luận án tiến sĩ nghiên cứu thành phần hóa học và xây dựng quy trình công nghệ chiết xuất để tạo sản phẩm có giá trị từ quả táo mèo (docynia indica (wall ) decne) ở việt nam

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học PGS TS Vũ Đình Hồng PGS TS Nguyễn Mạnh Cường Các số liệu kết thu luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận án Lê Xuân Duy ii LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành Viện Hóa học Hợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Với kính trọng, lịng biết ơn chân thành sâu sắc nhất, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Cường PGS.TS Vũ Đình Hồng người thầy hướng dẫn tận tình tạo điều kiện giúp đỡ thời gian thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ Ban lãnh đạo Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên, Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện để hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới tập thể cán Trung tâm Nghiên cứu Phát triển sản phẩm thiên nhiên, Phịng Hóa sinh hữu Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên giúp đỡ tơi nhiệt tình suốt thời gian thực luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới GS Young Ho Kim, Khoa Dược, Trường Đại học Chungnam, Hàn Quốc tạo điều kiện giúp đỡ nhiều suốt thời gian thực luận án Cuối cùng, tơi xin gửi lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến gia đình ln quan tâm, giúp đỡ, khích lệ tạo điều kiện cho tơi q trình làm luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Tác giả luận án Lê Xuân Duy iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG ix DANH MỤC CÁC HÌNH xii DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC xv MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu táo mèo 1.1.1 Vài nét họ Hoa hồng (Rosaceae) 1.1.2 Vài nét chi Táo mèo (Docynia) .4 1.1.3 Phân bố sản lượng táo mèo số tỉnh trọng điểm nước ta 1.2 Thành phần hóa học táo mèo 1.2.1 Các thành phần hóa học 1.2.2 Các hợp chất chuyển hóa thứ cấp phân lập từ táo mèo 1.2.3 Hoạt tính sinh học táo mèo 10 1.3 Tình hình khai thác, chế biến sử dụng táo mèo 14 1.3.1 Các sản phẩm chế biến truyền thống 14 1.3.2 Các sản phẩm chế biến theo công nghệ đại 14 1.4 Định hướng nghiên cứu 19 1.5 Vài nét nhóm hợp chất phenolic 20 1.5.1 Đặc điểm chung hợp chất phenolic 20 1.5.2 Phân loại hoạt tính sinh học hợp chất phenolic 21 1.5.3 Chiết xuất phenolic từ thực vật 22 1.6 Giới thiệu phương pháp đáp ứng bề mặt (RSM) tối ưu hóa quy trình cơng nghệ hóa học 27 CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Đối tượng nghiên cứu 29 2.2 Phương pháp nghiên cứu 29 2.2.1 Phương pháp định lượng số thành phần hóa học 29 2.2.2 Phương pháp xử lý, chiết xuất phân lập thành phần hóa học 30 2.2.3 Phương pháp xác định tính chất hóa lý cấu trúc hóa học 31 2.2.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 31 iv 2.2.5 Phương pháp chiết vi sóng, chiết siêu âm, chiết hồi lưu chiết soxhlet 34 2.2.6 Phương pháp quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa quy trình cơng nghệ .35 CHƯƠNG III THỰC NGHIỆM 37 3.1 Điều chế cao chiết tổng cao chiết phân đoạn 37 3.1.1 Sơ đồ phân lập thành phần hóa học từ cao chiết ethyl acetate táo mèo 38 3.1.2 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E2 39 3.1.3 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E3 39 3.1.4 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E5 40 3.1.5 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E6 40 3.1.6 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E7 40 3.1.7 Các hợp chất phân lập từ phân đoạn E8 41 3.2 Nghiên cứu hoạt tính sinh học cao chiết phân đoạn thành phần hóa học phân lập 41 3.3 Quy trình chiết xuất phenolic thiết lập mơ hình nghiên cứu 41 3.3.1 Quy trình chiết phương pháp soxhlet 42 3.3.2 Quy trình chiết xuất sử dụng vi sóng 42 3.3.3 Quy trình chiết xuất sử dụng siêu âm 43 3.3.4 Quy trình chiết xuất hồi lưu 44 3.4 Quy trình sấy phun thiết kế mơ hình nghiên cứu 45 3.4.1 Tiến hành thí nghiệm 46 3.4.2 Thiết kế ma trận kế hoạch thực nghiệm 46 3.5 Sơ đồ định hướng nghiên cứu quy trình công nghệ tạo sản phẩm bột cao chiết táo mèo quy mơ phịng thí nghiệm 47 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ táo mèo 48 4.1.1 Hợp chất TM17, (3S-Thunberginol C 6-O-β- D-glucopyranoside) 48 4.1.2 Hợp chất TM15 (chrysin) 54 4.1.3 Hợp chất TM2 (quercetin) 55 4.1.4 Hợp chất TM5 (hyperin) 57 4.1.5 Hợp chất TM36 (myricitrin) 58 4.1.6 Hợp chất TM16 (naringenin) 60 4.1.7 Hợp chất TM10 (astilbin) 61 4.1.8 Hợp chất TM7 (naringenin-7-O- β-D-glucopyranoside) 63 4.1.9 Hợp chất TM30 (2R/S)-5,7,3’,5’-tetrahydroxy-flavanone 7-O-β-D glucopyranosie) 65 v 4.1.10  Hợp chất TM33 (Phloretin-2’-O-(β-D-xylopyranosyl-(1 6)-O-β-D glucopyranoside)) 67 4.1.11 Hợp chất TM8 (phlorizin) 69 4.1.12 Hợp chất TM37 (2’,6’-dihydroxy-3’,4’- dimethoxychalcone) 70 4.1.13 Hợp chất TM24 (ursolic acid) 71 4.1.14 Hợp chất TM23 (23-hydroxy ursolic acid) 73 4.1.15 Hợp chất TM20 (pomolic acid) 75 4.1.16 Hợp chất TM22 (euscaphic acid) 76 4.1.17 Hợp chất TM25 (maslinic acid) 78 4.1.18 Hợp chất TM12 (gallic acid ) 80 4.1.19 Hợp chất TM13 (methyl gallate) 81 4.1.20 Hợp chất TM3 (protocatechuic acid) 82 4.1.21 Hợp chất TM9 (3-methoxy, 4-hydroxy-benzoic acid) (vanillic acid) 83 4.1.22 Hợp chất TM6 (4-methyl malate) 84 4.1.23 Hợp chất TM1 (chlorogenic acid methyl ester) 85 4.1.24 Hợp chất TM18 (1-O-coumaroyl-β-D-glucopyranose) 86 4.1.25 Hợp chất TM35 (cis-p-coumaric acid 4-O-β-D-glucopyranoside) 88 4.2 Đánh giá hoạt tính sinh học cao chiết hợp chất phân lập 92 4.2.1 Hoạt tính bảo vệ tim mạch (sEH) cao chiết phân đoạn hợp chất phân lập 92 4.2.2 Hoạt tính chống oxy hóa hợp chất phân lập .94 4.2.3 Hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan (Hep-G2) ung thư cổ tử cung (Hela) cao chiết phân đoạn 95 4.3 Xây dựng tối ưu quy trình chiết xuất phenolic từ táo mèo quy mơ phịng thí nghiệm 96 4.3.1 Kết chiết xuất táo mèo phương pháp chiết soxhlet 96 4.3.2 Xây dựng tối ưu hóa quy trình chiết xuất phenolic sử dụng vi sóng quy mơ phịng thí nghiệm 97 4.3.3 Xây dựng tối ưu hóa quy trình chiết xuất phenolic sử dụng sóng siêu âm quy mơ phịng thí nghiệm .107 4.3.4 Xây dựng tối ưu hóa quy trình chiết xuất phenolic phương pháp chiết hồi lưu quy mơ phịng thí nghiệm 116 4.3.5 So sánh, đánh giá phương án công nghệ nghiên cứu .123 4.4 Xây dựng tối ưu hóa quy trình sấy phun dịch chiết táo mèo quy mơ phịng thí nghiệm 125 4.4.1 Ảnh hưởng đơn yếu tố đến hàm mục tiêu trình 125 vi 4.4.2 Thiết lập mơ hình xây dựng ma trận kế hoạch thực nghiệm .127 4.4.3 Kiểm tra có nghĩa mơ hình 128 4.4.4 Tối ưu hóa quy trình sấy phun .131 4.4.5 Kiểm tra lại mơ hình tối ưu hóa .132 4.5 Quy trình cơng nghệ chiết xuất để tạo sản phẩm bột cao chiết táo mèo quy mơ phịng thí nghiệm .133 KẾT LUẬN 135 KIẾN NGHỊ 137 CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN .138   BÀI BÁO QUỐC TẾ 138 BÀI BÁO TRONG NƯỚC 138 TÀI LIỆU THAM KHẢO .139 PHỤ LỤC .148 vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu 13 C- NMR CC Diễn giải Tiếng Anh Carbon -13 Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon- C Resonance Spectroscopy 13 Sắc ký cột Column Chromatography CTPT Công thức phân tử Molecular formula DEPT Phổ DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer DMSO Dimethyl Sulfoxide Dimethyl Sulfoxide ESI-MS Phổ khối lượng phun mù electron Electron Spray IonzationMass Spectroscopy EtOAc CH3COOC2H5 Ethyl acetate EtOH C2H5OH Ethanol GAE Acid gallic tương đương Gallic acid equivalent Dòng tế bào ung thư gan người Liver hepatocellular carcinoma/Human hepatoma HeLa Ung thư cổ tử cung người Henrietta lacks HTSH Hoạt tính sinh học Bioactivity Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Hep-G2 H-NMR 1 1 H- HCOSY Phổ tương tác proton HMBC Phổ tương tác dị nhân qua nhiều liên kết Heteronuclear Multiple Bond (HMBC) Correlation HSQC Phổ tương tác dị nhân qua liên kết Phổ khối phân giải cao ion hóa HR-ESI-MS phun mù điện tử H - H - Correlation Spectroscopy Heteronuclear Single Quantum Coherence High Resolution Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy viii IR Phổ hồng ngoại Infrared Spectroscopy IC50 Nồng độ ức chế 50% Inhibitory concentration 50% KLPT Khối lượng phân tử Molecular weight MeOH CH3OH Methanol ppm Phần triệu Parts per million QE Quercetin tương đương Quercetin equivalent SC Khả trung hòa gốc tự Scavenging capacity SC50 Khả bắt gốc tự 50% Scavening capacity sEH Tác dụng bảo vệ tim mạch Soluble epoxide hydrolase STT Số thứ tự Numerical order TLC Sắc ký lớp mỏng Thin Layer Chromatography Tài liệu tham khảo Reference TFC Hàm lượng flavonoid tổng Total flavonoid content TPC Hàm lượng phenolic tổng Total phenolic content TLTK ix DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.2.1 Hàm lượng thành phần hóa học táo mèo Bảng 1.2.2.1 Danh sách hợp chất phân lập từ loài Docynia indica (Wall.) Decne nước Bảng 1.2.2.2 Danh sách hợp chất phân lập từ loài táo mèo Docynia indica (Wall.) Decne giới Bảng 1.4.3 Phân loại hợp chất phenolic dựa khung nguyên tử carbon phân tử 21 Bảng 4.1.1 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM17 tài liệu tham khảo 53 Bảng 4.1.2 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM15 chất tham khảo .55 Bảng 4.1.3 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM2 chất tham khảo .56 Bảng 4.1.4 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM5 chất tham khảo .58 Bảng 4.1.5 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM36 chất tham khảo .59 Bảng 4.1.6 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM16 chất tham khảo .61 Bảng 4.1.7 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM10 chất tham khảo .62 Bảng 4.1.8 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM7 chất tham khảo .64 Bảng 4.1.9 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM30 chất tham khảo .66 Bảng 4.1.10 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM33 chất tham khảo 68 Bảng 4.1.11 Dữ liệu phổ NMR hợp chất TM8 chất tham khảo 69 Bảng 4.1.12 Dữ liệu phổ hợp chất TM37 chất tham khảo .71 Bảng 4.1.13 Dữ liệu phổ hợp chất TM24 chất tham khảo .72 Bảng 4.1.14 Dữ liệu phổ hợp chất TM23 chất tham khảo .74 Bảng 4.1.15 Dữ liệu phổ hợp chất TM20 chất tham khảo .75 Bảng 4.1.16 Dữ liệu phổ hợp chất TM22 chất tham khảo .77 Bảng 4.1.17 Dữ liệu phổ hợp chất TM25 chất tham khảo .79 Bảng 4.1.18 Dữ liệu phổ chất TM12 chất tham khảo 80 Bảng 4.1.19 Dữ liệu phổ chất TM13 chất tham khảo 81 Bảng 4.1.20 Dữ liệu phổ chất TM3 chất tham khảo 82 Bảng 4.1.21 Dữ liệu phổ chất TM9 chất tham khảo 83 Bảng 4.1.22 Dữ liệu phổ TM6 chất tham khảo 85 x Bảng 4.1.23 Dữ liệu phổ hợp chất TM1 chất tham khảo .86 Bảng 4.1.24 Dữ liệu phổ hợp chất TM18 với chất tham khảo 87 Bảng 4.1.25 Dữ liệu phổ hợp chất TM35 với chất tham khảo 89 Bảng 4.2.1.1 Đánh giá hoạt tính bảo vệ tim mạch cao chiết phân đoạn .92 Bảng 4.2.1.2 Đánh giá hoạt tính bảo vệ tim mạch hợp chất phân lập 93 Bảng 4.2.2 Kết đánh giá hoạt tính chống oxy hóa hợp chất phân lập 95 Bảng 4.2.3 Kết đánh giá hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư gan ung thư cổ tử cung 96 Bảng 4.3.1 Kết chiết xuất táo mèo phương pháp chiết soxhlet 97 Bảng 4.3.2.1.a Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 .97 Bảng 4.3.2.1.b Ảnh hưởng nồng độ dung môi ethanol đến hàm mục tiêu Y1 Y2 98 Bảng 4.3.2.1.c Ảnh hưởng công suất vi sóng đến hàm mục tiêu Y1 Y2 99 Bảng 4.3.2.1.d Ảnh hưởng độ pH dung môi chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 99 Bảng 4.3.2.2a Các mức thí nghiệm biến biến công nghệ 100 Bảng 4.3.2.2b Ma trận kế hoạch hóa thực nghiệm q trình chiết xuất 100 Bảng 4.3.2.3 Bảng phân tích phương sai hàm mục tiêu Y1, Y2 Y3 .101 Bảng 4.3.2.4 Kết tối ưu hóa biến cơng nghệ 106 Bảng 4.3.2.5 Kết thực nghiệm hàm mục tiêu điều kiện tối ưu 107 Bảng 4.3.3.1.a Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nguyên liệu chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 107 Bảng 4.3.3.1.b Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 108 Bảng 4.3.3.1.c Ảnh hưởng công suất siêu âm đến hàm mục tiêu Y1 Y2 .109 Bảng 4.3.3.1.d Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 109 Bảng 4.3.3.2a Các mức thí nghiệm biến biến công nghệ 110 Bảng 4.3.3.2b Ma trận kế hoạch hóa thực nghiệm trình chiết xuất 110 Bảng 4.3.3.3 Bảng phân tích phương sai hàm mục tiêu Y1 Y2 111 Bảng 4.3.3.4 Kết tối ưu hóa biến cơng nghệ 115 Bảng 4.3.3.5 Kết thực nghiệm hàm mục tiêu điều kiện tối ưu 116 Bảng 4.3.4.1.a Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm mục tiêu Y1 Y2 116 H 6.41126400 3.48186700 1.27810600 O 1.07905500 -1.88013000 2.56590300 H 1.91137000 -2.39270600 2.50076800 - Thermochemistry data Zero-point correction= 0.425530 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452847 Thermal correction to Enthalpy= 0.453791 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.365566 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.600106 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.572789 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.571845 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.660070 Boat Conformer 01 C -4.83176500 0.11164000 -0.58894700 C-4.21810900 -0.80902600 0.46958200 C-2.65125500 0.99914600 0.79898800 C-3.60738400 2.06795500 0.25933000 C-4.98547300 1.48313400 0.02915000 H-5.03445200 -1.13564800 1.11661500 H-4.18355300 0.17703100 -1.46993800 H-2.06107900 1.41799300 1.61136300 H-3.22246300 2.41607100 -0.70144500 H-5.49563700 1.37993800 0.99330700 O-3.30087600 -0.11989000 1.32986600 O-1.80147300 0.63701500 -0.28475100 O-3.63985000 3.12534300 1.19855600 H-4.29781700 3.75836400 0.89862100 O-5.69204100 2.37511700 -0.80919500 H-6.48439000 1.91812400 -1.10831800 O-6.12316200 -0.33118300 -0.96742600 H-6.02034200 -1.21392800 -1.33931800 C-3.55292600 -2.02573600 -0.15648300 H-2.75797400 -1.71582800 -0.83164700 H-3.12632700 -2.66527100 0.61623900 O-4.52450700 -2.72521200 -0.94338200 H-4.90402000 -3.43436100 -0.42347200 C-0.67311300 -0.07993200 -0.02173800 C0.18642600 -0.24161300 -1.11789200 C-0.37762700 -0.62394400 1.21605100 C1.36225800 -0.93512200 -0.95397700 H-0.08774600 0.19821100 -2.06654800 C0.81415800 -1.33557900 1.37592100 H-1.04925300 -0.55862100 2.05689700 C1.70200400 -1.48114400 0.29448500 C2.94498700 -2.23615300 0.47523600 C2.33045100 -1.15926100 -2.08112600 H2.12189400 -2.12280600 -2.55158400 H2.23354700 -0.39313800 -2.84839700 C3.74523800 -1.20408800 -1.53410500 O3.82804700 -2.25659800 -0.53669800 H4.43049000 -1.54822700 -2.30549800 O3.19861200 -2.86683000 1.48293300 C4.26217600 0.08946100 -0.93901800 203 C 3.63420400 1.31473600 -1.12329200 C 5.44349700 0.05176600 -0.19347200 C 4.16974700 2.47906900 -0.58370700 H 2.70898400 1.38426400 -1.67705400 C 5.98430300 1.20169100 0.35092000 H 5.93294500 -0.89878300 -0.02790900 C 5.34482100 2.42210000 0.15298800 H 3.66530200 3.42635000 -0.73052500 H 6.89432500 1.17653600 0.93293900 O 5.91551900 3.52627400 0.70891100 H 5.37671800 4.29894500 0.52866700 O 1.05402100 -1.86656300 2.57609400 H 1.88682800 -2.37959600 2.51437300 - Thermochemistry data Zero-point correction= 0.425623 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452856 Thermal correction to Enthalpy= 0.453800 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.366223 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.599802 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.572569 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.571625 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.659202 Boat Conformer C3 01 C 3.57465800 0.69185900 -0.60544100 C2.45805800 1.02583400 0.38464000 C2.50766900 -1.34840800 0.86947100 C3.96845100 -1.51324900 0.43997700 C4.58582700 -0.16477600 0.12526000 H2.81977000 1.84749700 1.00430100 H3.18089200 0.14789000 -1.47090500 H2.29875700 -1.99845000 1.71709000 H3.98994800 -2.11942200 -0.46755500 H4.84427100 0.33340200 1.06656900 O2.19115600 -0.05412500 1.29174900 O1.72609200 -1.74480000 -0.25455500 O4.65223900 -2.16424500 1.49461000 H5.58014600 -2.21378100 1.24986500 O5.74990500 -0.39679800 -0.64221300 H6.03284800 0.45381700 -0.99253700 O4.24581300 1.86563100 -1.02761300 H3.57821100 2.47170200 -1.37017400 C1.17723400 1.46691200 -0.30125600 H0.80879400 0.68618900 -0.97024500 H0.41555700 1.67750500 0.45056900 O1.52203500 2.64082300 -1.03934600 H0.72704200 3.11466700 -1.30263900 C0.37304000 -1.82013400 -0.14357700 C-0.33671200 -1.43178000 1.00255100 C-0.27869600 -2.28289500 -1.27676800 C-1.71482900 -1.43783200 0.94948700 H0.17032700 -1.05910400 1.87758100 C-1.66686400 -2.31521700 -1.31312700 H0.29000500 -2.60169000 -2.13727600 204 C -2.39626300 -1.84740100 -0.20154100 C -3.84352000 -1.66337400 -0.31737300 C -2.57005500 -0.94064000 2.07806800 H -3.03528100 -1.77672100 2.60491100 H -1.97987200 -0.36877700 2.79147400 C -3.66745000 -0.06367100 1.47847600 O -4.45481000 -0.84381000 0.56098700 O -4.51422300 -2.17004300 -1.19370700 H -4.37729800 0.23179400 2.24767900 C -3.08342200 1.17000800 0.81836200 C -2.50199300 2.14073500 1.63025900 C -3.03465800 1.34130600 -0.56182200 C -1.83645400 3.22974900 1.08480200 H -2.55366400 2.04451400 2.70807900 C -2.36592100 2.42095500 -1.12136500 H -3.52145200 0.63626000 -1.21992900 C -1.74535500 3.34700700 -0.29675600 H -1.37055500 3.96517900 1.72932200 H -2.31140800 2.54998900 -2.19320800 O -1.01353300 4.33737000 -0.90326400 H -0.73949800 4.99129700 -0.25569000 O -2.25946800 -2.75846100 -2.42626000 H -3.22564700 -2.73602800 -2.28435200 Zero-point correction= 0.426645 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.453141 Thermal correction to Enthalpy= 0.454085 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.370887 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.604731 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.578235 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.577291 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.660489 Boat Conformer C4 01 C 4.01249600 1.07634300 C 2.80707300 1.38074600 C 2.83799500 -0.98935700 C 4.32549400 -1.14488600 C 4.96678800 0.21023300 H 3.10012300 2.20710100 H 3.69978800 0.54513500 H 2.57955200 -1.66623100 H 4.41098100 -1.71627100 H 5.14415100 0.68101000 O 2.49152600 0.29514300 O 2.12599200 -1.33389500 O 4.92829200 -1.83842000 H 5.87023800 -1.89370900 O 6.18941100 -0.00034700 H 6.49689400 0.85760000 O 4.70563600 2.26307800 H 4.10530500 2.79785600 C 1.58746500 1.78952700 H 1.32136200 1.00872800 H 0.73232200 1.96898100 -0.55081900 0.34408300 0.78929700 0.45987300 0.24087500 0.99556300 -1.45608600 1.60062300 -0.46656000 1.21437300 1.22761000 -0.39100200 1.53569900 1.35368300 -0.43480700 -0.74372300 -0.89766200 -1.42748600 -0.46993900 -1.17860800 0.18379100 205 O 1.91342500 2.94871700 -1.24322800 H1.80087200 3.72966900 -0.69925700 C0.77754200 -1.52353700 -0.31466200 C0.03566900 -1.33209200 0.85851300 C0.17410400 -1.91990300 -1.49661600 C-1.32772000 -1.54623300 0.81629300 H0.49969300 -0.98752100 1.76907300 C-1.19830100 -2.13752900 -1.53414200 H0.76708000 -2.07681700 -2.38506700 C-1.96574900 -1.93263600 -0.36829300 C-3.41588600 -2.13982700 -0.40948000 C-2.19546500 -1.38485000 2.03190800 H-2.34701500 -2.35825600 2.50419800 H-1.72948500 -0.73541700 2.76988300 C-3.55362900 -0.85570400 1.60688000 O-4.13947800 -1.79032600 0.66974700 O-3.99241600 -2.62897300 -1.36010100 H-4.24499200 -0.88184300 2.44650300 C-3.54087100 0.53372900 0.99678700 C-2.58332200 1.48322300 1.33546000 C-4.55112800 0.89948700 0.10432600 C-2.63039800 2.76693000 0.80374600 H-1.78029000 1.24027000 2.01708500 C-4.60405500 2.17219100 -0.43627600 H-5.29990800 0.17163400 -0.17629800 C-3.64174800 3.11177000 -0.08350500 H-1.88032500 3.49770300 1.08243700 H-5.38125400 2.45580200 -1.13131000 O-3.74014300 4.35140500 -0.63893300 H-3.02917200 4.91090500 -0.32148100 O-1.73770200 -2.53686600 -2.68768500 H-2.69040200 -2.69819700 -2.53428400 - Thermochemistry data Zero-point correction= 0.425863 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452929 Thermal correction to Enthalpy= 0.453873 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.366571 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.598595 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.571529 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.570585 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.657887 Boat Conformer C5 206 01 C 3.62233000 0.73118200 -0.53838900 C2.55305600 1.01818200 0.51533700 C2.52246100 -1.39192700 0.78365700 C3.96705000 -1.56725100 0.30512000 C4.62312600 -0.21829400 0.08401000 H2.96995700 1.76224900 1.19548100 H3.18095300 0.27634600 -1.43186200 H2.30740100 -2.10713300 1.57547300 H3.94689400 -2.09774400 -0.64861900 H4.92663500 0.18954900 1.05494700 O2.26188000 -0.13066700 1.32614900 O1.70379600 -1.66302900 -0.35161100 O4.65181100 -2.32415100 1.28588200 H5.57212500 -2.38183500 1.01562000 O5.75530400 -0.42238200 -0.73734300 H6.05770900 0.44550500 -1.02321400 O4.32271000 1.91295600 -0.88345700 H3.66739600 2.57616200 -1.13114400 C1.27062500 1.57183100 -0.07762400 H0.83987300 0.86594800 -0.79182900 H0.55246500 1.74555100 0.72317400 O1.63026700 2.79042300 -0.72932100 H0.85447100 3.35022200 -0.83848800 C0.35447700 -1.75249200 -0.20989700 C-0.33024500 -1.40135400 0.96352800 C-0.32139400 -2.18810400 -1.33977700 C-1.70942400 -1.42173500 0.94495300 H0.19742200 -1.04675100 1.83409500 C-1.70936200 -2.23748200 -1.34127500 H0.22870300 -2.47837500 -2.22215600 C-2.41567900 -1.81183100 -0.19826000 C-3.86879700 -1.65453200 -0.26856600 C-2.54107600 -0.95301600 2.10367100 H-2.98415700 -1.80156700 2.62952700 H-1.93854400 -0.38754300 2.81138600 C-3.66498800 -0.08380500 1.54267400 O-4.47215700 -0.87620700 0.65284800 O-4.55456700 -2.14945500 -1.14024700 H-4.35266500 0.20732700 2.33341800 C-3.11266400 1.14667200 0.84822500 C-3.23205900 1.35181200 -0.52077500 C-2.38701100 2.07077900 1.60012500 C-2.57324400 2.40715100 -1.14104200 H-3.83076500 0.68568500 -1.12522100 C-1.73900800 3.13653900 0.99686400 H-2.31325000 1.95458000 2.67444500 C-1.80237200 3.27473100 -0.38374300 H-2.64238100 2.53205300 -2.21470800 H-1.16389700 3.84813700 1.57294200 O-1.03800500 4.26526900 -0.95479000 H-1.31157600 4.40783200 -1.86432600 O-2.32511700 -2.65891700 -2.45070300 H-3.28696300 -2.65927100 -2.28109500 207 Zero-point correction= 0.426759 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.453188 Thermal correction to Enthalpy= 0.454132 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.370858 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.604399 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.577970 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.577025 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.660300 Chair Conformer C1 01 C 5.00919300 -0.56472100 0.76378700 C3.66674700 -1.08461000 1.28642300 C2.93852300 -0.81818500 -0.99994200 C4.35321100 -0.92982000 -1.57697700 C5.33885100 -1.32936500 -0.49852300 H3.87682800 -2.00298100 1.83819600 H4.95031100 0.50588400 0.53889600 H2.23587900 -1.28689600 -1.68542700 H4.64460900 0.05118300 -1.95761000 H5.23431700 -2.40167000 -0.29874400 O2.77778300 -1.47073300 0.22794900 O2.65871300 0.57109500 -0.88178000 O4.31091000 -1.88184200 -2.62283400 H5.20866300 -1.99701200 -2.94587700 O6.63603000 -1.04182000 -0.97886000 H7.23820200 -1.10402700 -0.23073000 O6.05022700 -0.81004900 1.69296000 H5.83620900 -0.31846300 2.49317500 C2.99590500 -0.08067000 2.21250500 H2.81835000 0.85667400 1.68962000 H2.04129600 -0.46960800 2.56805900 O3.88302400 0.20932300 3.29799900 H3.69818200 -0.38486300 4.02628800 C1.37250200 0.96635000 -0.66511400 C0.31801800 0.07401800 -0.43259400 C1.17115100 2.33764700 -0.68053600 C-0.95181100 0.58858500 -0.25093700 H0.48537400 -0.98925800 -0.36286000 C-0.10286300 2.85265200 -0.47802700 H2.00022500 3.00752600 -0.85228400 C-1.18689300 1.96804700 -0.28707300 C-2.53181400 2.50876900 -0.06620500 C-2.13261900 -0.29811600 0.02706500 H-1.98422500 -1.29235300 -0.39298400 H-2.28149000 -0.40838600 1.10504300 C-3.38390100 0.32321000 -0.57118200 O-3.56538000 1.65245700 -0.03906000 H-3.26052700 0.41812500 -1.65284500 O-2.75244500 3.69041000 0.10877700 C-4.62233700 -0.47173600 -0.26538200 C-5.41104800 -0.19346500 0.84383300 C-4.95512000 -1.55418500 -1.07708700 C-6.51203100 -0.98649900 1.14094700 208 H -5.17594900 0.65736300 1.46705400 C -6.04790200 -2.35413100 -0.78783200 H -4.35633300 -1.77240000 -1.95341300 C -6.82835700 -2.06779900 0.32705000 H -7.12830200 -0.75800500 2.00218800 H -6.31789100 -3.19186700 -1.41453700 O -7.89655600 -2.87855400 0.56929600 H -8.37267300 -2.56863500 1.34196900 O -0.25136500 4.17924700 -0.48091400 H -1.18299800 4.37754300 -0.25663400 Zero-point correction= 0.425282 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452701 Thermal correction to Enthalpy= 0.453645 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.365567 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.600609 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.573191 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.572247 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.660324 Chair Conformer C2 01 C -4.78281900 -1.43579200 0.43522200 C-4.29907200 -0.22322200 1.23517700 C-3.62771700 0.63551000 -0.91935600 C-4.64207800 -0.21224200 -1.69369300 C-5.58243200 -0.92102700 -0.74064600 H-5.13140800 0.09068400 1.86823300 H-3.93408700 -2.02529400 0.07128400 H-3.51866800 1.60258200 -1.40562900 H-4.09352800 -0.97068400 -2.25601400 H-6.32613600 -0.20449300 -0.37452300 O-4.00889500 0.90498000 0.39882900 O-2.39404800 -0.07521800 -0.96404000 O-5.34045300 0.65289300 -2.56804200 H-6.01830700 0.13376300 -3.00907100 O-6.21270700 -1.96194800 -1.45918000 H-6.65573500 -2.52472900 -0.81644200 O-5.64404400 -2.25118700 1.21051100 H-5.13138500 -2.56991100 1.96110900 C-3.10046700 -0.56265400 2.10883400 H-2.27541000 -0.91883400 1.49561700 H-2.77146200 0.31783500 2.66112600 O-3.45762200 -1.63441500 2.98888100 H-3.79187600 -1.27098200 3.80989900 C-1.25218700 0.56773300 -0.59422900 C-0.07325300 -0.15750900 -0.81838500 C-1.22804100 1.83508600 -0.03684700 C1.13564200 0.40052100 -0.47527600 H-0.13943800 -1.13717000 -1.26975500 C0.00230700 2.40519500 0.29638800 H-2.12350400 2.39784500 0.17239500 C1.19299700 1.68041500 0.10120800 C2.47695300 2.28936200 0.45734500 = 2.7 kcal/mol C2.44378100 -0.29500500 -0.71992100 H2.31793800 -1.37712500 -0.73167200 209 H 2.85835000 0.00504500 -1.68645100 C 3.43218100 0.08955600 0.36899900 O 3.57983600 1.52496400 0.40561600 H 3.04200300 -0.22332100 1.34072800 O 2.59320200 3.45433200 0.78330800 C 4.79174600 -0.51158900 0.14777100 C 5.78475000 0.16745000 -0.54701000 C 5.04391600 -1.80728100 0.59346000 C 7.00877200 -0.43960500 -0.79709100 H 5.60777200 1.18083000 -0.87785600 C 6.25875900 -2.42406700 0.34548800 H 4.28249900 -2.34197700 1.14886000 C 7.24422900 -1.73572500 -0.35381800 H 7.78174800 0.09916400 -1.33183300 H 6.46603000 -3.42630500 0.69188900 O 8.42543100 -2.37997400 -0.56992700 H 9.03174600 -1.80171100 -1.03659700 O -0.01112400 3.63689200 0.81008000 H 0.91845500 3.92357700 0.92468400 Zero-point correction= 0.425068 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452577 Thermal correction to Enthalpy= 0.453521 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.365064 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.601456 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.573948 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.573004 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.661461 Chair Conformer C3 01 C 5.01305000 -0.57112800 C 3.67126900 -1.08778800 C 2.93573500 -0.82224400 C 4.34837200 -0.93601400 C 5.33668400 -1.33740800 H 3.88139100 -2.00571900 H 4.95561800 0.49943600 H 2.23046500 -1.29082000 H 4.64017200 0.04455800 H 5.23024800 -2.40933400 O 2.77840500 -1.47391400 O 2.65775000 0.56722700 O 4.30140800 -1.88783200 H 5.19822200 -2.00489000 O 6.63296200 -1.05339400 H 7.23731600 -1.11565900 O 6.05678800 -0.81790600 H 5.84608200 -0.32574200 C 3.00553500 -0.08115700 H 2.82688400 0.85538100 H 2.05202400 -0.46815400 O 3.89804300 0.20941100 H 3.71142800 -0.37857100 0.75097800 1.27862000 -1.00547000 -1.58709900 -0.51186900 1.83107000 0.52546700 -1.68834200 -1.96852100 -0.31106000 0.22339200 -0.88727600 -2.63307200 -2.95805200 -0.99679100 -0.25041600 1.67669800 2.47746200 2.20548700 1.68154600 2.56598900 3.28647900 4.01929600 C C 1.37253800 0.96349300 0.31774200 0.07174300 -0.66525400 -0.43244600 210 C 1.17261000 2.33500000 -0.67607800 C -0.95110600 0.58728500 -0.24608800 H 0.48383000 -0.99194500 -0.36619700 C -0.10034000 2.85081300 -0.46809800 H 2.00192600 3.00455500 -0.84798400 C -1.18494500 1.96688700 -0.27729700 C -2.52905100 2.50850600 -0.05043500 C -2.13202300 -0.29980100 0.03016900 H -1.98580600 -1.29180800 -0.39580100 H -2.27733600 -0.41628900 1.10805900 C -3.38416700 0.32445600 -0.56227800 O -3.56331300 1.65354600 -0.02161600 H -3.26424400 0.42415800 -1.64352600 O -2.74626000 3.69039000 0.12767100 C -4.62370200 -0.46545500 -0.25654600 C -5.11190500 -1.37603800 -1.18380900 C -5.26269100 -0.34778500 0.97694800 C -6.21347500 -2.17032300 -0.88941800 H -4.63506100 -1.46835100 -2.15188700 C -6.36539500 -1.12767900 1.27875300 H -4.90509300 0.37818200 1.69425700 C -6.83902600 -2.04430000 0.34471300 H -6.58947900 -2.87480100 -1.62129600 H -6.87745700 -1.03829200 2.22607400 O -7.92635500 -2.78745500 0.69320400 H -8.17167500 -3.36773800 -0.02982900 O -0.24754700 4.17745500 -0.46607000 H -1.17874900 4.37524900 -0.23816800 Zero-point correction= 0.425166 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452611 Thermal correction to Enthalpy= 0.453555 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.365432 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.600499 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.573053 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.572109 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.660232 Chair Conformer C4 01 C -4.78706300 C -4.30664600 C -3.62731600 C -4.63983900 C -5.58291500 H -5.14155200 H -3.93684900 H -3.51526800 H -4.08992500 H -6.32826300 O -4.01363800 O -2.39452000 O -5.33576600 -1.44174000 -0.23417400 0.63781700 -0.20378900 -0.91961600 0.07548200 -2.02845600 1.60792300 -0.95804400 -0.20594000 0.89927100 -0.07413300 0.66811000 0.42030200 1.22976800 -0.91667500 -1.70006500 -0.75488600 1.86161300 0.05539800 -1.39619500 -2.26667100 -0.38653200 0.40176700 -0.96112000 -2.56961300 H O H -6.01210000 0.15242300 -3.01695400 -6.21018600 -1.95610100 -1.48247000 -6.65602700 -2.52273700 -0.84510900 211 O -5.65052000 -2.26263000 1.18743000 H-5.14011200 -2.58644700 1.93735400 C-3.11134400 -0.57864200 2.10599100 H-2.28458400 -0.93309300 1.49410300 H-2.78329500 0.29919200 2.66310500 O-3.47189800 -1.65391400 2.98038500 H-3.81805800 -1.29317600 3.79771000 C-1.25285100 0.56582400 -0.58461200 C-0.07356200 -0.15682000 -0.81453900 C-1.22963900 1.82785900 -0.01540000 C1.13493500 0.39878800 -0.46558800 H-0.13891300 -1.13215800 -1.27530600 C0.00032100 2.39537300 0.32405900 H-2.12553900 2.38831500 0.19814300 C1.19148200 1.67302100 0.12284600 C2.47530800 2.27956800 0.48524500 C2.44312800 -0.29413600 -0.71734600 H2.31792500 -1.37617900 -0.73743700 H2.85453200 0.01336600 -1.68297900 C3.43413300 0.08007700 0.37235000 O3.57923500 1.51812000 0.42388400 H3.04944000 -0.24458100 1.34196700 O2.58844700 3.44109400 0.82469800 C4.79539200 -0.50918500 0.14044100 C5.15708900 -1.69122500 0.77213900 C5.68683200 0.07882000 -0.75594000 C6.38281300 -2.29170900 0.51080900 H4.48119600 -2.15263000 1.48161100 C6.91372200 -0.50511100 -1.01807900 H5.42326500 1.01295300 -1.23276700 C7.26048200 -1.69582700 -0.38632500 H6.65752000 -3.21212800 1.01147000 H7.61845100 -0.05405900 -1.70183400 O8.47894100 -2.22888100 -0.68155700 H8.61579200 -3.03245200 -0.17638600 O-0.01389500 3.62206200 0.84929100 H0.91599300 3.90741900 0.96716300 Zero-point correction= 0.425079 (Hartree/Particle) Thermal correction to Energy= 0.452564 Thermal correction to Enthalpy= 0.453508 Thermal correction to Gibbs Free Energy= 0.365038 Sum of electronic and zero-point Energies= -1565.601136 Sum of electronic and thermal Energies= -1565.573651 Sum of electronic and thermal Enthalpies= -1565.572707 Sum of electronic and thermal Free Energies= -1565.661177 212 PHỤ LỤC C KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA MẪU NGHIÊN CỨU 213 214 215 PHỤ LỤC D PHIẾU KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO ... chế, tạo sản phẩm có chất lượng cao Từ vấn đề nêu trên, lựa chọn đề tài ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học xây dựng quy trình cơng nghệ chiết xuất để tạo sản phẩm có giá trị từ táo mèo (Docynia indica. .. (Docynia indica (Wall. ) Decne) Việt Nam? ?? Nội dung Luận án tập trung vào nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học cơng nghệ chiết xuất, làm giàu thành phần hóa học có hoạt tính sinh học cao (nhóm... phenolic) để tạo sản phẩm có giá trị từ táo mèo Nội dung nghiên cứu luận án gồm  Nghiên cứu phân lập xác định cấu trúc số thành phần hóa học phân đoạn cao chiết ethyl acetate táo mèo Docynia indica