Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng xạ khuẩn phân lập từ đất ở lào

́ ĐAỊ HOCC̣ QUÔC GIA HÀNÔỊ TRƢỜNG ĐAỊ HOCC̣ KHOA HOCC̣ TƢC̣NHIÊN Keo Phommavong NGHIÊN CƢU CHỦNG XẠ KHUẨN PHÂN LẬP TỪ ĐẤT Ở LÀO LUÂṆ VĂN THACC̣ SĨKHOA HỌC Hà Nợi - 2016 ́ ĐAỊ HOCC̣ QC GIA HÀNÔỊ TRƢỜNG ĐAỊ HOCC̣ KHOA HOCC̣ TƢC̣NHIÊN Keo Phommavong NGHIÊN CƢU XẠ KHUẨN PHÂN LẬP TỪ ĐẤT Chuyên ngành: Sinh hocC̣ thƣcC̣ Mã số: nghiêṃ 60 42 01 14 LUÂṆ VĂN THACC̣ SĨKHOA HOCC̣ NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Nguyêñ Quang Huy Hà Nội - 2016 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên , em xin bày tỏlòng biết ơn chân thành vàsâu sắc nhất tới Thầy giáo PGS.TS Nguyêñ Quang Huy Thầy đa ̃tâṇ tinh̀ hướng dâñ vàtaọ moịđiều kiêṇ tốt nhất , giúp em có thêm nhiều kỹ và kiến thức quý báu trình thưcC̣ hiêṇ đềtai luâṇ văn ̀ Em xin chân cam ơn toan thê Trương ĐaịhocC̣ Khoa hocC̣ Tư ̀ kiến thưc bổich suốt hai năm hocC̣ qua ̃ và Hóa sinh , Khoa Sinh hocC̣ Trương ĐaịhocC̣ Khoa hocC̣ Tư ̀ văn viên, ́ Em xin chân cam ơn tơi ̀ Cuối cung, em xin gưi lơi cam ơn tơi gia đinh va baṇ ̀ tạo động lưcC̣ giup em trương suốt thơi cứu khoa hocC̣ Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2016 Học viên Keo Phommavong DANH MUCC̣ CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Chất kháng sinh đươcC̣ phát hiêṇ [8, 38] 16 Bảng 2.1 Các địa điêm lấy mẫu đất 25 Bảng 2.2 Các chủng vi sinh vật kiêm định 26 Bảng 3.1 Sư C̣phân bốcủa khuẩn lacC̣ xa kC̣ huẩn 36 Bảng 3.2 Hình thái của khuẩn lạc xạ khuẩn phân lập được 37 Bảng 3.3 SốlươngC̣ sư pC̣ hân bốcủa xa kC̣ huẩn theo nhóm màu 39 Bảng 3.4 Họat tính kháng sinh của chủng xạ khuẩn 41 Bảng 3.5 HTKS của xa C̣khuẩn theo nhóm màu 42 Bảng 3.6 Khả hoạt tính của chủng XK với nhóm vi khuẩn 43 Bảng 3.7 HTKS của chủng XK môi trường thach 44 Bảng 3.8 HTKS của dich lên men của chủng XK môi trường dich thê 46 Bảng 3.9 Ảnh hưởng của nồng độ NaCl với khả kháng VSVKĐ của chủng 49 Bảng 3.10 Ảnh hưởng của nhiệt độ với khả kháng VSVKĐ của chủng 52 Bảng 3.11 Ảnh hưởng của pH với khả kháng VSVKĐ của chủng 53 Bảng 3.12 Hoạt tính enzyme của chủng xạ khuẩn 55 Bảng 3.13 Hoạt tính enzyme ở nhiệt độ khác của chủng L 56 DANH MU Hình 1.1 Khuẩn lacC̣ xa C̣khuẩn [71] Hình 1.2 Khuẩn ty xạ khuẩn [73] Hình 1.3 Bào tử xạ khuẩn [70] Hình 1.4 Hình thái vi khuẩn S au Hình 1.5 Hình thái vi khuẩn E co Hình 1.6 Hình thái vi khuẩn B su Hình 1.7 Hình thái vi khuẩn B ce Hình 1.8 Môṭsốthuốc kháng sinh dungC̣ y hocC̣ nguồn gốc từxa kC̣ huẩn [73] 20 Hình 1.9 Môṭsốkháng sinh dungC̣ bảo vê tC̣ hưcC̣ vâṭnguồn gốc từxa kC̣ huẩn [74] 21 Hình 1.10 Môṭsốthuốc kháng sinh dungC̣ chăn nuôi nguồn gốc từ xa C̣khuẩn [75] 21 Hình 1.11 Môṭsốthuốc k háng sinh dụng bảo vệ thực phẩm nguồn gốc từ xa C̣ khuẩn [75] Hình 2.1 Hình mẫu đất thu thâpC̣ taịLao Hình 3.1 Khuẩn lacC̣ xa C̣khuẩn mocC̣ đia môi trương SCA va GI Hình 3.2 Khuẩn lacC̣ xa C̣khuẩn theo nhom mau Hình 3.3 Môṭsốchung xa kC̣ huẩn thuần khiết ̉ Hình 3.4 HTKS cua chung XK môi trương thach ̉ Hình 3.5 HTKS chung XK môi trương dich thê ̉ Hình 3.6 Hình thái khuẩn lạc và hệ sợi khuẩn ty phóng đại của chủng L4 Hình 3.7 Hình thái khuẩn lạc và hệ sợi khuẩn ty phóng đại của chủng C3 Hình 3.8 Hình thái khuẩn lạc và hệ sợi khuẩn ty phóng đại của chủng T9 Hình 3.9 Ảnh hưởng của nồng độ NaCl với khả kháng VSVKĐ của chủng C3 50 Hình 3.10 Ảnh hưởng của nồng độ NaCl với khả kháng VSVKĐ của chủng L4 51 Hình 3.11 Ảnh hưởng của nồng độ NaCl với khả kháng VSVKĐ của chủng T9 51 Hình 3.12 Ảnh hưởng của nhiệt độ với khả kháng VSVKĐ của chủng XK53 Hình 3.13 Ảnh hưởng của pH với khả kháng VSVKĐ của chủng 54 Hình 3.14 Hoạt tính enzyme của chủng XK 55 Hình 3.15 Hoạt tính chịu nhiệt enzyme của chủng L 56 Hình 3.16 Vị trí phân loại của chủng T9 dựa vào trình tự gen rARN 16S với loài có quan hệ họ hàng gần 58 NHƢƢ̃NG CHƢƢ̃VIẾT TẮT ChƣƢ̃viết tắt: ChƣƢ̃viết đầy đu CFU Colony Forming Unit GI Môi trường Gause I SCA Starch Casein Agar LB Môi trường Luria Betarni CMC Carboxyl Methyl Cellulose VSVKĐ Vi sinh vâṭkiêm đinh HTKS Hoạt tính kháng sinh MT Môi trường MỤC LỤC Trang ̀ MỞ ĐÂU 1 Lý chọn đề tài Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài Mục tiêu nghiên cứu Nôịdung nghiên cứu ̉ ̀ CHƢƠNG 1-TÔNG QUAN TAI LIÊỤ Giới thiêụ vềxa kC̣ huẩn 1.1 Vị trí phân loại và sự phân bố của xạ khuẩn tự nhiên 1.2 Đặc điêm sinh học-hình thái của xạ khuẩn 1.2.1 Cấu taọ tếbào của xa C̣khuẩn 1.2.2 Đặc điêm sinh lý, sinh hóa của xạ khuẩn 1.2.3 Khuẩn lacC̣ của xa kC̣ huẩn 1.2.4 Khuẩn ty của xa C̣khuẩn 1.2.5 Sư hC̣ inh̀ thành bào tử của xa C̣khuẩn 1.3 Sơ lươcC̣ vềvi khuẩn kiêm định 1.3.1 Vi khuẩn Staphylococcus aureus 1.3.2 Vi khuẩn Escherichia coli 10 1.3.3 Vi khuẩn Bacillus subtilis 12 1.3.4 Vi khuẩn Bacillus cereus 13 1.4 Đaịcương vềchất kháng sinh 14 1.4.1 Chất kháng sinh 14 1.4.2 Các chất kháng sinh có nguồn gốc từ xạ khuẩn 15 1.4.3 Sư hC̣ inh̀ thành chất kháng sinh ởxa kC̣ huẩn 16 1.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh tổng hợp chất kháng sinh 18 1.5.1 Điều kiêṇ nuôi cấy 18 1.5.2 Thành phần muôi trường nuôi cấy 18 1.6 Sư ứ C̣ ng dungC̣ chất kháng sinh từ xa C̣khuẩn 19 1.6.1 Ứng dụng y học 19 1.6.2 Ứng dụng bảo vệ thực vật 20 1.6.3 Ứng dụng chăn nuôi 21 1.6.4 Ứng dụng bảo vệ thực phẩm 22 1.7 Các phương pháp phân loại xạ khuẩn 22 1.7.1 Phương pháp phân loaịxa C̣khuẩn theo phương pháp truyền thống 22 1.7.2 Phương pháp phân loaịxa C̣khuẩn theo phương pháp hiêṇ đaị 23 1.8 Khả sinh tổng hợp enzyme ở vi sinh vật 23 1.8.1 Ứu thế của vi sinh vật đê sinh tổng hợp enzyme 23 1.8.2 Môṭsốenzyme cónguồn gốc từ xa kC̣ huẩn 24 CHƢƠNG 2-NGUYÊN LIÊỤ VÀPHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CƢƢ́U 25 Vâṭliêụ nghiên cứu 25 2.1 Mâũ đất 25 2.2 Vi sinh vâṭkiêm đinh 26 2.3 Hóa chất, dụng cụ và thiết bị 26 2.3.1 Hóa chất 26 2.3.2 Dụng cụ và thiết bị 26 2.4 Các môi trường dùng nghiên cứu 27 2.4.1 Môi trường phân lâpC̣ xa kC̣ huẩn 27 2.4.2 Môi trường xác đinh hoaṭtinh́ kháng vi sinh vâṭgây bênh .28 2.4.3 Môi trường kiêm tra khảnăng sinh enzyme ngoaịbào 28 2.5 Các phương pháp sử dụng nghiên cứu 28 2.5.1 Phương pháp lấy mâũ đất 28 2.5.2 Phương pháp phân lâpC̣ xa kC̣ huẩn 29 2.5.2.1 Phương pháp phân lâpC̣ xa C̣khuẩn theo Vinogradski 29 2.5.3 Phương pháp thuần khiết vàbảo quản giống 30 2.5.4 Phương pháp quan sát hinh̀ thái C̣sơị xa kC̣ huẩn 30 2.5.5 Phương pháp lên men xa kC̣ huẩn 30 2.5.6 Phương pháp xác đinh hoaṭtinh́ kháng vi sinh vâṭgây bênh 30 3.6 Khả tiết enzyme ngoaịbào cua chung xạ khuẩn 3.6.1 Khả hoạt tính enzyme cua chung xạ khuẩn chủng xạ khuẩn được nuôi lắc môi trường dịch thê Gause I và thu dịch enzyme thô môi trường đê sử dungC̣ làm tiến hành thínghiêṃ đêkiêm tra hoạt tính enzyme phương pháp khuếch tán đĩa thạch đục lô Kết quả đươcC̣ trình bày ở bảng 3.12 và hình 3.14 Bảng 3.12 Hoạt tính enzyme của chủng xạ khuẩn Ký hiêụ chung XK C3 L4 T9 Chú thích: Amylase L4 T9 Hình 3.14 Hoạt tính enzyme của chủng XK Kết quả b ảng 3.12 và hình 3.14, cho thấy chủng xạ khuẩn đều vẫn giữ đươcC̣ hoaṭtinh́ enzyme môi trường dịch thê Khả phân giải chất của chủng xạ khuẩn tương đối ổn định Chủng C có hoạt tính mạnh nhất với protease, tiếp theo làchủng T9 chủng L4 có hoạt tính với chất a mylase, protease vàcellulose cũng khámanh Chủng T9 không cóhoạt tính với amylase và cellulose Căn cứ kết quảtrên, chúng lựa chọn chủng L4 đê tiếp tục thí nghiệm 55 3.6.2 Khả chịu nhiệt cua enzyme chung L4 Đêxác đinh khảnăng bền nhiê tC̣ của enzyme từ chủng L 4, chúng đã tiến hành lên men môi trường GI , 7-10 ngày ly tâm thu dich enzyme Tiến hành xử lý dịch enzyme thô ở nhiệt độ khác 40°C, 50°C, 60°C, 70°C và80°C khoảng thời gian 15, 30 và 60 phút Sau đóđênguôịvàxác đinh hoaṭtinh́ enzyme phương pháp khuếc h tán điã thach đucC̣ lô Kết quả đươcC̣ trinh̀ bày ở bảng 3.13 và hình 3.15 Bảng 3.13 Hoạt tính enzyme ở nhiệt độ khác của chủng L Thơi ̀ gian xƣ̉ lý (phút) 15 30 60 Chú thích: 60′ 30′ Hình 3.15 Hoạt tính chịu nhiệt enzyme của chủng L 56 Kết quảtrên bảng 3.17 cho thấy , hoạt tính enzyme của chủng L tương đối bền vững với nhiêṭđô C̣, hoạt tính có sự thay đối tăng dần thời gian xử lý ở môṭmức đô C̣ Khả phân giải nguồn chất amylase , protease và cellulase thi c̀ ós ự khác Đối với amylase, chủng L4 không cókhả phân giải chất , enzyme protease vàcellulo se thời gian 15 phút tăng xử lýnhiêṭđô C̣, hoạt tính enzyme tăng dần và giảm ở nhiệt độ 50°C và 60°C, hoạt tính mạnh so với đối chứng (-) Riêng với enzyme cellulose bắt đàu xử lýởnhiêṭđô C̣ 40°C thời gian 15, 30 và 60 phút hoạt tính enzyme đã tăng liên tucC̣ so với đối chứng Hai enzyme protease vàcellulose là những enz yme cókhảnăng chiụ nhiêṭ cao, nhiêṭđô C̣thich́ hơpC̣ cho sư hC̣ oaṭđôngC̣ của enzyme này ở nhiệt độ 40°C Đây là đăcC̣ điêm thuâṇ lơị cho viêcC̣ ứng dungC̣ xử lýmôi trường 3.7 Kết quảđinh danh loaịcua chung xạ khuẩn Theo phương pháp sinh học phân tử , chúng tiến hành giải trình tự gen 16S rRNA của chủng xa kC̣ huẩn tuyên choṇ taịViêṇ Vi sinh vâṭhocC̣ vàCông nghê C̣ sinh hoc,C̣ ĐHQGHN đêđinh danh , đồng thời xây dưngC̣ phát sinh chủng loaịcủa chủng xạ khuẩn Đối với kết quả được so sánh với trình tự của loại đã được công bố Database DDBJ/EMBL/GenBank sử dungC̣ phần mềm BLAST vàxây dưngC̣ phát sinh chủng loaịbằng phần mềm ClustalX 1.83 3.7.1 Chung T9 Trình tự gen 16S ARNr của chủng T9 CCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACG ACGCGTTCCCGCATGGGATACGTGTGGAAAGTTCCGGCGGTGCAGGATG AGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTGATGGCCTACCAAGGCGA CGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGA CACGGCCCAGATTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAAT GGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCG GGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGTGAGTGACGGTACCTGC 57 AGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAG GGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGC TTGTCGCGTCGGATGTGAAAGCCCGGGGCTTAACTCCGGGTCTGCATTC GATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTA GCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGA TCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAAC AGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGTTGGGAACTAGGTG TGGGCGACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTTCCC CGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGG GGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAA GAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAACATCCAGAGATGGGTGC CCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTC GTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCTGTGT TGCCAGCGGGTTATGCCGGGGACTCACAGGAGACTGCCGGGGTCAACTC GGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGG CTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGAAGCCGTGAGG TGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAAC TCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTG CGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAA AGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCTTGTGGAGGGAGCCGT CGAAGGTGGGACTGGC 0.01 Streptomyces geldanamycininus_NR 043722 59 66 71 Streptomyces antimycoticus_AY999831 Streptomyces sporoclivatus_AJ781369 71 Streptomyces melanosporofaciens_AJ391837 71 Streptomyces hygroscopicus subsp enhygrus _DQ442510 Streptomyces yatensis_AF336800 Streptomyces rhizosphaericus_AJ391834 99 Streptomyces cangkringensis_AJ391831 77 62 96 Streptomyces samsunensis_EU077190 100 Streptomyces malaysiensis_AF117304 T9 Kitasatosporia setalba_U93332 58 Hình 3.16 Vị trí phân loại của chủng T9 dựa vào trình tự gen 16S ARNr với loài có quan hệ họ hàng gần Kết quảtrên giải trình tự gen 16S ARNr của chủng T9, cho biết chủng T9 thuôcC̣ chi Streptomyces Trình tự gen 16S ARNr của chủng T9 tương đồng 99,8 % (1331/1333 bp) với đoạn 16S của Streptomyces malaysiensis (AF117304); tương đồng 99,2 % (1323/1333 bp) với đoạn 16S ARNr của Streptomyces samsunensis (EU077190) 59 Ƣ́ KÊT LUÂṆ Đã phân lâpC̣ đươcC̣ 34 chủng xạ khuẩn từ mâũ đất ởLào Có 14 chủng xạ khuẩn có hoạt tính kháng sinh với vi sinh vâṭkiêm đinh Đa x ̃ ác đinh đăcC̣ điêm hinh̀ thái , đặc điêm sinh lý và sinh hóa chủng xạ khuẩn ký hiệu C3, L4 và T9 cho thấy chúng phát triên tối ưu môi trường trường không có NaCl, pH và nhiệt độ 30°C Đã phân loại chủng xạ khuẩn T9 cho thấy chủng tương đồng 99,8% (1331/1333 bp) với đoạn 16S ARNr của Streptomyces malaysiensis (AF117304) Ƣ́ KIÊN NGHỊ - Nghiên cứu thử hoaṭtinh́ kháng sinh của chủng xa C̣khuẩn với nấm - Nghiên cứu phân tích cấu trúc chất hoạt tính sinh học từ chủng T9 60 Tài liệu tham khảo Tiếng Viêṭ Ngô Đinh̀ Binh́ (2005), Vi sinh vâṭ hocc̣ công nghiêpc̣, Trung tâm Khoa hocC̣ Tự nhiên vàCông nghê Q C̣ uốc gia, Hà Nội, trang 34-45 Ngô Đinh̀ Quang Binh́ (2005), Vi sinh vâṭ hocc̣ công nghiê c̣ , Viêṇ sinh thái vàTài nguyên sinh vâṭ, Trung tâm Khoa hocC̣ tư C̣nhiên vàCông nghê C̣Quốc gia , Hà Nội, trang 53-61 Nguyêñ Văn Cách (2004), Công nghê c̣lên men các chất kháng sinh , NXB khoa học và kĩ thuật Hà Nội Nguyêñ Văn Cách , Lê Văn Nhương (2009), Cơ sởcông nghê sc̣ inh hocc̣ , tâpc̣ 4- công nghê vc̣ i sinh vâṭ, NXB Giáo ducC̣ Tô Minh Châu (2002), Giáo trình thực tập vi sinh vật học , ĐaịhocC̣ Nông Lâm , TP.HCM Vi Thị Đoan Chính, Nguyễn Thị Kim Cúc, Lê Tiến, Trịnh Ngọc Hoàng (2007) Nghiên cứu đặc điểm sinh học và phân loại một số chủng xạ khuẩn sinh kháng sinh phân lập từ đất thái nguyên, tạp chí Khoa học và Công nghê C̣số3(43) trang 90-94 Vi Thi Đoaṇ Chinh́ (2000), Nghiên cứu khảnăng nâng cao hoaṭ tính kháng sinh chủng Streptomyces rimousus R bằng ky thuâṭ dung hơpc̣ tếbao trần , Luâṇ an Tiến si Sinh hocC̣ , Viêṇ công nghê ̃ sinh hocC̣, Hà Nội Vi Thi Đoaṇ Chinh́ (2009), Tuyển choṇ và nghiên cứu xa k c̣ huẩn cókhảnăng đối kháng với một số chủng vi khuẩn gây nhiễm trùng bệnh viện , Báo cáo tổng kết đề tài khoa học và công nghệ cấp Nguyêñ Lân Dũng, Phạm Văn Ty (2009), Vi sinh vâṭ hocc̣, NXB Giáo ducC̣ 10 Nguyêñ Lân Dũng , Nguyêñ Đinh̀ Quyến , Phạm Văn Ty (2007), Vi sinh vâṭ hocc̣ , NXB Giáo dục, Hà Nội 11 Nguyêñ Lân Dũng , Nguyêñ Kim Nư Thảo (2006), Các nhóm vi khuẩn chủ yếu , Vietsciences, Hà Nội 12 Nguyêñ Lân Dung , Phạm Thị Trân Châu ̃ cưu vi sinh vâṭ hocc̣, TâpC̣ III, NXB Khoa hocC̣ va ky thuâṭ, Hà Nội ́ 61 13 Nguyêñ Lân Dũng , Nguyêñ Đinh̀ Quyến , Phạm Văn Ty (1977), Vi sinh vâṭ hocc̣ tâpC̣ II, Nhà xuất bán Đái học và Trung học chuyên nghiệp , Hà Nội 14 Nguyêñ Thành Đaṭ (2007), Cơ sởsinh hocc̣ vi sinh vâṭ , tâpc̣ 1, NXB ĐaịhocC̣ S phạm Hà Nội 15 Nguyêñ Thành Đaṭ, K.A Vinogradva V.A Poltorac (1974), Tính biến dị bề mặt bào tử xạ khuẩn sinh chromomycin , Act.A buraviensis, microbiologia, TXL, III, N5, NXB Academia cccp 16 Bùi Thị Việt Hà (2006), Nghiên cứu xa c̣khuẩn sinh chất khá ng sinhchống nấm gây bênḥ thưcc̣ vâṭ ởViêṭNam , Luâṇ án Tiến si ̃Sinh hocC̣ , Trường Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, tr.3-20 17 Đô Thu Hà (2004), Nghiên cứu xa k c̣ huẩn sinh chất kháng sinh chống nấm phân lâpc̣ từ đất Quáng Nam -Đá Nẵng , Luâṇ án tiến si s ̃ inh hocC̣ , ĐaịhocC̣ Sư phaṃ , trang Hà Nội, tr 56-69 18 Lê Mai Hương (1993), Nghiên cứu xạkhuẩn sinh chất kháng sinh phân lâpc̣ ở Hà Nội và vùng phụ cận , Luâṇ văn phótiến si s ̃ inh hocC̣ , ĐaịhocC̣ Tổng hơpC̣ Hà 19 Lê Gia Hy (1994), Nghiên cứu xạkhuẩn thuôcc̣ chi Streptomyces sinh chất kháng sinh chống nấm gây bênḥ đaọ ôn và thối cổrê ̃phân lâpc̣ ở Việt Nam , Luâṇ án Phó tiến sĩ sinh học,Viêṇ Công nghê sC̣ inh hocC̣, trang 68-73 20 Phan Quốc Kinh (2004), "Vài nét về tình hình sản xuất hóa dược thế giới ", Tạp chí công nghiệp hóa chất, số4, trang 37-46 21 Nguyêñ Khang (2005), Kháng sinh học ứng dụng, NXB Y hocC̣, Hà Nội 22 Lê Văn Taọ (1997), Bênḥ Escherichia coli gây những thành tưụ mới về nghiên cứu phòng chống bênḥ ởvâṭ nuôi , tài liệu giảng dạy sau đại học cho bác sĩ thú y và kỹ sư chăn nuôi, Viên thúy quốc gia, Hà Nội, trang 207-213 23 Đặng Văn Tiến, Nguyêñ Đinh̀ Tuấn , Vi Thi Đoaṇ Chinh́, Ngô Đinh̀ Binh́ (2009), Nghiên cứu xa kc̣ huẩn sinh kháng sinh sinh kháng vi khuẩn Xanthomonasoryzae gây bênḥ bacc̣ lá lúa, Báo cáo khoa học Hội nghị CNSH toàn guốc, trang 71-80 24 Nguyêñ Xuân Thành (2007), Giáo trình vi sinh vật học, NXB Giáo ducC̣ 25 Nguyêñ Như Thanh, Nguyêñ BáHiên, Trần Thi Laṇ Hương (1997), Vi sinh vâṭ thú y, NXB Nông nghiêpC̣, Hà Nội, tr 81-89 62 26 Cao Thanh Chinh́ Trung (2000), Khảo sát sự hiện diện E coli, Staphylococcus aureus, Salmonella môi trường chăn nuôi gà công nghiêpc̣ Luâṇ án tiến si k ̃ hoa chăn nuôi, Trường đaịhocC̣ nông lâm TP.HCM, tr 75-86 27 Vũ Thị Thứ (1996), Nghiên cứu đăcc̣ điểm sinh hocc̣ và khảnăng ứng dungc̣ môṭ sốchủng vi khuẩn thuôcc̣ chỉBacilllus subtilis , Luận án phó tiến sĩ khoa học, sinh hocC̣, Viên sinh hocC̣ nhiêṭđới, trang 78-86 28 Trần Thi Cậ̉m Vân (2001), Giáo trình vi sinh vật học môi trường , NXB ĐaịhocC̣ Quốc gia HàNôị Tiếng Anh 29 Ashutosh K (2008), "Pharmaceutical Microbiology", New Age International Ltd, pp 89-101 30 Adhikari T B (1993), "Identification of biovars and races of Pseudomonas solanacearum and source of resistance in tomato in Nepal", Plant disease, Vol 77, pp 905-907 31 Agrios, G N (1997), Plant Pathology, th Edition, Academic Press, San Diego, USA 32 Bibb (2005), "Regulation of secondary metabolism in Streptomyces", Curr Opin Mivrobiol, 8, pp 208-215 33 Bremer, P J., Fletcher G C., and Osbome, C (2004), Staphylococcus aureus, New Zealand Institute for Crop and Food Research, pp 570-672 34 Bhattacharya D., Nagpure A., Gupta R k (2007), "Bacterial chitinases: properties and potential", Critical Reviews in Biotechnology, 27(1), pp 21-28 35 Clarridge J E (2004), "Impact of 16S rRNA Gene Sequence Analysis for Identification of Bacteria on Clinical Microbiology and Infectious Diseases", Clinical Microbiology Reviews, Vol 17(4), pp 840–862 36 Demain A L and Sanchez S (2009), "Microbial drug discovery: 80 years of progress", The Journal of Antibiotics, pp 5-16 37 Emelda E J et al (2012), "Antimicrobial Activity of Antibiotic Producing Streptomyces macrosporu"s, IOSR Journal of Pharmacy and Biological Science, ISSN: 2278-3008, pp 20-23 38 Fred C Tenover (2006), "Mechanisms of antimicrobial resistance in bacteria", Amer.J Med, 119, pp 3-10 63 39 Geschva, A Shurk and W Romer (1917), "Phosphate inhibition of secondary metabolism in Streptomyces and its reversal by cyclic", AMP, Arch, Microbiol, 121, pp 91-96 40 Hopwood D.A and Mj Merrich (1997), "Genetics of antibiotic production", J Bacteriol, pp, 596-636 41 Horikoshi K (1999), "Alkaliphiles: some application of their products for biotechnology", Microbiology and Molecular biology, 63(4), pp 735-750 42 Jemimah N S V., Srinivasan M., Devi C S (2011), "Novel anticancer compounds from marine actinomycetes", J Pharma Ress., 4(4), pp 1285-1287 43 J.H.Auh, H.Y.Chae, Y.R.Kim, K.H.Shim, S.H.Yoo, K.H.Park (2006), "Modification of rice starch by selective degradation of amylose using alkalophilic bacillus cyclomaltodextrinase", J Agric, Food Chem, pp 324-337 44 Jang H D and Chang k S (2005), "Thermostable cellulose from Streptomyces sp scale-up production in a 50-1 fermenter", Biotechnology Letters, 27 (4), pp 239-242 45 Jeya K.R., K Kiruthika and M Veerapagu (2013), "Isolation of antibiotic producing Streptomyces sp from soil of Perambalur district and a study on the antibacterial activity against clinical pathogens, International Journal of PharmTech Research, Vol.5, pp 1207-1211 46 John Mann (2011), "Natural products as immunosuppressive agents", Natural Product Reports, Vol 18, pp 417-430 47 Kasana R.C., Salwan R., Dhar H., Dutt S and Gulati A (2008), "A Rapid and easy method for the detection of microbial cellulases on agar plates using Gram’s Iodine", Curr Microbiol, pp 503-507 48 Kenneth Todar (2005), Todar’s Online Textbook of Bacteriology University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology (Staphylococcus), Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology 49 Kar S and Ray R C (2008), "Statistical optimization of α-amylase production by Streptomyces erumpens MTCC 7317 cells in calcium alginate beads using response methodology", Polish Journal of Microbiology, 51 (1), pp 49-57 50 Madigan, M.T., Martinko, J.M., Dunlap, P.V and Clark, D.P (2009), In Brock th biology of microorganism 20 edition, Pearson, Benjamin Cummings, Pearson Education, Inc 51 MA Elberson, F Malekzadeh, M.T.Yazdi, N Kameranpour, M.R Noori-Daloii, M.H Matte, M Shahamat, R.R Cowell, K.R.Sower (2000), "Cellulomonas persica sp nov and cellulomonas iranensis sp nov., mesophilic cellulosdegrading bacteria isolated from forest soils", J Syst Evol Microbiol, 50, pp 993 52 Mary K Sandel and John L McKillip (2002), "Virulence and recovery of Staphylococcus aureus to the food industry using improvement on traditional approaches", Food control, 15, pp 5-10 53 Mitra P (2005), "An extracellular protease with depilation activity from Streptomyces nogalator", J Scientific Journal of Scientific and Industrial Res., 1(2), pp 105-116 54 Mihu M.R., J P R and D.Nosanchuk (2014), "The impact of antifungals on toll-like receptors", Frontiers in microbiology, pp 4-5 55 Mason et al (2001), "Extracellular heme peroxidases in actinomycetes: a Case of mistaken identity", Applied and Environmental Microbiology, Vol 67 (10), pp 4512-4519 56 Nordmann p., Dortet L and Poirel L (2012), "Carbapenem resistance in Enterobacteriace: here in the storm", Trends in Molecular Medicine, 18 (5), pp 263-272 57 Oldfield C., N T Wood, S C Gilbert, F D Murray and F R Faure (1998), "Desulphurisation of benzothiophene and dibenzothiophene by Actinomycete organisms belonging to the genus Rhodococcus, and related taxa", Antonie van Leeuwenhoek, Vol 74(1-3), pp 119-132 58 Pasti M B., A L Pometto, M P Nuti and D L Crawford (1990), "Lignin- solubilizing ability of actinomycetes isolated from termite (Termitidae) gut", Applied and Environmental Microbiology, Vol 56 (7), pp 2213-2218 59 R Gupta, O.K Beg, P Lorenz (2002), "Bacterial alkaline protease: molecular approaches and industrial application", Appl, Biotechnol, 59 (1), 15-20 60 Rathan R K and Ambili M (2011), "Cellulose enzyme production by Streptomyces sp using fruit waste as substrate", Australian J, Basic, Appl, Scien, (12), pp 1114-1118 61 Robert E (1985), "Vincristine, dactinomycin, and cyclophosphamide in the treatment of malignant germ cell tumors of the ovary", A gynecologic oncology group study, Cancer, Vol 56 (2), pp 243-248 62 Stuart H (2006), "Essential microbiology", John Wiley & Sons Ltd, pp 191-370 63 Saga T., Yamaguchi K (2008), "History of antimicrobial agents and resistant bacteria", J Japan Med Assoc, 137, pp 513-517 64 Scott E M., John J I., Harvey, J., Gilmour, A., Sita R T., Reginald Bennett and Bergdoll, M.S (2000), "Staphylococcus Encyclopedia of Food Microbiology", Academic Press, San Diego - San Francisco - New Yolk – Boston – London – Sydney – Tokyo, pp 2062-2083 65 Shirling E B., D Gottlieb Methods for Characterization of Streptomyces species Vol 16 No International Journal of Systematic Bacteriology 66 Waksman, S.A (1961), The Actinomycetes Classification, Identification and descriptions of genera and species, Vol 2, The Williams and Wilkins Co.,Baltimore, USA 67 William S.T and Davies F.L (1965), "Use of antibiotics for selective isolation and enumeration of actinomycetes in soil", J Gen, Microbiol, 38, pp 251-261 68 Yang C H and W H Liu (2004), "Purification and properties of a maltotriose- producing alpha-amylase from Thermobifida fusa", Enzyme and Microbial Technology, 35, pp 254-260 69 Zhang JF, Liu JJ, Lu MQ, Cai CJ, Yang Y, Li H, Xu C, Chen GH (2007), "Rapamycin in hibits cell growth by induction of apoptosis on hepatocellular carcinoma cells in vitro", Transp Immunol, 17 (3): 162-170 Trang Web 70 https://voer.edu.vn 71 http://muou.sc.mahidol.ac.th/research_wp_strep.html 72 http://www.denniskunkel.com 73 http://www.actizapharmaceutical.com 74 http://www.planetnatural.com 75 http://www.ecvv.com 66 ... nhóm sinh vật nhân sơ (prokaryote) với sốlươngC̣ loài lớn và phân bốởnhiều vùng sinh thái c thếgiới và là đối tượng nghiên cứu quan trọng của ngành vi sinh vật Nhóm vi sinh. .. hợp chất y dươcC̣ , chất kháng sinh và enzyme thủy phân hợp chất cao của phân tử Các chất kháng sinh xạ khuẩn sinh đư ợc sử dụng rất nhiều y học, sinh học, công tác bảo vệ thực... hướng nghiên cứu trongC̣ tâm làxa kC̣ huẩn Ý nghĩa khoa học và thực tiễn cua đề tài Đối với Lào , sư C? ?nghiên cứu ngành khoa hocC̣ sinh hocC̣ vi sinh vâṭhọc, sinh hóa hocC̣, sinh