MỤC LỤC
DANH MỤC BẢNG
DANH MỤC HÌNH
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
MỞ ĐẦU
Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Di truyền ung thư
1.1.1. Khái niệm ung thư
1.1.2. Gen ung thư và gen ức chế khối u
1.2. Hội chứng ung thư ruột kết
1.3. Hội chứng ung thư ruột kết không polyp di truyền (Hội chứng Lynch)
1.3.1. Đặc điểm di truyền của HNPCC
1.3.2. Đặc điểm lâm sàng và phổ khối u
1.3.3. Chẩn đoán lâm sàng
1.4. Cơ sở phân tử của HNPCC
1.4.1. Tính bất ổn định vi vệ tinh
1.4.2. Cơ chế sửa chữa ADN bắt cặp sai (MMR - Mismatch Repair)
1.4.3. Đột biến gen MMR và nguy cơ ung thư
1.4.4. Gen MLH1
1.5. Một số kỹ thuật di truyền sử dụng trong nghiên cứu HNPCC
1.5.1. Kỹ thuật PCR
1.5.2. Kỹ thuật PCR phiên mã ngược (RT-PCR: Reverse Transcription -
Polymerase Chain Reaction)
1.5.3. Kỹ thuật phân tích các trình tự lăp lại đơn giản (SSR - Simple Sequence
Repeat)
1.5.4. Kỹ thuật đa hình chiều dài các đoạn cắt giới hạn (RFLP: Restriction
Fragment Length Polymorphism)
1.5.5. Kỹ thuật phân tích đa hình sợi đơn (SSCP: Single Strand Conforma
Polymorphism)
1.5.6. Phương pháp giải trình tự ADN
1.6. Mục tiêu và nội dung nghiên cứu của đề tài
1.6.1. Mục tiêu nghiên cứu
1.6.2. Nội dung nghiên cứu của đề tài
Chương 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Vật liệu nghiên cứu
2.1.1. Đối tượng và địa điểm nghiên cứu
2.1.2. Hóa chất
2.1.3. Thiết bị
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Thu thập và bảo quản mẫu
2.2.2. Phương pháp tách chiết ADN tổng số
2.2.3. Xác định độ tinh sạch và hàm lượng ADN tổng số
2.2.4. Kỹ thuật PCR
2.2.5. Phân tích đa hình sợi đơn (SSCP - Single Strand Conformation
Polymorphism)
2.2.6. Phản ứng cắt bằng enzym giới hạn
2.2.7. Giải trình tự gen
Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Tách chiết ADN tổng số
3.2. Phản ứng PCR
3.2.1. Kết quả tối ưu phản ứng PCR
3.2.2. Nhân bản các exon quan tâm bằng kỹ thuật PCR
3.3. Kết quả phân tích SSCP
3.4. Kết quả phân tích đột biến bằng PCR – RFLP
3.4.1. Kết quả xử lý exon 16 bằng enzym MspI
3.4.2. Kết quả xử lý exon 19 bằng enzym CviQI
3.4.3. Kết quả xử lý exon 18 bằng enzym CviQI
3.5. Kết quả giải trình tự ADN và so sánh trình tự
3.5.1. Phân tích trình tự exon 13 của mẫu mô từ bệnh nhân số 6
3.5.2. Kết quả phân tích trình tự exon 14 từ mẫu T19
3.5.3. Phân tích trình tự exon 18 từ mẫu T20
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO