Tóm tắt: Cá rô phi là một trong năm đối tượng nuôi chủ lực của Việt Nam, nhu cầu về nguồn giống chất lượng tốt, số lượng lớn đặt ra rất cấp bách. Cá rô phi đực có tốc độ tăng trưởng vượt trội hơn hẳn cá rô phi cái.Nhiều nghiên cứu chuyển giới tính cá rô phi thành cá rô phi toàn đực (đực hóa) đã được áp dụng tại Việt Nam như công nghệ đực hóa cá rô phi bằng phương pháp cho cá bột ăn thức ăn trộn hormone 17αMethyltestosterone (MT) trong 21 ngày tuổi; công nghệ đực hóa cá rô phi bằng phương pháp ngâm cá bột trong nước có pha MT. Tuy nhiên các công nghệ này chưa đáp ứng được thực tế sản xuất hàng hóa. Vấn đề đặt ra là cần phải cải tiến công nghệ đực hóa cá rô phi bằng phương pháp ngâm trong nước có pha MT để tăng hiệu quả sản xuất đáp ứng nhu cầu con giống của thị trường. Nghiên cứu cải tiến quy trình đực hóa các rô phi, trong đó mật độ ngâm cá bột được tăng lên gấp đôi, nồng độ MT tăng 1,5 lần, thời gian ngâm giảm xuống còn 1 giờ trong điều kiện ổn định nhiệt độ 32oC. Kết quả nghiên cứu đã nâng tỷ lệ cá đực lên 94,7 %, gần bằng tỉ lệ đực trung bình của phương pháp cho ăn thức ăn trộn MT liên tục trong 21 ngày (95%). So với những phương pháp trước đây, phương pháp này đã rút ngắn quy trình thực hiện, giảm chi phí sản xuất, tăng tỷ lệ sống, đồng thời nâng cao sản lượng và chất lượng cá giống.
CẢI TIẾN QUY TRÌNH ĐỰC HĨA CÁ RƠ PHI (Oreochromis niloticus) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NGÂM TRONG NƯỚC CÓ PHA HORMONE 17α-METHYLTESTOSTERONE ThS Vũ Cơng Tâm1, Nguyễn Đức Trường2 Tóm tắt: Cá rô phi năm đối tượng nuôi chủ lực Việt Nam, nhu cầu nguồn giống chất lượng tốt, số lượng lớn đặt cấp bách Cá rơ phi đực có tốc độ tăng trưởng vượt trội hẳn cá rô phi Nhiều nghiên cứu chuyển giới tính cá rơ phi thành cá rơ phi tồn đực (đực hóa) áp dụng Việt Nam cơng nghệ đực hóa cá rơ phi phương pháp cho cá bột ăn thức ăn trộn hormone 17α-Methyltestosterone (MT) 21 ngày tuổi; công nghệ đực hóa cá rơ phi phương pháp ngâm cá bột nước có pha MT Tuy nhiên cơng nghệ chưa đáp ứng thực tế sản xuất hàng hóa Vấn đề đặt cần phải cải tiến cơng nghệ đực hóa cá rơ phi phương pháp ngâm nước có pha MT để tăng hiệu sản xuất đáp ứng nhu cầu giống thị trường Nghiên cứu cải tiến quy trình đực hóa rơ phi, mật độ ngâm cá bột tăng lên gấp đôi, nồng độ MT tăng 1,5 lần, thời gian ngâm giảm xuống điều kiện ổn định nhiệt độ 32oC Kết nghiên cứu nâng tỷ lệ cá đực lên 94,7 %, gần tỉ lệ đực trung bình phương pháp cho ăn thức ăn trộn MT liên tục 21 ngày (95%) So với phương pháp trước đây, phương pháp rút ngắn quy trình thực hiện, giảm chi phí sản xuất, tăng tỷ lệ sống, đồng thời nâng cao sản lượng chất lượng cá giống Từ khóa: Cá rơ phi, đực hóa, ngâm cá bột ĐẶT VẤN ĐỀ Cùng với tôm sú, tôm chân trắng, cá tra nhuyễn thể, cá rô phi coi đối tượng nuôi chủ lực Việt Nam, không đáp ứng nhu cầu thị trường nội địa mà để xuất Bởi vậy, nhu cầu nguồn giống chất lượng tốt, số lượng lớn đặt cấp bách Khoa Thủy sản – Trường Đại học Hạ Long Trung tâm khoa học kỹ thuật sản xuất giống thủy sản Quảng Ninh Cá rô phi đực có tốc độ tăng trưởng kích cỡ thương phẩm lớn cá Từ đó, nhà khoa học nghiên cứu sản xuất giống cá rô phi đơn tính đực cách chuyển giới tính thành đực (cịn gọi đực hóa) với mong muốn đạt tỉ lệ gần tuyệt đối (100% cá đực) Cá rơ phi đơn tính đực khơng sinh sản, không tạo đàn cá cạnh tranh thức ăn môi trường sống với đàn cá nuôi thương phẩm, làm tăng rõ rệt hiệu nuôi cá rô phi thương phẩm Cá rơ phi có q trình biệt hóa giới tính đặc biệt, lợi dụng đặc điểm này, nhà khoa học dùng hormone sinh dục đực để tác động lên q trình biệt hóa giới tính theo chiều hướng biệt hóa giới tính đực để thu hệ tồn đực Thời điểm biệt hóa giới tính chưa xác định xác Qua nghiên cứu thực nghiệm, nhà khoa học thấy rằng: cho cá ăn thức ăn trộn hormone sinh dục đực vịng 21 ngày tuổi thu đàn có tỷ lệ đực cao Nội dung phương pháp gồm bước: Thu trứng miệng cá mẹ phương pháp thủ công - Ấp trứng khay - ngày chuyển sang ương 21 ngày giai trước chuyển đến tay người nuôi Phương pháp này, cho tỉ lệ cá rô phi đực cao, trung bình 95% hạn chế phải thường xuyên thu trứng cá miệng cá mẹ, ảnh hưởng đến sức sinh sản cá bố mẹ; cách thức tiến hành phức tạp, dẫn đến chi phí nhân cơng cao, chi phí thức ăn, hormone lớn, cá chậm lớn, tỉ lệ sống thấp phải ương giai đến 21 ngày tuổi, thời gian sản xuất dài, sản lượng giống thấp, không phù hợp với phương thức sản xuất hàng hóa Một số nghiên cứu nhằm cải tiến phương pháp dùng hormone qua đường thức ăn gây tốn thời gian tiền bạc thực Trong có phương pháp ngâm cá nước có pha hormone 17α-Methyltestosterone Một số cơng trình trước cho thấy, mật độ cá xử lý thấp (60 con/l Lê Ngọc Thảo, 2008) hay phải xử lý nhiều lần đàn cá, việc ngâm thực dụng cụ chứa nước lớn, chiếm diện tích cần sử dụng điện để sục khí (Lê Ngọc Thảo, 2008), thời gian xử lý dài (2-9 ngày) sử dụng nhiều MT (5, 10 mg/l) (Lê Văn Thắng Phạm Anh Tuấn, 2000) Cơng trình Nguyễn Tường Anh (khoa Sinh, Đại học Khoa học Tự nhiên Tp.HCM) nâng cao mật độ xử lý lên 500 con/lít, tỉ lệ sống đạt cao (100% sau ngâm 95,89% sau ương nuôi 90 ngày sau nở) Tuy nhiên, mật độ xử lý 500 con/lít cịn thấp so với khả ứng dụng vào thực tiễn, tỉ lệ đực đạt không cao, trung bình 84,44 - 86,67% Do khơng thể sản xuất đàn cá rô phi 100% đực cho dù áp dụng phương pháp riêng lẻ hay kết hợp nhiều phương pháp với Trong thực tế sản xuất, giải pháp đơn giản, hiệu mang lại lợi ích kinh tế cao, đạt tỷ lệ đực tương đối cao lựa chọn Có thể thấy, phương pháp đực hóa cá rơ phi cách ngâm túi PE chứa nước pha hormone 17α-Methyltestosterone có bơm oxy đề xuất tốt cải thiện tỷ lệ đực lên gần 95% nâng cao hiệu ngâm cách tăng mật độ ngâm để giảm chi phí hormone Tăng mật độ ngâm: Bơm oxy lắc túi đảm bảo cho cá bột khơng bị chết MT làm cản trở oxy hịa tan nước Lắc túi làm tăng khả hòa tan oxy nước giống vận chuyển cá giống có bơm oxy, khơng lắc túi dù có bơm oxy, cá giống bị chết Do vậy, tăng mật độ ngâm cá lên giảm thời gian ngâm lắc túi thường xuyên Như vậy, vấn đề phải giải tăng tỷ lệ đực hóa lên gần 95% Khi steroid (MT) tiếp xúc với tế bào màng tế bào có cấu tạo lipid nên steroid (MT) dễ dàng xuyên qua màng tế bào để vào tế bào, vào hệ tuần hoàn thể cá Trong hệ tuần hoàn steroid (MT) liên kết với protein chuyên chở (Carrier protein) nên khắp nơi Ngồi ra, steroid có khả liên kết khơng đặc hiệu với protein nên giữ lại mơ có protein cá Hơn nữa, liên kết steroid (MT) với lipid, protein xảy giây tiếp xúc Vì thế, ngâm cá nước có pha steroid (MT) cần thời gian ngắn steroid xâm nhập vào thể cá Nó tích lũy thể cá, chờ đến biệt hoá tuyến sinh dục liên kết với thụ thể phát huy hiệu Cũng testosteron, MT steroid có khả xuyên màng tế bào tác dụng lên ADN (một đoạn nhiễm sắc thể nhân tế bào) Trong q trình biệt hóa giới tính, MT làm tác động theo hướng biệt hóa giới tính đực thay biệt hóa giới tính Như vậy, thời gian ngâm cá khơng quan trọng, giảm xuống giờ, mấu chốt lượng hormone ngấm qua màng tế bào vào thể cá phải đủ để đạt hiệu cao q trình biệt hóa giới tính Một yếu tố quan trọng để trình sinh hóa xảy nhanh, mạnh nhiệt độ nồng độ Có thể tăng nồng độ hormone nhiệt độ lên giá trị thích hợp để tăng hiệu đực hóa cá rơ phi lồi rộng nhiệt, chịu ngưỡng nhiệt độ dao động từ 11 – 42 oC (Balarin, J D., R.D Haller,1982) Chúng tăng nồng độ MT lên gấp 1,5 lần so với nồng độ MT sử dụng cơng nghệ Nguyễn Tường Anh, đồng thời thí nghiệm mật độ ngâm cá bột nhiệt độ khác để tìm nghiệm thức tối ưu VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Chuẩn bị vật liệu Cá thu hoạch ao ghép cặp cá bố mẹ cho sinh sản tự nhiên ao Hàng ngày, thu cá giai đoạn 8-14 ngày tuổi sau nở (Hình 1) Thời gian thu hoạch vào sáng sớm chiều tối Đẻ Nở 14 ngày sau nở Biết ăn Ngâm 1h dung dịch MT 21 ngày xử lý cách cho ăn thức ăn trộn MT 1-2 4-9 10 11-16 17 18 19-30 31 32 Hình 1: Thời điểm thu cá thời gian ngâm dung dịch MT Các vật liệu khác bao gồm túi PE kích thước 110x60 cm, dây cao su buộc miệng túi, bình oxy, bể xi măng chứa nước nâng nhiệt, heater nâng nhiệt, cân kỹ thuật, hormone 17α-Methyltestosterone, cồn 96o 2.2 Phương pháp ngâm Chuẩn bị dung dịch MT: Pha A mg MT lít cồn, nồng độ a mg/ml Chuẩn bị túi PE kích thước 110 cm x 60 cm, cho 10 lít nước vào túi, thêm 10.000 cá bột (8-14 ngày tuổi), thêm 50 ml cồn MT, bơm 25 lít oxy (khuấy, đuổi khơng khí khỏi túi trước bơm oxy), buộc chặt túi (túi căng trịn), tính (lắc thường xuyên túi), sau thả cá ao bể ương nuôi (cho nước vào túi để cá thoát từ từ) Cá sau ngâm, chuyển ương ao đất, giai bể lọc sinh học cho ăn thức ăn không trộn hormone, làm cho cá tăng trưởng nhanh, tỉ lệ sống cao, giảm thời gian xuất bán cá giống thị trường (không cần phải chờ cho ăn đủ 21 ngày thức ăn trộn hormone) 2.3 Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm 1: Nghiên cứu tìm nhiệt độ mật độ tối đa ngâm cá bột nước có pha hormone Một trở ngại việc tăng nồng độ hormone, tăng nhiệt độ khả hòa tan oxy nước giảm, tăng mật độ cá tăng mức tiêu hao oxy, ảnh hưởng đến tỉ lệ sống cá bột Thí nghiệm tăng nồng độ hormone lên 1,5 lần so với công nghệ Nguyễn Tường Anh Tăng nhiệt độ ngâm hormone lên nhiệt độ nước cao năm Cần tìm ngưỡng nhiệt độ mật độ thích hợp để đảm bảo cá bột sau ngâm giờ, tỷ lệ sống đạt 100% Thí nghiệm bố trí sau: Dùng heater nâng nhiệt bể nước, bể trì nhiệt độ 30 oC, bể trì nhiệt độ 32oC, bể trì nhiệt độ 34oC Thu cá bột 14 ngày tuổi sau nở, ngâm nước có pha hormone Cá bột đóng túi PE có bơm oxy, thể tích nước túi lít nước, bơm 12,5 lít oxy, đảm bảo túi căng tròn để tăng hàm lượng oxy hòa tan nước Cứ phút quan sát cá túi, thời gian ngâm tối đa giờ: (Ghi kết quan sát thời gian xuất cá bột chết túi theo bảng sau) Thông số kỹ thuật Ghi thời gian xuất có cá bột chết túi STT Túi 1 30 500 2 30 750 3 30 1.000 4 30 1.250 5 32 500 6 32 750 7 32 1.000 8 32 1.250 9 34 500 10 10 34 750 11 11 34 1.000 12 12 34 1.250 Nhiệt độ (oC) Mật độ (con/lít) Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nhiệt độ mật độ đến hiệu đực hóa Thí nghiệm bố trí sau: Dùng heater nâng nhiệt bể nước, bể trì nhiệt độ 30 oC, bể trì nhiệt độ 32oC, bể nhiệt độ nước bình thường 28oC Thu cá bột 14 ngày tuổi sau nở, ngâm nước có pha hormone Cá bột đóng túi PE có bơm oxy, thể tích nước túi lít nước, bơm 12,5 lít oxy, đảm bảo túi căng tròn để tăng hàm lượng oxy hòa tan nước Cứ phút lắc túi lần để tăng hàm lượng oxy hòa tan nước Ngâm giờ, đưa cá ương giai, sau thời gian 2,5 tháng, kiểm tra giới tính sớm để tính toàn kết ghi vào bảng sau: STT Túi 10 11 12 13 14 15 16 17 18 1a 1b 1c 1d 1e 1f 2a 2b 2c 2d 2e 2f 3a 3b 3c 3d 3e 3f Thông số kỹ thuật Nhiệt Mật độ độ (con/lít) (oC) 30 500 30 500 30 500 30 1.000 30 1.000 30 1.000 32 500 32 500 32 500 32 1.000 32 1.000 32 1.000 28 500 28 500 28 500 28 1.000 28 1.000 28 1.000 Tỷ lệ đực (%) Tỷ lệ đực trung bình (%) (Dựa vào kết kiểm tra giưới tính sớm sau 2,5 tháng ương) 2.4 Phương pháp kiểm tra giới tính sớm Mục đích: Kiểm tra giới tính sớm để biết tỷ lệ đực cá giống Dụng cụ bao gồm kính hiển vi có độ phóng đại x 40, đồ giải phẫu cá, hộp lame, chai lọ giữ mẫu Hóa chất bao gồm dung dịch formaline để cố định mẫu, dung dịch acetocarmine (dung dịch carmine bão hòa acid acetic 45% dùng để nhuộm mẫu tươi) Chuẩn bị dung dịch carmine sau: Thêm 0,5 g carmine vào 100 ml acetic acid 45% sau đun sơi dung dịch khoảng 2-3 phút để nguội, lọc qua giấy lọc để loại bỏ cặn Có thể xác định giới tính cá cá đạt 2,5 tháng tuổi (cỡ 3-4 cm) mẫu tươi hay mẫu cố định formaline với số lượng mẫu khảo sát tối thiểu 100 cá Giải phẫu cá lấy mảnh tuyến sinh dục đặt lame; nhỏ giọt carmine lên mẫu tuyến sinh dục; dùng miếng lame khác để nghiền mẫu tuyến sinh dục; để 1-2 phút quan sát mẫu kính hiển vi với độ phóng đại x 40 Kết quả: Nếu thấy hạt trứng trịn tuyến sinh dục cá cái, mẫu đồng gồm hạt nhỏ tuyến sinh dục cá đực mẫu khối đồng gồm hạt nhỏ có vài hạt trứng nằm lẫn bên tuyến sinh dục cá gian tính (cá có tế bào sinh dục đực cái) KẾT QUẢ 3.1 Kết nghiên cứu tìm nhiệt độ mật độ tối đa ngâm cá bột nước có pha hormone Cứ phút quan sát cá túi, thời gian ngâm tối đa giờ, thu kết sau: Thông số kỹ thuật STT Túi Nhiệt độ Mật độ (oC) (con/lít) Thời gian xuất có cá bột chết Ghi túi 1 30 500 K 2 30 750 K 3 30 1.000 4 30 1.250 5 32 500 K K: Trong K khơng có cá bột K chết túi 6 32 750 K 7 32 1.000 K 8 32 1.250 55 phút 9 34 500 35 phút 10 10 34 750 30 phút 11 11 34 1.000 25 phút 12 12 34 1.250 25 phút Như vậy, với nồng độ hormone tăng 1,5 lần, nên ngâm với mật độ tối đa 1.000 con/l, nhiệt độ tối đa 32oC 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ mật độ đến hiệu đực hóa Thí nghiệm bố trí sau: Dùng heater nâng nhiệt bể nước, bể trì nhiệt độ 30 oC, bể trì nhiệt độ 32oC, bể nhiệt độ nước bình thường 28oC Thu cá bột 14 ngày tuổi sau nở, ngâm nước có pha hormone nồng độ tăng 1,5 lần Cá bột đóng túi PE có bơm oxy, thể tích nước túi lít nước, bơm 12,5 lít oxy, đảm bảo túi căng tròn để tăng hàm lượng oxy hòa tan nước Cứ phút lắc túi lần để tăng hàm lượng oxy hòa tan nước Ngâm giờ, đưa cá ương giai, sau thời gian 2,5 tháng, kiểm tra giới tính, kết sau: STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Túi 1a 1b 1c 1d 1e 1f 2a 2b 2c 2d 2e 2f 3a 3b 3c 3d 3e 3f Thông số kỹ thuật Nhiệt Mật độ độ (con/lít) (oC) 30 500 30 500 30 500 30 1.000 30 1.000 30 1.000 32 500 32 500 32 500 32 1.000 32 1.000 32 1.000 28 500 28 500 28 500 28 1.000 28 1.000 28 1.000 Tỷ lệ đực (%) 92 93 92 92 91 92 95 96 95 95 95 94 90 89 89 88 89 88 10 Tỷ lệ đực trùng bình (%) Ghi 92,3 Kiểm tra giới tính: bắt ngẫu nhiên 100 con/giai ương để kiểm tra giới tính 91,7 theo phương pháp kiểm tra giới tính sớm 95,3 94,7 89,3 88,3 So sánh trung bình tỉ lệ giới tính đực mức nhiệt độ mức mật độ, kết sau: Tỷ lệ đực trung bình Nhiệt độ Mật độ 500 con/l Mật độ 1000 con/l Nhiệt độ 30 oC 92,3 91,7 Nhiệt độ 32 oC 95,3 94,7 Nhiệt độ 28 oC 89,3 88,3 Chạy thống kê EXCEL: phân tích ANOVA nhân tố nhiệt độ mật độ, ta kết sau: Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count Sum Average Variance Nhiệt độ 30 oC 184 92 0,18 Nhiệt độ 32 oC 190 95 0,18 Nhiệt độ 28 oC 177,6 88,8 0,5 276,9 92,3 274,7 91,56667 10,25333 df MS Mật độ 500 con/l Mật độ 1000 con/l ANOVA Source of Variation SS Rows 38,45333333 19,22667 Columns 0,806666667 0,806667 Error 0,053333333 0,026667 Total 39,31333333 11 F P-value 721 0,001385 F crit 19 30,25 0,031504 18,5128205 Qua bảng phân tích ANOVA ta thấy: Có sai khác có ý nghĩa thống kê tỷ lệ đực mức nhiệt độ mật độ khác với mức ý nghĩa (α = 0.05) Tỷ lệ sống cá sau ngâm túi bơm oxy chứa nước pha MT cho tỷ lệ sống 100% Cá sau ngâm ương ao đất, tỷ lệ sống cá 90 sau nở đạt 93 - 95% Kết cho thấy phương pháp không ảnh hưởng đến tỷ lệ sống cá bột ngâm thời gian ương ao Khi so sánh tỷ lệ sống cá với cơng trình trước kết cho tỷ lệ sống cao Tỉ lệ sống cách cho cá ăn thức ăn trộn MT liên tục 21 ngày 69,51 - 83,4% (Nguyễn Văn Tư, 2006), Lê Văn Thắng Phạm Anh Tuấn (2000) đực hóa cá cách ngâm nước có pha MT thu tỷ lệ sống 68,5-83,3%; Lê Ngọc Thảo (2008) với phương pháp tương tự cho tỷ lệ sống cá sau ngâm 97,78-99,02% Việc đực hóa cách ngâm phôi (Karayucel et al., 2004) cho tỷ lệ sống sau tháng ương 80,94% Bằng cách ngâm cá bột - 14 ngày tuổi sau nở túi PE chứa nước pha MT có bơm oxy tỷ lệ đực trung bình 94,7% Tỉ lệ đực gần tỉ lệ đực trung bình phương pháp cho ăn thức ăn trộn MT liên tục 21 ngày (95%) Điều chứng tỏ, phương pháp ngâm cá bột - 14 DPH túi PE chứa nước pha MT có bơm oxy với liều tăng gấp 1,5 lần, mật độ tăng gấp đôi (1.000con/l), nhiệt độ 32oC, lắc túi thường xuyên có tác dụng làm tăng tỷ lệ cá rô phi đực lên mức cao, ứng dụng vào thực tế sản xuất hàng hóa, cho hiệu kinh tế cao KẾT LUẬN Khi ngâm cá rô phi bột 8-14 ngày tuổi (sau nở) nhiệt độ 32 oC cho tỉ lệ đực cao Tỷ lệ đực trung bình mật độ 500 con/l cao tỉ lệ đực trùng bình mật độ 1.000 con/l (95,3% 94,7%) 12 Tuy nhiên, chênh lệch không đáng kể, thực tế sản xuất chấp nhận tỷ lệ đực 94,7% Chọn giải pháp tăng nhiệt độ ngâm lên 32oC, nồng độ hormone tăng 1,5 lần, mật độ 1.000 con/lít thời gian ngâm để áp dụng vào sản xuất TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Tường Anh (1999), Một số vấn đề nội tiết học sinh sản cá, NXB Nông nghiệp, 238 tr Phạm Quốc Hùng, Nguyễn Tường Anh (2011), Sinh sản nhân tạo cá Ứng dụng hormon steroid, NXB Nông nghiệp, 214 tr Lê Văn Thắng, Phạm Anh Tuấn (2000), Nghiên cứu chuyển giới tính cá Rơ phi Oreochromis niloticus phương pháp ngâm dung dịch hormon 17α- methyltestosteron Tuyển tập Báo cáo Khoa học Hội thảo toàn quốc Nuôi trồng Thủy sản năm 1998 114 – 123 Lê Ngọc Thảo, Nguyễn Tường Anh (2007), Đực hóa cá Rơ phi (Oreochromis niloticus) phương pháp ngâm nước có pha 17αmethyltestosteron Báo cáo Khoa học Khoa Thủy sản lần Đại học Nông Lâm TP HCM, 12/2007 Nguyễn Văn Tư (2006), Báo cáo Kết triển khai Dự án Chuyển giao công nghệ Sản xuất cá Rơ phi đơn tính đực 44 tr Devlin R.H and Nagahama Y (2002), “Sex determination and sex differentiation in fish: an overview of genetic, physiological, and environmental influences Aquaculture 208: 191-364 Karayucel I, Ezaz T, Karayucel S, McAndrew B J, Penman D J, 2004 Evidnence for two unlinked sex reversal loci in the Nile tilapia Oreochromis niloticus and for kinkage of one of these to the red colour gene> Aquaculture 234 51 –n53 8.Varadaraj K and Pandian T.J (1987), “Masculinization of Oreochromis mossambicus by the administration of 17α-methyl-5-androsten-3β-diol through rearing water”, Current Science 56, 67-71 13 14 ... giới tính sớm để biết tỷ lệ đực cá giống Dụng cụ bao gồm kính hiển vi có độ phóng đại x 40, đồ giải phẫu cá, hộp lame, chai lọ giữ mẫu Hóa chất bao gồm dung dịch formaline để cố định mẫu, dung... 11-16 17 18 19-30 31 32 Hình 1: Thời điểm thu cá thời gian ngâm dung dịch MT Các vật liệu khác bao gồm túi PE kích thước 110x60 cm, dây cao su buộc miệng túi, bình oxy, bể xi măng chứa nước nâng