Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu và hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus

Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu và hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu và hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu và hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHẠM QUANG HUY Nghiên cứu tổng hợp, thu nhận chất màu hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hà Nội, 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHẠM QUANG HUY Nghiên cứu tổng hợp, thu nhận chất màu hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THỊ HOÀI TÂM Hà Nội, 2011 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học MỤC LỤC MỤC LỤC T 37T DANH MỤC HÌNH T 37T DANH MỤC BẢNG T 37T MỞ ĐẦU T 37T I TỔNG QUAN 10 T 37T 1.1.Nấm mốc đỏ Monascus 10 T T 1.1.1 Giới thiệu nấm mốc Monascus 10 T T 1.1.1.1 Đặc điểm hình thái Monascus 10 37T T 1.1.1.2 Vòng đời Monascus 11 37T T 1.1.2 Monascus tổng hợp chất màu 13 T T 1.1.3 Cholesterol tổng hợp hoạt chất Monacolin từ nấm T Monascus có tác dụng giảm cholesterol 16 T T 1.1.3.1 Khái quát cholesterol 16 37T T T 1.1.3.2 Sự tổng hợp hoạt chất Monacolin tác dụng giảm 37T cholesterol 19 37T T 1.1.4 Các chất trao đổi chất bậc khác tổng hợp từ Monascus .21 T T T 1.1.4.1 γ-aminobutyric acid (GABA) acetylcholin 21 37T T 1.1.4.2 Các chất flavonoids .23 37T T T 1.1.4.3 Citrinin 24 37T 37T T 1.2 Tổng hợp chất màu từ Monascus yếu tố ảnh hưởng 25 T T T 1.2.1 Ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy 25 T T T 1.2.2 Ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy .29 T T T 1.3.Tổng hợp Monacolin từ Monascus yếu tố ảnh hưởng 30 T T 1.3.1 Ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy 30 T T 1.3.2 Ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy .31 T Phạm Quang Huy T CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 1.4 ỨNG DỤNG CỦA MONASCUS 33 T T T 1.4.1 Ứng dụng công nghiệp thực phẩm .33 T T T 1.4.2 Ứng dụng y học 35 T T T PHẦN II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 38 T T T 2.1 Nguyên liệu 38 T 37T T 2.1.1 Vi sinh vật, môi trường giữ giống, nhân giống, lên men .38 T T T 2.1.2 Hóa chất .39 T 37T T 2.1.3 Thiết bị 39 T 37T T 2.2 Phương pháp .40 T 37T 2.2.1 Nuôi cấy theo phương pháp bề mặt 40 T T 2.2.2 Ni cấy theo phương pháp chìm 42 T T 2.2.3 Phương pháp tách chiết, phân tích chất màu Monacolin 43 T T T 2.2.4 Phương pháp phân tích 43 T T T 2.2.4.1 Phân tích chất màu phương pháp quang phổ 43 37T T T 2.2.4.2 Phương pháp phân tích Monacolin 45 37T T T 2.2.4.3 Phương pháp phân tích citrinin 45 37T T T 2.2.4.4 Phương pháp sắc kí mỏng (TLC) 45 37T T T 2.2.4.5 Phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) 47 37T T T 2.2.4.6 Phương pháp xác định độ ẩm, đường tổng protein .49 PHẦN ІІІ KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 50 T T 3.1 Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu từ chủng Monascus T theo phương pháp lên men chìm 50 T 3.1.1 Kết lựa chọn thành phần môi trường nuôi cấy điều kiện T lên men thích hợp để tổng hợp hỗn hợp chất màu đỏ, da cam, vàng quy mơ phịng thí nghiệm máy lắc với chủng nấm Monascus purpureus 5085 50 37T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 3.1.2 Kết lựa chọn thành phần môi trường nuôi cấy điều kiện T lên men thích hợp để tổng hợp chất màu vàng quy mơ phịng thí nghiệm máy lắc với chủng nấm M purpureus MT-2010 60 T T 3.1.3 Nghiên cứu tổng hợp hỗn hợp chất màu tạo Monacolin từ T Monascus purpureus 5085 nuôi cấy theo phương pháp lên men chìm thiết bị lên men 14 lít 65 T T 3.1.4 Nghiên cứu lựa chọn điều kiện tách chiết để thu nhận dịch chiết T chất màu từ sinh khối Monascus purpureus 5085 69 T T 3.1.5 Nghiên cứu lựa chọn điều kiện cô đặc sấy phun để thu nhận T chất màu Monascus dạng bột 73 T 3.2 Nghiên cứu tổng hợp thu nhận hoạt chất Monacolin từ Monascus T purpureus 5085 theo phương pháp lên men bề mặt 76 T T 3.2.1 Lựa chọn thành phần môi trường nuôi cấy thích hợp để nâng cao T hiệu suất tổng hợp Monacolin 76 T T 3.2.2 Lựa chọn điều kiện ni cấy thích hợp để nâng cao hiệu suất tổng T hợp Monacolin .78 37T T 3.2.3 Quy trình sản xuất chế phẩm có tác dụng giảm cholesterol FiriT Monacholes từ nấm mốc Monascus purpureus quy mô xưởng thực nghiệm 83 37T KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .86 T 37T T I KẾT LUẬN: 86 T 37T T II ĐỀ NGHỊ: 88 T 37T T TÀI LIỆU THAM KHẢO 89 T 37T T I, TIẾNG VIỆT: 89 T 37T T II, TIẾNG ANH: .90 T 37T PHỤ LỤC 96 Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Quả thể có ćng nhỏ với nang bào tử M purpureus 10 T T T Hình 1.2: Vịng đời Monascus anka 12 T T T Hình 1.3 : Cấu trúc hóa học chất màu Monascus .14 T T T Hình 1.4: Cấu trúc hố học cholesterol 16 T T T Hình 1.5: Con đường chuyển hoá HMG-CoA reductase sinh tổng hợp T cholesterol 18 37T T Hình 1.6: Cơng thức cấu tạo monacolin 19 T T T Hình 1.7: Hai dạng tồn Monacolin 21 T T T Hình 1.8: Cấu trúc flavonoids 24 T T T Hình 1.9: Cơng thức hóa học Citrinin 24 T T Hình 2.1: Sơ đồ tổng quát trình lên men bề mặt 41 T T T Hình 3.1 Chủng Monascus purpureus 5085 sử dụng nghiên cứu 59 T T Hình 3.2 Lên men Monascus purpureus 5085 quy mơ phịng thí nghiệm T T máy lắc 59 T 37T Hình 3.3 Chủng M purpureus MT – 2010 sử dụng nghiên cứu 65 T T T Hình 3.4 Lên men M purpureus MT – 2010 quy mơ phịng thí nghiệm T T máy lắc 65 T 37T T Hình 3.5 Đồ thị thay đổi thơng số q trình ni cấy Monascus T purpureus 5085 thiết bị 14 lít .67 T Hình 3.6 Nuôi cấy Monascus purpureus 5085 theo phương pháp lên men T chìm thiết bị 14 lít 68 Hình 3.7 Thu nhận bột màu đỏ cam từ M.purpureus 5085 75 T T Hình 3.8 Kết kiểm tra định tính Monacolin K TLC 75 T T Hình 3.9 Ni cấy Monascus purpureus 5085 quy mơ phịng thí nghiệm T T theo phương pháp lên men bề mặt .82 T T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học Hình 3.10 Kết kiểm tra định tính Monacolin K TLC 82 T T Hình 3.11 Kết kiểm tra định lượng Monacolin K HPLC 83 T T Hình 3.12: Quy trình sản xuất chế phẩm có tác dụng giảm cholesterol FiriT Monacholes từ nấm mốc đỏ Monascus quy mô xưởng thực nghiệm 84 T Hình 3.13 Ni cấy Monascus purpureus 5085 theo phương pháp lên men T bề mặt khay 85 37T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Ảnh hưởng nguồn cacbon đến khả tổng hợp chất màu T chủng M purpureus 5085 52 T T Bảng 3.2: Ảnh hưởng nồng độ tinh bột đến tổng hợp chất màu M T purpureus 5085 53 37T Bảng 3.3: Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn nitơ đến khả tổng hợp T chất màu M purpureus 5085 54 T Bảng 3.4: Ảnh hưởng nồng độ cao nấm men đến tổng hợp chất màu T M purpureus 5085 54 37T Bảng 3.5: Ảnh hưởng số vitamin axit amin đến tổng hợp chất T màu M purpureus 5085 55 37T Bảng 3.6: Ảnh hưởng hàm lượng vitamin Biotin đến tổng hợp chất T màu M purpureus 5085 56 37T Bảng 3.7 Ảnh hưởng pH môi trường đến phát triển sinh khối hệ sợi T tổng hợp chất màu M purpureus 5085 ni cấy chìm 57 T Bảng 3.8 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển sinh khối hệ sợi tổng T hợp chất màu M purpureus 5085 ni cấy chìm .58 T Bảng 3.9 Nghiên cứu lựa chọn nguồn cacbon thích hợp cho chủng đột biến T M purpureus MT-2010 tổng hợp màu vàng .61 T Bảng 3.10 Lựa chọn hàm lượng bột ngơ thích hợp để tổng hợp màu vàng 61 T T Bảng 3.11 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến khả tổng hợp màu vàng T Monascus purpureus MT – 2010 62 T Bảng 3.12 Ảnh hưởng tỷ lệ tiếp giống đến khả phát triển tổng T hợp màu vàng chủng nấm M purpureus MT – 2010 .63 T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học Bảng 3.13: Ảnh hưởng thời gian lên men đến tổng hợp màu vàng T chủng nấm M purpureus MT – 2010 .64 T Bảng 3.14 Các thông số nuôi cấy Monascus purpureus 5085 thiết bị T 66 T 14lít T Bảng 3.15 Kết lên men M.purpureus 5085 thiết bị 14 lít 68 T T Bảng 3.16: Lựa chọn dung môi tách chiết chất màu chủng nấm mốc M T purpureus 5085 69 37T Bảng 3.17: Ảnh hưởng nồng độ cồn đến trình tách chiết chất màu T sinh khối chủng nấm mốc M purpureus 5085 .70 T Bảng 3.18: Ảnh hưởng chế độ chiết đến trình tách chiết chất màu T nấm mốc M purpureus 5085 71 T Bảng 3.19: Ảnh hưởng số lần, tỷ lệ tách chiết chất màu M T purpureus 5085 72 37T Bảng 3.20: Ảnh hưởng nhiệt độ sấy phun tới sản phẩm dạng bột chủng T nấm mốc M purpureus 5085 74 T Bảng 3.21: Ảnh hưởng nguồn chất lên men tới chủng nấm mốc M T purpureus 5085 76 37T Bảng 3.22: Ảnh hưởng bổ sung dinh dưỡng nitơ, muối khoáng, T vitamin axit amin đến tổng hợp Monacolin K M purpureus 5085 môi trường gạo hấp 77 37T Bảng 3.23: Ảnh hưởng độ ẩm ban đầu môi trường gạo hấp đến T phát triển tổng hợp Monacolin K M purpureus 5085 78 T Bảng 3.24: Ảnh hưởng nhiệt độ lên men đến phát triển hiệu suất T tổng hợp Monacolin K Monascus purpureus 5085 80 T Bảng 3.25: Ảnh hưởng phương thức nhân giống đến tổng hợp T T Monacolin K Monascus purpureus 5085 81 T T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học MỞ ĐẦU Cuộc sống ngày phát triển, xã hội lên làm cho chất lượng sống người thay đổi Nhưng mặt trái thay đổi tác động xấu tới sức khỏe người, tăng nguy bệnh tật, tử vong Một bệnh mà nhiều người mắc phải bệnh tim mạch Nguyên nhân bệnh tình trạng rối loạn lipid máu hay xơ vữa động mạch (Cholesterol xấu hình thành thành mạch máu) làm giảm lượng máu lưu thông tới quan thể, tim phải làm việc cường độ cao Hậu mà thấy rõ bệnh cao huyết áp, tai biến mạch máu, thiếu máu, tim phình to….Trên giới, bệnh có xu hướng tăng nhanh gây khả tử vong cao Để phịng chữa bệnh có nhiều người phải tuân theo chế độ ăn uống, vận động khắt khe sử dụng thuốc, chế phẩm có tác dụng giảm mỡ máu Tuy có tác dụng chữa bệnh loại thuốc đại lại gây phản ứng phụ không mong muốn như: đau cơ, tiêu cơ, tăng men gan, rối loạn tiêu hố khơng định cho người suy gan, suy thận loét dày – tá tràng Vì loại thuốc ngày nay, sử dụng nhiều ưa chuộng giới chế phẩm chứa hợp chất Monacolin (được tổng hợp từ gạo mốc đỏ lên men Monascus) Do thuốc có nguồn gốc tự nhiên, vừa mang lại hiệu điều trị cao lại hạn chế tác dụng phụ khơng mong muốn Ngồi việc cung cấp Monacolin có tác dụng chữa bệnh rối loạn lipid máu, Monascus cung cấp màu đỏ tươi tự nhiên làm chất màu thực phẩm đồ uống Các sản phẩm trao đổi chất thứ cấp có giá trị kinh tế cao, chẳng hạn Monacolins K kiềm chế tổng hợp cholesterol, GABA (γT aminobutyric acid) làm giảm huyết áp, axit béo không bão hịa có 39T Phạm Quang Huy CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học Hình 3.12: Quy trình sản xuất chế phẩm có tác dụng giảm cholesterol FiriMonacholes từ nấm mốc đỏ Monascus quy mô xưởng thực nghiệm Gạo Xi Ngâm (Tỷ lệ gạo: nước 1: 1; Monascus purpureus Hấp trùng ( Nuôi MT PDA, ngày, 30oC) (121oC, 15 phút) Nhân giống cấp Lên men (72 giờ, 30oC) (26-30oC, ngày) Hấp kết thúc lên men (121oC, phút) Sấy (60oC, 24 – 36 giờ) Nghiền Phối trộn, đóng nang Chất bổ sung Bao gói Sản phẩm Firi-Monacholes Phạm Quang Huy 84 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học Hình 3.13 Nuôi cấy Monascus purpureus 5085 theo phương pháp lên men bề mặt khay Phạm Quang Huy 85 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ I KẾT LUẬN: Từ kết nghiên cứu rút số kết luận sau: 1, Nghiên cứu tổng hợp thu nhận chất màu từ chủng Monascus theo phương pháp lên men chìm A - Với chủng nấm mốc Monascus purpureus 5085 thu nhận hỗn hợp màu đỏ, da cam, vàng - Đã lựa chọn thành phần môi trường ni cấy thích hợp (g/l): Tinh bột tan 15, MgSO 7H O 4.8, KH PO 1.5, K HPO 1.5, NaCl 0.4, R R R R R R R R R R R R FeSO 7H O 0.01, ZnSO 7H O 0.01, Yeast extract 2, MSG (Natri R R R R R R R R glutamat) 7.6, Biotin 25mg/l Sau lên men chìm với mơi trường lựa chọn ta thấy khả tổng hợp sắc tố mầu vàng, da cam tốt - Đã lựa chọn điều kiện ni cấy tổng hợp chất màu thích hợp: pH môi trường lên men 5.0, tỷ lệ tiếp giống 10%, lắc 250 vòng/phút, 300C 7-8 ngày Với điều kiện lượng chất màu vàng, da cam thu P P nhiều - Áp dụng thành phần môi trường điều kiện lên men thu đươc vào nghiên cứu nuôi cấy thiết bị 14 lít Bước đầu nghiên cứu động học phát triển Monascus purpureus 5085 - Đã lựa chọn điều kiện tách chiết chất màu sau lên men Trích ly sinh khối ướt cồn 700C, lần chiết với tỷ lệ: 1:20ml, chiết P P động chế độ lắc 250 vòng/ phút, 30phút, nhiệt độ 300C thu lượng mầu P P nhanh nhiều Phạm Quang Huy 86 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học - Đã thu bột màu đỏ cam cách cô đặc dịch chiết 30 lần sấy phun với điều kiện tốc độ bơm dịch 2l/h, nhiệt độ đầu vào 1700C, đầu P P 800C tốc độ đầu quay 20000 vòng/phút P P B - Với chủng đột biến tạo màu vàng Monascus purpureus MT-2010: - Đã lựa chọn thành phần môi trường ni cấy thích hợp (g/l): Tinh bột ngơ 50, NH NO 2, K HPO 2, MgSO 0.8 Lắc 200 vòng/phút, R R R R R R R R R R 300C 7-10 ngày Khả tổng hợp sắc tố vàng sau lên men cao P P - Đã lựa chọn điều kiện ni cấy tổng hợp chất màu thích hợp: pH môi trường lên men 5.5, tỷ lệ tiếp giống 16%, lắc 250 vòng/phút, 300C 9-10 ngày Với điều kiện lượng chất màu vàng thu P P nhiều 2, Nghiên cứu tổng hợp thu nhận hoạt chất Monacolin từ Monascus purpureus 5085 theo phương pháp lên men bề mặt - Đã lựa chọn thành phần môi trường nuôi cấy thích hợp cho tổng hợp monacolin chủng Monascus purpureus 5085 : chất gạo Xi, nguồn vitamin axit amin bổ sung L- Methionine (75mg/l) Biotin (25mg/l) - Đã lựa chọn điều kiện nuôi cấy thích hợp để tổng hợp Monacolin chủng Monascus purpureus 5085: Độ ẩm môi trường 40.25%, nhân giống bào tử khô lấy từ ống thạch nghiêng Nhiệt độ lên men 300C ngày đầu giữ 250C Với điều kiện lượng P P P P Monacolin thu nhiều - Đã tiến hành lên men Monascus purpureus 5085 theo phương pháp lên men bề mặt quy mô xưởng thực nghiệm kg gạo/mẻ Phạm Quang Huy 87 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học II ĐỀ NGHỊ: Do tính cấp thiết vấn đề bệnh tim mạch, chất lượng chất màu an tồn thực phẩm muốn: - Tiếp tục nghiên cứu kỹ để hồn thiện điều kiện tối ưu cho q trình lên men chủng Monascus purpureus 5085 tìm biến chủng có khả tổng hợp chất màu monacolin cao - Hồn thiện quy trình xưởng thực nghiệm để tạo sản phẩm chứa monacolin phục vụ y học nhằm nâng cao chất lượng sống Phạm Quang Huy 88 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học TÀI LIỆU THAM KHẢO I, TIẾNG VIỆT: Trương Thị Hòa, Phan Tố Nga, 2001 Báo cáo thí nghiệm thu đề tài cấp Bộ Công Nghiệp: Nghiên cứu sử dụng nấm men bia nấm men đỏ công nghiệp chế biến thực phẩm thức ăn gia súc” Viện Công Nghiệp Thực Phẩm Lê Đức Mạnh, 2007 Khảo sát khả tạo sắc tố, Lovastatin độc tố Citrinin hai chủng nấm mốc đỏ Monascus purpureus Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên Công nghệ 23: 238-244 Phan Tố Nga Phan Thị Sửu, 2001 Báo cáo thí nghiệm thu đề tài cấp Bộ Công Nghiệp: “Nghiên cứu công nghệ khai thác chất màu thực phẩm từ thực vật vi sinh vật” Viện Công Nghiệp Thực Phẩm Phan To Nga, Vu Nguyen Thanh, 2005 Ứng dụng Monascus purpureus sản xuất thực phẩm chức (chứa Lovastatin) khảo sát điều kiện nuôi cấy cho chủng nấm mốc Monascus Lương Đức Phẩm, Hồ Sưởng, 1978 Vi sinh tổng hợp, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Thị Hoài Trâm, 2006 Báo cáo tổng kết đề tài cấp Nhà Nước mã số KC.04.27: “Nghiên cứu xây dựng qui trình cơng nghệ vi sinh để sản xuất số chế phẩm sinh học dùng công nghiệp chế biến thực phẩm” Viện Công Nghiệp Thực Phẩm- Bộ Khoa Học Cơng Nghệ Bộ mơn hóa sinh (2001), Chuyển hóa lipid lipoprotein Hóa sinh học,nhà xuất Y học Hà Nội, tr.318-375 Nguyễn Thị Hà (2007), Chuyển hóa lipid lipoprotein Hóa sinh, nhà xuất Y học Hà Nội, tr.126-147 Phạm Quang Huy 89 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học II, TIẾNG ANH: Ahn J, Jung J, Hyung W, Haam S, Shin C (2006) Enhancement of Monascus pigment production by the culture of Monascus sp J101 at low temperature Biotechol Prog 22 (1): 338-40 10 Ajaz Ahmad, Bibhu Prasad Panda, Shamshir Khan, Mohd Ali and Saleem Javed, 2009 Downstreaming and purification of lovastatin from Monascus purpureus culture Thai J Pharm Sci 33: 39-46 11 Babitha A, Soccol CR, Pandey A (2007) Soild–state fermentation for the production of Monascus pigment from jackfruit seed Bioresour Technol 98 (8): 1554-1560 12 Bai-Shen Sun, Li-Ping Zhou, Xiao-Qin Jia and Chang-Keun Sung, 2008 Response surface modeling for γ-aminobutyric acid production by Monascus pilosus GM100 under solid-state fermentation African Journal of Biotechnology Vol (24), pp 4544-4550, 17 December 13 Bibhu Prasad Panda, Saleem Javed, Mohd Ali, 2010 Production of Angkak through Co-culture of Monascus prupureus and Monascus ruber Brazilian Journal of Microbiology 41: 757-764 14 Bo Zhou, Jufang Wang, Yuewu Pu, Mingjun Zhu, Shiming Liu, Shizhong Liang, 2009 Optimization of culture medium for yellow pigments production with Monascus anka mutant using response surface methodology Eur Food Res Technol 228:895–901 15 Bum-Kyu Lee, No-Hwan Park, Hai Yon Piao, and Wook-Jin Chung, 2001 Production of Red Pigments by Monascus purpureus in Submerged Culture Biotechnol Bioprocess Eng 6: 341-346 Phạm Quang Huy 90 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 16 C Arunachalam and D Narmadhapriya, 2011 Monascus fermented rice and its beneficial aspects: A new review Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research Vol 4, Issue 17 Chang-Chai Ng and Yuan-Tay Shyu, 2004 Development and production of cholesterol-lowering Monascus-nata complex World Journal of Microbiology & Biotechnology 20: 875–879 18 Cheng-Chieh Lin, Tsai-Chung Li and Ming-May Lai, 2005 Efficacy and safety of Monascus purpureus Went rice in subjects with hyperlipidemia European Journal of Endocrinology 153: 679–686 19 Chien-Lung Kao, 2004 Study on the flavor of red chiew effected by the addition of Monascus, Yeast strains, and culture temperature Thesis for Master's of science, July 20 D G Pereira, A Tonso and B V Kilikian, 2008 Effect of dissolved oxygen concentration on red pigment and citrinin production by Monascus purpureus ATCC 36928 Brazilian Journal of Chemical Engineering Vol 25, No 02, pp 247 - 253, April - June 21 D Wild, M Gareis, H U Humpf, 2002 Analyses of red fermented rice (angkak) and report of a new Monascus metabolite Mycotoxin Research, volume 18, june, supplement 2, 212-216 22 Emiliya Pisarevaa, Valentin Savovb, and Anna Kujumdzievac, 2005 Pigments and Citrinin Biosynthesis by Fungi Belonging to Genus Monascus Z Naturforsch 60c, 116Ð120 23 Emon Chairote, Griangsak Chairote, and Saisamorn Lumyong 2009 Red Yeast Rice Prepared from Thai Glutinous Rice and the Antioxidant Activities Chiang Mai J Sci; 36(1) : 42-49 24 Emon Chairote, Griangsak Chairote, Suganya Wongpornchai and Saisamorn Lumyong, 2007 Preparation of red yeast rice using various Thai Phạm Quang Huy 91 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học glutinous rice and Monascus purpureus CMU001 Isolated from commercial Chinese red yeast rice sample KMITL Sci Tech J Vol No S1 Nov 25 E I Pisareva and A V Kujumdzieva, 2010 Influence of carbon and nitrogen sources on growth and pigment production by Monascus pilosus C1 strain Biotechnol & Biotechnol EQ 24/2010/SE 26 Farhan M Said, Yusuf Chisti and John Brooks, 2010 The effects of forced aeration and initial moisture level on red pigment and biomass production by Monascus ruber in packed bed solid state fermentation International Journal of Environmental Science and Development, Vol 1, No 1, April 27 Hassan Hajjaj, Alain Klaebe, Marie O Loret, Ge Rard Goma, Philippe J Blanc and Jean Francois, 1999 Biosynthetic Pathway of Citrinin in the Filamentous Fungus Monascus ruber as Revealed by 13 C Nuclear Magnetic Resonance Applied and Environmental Microbiology, Vol 65, No 1, Jan, p 311–314 28 Hisn- Yi Tsai, 2003 The influence of environmental factors on monacolin K production by Monascus ruber Master's Thesis, 28, July 29 Hsin-Ping Ou, 2007 Investigations on Monacolin K Thermal Degradation Kinetics Analysis and Healthy Effects of Monascus-fermented Products Doctoral Dissertation, July 3T T 30 B Omamor , E I Eziashi and A A Adekunle, 2008 Carbon nutrition in relation to growth of three Monascus species isolated from decaying date fruits African Journal of Microbiology Research Vol.(2) pp.153-155, June 31 Ji Yeun Kim, Hae-Jin Kim, Jee-Hwan Oh, and Inhyung Lee, 2010 Characteristics of Monascus sp Isolated from Monascus Fermentation Products Food Sci Biotechnol 19(5): 1151-1157 Phạm Quang Huy 92 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 32 Jinn-Tsair Lee, B.S Ch.E, 2004 Optimization of Submerged Cultivation of Monascus anka via Sequential Pseudo Uniform Design Method, Thesis for Master of Science Department of Chemical Engineering Tatung University, July 33 Jose L Adrio, Arnold L Demain, 2003 Fungal biotechnology Int Microbiol 6: 191–199 34 Julio C Carvalho, Bruno O Oishi, Adenise L Woiciechowski, Ashok Pandey, Sumathy Babitha, Carlos R Soccol, 2007 Effect of substrates on the production of Monascus biopigments by solid-state fermentation and pigment extraction using different solvents Indian Journal of Biotechnology, Vol 6, April, pp 194-199 35 Jun-Sung Kim; Kee-Hyun Choi, Jang-Youn Choi, Kyungki-do, Yoon-Soo Lee, lk-Boo Kwon, 1995 Monascus strain, Monascus anka 732Y3 (KCCM 10014) producing high amount of Monascus pigments United States Patent:5,429,943; Jul.4 36 Júlio Cesar de Carvalho, Bruno Oliva Oishi, Ashok Pandey and Carlos Ricardo Soccol, 2005 Biopigments from Monascus: Strains Selection, Citrinin Production and Color Stability Brazilian Archives of Biology and Technology, Vol.48, n : pp 885-894, November 37 Jyh-Jye Wang, Chung-Lin Lee, Tzu-Ming Pan, 2003 Improvement of monacolin K, γ-aminobutyric acid and citrinin production ratio as a function of environmental conditions of Monascus purpureus NTU 601 J Ind Microbiol Biotechnol 30: 669–676 38 Lan-Hsin Wange, 2002 Investigation on Sporulation and Its Pigment Production of Monascus pilosus Master's Thesis, 31, July 39 Lin T.F., and Demain A.L., 1991 Effect of nutrition of Monascus spp on formation of red pigments Appl Microbiol Biotechnol; 36: 70-75 Phạm Quang Huy 93 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 40 Marzluf, GA, 1997 Genetic regulation of nitrogen metabolism in the T fungi Microbiol Mol Biol Re 61, 17–32 41 Ma, J., Y Li, Q Ye, J Li, Y Hua, D Ju, D Zhang, R Cooper and M Chang (2000), Constituents of red yeast rice, a traditional Chinese food and medicine, J Agri Food Chem, 48: 5220 – 5225 42 Mei-Chi Chen, 2005 The influence of temperature shift on pigment and monacolin K production by Monascus spp Master's Thesis, 5, July 43 Patcharee Pattanagul, Renu Pinthong, Aphirak Phianmongkhol , Noppo Leksawasdi, 2007 Review of Angkak Production (Monascus purpureus) Chiang Mai J Sci; 34(3) : 319-328 44 Patcharee Pattanagul, Renu Pinthong, Aphirak Phianmongkhol, Somsak Tharatha, 2008 Mevinolin, citrinin and pigments of adlay angkak fermented by Monascus sp International Journal of Food Microbiology 126: 20-23 45 P J Blanc, J P Laussac, J Le Bars, P Le Bars, M O Loret, A Pareilleux, D T 5 3T 2T 2T 3T 2T 2T T 3 T T T 3 T T T 3 T T T T 2T Prome, J C Prome, A L Santerre, G Goma, 1995 Characterization of T 1T 2T 1T 1T 2T T T T T monascidin A from Monascus as citrinin International Journal of Food Microbiology Volume: 27, Issue: 2-3, Pages: 201-213 46 R Vidyalakshmi, R Paranthaman, S Murugesh and K Singaravadivel, 2009 Stimulation of Monascus Pigments by Intervention of Different Nitrogen Sources Global Journal of Biotechnology & Biochemistry (1): 25-28 47 R.S.Subhasree, P.Dinesh Babu, R.Vidyalakshmi and V.Chandra Mohan, 2011 Effect of Carbon and Nitrogen Sources on Stimulation of Pigment Production by Monascus purpureus on Jackfruit Seeds International Journal of Microbiological Research (2): 184-187 Phạm Quang Huy 94 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 48 Sandra Fernanda Bilbao Orozco, Beatriz Vahan Kilikian, 2008 Effect of pH on citrinin and red pigments production by Monascus purpureus CCT3802 World J Microbiol Biotechnol 24:263–268 49 V K Joshi, Devender Attri, Anju Bala and Shashi Bhushan, 2003 Microbial Pigments Indian Journal of Biotechnology Vol 2, July.pp362-369 50 Wang UL, Houng JY, Chang HS, Roger–Chien H and Hsu WH, 1998 Selection of drug-resistant mutant of Monascus pilosus for enhanced monacolin K production J Chinese Agric Chem Soc.36: 192-200 51 Wun-Yuan Lin, Jui-Yun Chang, Chih-hsuan Hish, Tzu-Ming Pan, 2008 Profiling the Monascus pilosus Proteome during Nitrogen Limitation J Agric Food Chem no ,vol 56, 433–441 52 Wei-tsung Yang, 2004 Effect of amino acid supplements on monacolin K production by Monascus ruber Master's Thesis, 6, July 53 Yunquan Zheng & Yanwen Xin & Xianai Shi & Yanghao Guo, 2010 Anti-cancer effect of rubropunctatin against human gastric carcinoma cells BGC-823 Appl Microbiol Biotechnol 88:1169–1177 54 Yii-Lih Lin, Teng-Hsu Wang, Min-Hsiung Lee, Nan-Wei Su, 2008 Biologically active components and nutraceuticals in the Monascus fermented rice: a review Appl Microbiol Biotechnol 77:965–973 55 Zhao Hai (1998) Production of Monacolin by Monascus purpureus on rice solid state fermentation International symposium on Monascus 1998 19-13 Jun Tolous France 56 Zhao Hai (2000) Application of Monascus products in China The fourth international symposium on nature colorants 2-5 April, San Diego USA 57 Zhao Hai (2002) Research and Development of Monascus Product for cholesterol lowering Capital Medicine.9.P20 Phạm Quang Huy 95 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học PHỤ LỤC 1, Kết phân tích Monacolin K phương pháp HPLC Sắc ký đồ phổ mẫu Monacolin K (Mevinolin – Sigma) chuẩn Sắc ký đồ phổ Monacolin K tách chiết ethanol 75% từ gạo lên men Monascus purpureus 5058 Phạm Quang Huy 96 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 2, Kết phân tích hàm lượng Monacolin K tiêu hóa, lý Chỉ tiêu Monacolin K Độ ẩm Hàm lượng tro tổng số Hàm lượng Protein tổng số Hàm lượng Lipit Hàm lượng Gluxit Đơn vị mg/g g/100 g g/100 g g/100 g g/100 g g/100 g Kết 5.3-5.5 6.25 1.91 23.17 7.88 32.9 3, Kết phân tích tiêu vi sinh, độc tố nấm citinin kim loại nặng Chỉ tiêu Tổng số vi sinh vật hiếu khí Coliform E coli Cl perfringens S aureus Salmonella Tổng số bào tử nấm men, nấm mốc Độc tố nấm citrinin Hàm lượng Chì (Pb) Hàm lượng Asen (As) Hàm lượng Cadimi (Cd) Hàm lượng Thủy ngân (Hg) Đơn vị CFU/g MPN/g MPN/g CFU/g CFU/g CFU /25g CFU/g mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg Kết KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 3,24 < 0,01 < 0,01 KPH Ghi chú: KPH – Không phát (nghĩa ngưỡng phát phương pháp) Phạm Quang Huy 97 CNSH 2009 Viện CNSH&CNTP Luận văn thạc sĩ khoa học 4, Các cơng trình khoa học công bố: Đỗ Thị Thủy Lê, Nguyễn Thị Hoài Trâm, Bùi Thị Hồng Phương, Phạm Đức Tồn, Đỗ Thị Thanh Huyền, Phạm Quang Huy, Hồng Đình Hòa, Zhao Hai (2011) Nghiên cứu sản xuất chế phẩm có tác dụng giảm cholesterol Monacholes từ nấm mốc đỏ Monascus purpureus Trong Kỷ yếu Hội nghị khoa học tồn quốc điện nơng nghiệp bảo quản chế biến nông sản, thực phẩm Hà Nội, ngày20-21 tháng năm 2011 Trang 297-305 Nguyen Thi Hoai Tram, Do Thi Thuy Le, Bui Thi Hong Phuong, Pham Duc Toan, Do Thi Thanh Huyen, Le Van Trong, Pham Quang Huy, Hoang Dinh Hoa, Nguyen Phuong Thanh, Vu Thi Ngoc Thanh, Nguyen Trong Thong, Zhang Liang, Zhao Hai (2011) Study on analysis and qualification assessment of lowering – cholesterol preparation named Monacholes produced by red fungi of Monascus purpureus In Proceeding of The nd Analytica Vietnam Conference 2011, Ho Chi Minh City, April 77, 2011 pp 243-248 Phạm Quang Huy 98 CNSH 2009 ... U Nghiên cứu điều kiện sinh tổng hợp, tách chiết thu nhận chất màu hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus thiết bị lên men 14 lít lên men bề mặt Nội dung đề tài: U 1, Nghiên cứu tổng hợp thu. .. lên men thích hợp để tổng hợp chất màu vàng quy mơ phịng thí nghiệm máy lắc với chủng nấm M purpureus MT-2010 60 T T 3.1.3 Nghiên cứu tổng hợp hỗn hợp chất màu tạo Monacolin từ T Monascus purpureus... là: đỏ, da cam, vàng) mà cịn tính an tồn cao tới sức khỏe người mà mang lại Do đó, chúng tơi thực đề tài: ? ?Nghiên cứu tổng hợp, thu nhận chất màu hoạt chất Monacolin từ nấm mốc đỏ Monascus ” Mục