Nghiên cứu sử dụng nano bạc và các chất điều tiết sinh trưởng trong nuôi cấy in vitro giống mía roc22 (saccharum offcinarum l )

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGÔ THỊ ÁNH NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG NANO BẠC VÀ CÁC CHẤT ĐIỀU TIẾT SINH TRƯỞNG TRONG NI CẤY IN VITRO GIỐNG MÍA ROC22 (Saccharum offcinarum L.) Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 Người hướng dẫn khoa học: TS Đồng Huy Giới NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 29 tháng năm 2017 Tác giả luận văn Ngô Thị Ánh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn, nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Đồng Huy Giới, người tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài, Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo Đặc biệt xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô Bộ Môn sinh học – Khoa Công Nghệ Sinh Học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi suốt trình học tập, thực đề tài hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo – Giám đốc Trung tâm đặc biệt anh chị em phòng khoa học công nghệ sinh học – Trung tâm Nghiên cứu ứng dụng phát triển công nghệ sinh học Thanh Hóa giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi mặt, động viên, khuyến khích tơi hồn thành luận văn./ Hà Nội, ngày 29 tháng năm 2017 Tác giả luận văn Ngô Thị Ánh ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix The abstract x Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.3.1 Địa điểm nghiên cứu 1.3.2 Thời gian nghiên cứu .2 1.3.3 Đối tượng vật liệu nghiên cứu .2 1.4 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Giới thiệu mía .3 2.1.1 Nguồn gốc, phân bố, lịch sử phát .3 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Giá trị kinh tế 2.1.4 Đặc điểm thực vật học .5 2.2 Nghiên cứu nuôi cấy In vitro mía 11 2.2.1 Nghiên cứu nước 12 2.2.2 Nghiên cứu nước 13 2.3 Giới thiệu công nghệ nano nano bạc 16 2.3.1 Cơ sở khoa học công nghệ nano 16 2.3.2 Nano bạc chế diệt khuẩn ion bạc 17 2.3.3 Các nghiên cứu sử dụng nano nuôi cấy mô tế bào thực vật 18 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 21 iii 3.1 Địa điểm nghiên cứu 21 3.2 Thời gian nghiên cứu 21 3.3 Đối tượng nghiên cứu 21 3.4 Nội dung nghiên cứu 21 3.5 Phương pháp nghiên cứu 21 3.5.1 Thiết kế thí nghiệm: 21 3.5.2 Các tiêu nghiên cứu phương pháp xác định 22 3.5.3 Quy trình nghiên cứu 22 3.5.4 Phân tích số liệu 28 Phần Kết thảo luận 29 4.1 Nội dung 1: Nghiên cứu khả khử trùng nano bạc mẫu mía mang chồi bên non 29 4.1.1 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ thời gian xử lí nano bạc khử trùng mẫu mía mang chồi bên non mía ROC22 29 4.2 Nội dung 2: Nghiên cứu khả hình thành mô sẹo tái sinh chồi từ mô sẹo mẫu non 33 4.2.1 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ 2,4-D nano bạc đến khả hình thành mơ sẹo từ mẫu cấy non mía ROC22 33 4.2.2 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ BA, Kinetine, nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 37 4.3 Nội dung 3: Nghiên cứu khả tái sinh chồi cấp nhân chồi cấp từ mang chồi bên 40 4.3.1 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ BA, nano bạc đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên 40 4.3.2 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp nano bạc đến khả nhân chồi từ chồi cấp 42 4.4 Nội dung 4: Nghiên cứu khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 45 4.4 Thí nghiệm Ảnh hưởng nồng độ BA, Kinetine kết hợp nano bạc đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 45 4.4.2 Ảnh hưởng nồng độ BA, Ki kết hợp nano bạc đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 47 4.5 Nội dung 5: Nghiên cứu khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp 48 iv 4.5.1 Ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp 48 4.5.2 Ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp nano bạc đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp 50 Phần Kết luận kiến nghị 52 5.1 Kết luận 52 5.2 Kiến nghị .52 Tài liệu tham khảo 53 Phụ lục 56 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt BA Bezyl adenine CS Cộng CT Công thức CV% Sai số thí nghiệm GA Gibberellin IAA Indole – – acetic acid IBA Indole – – butylic acid LSD0,05 Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% MS Murashige and Skoog NAA α – naphthalene acetic acid NS Siliver-Nano NXB Nhà xuất TB Trung bình vi DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1.a Ảnh hưởng nồng độ nano bạc khử trùng mẫu mang chồi bên 29 Bảng 4.1.b Ảnh hưởng nồng độ nano bạc khử trùng mẫu mang non 30 Bảng 4.1.c Ảnh hưởng thời gian xử lí nano bạc (NS) khử trùng mẫu mang chồi bên 32 Bảng 4.1.d Ảnh hưởng thời gian xử lí nano bạc (NS) khử mẫu mang non 32 Bảng 4.2.a Ảnh hưởng 2,4-D đến khả hình thành mơ sẹo từ mẫu cấy non 34 Bảng 4.2.b Ảnh hưởng nồng độ 2,4-D kết hợp với nano bạc đến khả hình thành mơ sẹo từ mẫu cấy non 35 Bảng 4.3.a Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp kinetine đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 37 Bảng 4.3.b Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 38 Bảng 4.4.a Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên 40 Bảng 4.4.b Ảnh hưởng nồng độ BA, nano bạc đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên 41 Bảng 4.5.a Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp kinetine đến khả nhân chồi từ chồi cấp 43 Bảng 4.5.b Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp với nano bạc đến khả nhân chồi từ chồi cấp 44 Bảng 4.6.a Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp 0,2mg/l Kinetine đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 46 Bảng 4.6.b Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA, Kinetine kêt hợp với nano bạc đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 47 Bảng 4.7.a Ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp 49 Bảng 4.7.b Ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp với nano bạc đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp 50 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Hình thái mía Hình 4.1 Ảnh hưởng 2,4-D đến khả hình thành mơ sẹo từ mẫu cấy non mía Roc22 36 Hình 4.2 Ảnh hưởng nano bạc (NS) đến khả hình thành mơ sẹo từ mẫu cấy non mía Roc22 37 Hình 4.3.a Ảnh hưởng BA kết hợp kinetine đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 39 Hình 4.3.b Ảnh hưởng BA, kinetine kết hợp nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo .39 Hình 4.4 Ảnh hưởng BA, Kinetine, nano bạc (NS) đến khả tái sinh chồi từ chồi cấp 42 Hình 4.5.a Ảnh hưởng BA kết hợp 0,2 mg/l Ki đến khả nhân chồi từ chồi cấp (sau tuần theo dõi) 45 Hình 4.5.b Ảnh hưởng BA, 0,2 mg/l Ki kết hợp nano bạc (NS) đến khả nhân chồi từ chồi cấp (sau tuần theo dõi) 45 Hình 4.6 Ảnh hưởng nồng độ BA, Ki kêt hợp với nano bạc đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp 48 Hình 4.7 Ảnh hưởng NAA kết hợp nano bạc đến khả rễ chồi in vitro 51 viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Ngô Thị Ánh Tên luận văn: Nghiên cứu sử dụng nano bạc chất điều tiết sinh trưởng ni cấy in vitro giống mía ROC22 (Saccharum offcinarum L.) Ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 Tên sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: Xác định nồng độ thời gian xử lý nano bạc thích hợp cho việc khử trùng mẫu mía ROC22 Xác định nồng độ nano bạc chất điều tiết sinh trưởng thích hợp cho ni cấy in vitro mía ROC22 Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu thực theo phương pháp nuôi cấy mô hành, thí nghiệm bố trí cơng thức với lần lặp lại, số mẫu/công thức 20 mẫu thí nghiệm Số liệu xử lý phần mềm Microsoft Excel 2007, IRRISTAT 5.0 Kết kết luận: Bố trí thí nghiệm theo mục đích đề xác định được: i) Nồng độ nano bạc thích hợp cho khử trùng mẫu mía 150 ppm Trong đó, mẫu mía mang chồi bên, thời gian tiếp xúc 60 phút (tỉ lệ mẫu sống 76,70 %), mẫu mía mang non thời gian tiếp xúc 45 phút (85 %) Iii) Môi trường thích hợp để tạo mơ sẹo từ mẫu cấy non 2,5 mg/l 2,4-D+ ppm nano bạc cho tỉ lệ mẫu tạo mô sẹo 96,70 % iv) Môi trường bổ sung 1,5 mg/l BA + 0,2 mg/l kinetine + ppm nano bạc cho tỉ lệ mẫu bật chồi, số lượng chồi chất lượng chồi tái sinh từ mô sẹo mẫu non tốt với tỉ lệ mẫu bật chồi 96,67 % số chồi/mẫu 161,33 (chồi) v) Môi trường bổ sung 0,5 mg/l BA + ppm nano bạc cho tỉ lệ tái sinh chất lượng chồi cấp từ mẫu mang chồi bên tốt nhất, tỉ lệ mẫu bật chồi 100,00 %, chồi cao 10,03 (cm) vi) Môi trường bổ sung 1,5 mg/l BA + 0,2 mg/l kinetine kết hợp với ppm nano bạc cho khả nhân chồi từ chồi chồi cấp tốt nhất, hệ số nhân chồi 15,64 (lần) vii) Mơi trường có sổ sung 1,5 mg/l BA + 0,2 mg/l kinetine kết hợp với ppm nano bạc cho hệ số nhân chồi từ chồi cấp tốt 9,43 (lần) viii) Môi trường bổ sung mg/l NAA kết hợp với ppm nano bạc cho tỉ lệ rễ chất lượng rễ chồi tốt tỉ lệ chồi rễ 100,00 %, số rễ/chồi 14,63 (rễ) ix Bảng 4.3.a Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp kinetine đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4-2 25/ 4/17 1:45 :PAGE anh huong cua ba, kinetine toi tai sinh choi tu mo seo MEANS FOR EFFECT CT -CT NOS SMBC SC/M 0.000000 0.000000 9.00000 53.3333 17.6667 70.6667 3 18.6667 134.667 17.6667 97.6667 SE(N= 3) 0.316227 1.03548 5%LSD 8DF 1.03119 3.37660 -MEANS FOR EFFECT LL -LL NOS SMBC SC/M 12.6000 72.0000 13.0000 70.6000 12.2000 71.2000 SE(N= 5) 0.244949 0.802081 5%LSD 8DF 0.798753 2.61551 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4-2 25/ 4/17 1:45 :PAGE anh huong cua ba, kinetine toi tai sinh choi tu mo seo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 12.600 7.4814 0.54772 4.3 0.0000 0.1287 SC/M 15 71.267 46.586 1.7935 2.5 0.0000 0.4989 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi c1 t? ch?i b麩 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SMSS HC TB 18,0000 19,0000 6,63333 20,0000 19,3333 8,20000 62 |LL 20,0000 19,0000 7,06667 3 16,3333 19,6667 4,83333 15,6667 19,3333 4,03333 SE(N= 3) 0,349603 0,401386 0,149629 5%LSD 8DF 1,00002 1,30888 0,373926 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SMSS HC TB 18,0000 19,0000 6,12000 17,8000 19,0000 6,08000 18,2000 19,8000 6,26000 SE(N= 5) 0,270801 0,310913 0,115902 5%LSD 8DF 0,883056 1,01385 0,377946 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 18,000 1,9272 0,60553 3,4 0,0001 0,6035 SMSS 15 19,267 0,70373 0,69522 3,6 0,7500 0,1717 HC TB 15 6,1533 1,5833 0,25917 4,2 0,0000 0,5441 63 |LL Bảng 4.4.a Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi c1 từ mang chồi bên MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SMSS HC TB 18.0000 19.0000 6.63333 20.0000 19.3333 8.20000 20.0000 19.0000 7.06667 3 16.3333 19.6667 4.83333 15.6667 19.3333 4.03333 SE(N= 3) 0.349603 0.401386 0.149629 5%LSD 8DF 1.14002 1.30888 0.487926 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SMSS HC TB 18.0000 19.0000 6.12000 17.8000 19.0000 6.08000 18.2000 19.8000 6.26000 SE(N= 5) 0.270801 0.310913 0.115902 5%LSD 8DF 0.883056 1.01385 0.377946 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT |LL | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 18.000 1.9272 0.60553 3.4 0.0001 0.6035 SMSS 15 19.267 0.70373 0.69522 3.6 0.7500 0.1717 HC TB 15 6.1533 1.5833 0.25917 4.2 0.0000 0.5441 64 Bảng 4.3.b Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4-3 25/ 4/17 1:51 :PAGE anh huong cua BA, kinetine va nano Ag den tai sinh choi tu mo seo MEANS FOR EFFECT CT -CT NOS SMBC SC/M 18.6667 134.667 18.6667 80.0000 19.3333 161.333 3 18.3333 117.667 17.3333 78.6667 16.3333 65.3333 SE(N= 3) 0.291865 1.42465 5%LSD 10DF 0.919677 4.48913 -MEANS FOR EFFECT LL -LL NOS SMBC SC/M 18.5000 107.167 18.0000 105.500 17.8333 106.167 SE(N= 6) 0.206380 1.00738 5%LSD 10DF 0.650310 3.17429 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4-3 25/ 4/17 1:51 :PAGE anh huong cua BA, kinetine va nano Ag den tai sinh choi tu mo seo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT |LL | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 18 18.111 1.1318 0.50553 2.8 0.0004 0.1054 SC/M 18 106.28 35.445 2.4676 2.3 0.0000 0.5261 65 Bảng 4.4.a Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi c1 từ mang chồi bên MEANS FOR EFFECT CT -CT NOS SMBC SMSS HC TB 18.0000 19.0000 6.63333 20.0000 19.3333 8.20000 20.0000 19.0000 7.06667 3 16.3333 19.6667 4.83333 15.6667 19.3333 4.03333 SE(N= 3) 0.349603 0.401386 0.149629 5%LSD 8DF 1.14002 1.30888 0.487926 -MEANS FOR EFFECT LL -LL NOS SMBC SMSS HC TB 18.0000 19.0000 6.12000 17.8000 19.0000 6.08000 18.2000 19.8000 6.26000 SE(N= 5) 0.270801 0.310913 0.115902 5%LSD 8DF 0.883056 1.01385 0.377946 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3-1 25/ 4/17 1: :PAGE anh huong cua BA den kha nang tai sinh choi cấp từ mang chồi bên F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 18.000 1.9272 0.60553 3.4 0.0001 0.6035 SMSS 15 19.267 0.70373 0.69522 3.6 0.7500 0.1717 HC TB 15 6.1533 1.5833 0.25917 4.2 0.0000 0.5441 66 |LL Bảng 4.4.b Ảnh hưởng nồng độ BA, nano bạc đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3-3 25/ 4/17 1:16 :PAGE anh huong cua BA, kinetine nano Ag den kha nang tai sinh choi tu choi C1 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SMSS HC TB 18,0000 17,6667 8,16667 20,0000 14,6667 8,16667 20,0000 18,6667 10,0333 3 20,0000 15,6667 7,20000 18,0000 14,0000 6,13333 17,3333 12,6667 3,20000 SE(N= 3) 0,467460 0,417222 0,148698 5%LSD 10DF 1,10298 1,31468 0,488551 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SMSS HC TB 19,0000 15,6667 7,20000 18,8333 15,5000 7,18333 18,8333 15,5000 7,06667 SE(N= 6) 0,330544 0,295021 0,105145 5%LSD 10DF 1,04156 0,929621 0,331316 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3-3 25/ 4/17 1:16 :PAGE anh huong cua BA, kinetine nano Ag den kha nang tai sinh choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 18) SD/MEAN | | NO, BASED ON BASED ON % | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | SMBC 18 18,889 1,3235 0,80966 4,3 0,0048 SMSS 18 15,556 2,2022 0,72265 4,6 0,0000 HC TB 18 7,1500 2,1934 0,25755 3,6 0,0000 67 | | | 0,9189 0,8996 0,6380 |LL Bảng 4.4.b Ảnh hưởng nồng độ BA, nano bạc đến khả tái sinh chồi cấp từ mang chồi bên TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4-1 25/ 4/17 21:49 :PAGE anh huong cua BA den tai sinh choi tu mo seo MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 0,000000 0,000000 6,66667 46,3333 8,66667 58,3333 3 11,6667 110,333 11,3333 67,0000 SE(N= 3) 0,197203 1,36018 5%LSD 8DF 0,643060 4,43541 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SC/M 7,80000 57,4000 8,00000 56,0000 7,20000 55,8000 SE(N= 5) 0,152753 1,05359 5%LSD 8DF 0,498112 3,43566 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4-1 25/ 4/17 21:49 :PAGE anh huong cua BA den tai sinh choi tu mo seo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 7,6667 4,4186 0,34157 4,5 0,0000 0,0152 SC/M 15 56,400 36,814 2,3559 4,2 0,0000 0,5350 68 |LL Bảng 4.5.a Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp kinetine đến khả nhân chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4-2 25/ 4/17 1:45 :PAGE anh huong cua ba, kinetine toi tai sinh choi tu mo seo MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 0,000000 0,000000 9,00000 53,3333 17,6667 70,6667 3 18,6667 134,667 17,6667 97,6667 SE(N= 3) 0,316227 1,03548 5%LSD 8DF 1,03119 3,37660 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SC/M 12,6000 72,0000 13,0000 70,6000 12,2000 71,2000 SE(N= 5) 0,244949 0,802081 5%LSD 8DF 0,798753 2,61551 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4-2 25/ 4/17 1:45 :PAGE anh huong cua ba, kinetine toi tai sinh choi tu mo seo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 12,600 7,4814 0,54772 4,3 0,0000 0,1287 SC/M 15 71,267 46,586 1,7935 2,5 0,0000 0,4989 69 |LL Bảng 4.5.b Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp với nano bạc đến khả nhân chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4-3 25/ 4/17 1:51 :PAGE anh huong cua BA, kinetine va nano Ag den tai sinh choi tu mo seo MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 18,6667 134,667 18,6667 80,0000 19,3333 161,333 3 18,3333 117,667 17,3333 78,6667 16,3333 65,3333 SE(N= 3) 0,291865 1,42465 5%LSD 10DF 0,919677 4,48913 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SC/M 18,5000 107,167 18,0000 105,500 17,8333 106,167 SE(N= 6) 0,206380 1,00738 5%LSD 10DF 0,650310 3,17429 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4-3 25/ 4/17 1:51 :PAGE anh huong cua BA, kinetine va nano Ag den tai sinh choi tu mo seo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT |LL | (N= 18) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 18 18,111 1,1318 0,50553 2,8 0,0004 0,1054 SC/M 18 106,28 35,445 2,4676 2,3 0,0000 0,5261 70 Bảng 4.6.a Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp 0,2mg/l Kinetine đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5-1 25/ 4/17 8:20 :PAGE anh huong cua BA den kha nag nhan choi tu choi C1 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 17,6667 1,10000 18,6667 2,16667 19,3333 2,60000 3 19,6667 3,13333 18,3333 1,96667 SE(N= 3) 0,316228 0,572519E-01 5%LSD 8DF 1,03119 0,186693 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SC/M 19,0000 2,20000 18,4000 2,20000 18,8000 2,18000 SE(N= 5) 0,244949 0,443471E-01 5%LSD 8DF 0,798754 0,144612 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5-1 25/ 4/17 8:20 :PAGE anh huong cua BA den kha nag nhan choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT |LL | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 18,733 0,88372 0,54772 2,9 0,0139 0,2687 SC/M 15 2,1933 0,70556 0,99163E-01 4,5 0,0000 0,9346 71 Bảng 4.5.a Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp kinetine đến khả nhân chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5-2 25/ 4/17 8:24 :PAGE anh huong cua BA + kinetine den kha nang nhan choi tu choi C1 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 17,6667 1,10000 17,6667 19,0000 18,6667 19,1000 3 19,6667 23,9333 18,6667 10,6000 SE(N= 3) 0,316228 0,105161 5%LSD 8DF 1,03119 0,342920 MEANS FOR EFFECT LL -LL NOS SMBC SC/M 18,4000 14,8400 18,2000 14,7600 18,8000 14,6400 SE(N= 5) 0,244949 0,814575E-01 5%LSD 8DF 0,798754 0,265625 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5-2 25/ 4/17 8:24 :PAGE anh huong cua BA + kinetine den kha nang nhan choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 15 18,467 0,91548 0,54772 3,0 0,0105 0,2687 SC/M 15 14,747 8,3450 0,18214 1,2 0,0000 0,2743 72 |LL Bảng 4.5.b Ảnh hưởng nồng độ BA, kinetine kết hợp với nano bạc đến khả nhân chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5-3 25/ 4/17 8:28 :PAGE anh huong cua BA, kinetine nano Ag den kha nang nhan choi tu choi C1 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SMBC SC/M 19,6667 23,9333 19,6667 52,5667 20,0000 95,8667 3 20,0000 57,5000 18,3333 57,6667 17,3333 31,3333 SE(N= 3) 0,298142 0,473492 5%LSD 10DF 0,939457 1,49199 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SMBC SC/M 19,1667 53,3000 19,1667 52,5167 19,1667 53,6167 SE(N= 6) 0,210819 0,334809 5%LSD 10DF 0,664297 1,05500 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5-3 25/ 4/17 8:28 :PAGE anh huong cua BA, kinetine nano Ag den kha nang nhan choi tu choi C1 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 18) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SMBC 18 19,167 1,0981 0,51640 2,7 0,0005 1,0000 SC/M 18 53,144 23,754 0,82011 1,5 0,0000 0,1031 73 |LL Bảng 4.6.a Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp 0,2 mg/l Kinetine đến khả nhân nhanh chồi từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6-2 26/ 4/17 0:15 :PAGE anh huong cua ba, kinetine nano Ag den kha nang nhan choi C2 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SC TB/M HMTB 0,420000 11,7000 8,40000 11,6333 8,53333 12,4000 3 9,43333 13,0667 5,80000 14,1000 5,76667 13,4333 SE(N= 3) 0,730411E-01 0,166222 5%LSD 10DF 0,230155 0,523771 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SC TB/M HMTB 6,26833 12,7667 6,35333 12,6333 6,55500 12,7667 SE(N= 6) 0,516478E-01 0,117537 5%LSD 10DF 0,162744 0,370362 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6-2 26/ 4/17 0:15 :PAGE anh huong cua BA, kinetine nano Ag den kha nang nhan choi c2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 18) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SC TB/M 18 6,3922 3,0988 0,12651 2,0 0,0000 0,0081 HMTB 18 12,722 0,95397 0,28790 2,3 0,0000 0,6667 74 |LL Bảng 4.7.a Ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7-1 25/ 4/17 11:29 :PAGE anh huong cua NAA den re MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SO RETB/ SO CHOI CDAI RET 0,000000 0,000000 0,000000 9,20000 17,3333 3,20000 12,3333 19,6667 3,70000 3 12,1333 19,0000 3,66667 10,7333 16,6667 2,70000 SE(N= 3) 0,239792 0,401393 0,636833E-01 5%LSD 8DF 0,781938 1,30890 0,207665 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SO RETB/ SO CHOI CDAI RET 8,78000 14,4000 2,68000 8,78000 14,6000 2,66000 9,08000 14,6000 2,62000 SE(N= 5) 0,185742 0,310917 0,493289E-01 5%LSD 8DF 0,605686 1,01387 0,160856 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7-1 25/ 4/17 11:29 :PAGE anh huong cua NAA den re F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SO RETB/ 15 8,8800 4,7538 0,41533 4,7 0,0000 0,4579 SO CHOI 15 14,533 7,6239 0,69523 4,8 0,0000 0,8730 CDAI RET 15 2,6533 1,4267 0,11030 4,2 0,0000 0,6967 75 |LL Bảng 4.7.b Ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp với nano bạc đến khả rễ tạo hoàn chỉnh từ chồi cấp TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7-2 25/ 4/17 13: :PAGE anh huong cua NAA nano Ag den re MEANS FOR EFFECT CT -CT NOS SORETB/C SOCHOITB CDAIRETB 12,3333 19,6667 3,70000 15,2000 19,0000 4,10000 14,6333 20,0000 4,23333 3 13,2000 18,0000 3,46667 10,5333 18,0000 3,26667 8,26667 15,6667 2,83333 SE(N= 3) 0,981312E-01 0,467460 0,809663E-01 5%LSD 10DF 0,309215 1,47298 0,255128 MEANS FOR EFFECT LL LL NOS SORETB/C SOCHOITB CDAIRETB 12,3833 18,3333 3,65000 12,3167 18,6667 3,65000 12,3833 18,1667 3,50000 SE(N= 6) 0,693892E-01 0,330544 0,572518E-01 5%LSD 10DF 0,218648 1,04156 0,180403 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7-2 25/ 4/17 13: :PAGE anh huong cua NAA nano Ag den re F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL, SECTION VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 18) SD/MEAN | | | NO, BASED ON BASED ON % | | | OBS, TOTAL SS RESID SS | | | SORETB/C 18 12,361 2,4543 0,16997 1,4 0,0000 0,7448 SOCHOITB 18 18,389 1,6139 0,80966 4,4 0,0009 0,5750 CDAIRETB 18 3,6000 0,50990 0,14024 3,9 0,0000 0,1509 76 |LL ... giả: Ngô Thị Ánh Tên luận văn: Nghiên cứu sử dụng nano bạc chất điều tiết sinh trưởng ni cấy in vitro giống mía ROC22 (Saccharum offcinarum L. ) Ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 Tên... xử l? ? nano bạc thích hợp cho việc khử trùng mẫu mía ROC22 - Xác định nồng độ nano bạc chất điều tiết sinh trưởng thích hợp cho ni cấy in vitro mía ROC22 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU 1.3.1 Địa điểm nghiên. .. hình thái in vitro (Rostami A and Shahsavar A, 200 9) Chính báo cáo này, nano bạc chất điều tiết sinh trưởng nghiên cứu sử dụng để nâng cao hiệu nhân giống mía ROC22 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Xác