Nghiên cứu bào chế vi cầu Amoxicilin kết dính sinh học tại dạ dày

Các vi cầu thu được được đảnh giá khả năng mang dược chất, khả năng giải phóng dược chất, lực kết dính sinh học và độ ồn định của amoxicilin trong dịch dạ dày.. Kết quả [r]

NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VI CẢU AMOXICILIN KÉT DÍNH SINH HỌC TẠI DẠ DÀY

Nhóm nghiên cứu: ThS Nguyễn Thị Hoài Thương1, TS Vũ Thị Thu Giang2 1 Trường ĐH Y khoa V in h ,2B ộ m ôn Bào chế - ĐH D ược Hà N ội

TĨM TẮT

Mục đích nghiên cửu xây dựng công thức bào chế vi cầu Amoxiciỉin kết dính sinh học đề sử dụng trong điều trị viêm loét dày tá tràng Helicobacter pylori Vi cầu Amoxicilin kết dính sinh học bào chế theo phương pháp trao đổi ion cố định gel Natri alginat, propyl hydroxy methyl cellulose K100M (HPMC K100M), polyethylene oxide 5.000.000 (PEO 5) chitosan sử dụng làm polyme kết dính Các vi cầu thu được đảnh giá khả mang dược chất, khả giải phóng dược chất, lực kết dính sinh học độ ồn định amoxicilin dịch dày Công thức tối ưu chứa 5% amoxicilin, 1,3% natrí alginat, 0,1% HPMC K100M, 0,05% PEO ngâm 15 phút dung dịch calci clorid 10% phối hợp chitosan 0,1% kiểm sốt giải phóng dược chốt kéo dài đến (87,43% Amoxicilin giải phóng vào thời điểm cuối cùng) cải thiện đàng kể độ ổn định cùa dược chất so với mẫu nguyên liệu Kết cho thấy khả kết dính sinh học vi câu tốt: Ịực kết dính sinh học thừ nghiệm in vitro 0,17N sau 88% số vi cầu bám dính dày chuột cống thử nghiệm in vivo.

Từ khóa: Helicobacter pylori

SUMMARY

Formulation and evaluation of stomach amoxicillin mucoadhesive microspheres for anti-Helicobacter pylori therapy

Nguyen Thi Hoai Thuong, Vu Thi Thu Giang

The purpose o f this study was to formulate amoxicillin mucoadhesive microspheres fo r the potential use of treating gastric and duodenal ulcers, which were caused by Helicobacter pylori Amoxicillin mucoadhesive microspheres were prepared by the ionotropic gelation method Sodium alginate, hydroxy propyl methyl cellulose K100M (HPMC K100M), polyethylene oxide 5,000,000 (PEO 5) and chitosan were used as mucoadhesive polymers The obtained microspheres were investigated the drug entrapment, drug release rate, mucoadhesive force and stability o f amoxicillin in gastric fluid The optimal formulation containing 5% amoxicilin, 1.3% sodium alginate, 0.1% HPMC K100M, 0 % P E a n d 15 minute soaking in the 10% calci chloride with 0.1% chitosan solution could sustain the release rate o f amoxicillin up to hours (87.43% o f amoxicillin was released at the last time point) and significatly improved the drug stability in comparing to free drug The results also showed ihat the drug loading was 53.45% and the bioadhesive force was 0.17N The microspheres could adhere to gastric mucosa very well in in vivo bioadhesive study (up to 88% after hours).

Keywords: Amoxicillin, Mucoadhesive micropheres, Helicobacter pylori.

ĐẶT VẤN ĐÈ diện tích bề mặt tiếp xúc rộng dẫn đến iàm tăng Amoxicilin ià kháng sinh thuộc nhóm penicilin phổ hấp íhu thuốc, iàm giảm số dùng vả cải thiện rộng, thường sử dụng írong phác đồ điều trị tuân thủ bệnh nhân Nghiên cứu tiển

Helicobacter pylori (H.p) Tuy nhiên, H p có khả hành với mục tiêu xây dựng cơng íhức bào chế xâm nhập khu trú sâu íớp màng nhầy vi cầu amoxicilin KDSH dày giải phóng dược tế bảo niêm mạc dày gây kháng thuốc nên khó điều chất kéo dài

trị triệt để ỉ3l Ben cạnh đo, Ámoxicỉíin lại bền ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u acid dày dạng thuốc thông ỉhường có Đối tượng nghiên cứu

thời gian lứu thuoc dày ngắn nên khỏ cung Vi cầu amoxicillin kết dính sinh học cấp khán<3 sinh tới vị trí nhiễm trùng đạt nồng độ điều Đ ộng vật thí nghiệm

trị dẫn đen hiệu qua điều trị thấp Do cần thỉếỉ - Thổ trang, trưởng thành, giống đực, cân nặng - nghiên cứu bào chế dạng thuốc cỏ khả 2,5 kg, ni điều kiện có kiểm soát chế keo dài thời gian lưu thuốc vị trí tác dụng cải độ ăn đầy đủ Trước thí nghiệm đề thỏ nhịn đói qua thiện nồng đọ kháng sỉnh dày để điều trị ngày cho uống nước tự

nhiễm khuân H P ỉ4ị - Chuột cống trưởng thành, khỏe mạnh, giống đực, Vi cầu kết dính sinh học (KDSH) có khả tăng trọng lượng từ 300 - 350 gam, cho nhịn đoi íhời gian lưu íhuổc dày kéo dài giải phóng uống nước tự 24 trước tiến hành thí dược chất Nhờ kích thước nhỏ, vi cầu có khả nghiệm,

bám dính thâm nhập sâu vào lớp màng nhầy có pH 3^ PhiPơng pháp nghiên cứu írung tính từ khoảng 4,5 đến ĩ o ™ '171 cao pH 3.1 P hư ng pháp bào chế v i cầu

trong dịch dày nên có khả bảo vệ dược chất Vi cầu AMOX KDSH bào chế theo phương ổn đính hơn, có lợi cho việc điều trị chỗ tăng sinh pháp cố định gel ion với bước sau: ngâm khả dụng f1) Ngoài ra, vi cầu ổược đánh giá cao írương nở polyme KDSH (NaA polyme phối dạng bào chế thông thường viên nén hợp) 70 mi nước RO, khuấy ỉừ qua đêm để tạo

-íhành dung dịch polyme đồng nhẳt Phân tán hỗn hợp bột kép AMOX Aerosil khoảng 10 ml nước phối hợp với dung dịch polyme chuẩn bị bổ sung nước vừa đủ 100 mi khuấy trộn hỗn dịch thu máy khuấy từ 30 phut đến đống Sau nhỏ giọỉ hỗn dịch thu qua kim phun cỡ 18G với tốc độ 3,3 mi/phút vào môi ỉrường sau:

- Môi trường 1: 300 ml dung dịch calci clorid 5%, 10% 20% (kl/tt) trường hợp tạo màng calci alginat

- Môi trường 2: 300 mi dung dịch calci ciorid 10% (kl/tt) có phối hợp thêm chitosan với nồng độ 0,1%, 0,2%, 0,4% (kl/tì) trường hợp ỉạo màng phức

hợp alginat'Chitosan

Tiếp ỉục ngâm có khuấy từ hỗn dịch chứa vi cầu ìạo thành ỉrong thời gian ỉhích hợp với tốc độ 200 vịng/phút mơi trường 60S vịng/phút mơi trường Gạn rửa ví cầu nước RO lần, sấy nhiệt độ 45°c đến vi cầu đạt độ ẩm 3%

3.2 Đánh giá m ộ t số c h ỉ tiêu c hất lư ợ n g v i cầu 3.2.1 Khả trơn chảy vi cầu

Khả trơn chảy vi cầu đánh giá thông qua chí số Carr:

% Carr ™ X 100

Trong đó: db tỳ trọng biểu kiến (g/ml), d( ià tỷ trọng thô (g/mi) vi cầu xác định thiết bị đo ỉy trọng biểu kiến ERVVEKẤ SVM

3.2.2 Định luựng

Trong nghiên cứu độ ổn định xác định hàm lượng dược chất vi cầu, AMOX định lượng phương pháp HPLC pha đảo sử dụng hệ thống sắc kỵ lỏng hiệu nang cao HP 1260 ALIGENT: Cột sắc ký sử dụng cộỉ ZORBAX Eclipse XDB - CN (4,6 X 150 mm, ụm); bảo vệ cột ZORBAX XDB - CN (4,6 X 12,5 mm, Ịjm); nhiệt độ phòng; pha động: dung dịch đệm phosphat pH 5,0 - acetonỉtril theo tỷ lệ 95:5 (tt/tt); tốc độ dòng: 0,5 ml/phút; thể tích tiêm mẫu 20 ịjL; detector UV bước sóng 230 nm

3.2.3 Khả giải phóng amoxicilin in vitro

Khả giải phóng dược chất vi cầu AMOX bào chế tiến hành theo điếu kiện yêu cầu chuyên luận viên nén amoxỉcilin giải kéo dài USP 36(8J

Thiết bị: cánh khuấy, tốc độ khuấy 75 ±1 vịng/phút; mơi trường hồ tan: 900 ml nước cất, nhiệt độ 37 ± 0,5°c Thời điểm lấy mẫu: 0, 1, 3, giờ, hút 10ml, bổ sụng lại 10ml môi trường sau lần hút Định lượng phương pháp đo mật độ quang bước sóng 272nm Thí nghiệm tiển hành iần lấy ket trung bình

Yêu cầu phần trăm AMOX giải phóng theo thời gian trình bày bảnạ

Bảng Yêu call phan trăm AMOX giải phóng theo thời gian (USP 36)

Thời gian (qiờ) Phần trăm AMOX qiải phónq (%)

1 -6

3 -8

5 >85

3.2.4 Độ ỗn định dược chất mơi trường có pH khác nhau

Tiến hành thí nghiệm điều kiện tương tự thử

nghiệm hịa tan đa trình bày trên, thử VƠI môi

trường:

- MT 1: 900 ml dung dịch acid HCI pH 1,2 - MT 2: 900 ml dung dịch đệm phosphat pH Tiến hành định ỉượng hàm lượng dược chất giải phóng, ổn định mơi trường cịn lại vi cầu thời điễm phương pháp HPLC

Hàm lượng AMOX lại thời điểm tính theo cơng íhức:

Ao= (A 1+ A 2)(% ).

A0: hàm lượng DC lại thời điểm Ai: hàm lượng DC môi trường (%) A2: hàm lượng DC ỉrong vi cầu (%)

Thí nghiệm tiến hành lần lấy kết trung bình

3.2.5 Khả kết dính sinh học in vitro

Xử lý niêm mạc dày thỏ: bơm khơng khí vào tĩnh mạph vành tai để làm chết thỏ Ngay iập tức phẫu thuật cắt lấy dày thỏ đem làm bề mặt niêm mạc dung dịch nước muối sinh lý cho không làm lớp chất nhầy ỉrên bề mặt c ắ t thành mảnh niêm mạc diện ỉích 4cm2 (2*2cm) tiển hành thí nghiệm

Thiết bị dùng để xác định lực KDSH mô tả t~— —

-Hình Thiết bị đánh giá lực KDSH chế tạo từ cân Roberval.

Tiến hành: Gắn cố định niêm mạc dày thỏ lên giá, iàm ướt bề mặt niêm mạc thể.tích xác 0,1 mi dung dịch HCI 0,1 M sau rải 50 vi cầu lên niêm mạc c ố định miếng niêm mạc khác vào mặt đĩa cân tự tạo đỉeu chỉnh cân thăng Tác động lực 100 mg lên đĩa cân để hai lơp niêm mạc tiềp xúc vòng phút Sau ngừng tác dụng lực điều chỉnh đe buret nhỏ nước xuống cốc tốc độ ml/phút hai lớp niêm mạc tách tác đọng trọng lượng nước nhỏ xuống, ghi lại khối lượng nước đắ nhỏ xuống Lực kểt dính sính học tính theo cong thức:

F(N) = 0,00981 * m

Trịng m khối lượng nước nhỏ xuống (g) Thí nghiệm tiến hành lần lấy ket trung binh

3.2.6 Khả kết dính sinh học in vivo

Cách tiến hành: Mỗi chuột cho uổng 50 hạt vi cầu AMOX bào chế qua ống xông (sử dụng dây truyền dịch đường kính 2mm) Sau khoảng thời gian xác định giờ, giờ, kể từ uống,'gây chết chuột ether, phẫu thuật đường tiêu hóa, đem số lượng vi cầu cịn kết dính lại dày ruột non

Khả kết dính sinh học mẫu vi cầu xác định tỷ iệ phần trăm số vi cầu kết dính niêm mạc dày, ruột non đểm tổng số vi cầu cho chuột uống ban ổầu Tiến hành thí nghiệm lần, lấy kết trung bình

KET LUẬN VÀ BÀN LUẬN

Qua kết khảo sát sơ nghiên cứu lựa chọn nhiệt độ sấy vi cầu 45°c nồng độ Aerosii 0,4% để tiến hành bào chế vi cầu

1 Ảnh hưởng nồng độ dược chất Để khảo sát anh hưởng nống độ dược chất đến hiệu suất tạo vi cầu, tỳ lệ VCH hàm lượng

dược chất, tiến hành bào chế mẫu vi cầu íheo cơng thức bảng Các hỗn dịch thu được nhỏ giọt vào dung dịch caici clorid 5% (kl/tt), tiếp tục khuẩy từ írong thời gian 30 phút

Bảng Cơng thức bào chế vi cều AMOX vớí tỷ lệ dược chất khác

Mâu v c

Nông đô AMOX

(%)

Nồng độ Aerosil (%)

Nông đô

NaA

(%)

Nồng độ calci clorid

(%)

F1 3,0 0,4 2,0 5,0

F2 4,0 0,4 2,0 5,0

F3 5,0 0,4 2,0 5,0

F4 6,0 0,4 2,0 5,0

Hầu hết mẫu vi cầu bào chế đạt ổộ ầm 3%, có hình dạng íừ gần cầu đến cầu, phân bố kích thước khoồng từ 1,0 đến 1,25 mm

Bảng Một số đặc tính vi cầu cổ nồng độ AMOX khác (n=3)

Mâu

v c

Hiệu suất tao v c

H(%)

Hàm lượng

AMOX C(%)

Tỷ iệ VCH (%)

Chỉ số

Carr (%)

Tỳ BK

LưcKDSH (N)

Phần trăm AMOX giải phỏnq (%)

1 giờ

F1 90,78 23,08± 0,24 39,11± 0,63 12,67±0,03 0,58± 0,01 0,07+ 0,02 33,41±0.42 55,93±2,03 73,4Ũ± 0,95

F2 90,02 28,35± 0,31 46,95 ± 0,45 8,12 ±0,05 0,63 ±0,02 0,06 ± 0,02 46,11±1,19 61,88+0,76 83,50 ±1,36

F3 89,74 36,42+0,12 48,34 ±0,67 8,16 ±0,02 0,63 ±0,01 0,07 ±0,02 52,24±2,42 67,91+4,12 87,52 ±2,11

F4 85,22 35,87 ±0,06 48,51±0,88 8,25 ±0,04 0,67 ±0,01 0,07 ±0,02 54,13±1,33 65,86±0,78 85,34 ±0,07

Nhận xét: Khi tăng nồng độ dược chắt từ lê.n 4%, đặc tính trơn chảy vi cầu cài thiện đáng kể thể

hiện qua số Carr giảm rõ rệt Hiệu suất tạo vi cầu có xu hưởng giảm nhẹ (từ 90,78 xuống 89,74%) tăng nồng độ AMOX từ lên 5% giảm rỗ rệt khí nồng độ dược chất mức 6% (85,22%) Tỷ lệ vi cầu hóa tăng đáng kề từ 39,11 % lên 48,34% tăng nồng độ dược chất từ lên 5% không tăng tăng nồng độ dược chất iên 6% (bảng 3) Tốc độ giai phóng dược chất (GPDC) từ vi cầu tăng đáng kể nồng độ dưực chất tăng từ lên 4% (thời điềm tăng từ 73,40% lên 83,50%), tăng chậm nồng độ 5% AMOX (87,52% iủc giờ) giầm nhẹ tỷ lệ AMOX ià 6% (85,34% iúc giờ)

Trong sổ mẫu vi cầu bào chế, mẫu vi cầu F3 chứa 5% dược chất cho hàm lượng AMOX vỉ càu cao nhất, tổc độ GPDC phù hợp với yêu cầu, khả KDSH cao nên lựa chọn để tiếp tục nghiên cứu

3.2 Ả n h h n g polym é p h ố i hợp

Từ kết bang nhận tháy lực KDSH mẫu vi cầu F3 lựa chọn thấp (0,07N) vỉ cần tiếp tục nghiên cứu cai thiện đặc tính vi cầu Kếí khảo sát sơ cho thấy PEO HPMC K1ÓOM poiyme phối hợp vừa cho khả KDSH tốt, ngồi PEO có khả ồn định dược chất, HPMC K100M có tính acid nhẹ kết hợp với NaA cho dịch gel có pH khoảng Do đỏ hai poíyme lựa chọn để khảo sát theo công thức bào chế vi cầu bang Các mẫu vi cầu nhỏ giọt vào dung dịch caìci clorid 5% (kl/tt), ngâm thời gian 30 phút

Bảng Công thức bào chế vi cầu AMOX với tỷ lệ polyme khác

Mẫu v c Nồng độ DC (%) Nồng dộ Aerosil

(%)

Nồng độ natri alginat m

Nồng đô PEO (%)

Nồng độ HPMC K100M (%)

F3 5,0 0,4 2,0' -

-F5 5,0 0,4 1,6 0,05

-F6 5,0 0,4 1,7 - 0,1

F7 5,0 0,4 1,3 0,05 0,1

Bảng Mộí số đặc tính vi cầu có nồng độ polyme khác (n=3)

Mâu v c

Hiệu suất tạo v c H(%)

Hàm lương AMOX

C(%)

Tỷ ỉệ VCH (%)

Chỉ số Carr (%)

Tỷ BK

Lưc KDSH (N)

Phần trăm AMOX qiải phóng (%)

1 giờ

F3 89,74 36,42

±0,12

48,34 ±0,67 8,16 ±

0,02

0,63±0,01 0,07±

0,02

52,24 ± 2,42

67,91 ± 4,12

87,52 ± 2,11

F5 83,21 33,93 ±0,41 45,57±0,23 8,58 ±

0,05

0,65 ±0,04 0,11

±0,02

61,42± 3,06

72,31 ±2,61

92,04 +0,67

F6 82,12 33,06 ±0,21 44,91 ±

0,13

9,03 ±0,03

0,63 ±0,01 0,10

±0,02

60,51 ± 0,12

73,02 +3,42

90.89 ± 2,14

F7 83,55 38,68 ±0,15 48,87±0,31 8,04 ±

0,04

0,65+0,02 0,14±0,02 60,43

±1,57

72,96 ±3,18

91,77 + 1,33

Nhận xét: Kết bàng cho thấy: so với mẫu vi cầu F3 mẫu vi cầu F5, F6, F7 có thêm HPMC K100M hay PEO phối hợp polyme với NạA cho lực kết dính cao đáng kể (từ 0,07N công thức F3 tăng lên 0,11; 0,10 0.14N mẫu F5, F6, F7) (hình 2) Hơn nữa, kha GPDC công thức F5, F6, F7 khác không nhiều, cao công thưc F3 đạt yêu cầu thời điểm Do công thức F7 kết hợp polyme lựa chọn đề ìiểp tục khảo sáì

3 Ảnh hưởng nồng độ dung dịch calcỉ clorid

Màng calci alginat hình thành khơng tan nước có kéo dài GPDC, nhiên lại có xu hướng !àm giảm khả KDSH Do cần nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ dung dịch calci clorid để co thể lựa chọn nồng độ thích hợp Ngồi mâu VC F7 lựa chọn, mẫu VC F8 F9 bào che có cơng thức tương tự mẫu VC F7 nhỏ giọt vào dung dịch caici clorid có nồng đọ lẩn lưỡi la 10% (F8) 20% (kl/tt) (F9)

Tiến hành đánh gia số đặc tính mẫu vi cầu bào chế, kết ỉhể bảng Bảng Một số đặc tỉnh vỉ cầu có nồng độ calci ciorid khác (n=3)

Mẫu

v c

Hiệu suất tao VC H(%)

Hàm lượng AMOX

C(%)

Tỷ lê VCH (%)

Chỉ số Carr {%)

Tỷ trọng BK

Lưc KDSH

(N)

Phần trăm AMOX aiảì phónq (%)

1 giở giờ

F7 83,55 38,68 ±0,15 48,87+0,31 8,04 ±0,04

0,65± 6,02

0,14 ±0,02 60,43 ±

1,57

72,96± 3,18

91,77± 1,33

F8 86,34 41,23 ±0,31 54,10

±0,07

7,34±0,04 0,68

±0,05

0,14 ±0,02 59,09

± , 2

70,82 ±2 ’

90,68 ±2,42

F9 88,57 41,30 ±0,03 55,95

±2,13

7,31 ±0,03

0.71 ±0.01

Q,12±0,02 48,35 ±2,14

57,11 ±0J5

73,34 ±1,09

Nhận xé t: Khi tăng nồng độ Ca++ mức độ tạọ màng calci aíginat tăng dẫn đến hiệu suất íạo vi cầu, hàm lượng

AMOX, tỷ iệ vi cầu hóa tăng đáng kể, vi cầu rân chac nen tỷ trọng biểu kiến có xu hướng tăng Tuy nhiên nồng độ Ca++ tăng lên 20% thi lực KDSH giảm khả giải phóng dược chất giảm mạnh từ 90,68 (mâu F8) xuống 73,34% (mẫu F9) thời điểm (bảng 6) Trong công thức, công thức F8 nhỏ giọt vào dung dịch calci 10% cho tiêu tốt nhất, lựa chọn để tiếp tục khảo sát

4 Ảnh hường chiỉosan thờỉ gian ngâm vỉ cầu

Với mong muốn tiếp tục cải thiện khả KDSH hiệu suất íạo vi cầu tỷ lệ VCH để có ihẻ đỏng nạng sau này, mẫu vi cầu bao thêm chiỉosan - poiyme có khả KDSH tốt - nhờ phản ửng nhỏm chức amin chitosan nhóm acid ginat Nồng độ chitosan mơi trường thời gian ngâm VC dung dịch nhỏ giọt mẫu thể ỉrong bảng

Bảng Thành phần nhỏ giọt thời gian ngâm mẫu vi cầu

Mễu

Thành phần MT nhỏ aiot Thời gian ngâm

Nống độ calci clorid 10 % (k!/tt) Nồnq chitosan (kl/ttì (phút)

v c 0,1% 0,2% 0,4%

F8 + - - _ 30

F10 + + - - 30

F11 + - + - 30

F12 + - - + 30

F13 + + - _ 15

Bảng 8- Một số đặc tỉnh vi cầu cỏ nồng độ chitosan thời gian ngâm khác (n=3)

Mẳu

v c

Hiêu suất tao VC H(%)

Hàm tượng AMOX C (%)

Tỷ lê VCH (%)

Chỉ số Carr (%)

Tỷ trọng BK

Lực KDSH (N)

Phằn írăm AMOX qiải phóng (%)

1 3 g i ờ

F8 86,34 41,23 ±0,31 54,10+

0,07

7,34 ±0,04

0,68 ±0,05

0,14±0,02 59,09

±0,93

70,82 ±2,18

90,68 ±2,42

F10 94,79 43,41±0,15 62,54+0,13 4,85

±0,02

0,80 +0,04

0,16 ±0,02 52,09±2,10 66,02+1,33 85,45

±118

F11 96,88 46,22 +0,22 68,06±0,41 4,61

±0,05

0,83±0,06 0,18 ±0,03 50,19

±0,03

65,26 ±4,26

82,63 ±3,67

F12 97,62 46,56 ±0,04 69,09

±0,10

4,33 ±0,05

0,85 ±0,02

0,18+0,02 49,55

±1,23

52,21 ±1,94

76,44 ±2,13

F13 94,85 53,45 ±1,12 78,68

±0,22

4,9810,03 0,80

±0,03

0,17 ±0,02 58,31

±2,01

69,15 ±3,12

87,43 ±1,15

F14 93,67 45,30 ±0,57 55,86

±2,56

4,76 ±0,06

0,81 ± 0,03

0,17 ±0,02 49,22

±4,04

59,07 ±0Ì43

83,29 ±0,93

Nhận xét: So với mẫu VC F8, mẫu v c có bao chitosan có kích thước khoảng 800 - lOOOụm, hình cầu hơn, bề mặt nhẵn có màu vàng nhạt Hiệu suất tạo vi cầu, khả vi cầu hóa hàm lượng AMOX írong vi cầu tăng iên thêm chitosan nồng độ chitosan tăng So với mẫu F8, mẫu v c chứa chitosan the khả KDSH cao

Theo kết trinh bày bảng 8, có mẫu vi cầu F10 F13 ngâm mơi trường chứa 0,1% chiíosan đạt mức giải phóng yêu cầu Trong mẫu F13 cho mức độ giải phóng dược chất cao (tại thời điềm 1, 3, tương ưng 58,31; 69,15 87,43%! Ngồi ra, mẫu ví cau F13 cho hiẹu suất íạo vi cầu, tỷ lệ vi cầu hóa hàm lượng dược chất V! cầu cao nhắt ba mẫu F10, F13 F14, lựa chọn mẫu F13 để tiếp tục đánh giá chi tiêu khác

5 Độ ổn định dược chất mẫu vl cầu F13 môi trường pH khác

Tiến hành khảo sát độ ổn định amoxiciiin nguyên liệu mẫu vi cầu F13 môi trường: dung dịch đệm phosphat pH dung dịch acid HCI pH 1,2 cho kết Cjuả trình bày bảng

% AMOX cịn lại

Mơi trường acid pH 1,2 Môi trường đệm pH

Mầu NL Mâu

VCF13 So với mẫu NL (%) Mẫu NL

Mau

VCF13 So với mẫu NL (%)

0 100,00 100,00 100,00 100,00 _

1 80,26

± 2,48

91,90

±3,12 114,50

98,91 ± 2,05

99,89

±1,57 100,99

3 56,15

±2,15

66,56

±1,40 118,54

96,52 ±2,91

99,33

± 2,21 102,91

5 40,00

±1,98

48,57

± Ó,69 121,43

94,07 ± 2,55

98,74

±1,41 104,96

Nhận xét: - Trong môi trường acid HC! pH 1,2: nguyên liệu amoxiciiin dê bị phân hủy, sau lại 40,00% so với ban đau Việc bào chế vi cầu KDSH góp phần cải thiện độ ổn định dược chất, tẩt thời ổiểm, phần trăm AMOX cịn íại mẫu vi cầu cao mẫu nguyên liệu từ 14,5 đến 21,4%

- Trong môi trường đệm phosphat pH 5, độ ổn định dược chắt mẫu nguyên liệu mẫu vi cầu cao (sau hai mẫu 94% AMOX) Tuy nhiên, tác động thành phần tá dược vi cầu, dược chất có xu hướng bảo vệ ổn định dạng nguyên liệu tự

Kếỉ quà nghiên cứu cho thầy rõ: vi cầu kết dính vào lớp màng nhày ỉrên niêm đày amoxicilirt bảo vệ ồn định nhiều so với dạng thuốc qui ước

6 Khà kết dính sinh học in vivo chuộỉ

Mâu vi cầu F13 mẫu vi cầu FQ (chĩ sử dụng natrỉ alginat 2%, không phối hợp thêm HPMC K100M PEO 5, không bao chitosan; ỉhành phần khác thông số kỹ thuật trình bào chế giống mẫu F13) được đánh giá khả KDSH in vivo chuột Kết qua thử KDSH hai mẫu vi cầu the bảng 10

Tỷ lê VI cáu bấm dinh

(%)

Mẫu F13 Mẳu F0

Tại dày Tại ruôt non Tai da dày Tai ruòt non

Sau 96,67+1,15 3,33± 1,15 79,33± 1,15 19,33 ±1,15

Sau 93,33± 1,15 6,00 ±2,00 64,00±2,00 30,67± 1,15

Sau 88,67+1,15 9,33± 1,15 51,33 + 1,15 44,00 ±2,00

kết dính sình học dày Mầu F0 sau cớ írên 51% số vi cầu cịn bám dính íạ dày Tỷ iệ vi cầu kềt dính dày mẫu vi cầu F13 cao nhiều so với mẫu vi cầu F0 thời điểm Cụ thể: thời điềm giờ, tỷ lệ vi cầu bám dính dày cùa mẫu F13 88,67%, cao 1,73 lần so với mẫu F0

luận viên nén amoxicỉlin giải phóng kéo dài USP 36 lựa chọn công thức cuối Thành phần

Cống thức vi cầu mẫu F13 cho ỊQOml dịch: _* _'

Amoxiciỉin trihydrat 5,0 gam HPMC K100M 0,1 qam

Aerosil 0,4 gam PEO 0,05 qam

Natri alqinat 1,3 gam Nước vừa đủ 100 ml

Tiên hành nhỏ giọt hôn hợp vào:

Môi trường nhỏ giọt: dung dich calci clorid 10% phối hợp chitosan 0,1% Thời gian ngâm vi cầu: 15 phút

Nhiệt đô say: 45 C, sấy đến độ ẩm < 3%

“Can Helicobacter pylori Invade human gastric mucosa: an in vivo study using electron microscopy, immunohistochemical methods, and real-time polymerase chain reaction”, J Clin Gastroenterol, 44(6), pp 416-422

4 Nailasamy V., Ramanathan s (2012), "Role of novel drug delivery systems in stomach specific anti

Helicobacter pylori therapy" Journal o f Phamarcy research, (2), pp 1165-1168.

5 Lin YH, Chung CK, Chen CT, Liang HF, Chen SC, Sung HW (2009), “ Development of pH-responsive chitosan/heparin nanoparticles for stomach-specific anti-Helicobacter pylon therapy", Biomaterials, 30, pp 3332-3342

6 Patroneiia CK, Vanek i, Bowen JC (1988), “in vivo measurement of gastric mucus pH in canines: effect of high luminal acidity and prostaglandin E2",

Gastroentemlogy, 95(3), pp.612-618.

7 Turnberg LA, Ross IN (1984), “Studies of the pH gradient across gastric mucus”, Scand J Gastroenterol Suppl, 92, pp 48-50.

8 USp 36, pp 711-712

NGHIÊN CỨU BÁN TỎNG HỢP TROXERUTIN TỪ RUTIN Ở QUY MỘ PHỊNG THÍ NGHIỆM

Tác giả: Nguyễn Thị Hoàng Anh (Khoa D ược - T rường Cao đẳng Y tế Thái Bình) Giáo viên hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Đinh Luyện (BM Công nghiệp d ợ c- Trường ĐH D ược Hà Nội)'

Ths Giang Thị Thu Hà (Phòng Đào tạo NCKH-Trư n g CĐ Y tế Thái Bình)

TĨM TẮT

Troxemtin có ý nghĩa quan trọng điều trị suy tĩnh mạch mãn tính - bệnh lý nguy hiềm ngày trở nên phổ biến nước ta giới Troxemtin hỗn hợp dẫn xuất mtin hydroxỳéthyl hóa có chứa tối thiểu 80% trí-(hydroxyethyl) rutin, ngồi cịn có ơẫn xuất mono, bis, tetra-(hydroxyethyl) rutin Trong nghiên cứu này, chúng toi tiến hành khảo sốt câc yếu tổ ảnh hưởng đến quy trình bán tổng hợp Troxerutin từ Rutin với tác nhân alkyl hóa etylen-oxid để đưa quy trình bốn tổng hợp Troxerutin quỳ mồ phịng thí nghiệm Sản phẩm tổng hợp từ quy trình tiến hành kiểm nghiệm xác định tỉ lệ thành phần HPLC, khẳng định cẩu trúc hóa học phương pháp phổ, định lượng sản phẩm phương phốp đo quang Ket quà kiểm nghiệm cho thấy sản phầm từ quy trình cơ: hàm lượng troxerutin mẫu đạt 97,42 tính theo khối lượng làm khơ; tỉ lệ trì-(hydroxyethyl)-njtin: 97,25% đạt tiêu chuẩn Dược điển Anh 2010 Nhóm nghiên cứu h i vọng kết ban đầu để tiếp tục nghiên cứu triển khai quy mơ lớn để đưa vào sản xuất Troxerutin Việt Nam.

TừkhóaiTroxerin

SUMMARY

THE SYNTHESIS OF TROXERUTIN FROM RUTIN IN A LABORATORY SCALE Author: Nguyen Thi Hoang Anh (Department of Pharmacy - Thai Binh medical college)

Associate Professor Nguyen Dinh Luyen (Pharmaceutical Department - Ha Noi university of Pharmacy); Master Giang Thi Thu Ha (Thai Binh medical college)

Troxerutin is a standard mixture o f hydroxyethylated rutin derivatives (Hydroxyethylrutosides are comprised of the mono-, dh, trì- and tetrahydroxyethyl derivatives o f rutin) which contains not less than 80.0 % of trihydroxyethylrutoside The purpose o f this paper consists on develop and detail a methodology used to produce Troxerutin from Rutin, that can be applied in a laboratory scale.

KẾT LUẬN

Nghiên cứu xây dựng cơng thức bào chế vi cầu AMOX kết dính sinh học dày Việc kết hợp polyme KDSH gồm nairi aiginat 1,3% - HPMC K100M 0,1% - PEO 0,05% bao chitosan giúp cải thiện Khả KDSH (lực KDSH ỉn vitro đạt 0,17 N khả KDSH in vivo cao (írên 88% vi cầu bám dính dày sau giờ)) độ ổn định dược chất (cáo 1,21 lần so với AMOX nguyên liệu) môi trường dịch dày Mâu vi cầu bào chế ỉheo công thức lựa chọn cịn có khả kiểm sốt giải phóng dược chất Kéo dài (sau có 87,43% íượng dược chấỉ giải phóng)

TAI L1ẸU THAM KHẠO

1 Arora s., Bisen G., and Budhiraja R (2012), "Mucoadhesive and muco-peneỉrating delivery systems for eradication of Helicobacter pylori", Asian J

Pharmaceutics, 6(1), vol.6, pp.18-30.

2 De Boer W.A and Tytgat G.N (2000), “Regular review: treatment of Helicobacter pylori infection", BMJ, 320(7226), pp 31-34

3 Ozbek A., Ozbek E „ Dursun H., et al (2010),