Nghiên cứu xác định auramine o trong thực phẩm bằng phương pháp von ampe

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - DƢƠNG VĂN THẮNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH AURAMINE O TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP VON - AMPE LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - Năm 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - DƢƠNG VĂN THẮNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH AURAMINE O TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP VON - AMPE Chuyên ngành: HÓA PHÂN TÍCH Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THỊ KIM THƯỜNG Hà Nội - Năm 2018 MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT LỜI CÁM ƠN DANH MỤC BẢNG 10 DANH MỤC HÌNH 12 MỞ ĐẦU 15 CHƢƠNG : TỔNG QUAN 17 1.1 Giới thiệu chung chất nghiên cứu Auramine O 17 1.1.1 Cấu tạo Auramine O (AO) 17 1.2 Các phương pháp xác định Auramine O 20 1.2.1 Phương pháp sắc kí 20 1.2.3 Phương pháp quang phổ 22 1.3 Giới thiệu phương pháp von - ampe vòng (CV) 23 1.4 Giới thiệu phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ 23 1.4.1 Các kỹ thuật ghi đo tín hiệu hồ tan chất cần phân tích 24 1.4.2 Nguyên tắc phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ: 25 1.5 Điện cực làm việc 26 1.5.1 Điện cực giọt thủy ngân treo (HMDE) 26 1.5.2 Điện cực glassy carbon 27 1.5.3 Ưu, nhược điểm phương pháp Von - Ampe hòa tan hấp phụ 27 CHƢƠNG : NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Nội dung nghiên cứu 30 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu 30 2.2.1 Tiến trình thí nghiệm theo phương pháp CV 30 2.2.2 Tiến trình thí nghiệm theo phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ SqW, DP 31 2.3 Quy trình xử lý mẫu 32 2.3.1 Mẫu thịt gà 32 2.3.2 Mẫu nước dưa 34 2.4 Trang thiết bị hóa chất 35 2.4.1 Trang thiết bị 35 2.4.2 Hóa chất dung mơi 35 2.4.3 Chuẩn bị dung dịch hóa chất 36 2.4.3.1 Pha dung dịch gốc Auramine O 10 -3 M 36 2.4.3.2 Pha dung dịch đệm BR có pH (2 đến 12) 36 2.5 Các thông số đánh giá độ tin cậy phương pháp phân tích 36 2.5.1 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 36 2.5.2 Độ lặp lại phương pháp 37 2.5.3 Hiệu suất thu hồi 38 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Nghiên cứu đặc tính điện hóa Auramine O phương pháp von ampe vòng (CV) 39 3.1.1 Đặc tính điện hóa Auramine O điện cực HMDE GCE .39 3.1.1.1 Đặc tính hấp phụ AO HMDE 39 3.1.1.2 Đặc tính hấp phụ AO điện cực GCE 41 3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng pH 42 3.1.2.1 Khảo sát ảnh hưởng pH điện cực HMDE 42 3.1.2.2 Khảo sát ảnh hưởng pH điện cực GCE 43 3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét 44 3.1.3.1 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét điện cực HMDE .44 3.1.3.2 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét điện cực GCE 45 3.2 Tối ưu hóa điều kiện xác định A O điện cực HMDE GCE .47 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng pH 47 3.2.1.1 Khảo sát ảnh hưởng pH điện cực HMDE .47 3.2.1.2 Khảo sát ảnh hưởng pH điện cực GCE 50 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng hấp phụ 52 3.2.2.1 Khảo sát ảnh hưởng hấp phụ điện cực HMDE 52 3.2.3.2 Khảo sát ảnh hưởng hấp phụ điện cực GCE 54 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ 55 3.2.3.1 Khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ điện cực HMDE .55 3.2.3.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ điện cực GCE 58 3.2.4 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét 60 3.2.4.1 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét điện cực HMDE .60 3.2.4.2 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét điện cực GCE 62 3.3 Đánh giá phương pháp 64 3.3.1 Xây dựng đường chuẩn 64 3.3.1.1 Xây dựng đường chuẩn điện cực HMDE 64 3.3.1.2 Xây dựng đường chuẩn điện cực glassy carbon 66 3.3.2 Đánh giá độ lặp lại phương pháp 68 3.3.2.1 Đánh giá độ lặp lại phương pháp điện cực HMDE .68 3.3.2.2 Đánh giá độ lặp lại phương pháp điện cực GCE 69 3.4 Áp dụng phân tích Auramine O mẫu thịt gà 70 3.4.1 Khảo sát ảnh hưởng dung môi 70 3.4.1.1 Khảo sát ảnh hưởng dung môi ACN điện cực HMDE 70 3.4.1.2 Khảo sát ảnh hưởng etanol điện cực GCE 71 3.4.2 Xây dựng đường chuẩn xác định AO mẫu thịt gà 73 3.4.2.1 Đường chuẩn xác định AO mẫu thịt gà đo HMDE 73 3.4.2.2 Đường chuẩn xác định AO mẫu thịt gà GCE 74 3.5 Áp dụng phân tích mẫu thật 76 3.5.1 Áp dụng phân tích mẫu thật điện cực HMDE 76 3.5.2 Áp dụng phân tích mẫu thịt gà đo điện cực GCE đo đối chiếu LC - MS 77 3.5.3 So sánh ý nghĩa thống kê hai phương pháp AdSV - DP phương pháp LC - MS 81 3.6 Đánh giá độ thu hồi phương pháp 83 3.6.1 Đánh giá độ thu hồi phương pháp điện cực HMDE 84 3.6.2 Đánh giá độ thu hồi phương pháp điện cực GCE 84 3.7 Áp dụng phân tích Auramine O mẫu thịt gà 85 3.7.1 Xây dựng đường chuẩn xác định AO mẫu dưa đo điện cực GCE 85 3.7.2 Áp dụng phân tích số mẫu dưa thị trường 86 KẾT LUẬN 88 TÀI LIỆU THAM KHẢO 89 PHỤ LỤC 90 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 LỜI CÁM ƠN Trước hết, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Kim Thường tận tình hướng dẫn, hỗ trợ định hướng cho tơi suốt q trình thực luận văn Xin chân thành cảm ơn tới thầy mơn Hóa Phân tích nói riêng khoa hóa học truyền đạt cho tơi kiến thức vô quý báu tạo điều kiện thuận lợi sở vật chất cho suốt q trình nghiên cứu Tơi xin cảm ơn bạn sinh viên, học viên mơn hóa phân tích hỗ trợ, giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn gia đình, bạn bè, động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Dương Văn Thắng DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Khối lượng sản xuất Auramine O số quốc gia năm 2008 18 Bảng 1.2: Kết nghiên cứu động vật 19 Bảng 1.3: Kết nghiên cứu xác định AO, PA, RB phương pháp HPLC 21 Bảng 3.2: Kết khảo sát tốc độ quét đường CV HMDE 44 Bảng 3.3: Kết khảo sát tốc độ quét đường CV GCE .45 Bảng 3.4: Kết khảo sát ảnh hưởng pH đến cường độ dòng HMDE 47 Bảng 3.5: Kết khảo sát ảnh hưởng pH đến cường độ dòng GCE .50 Bảng 3.6: Kết khảo sát ảnh hưởng hấp phụ đến cường độ dòng HMDE 52 Bảng 3.7: Kết khảo sát ảnh hưởng hấp phụ đến cường độ dòng GCE 54 Bảng 3.8: khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ đến cường độ dòng HMDE 56 Bảng 3.9: Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ đến cường độ dòng GCE 59 Bảng 3.10: Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét đến cường độ dòng HMDE 60 Bảng 3.11: Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét đến cường độ dòng GCE 62 Bảng 3.12: Các điều kiện tối ưu xác định AO GCE 63 Bảng 3.13: Ảnh hưởng nồng độ Auramine O đến cường độ dòng HMDE 64 Bảng 3.14: Kết khảo sát ảnh hưởng nồng độ AO đến cường độ dòng GCE 66 -7 Bảng 3.15: Đo độ lặp lại hai mức nồng độ 10 M; 1,2.10 10 -6 M HMDE 68 certain dyestuff intermediates in the British chemical industry, Part II, Further consideration of the role of aniline and of the manufacture of auramine and magenta (fucshine) as possible causetive agents,", British journal of industrial medicine, 11 (2), pp, 213- 216 11 Chiye Tatebe, Xining Zhong, Takashi Ohtsuki, Hiroki Kubota, Kyoko Sato, and Hiroshi Akiyama, (2014),“ A simple and rapid chromatographic method to determine unauthorized basic colorants (rhodamine B, Auramine O, and pararosaniline) in processed foods” Food Sci Nutr, Sep; 2(5), 12, pp, 547–556 12 European Commission (2004), Commission Directive 2004/93/EC of 21 September 2004 amending Council Directive 76/768/EEC for the purpose of adapting its Annexes II and III to technical progress 13 European Commission (2004), Directive 2004/37/EC of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 on the protection of workers from the risks related to exposure to carcinogens or mutagens at work 14 E Laviron, “A multilayer model for the sdudy of space distributed redox modified electrodes Part Description and discussion of the model”, J Electroanal Chem., 112 (1), pp.11-23, 1980 15 Green F, J, (1990), The Sigma - Aldrich handbook of stains, dyes and indicators, Aldrich Chemical Co 16 Gubéran E, Raymond L, Sweetnam PM (1985), “Increased risk for male bladder cancer among a cohort of male and female hairdressers from Geneva”, Int J Epidemiol, 14, pp, 549 – 554 17 H Zhai, J Li, Z Chen, Q Zhou, Y Pan (2013), “Rapid determination of auramine o in yellow croaker by microchip capillary electrophoresis”, Chinese Journal of Applied Chemistry, 30, pp, 481 – 485 18 IARC (2010), "IARC monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans", Journal of clinical pathology, 19(6), pp, 111 - 140 90 19 Lide D, (2008), "Handbook of chemistry and physics", CRC Press, 8, pp, 3- 30 20 Miller A (1933), “ Bladder alterations due to amines Experiences from the industrial district of Basel”, Z Urol Chir (Gynaekol), 36, pp, 202–219 21 P Delahay, “New instrumental methods in electrochemistry”, Interscience New York, 6, pp 115 - 1980 22 Parodi S, Santi L,, Russo P,, et al, (1982), "DNA damage induced by auramine a of O in human cell Toxicology 6), pp, 941- 952 23 Sibel A, Ozkan, (2009), “Principles and Techniques of electroanalytical stripping methods for pharmaceutically active compounds in dosage forms and biological samples current pharmaceutical analysis”, Current Pharmaceutical Analysis, 5, pp, 127- 143 24 Silver H, Sonnenwirth A, Alex N, (1966), "Modifications in the fluorescence microscopy technique as applied to identification of acidfast bacilli in tissue and bacteriological material", Journal of clinical pathology, 19(6), pp, 583588 25 Sugin Han, Yunfang Wu, Yan Liu, Xiaoxia Chen (2016), “Determination of auramine O based on a carbon dot-enhanced chemiluminescence method” analytical methods, 6, pp, 8072 - 8078 26 Tan Enling,Xiao Jian (2012) “Determination of Basic Orange II Acid Orange II and Auramine O in Bean Products", Guangdong Chemistry Industry, 18, pp, 27- 31 27 Von Müller A, (1933), "Bladder alterations due to amines, Experiences from the industrial district of Basel (Ger,)", Z Urol Chir (Gynaekol), 36, pp, 202- 219 91 28 Wang Jian - wei, Zhong Hai - juan, Liang Chi - qiong (2010), “Determimation of Chrysoidin and Auramine O in food by solid phase extraction - ultra performance liquid chromatography - mass spectrometry”, Analysis and Testing Technology and Instrument, 2, pp, 013 29 Williams MH, Bonser GM (1962), Induction of hepatomas in rats and mice following the administration of auramine, Br J Cancer, 16, pp, 87–91 30 Yan J, Huang X, Liu S, Yuan Y, Duan R, Zhang H, Hu X (2016), “A Simple and Sensitive Method for Auramine O Detection Based on the Binding Interaction with Bovin Serum Albumin”, Anal Sci 2016, 32(8), 819 - 824 31 Zhang H, Li Z, Chen T, Qin B (2017), “Quantitative determination of Auramine O by terahertz spectroscopy with 2DCOS - PLSR model”, Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc., 184, pp 335 – 31 32 Zheng Xiao- yan (2009), “Simultaneous determination of Chrysoidine, Auramine O and Safranine T in foods by Ultra Performance Liquid Chromatography - Tandem Mass Spectrometry”, Journal of Analytical Science, 4, pp, 04 - 06 92 Phụ lục Kết tối ƣu hóa khảo sát pH điện cực glassy carbon 2.60u I (A) 2.50u 2.40u 2.30u 2.20u 600m 2.70u 2.60u I (A) 2.50u 2.40u 2.30u 500m 600m 93 3.00u 3.20u 3.00u 2.80u I (A) I (A) 2.80u 2.60u 2.60u 2.40u 2.40u 2.20u 2.20u 500m 500m U (V) 94 Phụ lục 2: kết đo mẫu thịt gà điện cực GCE 10.0u Mẫu Văn Điển I (A) 8.00u 6.00u 4.00u 200m 9.00u Mẫu Trương Đ 8.00u I (A) 7.00u 6.00u 5.00u 4.00u 3.00u 200m 6.00u 10.0u 8.00u I (A) I (A) 5.00u 6.00u 4.00u 4.00u 3.00u U (V) I (A) U (V) 9.00u 8.00u 7.00u 6.00u 5.00u 4.00u 3.00u 96 8.00u 7.00u I (A) 6.00u 5.00u 4.00u 3.00u U (V) 97 Phụ lục 3: Kết đối chứng mẫu thịt gà với bên LC - MS 98 99 100 101 ... phương pháp xác định định lượng Auramine O mẫu thực phẩm chưa có cơng trình nghiên cứu xác định Auramine O phương pháp von – ampe công bố Vì luận văn này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu xác định. .. VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu xác định Auramine O thực phẩm phương pháp von ampe 2.1.2 Nội dung thực Để thực mục tiêu nghiên cứu đề tài... hành nội dung nghiên cứu sau: - Nghiên cứu đặc tính điện hóa Auramine O phương pháp von ampe vòng sử dụng điện cực HMDE GCE - Nghiên cứu quy trình xác định Auramine O phương pháp von - ampe hòa tan