Xác định tỷ lệ nhiễm enterovirus ở bệnh nhi vào điều trị tại bệnh viện nhi trung ương năm 2011

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Khúc Thị Rềnh Hoa XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM ENTEROVIRUS Ở BỆNH NHI VÀO ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƢƠNG NĂM 2011 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Khúc Thị Rềnh Hoa XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM ENTEROVIRUS Ở BỆNH NHI VÀO ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƢƠNG NĂM 2011 Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số:60 42 40 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHÙNG THỊ BÍCH THỦY Hà Nội - 2015 Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa LỜI CẢM ƠN Trong q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn này, nhận đƣợc nhiều giúp đỡ từ thầy cô giáo, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Với tất kính trọng tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS.Phùng Thị Bích Thủy – Trƣởng khoa Nghiên cứu sinh học phân tử bệnh truyền nhiễm Bệnh viện Nhi Trung Ƣơng Chị truyền đạt cho kiến thức, phƣơng pháp tác phong làm việc nghiêm túc, trực tiếp hƣớng dẫn tận tình động viên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Chị xây dựng ý tƣởng tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn tới tất bạn đồng nghiệp khoa Nghiên cứu sinh học phân tử bệnh truyền nhiễm - Bệnh viện Nhi Trung Ƣơng giúp đỡ động viên tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Tơi xin đƣợc gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu, phòng Đào tạo sau đại học thầy cô giáo môn Vi sinh – Trƣờng đại học Khoa học tự nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập Đồng thời tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp cho ý kiến quý báu, giúp đỡ để tơi bảo vệ thành công đề tài Và cuối xin bày tỏ lòng biết ơn tới bố mẹ, ngƣời thân gia đình, bạn bè đồng nghiệp ln u thƣơng, khuyến khích, động viên tơi q trình học tập hoàn thành luận văn Một lần nữa, xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý báu Hà Nội, tháng 11 năm 2015 Khúc Thị Rềnh Hoa Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ BỆNH DO ENTEROVIRUS 1.1.1 Giới thiệu chung bệnh Enterovirus (EVs) gây 1.1.2 Dịch tễ học bệnh Enterovirus gây 1.2 ENTEROVIRUS 11 1.2.1 Phân loại 11 1.2.2 Cấu trúc Enterovirus 14 1.2.3 Quá trình chép EVs 21 1.3 CÁC PHƢƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN EV TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM 25 1.3.1 Mẫu bệnh phẩm 25 1.3.2 Phƣơng pháp nuôi cấy virus 25 1.3.3 Phƣơng pháp huyết học 27 1.3.4 Phƣơng pháp sinh học phân tử 28 CHƢƠNG II : ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 35 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 35 2.1.2 Cỡ mẫu 35 2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 35 2.1.4.Thời gian nghiên cứu 36 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa 2.3 ỨNG DỤNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ TRONG NGHIÊN CỨU 36 2.3.1 Mẫu bệnh phẩm 36 2.3.2 Sinh phẩm hóa chất 36 2.3.4 Các bƣớc tiến hành chẩn đoán 39 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 46 3.1 TỶ LỆ DƢƠNG TÍNH EV ĐƢỢC CHẨN ĐỐN BẰNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ 46 3.1.1 Tỷ lệ dƣơng tính EVs chẩn đốn theo phƣơng pháp RT-PCR 46 3.1.2 Tỷ lệ EVs dƣơng tính chẩn đốn theo phƣơng pháp realtime RT-PCR 48 3.2 TỶ LỆ DƢƠNG TÍNH EV71 CHẨN ĐOÁN THEO PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ 50 3.2.1 Tỷ lệ dƣơng tính EV71 chẩn đoán theo phƣơng pháp RT-PCR 50 3.2.2 Tỷ lệ dƣơng tính EV71 chẩn đốn theo phƣơng pháp realtime RT-PCR 52 3.3 So sánh tỷ lệ dƣơng tính EVs EV71 đƣợc chẩn đoán hai phƣơng pháp RT-PCR realtime RT-PCR 54 3.4 TỶ LỆ PHÂN BỐ EVs VÀ EV71 THEO GIỚI TÍNH .58 3.4.1 Tỷ lệ phân bố EVs theo giới tính 58 3.4.2 Tỷ lệ phân bố EV71 theo giới tính 59 3.5 TỶ LỆ PHÂN BỐ EVs VÀ EV71 THEO NHÓM TUỔI 60 3.5.1 TỶ lệ phân bố EVs theo nhóm tuổi 60 3.6.2 Tỷ lệ phân bố EV71 theo nhóm tuổi 62 3.6 TỶ LỆ PHÂN BỐ EVs VÀ EV71 THEO MÙA 64 3.6.1 Tỷ lệ phân bố EVs theo mùa 64 Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa 3.6.2 Tỷ lệ phân bố EV71 theo mùa 66 3.7 Tỷ lệ phân bố EVs EV71 theo địa dƣ 68 3.8 Tỷ lệ trẻ nhiễm EVs EV71 với triệu chứng nhập viện 69 3.9 Tỷ lệ gây biến chứng EVs EV71 trẻ 70 KHUYẾN NGHỊ 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa DANH MỤC BẢNG Bảng Bảng 1.1 Cá Bảng 1.2 Tìn Bảng 1.3 Phâ Bảng 2.1 Sin Bảng 2.2 Trì Bảng 2.3 Th Bảng 2.4 Ch Bảng 2.5 Th Bảng 2.6 Ch Bảng 2.7 Th Bảng 2.8 Ch Bảng 2.9 Th Bảng 2.10 Ch Bảng 3.1 Tỷ Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Tỷ PC Tỷ Tỷ RT So rea Nồ PC Luận văn tốt nghiệp Bảng 3.7 Bảng 3.8 Khúc Thị Rềnh Hoa So Ch thu Bảng 3.9 Tỷ Bảng 3.10 Tỷ Bảng 3.11 Tỷ Bảng 3.12 Tỷ Bảng 3.13 Tỷ Bảng 3.14 Tỷ Bảng 3.15 Tỷ Bảng 3.16 Bảng 3.17 Tỷ nha Tỷ Luận văn tốt nghiệp Khúc Thị Rềnh Hoa DANH MỤC HÌNH Hình Hình 1.1 Bản đồ biểu th bệnh chân tay Hình 1.2 Sƣ t ̣ ổchƣc cấu ́́ Hê ̣gen cua EV Hình 1.3 protein ban đầ Hình 1.4 Cấu trúc vỏ ́̉ Mơṭđoaṇ trinh ́̀ Hình 1.5 EV71 tƣ Tây Ú Hình 1.6 Các kiểu gen E Hình 1.7 Mối liên hệ củ Thái Bình Dƣơ Hình 1.8 Quá trình c Hình 1.9 Quá trình lây t Hình 1.10 Tác dụng E Hình 1.11 Nguyên lý phả Hình 1.12 Biểu đồ quan h ứng Realtime P Hình 1.13 Cơ chế hoạt độ Hình 1.14 Biểu đồ phản ứ ́̀ Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa Bảng 3.17: Tỷ lệ biến chứng trẻ nhiễm EVs EV71 Biến chứng Viêm não, màng não Viêm phế quản Viêm phổi Mạch nhanh (>170nhịp/phút) Tăng huyết áp Viêm tim Sốc Phù phổi cấp Theo nhƣ Bảng 3.17 mô tả biến chứng thƣờng gặp nhóm trẻ nhiễm EVs thống kê mạch nhanh chiếm tỷ lệ 34,9%, tăng huyết áp chiếm 23,3%, biến chứng viêm não màng não chiếm tỷ lệ đáng kể 11,6%.Biến chứng sốc, phù phổi cấp, viêm tim biến chứng nặng nhƣng có xuất vụ dịch EVs năm 2011, thống kê đƣợc lần lƣợt 5,8%; 3,5% 1,2% Số bệnh nhân nhiễm EV71 có biến chứng tƣơng tự nhƣ vậy, nhóm biến chứng viêm não, mạch nhanh, tăng huyết áp chiếm tỷ lệ cao lần lƣợt là: 25%, 33,3% 33,3% Những bệnh nhân có biến chứng nặng nhƣ sốc, phù phổi, viêm tim chiếm tỷ lệ nhỏ.Để giải thích cho tỷ lệ bệnh nhân biến chứng mạch nhanh, tăng huyết áp, thần kinh tăng cao biến chứng khác virus công vào quan đích nhƣ da, tim hệ thần kinh trung ƣơng, hoại tử tế bào tổn thƣơng thâm nhiễm tế bào đơn nhân hệ thần kinh trung ƣơng, tế bào tổn thƣơng tập trung phần lớn quanh mạch máu Theo Wang cộng sự,2007, biến chứng phù phổi cấp rối loạn chức tự động nhiễm trùng cấu trúc đặc biệt thân não (viêm não sau) gây tổn thƣơng nhân phó giao cảm lƣng nhân đƣờng dẫn truyền biệt hóa đƣờng thần kinh giao Khóa 2010-2012 71 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa cảm Do rối loạn hệ thần kinh thực vật gây tăng tính thấm mao mạch phổi dẫn đến phù phổi cấp[47] Khóa 2010-2012 72 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa KẾT LUẬN Phƣơng pháp realtime RT-PCR chẩn đốn EVs EV71 có độ nhạy cao phƣơng pháp RT-PCR thơng thƣờng Trẻ nam có tỷ lệ nhiễm EVs, EV71 tƣơng đƣơng với trẻ nữ theo tỷ lệ dƣơng tính lần lƣợt là: 1,22 : 1,16 : Nhóm tuổi dễ mắc EVs EV71 nhiều dƣới tuổi với tỷ lệ 42,9% 25,9% Trẻ mắc EVs EV71 cao từ tháng tới tháng với tỷ lệ lần lƣợt là: 52,5% 19,2% Hà Nội tỉnh miền Bắc có tỷ lệ trẻ nhiễm EVs EV71 cao là: 50% 17,1%/ Trẻ dƣơng tính với EVs EV71 triệu chứng nhập viện chiếm tỷ lệ cao sốt phát ban, có tƣơng quan với tỷ lệ trẻ nhiễm tay chân miệng thời điểm nghiên cứu Trẻ nhiễm EVs EV71 có nhiều biến chứng nguy hiểm, nhiên biến chứng mạch nhanh tăng huyết áp chiếm tỷ lệ cao biến chứng khác Khóa 2010-2012 73 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa KHUYẾN NGHỊ Sử dụng phƣơng pháp realtime RT-PCR chẩn đoán sớm EVs EV71 phục vụ cho điều trị trẻ nhiễm virus Lƣu giữ tiếp tục subtype chủng EVs dƣơng tính phục vụ cho cơng tác nghiên cứu Khóa 2010-2012 74 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Cục Y tế dự phòng - Bộ Y tế(2011), “Báo cáo tình hình bệnh tay chân miệng tồn quốc biện pháp phòng chống dịch triển khai" Trƣơng Hữu Khanh cộng (2003), “ Viêm não cấp trẻ em nhận dạng tác nhân EV71 ” Tạp chí y học thực hành, số 462/2003 Bộ Y tế xuất bản, tr 210 - 214 Ngô Thị Hiếu Minh (2010), “Nghiên cứu dịch tễ, lâm sàng, cận lâm sàng bệnh tay chân miệng trẻ em viện Nhi Trung ương”.Luận văn thạc sỹ y học, Đại học y, Hà Nội Tăng Chí Thƣợng, Nguyễn Thanh Hùng, Đỗ Văn Niệm, Trƣơng Hữu Khanh, Bạch Văn Cam, Nguyễn Bạch Huệ, Lê Anh Tuấn, Lê Phan Kim Thoa, (2008) "Đặc điểm dân số học biểu lâm sàng bệnh chân tay miệng Enterovirus",tạp chí y học thực hành, 15(3), tr 87-93 Tài liệu tiếng Anh Armando M., De Palma, Inge Vliegen, Erik De Clercq, Johan Neyts, (2008), "Selective Inhibitors of Picornavirus Replication" Medicinal Research Reviews DOI 10.1002/med.20125 Atkinson W., Hamborsky J., McIntyre L., Wolfe S (2009), "Poliomyelitis" Epidemiogy and Prevention of Vaccine- Preventable Diseases (11), pp 231-44 Baek KA., Yeo SG et al.(2011), “Epidemics of enterovirus infection in Chungnam, Korea 2008 and 2009”, (2010),Virol.J8: 297, doi: 10.1186/1743422X-8-297 Chatterjee S., Quarcoopome CO., Apenteng A (1970), "Unusual type of epidemic conjunctivitis in Ghana" Br Jophthalmol 54, pp 628-630 Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (2006), "Update on vaccine-derived polioviruses" MMWR Morb Mortal Wkly Rep 55 (40), pp 1093–1097 Khóa 2010-2012 75 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa 10 Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (2008), "Progress toward interruption of wild poliovirus transmission-worldwide, January 2007– April 2008" MMWR Morb Mortal Wkly Rep 57 (18), pp 489–494 11 Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (1994) "International Notes Certification of Poliomyelitis Eradication - the Americas, 1994" MMWR Morb Mortal Wkly Rep 43 (39): 720–722 12 Douglas Douglas D Richman,Richard J Whitley,Frederick G Hayden, (2002), clinnical virology, American Society for Microbiology, Washington DC 13 General News "Major Milestone reached in Global Polio Eradication: Western Pacific Region is certified Polio-Free".Health Educ Res 16 (1): 109.doi:10.1093 14 Harley A., Rotbart, (2002), "Clinical Significance, Diagnosis, and Treatment of Picornavirus Infections", Clinical Virology, pp 357-365 15 Hawley HB., Morin DP., Geraghty ME., Tomkow J., Philips CA (1973), "Coxsackievirus B epidemic at boy's summer camp isolation of virus from swimmim water Jama med, 226(1), pp 33-36 16 Hayward JC et al (1989), "Outbreak of poliomyelitis-like paralysis associated with enterovirus 71" Pediatric Infectious Disease Journal, 8(9), pp 611–616 17 Jang SK., H-G Krausslich, MJH Nicklin, GM Duke, AC Palmenberg, and E Wimmer, (1988), "A Segmentof the 5'Nontranslated Region of Encephaomyocarditis Virus RNA Directs Internal Entry of Ribosomes During in Vitro Translation." J Virol, 62, pp 2636-43 18 Jenista JA., Powell KR., Menegus MA., (1984), "Epidemiologgy of neonatal enterovirus infection", J Pediatr, 104, pp 685-90 19 Jeon JS., Kim JK., Yu J., Kim JW (2014), "Epidemic trends of Enterovirus Infection from Pediatric Patients in Cheonan, Korea" J Clin lab Anal, doi: 10.1002/jcla.21830 20 Kinnunen E., T.Hovi., M Stenvik, O Hellstrom, J Porras, M.Kleemola, and M L Kantanen, (1987), "Localized outbreak of enteroviral meningitis in adult" Acta Neuro, 75, pp 346-351 Khóa 2010-2012 76 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa 21 Karen Meerovitch, Jerry Pelletier, and Nahum Sonenberg (1989), "5'noncoding region of poliovirus RNA: implications for internal translation initiation", Genes & Development, 3(7), pp 1026-1034 22 Mastny, Lisa, (1999), "Eradicating Polio: A Model for International Cooperation" World watch Insitute 23 McMinn P., Stratov I, et al (2001), Neurological manifestations of enterovirus 71 infection in children during an outbreak of hand foot mouth disease in Western Australia Clin infect Dis 201(32), pp 236-242 24 Melnick, J L (1990), "Enterovirus: Poliovirus, coxsakieviruses, echoviruses, and newer enterovirus" In B N field, field virology, pp 549-605 25 Nishimura Y et al.(2009), “Human P- selectin glycoprotein ligand-1 is a functional receptor for EV71”, Nature Medicine, 15(7), pp.794-798 26 Nino Khetsuriani, MD, Ashley LaMonte-Fowlkes, MPH, M Steven Oberste, PhD, Mark A Pallansch, PhD Enterovirus Surveillance - United States, 1970-2005 Division of Viral Diseases, National Center for Immunization and Respiratory Diseases 27 Ngoc TB Nguyen, Hau V Pham, Cuong Q Hoang, Tien M Nguyen, Long T Nguyen, Hung C Phan, Lan T Phan, Long N Vuand Nguyen N Tran Minh (2014), "Epidemiological and clinical characteristics of children who died from hand, foot and mouth disease in Vietnam, 2011" BMC Infectious Diseases , 14, pp 341 28 Noordhoek GT., Weel JF., Poelstra E., Hooghiemstra M., Brandenburg AH (2008), "Clinical validation of a new real-time PCR assay for detection of enteroviruses and parechoviruses, and implications for diagnostic procedures" J Clin Virol, 41(2), pp 75-80 29 Oberste MS., Maber K., Kilpartrick DR et al (1999), "Typing of human enterovirus by partial sequencing of VP1" J Clin microbial, 37, pp 1288 1293 30 Ooi EE, et al (2002), Seroepidemiology of human enterovirus 71, Singapore Emerging Infectious Diseases, 8(9), pp 995–997 Khóa 2010-2012 77 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa 31 Ooi MH, et al (2010), Clinical features, diagnosis and management of human enterovirus 71 infection Lancet Neurology, 9(11), pp 1097–1105 32 Ooi MH, et al (2007), "Evaluation of different clinical sample types in diagnosis of human enterovirus 71-associated hand-foot-and-mouth disease" Journal of Clinical Microbiology, 45(6), pp 1858–1866 33 Perez-Velez CM et al (2007), “Outbreak of neurologic EV71 disease a diagnostic challenge”, Clin.Infect.Dis, 45, pp 950-957 34 Phan Van Tu, Nguyen Thi Thanh Thao, David Perera, Truong Khanh Huu, Nguyen Thi Kim Tien, Tang Chi Thuong, Ooi Mong How, Mary Jane Cardosa, and Peter Charles McMinn, (2007), "Epidemiologic and Virologic Investigation of Hand, Foot, and Mouth Disease, Southern Vietnam, 2005" Emerging Infectious Diseases, 13 (11), pp 1733-1741 35 Piyada Linsuwanon,Jiratchaya Puenpa, Sheng-Wen Huang, Ya-Fang Wang, John Mauleekoonphairoj, Jen-Ren Wang and Yong Poovorawan, (2014), " Epidemiology and seroepidemiology of human enterovirus 71 among Thai populations" Journal of Biomedical Science.doi:10.1186/1423-0127-21-16 36 Qunying Mao, Yiping Wang, Xin Yao, Lianlian Bian, Xing Wu, Miao Xu, and Zhenglun Liang, (2014),"Coxsackievirus A16 Epidemiology, diagnosis, and vaccine" Hum Vaccin Immunother 10(2), pp 360–367 37 RomeroJR, Steven Hinrichs, Deborah Perry, Robert Kruger, Merrill Magelli, (1998), "Impact of Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction Diagnosis of Enterovirus Infections on the Care of Febrile Children" Pediatric Research 43, pp 156–156 38 Ru WP., Kang K., You AG., Xia SL (2010), "Analysis on clinical and epidemiological characteristics of severe cases infected by EV71" Chinese journal of experimental and clinical virology, 24(6), pp 448-450 39 Schmidt NJ, Lennette EH, Ho HH (1974), "An apparently new enterovirus isolated from patients with disease of the central nervous system" Journal of Infectious Diseases, 129(3), pp 304– 309 Khóa 2010-2012 78 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa 40 Solomon T, et al (2010), "Virology, epidemiology, pathogenesis and control of enterovirus 71" Lancet Infectious Diseases, 10(11), pp 778–790 41 Sun Li-mei, Zheng Huan-gin, Zheng Hui-zhen, Guo-Xue, He Jian-feng, Guan Da-wei, Kang Min, Liu Zheng, Ke Chang-wen, Li Jian-sen, Liu Leng, Guo Ru-ning, Hiromu Yoshida, and Lin Jin-yan, (2011), "An EV71 epidemic in Guangdong province of china, 2008: Epidemiological, clinical, virogenic manifestations", Jpn J Infect Dis, 64(1), pp 13-18 42 Tran Tan Thanh, Nguyen To Anh, Nguyen Thi Tham, Hoang Minh Tu Van, Saraswathy Sabanathan, Phan Tu Qui, Tran Thuy Ngan, Tran Thi My Van, Lam Anh Nguyet, Nguyen Thi Han Ny, Le Thi My Thanh, Ong Kien Chai, David Perera, Do Chau Viet, Truong Huu Khanh, Do Quang Ha, Ha Manh Tuan, Kum Thong Wong, Nguyen Thanh Hung, Nguyen Van Vinh Chau, Guy Thwaites, H Rogier van Doorn, and Le Van Tan, (2015), "Validation and utilization of an internally controlled multiplex Real-time RT-PCR assay for simultaneous detection of enteroviruses and enterovirus A71 associated with hand foot and mouth disease" Virology Journal, 12:85DOI 10.1186/s12985-015-0316-2 43 Truong Huu Khanh, Saraswathy Sabanathan, Tran Tan Thanh, Le Phan Kim Thoa, Tang Chi Thuong, Vu thi Ty Hang, Jeremy Farrar,Tran Tinh Hien, Nguyen Van Vinh Chau, and H Rogier van Doorn, (2012), "Enterovirus 71– associated Hand, Foot, and Mouth Disease, Southern Vietnam", Emerg Infect Dis, doi: 10.3201/eid1812.120929 44 V A Janes., R Minnaar., G Koen., H van EijK., K Dijkman-de Haan, D Pajkrt, K C Wolthers, K S Benschop, (2014), "Presence of human non-polio enterovirus and parechovirus genotypes in an Amsterdam hospital in 2007 to 2011 compared to national and international published surveillance data: a comprehensive review" Eurosurveillance, 46(19), pp 1-9 45 W Allan Nix, M Steven Oberste., and Mark A., Pallansch, (2006), "Sensitive, Seminested PCR Amplification of VP1 Sequences for Direct Identification of Khóa 2010-2012 79 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa All Enterovirus Serotypes from Original Clinical Specimens" J Clin Microbiol 44(8), pp 2698–2704 46 Walter A Verstrepen, Sofie Kuhn, Mark M Kockx, Martine E Van De Vyvere, and An H Mertens, (2001), "Rapid Detection of Enterovirus RNA in Cerebrospinal Fluid Specimens with a Novel Single-Tube Real-Time Reverse Transcription-PCR Assay", J Clin Microbiol, 39(11), pp: 4093–4096 47 Wang SM; Lei HY et al.(2007), “Cerebrospinal fluid cytokines in EV71 brain stem encephalitis and echovirus meningitis infection of varying severity”, Clin Micrbiol.Infect, 13, pp 677-682 48 Wei Li, Xiao Zhang, Xi Chen, Yu-Ping Cheng, Yi-Dong Wu, Qiang Shu, Xue-Jun Chen and Shi-Qiang Shang, (2015), "Epidemiology of childhood enterovirus DOI: 10.1186/s12985-015-0294-4 49 World Health Organization (2011), A Guide to Clinical Management and Public Health Response for Hand, Foot and Mouth Disease (HFMD) 50 World Health Organization (2014), Polio-free certification South-East Asia 51 Xiao-ni Zoua, Xiao-zhuang, Zhangb, BoWangb, Yi-teng Qiub, (2012), "Etiologic and epidemiologic analysis of hand, foot, and mouth disease in Guangzhou city: a review of 4,753 cases" Braz J Infect Dis, 16(5) Salvador 52 Yi-hong Xie,Virasakdi Chongsuvivatwong, Zhenzhu Tang,Edward B McNeil,Yi Tan, (2014), "Spatio-Temporal Clustering of Hand, Foot, and Mouth Disease at the County Level in Guangxi, China" Plos One DOI: 10.1371/journal.pone.0088065 53 Yu-Chun Wang , Fung-Chang Sung Modeling the Infections for Enteroviruses in Taiwan Institute of Environmental Health, National Taiwan University College of Public Health, Taiwan Trang web 54 http://www.merckmanuals.com/professional/infectiousdiseases/enteroviruses 55 https://en.wikipedia.org/wiki/Poliomyelitis Khóa 2010-2012 80 Luận văn Thạc sĩ Khoa họcKhúc Thị Rềnh Hoa 56 http://www.ninds.nih.gov/disorders/polymyositis/polymyositis.htm 57 http://www.nlv.ch/Enterovirus/Enterotaxonomy.htm 58 http://ethesis.helsinki.fi/julkaisut/mat/bioti/vk/airaksinen/ch1.htm 59 http://viralzone.expasy.org/all_by_species/97.html 60 http://www.microbiologybook.org/virol/picorna.htm 61 https://en.wikipedia.org/wiki/Reverse_transcription_polymerase_chain_reacti on 62 http://www.gene-quantification.de/real-time-pcr-guide-bio Khóa 2010-2012 81 ... HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHI? ?N - Khúc Thị Rềnh Hoa XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHI? ??M ENTEROVIRUS Ở BỆNH NHI VÀO ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƢƠNG NĂM 2011 Chuyên ngành: Vi sinh vật học... xác đinḥ tỷlê n ̣ hiêmƣ̃ EV s bệnh nhi đến điều tri tạịbênḥ viêṇ Nhi Trung Ƣơng năm 2011 với muc ̣ tiêu sau: Xác định đƣợc tỷ lệ dƣơng tính Enterovirus hai kỹ thuật RTPCR realtime RT-PCR Xác. .. đƣơc xem mẫu bệnh phẩm phù hợp Tỷ lệ EVs đƣợc xác định dịch não tủy thấp nhi? ??u so với hai loại bệnh phẩm (xác định đƣợc khoảng 4-5%) Tuy nhi? ?n mẫu dịch não tủy hữu dụng việc xác định bệnh nhân có