SV Công nghệ kỹ thuật hóa học ĐHCT liên hệ anh tặng free: 0817.342.352 (zalo)
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP HĨA HỮU CƠ Giảng viên hướng dẫn : PGS TS Tôn Nữ Liên Hương Cần Thơ, 03/2019 Sinh viên thực hiên : Lê Thị Ngọc Dung Nguyễn Thanh Hoài Lê Thị Ái Ni Ngọc MSSV B1706362 B1706373 B1706402 B1706xxx Bài SỰ KẾT TINH - SỰ THĂNG HOA I Nguyên tắc lọc thường, lọc nóng, lọc áp suất kém: *Phương pháp lọc: Là phương pháp tách rời chất rắn không tan khỏi chất lỏng hay dung dịch Lọc thường: Lọc thường phương pháp lọc đơn giản chất cần lọc khơng bị phân hủy khơng khí bền nhiệt độ thường, tinh thể không lẫn tạp chất Dụng cụ gồm: Phễu thuỷ tinh, giấy lọc cốc đựng nước lọc Trước lọc nên làm ướt giấy lọc với nước cất Lúc lọc, nên đổ dung dịch vào giấy lọc theo đũa thủy tinh để tránh tinh thể bị phân tán nhiều thành giấy lọc Lọc áp suất kém: Lọc áp suất phương pháp để loại tạp chất cịn dính chất cịn sử dụng, cách dùng dung mơi lôi kéo áp suất thấp Phương pháp dùng để rút ngắn thời gian lọc Dụng cụ gồm có: Một phễu sứ (phễu buchner) bình lọc có vịi hệ thống tạo áp suất Dùng phễu Buchner, ta cho vào phễu tờ giấy lọc có đường kính nhỏ đường kính phễu trước đổ hỗn hợp vào phễu, nên dùng bình xịt nước cất dung môi (axeton, atanol ) vào giấy dính chặt vào đáy phễu Lọc nóng: Là phương pháp dùng để loại chất khơng tan cịn lại, phần sử dụng tiếp phần dung dịch (sau loại bỏ chất không tan) Để giữ dung dịch cịn đủ nóng nhằm tránh kết dính khơng xảy lọc, dùng phễu thủy tinh có đuôi ngắn dùng giấy lọc xếp trước Giấy lọc khơng ló khỏi miệng phễu tẩm ướt II Những bước trình kết tinh lại chất kết tinh Mục đích yêu cầu ưu khuyết điểm phương pháp này: *Phương pháp kết tinh lại: Là phương pháp dùng để tách chất rắn khỏi hỗn hợp chúng (có thể từ dung dịch bão hịa hay từ trạng thái nóng chảy) Nhưng chủ yếu dựa vào độ hịa tan chất cần kết tinh dung mơi nhiệt độ cao Khi làm nguội dung dịch độ hòa tan giảm, chất cần tinh chế tách khỏi dung dịch Phương pháp kết tinh lại gồm bước sau: Khi phản ứng kết thúc, sản phẩm thu thường khơng tinh khiết mà có lẫn nhiều tạp chất Nếu sản phẩm chất rắn, tinh chế phương pháp kết tinh lại, nghĩa hịa tan chất rắn dung mơi thích hợp cho kết tinh lại dạng tinh thể Hòa tan hợp chất dung mơi thích hợp nhiệt độ sơi (thường nhiệt độ sôi dung môi) Với lượng chất hịa tan xác định, lúc đầu cho dung mơi vừa phải, đun sơi sau tiếp tục bổ sung thêm dung mơi chất rắn tan hồn tồn Lọc nóng để loại bỏ tạp chất khơng tan Nếu cần, loại bỏ dung mơi trước cách bốc dung môi Tái tạo hợp chất cần tinh chế cách hạ nhiệt độ xuống thấp Tách hợp chất cần tinh chế khỏi dung mơi Mục đích u cầu: Dung mơi chọn phải đạt điều kiện sau: Hòa tan tốt chất cần tinh chế đun nóng chất khơng tan tan dung mơi lạnh Cịn tạp chất phải tan nhiều dung môi lạnh khơng tan dung mơi nóng Dung mơi có nhiệt độ sôi thấp để dễ dàng loại khỏi tinh thể Dung mơi khơng tương tác hóa học với chất cần tinh chế Tinh thể sau kết tinh phải tương đối tinh khiết Các tinh thể kết tinh đem lọc, làm khơ đo nhiệt độ nóng chảy phải gần với chất tinh khiết Ưu khuyết điểm phương pháp này: Ưu điểm Thông dụng, đơn giản, phổ biến, phương pháp có kết tinh sản phẩm từ chất rắn hay dung dịch bão hòa Quá trình kết tinh tiến hành lặp lặp lại từ - lần hay lần chất kết tinh đạt tinh khiết cao Dễ dàng tiến hành, trình kết tinh xảy tương đối nhanh Nhược điểm Trong suốt trình kết tinh địi hỏi phải quan sát kỹ, dễ gặp số khó khăn: nước lọc, dịch lọc, màu dung dịch, dung môi, cần phải xử lý thu sản phẩm tinh khiết Dung mơi chọn lựa khó khăn cần chọn lựa kỹ đủ điều kiện, hiệu suất thấp trình lọc bị rơi rớt, hay dung môi làm tan phần nhỏ chất tan vào dung dịch III Sự thăng hoa Ứng dụng thăng hoa vào việc tinh chế chất Ưu nhược điểm phương pháp: Sự thăng hoa: Những chất chuyển từ trạng thái rắn sang trạng thái khí mà khơng qua trạng thái lỏng gọi thăng hoa Áp dụng: Nguyên nhân thăng hoa áp suất chất rắn tăng theo nhiệt độ nên ta đun nóng đến nhiệt độ mà áp suất chất rắn áp suất bên ngồi chất rắn thăng hoa Áp dung tính chất người ta tinh chế chất có tính thăng hoa iot, naphtalen, axit benzoic, lưu huỳnh, antraquinon Vì áp suất phụ thuộc vào nhiệt độ áp suất bên ngồi nên người ta thăng hoa áp suất thấp chất có điểm thăng hoa cao Ưu nhược điểm phương pháp này: Ưu điểm Phương pháp thăng hoa giúp thu chất có độ tinh khiết cao Nhược điểm Quá trình xảy chậm hao phí sản phẩm nhiều, áp dung cho chất rắn có áp suất cao nhiệt độ thường tính bay chất rắn cần tinh chế phải khác so với tạp chất IV So sánh tonc acid benzoic trước sau kết tinh lại Nhiệt độ nóng chảy tonc acid salicilic hiệu suất trình: So sánh tonc acid benzoic trước sau kết tinh lại, hiệu suất: Nhiệt độ nóng chảy acid benzoic trước kết tinh lại 126,5oC Acid benzoic bắt đầu nóng chảy đến suốt có khoảng nhiệt độ từ 123 oC – 130oC Ta thấy, trường hợp chất khơng tinh khiết acid benzoic bắt đầu nóng chảy đến suốt có khoảng nhiệt độ Khoảng lớn, chất không tinh khiết Nhiệt độ nóng chảy acid benzoic sau kết tinh lại 124,5 oC Khối lượng acid benzoic ban đầu 0,5g, sau kết tinh lại 0,35g Vậy hiệu suất trình là: Nhiệt độ nóng chảy (tonc) acid salicilic hiệu suất q trình: Nhiệt độ nóng chảy acid salicilic trước thăng hoa 161,5oC Nhiệt độ nóng chảy acid salicilic sau thăng hoa 160oC Khối lượng acid salicilic ban đầu 0,5g, sau thăng hoa 0,207g Vậy hiệu suất trình là: Bài CÁC PHƯƠNG PHÂN LẬP VÀ TINH CHẾ HỢP CHẤT HỮU CƠ CHƯNG CẤT ĐƠN: CHƯNG CẤT NƯỚC I Nguyên tắc chưng cất đơn áp suất thường: Chưng cất phương pháp dùng để tách chất có nhiệt độ sơi khác Nhiệt độ sơi nhiệt độ mà áp suất chất lỏng áp suất khí Cịn có nghĩa chuyển lỏng thành hơi, sau ngưng tụ thành lỏng Các chất có nhiệt độ sôi nhỏ 150 0C bền với nhiệt độ, không bị phân hủy nhiệt độ sôi, nên chưng cất áp suất thường Nguyên tắc chưng cất áp suất thường: Phương pháp dùng để tách rời chất lỏng dễ bay khỏi chất rắn hay chất lỏng, khỏi tạp chất lỏng có nhiệt độ sơi cách xa từ 50 600C Đối với chất lỏng có nhiệt độ sơi nhỏ 180 0C ngưng tụ ống sinh hàn nước lạnh Đây q trình cho chất lỏng bay (sơi) áp suất thường Hơi chất lỏng bay qua ống sinh hàn (hệ thống làm lạnh) ngưng tụ lại thành chất lỏng tinh khiết Truờng hợp chất lỏng có chất bay cịn chất khác khơng bay cần chưng cất lần, với tốc độ - giọt/giây chất lỏng thu đạt độ tinh khiết cao Để chưng cất, dùng hệ thống chưng cất có lấp đặt nhiệt kế, cho phần bầu thủy ngân thấp miệng ống nhánh dẫn bình cầu khoảng 0,5cm Chất lỏng bình nên chiếm 2/3 thể tích bình II Kết đo chiết suất trước sau chưng cất nước hồ, nhiệt độ sôi nước hồ: Chỉ số khúc xạ nước trước chưng cất: 1.334 Chỉ số khúc xạ nước sau chưng cất: 1.332 Chỉ số khúc xạ nước nguyên chất: 1.333 Nhiệt độ sôi nước: 99oC Sở dĩ có sai lệch nước nguyên chất so với nước sau chưng cất do: nước chưa nguyên chất trình chưng cất chưa đúng, sai vị trí lấp nhiệt kế, đun lửa gây tượng nhiệt, sai số trình đo số khúc xạ nước Bài PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT CHIẾT XUẤT CAFEIN TỪ TRÀ I Nguyên tắc chiết: Chiết chất lỏng: Chiết trình chuyển chất dạng hịa tan hay huyền phù từ pha lỏng sang pha lỏng khác Quá trình chiết kết thúc chất dã chiết hết Kiểm tra màu hay sắc ký *Nguyên tắc chọn dung mơi Dung mơi phải chọn dung mơi có khả hịa tan lớn dung mơi cũ Dễ tách tinh chế lại thành chất tinh khiết khơng trộn lẫn vào dung mơi cũ Có khác biệt nhiều tỉ khối so với dung mơi cũ Ít có khả tạo nhũ nguy hiểm Có nhiệt độ sơi thấp sau chiết ta thường dùng phương pháp chưng cất để tách dung mơi Sử dụng bình lóng: Trước hết khóa kín bình, đổ dung dịch vào, cho dung mơi vào bình đựng dung mơi, thường dùng từ 1/5 – 1/3 thể tích dung dịch Đậy nút, tay phải giữ nắp bình, tay trái giữ khóa bình, lắc nhẹ cẩn thận, đảo ngược nhiều lần Khi lắp áp suất bình tăng lên nên mở khóa bình để cân áp suất với bên ngồi, sau đóng khóa lại, tiếp tục lắc Khi lắc xong, để bình giá, mở nắp đậy chờ dung dịch tách thành hai lớp Mở khóa bình cho lớp chất lỏng phía chảy xuống, cịn lớp lấy cách đổ qua miệng bình *Chú ý: Nếu sau lắc lắng, không thấy chất lỏng phân riêng mà tạo nhũ tương lúc ta thêm dung dịch NaCl bão hòa tinh khiết vào tách thành hai lớp chất lỏng II Làm khan chất lỏng Những điểm cần lưu ý: Đây phương pháp loại nước dung môi khỏi sản phẩm hóa chất ban đầu Các chất P4O10, H2SO4 đặc, CaCl2, MgSO4, Na2SO4 chất làm khơ mạnh Người ta cịn chia chất làm khô thành loại: Acid P 4O10, H2SO4 đặc ; bazơ KOH, NaOH viên chất làm khơ trung tính: MgSO 4, Na2SO4 tùy theo tính chất đối tượng làm khơ mà người ta chọn chất làm khơ thích hợp theo ngun tắc không làm biến chất chất làm khô tính chất vật lý lẫn hóa học Chất làm khô phải thỏa mãn điều kiện sau: Không có tác dụng hóa học với chất lỏng Có khả hút nước mạnh Khơng hịa tan chất lỏng Có tác dụng làm khơ nhanh *Chú ý: Cho vào chất lỏng không hút nước lượng q lớn chất làm khơ dạng rắn dùng nhiều hao hụt chất lỏng, sau loại chất làm khơ, dùng dung mơi thay chất làm khô III Phương pháp loại trừ dung môi máy quay: Dùng để tách chất có nhiệt độ sôi cao dễ bị phân hủy nhiệt độ sôi áp suất thường *Điểm cần ý: Khi sử dụng dụng cụ thủy tinh cổ nhám ta phải bôi vasaline để bơi trơn tránh làm vỡ bình Khi lắp xong, kiểm tra lại độ kín hệ thống cách cho máy hoạt động so sánh với áp suất thấp đạt hệ thống kín Sở dĩ ta thu ethylacetat nhiệt độ 40 - 50 0C theo qui tắc thực giảm áp suất nhiệt độ sơi giảm 15 0C, mà nhiệt độ sôi ethylacetat khoảng 77,10C IV Công thức caffein – Kết thực tập: 1.Công thức caffein: Công thức phân tử: C4H10O2N4 Công thức cấu tạo: H3C O O CH3 N N N N CH3 Hiệu suất q trình chiết thơ Bài ĐỊNH TÍNH CÁC NHĨM CHỨC ALCOL, PHENOL, ALDEHYDE, CETON, ACID, ESTER I Các loại thuốc thử: Điều chế thuốc thử Lucas: Hóa chất điều chế: dung dịch HCl đậm đặc, muối ZnCl2 khan Ứng dụng: thuốc thử dùng để phân biệt rượu bậc 1, bậc 2, bậc Bậc 1: điều kiện thường không phản ứng, dung dịch suốt Bậc 2: nhiệt độ thường phản ứng chậm Bậc 3: nghiệt độ thường phản ứng nhanh, sau dung dịch đục Ví dụ: OH H3C C Cl CH3 + HCl HClđđ ZnCl2 H3C CH3 H3C CH + HCl OH CH2 CH3 + H2O CH3 HClđđ ZnCl2 H3C CH3 H3C C CH Cl + H2O CH3 CH2OH + HCl HClđđ t0 ZnCl2 H3C CH2 CH2Cl + H2O Điều chế thuốc thử Fehling: Hóa chất điều chế: dung dịch CuSO4, muối K - Na tactrate môi trường kiềm mạnh Ứng dụng: dùng để định lượng định tính aldehyde, glucozo máu, thực phẩm, dược phẩm Ví dụ: COOK COOK OCH CHO COONa H Cu CHO OCH H COONa CHOH + RCHO + 2H2O COOK RCOOH + Cu2O + CHOH COONa Thuốc thử Tollens: Hóa chất ứng dụng: 2ml dd AgNO3 2% + giọt dd NaOH 10% Sau vừa lắc vừa nhỏ từ từ giọt dd NH4OH -3% đến kết tủa AgOH vừa biến Thuốc thử dùng để định tính định lượng aldehyde, dùng để phân biệt aldehyde với ceton Ví dụ: HCOONH4 + 2Ag + NH3 + H2O HCHO + [Ag(NH3)2OH] II Môi trường thuốc thử Lucas Tollens: Trong phản ứng với thuốc thử Lucas, alcol thể tính bazơ alcol có tính acid yếu Do thuốc thử Lucas hỗn hợp HCl đậm đặc với ZnCl khan làm tăng khả phản ứng alcol với HCl rượu bậc Rửa ống nghiệm trước dung dịch NaOH trước tiến hành thí nghiệm với thuốc thử Tollens trình thực phản ứng tráng gương: Vì thuốc thử Tollen AgNO3 NH4OH có tính oxi hóa yếu, tác dụng với chất có tính khử mạnh như: Aldehyde phản ứng thực môi trường kiềm tạo phức [Ag(NH3)2]OH, mặt khác dùng NaOH để rửa ống nghiệm mà không làm ảnh hưởng đến tính thuốc thử HCOONH4 + 2Ag + NH3 + H2O HCHO + [Ag(NH3)2OH] Phản ứng alcol đa chức với Cu(OH) cần có mơi trường kiềm Polyalcol có tính acid ảnh hưởng qua lại hai nhóm -OH kế cận chúng tác dụng với số hidroxit kim loại tạo phức màu xanh thẫm đặc trưng CH2OH CHOH CH2O CHO + Cu(OH)2 H CH2OH CH2OH OCH2 Cu H OCH + 2H2O CH2OH Dung dịch Fehling với đồng phức Cu 2+ với muối Na - K tactrate Các aldehyde khử Cu2+ Dùng Fehling tốt Cu(OH)2 Cu2+ Cu(OH)2 khơng tồn dạng ion tự mà tồn tủa, aldehyde khó khử III Định tính Phenol: Phenol có phản ứng màu đặc trưng với FeCl tạo thành hợp chất kiểu ROFeCl 2, hợp chất cho ion nhuộm ROFe2+, phương trình: 6ArOH + FeCl3 [Fe(OAr)6]3- + 6H+ + 3Cl- Phản ứng Phenol với FeCl3 cho màu tím Nếu thêm tiếp C2H5OH phản ứng trở nên nhạy Nhưng thêm HCl 2N vào trở nên màu quan sát thấy có kết tủa trắng xuất hiện, lúc nồng độ HCl tăng lên cân dịch chuyển theo chiều ngược lại IV Định tính aceton: Các aldehyde ceton ngưng tụ với 2,4-dinitrophenylhidrazin tạo thành 2,4-dinitrophenylhidrazol tương ứng tách dạng vàng sáng đỏ, tan nước Chúng chất dễ kết tinh có nhiệt độ nóng chảy xác định R C H2N O + NO2 NH R C R' N NO2 NH R' NO2 NO2 Cho aceton vào dung dịch NaHCO3 ta thấy tinh thể rắn tách Do tạo phản ứng: OH H3C C CH3 H3C NaHSO3 + C O SO3Na CH3 Cho aceton tác dụng với I2/KI NaOH: Quan sát ta thấy kết tủa màu vàng xuất xảy phản ứng: I2 + NaOH HIO + NaI HIO + NaOH NaOI + H2O H3C C CH3 + 3NaOI H3C C CI3 H3C O C CI3 + NaOH H3C O C ONa O + + 3NaOH CHI3 vàng O Từ kết thực nghiệm ta thấy phân biệt aceton diphenyl ceton phản ứng I2/KI NaOH tạo kết tủa màu vàng V Ester phản ứng nó: Khi cho acid acetic tác dụng với NaHCO ta thấy xuất sủi bột khí xảy phản ứng: CH3COOH + NaHCO3 CH3COONa + H2O + CO2 Những hóa chất để điều chế ethyl acetat CH 3COOH, C2H5OH, acid vô sau phản ứng ta ngửi mùi dứa Cơ chế phản ứng: H3C C H+ OH H3C O C C2H5OH OH H5C2 H3C +OH O+H C H3C C+ OC2H5 H3C OH OH C OH OH OC2H5 H3C O+ H C OC2H5 + H+ O Khi cho NH2OH.HCl vào ethylacetat trung hịa NaOH lỗng ta thấy có tượng tách lớp Làm nguội acid hóa vài giọt FeCl có tượng xuất phức màu đỏ máu Do xảy phản ứng: CH3COOC2H5 + NH2OH CH3CONHOH + C2H5OH [CH3CONHO-]3Fe + 3HCl CH3CONHOH + FeCl3 VI Điều chế xà phòng: Dầu dừa ester glixerin acid béo cao (acid stearic, palmitic, oleic, ) Khi thủy phân dầu dừa dung dịch NaOH ta thu glixerin muối acid béo gọi xà phòng CH2COOR1 CHCOOR2 CH2COOR3 ddNaOH CH2OH t0 CHOH R1COONa + R2COONa R3COONa CH2OH Khi cho dung dịch lỏng sau phản ứng xà phòng ta phản ứng với Cu(OH) thấy xuất phức màu xanh thẫm đặc trưng Do phản ứng: CH2OH CHOH CH2OH CH2O + Cu(OH)2 CHO H CH2OH OCH2 Cu H OCH + 2H2O CH2OH Khi cho xà phòng điều chế vào nước cất đun nóng ta thấy xà phịng tan hết Sau cho CaCl2 vào quan sát ta thấy kết tủa trắng vón lại xảy phản ứng: 10 RCOONa 2RCOOH + H2O t0 RCOOH + CaCl2 + (RCOO)2Ca + NaOH (1) 2HCl (2) Xà phịng hoạt tính nước cứng nước cứng có ion Ca 2+ Mg2+ tác dụng với muối acid béo phản ứng tương tự (1),(2) Bài PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ SẮC KÝ CỘT 1.Nguyên tắc phương pháp sắc ký cột hấp thụ: Dựa vào phân bố khác pha tĩnh pha động để tách cấu tử hóa học khỏi hỗn hợp Pha tĩnh cột nhồi, pha động dung môi hữu di chuyển ngang qua So sánh kiểu sắc ký hấp phụ sắc ký phân bố: *Sắc ký phân bố: Pha tĩnh lớp chất lỏng thật mỏng hấp phụ lên bề mặt chất mang rắn, trơ Pha động chất lỏng (sắc ký phân bố lỏnglỏng) chất khí (sắc ký khí) Trong hai trường hợp, tách tùy thuộc nhiều vào dung dịch chất hai pha Trên thực tế, trình phức tạp có tác động qua lại việc cấu tử hấp phụ lên chất mang việc tách cấu tử suốt q trình sắc ký *Sắc ký hấp phụ: Pha động thường chất lỏng rắn chất hấp phụ rắn, nhuyễn Việc tách dựa vào hấp phụ có chọn lọc số chất hỗn hợp lên bề mặt chất rắn (sắc ký rắn - lỏng: dung dịch trao đổi ion để tách hợp chất có tính acid bazơ amino acid amino-phenol) Các yếu tố ảnh hưởng đến khả tách: *Tiêu chuẩn đinh lượng cột sắc ký mẫu chất: Thông thường trọng lượng chất hấp phụ phải nặng gấp 25 - 50 lần trọng lượng mẫu chất cần sắc ký cột sắc ký cần có kích cỡ chiều cao phần chất hấp phụ cột sắc ký so với đường kính cột sắc ký cần thỏa tỷ lệ chiều cao: đường kính 8:1 *Cách chọn chất hấp phụ: Lựa chọn chất hấp phụ tùy theo loại mẫu chất cần phân tách sắc ký cột Cenllulozơ, tinh bột, đường, dùng cho nguyên liệu có nguồn ngốc thực vật, có chứa nhóm chức nhạy cảm với tương tác acid, bazơ Silicat mangne dùng để tách chất đường , tinh dầu, 11 Silicagel, alumin, florisil loại sử dụng rộng rãi, áp dụng cho nhóm chức như: hidrocacbon, alcol, ceton, ester, acid cacboxilic, hợp chất azo, amin, Các chất hấp phụ thường dùng alumin, silicagel với kích cỡ hạt gel 70 290 mesh giúp cho việc nhồi cột tương đối chặt đạt vận tốc giải ly vừa phải tác động sức hút trọng lực *Chọn dung môi giải ly: Lựa chọn dung mơi hịa tan mẫu chất cần sắc ký Nếu mẫu chất dạng dung dịch chẳng hạn dung dịch trích ly từ cỏ phải làm bay dung dịch đến khơ áp suất thấp hịa tan mẫu trở lại với lượng tối thiểu dung mơi phân cực Dung dịch đậm đặc tạo thành dãy băng sắc mỏng cột giúp cho trình tách ly hiệu Thường dùng, dung môi phân cực hịa tan mẫu chọn làm dung môi để nạp chất hấp phụ vào cột dung mơi q trình giải ly Dung môi dùng để giải ly phải dung môi tinh khiết, chưng cất lại trước sử dụng, đặc biệt dung môi hidrocacbon loại dễ cho nhiều cặn loại dung môi khác Thường ta bắt đầu dung môi không phân cực để loại cách tương đối hợp chất không phân cực khỏi cột kế dung mơi giải ly tăng dần độ phân cực để đuổi hợp chất có tính phân cực Muốn thay đổi dung mơi có tính phân cực phải thay đổi từ từ cách cho thêm vào lần vài phần trăm lượng dung mơi có tính phân cực vào dung môi giải ly, tăng từ từ đến đạt nồng độ mong muốn *Vận tốc giải ly: Lượng thời gian để mẫu chất cần phân tích sắc ký cột đạt cân pha động pha tĩnh - nhờ chất khác hỗn hợp tách riêng, phụ thuộc vào vận tốc giải ly Vận tốc giải ly nhanh, dung dịch chất hỗn hợp chưa có đủ thời gian để tạo cân với chất hấp phụ chúng ngang cột Vận tốc giải ly chậm nhanh việc tách chất khỏi hỗn hợp khó Đa số trường hợp, vận tốc giải ly nằm khoảng 5-50giọt/phút Phương pháp nhồi cột nạp mẫu: *Phương pháp nhồi cột: Đặt lớp bơng gịn dày 2-3 mm đáy cột để giữ cho chất hấp phụ không tuộc khỏi cột Cho dung môi không phân cực vào cột, chuẩn bị chất hấp phụ để nạp cột theo hai phương pháp: Phương pháp sệt: Chất hấp phụ nạp vào cột dạng sệt 12 Phương pháp khô: Cột đổ đầy dung môi, vừa cho dung môi chảy chầm chậm bên vừa cho chất hấp phụ vào cột đến đạt chiều cao cần thiết ngừng *Phương pháp nạp mẫu vào đầu cột: Mở khóa cột để hạ mực dung môi sát với mực chất hấp phụ, khóa cột lại, cho dung dịch mẫu vào, mở khóa để hạ mức dung dịch mẫu gần sát với mặt thống chất hấp phụ Cho dung mơi vào cột để tiến hành giải ly *Thử tính phân cực tăng dần số dung môi thường dùng: Ester dầu hỏa, hexan, ciclohexan, cacbo tetraclorur, diclorometan, clorofrom, eter diethyl, etyl acetat, aceton,pyridin,propanol, metanol, nước, acid acetic Ứng dụng phương pháp sắc ký cột: Sắc ký cột phương pháp đại, tinh vi để tách cấu tử hóa học khỏi hỗn hợp chúng Nếu lựa chọn điều kiện (chất hấp phụ, dung mơi giải ly, kích thước cột, ) ta tách hầu hết chất hỗn hợp Chẳng hạn, ta tách riêng sắc tố màu xanh từ dịch chiết ban đầu Kết thực nghiệm: Sắc tố β-caroten màu vàng di chuyển nhanh khỏi cột trước Sau dãy màu vàng khỏi cột thay hệ dung môi ta thấy dãy màu xanh lục bắt đầu di chuyển xuống cột kết ta thu sắc tố β-caroten màu vàng chlorophil màu xanh lục Công thức phân tử β-caroten: CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H3C CH3 CH3 CH3 CH3 Lúc đầu ta dùng dung mơi eter dầu hỏa để giải ly ta thu sắc tố β-caroten màu vàng Sau dãy màu vàng khỏi cột thay hệ dung mơi dùng hệ eter dầu hỏa-acetat etyl 7:3 thu sắc tố chlorophil màu lục Với dung môi giải ly cho thấy sắc tố β-caroten chất không phân cực Hợp chất không phân cực di chuyển nhanh giải ly khỏi cột trước, chất phân cực di chuyển chậm Vì ta thu chlorophil sau βcaroten Chlorophyl a: C55H72O5N4Mg Chlorophyl b: C55H70O6N4Mg 13 14 ... ethylacetat nhiệt độ 40 - 50 0C theo qui tắc thực giảm áp suất nhiệt độ sơi giảm 15 0C, mà nhiệt độ sôi ethylacetat khoảng 77,10C IV Công thức caffein – Kết thực tập: 1.Công thức caffein: Công thức phân... 0,5g, sau thăng hoa 0,207g Vậy hiệu suất trình là: Bài CÁC PHƯƠNG PHÂN LẬP VÀ TINH CHẾ HỢP CHẤT HỮU CƠ CHƯNG CẤT ĐƠN: CHƯNG CẤT NƯỚC I Nguyên tắc chưng cất đơn áp suất thường: Chưng cất phương pháp... với thuốc thử Tollens trình thực phản ứng tráng gương: Vì thuốc thử Tollen AgNO3 NH4OH có tính oxi hóa yếu, tác dụng với chất có tính khử mạnh như: Aldehyde phản ứng thực môi trường kiềm tạo phức