trị tiên lượng bệnh đạt hiệu cao, cần phải có chẩn đốn mơ bệnh học xác phân típ mơ bệnh học chi tiết Sự kết hợp nhiều dấu ấn hóa mơ miễn dịch làm tăng độ nhạy giúp cho việc chẩn đoán ung thư biểu mô (UTBM) phổi không tế bào nhỏ xác [8] Tuy nhiên, khơng phải tất chứng minh đầy đủ tính hiệu lâm sàng mà hầu hết nhiều bàn cãi giai đoạn nghiên cứu chuyên sâu [11] Tại Việt Nam, nghiên cứu bộc lộ số dấu ấn miễn dịch nhuộm HMMD UTBM phổi chưa nhiều Do chúng tơi thực đề tài: “Đặc điểm bộc lộ số dấu ấn hóa mơ miễn dịch ung thư biểu mơ phổi không tế bào nhỏ” với mục tiêu (1): Xác định số đặc điểm lâm sàng mô học ung thư phổi không tế bào nhỏ Bệnh viện phổi Trung ương (2): Đánh giá bộc lộ số dấu ấn hóa mơ miễn dịch ung thư biểu mô phổi không tế bào nhỏ TẠP CHÍ LAO VÀ BỆNH PHỔI Số 15 tháng 12/ 2013 Đối tượng nghiên cứu 77 trường hợp UTBM phổi khơng tế bào nhỏ, chẩn đốn mơ bệnh học nhuộm hóa mơ miễn dịch Bệnh viện Phổi Trung ương Trung tâm Nghiên cứu Phát sớm ung thư 2.2 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu mô tả cắt ngang 2.2.1 Nghiên cứu mô bệnh học - Kỹ thuật mô học: khối nến sau thu thập, đủ tiêu chuẩn cắt tiêu nhuộm theo phương pháp H-E, sau đọc phân tích kết kính hiển vi quang học - Phân loại mô học: tất tiêu ung thư phổi phân loại theo bảng phân loại WHO 2004 2.2.2 Nghiên cứu HMMD - Kỹ thuật HMMD: khối nến cắt tiêu nhuộm HMMD với dấu ấn: CK7, TTF-1, Ki-67, p53 p63 Kết quả: Phản ứng dương tính biểu nhân hay bào tương tế bào có mầu nâu vàng 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu - Thời gian nghiên cứu: năm: 2010-2012 - Địa điểm nghiên cứu: khối nến thông tin bệnh nhân thu thập Bệnh viện phổi Trung ương Các khối nến cắt nhuộm H-E HMMD, đánh giá kết Trung tâm nghiên cứu phát sớm ung thư ISSN 1859 - 3925 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC 2.4 Xử lý số liệu: số liệu xử lý phần mềm Epi-info 6.04 Phân bố mô bệnh học UTBM phổi không tế bào nhỏ III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.1 Mô bệnh học UTBM phổi không tế bào nhỏ Đặc điểm chung mẫu nghiên cứu Bảng Phân loại mô học UTBM phổi không tế bào nhỏ 1.1 Giới Loại mô học Bảng Phân bố theo giới Tỷ lệ (%) 24 31,2 80% UTBM tuyến 38 49,3 15 20% UTBM tế bào lớn 2,6 77 100% UTBM tuyến vảy 12 15,6 UTBM thần kinh nội tiết 1,3 Tổng số 77 100 Số BN Tỉ lệ % Nam 62 Nữ Tổng Nhận xét: Nam chiếm 80% cao so với nữ (20%), tỉ lệ nam/nữ = 4/1 1.2 Tuổi 1.2.1 Đặc điểm tuổi Bảng Phân bố tuổi theo giới Số Nhỏ Lớn BN nhất Nam 62 40 76 57,53±9,20 tuổi Nữ 15 33 70 57,40±10,06 tuổi Tổng 77 33 76 57,50±9,27 tuổi Trung bình ± ĐLC Nhận xét: Nhóm nghiên cứu có tuổi nhỏ 33 tuổi, cao 76 tuổi, tuổi trung bình 57,50±9,27 tuổi Nam nữ có độ tuổi trung bình tương đối (nam: 57,53±9,20 tuổi nữ: 57,40±10,06 tuổi), khác biệt tuổi nam nữ khơng có ý nghĩa thống kê với T = 0,038, p= 0,97 >0,05 (phép kiểm Student – T test) 1.2.2 Phân bố theo nhóm tuổi Bảng cho thấy nhóm UTBM tế bào khơng nhỏ, UTBM tuyến chiếm tỷ lệ cao (49,3%), sau UTBM vảy (31,2%), UTBM tuyến vảy đứng hàng thứ ba (15,6), UTBM tế bào lớn thần kinh nội tiết chiếm tỷ lệ thấp Bảng Phân loại mô học ung thư biểu mô vảy Loại mô học Số trường hợp Tỷ lệ (%) UTBM vảy 21 87,5 UTBM vảy tế bào sáng 8,3 UTBM vảy dạng đáy 4,2 Tổng số 24 100 Bảng cho thấy UTBM vảy thơng thường chiếm tỷ lệ cao (87,5%), sau UTBM vảy tế bào sáng UTBM vảy dạng đáy Bảng Phân loại mô học ung thư biểu mơ tuyến Bảng Phân bố theo nhóm tuổi Nhóm tuổi hợp UTBM vảy Giới Tuổi Số trường Loại mô học Số trường Tỷ lệ hợp (%) Số BN Tỉ lệ % < 45 tuổi 6% UTBM thông thường 28 73,6 45 - < 55 tuổi 26 34% 55 - < 65 tuổi 28 36% UTBM tuyến nhú 15,8 ≥ 65 tuổi 18 24% UTBM tiểu phế quản phế nang 10,6 Tổng 77 100% Tổng số 38 100 Nhận xét: Nhóm tuổi tuổi từ 55 đến 65 tuổi chiếm tỉ lệ cao (36%), nhóm từ 45 đến 55 tuổi (chiếm tỉ lệ 34%), bệnh nhân 65 tuổi chiếm tỉ lệ 24%, thấp nhóm 45 tuổi (5/77 bệnh nhân, chiếm tỉ lệ 6%) ISSN 1859 - 3925 Bảng cho thấy UTBM tuyến thông thường chiếm tỷ lệ cao nhât (73,6%), UTBM tuyến nhú UTBM tiểu phế quản phế nang chiếm tỷ lệ thấp 2.2 Một số dấu ấn hóa mơ miễn dịch ung thư biểu mô phổi không tế bào nhỏ Số 15 tháng 12/ 2013 TẠP CHÍ LAO VÀ BỆNH PHỔI 33 34 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Bảng Kết nhuộm hóa mô miễn dịch CK7 Loại mô học Tổng số Dương tính Tỷ lệ UTBM vảy 24 10 41,6 UTBM tuyến 38 37 97,4 UTBM tế bào lớn 0 UTBM tuyến vảy 12 10 83,3 UTBM thần kinh nội tiết 0 Tổng số 77 53 Kết bảng cho thấy UTBM tuyến có tỷ lệ dương tính với CK7 cao (97,4%), sau UTBM tuyến vảy (83,3%), UTBM vảy có 41,6% trường hợp dương tính với CK7 Bảng Kết nhuộm hóa mơ miễn dịch Ki-67 Tổng số Dương tính Tỷ lệ UTBM vảy Loại mô học 24 16 66,6 UTBM tuyến 38 14 36,8 UTBM tế bào lớn 0 UTBM tuyến vảy 12 75,0 UTBM thần kinh nội tiết Tổng số 77 39 Kết bảng cho thấy UTBM tuyến vảy có tỷ lệ dương tính với Ki-67 cao (75%), sau UTBM vảy (66,6%), UTBM tuyến có tỷ lệ dương tính với Ki-67 thấp (36,8%) Bảng Kết nhuộm hóa mơ miễn dịch p53 Loại mơ học Tổng số Dương tính Tỷ lệ UTBM vảy 24 12 50,0 UTBM tuyến 38 19 50,0 UTBM tế bào lớn 50,0 UTBM tuyến vảy 12 50,0 UTBM thần kinh nội tiết Tổng số 77 38 Bảng cho thấy bốn loại gồm UTBM vảy, UTBM tuyến UTBM tuyến vảy có nửa số trường hợp (50%) dương tính với p53, trường hợp UTBM thần kinh nội tiết âm tính với p53 Bảng 10 Kết nhuộm hóa mơ miễn dịch p63 Tổng số Dương tính Tỷ lệ (%) UTBM vảy Loại mô học 24 17 70,8 UTBM tuyến 38 18,4 UTBM tế bào lớn 0 UTBM tuyến vảy 12 25,0 UTBM thần kinh nội tiết 1 100,0 Tổng số 77 28 Bảng cho thấy 100% UTBM thần kinh nội tiết dương tính với p63, 70,8% trường hợp UTBM vảy dương tính với p63, 25% trường hợp UTBM tuyến vảy dương tính với p63 18,4% trường hợp UTBM tuyến dương tính với p63 TẠP CHÍ LAO VÀ BỆNH PHỔI Số 15 tháng 12/ 2013 ISSN 1859 - 3925 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Bảng 11 Kết nhuộm hóa mơ miễn dịch TTF-1 Loại mơ học Tổng số Dương tính Tỷ lệ UTBM vảy 13 46,1 UTBM tuyến 13 53,8 UTBM tế bào lớn 0 UTBM tuyến vảy 50,0 UTBM thần kinh nội tiết Tổng số 32 15 Trong nghiên cứu chúng tơi có 32/77 trường hợp UTBM khơng tế bào nhỏ nhuộm TTF-1 Kết cho thấy UTBM tuyến có tỷ lệ dương tính với TTF-1 cao so với UTBM vảy (53,8% so với 46,1%) Có 2/4 trường hợp UTBM tuyến vảy dương tính với TTF1 IV BÀN LUẬN Đặc điểm mẫu nghiên cứu UTBM tuyến nhú (6 trường hợp), UTBM tuyến tiểu phế quản phế nang (4 trường hợp), UTBM tế bào lớn (2 trường hợp), UTBM tuyến-vảy (12 trường hợp), UTBM thần kinh nội tiết tế bào lớn (1 trường hợp) Trong nhóm UTBM tế bào khơng nhỏ, ngồi týp mơ học theo phân loại mô học WHO 2004, gặp trường hợp đáng ý là: chiếm tỉ lệ cao là: nhóm tuổi từ 55 đến + Một trường hợp UTBM tuyến dạng vi nhú với vôi hóa bật giống UTBM tuyến giáp Một trường hợp UTBM tuyến có hoạt động thực huyết cao với tế bào u có bào tương giãn rộng chứa nhiều bạch cầu đa nhân trung tính hồng cầu Một trường hợp UTBM tế vào vảy dạng đáy đáp ứng đầy đủ tiêu chuẩn chẩn đoán WHO 2004 65 tuổi chiếm tỉ lệ 36%, nhóm từ 45 đến Sự bộc lộ dấu ấn CK7 Giới: Nam chiếm tỷ lệ cao hẳn nữ (80% so với 20%), tỉ lệ nam/nữ = 4/1 Tỷ lệ phù hợp với nghiên cứu khác nước nước ngoài, tỷ lệ UTPQ nam cao nữ [1],[8] Tuổi: nhỏ 33 tuổi, cao 76 tuổi, tuổi trung bình 57,50±9,27 tuổi Hai nhóm tuổi 55 tuổi chiếm tỉ lệ 34%, thấp nhóm 45 tuổi (6%) Kết phù hợp với Nguyễn Thị Diệu Hồng-Bệnh viện Bạch Mai (2008) tuổi trung bình mắc UTPQ 54 ± 15,18, thấp nhất: 19, cao 80 tuổi [3] Tần suất loại tế bào UTBM phổi không tế bào nhỏ theo phân loại WHO 2004 Phân loại mô bệnh học ung thư biểu mô phổi quan trọng, yếu tố tiên lượng thẩm định phương thức điều trị Cách phân loại WHO 2004 rõ ràng, có tính hệ thống cao, đặc biệt đưa týp mô bệnh học biến thể theo mã số ICD-O WHO Trong nghiên cứu chúng tơi có týp sau: UTBM tế bào vảy (21 trường hợp), UTBM tế bào vảy týp tế bào sáng (2 trường hợp), UTBM tế bào vảy dạng đáy (1 trường hợp), UTBM tuyến (38 trường hợp), ISSN 1859 - 3925 Trong nghiên cứu Satoshi cs cho thấy: CK7 dương tính với 90,9% mẫu UTBM tuyến dạng tuyến nguyên phát lại dương tính với 5,3% (19 mẫu) ung thư đại trực tràng di đến phổi, mặt khác hồn tồn âm tính với nhóm thư đại trực tràng nguyên phát Từ tác giả kết luận: CK7 hữu ích cho việc phân biệt ung thư phổi di từ hậu môn trực tràng với ung thư phổi biểu mô tuyến dạng tuyến [9] Trong nghiên cứu chúng tơi, CK7 dương tính 83% ung thư biểu mô tuyến vảy, 97,4% ung thư biểu mô tuyến 41,6% UTBM vảy, UTBM tế bào lớn ung thư thần kinh nội tiết âm tính tồn Như vậy, CK7 dương tính hầu hết UTBM tuyến phần UTBM vảy Điều phù hợp với nghiên cứu tác giả khác, đồng thời giúp sử dụng CK7 Số 15 tháng 12/ 2013 TẠP CHÍ LAO VÀ BỆNH PHỔI 35 36 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC chất điểm để phân biệt UTBM tuyến với phần lại, đặc biệt với loại UTBM thần kinh nội tiết Sự bộc lộ dấu ấn p53 Lee cs thấy tỷ lệ bộc lộ p53 25/48 (52%) bệnh nhân [8] Tammenagi cs báo cáo tỷ lệ p53 dương tính 49,1% [10] Trong nghiên cứu chúng tơi, dấu ấn hóa mơ miễn dịch p53 dương tính 50% trường hợp UTBM vảy, UTBM tuyến, UTBM tế bào lớn UTBM tuyến vảy, âm tính với UTBM thần kinh nội tiết Điều cho thấy, UTBM thần kinh nội tiết âm tính hồn tồn với dấu ấn CK7 p53, âm tính có giá trị việc chẩn đoán phân biệt với týp mơ bệnh học cịn lại UTBM phổi Sự bộc lộ dấu ấn p63 Các protein p63, thành viên gia đình yếu tố phiên mã p53 nhân, đặc trưng gen ghi nhận chuyển hóa kích hoạt (transactivating reporter genes) Theo kết nghiên cứu cho thấy p63 bộc lộ 109/118 UTBM vảy, 15/95 UTBM tuyến, 2/2 UTBM tuyến vảy, 4/6 UTBM tế bào lớn, 9/20 NET biệt hóa kém, 1/37 u carcinoids điển hình khơng điển hình (p