Nghiên cứu tuyển chọn các chủng xạ khuẩn ưa nhiệt chịu axit sinh tổng hợp xenlulaza cao để nâng cao hiệu quả xử lý bã thải chế biến dứa thành phân bón hữu cơ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI ĐÀO THỊ MINH HẠNH NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ƯA NHIỆT, CHỊU AXIT, SINH TỔNG HỢP XENLULAZA CAO ĐỂ NÂNG CAO HIỆU QUẢ XỬ LÝ Bà THẢI CHẾ BIÊN DỨA THÀNH PHÂN BÓN HỮU CƠ LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hà Nội, 2007 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI ĐÀO THỊ MINH HẠNH NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ƯA NHIỆT, CHỊU AXIT, SINH TỔNG HỢP XENLULAZA CAO ĐỂ NÂNG CAO HIỆU QUẢ XỬ LÝ Bà THẢI CHẾ BIÊN DỨA THÀNH PHÂN BÓN HỮU CƠ LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN: TS TĂNG THỊ CHÍNH Hà Nội, 2007 Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT BĐT Bột đậu tương CMC Cacboxylmethylcelluloza ĐC Đối chứng KTKS Khuẩn ty khí sinh KTCC Khuẩn ty chất NM Nấm mốc TN Thí nghiệm TB Tinh bột Xen Xenluloza VSV Vi sinh vật VK Vi khuẩn XK Xạ khuẩn Đại học bách khoa Hà Nội i Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các nhà máy chế biến dứa rau Việt Nam Bảng 1.2 Thành phần hoá học phế thải dứa Bảng 1.3.Thành phần nguyên liệu chế biến thức ăn gia súc từ bã dứa Bảng 2.1 Sơ đồ thí nghiệm chất bổ sung 45 Bảng 3.1 Hoạt tính xenlulaza chủng XK phân lập 47 Bảng 3.2 Đặc điểm hình thái chủng XK tuyển 48 Bảng 3.3 Khả sử dụng nguồn đường chủng XK tuyển chọn 50 Bảng 3.4 Đặc điểm sinh lý - sinh hoá chủng XK 51 Bảng 3.5 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng chủng XK tuyển chọn 52 Bảng 3.6 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh tổng hợp xenlulaza chủng XK tuyển chọn 53 Bảng 3.7 Ảnh hưởng pH lên sinh tổng hợp xenlulaza chủng XK tuyển chọn 54 Bảng 3.8 Ảnh hưởng pH lên sinh tổng hợp CMC-aza chủng XK tuyển chọn 56 Bảng 3.9 Ảnh hưởng pH lên sinh tổng hợp amylaza chủng XK tuyển chọn 57 Bảng 3.10 Ảnh hưởng nguồn cacbon lên sinh trưởng chủng XK tuyển chọn 58 Bảng 3.11 Ảnh hưởng nguồn cacbon lên sinh tổng hợp xenlulaza chủng XK tuyển chọn Đại học bách khoa Hà Nội 59 ii Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh Bảng 3.12 Ảnh hưởng nguồn cacbon lên sinh tổng hợp amylaza chủng XK tuyển chọn 61 Bảng 3.13 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên sinh trưởng chủng XK tuyển chọn 62 Bảng 3.14 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên sinh tổng hợp xenlulaza chủng XK tuyển chọn 65 Bảng 3.15 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên sinh tổng hợp CMC-aza chủng XK tuyển chọn 64 Bảng 3.16 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên sinh tổng hợp amylaza chủng XK tuyển chọn 65 Bảng 3.17 Sự biến động số nhóm VSV bình xử lý bã dứa điều kiện phịng thí nghiệm 67 Bảng 3.18 Sự biến động độ ẩm pH trình ủ 450C 71 Bảng 3.19 Khả phân giải bã dứa chủng XK tuyển chọn điều kiện phịng thí nghiệm 73 Bảng 3.20 Sự biến động số nhóm VSV trình xử lý bã dứa 75 Bảng 3.21 Khả phân giải bã dứa chủng XK tuyển chọn qui mô pilot 76 Bảng 3.22 Kết phân tích thành phần mùn sau xử lý Đại học bách khoa Hà Nội 76 iii Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cấu tạo phân tử xenluloza 10 Hình 1.2 Cơ chế phân giải xenluloza tự nhiên 12 Hình 3.1 Hoạt tính xenlulaza chủng XK tuyển chọn ( DH3, DH7, DH14, DH25, DH36, DH 42) 46 Hình 3.2 Khuẩn lạc số chủng xạ khuẩn tuyển chọn 49 Hình 3.3 Cuống sinh bào tử chủng xạ khuẩn tuyển chọn 49 Hình 3.4 Khuẩn lạc chủng XK DH3, DH14, DH25 nuôi 370C, 450C 550C 52 Hình 3.5 Ảnh hưởng pH lên sinh trưởng chủng XK tuyển chọn 54 Hình 3.6 Ảnh hưởng pH đến khả sinh xenlulaza chủng XK DH36 57 Hình 3.7.Ảnh hưởng nguồn cacbon lên hoạt tính xenlulaza chủng XK DH36 60 Hình 3.8 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến hoạt tính xenlulaza chủng XK tuyển chọn DH3 chủng DH25 64 Hình 3.9 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên hoạt tính amylaza chủng XK DH3 66 Hình 3.10 Các bình ủ thí nghiệm xử lý bã dứa 68 Hình 3.11 Mật độ XK mẫu TN4 môi trường xenluloza, sau 18 ngày ủ, ni 450C 70 Hình 3.12 Sự giảm thể tích bã dứa trình ủ xử lý 71 Hình 3.13 Bã dứa sau 30 ngày ủ 450C 73 Đại học bách khoa Hà Nội iv Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt i Danh mục bảng ii Danh mục hình iv Mục lục v Đặt vấn đề Phần I Tổng quan tài liệu 1.1 Tình hình sản xuất chế biến dứa 1.1.1 Nguồn gốc, đặc điểm sinh lý giá trị dinh dưỡng dứa 1.1.2 Tình hình trồng chế biến dứa giới nước 1.2.Tình hình sử dụng phế liệu chế biến dứa 1.2.1 Sử dụng phế liệu để sản xuất axit xitric 1.2.2 Sử dụng phế liệu để sản xuất chế phẩm bromelin 1.2.3 Sử dụng bã dứa để sản xuất thức ăn gia súc 1.2.4 Sử dụng bã dứa để sản xuất phân hữu 1.3 Xenluloza phân giải xenluloza 1.3.1 Cấu tạo xenluloza 1.3.2 Phức hệ enzim xenlulaza chế tác dụng 11 1.3.3 Sinh tổng hợp xenlulaza VSV 12 1.3.4 Các nhóm VSV phân giải xenluloza 13 1.4 Sự phân giải hợp chất cacbon tự nhiên biện pháp Đại học bách khoa Hà Nội v Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh xử lý rác thải VSV 15 1.4.1 Sự phân giải hợp chất cacbon tự nhiên 15 1.4.2 Cơ chế hình thành mùn rác nhờ VSV 17 1.4.3 Bản chất phương pháp xử lý phế thải hữu vi sinh vật 17 1.5 Xạ khuẩn (XK) 19 1.5.1 Tổng quan xạ khuẩn 19 1.5.2 Đặc điểm hình thái kích thước 20 1.5.3 Cấu tạo tế bào 22 1.5.4 Bào tử hình thành bào tử (khả sinh sản) 23 1.5.5.Đặc điểm phân loại 24 1.5.6 Khả phân huỷ xenluloza xạ khuẩn ưa nhiệt 29 1.6 Một số yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển 31 sinh tổng hợp xenlulaza VSV 1.6 Ảnh hưởng pH 31 1.6 Ảnh hưởng nhiệt độ 31 1.6 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl 32 1.6 Ảnh hưởng nguồn cacbon 32 1.6 Ảnh hưởng nguồn nitơ 33 Phần II Vật liệu phương pháp nghiên cứu 34 2.1 Vật liệu 34 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 34 2.1.2 Dụng cụ hoá chất 34 2.1.2.1 Dụng cụ 34 Đại học bách khoa Hà Nội vi Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh 2.1.2.2 Hóa chất 35 2.1.3 Môi trường 36 2.2.1 Thu nhận mẫu 36 2.2.2 Phương pháp phân lập XK [10] 36 2.2.3 Chọn chủng VSV 37 2.2.4 Phương pháp giữ giống 37 2.2.5 Phương pháp phân loại XK 38 2.2.5.1 Quan sát đặc điểm hình thái XK 38 2.2.5.2 Đặc điểm ni cấy 38 2.2.5.3 Đặc điểm sinh lý - sinh hoá 38 2.2.6 Phương pháp xác định hoạt lực enzim ngoại bào (xenlulaza, amylaza) phương pháp khuếch tán thạch 39 2.2.7 Nghiên cứu ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy lên sinh trưởng phát triển sinh tổng hợp enzim XK 39 2.2.7.1 Nhiệt độ 39 2.2.7.2 pH môi trường 40 2.2.7.3 Nguồn cacbon 40 2.2.7.4 Nguồn nitơ 40 2.2.8 Phương pháp xác định nitơ tổng số 41 2.2.8.1 Phá mẫu 41 2.2.8.2.Cất mẫu: 41 2.2.9 Phương pháp xác định photpho tổng số 42 2.2.10 Xác định độ ẩm 43 2.3 Nghiên cứu thử nghiệm xử lý chất thải từ bã dứa 43 Đại học bách khoa Hà Nội vii Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh 2.3.1 Thử nghiệm phịng thí nghiệm (bình lên men lít) 43 2.3.2 Thử nghiệm qui mô pilot 44 Phần III Kết thảo luận 45 3.1 Phân lập tuyển chọn chủng XK ưa nhiệt, chịu axit sinh tổng hợp xenlulaza 45 3.2 Một số đặc điểm phân loại chủng XK tuyển chọn 47 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng sinh tổng hợp xenlulaza chủng XK tuyển chọn 50 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng 50 3.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh tổng hợp xenlulaza 52 3.4 Ảnh hưởng pH lên sinh trưởng sinh hoạt tính enzim chủng XK tuyển chọn 53 3.4.1 Ảnh hưởng pH lên sinh trưởng chủng XK tuyển chọn 53 3.4.2 Ảnh hưởng pH lên hoạt tính enzim chủng XK 54 3.5 Ảnh hưởng nguồn cacbon lên sinh trưởng sinh enzim chủng XK tuyển chọn 57 3.6 Ảnh hưởng nguồn nitơ lên sinh trưởng sinh tổng hợp enzim chủng XK tuyển chọn 61 3.7 Ứng dụng chủng XK tuyển chọn để xử lý bã dứa điều kiện phịng thí nghiệm 66 3.7.1 Nghiên cứu biến động số nhóm VSV qúa trình xử lý bã ủ dứa điều kiện phịng thí nghiệm 66 3.7.2 Sự thay đổi thể tích trình ủ 70 3.7.3 Hiệu phân huỷ bã dứa qui mơ phịng thí nghiệm 71 Đại học bách khoa Hà Nội viii Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh ủ, bã dứa phân huỷ tốt có màu đen hơn, dứa lại mềm có mùi hơi XK, cịn mẫu ĐC có màu sáng hơn, cịn lại cứng dai Điều chứng tỏ rằng, chủng XK bổ sung vào phân huỷ xenluloza tốt chủng VSV có sẵn tự nhiên Kết phân tích khả phân huỷ bã dứa mẫu thí nghiệm trình bày bảng 3.19 Bảng 3.19 Khả phân giải bã dứa chủng XK tuyển chọn điều kiện phòng thí nghiệm Mẫu thí nghiệm Khối lượng chất Khối lượng chất sau Tỷ lệ trước ủ 30 ngày ủ phân Bã dứa tươi(g) Bã dứa khô tuyệt đối (g) Bã dứa lại sau phân huỷ (g) Bã dứa bị phân Tỷ lệ phân huỷ (%) huỷ (g) huỷ so với đối chứng (%) ĐC 3000 1037,46 397,56 639,9 61,73 100 TN1 3000 1037,46 227,65 809,81 78,05 126,55 TN2 3000 1037,46 322,73 714,73 68,9 111,7 TN3 3000 1037,46 303,25 734,31 70,77 114,75 TN4 3000 1037,46 138,64 898,82 85,67 139,0 Qua bảng 3.19 cho thấy việc bổ sung chủng XK tuyển chọn vào trình xử lý bã dứa cho hiệu tốt Sau 30 ngày ủ, mẫu thí nghiệm TN4 bổ sung 10% dịch giống chủng XK tuyển chọn lượng bã dứa bị phân huỷ 85,67%, mẫu đối chứng (ĐC) khơng bổ sung thêm VSV phân huỷ có 61,73%, tức tỷ lệ phân huỷ chủng XK tuyển chọn tăng 39,0% so với đối chứng Việc bổ sung thêm chế phẩm Đại học bách khoa Hà Nội 74 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh Biomicromix có làm tăng hiệu phân huỷ bã dứa so với không bổ sung VSV, không tốt bổ sung chủng XK tuyển chọn Từ kết cho thấy, sử dụng chủng XK tuyển chọn bổ sung vào trình xử lý bã dứa cho hiệu tốt bổ sung 10% Nếu sử dụng chế phẩm Biomicromix để xử lý bã dứa không mang lại hiệu cao 3.8 Ứng dụng chủng XK tuyển chọn để xử lý bã dứa qui mô Pilot (55kg) Từ kết nghiên cứu lựa chọn TN4 (bổ sung chủng XK tuyển chọn với nồng độ 10%) để xử lý bã dứa qui mơ pilot Cách bố trí thí nghiệm sau: Bã dứa lấy từ Công ty Thực phẩm xuất Đồng Giao - Mẫu đối chứng (ĐC) sử dụng 55 kg bã dứa không bổ sung VSV - Mẫu thí nghiệm (TN) sử dụng 55 kg bã dứa + 10% dịch giống hỗn hợp chủng XK tuyển chọn Bã dứa cho vào thùng nhựa 60lít, dùng giấy báo đậy lên trên, ni điều tự nhiên (không khống chế nhiệt độ) 3.8.1 Nghiên cứu biến động số nhóm VSV ủ xử lý Kết nghiên cứu thực Pilot Viện Công nghệ môi trường kết nghiên cứu trình bày bảng 3.20 Đại học bách khoa Hà Nội 75 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh Bảng 3.20 Sự biến động số nhóm VSV q trình xử lý bã dứa qui mơ pilot (55kg/thùng) Thí nghiêm Đối chứng Mẫu ủ Nhóm VSV Số lượng VSV, (CFU/g), kiểm tra 450C Môi trường 12 18 24 30 nuôi kiểm (ngày ngày tra đầu) MPA 4,2.106 1,8.107 1,2.108 2,4.108 5,3.108 5,6.108 Gauze I 1,5.102 1,8.103 1,2.104 8,6.104 2,6.105 3,4.105 Czapek 1,0.102 1.2.103 3,0.103 4,5.104 5,8.104 6,1.104 Vi khuẩn Xạ khuẩn Nấm mốc Tổng VSV Xenluloza 1,1.102 Xen Vi khuẩn MPA 4,2.106 Xạ khuẩn Gauze I 4,0.104 Nấm mốc Czapek 1,0.102 Tổng VSV Xenluloza 4,3.104 Xen 1,2.103 5,4.103 5,3.104 8,2.104 2,4.105 3,8.107 4,5.107 5,5.107 6,7.107 6,5.107 5,6.105 3,1.107 7,7.107 1,3.108 1,7.108 5,1.102 7,1.102 2,2.103 3,4.103 4,2.103 6,7.106 3,5.107 8,9.107 2,2.108 3,1.108 Kết bảng 3.20 cho thấy, mẫu thí nghiệm bổ sung chủng XK tuyển chọn, số lượng chủng XK mơi trường Gause tổng VSV có khả phân giải xenluloza cao nhiều lần so với mẫu đối chứng Đồng thời mật độ VSV phân giải xenluloza tăng thời gian ủ tăng 3.8.2 Khả phân huỷ bã dứa chủng XK tuyển chọn qui mô pilot Khả phân huỷ bã dứa chủng XK tuyển chọn so với đối chứng sau 30 ngày ủ trình bày bảng 3.21 Đại học bách khoa Hà Nội 76 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh Bảng 3.21 Khả phân giải bã dứa chủng XK tuyển chọn qui mô pilot Khối lượng chất ngày đầu (kg) Mẫu ủ ĐC ố TN Bã dứa tươi 55 55 Khối lượng chất ngày kết thúc (kg) Bã dứa khô tuyệt đối Mùn ướt 9,02 9,02 48,7 45,8 Bã dứa lại sau phân huỷ Bã dứa 4,3 2,8 4,72 6,22 bị phân Tỷ lệ phân huỷ (%) Tỷ lệ phân huỷ TN/ĐC (%) 52,33 68,95 100 131,8 huỷ Chất lượng mùn sau ủ phân tích Phịng phân tích Đất - Viện Địa Lý- Viện KH&CN Việt Nam Kết phân tích trình bày bảng 3.22: Bảng 3.22 Kết phân tích thành phần mùn sau xử lý Mẫu ủ pH mùn ĐC TN TN/ĐC (%) 7,51 7,78 Tỷ lệ phân huỷ (%) 52,33 68,95 - 131,8 Tổng Tổng hữu cơ, K (%) (%) Tổng N, (%) Tổng P, (%) Axit humic, (%) 20,93 21,21 5,75 6,05 0,6 0,77 0,34 0,36 4,03 4,28 101,34 105 128,33 105,88 106,20 Từ kết thu bảng 3.21 bảng 3.22 cho thấy, sau 30 ngày ủ, mẫu TN bổ sung hỗn hợp chủng XK tuyển chọn vào trình xử lý bã dứa cho kết tốt mẫu ĐC Tốc độ phân huỷ cao (tăng 31,8%) hàm lượng axit humic cao Việc sử dụng chủng XK tuyển chọn thúc đẩy nhanh trình phân huỷ bã dứa so với q trình phân huỷ VSV có sẵn tự nhiên Vì vậy, chúng hồn tồn ứng dụng để xử lý bã dứa làm phân bón hữu cơ, làm môi trường Đại học bách khoa Hà Nội 77 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh PHẦN IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận 1- Từ mẫu đất bã dứa Công ty thực phẩm Đồng giao tuyển chủng XK ưa nhiệt sinh tổng hợp xenlulaza cao 2- Kết nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng XK tuyển chọn cho thấy chúng thuộc chi Streptomyces Chúng sinh trưởng phát triển dải nhiệt độ từ 25 - 600C, nhiệt độ sinh trưởng tốt 450C - 500C Chúng sinh trưởng sinh tổng hợp xenlulaza amylaza mơi trường có giá trị pH ban đầu từ 3,0 - 9,0 Nhưng tốt pH từ 4,5-5,0 3- Tám chủng XK tuyển chọn sinh trưởng phát triển tốt môi trường có nguồn cacbon glucoza chúng phát triển tốt mơi trường có tinh bột sacaroza Chúng sinh trưởng phát triển yếu môi trường có nguồn cacbon CMC-Na xenluloza Các chủng XK tuyển chọn sinh tổng hợp xenlulaza cao mơi trường có nguồn cacbon xeluloza CMC-Na, cịn amylaza mơi trường có tinh bột Các chủng XK tuyển chọn sinh trưởng tốt môi trường có nguồn nitơ bột đậu tương KNO sinh tổng hợp xenlulaza amylaza cao môi trường KNO Sử dụng hỗn hợp chủng XK tuyển chọn để bổ sung vào trình ủ xử lý bã thải dứa với liều lượng 10% cho hiệu phân huỷ bã dứa tốt nhất, tốc độ phân huỷ tăng 39% so với đối chứng điều kiện phịng thí nghiệm 31,8% điều kiện ủ tự nhiên (pilot) Chất lượng mùn thu mẫu bổ sung chủng XK tuyển chọn tốt mẫu đối chứng (không bổ sung VSV) Đại học bách khoa Hà Nội 78 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh 4.2 Kiến nghÞ: Các kết nghiên cứu thu cho thấy, sử dụng chủng XK để xử lý bã thải dứa qui mô nhỏ cho kết khả quan Tuy nhiên, để triển khai ứng dụng chúng vảo thực tế chúng tơi cần phải tiếp tục nghiên cứu: - Định tên đến lồi chủng XK tuyển chọn - Tính đối kháng chủng XK loài VSV gây bệnh - Kiểm tra độc tính chủng XK trồng động thực vật - Nghiên cứu qui trình nhân giống sản xuất chế phẩm VSV từ chủng XK tuyển chọn để áp dụng vào qui mô xử lý bã thải rắn cho sở sản xuất chế dứa Đại học bách khoa Hà Nội 79 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh TÀI LIỆU THAM KHẢO A – T ài liệu tiếng Việt Vũ Thị Thanh Bình Nghiên cứu xạ khuẩn ưa nhiệt phân giải xenluloza khả ứng dụng chăn ni, luận văn phó tiến sĩ sinh học, trường ĐHSPHNI, 1991 Tăng Thị Chính Nghiên cứu vi sinh vật phân giải xenluloza phân huỷ rác thải hiếu khí ứng dụng, Viện CNSH, luận án tiến sĩ, HN, 2001 3.Tăng Thị Chính, Lê Thanh Xuân, Phan Tuyết Minh, Lý Kim Bảng, Lê Gia Hy (1999) Nghiên cứu sản xuất enzym xenlulaza số chủng vi khuẩn ưa nhiệt phân lập từ bể ủ rác thải Kỷ yếu Viện Công nghệ sinh học 1998, Nxb KHKT, tr 277-285 Hoàng Kim Cơ, Trần Hữu Uyển, Lương Đức Phẩm, Lý Kim Bảng, Dương Đức Hồng (2001) Kỹ thuật môi trường Nxb Khoa học kỹ thuật, tr 267-313 Nguyễn Thị Phương Chi (1997) Giáo trình cao học vi sinh vật học đại cương, Trung tâm Khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia-Viện sinh thái tài nguyên sinh vật, Hà Nội Nguyễn Thị Phương Chi, Lý Kim Bảng, Tăng Thị Chính, Lê Gia Hy, Phạm Thanh Hà, Hồ Kim Anh, Phan Tuyết Minh, Lê Thanh Xuân, Nguyễn Thị Quỳnh Mai Sử dụng công nghệ vi sinh sản xuất phân bón vi sinh Kỷ yếu hội thảo sinh học Hà Nội tháng 7/2001 Tập 2, tr 69-76 Nguyễn Ngọc Điệp Kiểm tra khả phân huỷ dầu mỏ số chủng XK phân lập từ mẫu đất nước nhiễm dầu vùng biển địa bàn HN, luận văn tốt nghiệp cử nhân sinh học, ĐHKHTN, HN-1997 Đại học bách khoa Hà Nội 80 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh Quách Đĩnh, Nguyễn Văn Tiếp, Nguyễn Văn Thoa (1996) Công nghệ sau thu hoạch chế biến rau quả, Nxb Khoa Học Kỹ Thuật Hà Nội Nguyễn Lân Dũng cộng (1985) Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật, Nxb Khoa học Kỹ thuật Hà Nội 10 Nguyễn Lân Dũng (1983) Thực tập vi sinh vật học, Nxb Đại học trung học chuyên nghiệp 11 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (1997) Vi sinh vật học, Nxb Giáo dục 12 Vũ Thị Minh Đức (2001) Thực tập vi sinh vật học, Nxb Đại học quốc gia, Hà Nội 13 Phan Huy Đường (2003) Sản xuất, chế biến tiêu thụ dứa Việt Nam nay, Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nơng thôn, (4), tr 400-405 14 Egorov, N.X., (1983) Thực tập vi sinh vật học Nxb Mir Moxkova KHKT Hà Nội (Nguyễn Lân Dũng dịch) 15.Vũ Công Hậu (2000) Trồng ăn Quả Việt Nam, Nxb Nông Nghiệp 16.Lê Gia Hy, Phạm Kim Dung, Tăng Thị Chính, Bạch Mai Hoa, Phí Quyết Tiến Nghiên cứu sản xuất enzym kiềm từ vi sinh vật ưa kiềm phân lập Việt Nam (2000), Báo cáo khoa học Hội nghị sinh học Quốc gia, Chương trình NCCB sinh học, Nxb ĐHQGHN, tr 98-102 17 Nguyễn Đình Huyên, Hà Ái Quốc, Lâm Thị Kim Châu, Lê Thị Thanh Mai (1994) Bromelin - nghiên cứu sản xuất ứng dụng, Trường Đại học tổng hợp thành phố Hồ Chí Minh Đại học bách khoa Hà Nội 81 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh 18 Lê Gia Hy, Phạm Kim Dung, Tăng Thị Chính (1999) Nghiên cứu sản xuất enzym xenlulaza chịu kiềm từ vi sinh vật ưa kiềm phân lập Việt Nam Tạp chí khoa học Cơng nghệ, tập XXXVI, số 2, tr 19-24 19 Đoàn Văn Hưng, Báo cáo tốt nghiệp (2005) "Nghiên cứu vài giải pháp lên men bã dứa vi sinh vật làm thức ăn cho bị sữa", Trường Đại học Nơng nghiệp I - Hà Nội 20 Nguyễn Xuân Thành, Nguyễn Như Thành, Dương Đức Tiến Vi sinh vật học nông nghiệp Nxb ĐHSP-2003 21 Lê Mai Hương, Phạm Văn Ty (1993) Tìm hiểu khả sinh kháng sinh đặc điểm phân loại số chủng Micromonospora phân lập Việt Nam, Tạp chí di truyền học ứng dụng, 93 (1), tr 7-10 22 Nguyễn Đức Lượng (1996) Nghiên cứu tính chất số vi sinh vật có khả tổng hợp xenluloza cao ứng dụng chúng công nghệ xử lý c ất thải hữu cơ, Luận án PTS KH-KT, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội 23 Nguyễn Đức Lượng, Đặng Vũ Bích Hạnh (1999) Một số tính chất enzym xenluloza xạ khuẩn Actinomyces griseus, Kỷ yếu Hội nghị Cơng nghệ sinh h ọc tồn quốc, Hà Nội, tr 580-584 24 Trần Hiếu Nhuệ (2001) Thoát nước xử lý nước thải công nghiệp, Nxb khoa học kỹ thuật 25 GS TS Lê Văn Nhương (1998) Nuôi cấy áp dụng CNSH sản xuất phân bón hữu vi sinh từ nguồn phế thải hữu rắn, trung tâm CNSHĐHBKHN, báo cáo tổng kết đề tài cấp nhà nước 26 Sổ tay phân tích Đất-Nước-Phân bón trồng I, Viện thổ nhưỡng nơng hố (1998), tr 100-130 Đại học bách khoa Hà Nội 82 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh 27 Lương Đức Phẩm (2004) Công nghệ vi sinh vật Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 28.Trần Thị Thanh (2001) Công nghệ vi sinh, Nxb Giáo dục 29 Trần Thế Tục (2000) Sổ tay người làm vườn, Nxb Nơng Nghiệp 30 TrÇn ThÕ Tơc (1992, 1993, 1994) Cây dứa nước ta trạng triển vọng phát triển đến năm 2000, Tạp chí Nông nghiƯp - C«ng nghiƯp thùc phÈm 31 Quy mơ sản xuất Nông nghiệp, Bộ Kế hoạch Đầu tư http://www.mpi.gov.vn/ttkt-xh.aspx?Lang=4&mabai=13412 32 Ngô Kế Sương, nguyễn Lân Dũng (1997) Sản xuất khí đốt (Biogas) kỹ thuật lên men kỵ khí, Nxb Nơng nghiệp, Tp Hồ Chí Minh 33 Trịnh Thị Thanh (1998) Đánh giá trạng chất thải rắn nguy hại kiến nghị công nghệ xử lý thành phố Hà Nội, Công nghệ môi trường, Nxb Nông nghiệp, tr 170-1905 B – Tài liệu tiếng Anh 34 Atlas R.M., Brown A.E., Miller W.L (1988) Experrimental microbiology, Fundamentals and Application, Macmillan Publishing Comp New York 35 Bellamy, W.D., (1974) Single cell proteins from cellulolytic wastes, Biotechnol Bioeng., 16, pp 869-880 36 Blanco, A., Diaz P., Zueco J., Parascandola P., Pastor F.I.J (1999) A multidomain xylanase from a Bacillus sp with a regon homologous to thermostabling domains of thermophylic enzymes, microbiol., 145, pp 21632170 37 Brock, T.D (1978) Thermophylic microorganisms and at high temperature, Springer-Verlag, New York, pp 64-84 Đại học bách khoa Hà Nội 83 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh 38 Chongrak, P (1993) Organic Waste recycling, John Wiley and Sons Chichester, New York, pp 64-84 39 Choppra, S and Mehta (1985) Influence of various nitrogen and cacbon sources on the production of pect-cellulo- and proteolytic enzymes by A niger, Fol Microbiol., 30, pp 117-125 40 Enari, T.M (1983) Microbiol enzymes and technology, Appl Sci LondonNew York, pp 183-223 41 Fergus, C.L (1969) The cellulolytic activity of thermophylic fungi and actinomycetes, Mycologia, 69, pp 120-134 42 Finstein, M.S., Miller F.C (1983) Composting ecosystem management for wastes treatment 43 Finstein, M S., Cirello J., Macgregor S T., and Miller F.C., (1983) Rational Approach to composting process control, Repost New Brunswick, VA 22161, Acc No PB82 136243 44 Hroiss, K Swardial, O Novak ( 1992), Anaerobic-aerobic treatment of waste paper Mill effluent, Wat, Sci Tech, 25 (1), pp 23-30 45 Mandel, M., Andreotti R and Roche C (1975) Measurement of saccharifying cellulase, Techn and Appl., New York, 21, pp 79-85 46 Manded, M., Andreotti R and Roche C (1975) Measurement of saccharifying cellulase, Biotech Bioeing, Symp., pp 35-54 47 Matseva, O V., Myasoedova N M., (1966) Seminar on microbitol degradation of lignocellulosis materials, Tbilisi, 74-72 Đại học bách khoa Hà Nội 84 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh 48 Reese, E.T., Siu R G H and Levison H.S (1950) The biological dieradation of soluble cellulose derivaties and its relationship to mechanism of cellulose hydrolysis, J Bact., pp 485-497 49 Schonbor, W (1996) Microbial degradation, Biotechnol (ed H.J Rehn and G.Ree), vol.8, VCH, pp 5-37, 362-398, 560-574 50 Shickates , S.et al (1990) Alkaline cellulase for laundry detergent; production by alkalophylic strains of Bacillus and some properties of crude enzymes culture medium C-Source effection CMC production in surfactant composition, J.Agric.Biol Chem, 51(1), pp, 91-96 51 Spirodonov, A.N and Wilson, D B (1998), regulation of invidual cellulases in Thermomonospora fusca, Bacterriology, 180 (4), pp 391-512 52 Romanelli, R.A and Huston C.W (1975) , Studies thermophylic cellulolytic Fungi, Appl Microbiol.,30 (1).pp 276-281 53 Rsenberg, S.L (1978) Cellulose and lignocellulose degradation by thermophilic and thermotolerances fungi, Mycologia, 70 (1) 54 Julia F Morton, Miami, FL (1987) Pineapple: Fruits of warm climates, pp 18-28 http://www.hort.purdue.edu/newcrop/morton/pineapple.html 55 Zsdriesche, M (1994) Composting, Germane-Vietnam workshop on solidwaste Treatment, Hanoi 12/1994 56 Waksman, S.A., Codon T.C and Hulpoi H (1939) Influence of temperature upon the microbiological population and decomposition processes in compost of stable nanure, Soil Sci., 47pp 83-114 Đại học bách khoa Hà Nội 85 Luận văn thạc sỹ-2007 Đào Thị Minh Hạnh PHẦN PHỤ LỤC M«i tr­êng Gause1 [14] M«i tr­êng ISP1 [14] Tinh bét tan : 20g Bacto-tripton : 5g K HPO : 0,5g Cao nÊm men : 3g MgSO 7H O : 0,5g pH : 4,5 KNO : 1g Nước cất : 1000 ml NaCl : 0,5g M«i tr­êng Glatin FeSO : 0,01g Gelatin : 120g N­íc m¸y : 1000ml N­íc cÊt : 1000ml pH : 4,5 pH : 4,5 Thạch : 30g Môi trường ISP4[10] M ụi trường MPA [10] Tinh bét tan : 10g Cao thịt : 3g K HPO : 1g Pepton : 5g (NH ) SO 7H O : 2g Nước : 1000ml MgSO 7H O : 1g Thạch : 30g CaCO : 2g pH : 4,5 M«i tr­êng ISP6[14] Bacto tripton : 15g Proteose pepton : 5g Amonium xitrat s¾t : 1g K HPO : 1g Na S O : 0,08g NaCl : 0,5g D2 vi l­ỵng :1ml Th¹ch :30g Đại học bách khoa Hà Nội 86 Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Thị Minh Hạnh Mơi trường Czapek M«i tr­êng xenluloza[10] (NH ) HPO : 15g NaNO :3,5g KH PO : 0,5g K HPO : 1,5g MgSO : 0,4g MgSO : 0,5g NaCl : 0,1g KCL : 0,5g FeSO : VÕt FeSO : VÕt MnSO : VÕt Đường kính : 30g Bét giÊy : 2g Nước : 1000ml Th¹ch : 30g Th¹ch : 30g N­íc cÊt : 1000ml pH : 4,5 pH : 4,5 M«i tr­êng ISP9 (Modified from Priham and Golieb, 1948) Nguån cacbon: D-glucoza, L-arabinoza, Saccaroza, D-xyloza, I-inositol, D-manitol, D-fructoza, Rhamnoza, Rafinoza, pha lo·ng 10% vµ trïng b»ng läc qua phin läc VK hc trïng Pasteur, chiếu tia UV Dung dịch muối vi lượng: CuSO : 0,064g FeSO 7H O : 0,11g MnCl 4H O : 0,79g ZnSO 7H O : 0,15g N­íc cÊt : 1000ml B¶o qu¶n nhiệt độ 3-5o-C Có thể sử dụng vòng tháng Môi trường thạch tối thiểu (môi trường C): Đại học bách khoa Hà Nội (NH ) SO : 2,64g KH PO 3H O : 2,38g K HPO : 5,65g MgSO 7H O : 1g D2 mi vi l­ỵng : 1ml Th¹ch : 15g N­íc cÊt : 1000ml pH : 4,5 87 Luận văn thạc sỹ - 2007 Đào Th Minh Hnh Môi trường hoàn thiện: sau làm nguội môi trường C xuống khoảng 60oC bổ sung nguồn cacbon đà trùng cho nồng độ đạt khoảng 1% Lắc chia vào hộp petri 25ml môi trường, cấy chủng XK nghiên cứu lên môi trường có nguồn cacbon môi trường nguồn cacbon để kiểm tra khả sử dụng loại đường chủng XK tuyển chọn i hc bách khoa Hà Nội 88 ... ĐÀO THỊ MINH HẠNH NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ƯA NHIỆT, CHỊU AXIT, SINH TỔNG HỢP XENLULAZA CAO ĐỂ NÂNG CAO HIỆU QUẢ XỬ LÝ Bà THẢI CHẾ BIÊN DỨA THÀNH PHÂN BÓN HỮU CƠ LUẬN VĂN THẠC... huỷ bã dứa thường xảy chậm Để giải vấn đề chọn đề tài: "Nghiên cứu tuyển chọn chủng xạ khuẩn ưa nhiệt, chịu axit sinh tổng hợp xenlulaza cao để nâng cao hiệu xử lý bã thải chế biến dứa thành phân. .. 3.1 Phân lập tuyển chọn chủng XK ưa nhiệt, chịu axit sinh tổng hợp xenlulaza 45 3.2 Một số đặc điểm phân loại chủng XK tuyển chọn 47 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng sinh tổng hợp xenlulaza