Ứng dụng sóng siêu âm kết hợp chế phẩm cellulase để tăng hiệu suất thu hồi chất chiết trong sản xuất nước ổi (psidium guajava)

I H C QU C GIA TP.HCM TR NG I H C BÁCH KHOA - NGUY N VÕ PHÚ THU N NG D NG SÓNG SIÊU ÂM K T H P V I CH PH M CELLULASE T NG HI U SU T THU H I CH T CHI T TRONG S N XU T N C I (Psidium guajava) Chuyên ngành: Công ngh th c ph m đ u ng LU N V N TH C S TP.H CHÍ MINH, tháng 08 n m 2011 CƠNG TRÌNH TR Cán b h NG C HOÀN THÀNH T I I H C BÁCH KHOA – HQG -HCM ng d n khoa h c : PGS TS Lê V n Vi t M n Cán b ch m nh n xét : TS Hoàng Kim Anh Cán b ch m nh n xét : TS Ngô Lu n v n th c s đ c b o v t i Tr i Nghi p ng i h c Bách Khoa, HQG Tp HCM ngày 14 tháng 08 n m 2011 Thành ph n H i đ ng đánh giá lu n v n th c s g m: PSG TS Nguy n Thúy H ng TS Phan Ng c Hòa PSG TS Lê V n Vi t M n TS Hồng Kim Anh TS Ngơ i Nghi p Xác nh n c a Ch t ch H i đ ng đánh giá LV Tr ngành sau lu n v n đ CH T CH H I NG ng Khoa qu n lý chuyên c s a ch a (n u có) TR NG KHOA………… I H C QU C GIA TP.HCM TR NG C NG HÒA XÃ H I CH NGH A VI T NAM I H C BÁCH KHOA c l p - T - H nh phúc NHI M V LU N V N TH C S H tên h c viên: Nguy n Võ Phú Thu n MSHV: 09110176 Ngày, tháng, n m sinh: 05/10/1985 N i sinh: Chuyên ngành: Công ngh Th c Ph m & u ng ng Tháp Mã s : 605402 I TÊN TÀI: ng d ng sóng siêu âm k t h p v i ch ph m enzyme cellulase đ t ng hi u su t thu h i ch t chi t s n xu t n c i II NHI M V VÀ N I DUNG: X lý i b ng sóng siêu âm kh o sát y u t d ch i thu đ c nh h ng đ n ch t l X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase kh o sát y u t đ n ch t l ng d ch i thu đ c nh h ng ng X lý i b ng sóng siêu âm k t h p v i ch ph m enzyme cellulase kh o sát y u t nh h ng đ n ch t l ng d ch i thu đ c III NGÀY GIAO NHI M V : 01/07/2010 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHI M V : 01/08/2011 V CÁN B H NG D N: PGS TS Lê V n Vi t M n Tp HCM, ngày 01 tháng 08 n m 2011 CÁN B H NG D N (H tên ch ký) TR CH NHI M B MÔN ÀO T O (H tên ch ký) NG KHOA ……………… (H tên ch ký) L IC M N u tiên, xin g i l i c m n chân thành đ n Th y Lê V n Vi t M n, ng t n tình h i ng d n tơi su t q trình th c hi n lu n v n Tơi xin bày t lịng bi t n sâu s c đ n thành viên gia đình tơi, nh ng ng i t o u ki n v t ch t, đ ng th i ng h h t lòng v m t tinh th n cho su t th i gian th c hi n lu n v n Tôi xin trân tr ng c m n t p th quý th y, cô thu c b môn Công ngh th c ph m, i h c Bách khoa Tp.HCM, nh ng ng i nhi t tình h tr chúng tơi hóa ch t thi t b c n thi t, nh v y m i có th ti n hành t t nhi m v nghiên c u lu n v n Sau cùng, xin c m n anh, ch b n h c th c ph m, nh ng ng cao h c t i tr ng phịng thí nghi m cơng ngh i b n đ ng hành th i gian th c hi n lu n v n i h c Bách khoa Tp.HCM Tp H Chí Minh, ngày 01 tháng 08 n m 2011 NGUY N VÕ PHÚ THU N iv ABSTRACT In the recent years, ultrasound applications have widely used in extraction to enhance the extraction yield, phenolic compounds, antioxidant activity in juice In this study, three methods were investigated: Ultrasonic treatment: the effects of the quality of guava juice were evaluated; the sonication conditions of ultrasonic power, temperature, and treatment time were investigated The results showed that, the appropriate conditions of ultrasonic treatment of guava mash were as follows: ultrasonic power of 3W/g of sample, sonication temperature of 600C, and sonication treatment time of minutes Enzymatic treatment: guava mash was treated with cellulase preparation; enzyme concentration and treatment time was investigated The results showed that the optimal conditions were enzyme concentration of 0.13 (%w/w), treatment time of 93 minutes Under these conditions, the extraction yield reached maximum of 63.7 g/100g of dry matter Combined ultrasound and cellulase treatment: guava mash was treated with enzyme preparation of cellulase after sonication treatment; the biocatalytic conditions were investigated are enzyme concentration and treatment time The results showed that the optimal conditions of enzymatic treatment were enzyme concentration of 0.12 (%w/w) and treatment time of 53 minutes Under these conditions, the extraction yield achieved maximum of 65.7 g/100g of dry matter; total polyphenol was 1684.0 mg GAE/100g of dry matter, antioxidant activity (TEAC) was 105.6 µTE/g of dry matter, and total sugar was 52.9 g/100g of dry matter There were an increase of 21.2% in extraction yield, 16.4% in total phenolics content, 19.7% in antioxidant activity and 13.5% in total sugars in comparison with those of the control sample The treatment time was reduced 1.6 times and the enzyme preparation was decrease in compare with those of conventional enzymatic treatment v TÓM T T LU N V N Trong nh ng n m g n đây, sóng siêu âm đ n c ng d ng r ng rãi s n xu t c trái nh m t ng hi u su t thu h i ch t chi t, đ ng th i c i thi n hàm l ng h p ch t phenolic, ho t tính ch ng oxi hóa d ch trích Trong nghiên c u này, chúng tơi s d ng ba ph ng pháp kh o sát: X lý i b ng sóng siêu âm: chúng tơi kh o sát nh h nhi t đ x lý th i gian x lý siêu âm đ n ch t l ng c a công su t x lý, ng c a d ch i thu đ c K t qu cho th y, u ki n t t nh t đ x lý d ch i là: công su t siêu âm W/g, nhi t đ siêu âm 600C th i gian x lý siêu âm phút X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase: ti n hành kh o sát s h ng c a n ng đ ch ph m enzyme th i gian x lý đ n ch t l nh ng c a d ch i K t qu cho th y, hi u su t thu h i ch t chi t đ t giá tr t i đa 67.3 g/100g ch t khô n ng đ ch ph m enzyme cellulase 0.13% (w/w) th i gian x lý 93 phút X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase sau x lý siêu âm: i đ c x lý b ng ch ph m enzyme cellulase sau x lý siêu âm Chúng kh o sát nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase th i gian x lý đ n ch t l ng c a d ch i K t qu thí nghi m cho th y n ng đ ch ph m th i gian x lý t i u l n l t 0.12% (w/w) 53 phút u ki n này, hi u su t thu h i ch t chi t đ t giá tr t i đa 65.7 g/100g ch t khơ, có ngh a t ng 21.2% so v i m u đ i ch ng Bên c nh đó, hàm l ho t tính ch ng oxi hóa đ ng t ng t ng l n l so v i m u đ i ch ng vi ng h p ch t phenolic, t 16.4%, 19.7%, 13.5% M CL C L I C M N iv ABSTRACT v TÓM T T LU N V N vi M C L C vii DANH M C B NG x DANH M C HÌNH xiv DANH M C CÁC T VI T T T xix L I GI I THI U CH NG T NG QUAN .2 1.1 i 1.1.1 Ngu n g c, phân lo i 1.1.2 Thành ph n hóa h c c a i .3 1.1.3 S l c v quy trình x lý thu nh n d ch i 1.2 T ng quan v cellulase .9 1.2.1 nh ngh a, phân lo i .9 1.2.2 C u t o tính ch t c a enzyme cellulase có ngu n g c t n m m c Aspergillus niger 10 1.3 K thu t siêu âm 11 1.3.1 nh ngh a 11 1.3.2 Tác đ ng c a sóng siêu âm 11 1.3.3 Các y u t 1.3.4 nh h ng đ n trình siêu âm 15 ng d ng k thu t siêu âm trích ly .16 vii CH NG NGUYÊN LI U VÀ PH NG PHÁP NGHIÊN C U 17 2.1 Nguyên li u 17 2.1.1 Enzyme 17 2.1.2 i 17 2.2 M c đích nghiên c u 17 2.3 S đ nghiên c u 17 2.4 Thuy t minh s đ nghiên c u .18 2.4.1 X lý i b ng sóng siêu âm 18 2.4.2 X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase .20 2.4.3 X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase sau x lý siêu âm 21 2.5 Các ph ng pháp phân tích 22 2.5.1 Hàm l ng ch t khơ hịa tan 22 2.5.2 Hàm l ng vitamin C .22 2.5.3 Hàm l ng h p ch t phenolic 22 2.5.4 Ho t tính ch ng oxi hóa 22 2.5.5 Hàm l ng đ ng t ng 23 2.6 Cơng th c tính tốn 24 2.7 Ph CH ng pháp x lý s li u 24 NG K T QU VÀ BÀN LU N 25 3.1 X lý i b ng sóng siêu âm 25 3.1.1 nh h ng c a l ng n c b sung 25 3.1.2 nh h ng c a công su t x lý siêu âm 28 3.1.3 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm 33 3.1.4 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm 38 viii 3.2 X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase .41 3.2.1 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase 41 3.2.2 nh h ng c a th i gian x lý .46 3.2.3 T i u hóa n ng đ ch ph m enzyme th i gian x lý b ng ph ng pháp quy hoach th c nghi m 49 3.3 X lý i b ng ch ph m enzyme cellulase sau x lý siêu âm 51 3.3.1 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase 51 3.3.2 nh h ng c a th i gian x lý .55 3.3.3 T i u hóa n ng đ ch ph m enzyme th i gian x lý b ng ph ng pháp quy hoach th c nghi m 58 CH NG K T LU N VÀ KI N NGH 61 4.1 K t lu n 61 4.2 Ki n ngh 61 TÀI LI U THAM KH O 62 PH L C 75 Ph l c A Thí nghi m t i u hóa 75 Ph l c B Các ph ng pháp phân tích 76 Ph l c C K t qu x lý siêu âm 83 Ph l c D K t qu x lý v i ch ph m enzyme cellulase .88 Ph l c E K t qu x lý siêu âm k t h p v i enzyme 91 ix DANH M C B NG B ng 1.1 Phân lo i i (Yusof, 2003) B ng 1.2 Thành ph n hóa h c c a i (Yusof, 2003) B ng 1.3 Hàm l ng acid ascorbic thay đ i theo m t vài lo i i (Yusof, 2003) B ng 1.4 So sánh thành ph n h p ch t phenolic m t s lo i trái nhi t đ i (Lim c ng s , 2007) B ng 1.5 S khác gi a ph ng pháp phân tích th hi n qua h s t ng quan gi a ho t tính ch ng oxi hóa TSP, vitamin C (Corral-Aguayo c ng s , 2008) B ng 3.1 K t qu quy ho ch th c nghi m .50 B ng 3.2 T i u hóa hi u su t thu h i ch t chi t 59 B ng 0.1 Quy ho ch th c nghi m 75 B ng 0.2 Quy ho ch th c nghi m 75 B ng 0.3 Pha loãng L(+) ascorbic 77 B ng 0.4 Hóa ch t phân tích phenolic dùng cho m u 78 B ng 0.5 Pha loãng acid gallic 79 B ng 0.6 Pha loãng trolox .80 B ng 0.7 Hóa ch t phân tích đ ng t ng 82 B ng 0.8 Pha dung d ch chu n saccharose 82 B ng 0.9 nh h ng c a l B ng 0.10 nh h B ng 0.11 nh h ng c a l ng n ng n ng c a l c b sung đ n hi u su t thu h i ch t chi t .83 c b sung đ n hàm l ng n ng vitamin C 83 c b sung đ n hàm l ng h p ch t phenolic .83 B ng 0.12 nh h ng c a l ng n c b sung đ n hàm l x ng đ ng t ng 84 B.4.2 Ph ng pháp FRAP  Chu n b hóa ch t: Pha đ m acetate 300 mmol/L, pH = 3.6: tr n 3.1 gam natri acetate (C2H3NaO2.3H2O) v i kho ng 16 ml acid acetic (C2H4O2)  đ nh m c thành L  dung d ch R2 Pha dung d ch HCl 40 mmol/L: cân 1.458 g HCl (3.942 mL HCl 37%) đ nh m c lên 1000 ml  R3 Pha dung d ch TPTZ 10 mmol/L 40 mmol/L HCl: cân 0.078 g TPTZ  đ nh m c thành 25 ml b ng R3  dung d ch R4 Pha dung d ch FeCl3.6H2O 20 mmol/L: cân 5.406 g FeCl3.6H2O đ nh m c thành 1000 mL  dung d ch R5 Chu n b dung d ch FRAP m i cho m i l n phân tích, pha h n h p theo t l R2:R4:R5= 10:1:1  dung d ch R6 (gi 370C, pha m i cho m i lo t phân tích)  Chu n b dung d ch chu n: Dung d ch chu n (St6) đ  Chu n b m u: m u (S2) đ c pha ch gi ng nh ph l c B.4.1 c pha loãng gi ng nh ph l c B.3  Quy trình phân tích: Hút 150 µL m u phân tích (S2, St6) ho c m u tr ng  thêm 2850µL R6  l c đ u, nhi t đ phòng, u ki n t i 30 phút  đo b c sóng h p th 593 nm  Tính tốn: D ng đ ng chu n đ h p thu – n ng đ trolox d a vào k t qu phân tích m u chu n Ho t tính ch ng oxi hóa c a d ch chi t tính theo n ng đ trolox t đ c n i suy t đ h p thu c a m u phân tích t 81 ng ng ng đ ng B.5 Hàm l ng đ ng t ng  Chu n b hóa ch t: B ng 0.7 Hóa ch t phân tích đ STT Tên nv S Anthrone g H2SO4 đ m đ c ml N cc t ml Pha H2SO4 đ c v i n ng t ng l ng 0.1 150 200 c: t l H2SO4: H2O = 5:2 Anthrone pha loãng v i H2SO4 (0.1 g anthrone pha v i 150 ml H2SO4) khu y kho ng 30 phút  dung d ch R7  Chu n b dung d ch chu n: Tên chu n Saccharose Pha dung d ch chu n v i giá tr n ng đ saccharose: 0, 100, 200, 300, 400, 500 ppm Cân 0.1 g Saccharose  cho vào bình đ nh m c đ n 100 ml  dung d ch St7 Hút St7 vào bình đ nh m c 25 ml nh sau: B ng 0.8 Pha dung d ch chu n saccharose STT Tên n v S l ng St7 ml St7 ml 2.5 St7 ml St7 ml 7.5 St7 ml 10 St7 ml 12.5 Ti n hành đ nh m c thành 25 ml  dung d ch St8  Chu n b m u: m u đ c pha loãng 275 l n  dung d ch S3  Quy trình phân tích: Hút 1ml m u (S3, St8) ho c m u tr ng vào ng nghi m ngâm s n n thêm vào ml R7  l c đ u   đo đ h p thu b c đá  1000C th i gian 10 phút  làm l nh nhanh c sóng 630 nm 82  Tính tốn: D ng đ ng chu n đ h p thu – n ng đ saccharose d a vào k t qu phân tích m u chu n N ng đ đ ng t ng t ng đ t đ h p thu c a m u phân tích t ng v i saccharose c a d ch chi t đ c n i suy ng ng Ph l c C K t qu x lý siêu âm C.1 Kh o sát l ng n c b sung Chú ý: Trong m t c t, giá tr đ c đánh d u b i nh ng ch gi ng khác khơng có ý ngh a theo phân tích th ng kê ANOVA ( = 0.05) B ng 0.9 nh h ng c a l ng n c b sung đ n hi u su t thu h i ch t chi t T l n c/nguyên li u S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 54.7 0.0 a 54.8 0.1 b 0.5 60.0 9.7 62.1c 13.4 1.5 61.0d 11.5 b,d 60.3 10.2 B ng 0.10 nh h ng c a l ng n c b sung đ n hàm l ng vitamin C T l n c/nguyên li u S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) i ch ng 802.2a 0.0 a 814.1 1.5 b 0.5 864.6 7.8 b,c 874.1 9.0 b,c 1.5 878.3 9.5 c 881.3 9.9 B ng 0.11 nh h ng c a l ng n c b sung đ n hàm l ng h p ch t phenolic T l n c/nguyên li u S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1154.9 0.0 a 1182.4 2.4 b 0.5 1279.0 10.7 1425.7c 23.4 c 1.5 1423.4 23.3 c 1447.6 25.3 83 B ng 0.12 nh h ng c a l T l n c/nguyên li u S l C 0.5 1.5 ng n c b sung đ n hàm l n l p l i Giá tr trung bình 49.6a 50.4a 53.2b 55.5c 55.1c 55.0c ng đ ng t ng thay đ i (%) 0.0 1.6 7.3 12.0 11.1 11.0 C.2 Kh o sát siêu âm Chú ý: Trong m t c t, giá tr đ c đánh d u b i nh ng ch gi ng khác khơng có ý ngh a theo phân tích th ng kê ANOVA ( = 0.05) C.2.1 Công su t siêu âm B ng 0.13 nh h ng c a công su t x lý siêu âm đ n hi u su t thu h i ch t chi t Công su t siêu âm (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a 55.1 0.0 1.5 56.0b 1.7 b 56.1 1.7 c 3 56.3 2.1 c 56.3 2.2 c 56.3 2.1 B ng 0.14 nh h ng c a công su t x lý siêu âm đ n hàm l ng vitamin C Công su t siêu âm (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a,b 696.9 0.0 b 1.5 703.9 1.0 b 704.0 1.1 a 3 689.0 -1.1 c 645.6 -7.4 d 624.0 -10.5 B ng 0.15 nh h ng c a công phenolic Công su t siêu âm (W/g) S l 1.5 su t x lý siêu âm đ n hàm l n l p l i Giá tr trung bình 1464.6a 1552.3b 1584.2c 1581.1c 1517.1d 1424.4e 84 ng h p ch t thay đ i (%) 0.0 6.0 8.2 8.0 3.6 -2.7 B ng 0.16 nh h ng c a công su t x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp FRAP Công su t siêu âm (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a 119.9 0.0 b 1.5 122.0 1.8 c 123.2 2.7 c 3 123.2 2.7 b,c 122.8 2.4 a 120.4 0.4 B ng 0.17 nh h ng c a công su t x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp ABTS Cơng su t siêu âm (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a 62.2 0.0 1.5 67.9b 9.2 68.3b,c 9.8 c 3 69.0 11.0 d 66.5 6.9 e 64.9 4.3 B ng 0.18 nh h ng c a công su t x lý siêu âm đ n hàm l ng đ ng t ng Công su t siêu âm (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a 47.7 0.0 a 1.5 47.9 0.3 a 48.1 0.7 b 3 48.5 1.7 b 48.6 1.7 b 48.5 1.7 C.2.2 Nhi t đ siêu âm B ng 0.19 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n hi u su t thu h i ch t chi t Nhi t đ x lý (W/g) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 59.4 0.0 b 30 60.6 2.0 b 45 61.1 2.8 c 60 61.7 3.8 b,c 75 61.4 3.3 85 B ng 0.20 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n hàm l ng vitamin C Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 947.2 0.0 30 936.48a -1.1 45 897.2b -5.3 c 60 878.9 -7.2 d 75 828.6 -12.5 B ng 0.21 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n hàm l ng h p ch t phenolic Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1761.4 0.0 b 30 1901.6 8.0 b,c 45 1883.7 6.9 c 60 1872.6 6.3 75 1722.7d -2.2 B ng 0.22 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích theo ph ng pháp FRAP Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) i ch ng 138.1a 0.0 b 30 141.8 2.7 c 45 140.2 1.5 a,c 60 139.1 0.8 d 75 136.5 -1.2 B ng 0.23 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích theo ph ng pháp ABTS Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 105.6 0.0 b 30 117.2 11.0 b,c 45 115.9 9.8 c 60 113.3 7.3 75 104.5a -1.0 B ng 0.24 nh h ng c a nhi t đ x lý siêu âm đ n hàm l ng đ ng t ng Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 47.7 0.0 30 48.5b 1.7 86 Nhi t đ x lý (0C) S l n l p l i Giá tr trung bình 45 48.7b 60 48.8b 75 48.7b thay đ i (%) 2.0 2.1 2.1 C.2.3 Th i gian siêu âm B ng 0.25 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm đ n hi u su t thu h i ch t chi t Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 58.3 0.0 b 58.8 0.9 c 60.5 3.7 c 60.8 4.2 d 61.4 5.2 c,d 61.2 5.0 B ng 0.26 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm đ n hàm l ng vitamin C Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 697.9 0.0 b 645.9 -7.4 b 644.8 -7.6 b 638.6 -8.5 610.9c -12.5 604.8c -13.3 B ng 0.27 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm đ n hàm l ng h p ch t phenolic Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1605.0 0.0 b 1659.8 3.4 c 1706.3 6.3 d 1728.7 7.7 d 1730.1 7.8 c,d 1709.8 6.5 B ng 0.28 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa t ng phân tích b ng ph ng pháp FRAP Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 144.2 0.0 145.2b 0.7 b 145.3 0.7 87 Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình 145.8c 146.2d 146.1c,d B ng 0.29 nh h ng c a th i phân tích b ng ph ng pháp ABTS Th i gian siêu âm (phút) S l i ch ng thay đ i (%) 1.0 1.4 1.3 gian x lý siêu âm đ n ho t tính ch ng oxi hóa n l p l i Giá tr trung bình 118.6a 123.6b 127.3c 127.8d 129.3e 129.8f thay đ i (%) 0.0 4.2 7.3 7.7 9.0 9.5 B ng 0.30 nh h ng c a th i gian x lý siêu âm đ n hàm l ng đ ng t ng Th i gian siêu âm (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 49.6 0.0 a 50.0 0.8 b 50.6 2.1 c 51.2 3.4 c,d 51.6 4.1 51.8d 4.5 Ph l c D K t qu x lý v i ch ph m enzyme cellulase Chú ý: Trong m t c t, giá tr đ c đánh d u b i nh ng ch gi ng khác khơng có ý ngh a theo phân tích th ng kê ANOVA ( = 0.05) D.1 N ng đ ch ph m enyme cellulase B ng 0.31 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hi u su t thu h i ch t chi t N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 53.8 0.0 b 0.10 61.2 13.7 0.12 63.2c 17.5 c 0.14 63.3 17.7 c 0.16 63.1 17.3 c 0.18 63.0 17.0 88 B ng 0.32 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l vitamin C N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 205.7 0.0 b 0.10 189.2 -8.0 b 0.12 187.9 -8.7 b 0.14 187.7 -8.8 b 0.16 187.5 -8.9 b 0.18 186.1 -9.5 ng B ng 0.33 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng h p ch t phenolic N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1448.2 0.0 0.10 1570.9b 8.5 b 0.12 9.0 1578.4 c 0.14 1630.4 12.6 d 0.16 1668.5 15.2 d 0.18 15.2 1667.7 B ng 0.34 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp FRAP N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình i ch ng 105.5a 0.10 124.3b 0.12 126.6b,c 0.14 126.9c 0.16 128.1c 0.18 128.0c B ng 0.35 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp ABTS N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình i ch ng 80.3a 0.10 98.1b 0.12 98.6b 0.14 98.8b,c 0.16 100.1c 0.18 100.2c 89 n ho t tính ch ng thay đ i (%) 0.0 17.8 20.0 20.3 21.5 21.3 n ho t tính ch ng thay đ i (%) 0.0 22.1 22.7 23.0 24.7 24.7 B ng 0.36 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l đ ng t ng N ng đ enzyme (% w/w) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 38.2 0.0 b 0.10 41.5 8.5 c 0.12 43.1 12.7 c 0.14 43.1 12.9 c 0.16 43.1 12.8 c 0.18 43.0 12.6 ng D.2 Th i gian x lý B ng 0.37 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n hi u su t thu h i ch t chi t Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 52.5 0.0 b 40 60.1 14.5 c 60 61.7 17.5 d 80 63.4 20.8 d 100 63.3 20.6 120 63.6d 21.0 B ng 0.38 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng vitamin C Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) i ch ng 283.8a 0.0 b 40 258.0 -9.1 c 60 241.2 -15.0 c 80 239.5 -15.6 d 100 219.3 -22.7 d 120 205.4 -27.6 B ng 0.39 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng h p ch t phenolic Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1489.9 0.0 b 40 1605.6 7.8 60 1624.5c 9.0 d 80 1656.4 11.2 e 100 1667.9 11.9 d,e 120 1665.0 11.7 90 B ng 0.40 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp FRAP Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 101.2 0.0 b 40 117.2 15.8 c 60 123.7 22.2 c 80 123.4 21.9 c 100 123.0 21.6 c 120 124.8 23.4 B ng 0.41 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng phápABTS Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 79.0 0.0 40 95.7b 21.1 60 97.4c 23.3 c,d 80 98.1 24.2 d 100 99.3 25.7 e 120 102.1 29.3 B ng 0.42 nh h ng c a th i gian x lý i b ng ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng đ ng t ng Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 37.5 0.0 b 40 41.1 9.8 c 60 42.4 13.1 d 80 43.8 17.0 100 43.7d 16.6 d 120 43.7 16.6 Ph l c E K t qu x lý siêu âm k t h p v i enzyme Chú ý: Trong m t c t, giá tr đ c đánh d u b i nh ng ch gi ng khác khơng có ý ngh a theo phân tích th ng kê ANOVA ( = 0.05) E.1 N ng đ ch ph m enzyme cellulase B ng 0.43 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hi u su t thu h i ch t chi t N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 54.0 0.0 0.00 57.0b 5.5 91 N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình 0.06 62.6c 0.09 64.4d 0.12 65.1d 0.15 65.0d B ng 0.44 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase vitamin C N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình i ch ng 428.3a 0.00 265.1b 0.06 264.4b 0.09 258.6b 0.12 258.6b 0.15 270.1b thay đ i (%) 15.9 19.3 20.5 20.4 đ n hàm l ng thay đ i (%) 0.0 -38.1 -38.3 -39.6 -39.6 -36.9 B ng 0.45 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng h p ch t phenolic N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 0.0 1431.6 b 0.00 1540.2 7.6 0.06 1636.7c 14.3 0.09 1672.7d 16.8 d 0.12 1673.9 16.9 d 0.15 1684.5 17.7 B ng 0.46 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích theo ph ng pháp FRAP N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 106.1 0.0 b 0.00 110.7 4.3 c 0.06 112.7 6.2 d 0.09 117.4 10.7 d 0.12 117.8 11.1 0.15 118.8d 12.0 92 B ng 0.47 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích theo ph ng pháp ABTS N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 28.8 0.0 b 0.00 31.6 9.4 c 0.06 33.7 16.8 d 0.09 34.8 20.6 d 0.12 35.0 21.3 d 0.15 34.7 20.4 B ng 0.48 nh h ng c a n ng đ ch ph m enzyme cellulase đ n hàm l ng đ ng t ng N ng đ cellulase (% w/w) S l n phân tích Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 47.8 0.0 0.00 50.0b 4.5 c 0.06 51.3 7.2 d 0.09 53.6 12.0 e 0.12 54.3 13.5 e 0.15 54.4 13.8 E.2 Th i gian x lý B ng 0.49 nh h ng c a th i gian x lý đ n hi u su t thu h i ch t chi t Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 53.9 0.0 b 56.8 5.3 20 62.9c 16.5 40 64.5d 19.7 d 60 65.3 21.1 d 80 65.4 21.2 B ng 0.50 nh h ng c a th i gian x lý đ n hàm l ng vitamin C Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 418.7 0.0 b 305.7 -27.0 c 20 267.7 -36.1 d 40 251.1 -40.0 e 60 231.2 -44.8 e 80 223.8 -46.6 93 B ng 0.51 nh h ng c a th i gian x lý đ n hàm l ng h p ch t phenolic Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 1416.9 0.0 1524.9b 7.6 c 20 1610.0 13.6 d 40 1648.7 16.4 d 60 1648.3 16.3 d 80 1650.7 16.5 B ng 0.52 nh h ng c a th i gian x lý đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp FRAP Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 102.2 0.0 b 106.4 4.2 c 20 109.3 7.0 40 111.6d 9.2 d 60 112.1 9.8 d 80 113.1 10.8 B ng 0.53 nh h ng c a th i gian x lý đ n ho t tính ch ng oxi hóa phân tích b ng ph ng pháp ABTS Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 86.3 0.0 b 94.3 9.3 c 20 103.9 20.4 c,d 40 104.2 20.8 c,d 60 104.6 21.1 d 80 104.9 21.5 B ng 0.54 nh h ng c a th i gian x lý đ n hàm l ng đ ng t ng Th i gian x lý enzyme (phút) S l n l p l i Giá tr trung bình thay đ i (%) a i ch ng 43.8 0.0 b 45.7 4.3 c 20 47.8 9.0 40 49.2d 12.2 60 49.5d 12.9 d 80 49.4 12.8 94 LÝ L CH TRÍCH NGANG H tên : Nguy n Võ Phú Thu n Ngày, tháng, n m sinh : 05/10/1985 N i sinh : a ch liên l c ng Tháp : 27, đ ng Lê Thúc Ho ch, Qu n Tân Phú, Tp HCM QUÁ TRÌNH ÀO T O i h c: 2003-2008 Cao h c: 2009-2011 Q TRÌNH CƠNG TÁC Công ty Tân Hi p Phát: 2008-2009 Tr ng Cao đ ng Ngh Tr ng ng Nai: 2009-2010 i h c Công nghi p: 2010 95 ... 10 1.3 K thu t siêu âm 11 1.3.1 nh ngh a 11 1.3.2 Tác đ ng c a sóng siêu âm 11 1.3.3 Các y u t 1.3.4 nh h ng đ n trình siêu âm 15 ng d ng k thu t siêu âm trích... nh nghĩa Sóng siêu âm sóng âm có t n s sóng l n h n 20 kHz (Feng c ng s , 2011) (Hình 1.3) 1.3.2 Tác đ ng c a sóng siêu âm 1.3.2.1 Tác đ ng v t lý Các tác đ ng v t lý c a sóng siêu âm di n m nh... ng d ng sóng siêu âm k t h p v i ch ph m cellulase đ t ng hi u su t thu h i ch t chi t s n xu t n c i” Chúng kh o sát tác đ ng c a trình x lý i b ng sóng siêu âm, enzyme k t h p siêu âm, enzyme;