Đánh giá biến dị di truyền các nhóm tôm sú penaeus monodon làm vật liệu ban đầu cho chương trình chọn giống

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ BIẾN DỊ DI TRUYỀN CÁC NHĨM TƠM SÚ (PENAEUS MONODON) LÀM VẬT LIỆU BAN ĐẦU CHO CHƯƠNG TRÌNH CHỌN GIỐNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : Th.s Bùi Thị Liên Hà Sinh viên thực : Trần Thị Thanh Trúc MSSV: 115 111 0388 Lớp: 11DSH02 TP Hồ Chí Minh, 2015 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Nhóm thực đồ án với đề tài “Đánh giá biến dị di truyền nhóm tơm sú (penaeus monodon) làm vật liệu ban đầu cho chương trình chọn giống” cam đoan nội dung đồ án nhóm thực hướng dẫn trực tiếp Th.s Bùi Thị Liên Hà – cán phòng Sinh học thực nghiệm thuộc Viên Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II Số liệu kết nghiên cứu đồ án hoàn toàn trung thực chưa sử dụng để công bố cơng trình khác Mọi tham khảo dùng đồ án trích dẫn rõ ràng, tên tác giả, tên cơng trình, thời gian địa điểm cơng bố Mọi hành vi chép không hợp lệ hay vi phạm quy chế đào tạo, nhóm thực đề tài xin chịu hoàn toàn trách nhiệm Sinh viên Trần Thị Thanh Trúc i Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Qua thời gian thực tập Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II, em học hỏi nhiều kinh nghiệm, kiến thức thực tiễn thực hành thiết bị đại mà em học lý thuyết Trước hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Th.s Phạm Minh Nhựt tạo điều kiện cho em có hội thực tập tốt nghiệp Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến với quý thầy cô trường Đại học Công Nghệ TP.HCM đặc biệt thầy cô thuộc khoa Công Nghệ Sinh Học – Thực Phẩm – Mơi Trường tận tình giảng dạy, trang bị kiến thức giúp em nắm bắt chủ động trình thực tập Em xin trân trọng cảm ơn chị Th.s Bùi Thị Liên Hà anh chị cơng tác phịng Sinh học thực nghiệm thuộc Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy sản II trực tiếp hướng dẫn tận tình giúp đỡ em suốt thời gian thực tập Và cuối em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè ln bên cạnh ủng hộ em vượt qua khó khăn để hồn thành tốt báo cáo Tuy cố gắng không tránh khỏi thiếu sót, mong nhận góp ý quý báu từ quý thầy cô Em xin chân thành cảm ơn ii Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC BIỂU ĐỒ HÌNH ẢNH x MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu tôm sú 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Phân bố 1.1.3 Đặc điểm hình thái cấu tạo 1.1.4 Chu kì phát triển 10 1.1.5 Đặc điểm dinh dưỡng 12 1.1.6 Đặc điểm sinh trưởng, sinh sản phát triển 13 1.1.7 Tình hình ni trồng tơm sú giới 14 1.1.8 Tình hình ni trơng tơm sú Việt Nam 14 1.2 GIỚI THIỆU CHUNG VỀ ĐA DẠNG DI TRUYỀN .15 1.2.1 Đa dạng di truyền 15 1.2.2 Quần thể .16 1.2.3 Nguyên nhân xuất đa dạng di truyền quần thể 17 1.2.4 Ý nghĩa đa dạng di truyền nuôi trồng thủy sản 18 1.3 KỸ THUẬT MICROSATELLITE 19 1.3.1 Khái niệm kỹ thuật Microsatellite 19 1.3.2 Tính chất .20 1.3.3 Ưu - nhược điểm microsatellite 20 1.3.4 Các loại Microsatellite 21 1.3.5 Cơ chế hình thành vai trị Microsatellite .22 iii Đồ án tốt nghiệp 1.3.5.1 Cơ chế hình thành Microsatellite 22 1.3.5.2 Vai trò Microsatellite 22 1.3.6 Các phương pháp phát Microsatellite .23 1.3.6.1 Phương pháp lai 24 1.3.6.2 Phương pháp PCR .24 1.3.6.3 Phát microsatellite mồi microsatellite .25 1.4 ĐỊNH LƯỢNG DNA BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ 28 1.5 KỸ THUẬT POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) 29 1.5.1 Nguyên lý chung kỹ thuật PCR 29 1.5.2 Các yếu tố cần thiết cho phản ứng PCR 30 2.6 KỸ THUẬT ĐIỆN DI 31 2.6.1 Điện di gel agarose 31 2.6.1.1 Khái niệm .31 2.6.1.2 Các bước thực 32 2.6.2 Điện di mao quản Capillary Electrophoresis (CE) 33 2.6.2.1 Nguyên tắc 33 2.6.2.2 Cơ chế điện di .33 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP .34 2.1 Vật liệu 35 2.1.1 Vật liệu sinh học 35 2.1.2 Hóa chất 36 2.1.2.1 Mồi (primer) .36 2.1.2.2 Thang (ladder) 38 2.1.2.3.Hóa chất ly trích DNA 38 2.1.2.4 Hóa chất chạy PCR .38 2.1.2.5 Hóa chất chạy điện di agarose 39 2.1.2.6 Hóa chất chạy điện di mao quản 39 2.1.2.7 Dụng cụ thí nghiệm 39 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 iv Đồ án tốt nghiệp 2.2.1 Phương pháp trích ly DNA tổng số 40 2.2.2 Phương pháp kiểm tra độ tinh định lượng DNA 43 2.2.3 Phương pháp tối ưu hóa phản ứng PCR khảo sát tính hoạt động cặp mồi microsatellite 44 2.2.3.1 Khảo sát nhiệt độ bắt cặp cặp mồi microsatellite 45 2.2.3.2 Khảo sát nồng độ MgCl2 47 2.2.3.3 Khảo sát hàm lượng DNA khuôn 48 2.2.3.4 Khảo sát tính ổn định quy trình PCR .49 2.3 Phân tích thống kê đa dạng di truyền bốn quần đàn mẫu tôm sú phần mềm Cervus, Fstat, Genepop .50 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 52 3.1 Kết trích ly DNA 53 3.2 Kết nhiệt độ bắt cặp cặp mồi microsatellite 55 3.2.1 Kết nhiệt độ bắt cặp cặp mồi microsatellite W1 bốn mẫu tôm A09, T30, G30, N03 đại diện cho bốn vùng Ấn Độ Dương, Thái Bình Dương, Gia Hóa Nội Địa 55 3.2.2 Khảo sát nhiệt độ bắt cặp cặp mồi microsatellite P1 bốn mẫu tôm A09, T30, G30, N03 đại diện cho nhóm Ấn Độ Dương, Thái Bình Dương, Gia Hóa Nội Địa .56 3.2.3 Kết nhiệt độ bắt cặp cặp mồi microsatellite L1 bốn mẫu tơm A09, T30, G30, N03 đại diện cho nhóm Ấn Độ Dương, Thái Bình Dương, Gia Hóa Nội Địa 57 3.3 Khảo sát nồng độ MgCl2 tối ưu 59 3.3.1 Kết tối ưu nồng độ MgCl2 microsatellite W1 .60 3.3.2 Kết tối ưu nồng độ MgCl2 microsatellite P1 .60 3.3.3 Kết tối ưu nồng độ MgCl2 microsatellite L1 61 3.3.4 Kết tối ưu nồng độ MgCl2 microsatellite N1 62 3.4 Kết tối ưu hàm lượng DNA khuôn 64 3.4.1 Kết tối ưu hàm lượng DNA khuôn cho cặp mồi microsatellite W1 64 3.4.2 Kết tối ưu hàm lượng DNA khuôn cho cặp mồi microsatellite L1 65 3.4.3 Kết tối ưu hàm lượng DNA khuôn cho cặp mồi microsatellite P1 66 v Đồ án tốt nghiệp 3.4.4 Kết tối ưu hàm lượng DNA khuôn cho cặp mồi microsatellite N1 67 3.5 Kết kiểm tra tính ổn định phản ứng PCR sàng lọc cặp mồi microsatellite 69 3.5.1 Kết kiểm tra tính ổn định phản ứng PCR 69 3.5.2 Sàng lọc cặp mồi microsatellite 72 3.6 Kết phân tích đa dạng di truyền bốn quần đàn tôm sú .74 3.6.1 Kết thơng tin đa hình quần đàn tơm sú: Ấn Độ Dương, Thái Bình Dương, Gia Hóa Nội Địa 74 3.6.2 Sự khác biệt di truyền quần đàn mẫu phân tích 78 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .80 4.1 Kết luận .81 4.2 Kiến nghị 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 Tài liệu tiếng việt 83 Tài tiệu tiếng anh 85 Tài liệu internet .87 PHỤ LỤC A A1 PHỤ LỤC B B1 vi Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT μl : Microlite μM : Micromol/lite μg : Microgram Ar : Allelic richness (mức độ phong phú alen) bp : Base pair ctv : cộng tác viên TP HCM : Thành phố Hồ Chí Minh DMSO : Dimethyl sulfoxide DNA : Deoxyribonucleic acid dNTP : Deoxyribonucleotide triphosphate EDTA : Ethylene diamine tetraacetic acid GTE : Glucose-Tris-EDTA He : Expected heterozygosity (dị hợp tử mong đợi) Ho : Observed heterrozygosity (dị hợp tử phát hiện) HWE : Cân Hardy - Weinberg ISSR : Inter Simple Sequence Repeats M : Ladder DNA (thang DNA) Marker : Chỉ thị mM : Milimolar (milimol/lite) Na : Number of alleles per locus (số lƣ ợng alen locus) NS : không khác biệt có ý nghĩa NST : Nhiễm sắc thể PCR : Polymerase chain reaction CE : Capillary Electropherosis (Điện di mao quản) EOF : Electro – Osmotic Flow xi vii Đồ án tốt nghiệp EFF : Electric Field Force PIC : Polymorphic Information Content (thơng tin đa hình) SDS : Sodium Dodecyl Sulphate SSR : Single sequence repeat - Microsatellite STE : Sodium Chloride-Tris-EDTA RE : Restristion Enzyme (enzyme cắt giới hạn) Ta : Annealing temperature (nhiệt độ bắt cặp) TBE : Tris Borate EDTA Tm : Melting temperature (nhiệt độ nóng chảy) VNCNTTS II : Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II VNTR : Variable Number Tamdem Repeat viii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Danh sách 137 mẫu tôm sú 35 Bảng 2.2 Thông tin cặp mồi 37 Bảng 2.3 Gradient nhiệt độ lai cho 15 cặp mồi microsatellite 46 Bảng 2.4 Nồng độ MgCl2 khảo sát cho cặp mồi microsatellite .47 Bảng 2.5 Hàm lượng DNA khuôn khảo sát cho cặp mồi microsatellite 48 Bảng 2.6 Thành phần buffer, dNTP, cặp mồi microsatellite, DNA khuôn, Taq polymerase cho phản ứng PCR 49 Bảng 3.1.Kết đo OD kiểm tra độ tinh nồng độ DNA .54 Bảng 3.2 Nhiệt độ bắt cặp (Ta) sau tối ưu 15 cặp mồi microsatellite .59 Bảng 3.3 Kết tối ưu nồng độ MgCl2 15 cặp mồi microsatellite 64 Bảng 3.4 Kết khảo sát hàm lượng DNA khuôn tối ưu 15 cặp mồi microsatellite 69 Bảng 3.5 Hiệu suất PCR số allen 15 cặp mồi microsatellite 28 mẫu DNA tôm sú 72 Bảng 3.6 Thông tin đa dạng di truyền quần đàn tôm sú 75 Bảng 3.7 Giá trị Fst phân tích theo nhóm 79 Bảng 3.8 Tổng hợp kết tối ưu 10 cặp mồi microsatellite 81 ix Đồ án tốt nghiệp 18 Phạm Văn Tình (2004) Kỹ thuật sản xuất giống tôm sú chất lượng cao, Nhà xuất Nơng Nghiệp, Tp Hồ Chí Minh 19 Trần Đức Trung (2009) Nghiên cứu đa dạng di truyền giống/dòng chè (Camellia sinensis (L.) O.Kuntze) Việt Nam thị hình thái thị phân tử microsatellite (SSR), Luận án Thạc Sĩ Sinh học, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, Hà Nội 20 Trần Ngọc Hải Trần Thị Thanh Hiền (1999) Giáo trình kỹ thuật ni thức ăn tự nhiên, giáo trình trường ĐH Cơng Nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh Tài tiệu tiếng anh 21 D Botstein, R.L White, M Skolnick and R.W.Davis (1980), Contruction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms, Am J Hum Genet, 32(3), 314 - 331 22.D.Aziz, S.S.Siraj, S.K Daud, J.M Panandam and M.F Othman (2011) Genetic Diversity of Wild and Cultured Populations of Penaeus monodon using Microsatellite Makers Journal of Fisheries and Aquatic Science, 6: 614-623 23 Falconer, D S., (1989) Introduction to Quantitative Genetics, Ed Longmans Green/John Wiley & Sons, Harlow, Essex, UK/New York 24 Griffiths Anthony JF (2000) An Introduction to Genetic Analysis, 7th edition Publisher New York: Harper & Row 25 Gjedrem T (2005) Selection and Breeding Programs in Aquaculture, Springer ISBN-10 1-4020-3341-9 364p 26 Hansen L.P., Windsor M.L., Youngson A.F (1997) Interactions between salmon culture and wild stocks of Atlantic salmon, The scientific and management issues ICES Journal of Marine Science 54, 963–1225 27 Hartl DL, Clark AG (1997) Principles of Population Genetics 3rd ed., Sinauer Associates Inc., Sunderland, Massachusets ISBN: 0-87893-306-9 28 Jeremy J Agresti, Shingo Seki, Avner Cnaani, Supawadee Poompuang , Eric M Hallerman, Nakdimon Umiel, Gideon Hulata, Graham A.E Gall, Bernie May 85 Đồ án tốt nghiệp (2000) Breeding new strains of tilapia: development of an artificial center of origin and linkage map based on AFLP and microsatellite loci Aquaculture 185, 43–56 29 Kottelat M and Whitten T (1996) Freshwater biodiversity in Asia with special reference to fish Work band technical paper No 343, Washington, 59 pp 30 Li, et al (2007) Development of two microsatellite multiplex systems for black tiger shrimp Penaeus monodon and its application in genetic diversity study for two populations 31 Liu J (2006) Aquaculture Research Progress Report for 2006 32 Miller, S A Dykes, D D Polesky (1988) A simple salting out procedure for extracting DNA from nucleated cells Nucleic Acids Research 16, 31-215 33 M Nei (1978) Estimation of average heterozygosity and genetic distance from small number of individuals, Genetics, 18(9), 283 – 301 34 Motoh H (1981) Aquaculture Department Southeast Asian Fisheries Development Center Iloilo Philippine 128p 35 Mustafa S (2003) Stock enhancement and sea ranching: objectives and potential Reviews in Fish Biology and Fisheries 13(2), 141-149 36 Pan, et al (2004) Isolation and characterization of 23 polymorphic microsatellite markers for diversity and stock analysis in tiger shrimp ( Penaeus monodon) 37 Powell W, Morgante M, Andre C, Hanafey M, Vogel J, Tingey S, Rafalski A (2006) The comparison of RFLP, RAPD, AFLP and SSR (Microsatellite) markers for germplasm analysis 38 Reza Nahavandi (2011), Genetic diversity of intensive cultured and wild tiger shrimp Penaeus monodon (Fabricius) in Malaysia using microsatellite markers African Journal of Biotechnology Vol 10(69), pp 15501-15508 39 Ridley M (1993) Evolution Blackwell Scientific Publishing, Boston 40 Suzuki DT, Griffiths AJF, Miller JH, Lewontin RC (1989) An Introduction to Genetic Analysis 4th ed., W-H Freeman and Company, New York 86 Đồ án tốt nghiệp 41 Wuthisuthimethavee, et al (2003) Development of microsatellite markers in black tiger shrimp (Penaeus monodon Fabricius) 42 Xu, et al (1999) Identification of bundant and informative microsatellites from shrimp (Penaeus monodon) genome 43 Yablokov V.A (1986) Population Biology: Progress and Problems on Natural Populations Mir Publishers, Moscow Tài liệu internet 44 Thông xã Việt Nam Xuất tôm đạt kỷ lục 4,1 tỷ USD, 7/2015, http://xttm.agroviet.gov.vn/XTTMSites/vi-VN/64/87/87971/Default.aspx 45 Thông xã Việt Nam Triển vọng mở rộng thị trường xuất nhập Việt Nam, 7/2015, http://agritrade.com.vn/ViewArticle.aspx?ID=4601&AspxAutoDetectCookieSuppo rt=1 46 Việt Linh Kỹ thuật nuôi trồng, khai thác chế biến thủy sản, 7/2015 www.vietlinh.vn/library/aquaculture_shrimp/su_sinhhocsinhthai.asp 87 Đồ án tốt nghiệp 88 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC A A1 Đồ án tốt nghiệp A2 Đồ án tốt nghiệp A3 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC B pop1 pop2 pop3 pop4 All_W All_UW Locus: P1 N 31 37 38 24 p: 264 0.258 0.149 0.026 0.292 0.165 0.181 p: 278 0.161 0.108 0.368 0.125 0.200 0.191 p: 302 0.306 0.554 0.500 0.208 0.415 0.392 p: 382 0.274 0.189 0.105 0.375 0.219 0.236 Locus: P2 N 33 35 38 25 p: 285 0.348 0.443 0.355 0.480 0.401 0.407 p: 324 0.485 0.429 0.421 0.260 0.408 0.399 p: 393 0.167 0.129 0.224 0.260 0.191 0.195 Locus: W2 N 28 25 33 21 p: 216 0.107 0.060 0.167 0.048 0.103 0.095 p: 306 0.571 0.220 0.197 0.452 0.350 0.360 p: 356 0.107 0.040 0.333 0.333 0.206 0.203 p: 406 0.214 0.680 0.303 0.167 0.341 0.341 Locus: W10 N 32 35 39 26 B1 Đồ án tốt nghiệp p: 316 0.438 0.043 0.359 0.577 0.337 0.354 p: 342 0.344 0.129 0.308 0.231 0.254 0.253 p: 466 0.172 0.429 0.244 0.096 0.246 0.235 p: 492 0.047 0.400 0.090 0.096 0.163 0.158 Locus: P4 N 30 34 39 23 p: 222 0.467 0.456 0.385 0.304 0.409 0.403 p: 268 0.367 0.441 0.423 0.457 0.421 0.422 p: 364 0.167 0.103 0.192 0.239 0.171 0.175 Locus: P5 N 31 35 39 25 p: 282 0.403 0.257 0.564 0.460 0.423 0.421 p: 304 0.452 0.543 0.333 0.440 0.438 0.442 p: 382 0.145 0.200 0.103 0.100 0.138 0.137 Locus: P7 N 31 34 37 25 p: 178 0.355 0.603 0.486 0.460 0.480 0.476 p: 216 0.194 0.029 0.135 0.200 0.134 0.140 p: 246 0.194 0.250 0.257 0.200 0.228 0.225 p: 286 0.258 0.118 0.122 0.140 0.157 0.159 B2 Đồ án tốt nghiệp Locus: L1 N 32 35 38 24 p: 270 0.297 0.429 0.224 0.250 0.302 0.300 p: 293 0.234 0.429 0.461 0.479 0.399 0.401 p: 328 0.469 0.143 0.316 0.271 0.298 0.300 Locus: L3 N 30 36 38 25 p: 275 0.267 0.222 0.474 0.340 0.329 0.326 p: 295 0.450 0.569 0.303 0.420 0.434 0.436 p: 330 0.283 0.208 0.224 0.240 0.236 0.239 Locus: L4 N 32 35 38 26 p: 251 0.094 0.329 0.092 0.269 0.191 0.196 p: 272 0.422 0.357 0.368 0.308 0.366 0.364 p: 296 0.406 0.257 0.474 0.346 0.374 0.371 p: 331 0.078 0.057 0.066 0.077 0.069 0.069 Locus: W4 N 30 34 35 25 p: 441 0.367 0.176 0.314 0.200 0.266 0.264 p: 477 0.067 0.103 0.086 0.180 0.105 0.109 p: 503 0.433 0.426 0.286 0.380 0.379 0.381 p: 533 0.133 0.294 0.314 0.240 0.250 0.245 B3 Đồ án tốt nghiệp Locus: W3 N 31 34 37 23 p: 502 0.468 0.735 0.473 0.652 0.576 0.582 p: 606 0.532 0.265 0.527 0.348 0.424 0.418 Locus: N1 N 30 30 35 21 p: 185 0.233 0.167 0.200 0.214 0.203 0.204 p: 207 0.433 0.433 0.371 0.381 0.405 0.405 p: 235 0.333 0.400 0.429 0.405 0.392 0.392 Locus: N2 N 31 35 36 22 p: 185 0.242 0.171 0.194 0.182 0.198 0.197 p: 207 0.419 0.429 0.361 0.455 0.411 0.416 p: 235 0.339 0.400 0.444 0.364 0.391 0.387 Locus: W9 N 29 32 35 22 p: 227 0.534 0.484 0.557 0.432 0.508 0.502 p: 275 0.466 0.516 0.443 0.568 0.492 0.498 ************************************************ B4 Đồ án tốt nghiệp Gene diversity per locus and population : P1 0.759 0.636 0.615 0.737 P2 0.627 0.615 0.654 0.651 W2 0.618 0.493 0.744 0.682 W10 0.670 0.649 0.720 0.613 P4 0.631 0.596 0.647 0.657 P5 0.625 0.610 0.570 0.598 P7 0.749 0.567 0.676 0.707 L1 0.650 0.623 0.650 0.651 L3 0.662 0.593 0.644 0.665 L4 0.655 0.710 0.638 0.729 W4 0.676 0.708 0.732 0.748 W3 0.512 0.398 0.509 0.472 N1 0.661 0.640 0.651 0.667 N2 0.665 0.640 0.647 0.649 W9 0.514 0.511 0.504 0.511 ************************************************ number of alleles sampled : P1 4 4 P2 3 3 W2 4 4 W10 4 4 P4 3 3 P5 3 3 P7 4 4 L1 3 3 B5 Đồ án tốt nghiệp L3 3 3 L4 4 4 W4 4 4 W3 2 2 N1 3 3 N2 3 3 W9 2 2 ************************************************ Allelic Richness per locus and population based on sample size of: 21 diploid individuals P1 4.000 3.999 3.802 4.000 4.000 P2 3.000 3.000 3.000 3.000 3.000 W2 4.000 3.974 4.000 4.000 3.994 W10 3.963 3.940 3.997 4.000 4.000 P4 3.000 2.999 3.000 3.000 3.000 P5 3.000 3.000 2.999 3.000 2.999 P7 4.000 3.857 4.000 4.000 3.998 L1 3.000 3.000 3.000 3.000 3.000 L3 3.000 3.000 3.000 3.000 3.000 L4 3.996 3.978 3.982 3.999 3.962 W4 3.994 3.999 3.997 4.000 3.994 W3 2.000 2.000 2.000 2.000 2.000 N1 3.000 3.000 3.000 3.000 3.000 N2 3.000 3.000 3.000 3.000 3.000 W9 2.000 2.000 2.000 2.000 2.000 B6 Đồ án tốt nghiệp ************************************************ Fis Per population : P1 0.703 0.490 0.572 0.435 P2 0.227 0.256 -0.168 0.262 W2 0.191 -0.054 0.185 0.721 W10 0.067 0.208 0.181 0.498 P4 0.049 0.013 0.286 0.074 P5 0.278 0.251 0.370 0.063 P7 0.397 -0.090 0.321 0.264 L1 0.230 0.220 0.393 0.232 L3 0.446 0.203 0.141 0.098 L4 0.236 0.477 0.299 0.578 W4 0.803 0.709 0.766 0.519 W3 0.685 0.557 0.522 0.816 N1 0.294 0.479 0.386 0.357 N2 0.272 0.465 0.399 0.440 W9 0.799 0.450 0.490 0.733 All 0.374 0.316 0.338 0.398 pop2 pop3 pop4 pop1 0.00833 pop2 pop3 0.15833 0.00833 0.39167 0.00833 0.09167 P-values obtained after : 120 permutations B7 Đồ án tốt nghiệp Indicative adjusted nominal level (5%) for multiple comparisons is : 0.008333 pop1 pop2 pop3 pop2 pop3 pop4 * NS NS * * NS B8 ... nhỏ với đề tài ? ?Đánh giá biến dị di truyền nhóm tơm sú (Penaeus monodon) làm vật liệu ban đầu cho chương trình chọn giống? ?? nhằm cung cấp sở khoa học cho chương trình chọn giống tơm sú quốc gia Đề... nghiệp LỜI CAM ĐOAN Nhóm thực đồ án với đề tài ? ?Đánh giá biến dị di truyền nhóm tơm sú (penaeus monodon) làm vật liệu ban đầu cho chương trình chọn giống? ?? cam đoan nội dung đồ án nhóm thực hướng... chọn - Phân tích đa dạng di truyền nhóm mẫu tơm sú chọn giống - Đưa nhận định hỗ trợ cho chương trình chọn giống tôm sú Kết cấu đồ án tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp ? ?Đánh giá biến dị di truyền nhóm