Nghiên cứu sự ảnh hưởng của axid salicylic và aspirin lên sự tăng tăng trưởng của cây lan gấm anoectochilus roxburghii trong điều kiện in vitro

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA ACID SALICYLIC VÀ ASPIRIN LÊN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA CÂY LAN GẤM (Anoectochilus Roxburghii) TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS ĐỖ ĐĂNG GIÁP Sinh viên thực : VÕ HỒNG LÊ MSSV: 1411100053 Lớp: 14DSH01 Tp Hồ Chí Minh, năm 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA ACID SALICYLIC VÀ ASPIRIN LÊN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA CÂY LAN GẤM (Anoectochilus Roxburghii) TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS ĐỖ ĐĂNG GIÁP VÕ HỒNG LÊ MSSV: 1411100053 Lớp: 14DSH01 Tp Hồ Chí Minh, năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đồ án tốt nghiệp với đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng acid salicylic aspirin lên tăng trưởng lan gấm (Anoectochilus roxburghii) điều kiện in vitro” cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn trực tiếp T.S Đỗ Đăng Giáp Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực, khách quan chưa công bố cơng trình khác trước Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm cơng trình nghiên cứu Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng Sinh viên thực Võ Hồng Lê i năm 2018 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đồ án tốt nghiệp mình, tơi xin gửi lời cám ơn sâu sắc tới thầy cô trường Đại học Công Nghệ TP.HCM – HUTECH nói chung thầy Viện khoa học ứng dụng nói riêng nhiệt tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu thời gian qua Đặc biệt xin gửi lời cảm ơn chân thành đến T.S Đỗ Đăng Giáp tận tình giúp đỡ, hướng dẫn trực tiếp cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài tốt nghiệp Thời gian làm việc với thầy giúp trao dồi thêm kinh nghiệm mà học tập tinh thần làm việc thái độ nghiêm túc nghiên cứu khoa học để đạt hiệu quả, kiến thức cần thiết để làm tốt công việc tương lai Bên cạnh đó, xin cám ơn anh chị bạn đồng hành hỗ trợ tơi suốt q trình nghiên cứu Rất mong nhận đóng góp ý kiến Thầy Cơ để tơi hồn thiện đề tài báo cáo Xin chân thành cám ơn! Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng Sinh viên thực Võ Hồng Lê ii năm 2018 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC BIỂU ĐỒ viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix LỜI MỞ ĐẦU .1 I Đặt vấn đề II Mục đích nghiên cứu III Nội dung thực IV Phương pháp nghiên cứu V Yêu cầu đề CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .5 1.1 Giới thiệu lan gấm 1.1.1 Phân loại thực vật 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Đặc điểm phân bố 1.2 Thành phần giá trị dược liệu lan gấm .8 1.3 Lan gấm thị trường .10 1.4 Nhân giống lan gấm .10 1.4.1 Nhân giống hạt .10 1.4.2 Nhân giống 11 1.4.3 Phương pháp giâm 11 1.4.4 Nhân giống in vitro 11 1.5 Nuôi cấy mô thực vật 16 1.5.1 Ứng dụng nuôi cấy mô thực vật 16 iii 1.5.2 Định nghĩa .17 1.5.3 Ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy lên phát triển thực vật in vitro .18 1.6 Vai trị mơi trường khống đến phát triển mẫu cấy in vitro .21 1.7 Tình hình nghiên cứu nước 23 1.7.1 Tình hình nghiên cứu giới 23 1.7.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 24 1.8 Giới thiệu Salicylic Acid (SA) 25 1.9 Giới thiệu Aspirin (ASA) 28 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 30 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 30 2.2 Vật liệu .30 2.2.1 Nguồn mẫu lan gấm 30 2.2.2 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất 30 2.3 Điều kiện nuôi cấy .32 2.4 Nội dung nghiên cứu 32 2.4.1 Thí nghiệm 1.1: Khảo sát ảnh hưởng SA (dãy nồng độ lớn) lên khả sinh trưởng lan gấm .32 2.4.2 Thí nghiệm 1.2: Khảo sát ảnh hưởng SA (dãy nồng độ nhỏ) lên khả sinh trưởng lan gấm .34 2.4.3 Thí nghiệm 2.1: Khảo sát ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ lớn) lên khả sinh trưởng lan gấm .35 2.4.4 Thí nghiệm 2.2: Khảo sát ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ nhỏ) lên khả sinh trưởng lan gấm .38 2.5 Phương pháp thu tiêu theo dõi .39 2.6 Phương pháp phân tích xử lý số liệu .40 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Khảo sát ảnh hưởng SA (dãy nồng độ lớn) lên khả sinh trưởng lan gấm in vitro 41 iv 3.2 Khảo sát ảnh hưởng SA (dãy nồng độ nhỏ) lên khả sinh trưởng lan gấm 46 3.3 Khảo sát ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ lớn) lên khả sinh trưởng lan gấm 48 3.4 Khảo sát ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ nhỏ) lên khả sinh trưởng lan gấm 52 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 4.1 Kết luận 55 4.2 Kiến nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC 64 v DANH MỤC BẢNG Bảng 2: Thành phần dinh dưỡng amino acid lan gấm .9 Bảng 1: Bảng thiết bị 30 Bảng 2: Bảng dụng cụ 31 Bảng 3: Bảng hóa chất 31 Bảng 4: Bảng bố trí nghiệm ảnh hưởng SA sử dụng thí nghiệm 1.1 33 Bảng 5: Bảng bố trí thí nghiệm ảnh hưởng SA sử dụng thí nghiệm 1.2 35 Bảng 6: Bảng bố trí thí nghiệm ảnh hưởng ASA sử dụng thí nghiệm 2.1 37 Bảng 7: Bảng bố trí thí nghiệm ảnh hưởng ASA sử dụng thí nghiệm 2.2 38 Bảng 1: Bảng khảo sát ảnh hưởng SA (ở nồng độ mg/L; mg/L; mg/L; mg/L) lên khả sinh trưởng lan gấm .41 Bảng 2: Bảng khảo sát ảnh hưởng SA (ở nồng độ mg/L; 1,0 mg/L; 1,2 mg/L; 1,4 mg/L; 1,6 mg/L; 1,8 mg/L; 2,0 mg/L) lên khả sinh trưởng lan gấm 46 Bảng 3: Bảng khảo sát ảnh hưởng ASA (ở nồng độ mg/L; mg/L; mg/L; mg/L) lên khả sinh trưởng lan gấm .49 Bảng 4: Bảng khảo sát ảnh hưởng ASA (ở nồng độ mg/L; 1,0 mg/L; 1,2 mg/L; 1,4 mg/L; 1,6 mg/L; 1,8 mg/L; 2,0 mg/L) lên khả sinh trưởng lan gấm 52 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1: Cây lan gấm .6 Hình 2: Hoa lan gấm .8 Hình 3: Quy trình ni cấy sinh khối lan gấm kỹ thuật bioreactor a: mẫu cấy ban đầu b, b1: mẫu cấy sau tuần nuôi cấy c, c1: khối lượng sinh khối thu nhận 20 Hình 4: a) Công thức cấu tạo; b) Cấu trúc không gian; c) Salicylic acid .26 Hình 5: a) Công thức cấu tạo; b) Cấu trúc không gian; c) Aspirin .28 Hình 1: Vật liệu lan gấm ban đầu 30 Hình 2: Quy trình thực thí nghiệm 1.1 32 Hình 3: Hình mơ bố trí thí nghiệm SA .33 Hình 4: Quy trình thực thí nghiệm 1.2 34 Hình 5: Quy trình thực thí nghiệm 2.1 36 Hình 6: Hình mơ bố trí thi nghiệm ASA 37 Hình 7: Quy trình thực thí nghiệm 2.2 38 Hình 1: Đo chiều cao lan gấm 42 Hình 2: Thu trọng lượng tươi lan gấm 43 Hình 3: Cây lan gấm sau sấy khô 44 Hình 4: Đo chlorophyll 45 vii DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 1: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ lớn) lên chiều cao lan gấm41 Biểu đồ 2: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ lớn) lên trọng lượng lan gấm 43 Biểu đồ 3: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ lớn) lên hàm lượng chlorophyll lan gấm 44 Biểu đồ 4: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ nhỏ) lên chiều cao lan gấm 46 Biểu đồ 5: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ nhỏ) lên trọng lượng lan gấm 47 Biểu đồ 6: Ảnh hưởng SA (dãy nồng độ nhỏ) lên hàm lượng chlorophyll lan gấm 48 Biểu đồ 7: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ lớn) lên chiều cao lan gấm 49 Biểu đồ 8: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ lớn) lên trọng lượng lan gấm 50 Biểu đồ 9: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ lớn) lên hàm lượng chlorophyll lan gấm 51 Biểu đồ 10: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ nhỏ) lên chiều cao lan gấm 52 Biểu đồ 11: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ nhỏ) lên trọng lượng lan gấm 53 Biểu đồ 12: Ảnh hưởng ASA (dãy nồng độ nhỏ) lên hàm lượng chlorophyll lan gấm 54 viii 10 Nguyễn Văn Đồng Ngô Xn Bình, 2010 Cơng nghệ sinh học thực vật (Giáo trình đại học), NXB Nơng nghiệp - Hà Nội 11 Nguyễn Văn Uyển, 1993 Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống rừng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 12 Như Quỳnh, Bất ngờ: Aspirin giúp hầu hết loại suất khỏe mạnh hơn, Kích thích tăng trưởng suất trồng, Thứ Năm, 05/10/2017 08:00 AM GMT+7 13 Phạm Hoàng Hộ, 2003 Cây cỏ Việt Nam – Quyển II Nhà xuất Trẻ 14 Phí Thị Cẩm Miện, 2012 Nghiên cứu nhân nhanh in vitro loài lan kin tuyến (Anoectochilus setaceus blume) nhằm bảo tồn nguồn dược liệu quý, luận văn thạc sĩ khoa học, Hà Nội 15 Phùng Văn Phê, Nguyễn Trung Thành, Vương Duy Hưng “Đặc điểm hình thái, phân bố loài Lan Gấm Anoectochilus setaceus Blume Vườn Quốc gia Tam Đảo, tỉnh Vĩnh Phúc”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 26 (2), 104 – 109, 2010 16 Trần Văn Minh, 1994 Nuôi cấy mô tế bào thực vật, Phân viện Công nghệ sinh học Thành phố Hồ Chí Minh, tr 58 – 97 Tài liệu nước ngồi 17 Agami and Mohamed, 2013 R.A Agami, F.G Mohamed Exogenous treatment with indole-3-acetic acid and salicylic acid alleviates cadmium toxicity in wheat seedlings Ecotoxicol Environ Saf., 94 (2013), pp 164 – 171 18 Arfan M, Athar HR, Ashraf M (2007) Does exogenous application of salicylic acid through the rooting medium modulate growth and photosynthetic capacity in two differently adapted spring wheat cultivars under salt stress? J Plant Physiol 164: 685 – 694 19 Bektas, E., Cuce, M and Sokmen, A., 2013 In vitro germination, protocorn formation, and plantlet development of Orchis coriophora (Orchidaceae), a 57 naturally growing orchid species in Turkey Turkish journal of Botany 37: 336 – 342 20 Cano EA, Perez – Alfocea F, Moreno V, Caro M, Bolarin MC (1998) Evaluation of salt tolerance in cultivated and wild tomato species through in vitro shoot apex culture Plant Cell Tissue Organ Cult 53: 19 – 26 21 Chiu N.Y and K.H Chang., 1995 Anoectochilus formosanus Hayata In: The Illustrated Medicinal Plants of Taiwan SMC Publishing Inc, Taipei, Taiwan 4: 282 – 283 22 Chun-Nian He, Chun – Lan Wang, Shun – Xing Guo, Jun-Shan Yang and Pei Gen Xiao, A Novel Flavonoid Glucoside from Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl., Acta Botanica Sinica, Volume 48 Issue (2006) 23 Dat JF, Foyer CH, Scott IM (1998) Changes in salicylic acid and antioxidants during induced thermotolerance in mustard seedlings Plant Physiol 118: 1455 – 1461 24 Eraslan F, Inal A, Gunes A, Alpaslan M (2007) Impact of exogenous salicylic acid on the growth, antioxidant activity and physiology of carrot plants subjected to combined salinity and boron toxicity Sci Hortic 113: 120 – 128 25 Galal, 2012 A GalalImproving effect of salicylic acid on the multipurpose tree Ziziphus spina-christi (L.) Willd tissue culture Am J Plant., (2012), pp 947 – 952 26 Gunes A, Inal A, Alpaslan M, Eraslan F, Bagci EG, Cicek N (2007) Salicylic acid induced changes on some physiological parameters symptomatic for oxidative stress and mineral nutrition in maize (Zea mays L.) grown under salinity J Plant Physiol 164: 728 – 736 27 Guo B, Yongchao L, Zhaojun L, Wei G (2007) Role of salicylic acid in alleviating cadmium toxicity in rice roots J Plant Nutr 30: 427 – 439 28 Hao L, Zhou L, Xu X, Cao J, Xi T (2006) The role of salicylic acid and carrot embryogenic callus extracts in somatic embryogenesis of naked oat 58 (Avena nuda) Plant Cell, Tissue Organ Cult 85: 109 - 113 Harinasut P, Srisunak S, Pitukchaisopol S, Charoensataporn R (2000) Mechanisms of adaptations to increasing salinity of mulberry: Proline content and ascorbate peroxidase activity in leaves of multiple 29 Horváth E, Szalai G, Janda T (2007) Induction of abiotic stress tolerance by salicylic acid signaling J Plant Growth Regul 26: 290 – 300 30 Hu S.Y., 1971 The Orchidaceae of China Quarterly Journal of the Taiwan Museum 24: 67 – 103 31 JA Jerstedt Southworth D 1995 Sự phát triển phấn hoa exine trước xếp microtubule Vigna unguiculata (Fabaceae): mơ hình cho tường phấn hoa Protoplasma 187: 79 – 87 32 Janda T, Szalai G, Tari I, Páldi E (1999) Hydroponic treatment with salicylic acid decreases the effect of chilling injury in maize (Zeamays L.) plants Planta 208: 175 – 180 33 Jin M.Y, Han L, Li H, Wang H.Q, Piao X.C and Lian M.L, 2017 Kinsenoside and polysaccharide production by rhizome culture of Anoectochilus roxburghii in continuous immersion bioreactor systerms Plant Cell Tiss Organ Cult 10: – 34 Kan W.S, 1986 Anoectochilus formosanus Hayata In: Pharmaceutical Botany National Research Institute of Chinese Medicine Taipei, Taiwan 35 Kusumi K, Yaeno T, Kojo K, Hirayama M, Hirokawa D (2006) The role of salicylic acid in the glutathione-mediated protection against photooxidative in rice Physiol Plant 128: 651 – 661 36 Limasset P, Cornuet P 1949 Recherche du virus de la mosalque du tabac (Marmor tabaci Homes) dans les meristemes des plantes infectees Comptes Rendus de I'Academie des Sciences Paris 228: 1971 – 1972 37 Luo J-P, Jiang S-T, Pan L - J (2001) Enhanced somatic embryogenesis by salicylic acid of Astragalus adsurgens Pall.: relationship with H2O2 59 production and H2O2-metabolizing enzyme activities Plant Sci 161: 125 – 132 38 Malamy J, Carr JP, Klessig DF, Raskin I (1990) Salicylic acid: A likely endogenous signal in the resistance response of tobacco to viral infection Sci 250: 1001 – 1004 39 Mamoru Kusomoto (1980), “Coconut Milk, Agar and Sucrose Concentrations, Media pH on the Proliferation of Cymbidium Protocorm – like Bodies Cultured in vitro”, J Japan Soc Hort Effects of and Sci 48 (4), pp 503 – 509 40 Martinez CA, Maestri M, Lani EG (1996) In vitro salt tolerance and proline accumulation in Andean potato (Solanum spp.) differing in frost resistance Plant Sci 116: 177 – 184 41 Menzel MY, Wilson FD (1961) Chromosomes and crossing behavior of Hibiscus cannabinus, H acetosella, and H radiatus Am J Bot 48: 551 – 650 42 Métraux JP, Signer H, Ryals J, Ward E, Wyss – Benz M, Gaudin J, Raschdorf K, Schmid E, Blum W, Inverardi B (1990) Increase in salicylic acid at the onset of systemic acquired resistance in cucumber Science 250: 1004 – 1006 43 Mora-Herrera ME, Lopez – Delgado H, Castillo – Morales A, Foyer CH (2005) Salicylic acid and H2O2 function by independent pathways in the induction of freezing tolerance in potato Physiol Plant 125: 430 – 440 44 Murashige T, Plant propagation through tissue cultures, Annu Rev Plant Physiol, 25:135 – 166, 1974 45 Murashige T, Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture Physiol Plant 15: 473 – 497 46 Nguyen Trung Thanh, Pham L.H., Nguyen V.K., Truong T.L.A, Phung V.P, Nguyen T.H.G and Phi T.C.M, 2012 The role of different medium and plant hormones on multiple shoots of Jewel orchids (Anoectochilus setaceus 60 Blume) VNU Journal of Science, Natural Sciences and Technology 28, 47 – 53 47 Nilov, Nesterenko and Milkhel’ son, 1936 Biokhim i Fiziol Drevesnykh i Kustarnnykh Yuzhnykh Porod 48 Ormerod P, 2005 Notulae Goodyerinae (II) Taiwania 50 (1): – 10 49 Quiroz – Figueroa F, Mendez – Zeel M (2001) Picomolar concentration of salicylates induce cellular growth and enhance somatic embryo – genesis in Coffea arabica tissue culture Plant Cell Rep 20: 679 – 689 Raskin I (1992) Role of salicylic acid in plants Ann Rev Plant Physiol.Mol Biol 43: 439 – 463 50 Raskin I (1992) Role of salicylic acid in plants Ann Rev Plant Physiol.Mol Biol 43: 439 – 463 51 Sakhanokho and Kelley, 2009 F.H Sakhanokho, Y.R KelleyInfluence of salicylic acid on in vitro propagation and salt tolerance in Hibiscus acetosella and Hibiscus moscheutos (cv ‘Luna Red’) Afr J Biotechnol, (2009), pp 1474 – 1481 52 Shakirova FM, Sakhabutdinova AR, Bezrukova MV, Fatkhutdinova RA, Fatkhutdinova DR (2003) Changes in the hormonal status of wheat seedlings induced by salicylic acid and salinity Plant Sci 164: 317 – 322 53 Shakti Mehrotra, Manoj Kumar Goel, Arun Kumar Kukreja and Bhartendu Nath Mishra, 2007 Efficiency of liquid culture systems over conventional micropropagation: A progress towards commercialization 54 Stevens J, Senaratna T, Sivasithamparam K (2006) Salicylic acid induces salinity tolerance in tomato (Lycopersicon esculentum cv Roma): associated changes in gas exchange, water relations and membrane stabilization Plant Growth Rgul 49: 77 – 83 55 Strobel NE, Kuc A (1995) Chemical and biological inducers of systemic acquired resistance to pathogens protect cucumber and tobacco from damage caused by paraquat and cupric Chloride Phytopathology 85:1306 – 1310 61 56 Tari I, Csiszar J, Szalai G, Horvath F, Pecsvaradi A, Kiss G, Szepesi A, Szabo M, Erdei L (2002) Acclimation of tomato plants to salinity stress after a salicylic acid pre-treatment Acta Biol Szeged 46: 55 – 56 57 Tseng, C C, Shang, H F, Wang, L – F, Su, B, Hsu, C C, Kao, H Y, & Cheng, K T (2006) Antitumor and immunostimulating effects of Anoectochilus formosanus Hayata Phytomedicine, 13 (5), 366 – 370 58 WHO, 2015 Model List of Essential Medicines 59 Wu KB (2007) The use and potential for Anoectochilus formosanus Hayata Agricultre World Vol.288, 14 – 19 60 Yang Y, Jeong D1, Yang WS, , Nam G, Kim JH, Yoon DH, Noh HJ, Lee S, Kim TW, Sung GH, Cho JY, 2013 In vitro and in vivo anti-inflammatory effect of Rhodomyrtus tomentosa methanol extract 61 Yang ZM, Wang J, Wang SH, Xu LL (2003) Salicylic acid-induced aluminum tolerance by modulation of citrate efflux from roots of Cassia tora L Planta 217: 168 – 174 62 Yih-Juh Shiau, Abhay P Sagare, Uei-Chin Chen, Shu-Ru Yang, and HsinSheng Tsay, 2001 Conservation of Anoectochilus formosanus Hayata by artificial cross-pollination and in vitro culture of seeds Department of Agronomy, Taiwan Agricultural Research Institute, Wufeng, Taichung 41301, Taiwan 63 Yoon K.J, Hosakatte N.M, Hahn E.J and Paek K.Y, 2007 Biomass production of Anoectochilus formosanus Hayata in a Bioreactor System Journal of Plant Biology 50(5) : 573 – 576 64 Zhong HJ, Zhong JJ, Chen HY, Wang SD (2000), Delectis floare reipublicae popularis sinicae, pp 238 – 239 65 Zhou X M, MacKenzie AF, Madramootoo CA, Smith DL (1999) Effect of steminjected plant growth regulators, with or without sucrose, on grain production, biomass and photosynthetic activity of field – grown corn plants J Agric Crop Sci 183: 103 – 110 62 Tài liệu web 66 http://www.khoahocphothong.com.vn/lan-gam-duoc-lieu-quy-can-bao-veva-phat-trien-13041.html 63 PHỤ LỤC • Trắc nghiệm phân hạng chiều cao mơi trường có SA (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng tươi môi trường có SA (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) 64 • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng khơ mơi trường có SA (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng hàm lượng chlorophyll mơi trường có SA (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) 65 • Trắc nghiệm phân hạng chiều cao mơi trường có AS (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng tươi mơi trường có AS (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) 66 • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng khơ mơi trường có AS (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng hàm lượng chlorophyll mơi trường có AS (0 mg/L, mg/L, mg/L, mg/L) 67 • Trắc nghiệm phân hạng chiều cao mơi trường có SA (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng tươi mơi trường có SA (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) 68 • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng khơ mơi trường có SA (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng hàm lượng chlorophyll môi trường có SA (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) 69 • Trắc nghiệm phân hạng chiều cao mơi trường có AS (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng tươi mơi trường có AS (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) 70 • Trắc nghiệm phân hạng trọng lượng khơ mơi trường có AS (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) • Trắc nghiệm phân hạng hàm lượng chlorophyll môi trường có AS (0 mg/L, 1,0 mg/L, 1,2 mg/L, 1,4 mg/L, 1,6 mg/L, 1,8 mg/L, mg/L) 71 ... VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA ACID SALICYLIC VÀ ASPIRIN LÊN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA CÂY LAN GẤM (Anoectochilus Roxburghii) TRONG ĐIỀU... ĐOAN Tôi xin cam đoan đồ án tốt nghiệp với đề tài ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng acid salicylic aspirin lên tăng trưởng lan gấm (Anoectochilus roxburghii) điều kiện in vitro? ?? cơng trình nghiên cứu riêng... Đỗ Mạnh Cường cộng sự, 2015 nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng điều kiện nuôi cấy lên sinh trưởng phát triển lan gấm (Anoectochilus setaceus Blume) nuôi cấy in vitro Sau tháng nuôi