Nghiên cứu sản xuất chế phẩm nấm paecilomyces sp để phòng trừ một số loài sâu hại cây trồng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP SẢN XUẤT CHẾ PHẨM NẤM PAECILOMYCES LILACINUS PHÒNG TRỪ MỘT SỐ LỒI SÂU HẠI CÂY TRỒNG Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực MSSV: 1515100003 : Đỗ Anh Duy Lớp: 15HSH01 TP Hồ Chí Minh, 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP SẢN XUẤT CHẾ PHẨM NẤM PAECILOMYCES LILACINUS PHÒNG TRỪ MỘT SỐ LỒI SÂU HẠI CÂY TRỒNG Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực MSSV: 1515100003 : Đỗ Anh Duy Lớp: 15HSH01 TP Hồ Chí Minh, 2016 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu kết Đồ án trung thực Mọi thơng tin trích dẫn Đồ án ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày 19 tháng năm 2016 Sinh viên thực Đỗ Anh Duy LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu Trường Đại học Cơng Nghệ Tp Hồ Chí Minh – HUTECH tạo điều kiện thuận lợi để em học tập hồn thành tốt khóa học 2011 – 2016 Em xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến thầy cô khoa Công nghệ sinh học, Thực phẩm Môi trường giảng dạy em năm qua, kiến thức mà em nhận giảng đường đại học hành trang giúp em vững bước tương lai Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Hai người tận tình hướng dẫn, giải đáp thắc mắc, truyền đạt nhiều kinh nghiệm quý báu, suốt trình thực đồ án tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn đến ThS Huỳnh Văn Thành, cán phịng thí nghiệm CNSH, Trường Đại học Cơng Nghệ TP.HCM – HUTECH tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành tốt đồ án Em xin cảm ơn KS Nguyễn Ngọc Phong, cán công ty Sitto Việt Nam tận tình hỗ trợ, hướng dẫn em q trình thực thí nghiệm thực tế vườn hồ tiêu tỉnh Bình Phước Và tơi gửi lời cảm ơn đến bạn phòng thí nghiệm CNSH, em Đinh Thành Hiếu khóa 2013 tận tình hỗ trợ, giúp đỡ tơi trải qua khó khăn q trình thực đồ án Cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình đặc biệt ba mẹ bên cạnh, cổ vũ, động viên tinh thần, tạo điều kiện để hồn thành tốt Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC Trang DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi LỜI MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan nghiên cứu sử dụng nấm có ích phòng trừ sâu hại 1.2 Giới thiệu nấm thuộc chi Paecilomyces 1.2.1 Phân loại khoa học 1.2.2 Đặc điểm hình thái 1.2.3 Đặc điểm sinh thái 1.2.4 Cơ chế tác động lên côn trùng 10 1.3 Một số kết nghiên cứu nấm Paecilomyces sp trừ sâu hại trồng 11 1.4 Giới thiệu phương pháp lên men bán rắn tạo chế phẩm nấm 12 1.5 Tổng quan số loài sâu bọ chích hút 13 1.5.1 Tổng quan rầy nâu 13 1.5.1.1 Hình thái 13 1.5.1.2 Phân bố 14 1.5.1.3 Tập tính sinh sống quy luật phát sinh gây hại 15 1.5.1.4 Mức độ gây hại 16 1.5.1.5 Biện pháp phòng trừ 20 1.5.2 Tổng quan rệp sáp 21 1.5.2.1 Hình thái 21 1.5.2.2 Đặc điểm sinh thái 22 1.5.2.3 Triệu chứng mức độ gây hại 22 1.5.2.4 Biện pháp phòng trừ 24 i 1.5.3 Tổng quan rệp muội 24 1.5.3.1 Hình thái 24 1.5.3.2 Đặc điểm sinh thái 25 1.5.3.3 Triệu chứng mức độ gây hại 26 1.5.3.4 Biện pháp phòng trừ 28 1.5.4 Tổng quan rệp muội nâu đen Toxoptera sp hại hồ tiêu 29 1.5.4.1 Đặc điểm hình thái 29 1.5.4.2 Triệu chứng gây hại 30 1.5.4.3 Biện pháp phòng chống 31 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 32 2.2 Vật liệu 32 2.2.1 Dụng cụ 32 2.2.1 Hóa chất 32 2.2.2 Chủng nấm Paecilomyces lilacinus 33 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Phân lập lại nấm Paecilomyces lilacinus rệp sáp 34 2.3.1.1 Phân lập 34 2.3.1.1 Tạo dòng 34 2.3.1.2 Quan sát đặc điểm hình thái nấm sợi (Agrios, 2005) 34 2.3.2 Xác định môi trường nhân sinh khối tạo chế phẩm 36 2.3.3 Ảnh hưởng loại thuốc bảo vệ thực vật đến phát triển nấm Paecilomyces sp 37 2.3.4 Đánh giá hiệu lực chế phẩm điều kiện phịng thí nghiệm 38 2.3.4.1 Đánh giá khả gây chết rầy nâu Nilaparvata lugens Stal chế phẩm nấm Paecilomyces lilacinus 39 2.3.4.2 Đánh giá khả gây chết rệp sáp Planococcus lilacinus chế phẩm nấm Paecilomyces lilacinus 39 2.3.4.3 Đánh giá khả gây chết rệp muội Brevicoryne brassaciae chế phẩm nấm Paecilomyces lilacinus 40 ii 2.3.5 Đánh giá hiệu lực chế phẩm nấm Paecilomyces lilacinus trừ rệp Toxoptera sp hại hồ tiêu 41 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 42 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1 Phân lập lại chủng nấm Paecilomyces lilacinus từ rệp sáp 43 3.2 Xác định môi trường nhân sinh khối bào tử nấm Paecilomyces lilacinus 45 3.3 Ảnh hưởng loại thuốc bảo vệ thực vật đến phát triển nấm Paecilomyces lilacinus 49 3.4 Khả gây chết trùng chích hút nấm Paecilomyces lilacinus nhân môi trường gạo 51 3.4.1 Khả gây chết rầy nâu 51 3.4.2 Khả gây chết rệp sáp 55 3.4.3 Khả gây chết rệp muội 58 3.5 Đánh giá khả gây chết rệp muội Texoptera sp hại hồ tiêu điều kiện vườn trồng 63 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 67 4.1 Kết luận 67 4.2 Đề nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BVTV: Bảo vệ thực vật EC: Emulsifiable Concentrate (thuốc dạng nhũ dầu) WP: Wettable Powder (thuốc dạng bột hòa nước) WG: Wettable Granule (thuốc hạt phân tán nước) G: Granule (thuốc dạng bột, dùng khơng hịa với nước) iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Sự sinh trưởng nấm Paecilomyces lilacinus loại môi trường nhân sinh khối 45 Bảng 3.2 Mật độ bào tử nấm Paecilomyces lilacinus nhân nuôi khay gạo 48 Bảng 3.3 Ảnh hưởng số loại thuốc BVTV đến phát triển nấm Paecilomyces lilacinus 49 Bảng 3.4 Số rầy nâu chết ngày sau phun thuốc 52 Bảng 3.5 Hiệu lực gây chết rầy nâu 52 Bảng 3.6 Số rệp sáp Planococcus lilacinus chết ngày sau phun thuốc 55 Bảng 3.7 Hiệu lực gây chết rệp sáp Planococcus lilacinus 56 Bảng 3.8 Số rệp muội Brevicoryne brassacicae chết ngày sau phun thuốc 59 Bảng 3.9 Hiệu lực gây chết rệp muội Brevicoryne brassacicae 59 Bảng 3.10 Mật độ rệp công thức trước phun thuốc 64 Bảng 3.11 Mật độ rệp công thức sau phun nấm Paecilomyces lilacinus 64 Bảng 3.12 Hiệu lực gây chết rệp Texoptera sp nấm Paecilomyces lilacinus 65 v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Đại thể nấm Paecilomyces spp Hình 1.2 Đặc điểm vi thể nấm Paecilomyces lilacinus Hình 1.3 Đặc điểm vi thể nấm Paecilomyces farinosus Hình 1.4 Đặc điểm vi thể nấm Paecilomyces varioti Hình 1.5 Đặc điểm vi thể nấm Paecilomyces lilacinus 10 Hình 1.6 Vịng đời rầy nâu Nilaparvata lugens 14 Hình 1.7 Lúa bị rầy nâu công 18 Hình 1.8 Triệu chứng bệnh lùn xoắn 19 Hình 1.9 Triệu chứng lùn xoắn giai đoạn đẻ nhánh 20 Hình 1.11 Rệp sáp Planococcus lilacinus 22 Hình 1.12 Rệp sáp gây hại mãng cầu 23 Hình 1.13 Rệp muội Brevicoryne brassacicae 25 Hình 1.14 Vòng đời rệp Brevicoryne brassacicae 26 Hình 1.15 Rệp bám hút chích mặt 27 Hình 1.16 Rau bị hư hại rệp muội công 27 Hình 1.17 Rệp muội Texoptera sp 29 Hình 1.18 Rệp Texoptera sp Hồ tiêu 30 Hình 2.19 Rệp Texoptera sp hút chích Hồ tiêu 31 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 33 Hình 2.2 Phòng ẩm 35 vi Hieu luc gay chet ray nau sau The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values Actara Nuoccat Pae hieuluc7ngay Number of Observations Read Number of Observations Used The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 10825.90216 5412.95108 Error 220.66907 36.77818 Corrected Total 11046.57122 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 6.064501 49.33556 0.980024 12.29235 Source DF Anova SS Mean Square F Value hieuluc7ngay 10825.90216 5412.95108 147.18 147.18 F F Model 42.66666667 21.33333333 Error 3.33333333 0.55555556 Corrected Total 46.00000000 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.745356 2.666667 0.927536 27.95085 Source DF sorepsapchet3N Anova SS Mean Square F Value 42.66666667 21.33333333 38.40 38.40 0.0004 Pr > F 0.0004 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y Note: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate 0.05 Alpha Error Degrees of Freedom 0.555556 Error Mean Square 2.44691 Critical Value of t Least Significant Difference 1.4891 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N sorepsapchet3N A 5.3333 Abamecti B 2.6667 Pae C 0.0000 Nuoccat Hieu luc gay chet rep sap sau The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values Abamecti Nuoccat Pae hieuluc3ngay Number of Observations Read Number of Observations Used The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1443.194822 721.597411 Error 42.066133 7.011022 Corrected Total 1485.260956 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 2.647833 17.65778 0.971678 14.99528 Source DF Anova SS Mean Square F Value 102.92 F The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y Note: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate 0.05 Alpha Error Degrees of Freedom 7.011022 Error Mean Square 2.44691 Critical Value of t Least Significant Difference 5.2901 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N hieuluc3ngay A 30.997 Abamecti B 21.337 Pae C 0.640 Nuoccat SO REP SAP CHET SAU NGAY The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values Abamecti Nuoccat Pae sorepsapchet5N Number of Observations Read Number of Observations Used The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 208.6666667 104.3333333 Error 3.3333333 0.5555556 Corrected Total 212.0000000 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.745356 6.333333 0.984277 11.76878 Source DF sorepsapchet5N Anova SS Mean Square F Value 208.6666667 104.3333333 187.80 187.80 F F Model 3917.701667 1958.850833 Error 28.734133 4.789022 Corrected Total 3946.435800 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 2.188383 29.24000 0.992719 7.484212 Source DF Anova SS Mean Square F Value hieuluc5ngay 3917.701667 1958.850833 409.03 409.03 F F Model 640.2222222 320.1111111 Error 4.6666667 0.7777778 Corrected Total 644.8888889 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.881917 11.88889 0.992764 7.417994 Source DF sorepsapchet7N Anova SS Mean Square F Value 640.2222222 320.1111111 411.57 411.57 F F Model 10466.74496 5233.37248 Error 244.17527 40.69588 Corrected Total 10710.92022 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 6.379332 48.51444 0.977203 13.14935 Source DF Anova SS Mean Square F Value hieuluc7ngay 10466.74496 5233.37248 128.60 128.60 F F Model 44.66666667 22.33333333 Error 5.33333333 0.88888889 Corrected Total 50.00000000 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.942809 3.000000 0.893333 31.42697 Source DF Anova SS Mean Square F Value sorepmuoichet3N 44.66666667 22.33333333 25.12 25.12 0.0012 Pr > F 0.0012 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y Note: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate 0.05 Alpha Error Degrees of Freedom 0.888889 Error Mean Square 2.44691 Critical Value of t Least Significant Difference 1.8836 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N sorepmuoichet3N A 5.3333 Abamecti A 3.6667 Pae B 0.0000 Nuoccat Hieu luc gay chet rep muoi sau The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values Abamecti Nuoccat Pae hieuluc3ngay Number of Observations Read Number of Observations Used The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1558.072067 779.036033 Error 64.049133 10.674856 Corrected Total 1622.121200 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 3.267240 18.94333 0.960515 Source 17.24744 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F hieuluc3ngay 72.98 F hieuluc7ngay 7047.365422 3523.682711 59.49 0.000 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y Note: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate 0.05 Alpha Error Degrees of Freedom 59.23282 Error Mean Square 2.44691 Critical Value of t Least Significant Difference 15.376 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N hieuluc7ngay A 73.790 Abamecti A 68.857 Pae B 12.117 Nuoccat B PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Hình B1 Khay lên men nấm Paecilomyces lilacinus Hình B2 Sinh viên cấy trang phịng thí nghiệm Hình B3 Rệp muội nâu đen gây hại mặt non hồ tiêu Hình B4 Sinh viên làm thí nghiệm vườn hồ tiêu xã Đakia, huyện Bù Gia Mập, tỉnh Bình Phước ... nghiên cứu ứng dụng lồi nấm có ích hạn chế Sản xuất chế phẩm nấm sử dụng phòng trừ sâu hại trồng lại vấn đề quan tâm Công nghệ sinh học Đó lý để em thực đề tài ? ?Nghiên cứu sản xuất chế phẩm nấm. .. chế phẩm nấm Paecilomyces sp để phịng trừ số lồi sâu hại trồng? ?? Mục đích nghiên cứu Tìm mơi trường sản xuất nấm Paecilomyces sp xác định hiệu phòng trừ chế phẩm số đối tượng sâu hại làm sở cho... Cơ chế tác động lên côn trùng 10 1.3 Một số kết nghiên cứu nấm Paecilomyces sp trừ sâu hại trồng 11 1.4 Giới thiệu phương pháp lên men bán rắn tạo chế phẩm nấm 12 1.5 Tổng quan số