Thiết kế chế tạo máy đếm công thức bạch cầu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHẠM LÊ VÂN Đề tài: THIẾT KẾ CHẾ TẠO MÁY ĐẾM CÔNG THỨC BẠCH CẦU LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Chuyên ngành Kỹ thuật Y Sinh Hà Nội, 10/2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHẠM LÊ VÂN Đề tài: THIẾT KẾ CHẾ TẠO MÁY ĐẾM CÔNG THỨC BẠCH CẦU Chuyên ngành: Kỹ Thuật Y Sinh LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Chuyên ngành: Kỹ Thuật Y Sinh NGƢỜI HƢỚNG DẪN Tiến sĩ: NGUYỄN PHAN KIÊN Hà Nội, 10/2016 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH VẼ DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: CÁC PHƢƠNG PHÁP ĐẾM TẾ BÀO PHỔ BIẾN HIỆN NAY 1.1.Các phƣơng pháp đếm tế bào dùng máy phân tích huyết học 1.1.1.Đếm tế bào dùng kính hiển vi quang học 1.1.2.Phƣơng pháp xác định lƣợng huyết sắc tố 1.1.3.Đếm tế bào dùng máy phân tích huyết học tự động 1.2.Hiện trạng máy xét nghiệm huyết học Việt Nam 1.3.Yêu cầu thiết kế CHƢƠNG 2: LÝ THUYẾT LẬP CÔNG THỨC MÁU 10 2.1.Các thành phần chức máu 11 2.1.1.Chức chung máu 11 2.1.2.Các thành phần huyết tƣơng 12 2.1.3.Các thành phần huyết cầu 13 2.2.Lập công thức máu ý nghĩa 16 2.2.1.Khái niệm 16 2.2.2.Xét nghiệm lập công thức máu 16 2.2.3.Ý nghĩa lập công thức máu 18 CHƢƠNG THIẾT KẾ VÀ CHẾ TẠO MÁY ĐẾM CÔNG THỨC BẠCH CẦU 21 3.1 Giới thiệu phần mềm sử dụng đề tài 21 3.1.1 Giới thiệu phần mềm Solidworks 21 3.1.2 Phần mềm lập trình Code Vision 21 3.1.3 Phần mềm mô Proteus 23 3.1.4 Phần mềm thiết kế mạch Altium Designer .24 3.1.5 Giới thiệu phần mềm Corel Draw 26 3.2 Nguyên lý hoạt động máy 26 3.3 Chi tiết khối .27 3.3.1 Khối nguồn 27 3.3.2 Khối bàn phím 29 3.3.3 Khối vi xử lý 33 3.3.4 Khối hiển thị 34 3.3.5 Khối báo hiệu 35 3.3.6 Mô Protes 36 3.3.7 Sơ đồ mạch layout 36 3.3.8 Sơ đồ nguyên lý tổng thể 37 3.4 Thiết kế vỏ máy 37 3.5 Thiết kế market bàn phím lƣới in 39 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ PHƢƠNG HƢỚNG PHÁT TRIỂN .40 4.1 Thƣc nghiệm thực bệnh viện 40 4.2 Nâng cấp phiên .41 4.2.1 Nâng cấp hình 41 4.2.2 Nâng cấp phím bấm 42 4.2.3 Nâng cấp vỏ máy 43 4.2.4 Thiết kế catalog .44 KẾT LUẬN 47 BẢNG ĐỐI CHIẾU CÁC THUẬT NGỮ VIỆT ANH 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC 51 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tơi viết luận văn thân tự tìm tịi nghiên cứu chế tạo Các số liệu luận văn có thực, đƣợc trích dẫn nguồn gốc cụ thể rõ ràng Luận văn chƣa đƣợc thực hội đồng luận văn thạc sĩ nào, chƣa đƣợc công bố phƣơng tiện thông tin Tôi xin chịu trách nhiệm mà tơi cam đoan Học viên PHẠM LÊ VÂN DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT WBC White Blood Cell MCV Mean corpuscular volume MCH Mean corpuscular hemoglobin MCHC Mean corpuscular hemoglobin concentration RDW Red cell distribution width MPV Mean platelet volume PDW Platelet Dítribution Width RBC Red Blood Cell CBC Complete blood count DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1 Ƣu nhƣợc điểm máy lập công thức bạch cầu Difftote 18 Bảng Yêu cầu chức năng, phi chức máy đếm công thức bạch cầu .10 Bảng Các giá trị bình thƣờng hồng cầu .20 Bảng 2Các giá trị bình thƣờng bạch cầu 20 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1 Kính hiển vi Hình Nguyên lý xác định Hematocrit Hình Máy xét nghiệm huyết học 22 thông số CellDyn Ruby hãng Abbott Mỹ .7 Hình Viên sỏi để phục vụ lập công thức máu Hình Máy lập công thức bạch cầu hệ Hình Máy lập cơng thức bạch cầu Difftote18 đƣợc sử dụng phòng nghiên cứu bệnh viện Huyết học Truyền máu Trung ƣơng Hình Máy lập công thức bạch cầu Thái Lan Hình Tế bào hồng cầu 13 Hình 2 Các dạng tế bào bạch cầu 15 Hình Các dạng tế bào tiểu cầu 15 Hình Phần mềm vẽ thiết kế khí Solidworks 21 Hình Phần mềm Codevision .22 Hình 3 Phần mềm Proteus .24 Hình Phần mềm Altium .25 Hình Giới thiệu phần mềm Corel Draw .26 Hình Sơ đồ khối máy đếm công thức bạch cầu 27 Hình Adapter 12/1A 28 Hình Khối nguồn 28 Hình Khối bàn phím 29 Hình 10 Phím bấm thực tế 30 Hình 11 Q trình dội phím thực tế 31 Hình 12 Phƣơng pháp chống dội phím phần cứng 32 Hình 13 Khối vi xử lý 33 Hình 14 Hình ảnh Atmega16 thực tế 34 Hình 15 Khối hiển thị 34 Hình 16 Màn hình LCD 20 x .35 Hình 17 Khối báo hiệu 35 Hình 18 Mơ Protes .36 Hình 19 Sơ đồ mạch Lay out 36 Hình 20 Mô mạch in 3D 36 Hình 21 Sơ đồ khối tổng thể 37 Hình 22 Thiết kế vỏ máy .37 Hình 23 Mặt sau vỏ máy .38 Hình 24 Mặt chiếu ngang 38 Hình 25 Mặt chiếu đứng .38 Hình 26 Mặt chiếu cạnh 39 Hình 27 Market kiểu số 39 Hình 28 Market kiểu số 39 Hình 4.1 Sử dụng máy Bệnh viện Ung Bƣớu Hà Nội 40 Hình 4.2 Thử nghiệm Khoa Xét nghiệm Bệnh viện Ung Bƣớu Hà Nội 41 Hình 4.3 Màn hình LCD 40 x 42 Hình 4.4 Bàn phím chức năng- phi chức (tiếng Việt) 42 Hình 4.5 Bàn phím nâng cấp……………………………………………………….43 Hình 4.5 Vỏ máy phiên nâng cấp .44 Hình 4.6 Catalog .45 Hình 4.7 Catalog .46 Hình 4.8 Máy đếm cơng thức bạch cầu sử dụng BV Y học cổ truyền TW 47 MỞ ĐẦU Ngành y nói chung dịch vụ chăm sóc sức khỏe nói riêng - điều cần thiết xuyên suốt quãng đời ngƣời, phải cần đến chăm sóc y tế Trong y tế, trang thiết bị y tế, dù thô sơ hay đại, phƣơng tiện hỗ trợ đắc lực cho bác sĩ nhân viên y tế việc nghiên cứu, chẩn đoán điều trị cho ngƣời bệnh Ở Việt Nam trang thiết bị y tế hầu hết đƣợc nhập từ nƣớc với giá thành cao, kèm chi phí trì hoạt động khơng nhỏ… Tất điều khiến việc trang bị trang thiết bị y tế đại sở y tế ngồi cơng lập gặp nhiều khó khăn nguồn vốn đầu tƣ, việc sử dụng vận hành, trì hoạt động gây tốn kém.Vì vây việc đẩy mạnh nghiên cứu ứng dụng khoa học kỹ thuật để sáng chế, chế tạo trang thiết bị y tế sản xuất nƣớc cần thiết Đây chủ trƣơng đƣợc Chính phủ, Bộ Ngành liên quan dành nhiều quan tâm khuyến khích trọng phát triển nhiều năm gần Thiết bị xét nghiệm số chủng loại trang thiết bị y tế cần phải có đƣợc sử dụng rộng rãi thƣờng xuyên sở y tế, với vai trò quan trọng xác định số hóa sinh, huyết học làm sở giúp bác sĩ chẩn đoán bệnh tình trạng sức khỏe bệnh nhân xác Một số kỹ thuật xét nghiệm huyết học phải kể đến xét nghiệm đếm - lập công thức bạch cầu để kiểm tra định lƣợng thành phần máu Hiện có thiết bị xét nghiệm huyết học đại tiên tiến, tự động gần nhƣ hoàn toàn để thực kỹ thuật xét nghiệm này, giúp giảm thiểu đƣợc nhân công.Tuy nhiên thiết bị đƣợc nhập từ nƣớc với chi phí cao, có thiết bị lại có nhiều chức nằm nhu cầu sử dụng thực tế, gây lãng phí Trong với thao tác đơn giản, ngƣời kỹ thuật viên hồn tồn thực đƣợc xét nghiệm với kính hiển vi.Việc sử dụng kính hiển vi để làm xét nghiệm cần thiết trƣờng hợp thiết bị gặp cố trục trặc, thiếu hóa chất, nhiễu hiệu chỉnh hóa chất… Các kỹ thuật viên xét nghiệm dùng kính hiển vi để soi, họ thƣờng sử dụng viên bi có màu sắc khác để thống kê tế bào máu sau đƣa kết PHỤ LỤC A HƢỚNG DẪN SỬ DỤNG MÁY ĐẾM CƠNG THỨC BẠCH CẦU Quy trình hƣớng dẫn sử dụng máy lập cơng thức bạch cầu  Bàn phím  Phím chức  Phím UNDO: Dùng để trở lại thao tác trƣớc, lùi tối đa 10 lần 51  Phím LIGHT: Bật tắt đèn hình  Phím SHIFT: Giữ phím SHIFT+ REDO(CLEAR): Xóa hình trang thái ban đầu  Phím REDO(CLEAR):Trở lại thao tác vừa thực hiện( phím có tác dụng sau bấm phím UNDO 52  Phím CANCEL: Hủy bỏ lần đếm  Phím MODE: Hiển thị phần trăm tế bào bạch cầu  Bàn phím tế bào bạch cầu 53  Số lƣợng tế bào tăng lên tƣơng ứng với số lần bấm Khi tổng tế bào tới 98 máy báo hiệu tiếng chng.Tiếp theo bấm phím MODE bàn phím hiển thị phần trăm tế bào  Tổng số tế bào đếm vƣợt 100 B HƢỚNG DẪN SỬ DỤNG KÍNH HIỂN VI ĐỂ LẬP CƠNG THỨC MÁU Một số dụng cụ thí nghiệm máu  Kim chích máu Muốn chích máu mao mạch ( đầu ngón tay) để làm xét nghiệm, ta dùng đinh ghim cắt đầu,kim tiêm, kim chích vacxin để chọc nhanh qua da Ta dùng kim chích riêng, có lị xo bấm cho kim bật chọc qua da (Hình 23) Trong tất trƣờng hợp phải ý đảm bảo vơ trùng kim chích vùng chích thật tốt( công 700 ); ý điều chỉnh mức độ nơng sâu lúc chích ( ngón tay để có cữ điều chỉnh vỏ kim chích bấm) Ngày nay, ngƣời ta thƣờng dùng kim chích đƣợc khử trùng lần bỏ Kim chích máu dùng lần 54  Ống trộn Ống trộn dụng cụ dùng để pha loãng máu dùng đếm hồng cầu, bạch cầu tiểu cầu Ống trộn ống mao quản có chỗ bầu phình ra, bầu có hạt thủy tinh có màu để trộn máu với dung dịch trộn ( ống trộn hồng cầu có hạt màu đổ, cịn ống trọn bạch cầu hạt có màu trắng xanh nhƣng khơng có hạt màu đỏ) Ở ống mao quản có vạch 0.5 Phần chỗ phình có vạch 101 ống trộn hồng cầu vạch 101 thể tích máu trộn với dung dịch phần bầu phình(100 phần, có phần máu), từ vạch trở xuống có dung dịch khơng có máu Máu đƣợc pha lỗng 100 lần Nếu hút đến vạch 0.5 máu đƣợc pha lỗng 200 lần lƣợng máu nửa lƣợng máu Ta suy luận nhƣ đối ống trộn bạch cầu: pha lỗng máu 10 lần 20 lần tùy theo ý muốn Ống trộn bạch cầu, hồng cầu  Phòng đếm Phòng đếm giống nhƣ lam kính dày có khắc rãnh sâu làm chỗ dung dịch, khơng cho tràn lên bờ bên ( bờ dán kính) Bờ thấp bờ bên 0,1 mm ( xác tới 0,001mm) Vì vậy, để đảm bảo độ cao cần phải dán chặt kính lên hai bờ bên (Hình ) Ở bờ có khắc hai lƣới đếm ( cách rãnh ngang) Phòng đếm vạch kẻ ngang bờ theo kích thƣớc định Có nhiều cách kẻ lƣới đếm để bố trí đếm khác tùy tác giả Trong lƣới 55 cócác vuông lớn ô vuông nhỏ Tùy lƣới đếm bố trí khác nhƣng kích thƣớc ô vuông nhỏ 1/400 mm2 ( Hình ) Biết đƣợc diện tích đếm, chiều cao ô đếm (0,1mm) số ô đếm, ta suy đƣợc thể tích trộn nằm vùng đếm biết đƣợc độ pha lỗng máu ta tính đƣợc số lƣợng tế bào máu có 1mm3 máu chƣa pha lỗng Khi dùng phịng đếm ống trộn phải ý: - Không đƣợc làm xây xƣớc ( dùng gạc mềm để lau, rửa ete,cồn, ngầm vào acid sulfocromic, không dùng que cứng chọc) - Không đƣợc để máu đông bám đọng ống trộn, phòng đếm Phòng đếm Lưới đếm Goriaev 56 Lưới đếm Neubauer Đếm số lƣợng hồng cầu  Nguyên tắc Pha loãng máu theo tỷ lệ định cho vào phịng đếm biết rõ kích thƣớc Đếm số lƣợng hồng cầu dƣới kính hiển vi với số nhật định, từ tính số lƣợng hồng cầu 1mm3 máy chƣa pha loãng  Phƣơng tiện cần thiết  Bộ dụng cụ để chích máu: Bơng, cồn 700 , kim chích máu  Phịng đếm huyết cầu Neubauer cải tiến  Ống trộn hồng cầu  Kính hiển vi vật kính 40, thị kính 10 15  Dung dịch pha loãng máu: dung dịch nƣớc muối đẳng trƣơng hay dung dịch Marcano dung dịch Hayem Cách làm: 57 Chuẩn bị phòng đếm Dùng khăn mềm lau phịng đếm kính Dán kính lên phịng đếm Đặt phịng đếm lên kính hiển vi để kiểm tra phịng đếm, quan sát tồn cảnh phịng đếm xác định vị trí đếm hồng cầu (là vng lớn có chia thành ô vuông nhỏ, ô bốn góc ô khu vực đếm hồng cầu.) Sát trùng chích máu Ngƣời lớn lấy đầu ngón tay đeo nhẫn, trẻ em lấy đầu ngón tay cái, ngón chân gót chân Lấy máu vào buổi sáng, chƣa ăn, nghỉ ngơi 15 phút sau lấy máu Dùng tẩm cồn 700 sát trùng nơi chích máu, để khơ Dùng kim tiệt trùng chích sâu độ đến 1,5 mm Lau bỏ giọt Để giọt máu chảy thật tròn, đƣờng kính khoảng 2mm Chú ý khơng nên bỏ năn nhƣ dịch kẻ chảy hịa lẫn với máu làm sai lệch kết Pha loãng máu Hút máu vào ống trộn hồng cầu đến vạch 0.5 dùng bơng kho lau máu dính đầu ống Hút tiếp dung dịch pha loãng hồng cầu đến vạch 101 Nhƣ tỷ lệ pha loãng 1/200 Chú ý tránh hút mạnh có bọt Dùng ngón tay ngón tay trỏ bị kín hay đầu ống, lắc vài phút để máu dụng dịch trộn Cho máu vào phòng đếm Lắc ống trộn thật đều, bỏ vài giọt đầu giọt nằm phần mao quản ống trộn khơng có màu Nghiêng ống trộn đặt vào nơi tiếp xúc kinh phòng đếm máu phủ vừa hết phịng đếm, rỏ q nhiều kính lên, chiều cao buồn đếm tăng gây sai số Cách đếm Sau cho máu vào phòng đếm, chờ vài phút để hồng cầu lắng xuống ổn định Dùng vật kính 10 kiểm tra xem máu dàn chƣa, xác định ô cần đếm dùng vật kính 40 để đếm Đếm số hồng cầu có 80 vng nhỏ vng lớn Mỗi ô vuông lớn ( ô chia làm 16 vng 58 nhỏ) góc ô Đếm số lƣợng hồng cầu nằm gọn ô vuông nhỏ, Với hồng cầu nằm cạnh đếm cạnh liên tiếp Ví dụ cạnh với cạnh trái cạnh dƣới với cạnh phải Cách tính kết Giả sử hồng cầu ta đếm đƣợc 80 ô nhỏ A Thể tích vng 1/400 mm3 , tỷ lệ pha loãng máu 1/200 Nhƣ số lƣợng hồng cầu mm3 (N) là: N= Nói cách khác, sau đếm 80 ô vuông nhỏ đƣợc A hồng cầu ta việc thêm vào bốn số đƣợc số lƣợng hồng cầu 1mm3 máu Từ tính đƣợc số lƣợng hồng cầu có lít máu Ghi chú: Đối với bệnh nhân bị thiếu máu nặng hút đếm đến vạch hút tiếp dụng dịch pha loãng 101 Nhƣ tỷ lệ pha loãng 1/100, kết A*5000 Nhận định kết quả: Số lƣợng hồng cầu ngƣời Việt nam trƣởng thành bình thƣờng là: Nam : 4,5-5,4 1012 /lit máu Nữ: 3,8-4,8 1012/lit máu Đếm số lƣợng bạch cầu: Nguyên tắc Pha loãng máu theo tỷ lệ định dung dịch có tác dụng phá hủy hồng cầu nhuộm sơ bạch cầu vào phòng dếm biết rõ kích thƣớc Đếm số bạch cầu dƣới kính hiển vi số định tính số lƣợng bạch cầu mm3 máu chƣa pha loãng Phƣơng tiện cần thiết  Bộ dụng cụ để chích máu  Phịng đếm Neubauer cải tiến  Ống trộn bạch cầu  Kính hiển vi  Dung dịch pha loãng máu: Dung dịch laxarua 59 Cách làm Chuẩn bị phòng đếm Lau phòng đếm kính dán kính lên phịng đếm, kiểm tra phịng đếm dƣới kính hiển vi Sát trùng, chích máu: làm tƣơng tự với đếm hồng cầu Pha loãng máu Hút máu vào ống trộn bạch cầu tới vạch 0.5;hút tiếp dung dịch Lazarus tới vạch 11, Nhƣ tỷ lệ pha lỗng 1/20 Dùng ngón ngón tay trỏ bịt chặt hai đầu ống,lắc trộn vài phút, để yên phút để phá hồng cầu nhuộm sơ bạch cầu Cho máu vào phòng đếm Lắc ống trộn, bỏ vài giọt đầu cho máu vào phòng đếm đƣợc dãn sẵn kính nhƣ hồng cầu Cách đếm Dùng vật kính hay 10 thị kính 15 để đếm bạch cầu khu vực khu vực gồm 16 ô lớn Không chia ô nhỏ Chúng ta đếm số bạch cầu 64 ô vuông lớn Diện tích vng lớn 1/16 mm3 thể tích 1.160 mm3 ( gấp 25 lần vng nhỏ) Cách tính kết Giả sử tổng số lƣợng bạch cầu đếm A số lƣợng bạch cầu mm3 (N) N= Từ tính số lƣợng bạch cầu có lít máu Nhận định kết Số lƣợng bạch cầu ngƣời Việt Nam trƣởng thành bình thƣờng 5*109 – *109 /lít máu Nếu dƣới 109/lit số lƣợng bạch cầu giảm, *109 tăng số lƣợng bạch cầu Nhận định công thức bạch cầu phổ thông Nguyên tắc 60 Trên tiêu máu ngoại vi đƣơc dàn mỏng nhuộm, dựa vào hình dáng, kích thƣớc bắt màu nhân hạt bào tƣơng nhận loại vừa đếm 100 bạch cầu để xác định công thức bạch cầu phổ thơng Phƣơng tiện  Phiến kính khơ  Lá kính  Máy lập cơng thức bạch cầu  Thuốc để cố định nhuộm tiêu + Dung dịch Giemsa gồm: Giemsa 7.6g Cồn methlic 750ml Glycerine 250ml + Nƣớc cất trung tính  Dầu Cedre ( dầu bả hƣơng)  Xelenen  Kính hiển vi ( vật kính 90 100) Cách làm  Kéo tiêu Chích máu đầu ngón tay bỏ giọt mấu đầu lấy giọt máu vừa phải chấm lên phiến kiến, dùng kính đặt lên giọt máu thành gốc 300 đến 450, chờ cho máu dàn khắp cạnh từ từ đẩy ngƣợc cho tay Nếu đẩy nhanh tiêu mỏng, đẩy chậm thiêu tiêu dầy, khố đọc Để khô tự nhiên cố định cồn tuyệt đối  Nhuộm tiêu Pha loãng ml dung dịch Giemsa vào 18 ml nƣớc cất, lắc trộn nhỏ khắc tiêu bản, để từ 15-20 phút, rửa dƣới vòi nƣớc cất, hong khô định công thức  Định công thức bạch cầu Nhỏ giọt dầu cedre vào phần tiêu bản, dùng vật kính dầu (vật kính 90) để nhận dạng đếm loại bạch cầu, 61 + Bạch cầu hạt trung tính: Đƣờng kính 10-15µm, nhân chƣa chia múi( nhân hình quê) chia nhiều múi tùy theo trƣởng thành tế bào Bào tƣơng có nhiều hạt nhỏ, mịn, bắt màu hồng tím + Bạch cầu hạt ƣa acid: nhân chia hai múi nhƣ hình mắt kính, bào tƣơng có hạt to, tròn bắt màu da cam + Bạch cầu hạt ƣa kiềm: nhân hình hoa thị, bào tƣơng có hạt to, nhỏ khơng nhau, nằm để lên nhân bắt màu xanh đen + Bạch cầu Lympho: Nhân to, tròn chiếm gần hết bào tƣơng, bào tƣơng dải màu xanh lơ bao quanh nhân, khơng có hạt + Bạch cầu mono: Đƣờng kính 20-25 µm, nhân to, màu tím đen, hình dạng nhân thay đổim thƣờng hình hạt đậu nằm lệch phía hình phật thủ Bào tƣơng màu tro bẩn, ngƣời ta thƣờng ví với màu da trời lúc có mƣa, có hạt bắt màu azua tập trung thành đám Cách đếm bạch cầu: đếm tiêu bản, đếm theo hình chữa chi đếm 100 bạch cầu  Nhận định kết quả: Công thức bạch cầu thông thƣờng ngƣời Việt Nam trƣởng thành nhƣ sau: Bạch cầu hạt trung tính: 60-70% Bạch cầu hạt ƣa acid : 1-4% Bạch cầu hạt ƣa bazơ: 0-0,5% Bạch cầu mono: 1-2% Bạch cầu lympho : 20-30% Đếm số lƣợng tiểu cầu theo phƣơng pháp FONIO: Nguyên tắc: Trên tiêu máu nhuộn, đếm số lƣợng tiểu cầu có 1000 hồng cầu vào số lƣợng hồng cầu có mm3 máu để tính số lƣợng tiểu cầu mm3 máu Phƣơng tiện cần thiết:  Bộ dụng cụ để chích máu  Phiến kính dán máu kéo máu  Dung dịch MgS04, 14% 62  Dung dịch nhuộn Giemsa Cách làm : Sát trung nhón tay đeo nhẫn để khơ Nhỏ giọt MgS04 14% lên chỗ vừa sát trung Dùng kim chích qua giọt MgS04, để máu chả tự nhiên hòa với dung dịch, lấy máu làm tiêu để định lƣợng số tiểu cầu Các đếm tính kết Tiểu cầu tiêu nhuộn Giesa màu đổ tím đƣờng kính 2-4 µm, đứng rời rạc xen kẽ với hồng cầu Dùng vật kính 40 để xem lƣớt qua tiêu lƣợt chọn chỗ hồng cầu tiểu cầu rải để đếm vật kính Đếm xem 1000 hồng cầu có tiểu cầu vào số lƣợng hồng cầu 1mm3 mà suy số lƣợng tiểu cầu mm3 máu Thí dụ: Ta đếm đƣợc 40 tiểu cầu 1000 hồng cầu: số lƣợng hồng cầu ngƣời 4.000.000/mm3 số lƣợng tiểu cầu mm3 (N) là: N= = 160.000/ mm3 Đếm số lƣợng tiểu cầu theo phƣơng pháp FIESSLY: Nguyên tắc Pha loãng máu theo tỷ lệ định dùng dịch đếm tiểu cầu cho vào phịng đếm để biết rõ kích thƣớc, đếm số lƣợng tiểu cầu số ô định, từ tính số lƣợng tiểu cầu mm3 máu chƣa pha loãng Phƣơng tiện cần thiết  Bộ dụng cụ để chích máu  Phịng đếm huyết cầu Neubauer cải tiến  Ống trộn bạch cầu  Kính hiển vi, tốt kính hiển vi đối pha Nếu kính hiển vi quang học phải sáng  Dung dịch tiểu cầu Cách làm Chuẩn bị dụng cụ: nhƣ đếm bạch cầu Sát trùng, chích máu: nhƣ đếm bạch cầu nhƣng khơng bỏ giọt máu đầu 63 Pha loãng máu: hút máu vào ống trộn bạch cầu đến vạch 0,5 hút tiếp dung dịch pha loãng máu đến vạch 11, lắc đến để yên 15-30 phút để phá hồng cầu nhuộm tiểu cầu Cho máu vào phòng đếm: nhƣ đếm bạch cầu Cách đồ: Tiểu càu nhƣ hạt nhỏ bóng, màu xanh nhạt, nhìn kỹ thấy tiểu cầu có di động nhẹ Dùng vật kính 40 đếm số tiểu cầu 80 ô vuông nhỏ ( giống nhƣ đếm hồng cầu) Cách tính: Giả sử đếm đƣợc A tiểu cầu 80 ô vuông nhỏ số lƣợng tiểu cầu mm3 máu (N) là: N= = A*1000 Nhƣ vậy, số lƣợng tiểu cầu đếm đƣợc 80 ô vuông nhỏ thêm vào số khơng ta có số lƣợng tiểu cầu mm3 máu từ 150.000 đến 300.000 Dƣới 150.000 giảm; 350.000 tăng số lƣợng tiểu cầu Chú ý: Muốn cho xét nghiệm thật xác, nên đếm phƣơng pháp lấy số trung bình cộng Nếu muốn đánh giá tiểu cầu mặt chất lƣợng phải làm xét nghiệm mặt chất lƣợng làm xét nghiệm độ tập trung, hình thể, kích thƣớc, cấu trúc phải quan sát tiêu thƣờng khơng có MgS04 Đếm hồng cầu mạng lƣới -Nguyên tắc: Nhuộm hồng cầu mạng lƣới phƣơng pháp nhuộm sống, sau đếm số lƣợng 1000 hồng cầu tính tỷ lệ phần trăm - Phƣơng tiện: + Bộ dụng cụ để chích máu + Phiến kính làm tiêu + Kính hiển vi + Dung dịch nhuộm xanh cresyl:  Xanh cresul anh 1g  Cồn tuyệt đối 100ml Cách làm: Làm tiêu 64 Nhỏ giọt xanh cresyl lên lam kính dàn nhƣ tiêu công thức bạch cầu Nhƣ mặt lam kính có lớp thuốc nhuộm mỏng, để khô tự nhiên đánh dấu mặt có thuốc Chích máu nhỏ giọt máu lên lam kính dàn sẵn xanh cresyl dàn dần máu để lên lớp thuốc để khô tự nhiên Cố định cồn tuyệt đối đem nhuộm Giemsa Sau nhuộm, hồng cầu lƣới hồng cầu có hạt nhỏ mạng màu xanh thẫm, phân bố mặt hồng cầu, số hạt nhiều hay tùy theo mức độ thƣởng thành tế bào Cách đếm tính kết Đếm số lƣợng hồng cầu lƣới gặp 1000 hồng cầu tính tỷ lệ phần trăm Thí dụ: Ta đếm 1000 hồng cầu gặp 10 hồng cầu lƣới tỷ lệ hồng cầu lƣới 1% Nhận định kết quả: Bình thƣờng tỷ lệ hồng cầu lƣới máu ngoại vị là: Nam: 0,7 ±0,21% Nữ: 0,9 ±0,25% 65 ... thiết kế máy đếm công thức bạch cầu Chƣơng 2: Lý thuyết lập công thức máu Giới thiệu lý thuyết lập công thức máu ứng dụng lập công thức máu, công thức bạch cầu Chƣơng 3 :Thiết kế chế tạo máy đếm. .. nhƣợc điểm máy lập công thức bạch cầu Difftote 18, dựa nhu cầu thực tế ngƣời sử dụng, tơi nhóm bạn cộng tác viên định thiết kế máy đếm công thức bạch cầu dựa theo yêu cầu chức sau: Yêu cầu chức... Hình Máy lập cơng thức bạch cầu Thái Lan 1.3 Yêu cầu thiết kế Qua tham khảo nhu cầu thực tế ngƣời sử dụng, từ khảo sát thiết bị xét nghiệm huyết học đại thiết bị Máy lập công thức Bạch cầu Difftone