Thử nghiệm sử dụng bacteriocin trong điều trị bệnh gan, thận mủ trên cá tra pangasianodon hypophthalmus giai đoạn giống tại tỉnh an giang

UBND TỈNH AN GIANG TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG -oOo - BÁO CÁO TỔNG KẾT NHIỆM VỤ KH&CN CƠ SỞ THỬ NGHIỆM SỬ DỤNG BACTERIOCIN TRONG ĐIỀU TRỊ BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) GIAI ĐOẠN GIỐNG TẠI TỈNH AN GIANG NGUYỄN THỊ THÚY HẰNG An Giang, tháng năm 2018 UBND TỈNH AN GIANG TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG -oOo - BÁO CÁO TỔNG KẾT NHIỆM VỤ KH&CN CƠ SỞ THỬ NGHIỆM SỬ DỤNG BACTERIOCIN TRONG ĐIỀU TRỊ BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) GIAI ĐOẠN GIỐNG TẠI TỈNH AN GIANG KHOA NN&TNTN (Họ tên, chữ ký đóng dấu) CHỦ NHIỆM NHIỆM VỤ (Họ tên chữ ký) NGUYỄN THỊ THÚY HẰNG CƠ QUAN CHỦ TRÌ (Họ tên, chữ ký đóng dấu) CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG Nhiệm vụ khoa học công nghệ “Thử nghiệm sử dụng bacteriocin điều trị bệnh gan, thận mủ cá Tra giai đoạn giống tỉnh An Giang” nhóm tác giả Nguyễn Thị Thúy Hằng, Phan Thị Thanh Vân Trịnh Thị Lan, công tác khoa Nông nghiệp – Tài nguyên Thiên nhiên thực Nhóm tác giả báo cáo kết nghiên cứu đƣợc Hội đồng Khoa học Đào tạo Trƣờng Đại học An Giang thông qua ngày tháng năm 2018 Thƣ ký Ths Nguyễn Thị Lan Phƣơng Phản biện Phản biện Ths Ngô Thị Hạnh Ths Trần Kim Hoàng Chủ tịch Hội đồng PGS.Ts Võ Văn Thắng i LỜI CẢM TẠ Chủ nhiệm nhiệm vụ thành viên chân thành cám ơn: Ban Giám Hiệu, Sở Khoa học – Cơng nghệ tỉnh An Giang, Phịng Quản lý Khoa học Hợp tác Quốc tế, Phòng Kế hoạch – Tài vụ, Ban Chủ Nhiệm Khoa Nông nghiệp – Tài nguyên Thiên nhiên, Lãnh đạo Bộ môn Thủy sản, Quản lý Khu thí nghiệm thực hành Ni trồng Thủy sản Trƣờng Đại học An Giang tạo điều kiện cho việc thực đề tài An Giang, ngày 14 tháng năm 2018 Ngƣời thực Nguyễn Thị Thúy Hằng ii TÓM TẮT Thử nghiệm đánh giá khả kháng khuẩn bacteriocin vi khuẩn gâ bệnh gan, thận mủ cá Tra giống đƣợc thực hiện, nhằm mục tiêu t m giải pháp c thể tha đƣợc thuốc kháng sinh để điều trị hiệu cho t m cá an toàn cho sức kh e ngƣời Kết phân lập định danh cá Tra có dấu hiệu bơi lờ đờ, b ăn, xuất huyết bên ngồi da, đầu, thân…đặc biệt có dấu hiệu bệnh lý đặc trƣng: gan, thận tỳ tạng có đốm trắng phân lập định danh đƣợc vi khuẩn E ictaluri tác nhân gây bệnh gan thận mủ cá Tra Kết xác định tính nhạy bacteriocin vi khuẩn E ictaluri phƣơng pháp khuếch tán giếng thạch cho thấy bacteriocin c khả tạo v ng kháng khuẩn thể tích 20, 30, 40, 50 60 μl với đƣờng kính v ng v trùng tƣơng ứng 8,57 mm ± 0,55; 17,87 mm ± 0,95; 18,17 mm ± 0,98; 20,20 mm ± 0,35 22,97 mm ± 1,15 Trong đ , giếng đối chứng đƣợc bơm nƣớc muối sinh l tiệt trùng (NaCl 0,85%) th kh ng tạo v ng v trùng xung quanh giếng Đồng thời, kết thử nghiệm điều trị bacteriocin cá Tra đƣợc gây cảm nhiễm vi khuẩn E ictaluri với mật số 6,8 x 107 CFU/mL, cho thấy tỉ lệ sống hiệu điều trị (RPS) (%) NT1.4 – 40mL/Kg thức ăn, đạt cao tƣơng ứng 92,22 % 91,86% thí nghiệm trại thực nghiệm thí nghiệm điều trị ao lần lƣợt 98,38 % 79,14 % o n ictaluri, Pangasianodon hypophthalmus ABSTRACT Evaluation the resistance of bacteriocin to bacteria causing the infectious Enteric septicaemia disease of fingerling catfish was conducted, aiming to find a new solution that can replace antibiotics to treat effectively Shrimp and fish are safe for human health The results of isolation and identification of catfish have signs of swimming sluggish, eliminating eating, haemorrhage outside the skin, head, body especially signs specific pathological diseases: liver, kidney and spleen with white spots, isolated and identified E ictaluri as the causative agent of Enteric septicaemia disease Results of bacteriocin susceptibility analysis for E ictaluri by welldiffusion method, showed that the bacteriocin was capable of producing zone of inhibition diameter with different volumes of 20, 30, 40, 50 and 60 μl with of 8,57 mm ± 0,55; 17,87 mm ± 0,95; 18,17 mm ± 0,98; 20,20 mm ± 0,35 and 22,97 mm ± 1,15, respectively While, at the control well, the sterile saline solution (NaCl 0,85%) was injected without sterile loop around the well At the same time, the bacteriocin treatment test result on catfish was infected with E ictaluri with a density of 6,8 x 107 CFU/mL, indicating survival and ralative survival rate (RPS) of NT1.4 40mL/Kg feed, reaching the highest respectively 92,22% and 91,86 % And experimental and experimental treatments in ponds were 98.38% and 79,14%, respectively Key words: bacteriocin, E ictaluri, Pangasianodon hypophthalmus iii CAM KẾT KẾT QUẢ Tôi xin cam kết đâ c ng tr nh nghiên cứu riêng Các kết số liệu cơng trình nghiên cứu nà đƣợc ghi nhận xử lý rõ ràng phƣơng pháp Những kết luận khoa học cơng trình nghiên cứu nà chƣa đƣợc công bố công trình nghiên cứu khác An Giang, ngày 14 tháng năm 2018 Ngƣời thực Nguyễn Thị Thúy Hằng iv MỤC LỤC Trang CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG i LỜI CẢM TẠ ii TÓM TẮT iii CAM KẾT KẾT QUẢ iv MỤC LỤC v DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH HÌNH viii CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 TÍNH CẦN THIẾT CỦA ĐỀ TÀI 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 1.4.NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.5 NHỮNG ĐÓNG GÓP CỦA ĐỀ TÀI CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN E ictaluri 2.2 TÌNH HÌNH DỊCH BỆNH TRÊN CÁ TRA 2.3 TỔNG QUAN VÀ NHỮNG NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CỦA BACTERIOCIN 2.3.1 Tổng quan bacteriocin tình hình nghiên cứu ứng dụng bacteriocin thực phẩm 2.3.2 Tình hình nghiên cứu ứng dụng bacteriocin nuôi thủy sản6 2.4 HIỆN TRẠNG SỬ DỤNG THUỐC KHÁNG SINH ĐỐI VỚI BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA v CHƢƠNG 10 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 3.1 MẪU NGHIÊN CỨU 10 3.2 THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU 10 3.2.1 Hệ thống ao/thùng thí nghiệm 10 3.2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 10 3.3 CÔNG CỤ NGHIÊN CỨU 13 3.4 PHÂN TÍCH DỮ LIỆU 14 CHƢƠNG 15 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 15 3.1 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VI KHUẨN E.ictaluri GÂY BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA GIỐNG 15 3.2 KẾT QUẢ KIỂM TRA KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA BACTERIOCIN ĐỐI VỚI VI KHUẨN E ictaluri GÂY BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA GIỐNG 18 3.3 KẾT QUẢ ÁC ĐỊNH NỒNG ĐỘ ỨC CHẾ 50 % ID50 CỦA VI KHUẨN E ictaluri 20 3.4 KẾT QUẢ ĐIỀU TRỊ BỆNH GAN THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA DO VI KHUẨN E ictaluri G RA TRONG TRẠI THỰC NGHIỆM 24 CHƢƠNG 34 KẾT LUẬN V KHU ẾN NGHỊ 34 5.1 KẾT LUẬN 34 5.2 KHU ẾN NGHỊ 34 T I LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC 39 vi DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1: Kết định danh vi khuẩn định danh API 20E 17 Bảng 2: Đƣờng kính v ng v trùng bacteriocin vi khuẩn E.ictaluri ph ng thí nghiệm 20 Bảng 3: Kết tái phân lập định danh vi khuẩn định danh API20E 23 Bảng 4: Hiệu điều trị bacteriocin cá Tra cảm nhiễm vi khuẩn E ictaluri 27 Bảng 5: Tỉ lệ sống TB cá NT 10 ngà cho ăn bacteriocin 30 Bảng 6: Hiệu điều trị - giá trị RPS bacteriocin vi khuẩn E.ictaluri gâ bệnh gan,thận mủ cá Tra sau 10 ngà cho ăn bacteriocin 31 Bảng 7: Kết theo d i ếu m i trƣờng thời gian thí nghiệm 34 vii DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1: Dấu hiệu bệnh lý bên (A) bên cá Tra bệnh gan, thận mủ B ; Đặc điểm khuẩn lạc vi khuẩn E ictaluri (C).; Hình dạng khuẩn lạc vi khuẩn E ictaluri (D) 17 Hình 2: Kết định danh vi khuẩn E.ictaluri phƣơng pháp API 20E 18 Hình 3: Kết kiểm tra khả kháng khuẩn bacteriocin vi khuẩn E.ictaluri A ; Phƣơng pháp xác định đƣờng kính v ng v khuẩn B 20 H nh 4: Sơ đồ bố trí thí nghiệm A ; Kiểm tra cá kh e trƣớc tiêm cảm nhiễm B ; Các nồng độ vi khuẩn tiêm cảm nhiễm (C ; Vị trí tiêm cảm nhiễm D ; Dấu hiệu bên cá sau cảm nhiễm E ; Dấu hiệu bên cá sau cảm nhiễm F : gan, thận tỳ tạng c đốm trắng 24 H nh 5: Tỉ lệ sống nghiệm thức thời gian thí nghiệm 25 H nh 6: Tỉ lệ sống nghiệm thức sau kết thúc thí nghiệm (14 ngà ) 26 H nh 7: Sơ đồ bố trí thí nghiệm A ; Cá trƣớc cảm nhiễm B ; Kết tái phân lập vi khuẩn đối chứng dƣơng C ; Cá sau cảm nhiễm (D), thận sung to c đốm trắng gan có màu sắc tái nhạt; Kết tái định danh vi khuẩn E ; Kết tái phân lập vi khuẩn đối chứng âm F 29 H nh 8: Tỉ lệ sống TB cá 10 ngà điều trị NT 30 H nh 9: Tỉ lệ sống TB cá 14 ngà điều trị NT 31 H nh 10: Bố trí cá vào v o A ; Cá trƣớc cảm nhiễm vi khuẩn B ; Trộn vi khuẩn vào thức ăn C ; Biểu cá sau cảm nhiễm D ; Kết tái định vi khuẩn cá bệnh sau cảm nhiễm E ; Quan sát phân lập vi khuản sau kết thúc thí nghiệm 33 viii TÀI LIỆU THAM KHẢO Arques, J L., J Fernandez, P Gaya, M Nunez, E Rodriguez, and M.Medina (2004) Antibicrobial activity of reuterin in combination with nisin against food-borne pathogens Int J Food Microbiol.95:225–229 Baxa, D.V., J.M Groff, A Wishkovsky and R.P Hedrick, 1990 Susceptibility of nonictalurid fishes to experimental infection with Edwardsiella ictaluri Diseases of Aquatic Organisms, 8: 113-117 Bùi Quang Tề, 2006 Bệnh truyền nhiễm động vật thủy sản bệnh học thủy sản Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1, 218 trang Châu Hồng Thúy 2008 Khảo sát tình hình xuất mủgan vi khuẩn Edwardsiella ictaluri cá Tra nuôi thâm canh ởtỉnh Trà Vinh Luận văn cao học 2008 Khoa Thủy Sản Đại học Cần Thơ 75 Trang Cotter P D., Ross R P., Hill C (2013) Bacteriocins—a viable alternative to antibiotics? Nat Rev Microbiol 11, 95–105 10.1038/nrmicro2937 Cursino L., Smajs D., Smarda J., Nardi R M., Nicoli J R., Chartone-Souza E., et al (2006) Exoproducts of the Escherichia coli sTrain H22 inhibiting some enteric pathogens both in vitro and in vivo J Appl Microbiol 100, 821– 829 10.1111/j.1365-2672.2006.02834 Crumlish, M Thanh, P.C., Koesling, J., Tung, V., T and Gravingen, K., 2010 Experimental challenge studies in Vietnamese catfish, Pangasianodon hypophthalmus (Sauvage), exposed to Edwardsiella ictaluri and Aeromonas hydrophila Journal of Fish Diseases, 33: 717-722 Đặng Thị Hoàng Oanh Ngu ễn Thanh Phƣơng 2012 Thử nghiệm điều trị bệnh vi khuẩn Edwardsiella ictaluri cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) thuốc kháng sinh Er throm cine thioc anate Tạp chí khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ Đặng Thị Hoàng Oanh Ngu ễn Trúc Phƣơng 2010 Phát vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây bệnh mủ gan cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) phƣơng pháp PCR Tạp chí khoa học 2010:13 151159 Trƣờng Đại học Cần Thơ Đồn Kim Ngân 2010 Khảo sát tình hình dịch bệnh cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nuôi Thoại Sơn - An Giang Luận văn tốt nghiệp Khoa Sinh học Ứng dụng Trƣờng Đại học Tâ Đ Đồng Thanh Hà 2009 Nghiên cứu xác định tác nhân gâ bệnh ―mủ gan thận‖ cá Tra nu i Bến Tre Kỷ ếu hội nghị sinh viên NCKH Khoa Nu i trồng thủ sản Trƣờng Đại học Nha Trang 35 Đỗ Quang Tiền Vƣơng Trƣơng Hồng Việt, 2012 Hệ thống giám sát tình hình nu i điều kiện phát sinh bệnh gan, thận mủ cá Tra nuôi thâm canh tỉnh An Giang Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II Ellis, A E 1988 General principles of fishvaccination In Fish vaccination A.E Ellis, editor Academic Press San Diego, p 1-19 Geir Mathiesen, Kathrin Huehne, Lothar Kroeckel, Lars Axelsson, and Vincent G H Eijsink (2005) Characterization of a New Bacteriocin Operon in Sakacin P-Producing Lactobacillus sakei, Showing Strong Translational Coupling between the Bacteriocin and Immunity Genes Applied and Environmental Microbiology, p 3565–3574 Geir Mathiesen, Kathrin Huehne, Lothar Kroeckel, Lars Axelsson, and Vincent G H Eijsink (2005) Characterization of a New Bacteriocin Operon in Sakacin P-Producing Lactobacillus sakei, Showing Strong Translational Coupling between the Bacteriocin and Immunity Genes Applied and Environmental Microbiology, p 3565–3574 Gillor, et al (2008) The dual role of bacteriocins as anti- and probiotics Appl Microbiol Biotechnol.; 81(4): 591–606 doi:10.1007/s00253-008-1726-5 Grinter R., Milner J., Walker D (2012) Bacteriocins active against plant pathogenic bacteria Biochem Soc Trans 40, 1498–1502 10.1042/BST20120206) Hawke, J.P., A.C McWhorter, A.G Steigerwalt and D.J Brenner, 1981 Edwardsiella ictaluri sp nov., the causative agent of enteric septicemia of catfish International ournal of Systematic bacteriology, 31: 396-400 Jack Ralph W., John R Tagg, Andbibek Ray (1995) Bacteriocins of Gram-Positive Bacteria Microbiological reviews, June 1995, p 171–200 American Society for Microbiology John P Hawke, 2015 Enteric Septicemia of Catfish Southern Regional AquacultureCenter SRAC Publication No 477 July 2015 Karthikeyan Santhosh (2009) Study of Bacteriocin as a food preservative and the L.acidophilus sTrain as probiotic Department ot Biotechnogoly, School of Bioengineering, SRM University, Kattankulathur -603203, Tamilnadu, India Pakistan Journal of Nutrient (4):335-340 Klesius, P.H and W.M Sealey, 1995 Characterization of serum antibody in enteric septicemia of catfish Journal of Aquatic animal Health, 7: 205-210 Lê X Thành, Nguyễn T Lệ Quyên, Nguyễn T Quỳnh, Đào Trƣờng, Bùi Q Tề, TS (2002) Hiệu Quả Của Sản Phẩm Microcin Phòng Trị Bệnh Vi Khuẩn Cho Tôm, cá Viện Nghiên Cứu Nuôi trồng Thủy sản I 36 Lê Thị Mỹ, 2017 Phân lập định danh vi khuẩn E ictaluri gây bệnh Ếch Thái Lan nu i Chu ên đề tốt nghiệp Khoa Nông nghiệp – Tài nguyên Thiên Nhiên Trƣờng Đại hoạc An Giang Lê Thị Kim Mai, 2018 Đánh giá khả nhạy số loại thuốc kháng sinh vi khuẩn E ictaluri gây bệnh cá Lóc nu i Chu ên đề tốt nghiệp Khoa Nông nghiệp – Tài ngu ên Thiên Nhiên Trƣờng Đại hoạc An Giang Michel Bakar Diop, et al (2007) Bacteriocin producers from Traditional food products Biotechnol Agron Soc Environ 275–281 Nguyễn Thú Hƣơng, Trần Thị Tƣởng An (2008) Thu Nhận Bacteriocin Acteriocin Bằng Phƣơng Pháp Lên Men Bởi Tế Bào Lactococcus Lactic Cố Định Trên Chất Mang Cellulose Vi Kkuẩn (BC) Ứng Dụng Trong Bảo Quản Thịt Tƣơi Sơ Chế Tối Thiểu Trƣờng Đại học Bách khoa, ĐHQG-HCM Nguyễn Trí Hiếu, 2017 Đánh giá khả nhạy số loại thuốc kháng sinh vi khuẩn E ictaluri gây bệnh Ếch Thái Lan nu i Chu ên đề tốt nghiệp Khoa Nông nghiệp – Tài ngu ên Thiên Nhiên Trƣờng Đại hoạc An Giang Nguyễn Văn Thành Ngu ễn Ngọc Trai (2012) Phân lập tuyển chọn vi khuẩn Lactobacillus sp có khả ức chế vi khuẩn gây bệnh gan thận mủ đốm đ cá Tra Tạp chí Khoa học 2012:23a 224-234 Trƣờng Đại học Cần Thơ Phạm Ngọc Kh e 2008 Khảo sát mầm bệnh ký sinh trùng vi khuẩn cá Tra bị bệnh trắng gan trắng mang Khoa thủy sản Đại học Cần Thơ 41 Trang Quách Văn Cao Thi, Từ Thanh Dung Đặng Phạm Hòa Hiệp, 2014 Hiện trạng kháng thuốc kháng sinh hai loài vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Aeromonas hydrophila gây bệnh cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Đồng Bằng Sơng Cửu Long Tạp chí khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ Shinichi Kawamoto and Jun Shima (2004) Bacteriocins of Lactic Acid Bacteria and Their Applications Food Hygiene Team, National Food Research Institute 2-1-12, Kannondai, Tsukuba, Ibaraki 305-8642, Japan Suphan Bakkal, Sandra M Robinson and Margaret A Riley.(2012) Bacteriocins of Aquatic Microorganisms and Their Potential Applications in the Seafood Industry University of Massachusetts Amherst USA Tapasa Kumar Sahoo, et al (2014) Bacteriocins and their applications for the treatment of bacterial diseases in aquaculture: a review Aquaculture Research Volume 47, Issue 4, pages 1013–1027 Từ Thanh Dung, Đặng Thị Hồng Oanh, Trần Thị Tuyết Hoa, 2005 Giáo trình bệnh học thủy sản Khoa thủy sản Trƣờng Đại Học cần Thơ, 123 trang 37 Từ Thanh Dung, Phạm Thanh Hƣơng, Ngu ễn Anh Tuấn, 2009 Hiện trạng đa kháng vi khuẩn edwardsiella ictaluri gây bệnh gan thận mủ cá tra Pangasianodon hypophthalmus Ởđồng sông cửu long Khoa Thủy sản, Trƣờng Đại học Cần Thơ Từ Thanh Dung 2005 Giáo tr nh Bệnh học thủ sản Chu ên ngành Bệnh học Thủ sản Khoa Thủ sản Trƣờng Đại học Cần Thơ Từ Thanh Dung 2017 Bệnh cá Tra quản l dịch bệnh ao nu i Khoa Thủ sản Trƣờng Đại học Cần Thơ Vũ Dũng Tiến cs (2013) Tài liệu tập huấn khuyến n ng Hƣớng dẫn sử dụng thuốc kháng sinh, sản phẩm xửlý cải tạo m i trƣờng nuôi trồng thủy sản Trung tâm Khuyến nông Quốc Gia Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn N B Văn h a dân tộc Hà Nội http://thuysanvietnam.com.vn/benh-mu-gan-o-ca-article-14663.tsv thứ 4, 16/03/2016 09:48:38 GMT+7 https://tongcucthuysan.gov.vn/vi-vn/ni trồng thủy sản/ phịng chống dịch bệnh/doc-tin/010421/2018-04-27/cong-tac-giam-sat-dich-benh-tren-tom-vaca-tra-phuc-vu-xuat-khau-nam-2017 38 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Đƣờng kính vịng vơ trùng bacteriocin Cơ quan/lần lặp lại Thể tích 20 30 40 50 60 10 16 18 20 22 Gan 9,5 16 18 20 23 20 17 20 22 Thận 7,5 19 20 21 24 20 20 20 25 18 18 21 25 16 17 20 23 Tỳ tạng 16 18 20 22 20 18 20 22 Phục uc Đƣờng kính trung bình vịng vơ trùng bacteriocin vi khuẩn E.ictaluri Thể tích 20 30 40 50 60 L Cơ quan Thận 8,2 19 19,3 20,6 24,3 Gan 9,2 17,3 17,6 20 22,3 Tỳ tạng 8,3 17,3 17,6 20 22,3 Đƣờng kính TB 8,57 17,87 18,17 20,20 22,97 Độ lệch 0,55 0,98 0,98 0,35 1,15 Phụ lục 3: Thí nghiệm trại thực nghiệm A số cá chết theo ngày thí nghiệm Ngà điều trị NT NT1.1 0,67 1,00 1,67 1,33 1,67 2,33 2,33 1,33 NT1.2 0,33 1,67 1,33 2,33 0,00 1,00 0,67 NT1.3 0,00 2,00 0,00 1,67 0,00 0,00 NT1.4 0,00 0,00 1,00 0,33 0,00 NT2 (ĐC (+)) 0,00 0,00 2,00 3,00 3,67 NT3-ĐC NaC 0,33 1,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 NT4-ĐC (-) 13 14 1,00 0,00 1,00 1,00 0,67 1,33 0,33 0,33 0,00 0,00 0,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,33 0,00 0,33 0,00 0,67 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 3,67 3,67 3,67 2,67 1,67 1,33 1,33 1,33 0,67 0,67 0,00 1,00 0,00 0,33 0,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 39 10 11 12 B: Số cá chết trung bình NT NT NT1.1 NT1.2 NT1.3 NT1.44 NT2 NT3 NT4 20,00 12,00 4,00 3,00 28,00 7,00 0,00 16,00 12,00 5,00 2,00 27,00 3,00 0,00 10,00 6,00 4,00 2,00 29,00 2,00 0,00 TB 15,33 10,00 4,33 2,33 28,67 4,00 0,00 C: Hiệu điều trị trung bình NT NT1 NT2 NT3 NT4 57,14 85,71 89,29 40,74 55,56 81,48 92,59 65,52 79,31 86,21 93,10 TB 44,94 64,00 84,47 91,66 RPS (%) 28,57 D Kết thống kê Descriptives RPS 95% Confidence Interval for Mean N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound 1.00 44.9433 18.83021 10.87162 -1.8335 91.7202 2.00 64.0033 13.27948 7.66691 31.0153 96.9914 3.00 84.4667 2.59858 1.50029 78.0114 90.9219 4.00 91.6600 2.06826 1.19411 86.5222 96.7978 Total 12 71.2683 21.51386 6.21052 57.5991 84.9376 40 Descriptives RPS Minimum Maximum 1.00 28.57 65.52 2.00 55.56 79.31 3.00 81.48 86.21 4.00 89.29 93.10 Total 28.57 93.10 ANOVA RPS Sum of Squares df Mean Square Between Groups 4007.406 1335.802 Within Groups 1083.903 135.488 Total 5091.309 11 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets RPS a Duncan NT Subset for alpha = 0.05 N 1.00 44.9433 2.00 64.0033 64.0033 41 F 9.859 Sig .005 3.00 4.00 Sig 84.4667 84.4667 91.6600 080 063 471 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 42 CTỉ lệ sống cá qua ngày thí nghiệm trại thực nghiệm NT NT1.1 NT1.2 NT1.3 NT1.4 NT2 ĐC + NT3 - NaCl NT4 ĐC -)) MIN MAX 10 11 100 97,78 94,44 88,89 84,44 78,89 71,11 63,33 58,89 55,56 55,56 100 98,89 93,33 88,89 81,11 81,11 77,78 75,56 73,33 68,89 67,78 100 100,00 93,33 93,33 87,78 87,78 87,78 86,67 86,67 86,67 86,67 100 100,00 100,00 96,67 95,56 95,56 94,44 94,44 92,22 92,22 92,22 100 93,33 83,33 71,11 58,89 46,67 34,44 25,56 20,00 15,56 11,11 100 98,89 94,44 94,44 92,22 92,22 88,89 88,89 87,78 86,67 86,67 100 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 93,33 83,33 71,11 58,89 46,67 34,44 25,56 20,00 15,56 11,11 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 38 12 52,22 66,67 86,67 92,22 6,67 86,67 100,00 6,67 100,00 13 48,89 66,67 85,56 92,22 4,44 86,67 100,00 4,44 100,00 14 48,89 66,67 85,56 92,22 2,22 86,67 100,00 2,22 100,00 Phụ lục 4: Kết ghi nhận thí nghiệm điều trị ao A: Kết ghi nhận số cá chết trung bình NT Ao điều trị Ngà 10 11 12 13 14 V o1 1 2 V o2 3 2 2 1 V o3 0 1 2 2 0 Ao đối chứng Số cá chết TB 2,00 0,67 1,33 2,00 1,00 2,67 2,00 2,67 3,67 1,33 2,00 2,33 1,67 2,33 TLS TB (%) 99,83 99,78 99,67 99,50 99,42 99,19 99,03 98,81 98,50 98,39 98,22 98,03 97,89 97,69 39 V o1 10 15 10 10 11 5 V o2 10 10 10 8 4 V o3 12 20 10 10 8 6 7 Số cá chết TB 10,00 9,00 15,00 9,67 9,33 8,67 8,67 9,33 6,67 6,33 4,33 5,00 5,33 6,00 TLS TB (%) 99,17 98,42 97,17 96,36 95,58 94,86 94,14 93,36 92,81 92,28 91,92 91,50 91,06 90,56 B: Tỉ lệ sống hiệu điều trị sau 10 cho ăn Ao điều trị Ao đối chứng Chỉ tiêu V o1 V o2 V o3 TB V o1 V o2 V o3 TB Tổng số cá chết % cá chết Số cá c n lại TLS (%) RPS (%) 27 2,25 1173 97,75 71,58 18 1,5 1182 98,5 78,82 13 1,08 1187 98,92 86,73 19,33 1,61 1180,67 98,39 79,14 95 7,92 1105 92,08 85 7,08 1115 92,92 98 8,17 1102 91,83 92,67 7,72 1107,33 92,28 40 C: Tỉ lệ sống hiệu điều trị sau 14 ngày thí nghiệm Tổng số cá chết % cá chết Số cá c n lại TLS (%) RPS (%) V o1 Ao điều trị V o2 V o3 41,00 3,42 1159,00 96,58 64,96 26,00 2,17 1174,00 97,83 74,26 16,00 1,33 1184,00 98,67 86,89 TB 27,67 2,31 1142,33 95,19 75,59 41 Ao đối chứng V o1 V o2 117,00 9,75 1083,00 90,25 101,00 8,42 1099,00 91,58 TB V o3 122,00 10,17 1078,00 89,83 113,33 9,44 1036,67 86,39 Phụ lục 4: Cá yếu tố môi trƣờng đƣợc theo dõi q trình thí nghiệm A Thí nghiệm trại thực nghiệm Thể tích điều trị/NT B- 10 B- 20 B- 30 B- 40 ĐC (+) ĐC (-) ĐC NaC Nhiệt độ Sáng Chiều 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 28 28,5 pH Sáng Chiều 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7 7 7 7 7 7 7 7 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 7 7 7 7 7 7 42 NO2Sáng Chiều 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 1 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 NH3/NH4+ Sáng Chiều 1 1 1 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 1 1 1 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 DO Sáng Chiều 4 4 4 4 6 6 6 6 6 6 6 6 4 4 4 4 4 4 4 4 4 B Thí nghiệm ngồi ao Ngày 10 11 12 13 14 Nhiệt độ Sáng Chiều 29 30 29 31 28 30 27 30 28 29 27 30 28 31 29 31 29 30 26 30 28 30 27 31 29 30 27 31 NT - Ao1: Điều thị bacteriocin pH NH3/NH4+ Sáng Chiều Sáng 7,5 0,5 7,5 7,5 0,5 7,5 7 0,5 7,5 0,5 7,5 7,5 0,5 7,5 7,5 7 7,5 0,5 7,5 7,5 7,5 0,5 7,5 0,5 7 43 Chiều 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 NO2Sáng 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Chiều 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 DO Sáng 4 4 4 4 4 4 4 Chiều 4 4 4 4 4 4 4 Ngày 10 11 12 13 14 Sáng 28 27 28 27 28 29 29 29 29 26 28 27 29 27 Nhiệt độ Chiều 30 30 29 30 31 31 30 31 30 30 30 31 30 31 NT - Ao2: ao đối chứng pH NH3/NH4+ Sáng Chiều Sáng Chiều 7 0,5 0,5 7 0,5 7 0,5 7 0,5 7 0,5 7 0,5 0,5 7 0,5 0,5 7 0,5 7 1 7 0,5 7 0,5 7 0,5 0,5 7 0,5 0,5 7 0,5 44 NO2Sáng 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Chiều 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 DO Sáng 4 4 4 4 4 4 4 Chiều 4 4 4 4 4 4 4 ... khoa học ? ?Thử nghiệm sử dụng bacteriocin điều trị bệnh gan, thận mủ cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) giai đoạn giống tỉnh An Giang? ?? cần thiết 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Thử nghiệm sử dụng bacteriocin. ..UBND TỈNH AN GIANG TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG -oOo - BÁO CÁO TỔNG KẾT NHIỆM VỤ KH&CN CƠ SỞ THỬ NGHIỆM SỬ DỤNG BACTERIOCIN TRONG ĐIỀU TRỊ BỆNH GAN, THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) ... học công nghệ ? ?Thử nghiệm sử dụng bacteriocin điều trị bệnh gan, thận mủ cá Tra giai đoạn giống tỉnh An Giang? ?? nhóm tác giả Nguyễn Thị Thúy Hằng, Phan Thị Thanh Vân Trịnh Thị Lan, công tác khoa