QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG BETA-TRACE PROTEIN [NƯỚC TIỂU]

Trong trường hợp này, nếu cần phải định lượng thêm, lặp lại quá trình xác định bằng cách sử dụng tỉ lệ pha loãng cao hơn. IV[r]

QUY TRÌNH

QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG BETA-TRACE PROTEIN [NƯỚC TIỂU] I NGUYÊN LÝ

Các hạt polystyrene bọc kháng thể với BTP người kết tập lại trộn với mẫu có chứa BTP Những kết tập làm phân tán chùm ánh sáng qua mẫu Cường độ ánh sáng phân tán tỷ lệ thuận với nồng độ BTP mẫu Kết đánh giá cách so sánh với chuẩn có nồng độ biết trước

Xét nghiệm định lượng BTP giúp đánh giá chức thận lại, chất điểm quan trọng tiên lượng bệnh nhân cần phải có liệu pháp điều trị thay thận (như chạy thận nhân tạo thẩm phân phúc mạc) Quan sát thấy nồng độ BTP nước tiểu tăng lên tổn thương ống thận

II CHUẨN BỊ

1 Cán thực hiện: 01 Bác sỹ 01cán đại học 01 kỹ thuật viên chuyên ngành Hóa sinh

2 Phương tiện, hóa chất 2.1 Phương tiện

Máy phân tích: BN ProSpec Máy ly tâm

Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC mẫu bệnh phẩm Pipep loại

Ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm 2.2 Hóa chất

Thuốc thử N Latex BTP: hạt polystyrene bọc kháng thể thỏ với BTP người,dạng đông khô Azide natri < g/L

Bổ sung N Latex BTP: globulin miễn dịch thỏ dung dịch chất đệm Azide natri < g/L

Hóa chất ổn định đến ngày ghi nắp hộp với điều kiện không mở nắp bảo quản nhiệt độ 2-8°C Độ ổn định sau hoàn ngun bảo quản 2-8°C lọ đóng kín ngày

2.3 Các dụng cụ tiêu hao khác - Ống nghiệm;

- Găng tay, nước rửa tay, khăn lau tay, trang;

3 Người bệnh: Cần giải thích mục đích xét nghiệm để bệnh nhân người nhà bệnh hiểu, từ hợp tác q trình lấy máu

4 Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thông tin bệnh nhân bao gồm họ tên, tuổi, khoa phịng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, ngày định, ngày lấy mẫu, loại thuốc sử dụng (nếu có)…

III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

1 Lấy bệnh phẩm xử lý mẫu bệnh phẩm Thực mẫu nước tiểu

Mẫu nước tiểu phải quay li tâm (khoảng 10 phút/ 15 000 × g) trước sử dụng Cần pha loãng trước theo cách thủ cơng theo tỉ lệ 1:5 chất pha lỗng mẫu N (REF 10873460) Trong trường hợp thể tích mẫu thấp, phải thực pha loãng cuối theo cách thủ công theo tỉ lệ 1:20 NaCl đẳng trương chất pha loãng N

2 Tiến hành kỹ thuật 2.1 Chuẩn bị máy phân tích

Dựng đường chuẩn: dựa điểm với nồng độ khác nha Pha loãng UY tiêu chuẩn protein N thiết bị chuẩn bị tự động cách sử dụng chất pha loãng N Sử dụng pha lỗng chuẩn vịng ba

Phân tích QC: level Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu 2.2 Phân tích mẫu

- Mẫu bệnh phẩm nên tiến hành phân tích vịng 2giờ - Mẫu sau ly tâm chuyển vào khay đựng bệnh phẩm

- Đánh số (hoặc ID bệnh nhân); chọn test vận hành theo protocol máy tự động phân tích

Lưu ý: Một số mẫu mang lại tín hiệu đo vượt phạm vi đường cong tham chiếu Trong trường hợp này, cần phải định lượng thêm, lặp lại trình xác định cách sử dụng tỉ lệ pha loãng cao

IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Các khoảng tham chiếu mẫu huyết (n = 328) xác định từ quần thể người lớn có bề ngồi khỏe mạnh Các khoảng tính tốn khơng có tham số thể phạm vi 95 % quần thể

BTP nước tiểu ≤ 3,75 (1,11) mg/L V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ

- Các yếu tố ảnh hưởng đến kết khi: độ đục mẫu nước tiểu