hóa sinh

Mục lục: - Phần Hóa học glucid Phần Hóa học Protid Phần Xét nghiệm nước tiểu Phần Hóa học Lipid BÁO CÁO THỰC HÀNH HĨA HỌC GLUCID 1.Khảo sát tính khử monosacacarid va disaccarid: 1.1 Ngun lí: Trong điều kiện nhiệt độ mơi trường kiềm monosaccarid/disaccarid có tính khử có nhóm andehit cách khử KL nặng R-CHO + Cu(OH)2  R-COOH + Cu2O (đỏ gạch) + H20 1.2 Hóa chất Felling A, Felling B, frutozo 5%, glucozo 5%, saccarozo 5%, lactozo 5% 1.3 Các bước tiến hành - Chuẩn bị ống nghiệm thủy tinh, khô sạch, đánh STT 14 - Hút 0.5ml Felling A vào ống nghiệm - Hút 0.5ml Felling B vào ống nghiệm - Đun 80° 5p - Hút 0.5ml glucozo 5%( ống 1), frutozo 5%(ống 2), lactozo 5%(ống 3), saccarozo 5%( ống 4) - Đun 80° 5p 1.4 Hiện tượng - ống đầu tạo kết tủa đỏ gạch, theo thứ tự giảm dần lượng kết tủa: ống 1, ống 2, ống -ống khơng tạo kết tủa 1.5 Giải thích tượng - Do ống monossaccarid có nhóm –CHO, -C=O mang tính khử nên đun với dd Felling cho kết tủa - Ống đường đơi lactozo cịn gốc OH linh động nên mang tính khử, đun với Felling tạo kết tủa - Ống saccarozo kết hợp từ nhóm OH glucozid đường đơn thứ với nhóm OH glucozid đường đơn thứ nên khơng mang tính khử, nên khơng tạo kết tủa đung với Felling 1.6 Ứng dụng -Phản ứng thể tính khử monosaccarid/ disaccarid dùng để định lượng đường nước tiểu -Nguyên nhân xuất đường nước tiểu: + lượng glucozo máu cao nên thận không giữ glucozo + lượng glucozo máu bình thường thận bị tổn thương nên khơng có khả giữ glucozo máu 2.Phản ứng Furfural 2.1 Nguyên lí: Những phân tử đường có nhóm chức ancol bậc cho tác dụng với acid đậm đặc bị rút nước tạo liên kết nối đôi gọi furfural cho polypenol furfural chuyển màu 2.2 Hóa chất Glucozo 5%, dd H2SO4 đậm đặc, thuốc thử molish 2.3 Tiến hành - 1ml dd glucozo 5% -2 giọt molish -1ml dd H2SO4 2.4 Hiện tượng Xuất vòng xanh tím ống nghiệm 2.5 Giai thích Do glucozo tác dụng H2SO4 đậm đặc bị khử nước tạo liên kết đôi Furfural mà chất môi trường acid cho phản ứng thân điện từ α naptol cho sản phẩm có màu xanh tím 2.6 Ứng dụng Dùng để phân loại nhóm ccbohydrat với chất khác dựa vào cường độ màu chúng BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA HỌC PROTID Phản ứng tạo kết tủa protein dd HNO3 Nguyên tắc: biến tính tạo kết tủa Tiến hành: sử dụng ống nghiệm - Protein 10% : 1ml - HNO3 : 1ml - Nghiêng ống nghiệm để đầu pipet vào thành ống nghiệm, cho dd HNO3 chảy từ từ Để nguyên không lắc Hiện tượng - Xuất bọt khí - Tạo vịng kết tủa lớp dung dịch Giai thích Khi cho dung dịch axit nitric vào dung dịch protein 10% thấy kết tủa màu vàng xuất Vì nhóm R – C6H4 – OH số amino axit protein phản ứng với HNO3 cho hợp chất mang nhóm NO2 có màu vàng, đồng thời protein bị đơng tụ HNO3 tạo thành kết tủa Ứng dụng: - Phản ứng kết tủa protein HNO3 dùng để nhận biết protein niệu thận Protein niệu xuất thường xuyên biểu bệnh lý thận tiết niệu - Bệnh thận tiết niệu phân chia mức độ protein niệu để có hướng chẩn đốn bệnh: o Khi lượng protein niệu thấp < 1g/24h: Gặp bệnh viêm thận bể thận, viêm thận kẽ, thận đa nang, xơ mạch thận, tăng huyết áp o Khi lượng protein niệu từ 1-3g/24h: Gặp bệnh lý cầu thận viêm cầu thận cấp mạn hay bệnh thận đái tháo đường, thường kèm theo triệu chứng phù mềm, tiểu hay vơ niệu, tăng huyết áp, tiểu máu o Khi protein niệu cao > 3,5g/24h: Biểu bệnh hội chứng thận hư, thường bao gồm triệu chứng giảm protein máu( phức hợp màu xanh tím Riêng (Prolin hydroprolin) +ninhydrin => phức hợp màu vàng II THUÔC THỬ - Dung dịch prôtêin 10% - Dung dịch ninhydrin 1% III TIẾN HÀNH B1: Cho vào ống nghiệm 2ml prôtêin 10% + 1ml ninhydrin 1% Lắc B2: Đem ống nghiệm đun cách thủy 80 (độ) phút IV HIỆN TƯỢNG Sau đun cách thủy 80 (độ) phút, dung dịch ống nghiệm có màu xanh tím nhạt V GIẢI THÍCH THÍ NGHIỆM Ninhydrin chất oxy hóa mạnh, acid amin trải qua q trình oxy hóa khử giải phóng NH3 + CO2 + R-CHO (tương ứng) + ninhydrin dạng khử Sau Ninhydrin dạng khử + NH3 + ninhydrin dạng không khử => Phức hợp màu xanh tím VI ỨNG DỤNG Hiện màu acid amin giấy sắc ký (Định tính) Xác định tỷ lệ % hàm lượng acid amin phương pháp aminoacid tự động (Định lượng) Xét nghiệm nước tiểu 11 thông số “Nước tiểu dịch xuất quan trọng nhất, chứa phần lớn chất cặn bã thể Những thay đổi số hoá lý thay đổi thành phần hoá học phản ánh rối loạn chuyển hố thể Vì vậy, xét nghiệm nước tiểu định quan trọng cần thiết giúp chẩn đoán bệnh lý” pH: Chỉ số pH dùng để kiểm tra xem nước tiểu có tính chất acid hay bazơ • Thay đổi: + sinh lý: sau ăn protein (pH axit) + bệnh lý Nitrit: • Bình thường khơng có nước tiểu • Xuất nhiễm khuẩn, nhiễm trùng đường nước tiểu Glucoso • Bình thường khơng có đường nước tiểu có glucose • Khi đường huyết máu tăng cao, chẳng hạn đái tháo đường khơng kiểm sốt đường nước tiểu Glucose tìm thấy bên nước tiểu thận bị tổn thương có bệnh Astobic acid (vitamin C) • Xuất trường hợp bổ xung nhiều, thừa vitamin => đào thải bên ngồi Specific Gravity (SG) • Tỉ trọng nước tiểu số nói cung thành phần có, mang tính chất bổ sung cho chẩn đốn thay đổi bất thường • Tăng: đái tháo đường • Giảm: đái tháo nhạt Blood (BLD) – máu • Bình thường có trường hợp đặc biệt ( nữ có chu kỳ kinh nguyệt) • Hồng cầu niệu dấu hiệu cho thấy có nhiễm trùng đường tiểu, sỏi thận, viêm cầu thận hay xuất huyết từ bàng quang bướu thận • Nếu số BLD tăng cao vượt mức cho phép dấu hiệu cảnh báo tổn thương thận, niệu quản, bàng quang, niệu đạo làm máu xuất nước tiểu Protein • Bình thường có với hàm lượng ít, kỹ thuật thơng thường khơng phát • Xuất trong: Viêm cầu thận, hội chứng thận hư Bilirubin • Xuất bệnh lý gan, mật, tan máu Urobilinogen (UBG) • Đây xét nghiệm giúp chẩn đốn bệnh lý gan hay túi mật • UBG sản phẩm tạo từ thối hóa bilirubin Urobilinogen có nước tiểu dấu hiệu bệnh gan (xơ gan, viêm gan), dòng chảy mật bị tắc nghẽn 10 Keton, Ceton • Dấu hiệu hay gặp bệnh nhân tiểu đường không kiểm sốt, chế độ ăn chất carbohydrate, nghiện rượu, nhịn ăn thời gian dài • Đây chất thải đường tiểu, cho biết thai phụ thai nhi thiếu dinh dưỡng mắc chứng tiểu đường Đồng thời dấu hiệu nhiễm trùng đường tiểu 11 Bạch cầu • Có nước tiểu trường hợp nhiễm khuẩn hệ thống tiết niệu ( bệnh phụ nữ: viêm âm đạo, âm hộ) Khi cần làm xét nghiệm nước tiểu? - -  Xét nghiệm nước tiểu thường định trường hợp: Kiểm tra sức khỏe định kỳ: khám tổng quát hàng năm, đánh giá trước phẫu thuật, nhập viện, sàng lọc bệnh thận, đái tháo đường, tăng huyết áp, bệnh gan,… Kiểm tra có triệu chứng thận: đau bụng, tiểu đau, đau sườn, sốt, máu nước tiểu triệu chứng tiết niệu khác Chẩn đoán bệnh: nhiễm trùng đường tiết niệu, sỏi thận, tiểu đường khơng kiểm sốt được, suy thận, suy nhược (tiêu vân), protein nước tiểu, sàng lọc ma túy viêm thận (viêm cầu thận) Theo dõi tiến triển bệnh đáp ứng với điều trị: bệnh thận liên quan đến tiểu đường, suy thận, bệnh thận liên quan đến lupus, bệnh thận liên quan đến huyết áp, nhiễm trùng thận, protein nước tiểu, máu nước tiểu Thử thai, khám thai định kỳ Báo cáo thí nghiệm khảo sát tính chất triglyceride I Ngun lý • Lipid khơng tan nước • Lipid tan dung môi hữu Độ tan Lipid tỷ lệ nghịch với độ phân cực dung mơi hữu Dụng cụ, hố chất • ống nghiệm sạch, khô, đánh số từ đến • Giá đỡ ống nghiệm • Máy đun cách thuỷ điều chỉnh nhiệt độ • pipet • ống nhỏ giọt • Bóng cao su • Hoá chất: Nước cất, dầu ăn, ethanol, acetone, toluene Các bước tiến hành Chuẩn bị dụng cụ hoá chất, xếp hợp lý Hút 1ml chất: nước cất, ethanol, acetone, toluene vào ống nghiệm theo thứ tự từ đến Nhỏ giọt dầu ăn vào ống nghiệm, quan sát tượng ghi lại Đưa ống nghiệm vào đun cách thuỷ vòng 10 phút nhiệt độ từ 60 đến 80 độ C Sau 10 phút, đưa ống nghiệm ra, quan sát tượng ghi lại Giải thích tượng Kết thí nghiệm • II III IV Ống nghiệm Trước đun Sau đun V Dầu ăn khơng tan, n Dầu ăn khơng t Giải thích kết Triglyceride este glycerol acid béo có trọng lượng phân tử lớn, cấu trúc phân tử cồng kềnh, động thấp, khả tạo liên kết hydro thấp, phân tử không phân cực triglyceride không tan nước tan dung môi phân cực protic tan tốt dung môi hữu không phân cực dung môi phân cực aprotic Ống Ống Ống Ống Trước đun: Dầu ăn không tan Sau đun: Nhiệt độ cao làm gia tang Trước đun: Dầu ăn tan lượng n Sau đun: Lượng dầu ăn hồ tan bị í Trước đun: Dầu ăn tan hoàn toàn dù Sau đun: Acetone bị bay nhi Trước đun: Dầu ăn tan hoàn toàn Sau đun: Lượng dầu ăn tan vào Chi tiết điểm sôi, số điện môi tỷ trọng hố chất dễ dàng tìm thấy mạng :3 VI Mở rộng ứng dụng thí nghiệm Qua thí nghiệm rút số điều sau: Sự nguy hiểm toluene, benzene hợp chất dị vòng rơi vào da Chúng gây bỏng hoại tử tổ chức khả hoà tan mạnh với triglyceride (thành phần lớp mỡ) nói riêng lipid nói chung Bản thân triglyceride dung môi hữu không phân cực nên số loại độc tố tan mỡ tan vào chúng Dimethyl Mercury, Dimethyl Cadmium hàm lượng chúng không diện hồn tồn máu mà nằm lượng mỡ thể Ở chiều ngược lại, nhờ tính chất mà điều chế thuốc tê Màng tế bào thần kinh có cấu trúc lipoprotein nên thuốc dễ tan mỡ thấm dễ qua màng tế bào thần kinh làm tăng độc lực thuốc VD: procaine, lidocaine, tetrecain loại thuốc tê từ yếu đến mạnh Vì lipid khơng tan nước nên tiêu hố cần nhũ tương hoá muối mật enzym lipase, cholesterol ester hydrolase, phosphilipase A2 tuỵ Báo cáo thí nghiệm nhũ tương hoá lipid I II Nguyên lý Nhũ tương hệ phân tán cao chất mà bình thường khơng tan vào nhau, thường dùng hai chất pha phân tán pha liên tục chất lỏng Trạng thái nhũ tương đa phần không bền vững, sau thời gian trạng thái hỗn hợp trở lúc đầu Trạng thái nhũ tương bền vững sau dừng trộn lẫn hai dung dịch mà hỗn hợp không trở trạng thái cũ trạng thái nhũ tương bền vững Dụng cụ, hố chất ống nghiệm khơ đánh số từ đến 3 pipet Ống nhỏ giọt Bóng cao su Giá đỡ ống nghiệm III IV Hoá chất: dầu ăn, nước cất, dung dịch Na2CO3 1%, dung dịch protein 10% Các bước tiến hành Chuẩn bị dụng cụ, xếp hợp lý Hút 1ml chất: nước cất, Na2CO3 1%, protein 10% vào ống nghiệm từ đến 3 Nhỏ giọt dầu ăn vào ống nghiệm Lắc ống nghiệm để yên giá, quan sát tượng Sau phút, quan sát lại kết giải thích tượng Kết Ống Ống Ống V Ngay sau lắc: hỗn hợp đạt trạng th Sau phút: Trạng thái hỗn hợp trở ban đ Ngay sau lắc: hỗn hợp đạt trạng th Sau phút: Trạng thái nhũ tương Ngay sau lắc: hỗn hợp đạt trạng th Sau phút: Trạng thái nhũ tương Giải thích tượng Vì dầu ăn vốn không tan nước nên sau lắc, dù bị phân tán thành hạt dầu nhỏ li ti sau để yên, động hỗn hợp giảm, hạt dầu gặp nhập lại lực Van der Waals chúng (lipid có kích thước phân tử thể tích phân tử lớn nên tác dụng lực Van der Waals chủ yếu cịn nước liên kết hidro lực tĩnh điện chủ yếu) Do đó, ống ta thấy tượng nhũ tương khơng bền vững Cịn ống 3, nhũ tương bền vững Na2CO3 protein chất hoạt động bề mặt, có khả làm giảm sức căng bề mặt pha hệ có đầu ưa nước đầu ưa mỡ Đầu ưa mỡ tan vào lòng hạt dầu, cịn đầu ưa nước quay phía ngồi, tạo liên kết hidro với phân tử nước xung quanh Trong trường hợp này, hai hạt dầu lại gần nhau, chúng bị đẩy lực tĩnh điện đầu ưa nước này, khiến cho nhũ tương hoá trở nên bền vững Ở ống khơng có tượng nên nhũ tương không bền vững VI Mở rộng ứng dụng Sản xuất nước giặt, nước rửa bát giúp tẩy vết dầu theo chế Sự tiêu hoá lipid cần tới lecithin muối mật dịch mật để nhũ tương hoá lipid giúp tăng 1000 lần diện tích tiếp xúc với enzym lipase, cholesterol ester hydrolase phospholipase A2 dịch tuỵ để trình tiêu hố hiệu 3 Sản xuất số chế phẩm thuốc dạng nhũ tương, nhũ tương mĩ phẩm  ... ống nghiệm có màu xanh tím nhạt V GIẢI THÍCH THÍ NGHIỆM Ninhydrin chất oxy hóa mạnh, acid amin trải qua q trình oxy hóa khử giải phóng NH3 + CO2 + R-CHO (tương ứng) + ninhydrin dạng khử Sau Ninhydrin... dụng Dùng để phân loại nhóm ccbohydrat với chất khác dựa vào cường độ màu chúng BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA HỌC PROTID Phản ứng tạo kết tủa protein dd HNO3 Nguyên tắc: biến tính tạo kết tủa Tiến hành:... acid đậm đặc bị rút nước tạo liên kết nối đơi gọi furfural cho polypenol furfural chuyển màu 2.2 Hóa chất Glucozo 5%, dd H2SO4 đậm đặc, thuốc thử molish 2.3 Tiến hành - 1ml dd glucozo 5% -2 giọt