Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Phân lập, tuyển chọn và nghiên cứu ứng dụng các chủng vi sinh vật chịu mặn bản địa có khả năng cố định đạm để sản xuất phân vi sinh cải tạo đất trồng

Mục tiêu của đề tài là tuyển chon được bộ chủng vi sinh vật chịu mặn bản địa Trường Sa, có hoạt tính cố định đạm, phân giải phosphate và đồng thời sinh chất kích thích sinh trưởng IAA( Indole -3- axetic axit); xây dựng được quy trình lên men thu nhận sinh khối các chủng vi sinh vật đã được tuyển chọn nhằm sản xuất phân vi sinh.

BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Trần Thị Nguyệt PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÁC CHỦNG VI SINH VẬT CHỊU MẶN BẢN ĐỊA CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM ĐỂ SẢN XUẤT PHÂN VI SINH CẢI TẠO ĐẤT TRỒNG RAU TRÊN QUẦN ĐẢO TRƯỜNG SA LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM Hà Nội - 2020 BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Trần Thị Nguyệt PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÁC CHỦNG VI SINH VẬT CHỊU MẶN BẢN ĐỊA CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM ĐỂ SẢN XUẤT PHÂN VI SINH CẢI TẠO ĐẤT TRỒNG RAU TRÊN QUẦN ĐẢO TRƯỜNG SA Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hướng dẫn 1: TS Lê Đức Anh Hướng dẫn 2: TS Nguyễn Ngọc Lan Hà Nội - 2020 i Lời cam đoan Luận văn cơng trình nghiên cứu cá nhân tôi, thực hướng dẫn khoa học TS Lê Đức Anh, TS Nguyễn Ngọc Lan Ths Vũ Văn Dũng Các số liệu, kết luận nghiên cứu trình bày luận văn hồn tồn trung thực Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan Học viên Trần Thị Nguyệt ii LỜI CẢM ƠN Trước hết, em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Lê Đức Anh, TS Nguyễn Ngọc Lan ThS Vũ Văn Dũng giao đề tài tận tình hướng dẫn em suốt trình thực Luận văn Em xin chân thành cảm ơn Thầy, cô, cán Học viện Khoa học công nghệ, Viện Hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam giảng dạy, hướng dẫn giúp đỡ em hoàn thành học phần Chương trình đào tạo Em xin cảm ơn Đảng ủy, Lãnh đạo Viện Hóa học- vật liệu, Viện Khoa học công nghệ quân sự, Bộ Quốc phịng tập thể phịng Hóa học hợp chất nhiên cho phép, tạo điều kiện thời gian, thiết bị nghiên cứu, động viên tinh thần cho em q trình học tập nghiên cứu Tơi xin cảm ơn đề tài ĐTĐL.CN - 11/19- C giúp đỡ phần kinh phí để tơi hồn thành Luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến gia đinh, người thân, bạn bè hết lòng ủng hộ tinh thần vật chất suốt trình học tập thực Luận văn iii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng vii Danh mục hình vẽ, đồ thị ix MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 ĐIỀU KIỆN TỰ NHIÊN VÀ TÌNH HÌNH TRỒNG RAU TRÊN QUẦN ĐẢO TRƯỜNG SA 1.1.1 Điều kiện tự nhiên quần đảo Trường Sa 1.1.2 Tình hình trồng rau quần đảo Trường Sa 1.2 TỔNG QUAN VỀ VI SINH VẬT CỐ ĐINH NITƠ 1.3 PHƯƠNG PHÁP LÊN MEN THU SINH KHỐI VI SINH VẬT 1.3.1 Phương pháp lên men chìm 10 1.3.2 Phương pháp lên men bề mặt 10 1.4 CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG TỐI QUÁ TRÌNH LÊN MEN THU SINH KHỐI CỦA VI SINH VẬT CHỤI MẶN CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM 10 1.4.1 Ảnh hưởng nguồn cacbon 10 1.4.2 Ảnh hưởng nguồn nitơ 11 1.4.3 Các nguyên tố khoáng 11 1.4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình sinh trưởng vi sinh vật chịu mặn có khả cố định đạm 11 1.4.5 Ảnh hưởng pH đến phát triển vi sinh vật chụi mặn có khả cố định đạm 12 1.4.6 Ảnh hưởng nồng độ muối đến phát triển vi sinh vật chụi mặn có khả cố định đạm 12 iv 1.5 THỰC TRẠNG NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG VI KHUẨN CHỊU MẶN VÀO CÁC CHẾ PHẨM VI SINH TRÊN THẾ GIỚI 13 1.6 TÌNH HÌNH SỬ DỤNG VÀ SẢN XUẤT PHÂN VI SINH CỐ ĐỊNH ĐẠM TRONG NƯỚC 16 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 18 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 18 2.1.1 Vật liệu 18 2.1.2 Hóa chất môi trường 19 2.1.3 Dụng cụ thiết bị 20 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGUYÊN CỨU 20 2.2.1 Phương pháp lấy mẫu 20 2.2.2 Phương pháp phân lập chủng vi sinh vật chịu mặn bảo quản 20 2.2.3 Khảo sát hình thái khuẩn lạc đặc điểm tế bào vi khuẩn 21 2.2.4 Phương pháp xác định khả sinh trưởng vi khuẩn 21 2.2.5 Tách chiết DNA tổng số từ vi khuẩn 22 2.2.6 Khuếch đại gen 16S rRNA 23 2.2.7 Sàng lọc chủng vi khuẩn có khả cố định nitơ 23 2.2.8 Sàng lọc chủng có khả phân giải phosphate khó tan 24 2.2.9 Phương pháp xác định khả sinh IAA chủng chọn lọc 25 2.2.10 Phương pháp xác định đường tổng phenol acid sulfuric 26 2.2.11 Phương pháp định lượng protein phương pháp Lowry 27 2.2.12 Phương pháp lên men 28 2.2.13 Nghiên cứu số yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men 29 2.2.13.1 Ảnh hưởng NaCl lên sinh trưởng, cố định nitơ sinh tổng hợp IAA 29 2.2.13.2 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng carbon đến sinh trưởng chủng vi sinh vật chịu mặn có khả cố định đạm 29 v 2.2.13.3 Ảnh hưởng nhiệt độ 30 2.2.14.4 Ảnh hưởng pH 30 2.2.13.5 Ảnh hưởng thời gian nhân sinh khối 30 2.2.14 Sản xuất thử nghiệm chế phẩm phân vi sinh chịu mặn cố định đạm 31 2.2.15 Thử nghiệm, đánh giá chế phẩm vi sinh 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VI SINH VẬT CHỊU MẶN CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM TỪ MẪU ĐẤT LẤY TẠI CÁC ĐẢO THUỘC QUẦN ĐẢO TRƯỜNG SA 33 3.2 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM, HÒA TAN PHOSPHATE VÀ SINH IAA CỦA CÁC CHỦNG CHỌN LỌC 34 3.3 GIẢI TRÌNH TỰ GEN 16S RRNA CỦA HAI CHỦNG CHỌN LỌC N4.1 VÀ STT 3.1 37 3.4 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA NACL LÊN KHẢ NĂNG SINH IAA CỦA CHỦNG N 4.1 VÀ KHẢ NĂNG SINH AMONI CỦA CHỦNG STT3 3.1 38 3.5 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG CỦA HAI CHỦNG N4.1 VÀ STT 3.1 40 3.5.1 Kết đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 40 3.5.2 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 41 3.5.3 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 42 3.5.4 Ảnh hưởng nồng độ oxi hòa tan ban đầu đến sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 43 3.5.5 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 43 vi 3.5.6 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng hai chủng N4.1 STT 3.1 46 3.6 ĐỘNG HỌC QUÁ TRÌNH LÊN MEN NHÂN SINH KHỐI 48 3.6.1 Động học trình lên men nhân sinh khối chủng N4.1 48 3.6.2 Động học trình lên men nhân sinh khối chủng STT3.3.1 49 3.7 QUY TRÌNH KỸ THUẬT NHÂN SINH KHỐI CHỦNG CỐ ĐỊNH ĐẠM 50 3.8 SẢN XUẤT PHÂN HỮU CƠ VI SINH TỪ HAI CHỦNG VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM CHỊU MẶN N4.1 VÀ STT3 3.1 52 3.9 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM PHÂN VI SINH CỐ CHỊU MẶN CỐ ĐỊNH ĐẠM 54 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 57 4.1 KẾT LUẬN 57 4.2 KIẾN NGHỊ 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 PHỤ LỤC vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Kí hiêu vị trí lấy mẫu đất quần đảo Trường Sa 18 Bảng 2.2: Kết phép đo OD 24 Bảng 3.1: Hình thái khuẩn lạc chủng cố định đạm 33 Bảng 3.2 Kết giải trình tự gen 16S rRNA chủng N 4.1 STT3 3.1 37 Bảng 3.3: Môi trường lên mem sinh khối hai chủng N4.1 STT3 3.1 51 Bảng 3.4: Kết sau 30 ngày thử nghiệm trồng rau với giá thể đất cổ đảo Trường Sa phân vi sinh cố định đạm chịu mặn qui mơ phịng thí nghiệm 54 viii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT STT Viết tắt Phần viết đầy đủ ATP Adensine triphosphate ( lượng tế bào) N nitơ NH3 Amoniac VSV Vi sinh vật IAA 3-indole aceticacid (chất kích thích sinh trưởng) 36 15.6763 36 15.8203 36 15.8738 SE(N= 36) 0.102290 5%LSD 70DF 0.288488 - MEANS FOR EFFECT CHUNG - CHUNG NOS AMONI 14.5933 17.5596 3 16.9575 13.1253 16.6026 15.2984 17.2037 15.6101 13.4878 10 25.3477 11 14.7523 12 12.0995 13 14.0103 14 17.1475 15 12.4785 16 17.9021 17 12.7056 18 17.7935 19 13.8142 20 15.3412 21 13.6309 22 15.4196 23 13.9642 24 18.2145 25 15.4192 26 19.5634 27 17.6757 28 14.7525 29 17.2173 30 16.8049 31 14.2331 32 15.9134 33 17.8424 34 16.8141 35 13.1755 36 13.9734 SE(N= 3) 5%LSD 70DF 0.354343 0.999353 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE AMONI 11/10/20 10:55 :PAGE Ket qua amoni F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE |CHUNG | GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NHACLAI (N= 108) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | AMONI 108 15.790 2.5302 0.61374 | | | | | | | 3.9 0.3757 0.0000 Kết phân tích hàm lượng PO43- sinh phần mền IRISTART BALANCED ANOVA FOR VARIATE PHOTPHAT FILE PP1 11/10/20 8:56 :PAGE Ket qua pp VARIATE V003 PHOTPHAT mg/L LN SOURCE OF VARIATION SQUARES DF SUMS OF MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ================================================================ ============= NHACLAI CHUNG * RESIDUAL 1.47266 736331 1.66 0.196 35 521389 14896.8 ****** 0.000 70 31.1246 444638 * TOTAL (CORRECTED) 107 521422 4873.10 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PP1 11/10/20 8:56 :PAGE Ket qua pp MEANS FOR EFFECT NHACLAI - NHACLAI NOS PHOTPHAT 36 137.127 36 136.854 36 136.917 SE(N= 36) 0.111135 5%LSD 70DF 0.313435 Kết phân tích hàm lượng Photphat phần mền IRISTART MEANS FOR EFFECT CHUNG - CHUNG NOS PHOTPHAT 117.231 307.818 3 275.206 80.1625 57.2597 62.0619 65.0171 141.114 86.6270 10 282.875 11 133.023 12 64.8691 13 103.471 14 100.697 15 114.369 16 117.324 17 74.6277 18 106.611 19 101.070 20 94.7905 21 191.019 22 130.633 23 79.2153 24 242.026 25 127.220 26 295.021 27 136.018 28 96.0637 29 152.353 30 87.3841 31 203.121 32 153.412 33 97.1913 34 86.5260 35 231.425 36 SE(N= 3) 5%LSD 70DF 135.934 0.384984 1.08577 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PP1 11/10/20 8:56 :PAGE Ket qua pp F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE |CHUNG | GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NHACLAI (N= 108) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | PHOTPHAT 108 136.97 69.808 0.66681 | | | | | | | 0.5 0.1964 0.000 Kết phân tích hàm lượng IAA sinh phần mền IRISTART BALANCED ANOVA FOR VARIATE IAA FILE IAA 11/10/20 11:15 :PAGE Ket qua IAA VARIATE V003 IAA mg/L LN SOURCE OF VARIATION SQUARES DF SUMS OF SQUARES MEAN LN F RATIO PROB ER ================================================================ ============= NHACLAI 523683E-01 261842E-01 0.71 0.497 CHUNG 35 7099.75 * RESIDUAL 70 2.56644 202.850 ****** 0.000 366635E-01 * TOTAL (CORRECTED) 107 7102.37 66.3773 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE IAA 11/10/20 11:15 :PAGE Ket qua IAA MEANS FOR EFFECT NHACLAI - NHACLAI NOS IAA 36 11.5200 36 11.5417 36 11.4881 SE(N= 36) 5%LSD 70DF 0.319129E-01 0.900038E-01 - MEANS FOR EFFECT CHUNG - CHUNG NOS 0.560000 0.203333 3 0.560000 4.57333 6.53000 11.2433 3.56000 23.1733 15.2467 10 19.6167 11 33.4900 12 2.55333 13 6.28667 14 5.64000 15 4.86333 16 17 5.61333 18 5.90333 19 18.9700 20 18.5433 21 17.6667 22 23.2467 23 15.5800 24 18.6433 25 14.5933 26 17.0700 27 13.6567 IAA 0.000000 28 16.5567 29 12.6367 30 13.6900 31 17.0800 32 33 14.5133 34 17.6967 35 36 SE(N= 3) 0.000000 0.000000 14.8367 0.110549 5%LSD 70DF 0.311782 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE IAA 11/10/20 11:15 :PAGE Ket qua IAA F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE |CHUNG | GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NHACLAI (N= 108) SD/MEAN | IAA NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | 108 11.517 8.1472 0.19148 | | | | | | | 1.7 0.4975 0.0000 Bảng : Hình thái khuẩn lạc chủng vi khuẩn phân lập từ mẫu đất lấy Trường Sa KÍ HIỆU HÌNH THÁI KHUẨN LẠC HÌNH DẠNG TẾ BÁO GRAM AB1 2.1 Màu trắng, tròn, viền nhăn, khơ Hình que phân nhánh que Gram dương AB3 1.3 Trịn,trắng đục, đường kính mm, viền trơn, bề mặt bóng Hình que Gram âm AB3 2.2 Trịn,bề mặt bóng, sinh sắc tố, đường kính mm Hình que Gram dương AB4 2.2 Tròn,bề mặt nhăn, trắng, viền nhăn Hình que Gram dương N N4.1 Trịn, viền nhăn, màu ngà vàng, đường kính mm,,lồi bóng, Hình que Gram dương NY1 2.3 Xạ khuẩn, trắng, trịn, đường kính1 mm Que phân nhánh Gram âm NY1 6.1 Viền nhăn, trắng đục, đường kính mm, bề mặt nhăn Hình que Gram dương NY3 1.2 Trịn,trắng đục, đường kính mm, viền trơn, bề Hình que Gram âm TT ĐẢO An Bang Nam yết mặt bóng NY3 2.2 Trịn, nhỏ, đường kính mm, màu trắng đục Hình trịn Gram âm 10 Trịn, vàng ngà, đường NY3 3.1 kính mm, viền trơn, lồi Hình cầu Gram âm 11 NY5 2.1 trắng vàng, đường kính 1,5 mm, trịn 12 NY5 5.1 Trắng đục, đường kính mm, trịn, Hinh ưue Gram dương 13 TSL1 5.1 Tròn, trắng trong, bề mặt lồi, đường kính mm Hình que Gram dương 14 TSL3 4.1 Trịn, trắng trong, đường kính mm, bề mặt lồi, viền trơn Hình cầu Gram âm TSL3 4.2 Trịn,viền khơng đều, trắng đục, mặt nhăn Hình que Gram dương 16 TSL4 2.2 Tròn suốt, nhầy , đường kính2 mm, viền trơn Hình trịn Gram dương 17 TSL4 2.3 Trong suốt, đường kính mm, nhầy, viền trơn trịn Hình trịn Gram âm K1 2.2 Trắng sữa, viền nhăn, đường kính mm, bề mặt lồi lõm Hình que Gram dương 15 18 Trường Sa lớn Sơn ca K1 8.3 Trắng đục, trịn, viên trơn, đường kính mm, lồi bóng Hình que Gram dương STĐ4 1.1 Trịn, nhỏ, lồi, đường kính mm, bóng, trắng sửa Hình ovan Gram âm 21 STT5 4.1 Trắng sữa, viền nhăn, đường kính mm, bề mặt lồi lõm Hình que Gram dương 22 STT5 3.1 Trắng đục, đường kính mm, trịn, Hình cầu Gram dương 23 STT1 4.2 Trịn, bề mặt phẳng, đường kính mm, viền nhăn, trắng sửa Hình que Gram dương 24 STT1 5.1 Trịn, lồi, bóng đường kính mm, trắng đục Hình que Gram Âm 25 STT2 2.1 Trịn, lồi, bóng, trắng nâu, đường kính 1,5 mm, viền trơn Hình que Gram âm 26 STT2 6.2 Trịn, bề mặt phẳng, đường kính mm, viền nhăn, trắng sửa Hình que Gram dương 27 STT3 1.3 Trắng đục, đường kính mm, trịn, bề mặt khuẩn lạc Hình que Gram âm 28 STT3 Trắng đục, viền trơn trịn Hình que Gram 19 20 Sinh Tồn Đông Sinh Tồn Tây 3.1 dương 29 STT4 1.2 Trắng đục, đường kính mm,trịn, lồi, bề mặt bóng Hình que Gram dương 30 STT4 5.1 Trịn, nhỏ, đường kính mm, màu trắng đục Hình cầu Gram âm 31 STT5 1.2 Trịn, vàng ngà, đường kính mm, viền trơn, lồi Hình trịn Gram dương 32 PVA1 2.1 Vàng ngà, trịn, bóng trơn, đường kính mm Hình trịn Gram âm PVA1 4.1 Trắng sữa, đường kính mm, viên nhăn, bề mặt phẳng Hình que Gram dương 34 ĐL1 1.1 Màu nâu nhạt, đường kính 1,5 mm, viên trơn, bề mặt phẳng Hình cầu Gram dương 35 Trong suốt, nhầy, đường ĐL1 9.1 kính mm, bề mặt bóng, viền trơn Hình trịn Gram dương Màu trắng, đường kính ĐL1 5.1 mm, viền trơn, bề mặt bóng Hình trịn Gram dương Phan Vinh A 33 36 Đá Lát Kết giải trình tự gen 16S rDNA chủng N4.1 Sequences 16S rDNA of N 4.1: ATACATGCAAGTCGAGCGAACTGATTAGAAGCTTGCTTCTATGAC GTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCTGTAA GACTGGGATAACTTCGGGAAACCGAAGCTAATACCGGATAGGATC TTCTCCTTCATGGGAGATGATTGAAAGATGGTTTCGGCTATCACTT ACAGATGGGCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCA CACCAAGGCAACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCA CACTGGGACTGAGACACGGCACAGACACCTACGGGAGGCAGCAGT AGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGC GTGAGTGATGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTAGGGAA GAACAAGTACAAGAGTAACTGCTTGTACCTTGACGGTACCTAACC AGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTA GGTGGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAG GCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGA GGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGAAAAGCG GAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACA CCAGTGGCGAAGGCGGCTTTTTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCG CGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCGGGTAGTCCAC GCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGAGGGTTTCCGCTCTTTAG TGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCG CAAGACTGAAACTCAAAGGAAGTGACGGGGGCCCGCACGAGCGG TGGAGCATGTGGTTTATTTCGAAGCAACGCGAGAACCATACCAGG TCTTGACATCCTCTGACAACTCTAGAGATAGAGCG This sequence is similarity 99,8 % with Bacillus aryabhattai MH26107 Kết giải trình tự gen 16S rDNA chủng STT3 3.1 Sequence 16S rDNA of STT3 3.1: ATGCAAGTCGAGCGAACTGATTAGAAGCTTGCTTCTATGACGTTAG CGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCTGTAAGACTG GGATAACTTCGGGAAACCGAAGCTAATACCGGATAGGATCTTCTC CTTCATGGGAGATGATTGAAAGATGGTTTCGGCTATCACTTACAGA TGGGCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCA AGGCAACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTG GGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGG AATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGA GTGATGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTAGGGAAGAA CAAGTACGAGAGTAACTGCTCGTACCTTGACGGTACCTAACCAGA AAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGT GGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGCG GTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGT CATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGAAAAGCGGAATT CCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGT GGCGAAGGCGGCTTTTTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCGCGAAA GCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGT AAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGAGGGTTTCCGCCCTTTAGTGCTG CAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGA CTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGC ATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTG ACATCCTCTGACAACTCTAGAGATAGAGCG This sequence is similarity 100 % with Bacillus megaterium IAM 13418T ... vi sinh vật chụi mặn có khả cố định đạm 12 iv 1.5 THỰC TRẠNG NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG VI KHUẨN CHỊU MẶN VÀO CÁC CHẾ PHẨM VI SINH TRÊN THẾ GIỚI 13 1.6 TÌNH HÌNH SỬ DỤNG VÀ SẢN XUẤT PHÂN... pháp sử dụng chủng vi sinh vật hữu ích để sản xuất phân bón vi sinh cải tạo đất nơng nghiệp nhiễm mặn tăng khả chịu mặn trồng Phân bón VSV sản xuất cách phối trộn sinh khối VSV mật độ định vào chất... 3.8 SẢN XUẤT PHÂN HỮU CƠ VI SINH TỪ HAI CHỦNG VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM CHỊU MẶN N4.1 VÀ STT3 3.1 52 3.9 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM PHÂN VI SINH CỐ CHỊU MẶN CỐ ĐỊNH ĐẠM 54 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ